• Tidak ada hasil yang ditemukan

Performa Benih Ikan Nila yang Diberi Pakan Mengandung Hormon Pertumbuhan Rekombinan dengan Metode Penyiapan Berbeda

N/A
N/A
Protected

Academic year: 2017

Membagikan "Performa Benih Ikan Nila yang Diberi Pakan Mengandung Hormon Pertumbuhan Rekombinan dengan Metode Penyiapan Berbeda"

Copied!
33
0
0

Teks penuh

(1)

PERFORMA BENIH IKAN NILA YANG DIBERI PAKAN

MENGANDUNG HORMON PERTUMBUHAN REKOMBINAN

DENGAN METODE PENYIAPAN BERBEDA

RANGGA GARNAMA

DEPARTEMEN BUDIDAYA PERAIRAN FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN

INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR

(2)
(3)

PERNYATAAN MENGENAI SKRIPSI DAN

SUMBER INFORMASI SERTA PELIMPAHAN HAK CIPTA

Dengan ini saya menyatakan bahwa skripsi berjudul “Performa Benih Ikan Nila yang Diberi Pakan Mengandung Hormon Pertumbuhan Rekombinan dengan Metode Penyiapan Berbeda“ adalah benar karya saya dengan arahan dari komisi pembimbing dan belum diajukan dalam bentuk apa pun kepada perguruan tinggi mana pun. Sumber informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan maupun tidak diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam Daftar Pustaka di bagian akhir skripsi ini.

Dengan ini saya melimpahkan hak cipta dari karya tulis saya kepada Institut Pertanian Bogor.

Bogor, Agustus 2013

Rangga Garnama

(4)

ABSTRAK

RANGGA GARNAMA. Performa Benih Ikan Nila yang Diberi Pakan Mengandung Hormon Pertumbuhan Rekombinan dengan Metode Penyiapan Berbeda. Dibimbing oleh ALIMUDDIN dan MUHAMMAD AGUS SUPRAYUDI.

Penelitian ini dilakukan untuk mengevaluasi pengaruh pemberian rElGH dalam bentuk bakteri Escherichia coli utuh dan mengandung media kultur, E. coli

utuh yang mengandung rElGH tanpa media kultur, dan protein total hasil lisis dicampur dengan bahan pakan sebelum dibuat menjadi pelet (repeleting) dan diberikan pada ikan nila merah. Penelitian terdiri atas 3 perlakuan penyiapan berbeda dengan dosis rElGH 3 mg/kg pakan, dan satu kontrol. Setiap perlakuan diulang sebanyak 3 kali. Pakan kontrol dan rElGH terlebih dahulu disalut menggunakan kuning telur yang selanjutnya dicampur ke pakan dengan cara

repeleting. Ikan dipelihara selama 6 minggu dan diberi pakan mengandung rElGH 3 kali pada awal pemeliharaan,yaitu pada hari ke-1, 4 dan 7, sebanyak10% bobot tubuh ikan. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian pakan rElGH hasil lisis memberikan pertumbuhan bobot, biomassa, laju pertumbuhan spesifik (LPS) panjang dan bobot lebih tinggi dibandingkan dengan kontrol. Bobotnya meningkat 8,30%, biomassa sekitar 7,39% dan LPS panjang dan bobot masing masing 4,20% dan 4,92% lebih tinggi dibandingkan dengan kontrol. Dengan demikian, pemberian pakan mengandung rElGH hasil lisis merupakan cara efektif dalam meningkatkan pertumbuhan benih ikan nila merah.

Kata kunci: rekombinan, Escherichia coli, rElGH, repelleting, ikan nila merah.

ABSTRACT

RANGGA GARNAMA. Performance of Nile Tilapia Juvenile Fed Diet Containing Recombinant Growth Hormone with Different Preparation Methods. Guided by ALIMUDDIN and MUHAMMAD AGUS SUPRAYUDI.

This research was conducted to evaluate the influence of rElGH in the form of the bacterium Escherichia coli intact and contains whole culturing medium,

E.coli containing rElGH without culture medium, and protein total of lysozyme-lysated E. coli and mixed with feedstuffs before it made into pellet (repeleting) on red Nile tilapia juvenile. The research consisted of 3 treatments by different preparation of rElGH at a dose of 3 mg/kg diet, and one control. Each treatment was repeated three times. The control diet and rElGH was firstly coated by chicken egg yolks,and then mixed with diet by repelleting. Fish were reared for 6 weeks and fed diet containing rElGH by 3 times at day 1, 4 and 7 of the first week, 10% of fish body weight. The result showed that feeding fish by diet containing lysozyme-lysated rElGH generated higher growth, biomass and specific growth rate (SGR) of length and body weight compared with the control. Increment of body weight, biomass and SGR of length and body weight were 8.30%, 7,39% 4.20% and 4,92% higher compared to the control, respectively. Thus, feeding fish with diet containing the lysated rElGH is an effective method to increase growth of red Nile tilapia juvenile.

(5)

Skripsi

sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Perikanan

pada

Departemen Budidaya Perairan

PERFORMA BENIH IKAN NILA YANG DIBERI PAKAN

MENGANDUNG HORMON PERTUMBUHAN REKOMBINAN

DENGAN METODE PENYIAPAN BERBEDA

DEPARTEMEN BUDIDAYA PERAIRAN

FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN INSTITUT PERTANIAN BOGOR

BOGOR 2013

(6)
(7)
(8)

Judul Skripsi : Performa Benih Ikan Nila yang Diberi Pakan Mengandung Hormon Pertumbuhan Rekombinan dengan Metode Penyiapan Berbeda

Nama : Rangga Garnama NIM : C14090029

Program Studi : Teknologi dan Manajemen Perikanan Budidaya

Disetujui oleh

Dr Alimuddin, SPi,MSc Pembimbing I

Dr Ir Muhammad Agus Suprayudi, MSi Pembimbing II

Diketahui oleh

Dr Ir Sukenda, MSc Ketua Departemen

(9)

PRAKATA

Puji syukur kehadirat Allah SWT atas segala rahmat dan karuniaNya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul ”Performa Benih Ikan Nila yang Diberi Pakan Mengandung Hormon Pertumbuhan Rekombinan dengan Metode Penyiapan Berbeda”. Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Januari Desember 2012 sampai dengan Februari 2013 di Laboratorium Reproduksi dan Genetika Organisme Akuatik, Laboratorium Pembuatan Pakan Nutrisi, Budidaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Institut Pertanian Bogor, Jawa Barat.

Dalam kesempatan kali ini, penulis mengucapkan terima kasih kepada : 1. Bapak Dr Alimuddin, MSc, Bapak Dr Ir Muhammad Agus Suprayudi,

MSi selaku dosen pembimbing yang telah banyak memberikan bimbingan selama pengerjaan penelitian ini.

2. Bapak Prof Dr Ir Muhammad Zairin Junior, MSc dan Ibu Dr Dinamella Wahjuningrum selaku dosen penguji tamu dan komisi pendidikan S1 Departemen Budidaya Perairan yang telah banyak memberikan kritik dan saran-sarannya.

3. Ibu Yuni Puji Hastuti SPi, MSi selaku dosen pembimbing akademik yang telah banyak memberikan masukan, semangat dan motivasi.

4. Mba Anna Octavera SPi. MSi, Kak Fuad, Kak Darmawan, Kak Jessy, Kak Fajar, Kak Epro, Kak Ipah, Kak Yadi, Kak Sri dan mahasiswa S2, S3 Genetik yang telah memberikan motivasi, informasi, bimbingan serta ilmunya.

5. Seluruh dosen dan staf karyawan/karyawati Departemen Budidaya Perairan.

6. Dani Jatnika dan Nunung Sumarni selaku orang tua, serta Mustika katresna yang selalu memberikan doa, dukungan moril dan materil yang tidak ternilai.

7. Teman-teman terbaikku di BDP 46 (Putri Zulfania, Anthares Sugati, Doni Nurdiansyah, Chandra Syayid Bani) atas dukungan dan persahabatan selama ini, serta semua pihak yang telah memberikan dukungan baik secara langsung maupun tidak langsung.

Semoga skripsi ini bermanfaat.

Bogor, Agustus 2013

(10)

DAFTAR ISI

DAFTAR TABEL ………. ix

DAFTAR GAMBAR ……… ix

DAFTAR LAMPIRAN ……… ix

PENDAHULUAN ……… 1

Latar Belakang ……….. 1

Tujuan Penelitian ……….. 2

METODE ……….. 3

Rancangan Percobaan ………... 3

Produksi rElGH ………. 3

Lisis Dinding Sel Bakteri ………... 3

Repelleting Pakan dengan rElGH ………. 3

Pemeliharaan Ikan ………. 4

Sampling ………... 4

Pengukuran Kualitas Air ………... 4

Uji Mikrobiologis Pakan .………. 4

Uji Proksimat ……… 4

Laju Pertumbuhan Bobot Spesifik ……….. 4

Laju Pertumbuhan Panjang Spesifik ………..………….. 5

Analisis Statistik ……….…… 5

HASIL DAN PEMBAHASAN ……….. 5

Hasil ………. 5

Tingkat Kelangsungan Hidup ……… 5

Biomassa & Bobot Rerata Tubuh Ikan ……….. 6

Pertumbuhan Panjang ……… 7

Laju Pertumbuhan Spesifik ……… 8

Kualitas Air ……… 9

Uji Mikrobiologis Pakan .……….. 9

Uji Proksimat ………. 10

Pembahasan ………. 10

(11)

Kesimpulan ……….. 13

Saran ……… 13

DAFTAR PUSTAKA ………. 13

LAMPIRAN ……… 16

(12)

DAFTAR TABEL

1 Biomassa dan rerata bobot tubuh ikan nila yang diberi pakan yang mengandung rElGH media kultur, rElGH non media kultur, rElGH lisis

dan kontrol ………. 6

2 Rerata pertumbuhan panjang (cm) benih ikan nila yang diberi pakan yang mengandung rElGH media kultur, rElGH non media kultur,

rElGH lisis dan kontrol ………. 7

3 Rerata laju pertumbuhan spesifik benih ikan nila yang diberi pakan yang mengandung rElGH media kultur, rElGH non media kultur, rElGH lisis dan kontrol ……….……….... 8 4 Hasil pengukuran suhu, oksigen terlarut (dissolved oxygen, DO), pH,

kadar nitrit, nitrat dan total amonia nitrogen (TAN) pada awal dan akhir

penelitian ………... 9

5 Hasil uji proksimat ikan yang diberi pakan rElGH dalam bentuk bakteri utuh bercampur media kultur (A), tanpa media (B), hasil lisis (C) dan

kontrol………... 10

DAFTAR GAMBAR

1 Tingkat kelangsungan hidup (%) benih ikan nila yang diberi pakan mengandung rElGH media kultur, non media kultur, rElGH lisis dengan dosis 3 mg/kg dan kontrol ………... 5 2 Pertumbuhan biomassa ikan nila yang diberi pakan mengandung rElGH

media kultur, non media kultur, rElGH lisis, dan kontrol ...….... 6 3 Pertumbuhan bobot rerata ikan nila yang diberi pakan mengandung

rElGH media kultur, non media kultur, rElGH lisis dan kontrol….….... 7 4 Pertumbuhan panjang ikan nila yang diberi pakan mengandung rElGH

media kultur, non media kultur, rElGH lisis dan kontrol……...…….... 8 5 Dokumentasi Ikan nila yang diberi pakan yang mengandung rElGH

media kultur (A), non media kultur (B), rElGH lisis (C) dan kontrol (K) ………...……... 8 6 Hasil penebaran pakan uji untuk menumbuhkan bakteri... 9 7 Hasil cracking bakteri dari pakan yang disuplementasi dengan hormon

pertumbuhan pada pakan perlakuan A, B dan kontrol ……...…….... 10

DAFTAR LAMPIRAN

1 Proses kultur bakteri Escherichia coli BL 21 dengan konstruksi hormon pertumbuhan ikan kerapu kertang (rElGH) ………... 16 2 Proses cracking bakteri Escherichia coli BL 21 pembawa rElGH pada

pakan pelet ………. 17

(13)
(14)

PENDAHULUAN

Latar Belakang

Ikan nila (Oreochromis niloticus) adalah salah satu jenis ikan air tawar yang paling banyak dibudidayakan di Indonesia. Departemen Perikanan dan Akuakultur FAO (Food and Agriculture Organization 2008) menempatkan ikan nila di urutan ketiga setelah udang dan salmon sebagai contoh sukses perikanan budidaya dunia. Ikan nila merah disukai oleh konsumen luar negeri, karena ukuran dan bobot tubuhnya mirip dengan ikan kakap terutama yang berukuran lebih dari 500 g/ekor (Josupeit 2005).

Teknologi budidaya ikan nila, baik dari segi pembenihan hingga pembesaran telah dikuasai oleh masyarakat karena relatif mudah. Namun demikian, untuk mencapai ukuran konsumsi 3-6 ekor/ kg dari benih ukuran 3-5 cm diperlukan waktu sekitar 6 bulan (Wiryo 2010). Permasalahan lainnya adalah harga pakan tinggi, karena dalam budidaya ikan secara intensif pakan buatan digunakan untuk memenuhi kebutuhannya, dimana biaya yang harus dikeluarkan dapat mencapai hingga 60% dari biaya produksi (Nugroho 2010). Teknologi tepat guna diperlukan untuk mempercepat siklus produksi dalam rangka mendukung ketercapaiannya memenuhi kebutuhan pangan dunia. Salah satu teknologi untuk mendukung program tersebut dan dapat menekan konversi pakan (FCR) yang tinggi adalah aplikasi hormon pertumbuhan rekombinan (recombinant growth hormone/ rGH). Hormon pertumbuhan ini dapat dikatakan sebagai stimulan pertumbuhan karena dapat memacu pertumbuhan ikan. Upaya lain yang dapat dilakukan salah satunya adalah dengan teknologi transgenesis (proses introduksi gen ke sel suatu organisme) akan tetapi penggunaan rGH lebih menguntungkan dan aman dari isu keamanan pangan.

Hormon pertumbuhan merupakan polipeptida rantai tunggal dengan ukuran sekitar 22 kDa yang dihasilkan oleh kelenjar pituitari dengan fungsi pleotropik pada hewan vertebrata (Rosseau & Dufour 2007). Menurut Brown (2006) teknik yang digunakan dalam hormon pertumbuhan rekombinan adalah mengkombinasi gen-gen yang diinginkan secara buatan di luar tubuh dengan bantuan sel tranforman, gen dari target diisolasi dan ditransformasikan ke mikroba, seperti

Saccharomyces, Streptomyces, Bacillus dan Escherichia coli. Peranan hormon pertumbuhan diantaranya adalah meningkatkan daya tahan terhadap stres dan infeksi penyakit serta meningkatkan kelangsungan hidup ikan (Acosta et al. 2009), pertumbuhan dan perkembangan organisme secara normal (Anathy et al. 2001), metabolisme (Rousseau & Dufour 2007), dan kekebalan tubuh (Yada et al. 1999). Pemberian hormon pertumbuhan juga dapat memacu pertumbuhan ikan dengan cara peningkatan selera makan ikan sehingga dapat memperbaiki konversi pakan (Donaldson et al. 1979).

(15)

2

kelemahan dalam hal metode injeksi/ penyuntikan ikan adalah kurang efisien, dan metode perendaman hanya efektif pada fase larva, dosis dan frekuensi perendaman tertentu. Penggunaan metode oral dapat diterapkan pada skala masal dan dapat digunakan pada beberapa stadia ikan yang disesuaikan dengan ukuran pakan, akan tetapi kemungkinan besar leaching pada saat pemberian pakan rGH.

Aplikasi hormon pertumbuhan melalui injeksi/ penyuntikan dapat meningkatkan bobot ikan nila sekitar 20,94% dengan menggunakan hormon pertumbuhan rekombinan ikan kerapu kertang (rElGH) (Lesmana 2010). Begitu pula dengan perendaman, penggunaan rgh ikan mas pada ikan nila dapat meningkatkan bobot sebesar 53,1% dari kontrol (Li et al. 2003). Pada metode oral (penyemprotan pada pakan) rGH kerapu kertang dapat meningkatkan bobot pertumbuhan lebih bagus dari kontrol dan dosis lainnya (Muhammad et al. 2013). Aplikasi oral dapat juga dilakukan dengan mencampurkan rGH pada bahan-bahan pakan yang kemudian dibuat pelet, akan tetapi metode tersebut belum di lakukan. Oleh karena itu, pada penelitian ini dipilih metode penggunaan rGH melalui oral menggunakan pakan buatan melalui proses peleting (pencampuran rGH dengan bahan-bahan pakan). Metode ini diharapkan dapat lebih praktis dan ekonomis sehingga dapat diterapkan pada skala massal dan dapat diaplikasikan pada pakan komersial.

Hormon pertumbuhan yang dipakai dalam penelitian adalah hormon pertumbuhan rekombinan ikan kerapu kertang Epinephelus lanceolatus (rElGH). Dalam memperbanyak rElGH digunakan bakteri Escherichia coli dikarenakan produksinya lebih tinggi daripada hormon pertumbuhan dari ikan mas (rCcGH) dan ikan gurame (rOgGH) (Handoyo 2012, Irmawati 2013).

Secara garis besar produksi rGH meliputi kultur media padat, kultur media cair, panen bakteri, dan lisis dinding sel bakteri. Namun belum diketahuinya efek pemberian rElGH yang diambil dari media kultur cair bakteri Escherichia coli

yang mengandung rGH (Media) dan bakteri utuh E. coliyang mengandung rGH (pelet hasil sentifugasi media kultur cair bakteri E. coli) (non media) diduga dapat diterapkan kedalam metode oral menggunakan pakan buatan yang dilakukan melalui proses peleting, sehingga apabila salah satu atau keduanya lebih baik jika dibandingkan dengan E. coliyang telah dilisis (Lisis) maka hal ini dapat berdampak pada efisiensi produksi rGH. Dosis yang digunakan mengacu pada penelitian Muhammad et al. (2013) yang menyatakan bahwa dosis 3 mg/ kg pakan merupakan dosis yang efektif meningkatkan pertumbuhan ikan nila.

Tujuan Penelitian

(16)

3

METODE

Rancangan Percobaan

Penelitian ini menggunakan rancangan acak lengkap, terdiri dari empat perlakuan dengan masing masing tiga kali ulangan. Larva ikan nila berukuran 1,7 cm dihitung sebanyak 400 ekor dan kemudian dimasukan kedalam masing masing akuarium sebanyak 30 ekor/akuarium yang berisi 175 L air. Sebelum perlakuan dimulai ikan nila dipuasakan terlebih dahulu selama 1 hari. Perlakuan yang diberikan yaitu:

Kontrol (K) : Benih ikan nila yang diberi pakan komersial protein 37-39%, tidak mengandung rElGH

Perlakuan A : Benih ikan nila yang diberi pakan komersial yang dicampur bakteri dan media kultur.

Perlakuan B : Benih ikan nila yang diberikan pakan komersil yang dicampur bakteri setelah media kultur dibuang melalui sentrifugasi (Non Media).

Perlakuan C : Benih ikan nila yang diberikan pakan komersial dan hasil lisis dinding sel bakteri.

Ikan uji yang digunakan adalah larva ikan nila merah berukuran 2 cm yang berasal dari kolam percobaan Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, IPB. Pakan yang digunakan adalah dalam bentuk pelet yang dibuat oleh Lab. Pembuatan Pakan, Departemen Budidaya Perairan IPB. Rekombinan hormon pertumbuhan diproduksi sesuai dengan metode Alimuddin et al. (2010).

Produksi rElGH

Produksi rElGH dilakukan dengan menggunakan bakteri E. coli BL21. Perbanyakan bakteri yang mengandung konstruksi pCold-I/ElGH sesuai dengan metode Alimuddin et al. (2010). Media yang digunakan adalah 2xYT cair yang telah ditambahkan antibiotik ampisilin sebanyak 100 µL ampisilin dalam 100 mL media. Konsentrasi ampisilin adalah 100 mg/ mL.adalah Bakteri hasil kultur dipanen dengan sentrifugasi selama 3 menit pada kecepatan 12.000 rpm, dan selanjutnya siap untuk dilisis.

Lisis Sel Bakteri

Lisis sel bakteri E. coli dilakukan secara kimiawi menggunakan lisozim. Metode lisis dinding sel bakteri mengacu pada Handoyo (2012) dengan dosis lysozim sebagai pelisis sebanyak 500µL (10 mg dalam 1 mLtris-EDTA). Hasil akhir dari lisis berupa pelet yang merupakan total protein mengandung rElGH dalam bentuk badan inklusi. Pelet rElGH dicuci dengan phosphate buffer saline

(PBS) sebanyak 2 kali dan disimpan pada freezer -80 oC hingga akan digunakan.

Peleting Pakan Dengan rElGH

(17)

4

kuning telur pada mangkuk, jumlah kuning telur yang digunakan adalah sebanyak 5 g, diaduk sampai merata, ditambahkan air 200 mL, dicampurkan secara merata dengan bahan pakan, kemudian dimasukkan kedalam mesin pelet. Pelet yang sudah jadi dikeringkan menggunakan oven selama 24 jam pada suhu 60 oC.

Pemeliharaan Ikan

Ikan dipelihara di dalam akuarium berdimensi 100 x 50 x 50 cm3 hingga akhir pemeliharaan dengan volume air sebanyak 175 liter. Larva ikan nila merah diberi pakan komersial dengan feeding rate 10% dari bobot tubuh dengan frekuensi 3 kali pemberian pakan yang diberi rElGH yaitu pada hari pertama, hari ke-4 dan hari ke-7. Sementara pada hari ke-2,3,5,6,8 dan seterusnya diberi pakan sekenyangnya (at satiation) dengan frekuensi 3 kali sehari pada pagi, siang dan kelangsungan hidup ikan dihitung setiap 2 minggu sekali. Biomassa diukur menggunakan timbangan digital dengan ketelitian 0,01 g, panjang total (diukur mulai dari ujung mulut terdepan sampai bagian ujung ekor paling belakang) dan panjang baku (diukur mulai dari ujung mulut terdepan sampai bagian pangkal lipatan sirip ekor) diukur menggunakan kertas ukur.

Pengukuran Kualitas Air

Suhu air diukur setiap hari, sedangkan parameter lainnya yang diukur pada tengah dan akhir pemeliharaan adalah DO, pH, amonia, kesadahan, alkalinitas, nitrit dan nitrat. Seluruh parameter tersebut diukur dengan pengukuran manual di Lab. Lingkungan BDP FPIK IPB.

Uji Mikrobiologis Pakan

Uji mikrobiologis dilakukan untuk mengetahui bakteri yang terdapat dalam pakan mengandung atau tidaknya plasmid pCold-I/ElGH. Metode kultur bakteri, metode cracking, PCR dan elektroforesis dilakukan mengikuti metode Alimuddin

et al. (2010).

Laju Pertumbuhan Bobot Spesifik

Laju pertumbuhan spesifik (LPS) atau persentase pertambahan bobot setiap hari dikenal dengan istilah specific growth rate (SGR). LPS bobot dihitung dengan menggunakan rumus sebagai berikut:

LPSb = [√t WoWt− ] x %

Keterangan :

(18)

5 Wo : Bobot rerata individu ikan waktu ke-o (gram)

t : Lama pemeliharaan (hari)

Laju Pertumbuhan Panjang Spesifik

LPS panjang dihitung dengan menggunakan rumus sebagai berikut:

LPSp = [√t LoLt − ] x %

Keterangan :

LPSp : Laju petumbuhan panjang spesifik (%/hari) Lt : Panjang rerata individu ikan waktu ke-t (gram) Lo : Panjang rerata individu ikan waktu ke-o (gram) t : Lama pemeliharaan (hari)

Analisis Data

Efektivitas perlakuan rElGH ditentukan berdasarkan tingkat kelangsungan hidup, biomassa, pertumbuhan panjang, dan laju pertumbuhan spesifik. Data yang diperoleh dianalisis secara deskriptif dan diolah menggunakan perangkat lunak Microsoft excel 2013.

HASIL DAN PEMBAHASAN

Hasil

Kelangsungan Hidup Ikan

Tingkat kelangsungan hidup ikan nila pada perlakuan dan kontrol berbeda, yaitu pada perlakuan kontrol (K) sebesar 97,78 %, perlakuan rElGH media kultur (A) sebesar 98,89 %, perlakuan rElGH non media kultur (B) sebesar 97,78 %, dan perlakuan rElGH lisis (C) sebesar 96,67 % (Gambar 1). Kelangsungan hidup paling tinggi adalah perlakuan rElGH media kultur bakteri (A) dan yang paling rendah adalah perlakuan rElGH lisis (C).

Gambar 1 Tingkat kelangsungan hidup (%) benih ikan nila yang diberi pakan

Kontrol (K) Media kultur (A) Non media kultur (B) Lisis (C)

(19)

6

Biomassa dan Rerata Bobot Tubuh Ikan

Hasil penelitian menunjukkan bahwa nilai pertumbuhan baik panjang, laju pertumbuhan spesifik, bobot rerata individu maupun biomassa ikan nila yang diberikan rElGH relatif lebih tinggi daripada kontrol (Tabel 1). Biomassa dan rerata bobot tubuh akhir yang paling tinggi terdapat pada perlakuan rElGH yang telah dilisis dan yang terendah terdapat pada perlakuan kontrol.

Tabel 1 Biomassa dan rerata bobot tubuh ikan nila yang diberi pakan yang mengandung rElGH media kultur, rElGH non media kultur, rElGH lisis dankontrol.

Perlakuan Biomassa Rerata bobot tubuh terakhir

Kontrol (K) 98,10 ± 4,62 3,35 ± 0,73

Media kultur (A) 103,82 ± 3,55 3,46 ± 0,84

Non Media kultur (B) 99,91 ± 3,04 3,37± 0,66

Lisis (C) 105,35 ± 8,33 3,63± 0,63

Keterangan : nilai dinyatakan dalam rerata ± simpangan baku, setiap perlakuannya ikan dipelihara selama 6 minggu di akuarium berukuran 100 x 50 x 50 cm3 dengan kepadatan 3 ekor/20 L air.

Gambar 2 menunjukkan bahwa pertumbuhan biomassa ikan nila perlakuan rElGH lisis cenderung lebih tinggi daripada kontrol. Biomassa tertinggi terdapat pada perlakuan rElGH lisis (105,35 gram), sedangkan kontrol (98,10 gram) memiliki nilai yang paling rendah. Peningkatan biomassa perlakuan rElGH lisis sebesar 7,39% lebih tinggi dibandingkan dengan kontrol.

Gambar 2 Pertumbuhan biomassa ikan nila yang diberi pakan mengandung rElGH

media kultur, non media kultur, rElGH lisis, dan kontrol.

Sama halnya dengan Gambar 3, bobot rerata tertinggi terdapat pada perlakuan rElGH lisis dengan nilai 3,63gram, sedangkan kontrol memliki nilai yang paling rendah dari semua perlakuan yaitu 3,35 gram. Peningkatan bobot rElGH lisis sebesar 8,3% lebih tinggi dibandingkan dengan kontrol.

(20)

7

Gambar 3 Pertumbuhan bobot rerata ikan nila yang diberi pakan mengandung rElGH media kultur, non media kultur, rElGH lisis dan kontrol.

Pertumbuhan Panjang

Pertumbuhan panjang benih ikan nila yang diberikan perlakuan rekombinan hormon pertumbuhan ikan kerapu kertang melalui pakan buatan dengan perlakuan dari rElGH media kultur, rElGH non media kultur dan rElGH lisis lebih tinggi daripada kontrol. Nilai pertumbuhan panjang baku dan panjang total tertinggi diperoleh pada perlakuan rElGH lisis dan terendah pada perlakuan kontrol (Tabel 2 dan Gambar 2).

Tabel 2 Rerata pertumbuhan panjang (cm) benih ikan nila yang diberi pakan yang mengandung rElGH media kultur, rElGH non media kultur, rElGH lisis dan kontrol.

Perlakuan Pertumbuhan

Panjang baku (cm) Panjang total (cm)

Kontrol (K) 5,01 ± 0,21 6,30 ± 0,17

Media kultur (A) 5,11 ± 0,21 6,46 ± 0,26

Non Media kultur (B) 5,15 ± 0,17 6,51 ± 0,21

rElGH lisis (C) 5,32 ± 0,27 6,72 ± 0,39

Keterangan : nilai dinyatakan dalam rerata ± simpangan baku, setiap perlakuan ikan dipelihara selama 6 minggu di akuarium berukuran 100 x 50 x 50 cm3 dengan kepadatan 3 ekor/20 L air.

(21)

8

menunjukkan peningkatan panjang rElGH lisis sebesar 6,21% lebih tinggi dibandingkan dengan kontrol.

Gambar 4 Pertumbuhan panjang ikan nila yang diberi pakan mengandung rElGH

media kultur, non media kultur, rElGH lisis dan kontrol.

Laju Pertumbuhan Spesifik

Laju pertumbuhan spesifik benih ikan nila yang diberi hormon pertumbuhan rekombinan ikan kerapu kertang (rElGH) dari rElGH media kultur, non media

kultur, dan rElGH lisis lebih tinggi daripada kontrol. Nilai laju pertumbuhan panjang dan laju pertumbuhan bobot tertinggi diperoleh pada perlakuan rElGH lisis dan terendah pada perlakuan kontrol (Tabel 3). Hal tersebut menunjukan bahwa perlakuan rElGH lisis dapat meningkatkan pertumbuhan panjang dan bobot, masing-masing sebesar 4,20% dan 4,92% lebih tinggi dibandingkan dengan kontrol.

Tabel 3 Rerata laju pertumbuhan spesifik benih ikan nila yang diberi pakan yang mengandung rElGH media kultur, rElGH non media kultur, rElGH lisis dan

Keterangan : nilai dinyatakan dalam rerata ± simpangan baku, setiap perlakuan ikan dipelihara selama 6 minggu di akuarium berukuran 100 x 50 x 50 cm dengan kepadatan 3 ekor/20 L air.

(22)

9

Gambar 5 Hasil Dokumentasi Ikan nila yang diberi pakan yang mengandung rElGH media kultur (A), non media kultur (B), rElGH lisis (C) dan kontrol (K).

Kualitas air

Hasil pengukuran kualitas air menunjukan hasil yang tidak jauh berbeda dengan kisaran optimum untuk ikan nila. Kualitas air ditampilkan pada Tabel 4.

Tabel 4 Hasil pengukuran suhu, oksigen terlarut (dissolved oxygen/DO), pH, kadar nitrit, nitrat dan total amonia nitrogen (TAN) pada awal dan akhir penelitian.

Sampel Suhu DO pH Nitrit Nitrat TAN

Awal Akhir Awal Akhir Awal Akhir Awal Akhir Awal Akhir Awal Akhir

K 27 27,5 5,65 5,40 6,37 8,10 1,174 0,363 1,294 1,160 0,196 0,250

A 27 27,5 5,95 5,40 6,53 8,13 1,034 0,449 1,420 1,518 0,181 0,222

B 27 27,5 5,25 5,60 6,54 8,07 1,059 0,472 1,431 1,132 0,199 0,214

C 27 27,5 5,45 5,25 6,62 8,12 1,057 0,421 1,603 1,294 0,201 0,162

Optimal 25 -32 ≥ 3 6,5 – 8,5 0.1 – 0.7 < 1 < 1

Kualitas air media pemeliharaan ikan perlakuan dan kontrol relatif sama dan berada pada kisaran normal (Tabel 4). Dengan demikian, perbedaan pertumbuhan bukan disebabkan oleh perbedaan kualitas air pemeliharaan.

Uji Mikrobiologis Pakan

Dengan pertimbangan keamanan lingkungan, keberadaan bakteri pembawa rElGH yang telahdicampur pada pakan perlu diuji. Pakan disebar pada cawan untuk mengetahui bakteri yang tumbuh dan kemudian dilakukan metode cracking.

Gambar 6 Hasil penebaran pakan uji untuk menumbuhkan bakteri. K: Pakan kontrol, A: Pakan media, B: Pakan non media. o : menunjukan tumbuhnya bakteri.

C B A K

K

(23)

10

Dengan menggunakan metode PCR, seperti ditunjukkan pada Gambar 7 bahwa sampel pakan mengandung rElGH (kolom 4-16) dan kontrol (kolom 17-20) tidak ada produk PCR (no 4-17-20), sedangkan sampel 1-3 sebagai stok murni kultur bakteri pembawa rElGH memperlihatkan amplikon berukuran sekitar 0,5 kbp. Dengan demikian, tidak ada bakteri hidup yang membawa rElGH dalam pakan perlakuan, dan tidak ada bakteri yang terlepas ke wadah budidaya.

Gambar 7 Hasil cracking bakteri dari pakan yang disuplementasi dengan hormon pertumbuhan pada pakan perlakuan A, B dan kontrol. M : Marker penanda, 1-3: stok murni bakteri pembawa pColdI/ rElGH,4-10 merupakan pakan yang diberi rElGH media kultur, nomor 11-16 pakan yang diberi rElGH non media kultur, dan 17-20 bakteri kontrol.

Uji Proksimat

Berdasarkan Tabel 5, kadar proksimat ikan perlakuan dan kontrol relatif sama. Dengan demikian, perlakuan tidak mempengaruhi kandungan nutrisi ikan nila merah.

Tabel 5 Hasil uji proksimat pakan rElGH dalam bentuk bakteri utuh bercampur media kultur (A), tanpa media (B), hasil lisis (C) dan kontrol.

Kode Sampel Kadar Abu Protein Lemak Karbohidrat

(Serat kasar)

K 13,7456 38,2758 6,2281 8,1622

A 13,4670 39,8126 7,5942 7,0059

B 13,5661 38,3812 7,1693 5,1675

C 13,6412 37,0767 7,0510 4,0184

Bakteri yang terdapat dalam pakan yang dikeringan dengan oven sekitar 60oC setelah diuji mikrobiologis dengan menumbuhkan bakteri dalam media

cawan (Gambar 6) diperoleh hasil yang negatif (Gambar 7). Dengan demikian pakan yang dibuat dengan mencampurkan rElGH media dan non media aman digunakan. Jika bakteri rElGH aktif dilingkungan, dikhawatirkan dapat mengganggu ekosistem bakteri E.coli alami dan ekosistem lingkungan.

Pembahasan

(24)

11 pertumbuhan sebesar 36,5% lebih tinggi daripada kontrol. Hasil yang diperoleh pada penelitian ini lebih rendah, yakni 7,39%. Penelitian Latar (2013) dilakukan di hapa yang dipasang di kolam, dan hal ini diduga mempengaruhi perbedaan hasil tersebut. Selain itu, pada penelitian ini, frekuensi 3 kali sehari selama 3 hari dengan interval waktu pemberian 2 hari. Hal ini diduga juga mempengaruhi perbedaan hasil tersebut.

Pemberian rElGH pada pakan dengan metode pelleting perlu adanya penyalut atau binder rElGH agar terhindar dari degradasi oleh enzim pencernaan dan kerusakan akibat yang rendah. HP55 (hydroxypropil methylcellulose phthalate) merupakan penyalut yang telah terbukti memberikan hasil yang bagus dlam pertumbuhan (Jeh et al. 1998). Akan tetapi kekurangan dari HP55 adalah harga yang mahal. Penyalut lainnya yang lebih murah dari HP55 adalah PMC (polymethyl carbamide) dan kuning telur. Fungsi dari PMC menurut Arbuckle & Marshall (1996) adalah mengikat air dan berperan dalam pemberian udara terhadap adonan ketika proses pembekuan dan meningkatkan kekuatan permukaan produk. Kuning telur relatif sangat murah dari kedua bahan tersebut dan sangat mudah untuk didapatkan dan peranan kuning telur telah banyak digunakan dalam binder (pengikat) obat-obatan. Kuning telur diharapkan sama dengan fungsi HP55 dan PMC sehingga dapat dijadikan bahan subtitusi.

Hasil pemeliharaan selama 6 minggu memperlihatkan respons benih ikan nila yang diberi rElGH secara oral melalui pakan yang direpeleting dengan dosis 3 mg/kg rElGH lisis memberikan pertumbuhan yang lebih tinggi dibandingkan dengan perlakuan kontrol (Gambar 5), dimana ikan yang diberikan rElGH lisis memiliki tubuh yang lebih lebar dan panjang jika dibandingkan dengan ikan perlakuan lainnya. Perbedaan dari biomassa sebesar 7,39% dari kontrol.

Metode pemberian rGH melalui pakan buatan salah satunya telah dilakukan oleh Tsai et al. (1997) menggunakan protein rypGH yang memberikan pakan dengan frekuensi 2 kali sehari selama 2 minggu dalam ikan black sea bream

mampu meningkatkan pertumbuhan sebesar 180% lebih tinggi daripada kontrol. Jika dibandingkan dengan hasil penelitian ini, pemberian pakan dengan frekuensi 3 kali sehari selama 3 hari dengan selang interval pemberian 2 hari pada ikan nila memberikan peningkatan sebesar 7%. Terdapat perbedaan pada ikan uji, namun frekuensi pemberian pakan perlakuan yang diberikan oleh Tsai et al. (1997) terlihat mempengaruhi terhadap proses pertumbuhan. Oleh karena itu optimalisasi terhadap frekuensi pemberian pakan yang efektif perlu dilakukan agar penerapan teknologi hormon pertumbuhan didalam pakan dapat berkembang.

Perlakuan media (A) sangat berpotensi untuk menggantikan lisis rGH, karena hasil pertumbuhan bobot dan biomassa yang mendekati hasil pertumbuhan bobot dan biomassa lisis rGH. Bahan-bahan yang terkandung di dalam media diataranya adalah polypeptone, yeast exract dan NaCl. Kandungan nutrisi tersebut digunakan sebagai sumber nutrisi perkembangan bakteri. Menurut BD (2006)

yeast exract sering digunakan oleh industri makanan kesehatan sebagai sumber vitamin murah, dan telah lama dikenal sebagai sumber utama dari vitamin B-kompleks. Yeast exract berfungsi sebagai substrat dalam formulasi media, persediaan tidak hanya vitamin, tetapi juga protein, karbohidrat dan beberapa mikronutrien.

(25)

12

culture media. Nilai gizi Peptone sangat tergantung pada kandungan asam amino yang memasok nitrogen yang penting. Polypeptone merupakan campuran dari peptoneyang terdiri dari bagian yang sama dari pankreas pencerna kasein dan peptic pencerna jaringan hewan. Polypeptone memiliki kandungan asam amino yang tinggi.Karakteristik polipeptida pankreas pencerna kasein sangat kecil dan karakteristik polipeptida peptic pencerna jaringan hewan adalah lebih besar (BD 2006). Sodium kloridaatau NaCL memberikan keseimbangan osmotik untuk membantu dalam osmoregulasi dan juga dalam transportasi bahan dalam dan keluar dari sel mikroba (transport aktif). Hasil penelitian ini memberikan hasil bahwa perlakuan media lebih baik daripada kontrol karena diduga kandungan nutrisi nutrisi yang berasal dari polypeptone, yeast exract dan NaCl masih ada dan memberikan efek positif terhadap pakan, sehingga memperkecil biaya produksi hormon pertumbuhan rekombinan.

Biaya yang dikeluarkan untuk lisis dinding bakteri agar didapatkannya badan inklusi protein membutuhkan total biaya sebesar Rp. 200669/ 1 gram. Jika dihitung kebutuhan dalam pakan per 1 kg adalah sebesar Rp. 602,007/ 3 mg dosis rElGH. Namun total biaya yang dikeluarkan pada media hanya sebesar Rp. 84082, jika dihitung kebutuhan per 1 kg pakan maka media yang dibutuhkan adalah sebesar 300µL media (asumsi dari 100 mL menghasilkan 1 g rElGH) dengan dosis 3 rElGH mg/ kg dan biaya yang dibutuhkan sebesar Rp. 252,246.Total biaya yang dikeluarkan pada non media kultur adalah sebesar Rp. 133582. Kebutuhan per 1 kg pakan non media sama halnya dengan perlakuan media yaitu 300 µL dengan dosis 3 rElGH mg/ kg adalah sebesar Rp. 400,746. Pertumbuhan bobot dan biomassa media yang mendekati hasil pertumbuhan bobot dan biomassa lisis rGH, berpotensi menggantikan lisis rGH karena selain hasil yang bagus dan dapat menekan biaya pembuatan rGH sebesar 58,09 % dari biaya lisis.

(26)

13

KESIMPULAN DAN SARAN

Kesimpulan

Pertumbuhan ikan nila dapat ditingkatkan melalui pemberian hormon pertumbuhan rekombinan ikan kerapu kertang secara oral. Pemberian rElGH hasil lisis dosis 3 mg/kg pakan dengan metode repelleting pakan buatan dapat meningkatkan biomassa 7,39% lebih tinggi dibandingkan dengan kontrol.

Saran

Pemberian pakan yang diberi rekombinan hormon pertumbuhan ikan kerapu kertang dengan metode oral melalui repelleting pakan buatan merupakan cara yang mudah dan aplikatif untuk diterapkan pada kegiatan produksi massal. Metode pemberian rElGH dengan rElGH yang dipakai berasal dari rElGH lisis

kultur lebih bagus dibandingkan dengan perlakuan rElGH media kultur, rElGH

non media kulturdan kontrol negatif. Akan tetapi metode ini harus diuji atau dilakukan penelitian lebih lanjut dengan mencoba menerapkan umur ikan uji yang sama, lebih baik menggunakan benih yang berasal dari 1 induk, dosis rElGH yang lebih tinggi dan optimalisasi frekuensi pemberian pakan rElGH untuk memberikan hasil yang optimum.

DAFTAR PUSTAKA

Acosta J, Morales R, Morales A, Alonso M, Estrada MP. 2007. Pichia pastoris

expressing recombinant tilapia growth hormone accelerates the growth of tilapia. Biotechnol Lett. 29:1671–1676.

Acosta J, Estrada MP, Carpio Y, Ruiz O, Morales R, Martinez E, Valdes J, Borroto C, Besada V, Sanchez A, Herrera F. 2009. Tilapia somatotropin polypeptides: potent enhanchers of fish growth and innate immunity.

Biotecnologia Aplicada. 26: 267-272.

Alimuddin, Lesmana I, Sudrajat AO, Carman O, Faizal I. 2010. Production and bioactivity potential of three recombinant growth hormones of farmed fish.

Indonesian Aquaculture Journal. 5 (1): 11-17.

AnathyV, Venugopal T, Koteeswaran R,PandianTJ, Mathavan S. 2001.Cloning, sequencing and expression of cDNA encoding growthhormonefrom Indian catfish (Heteropneustes fossilis). J Biosci. 26:315–324.

Arbuckle WS, Marshall RT.1996. Ice cream. 5th Edit. New York (USA): Chapman

and Hall Publishing.

[BD] Beckon, Dickinson and Company. 2006. BD Bionutrients Technical Manual Advanced Bioprocessing. Third Editon Revised. USA : [Penerbit tidak diketahui]

Ben-Atia I, Fine M,Tandler A, Funkenstein B, Maurice S, Cavari B,Gertler A. 1999. Preparation of recombinant gilthead seabream (Sparus aurata) growth hormone and its use for stimulation of larvae growth by oral administration.General and Comparative Endocrinology. 113: 155–164. Brown TA. 2006. Gene cloning and analysis. United Kingdom (EN) : Blackwell

(27)

14

Donaldson EM, Fagerlund UHM, Higgs DA, McBride JR. 1979. Hormonal enhancement of growth. Di dalam: HoarWS, RandallDJ, dan Brett JR, editor. Physiology Vol. 8: Bioenergetics and Growth. Academic Press, California.

FAO. 2008. Aquaculture development. 5. Genetic resource management. FAO Technical Guidelines for Responsible Fisheries. No. 5, Suppl. 3. FAO-Rome, 125p.

Handoyo B. 2012. Metode Pemberian dan respons benih ikan sidat terhadap hormon pertumbuhan rekombinan ikan kerapu kertang [tesis]. Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor.

Husna HN. 2012. Pertumbuhan benih ikan betok yang diberi protein rekombinan hormon pertumbuhan ikan kerapu kertang (rElHP) dengan dosis berbeda melalui perendaman [skripsi]. Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor.

Huwoyon GH, Gustiano R, Kusmini I, Mulyasari, Prihadi T, Mujiutami E, Wahyutomo, Iskandariah. 2010. Penyediaan protein ikan melalui peningkatan produksi dan produktivitas lahan marginal melalui budidaya ikan nila unggul. Balai Riset Ikan Hias Depok (ID), Balai Riset Perikanan Budidaya Air Tawar Bogor (ID), dan Balai Riset Budidaya Air Tawar Mandiangin (ID).

Irmawati. 2013. Respons fisiologis, biokimia dan molekuler ikan gurame yang diberi hormon pertumbuhan rekombinan [disertasi]. Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor.

Jeh HS, Kim CH, Lee HK, Han K. 1998. Recombinant flounder growth hormone from escherichia coli : overexpression, efficienr recovery, and growth-promoting effect on juvenile flounder by oral administration. J Biotechnol

60 :183-193.

Josupeit H. 2005. World Market of Tilapia. Volume 79, Globefish. FAO’s Fishery

Industries Division, Rome, Italy.

[KKP] Kementerian Kelautan dan Perikanan.2011. Pembuatan Pakan Pelet [internet]. [diacu 2013 Juni 27]. Tersedia dari: http://www.kkp.go.id/index.php/arsip/c/5599/PEMBUATAN-PAKAN-PELLET/?category_id=104

Latar DI. 2013. Efektivitas Pemberian Hormon Pertumbuhan Rekombinan Ikan Kerapu Kertang Melalui Pakan dengan Bahan Penyalut Berbeda pada Ikan Nila (Oreochromis niloticus) [tesis]. Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor. Lesmana I. 2010. Produksi dan bioaktivitas protein rekombinan hormon

pertumbuhan dari tiga jenis ikan budidaya [tesis]. Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor.

Li Y, Bai J, Jian Q, Ye X, Lao H, Li X, Luo J, Liang X.2003. Expression of common carp growth hormone in the yeast Pischia pastoris and growth stimulation of juvenile tilapia (Oreochromis niloticus). Aquaculture.

216:329-341

(28)

15 Muhammad, Junior MZ, Alimuddin, Carman O. 2013. Performa Ikan Nila yag diberi Pakan Mengandung Protein Rekombinan Hormon Pertumbuhan.

Jurnal Akuakultur Indonesia, siap terbit.

Moriyama S, Kawauchi H. 1990. Growth stimulation of juvenile salmonids by immersion in recombinant salmon growth hormone. Nipp Suis Gakk

56:31-34.

Moriyama S, Hiroshi Y, Seiji S, Toshio A, Tetsuya H, Hiroshi K. 1993. Oral administration of recombinant salmon growth hormone to rainbow trout,

Oncorhynchus mykiss. Aquaculture,112: 99-106.

Nugroho, SJ. 2010. Pemakaian Limbah (Sludge) Biogas dari Kotoran Sapi sebagai Sumber Bahan Baku Pakan Nila Oreochromis niloticus [skripsi]. Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor.

Pogram RKS. 2012. Pertumbuhan dan kelangsungan hidup ikan betok yang direndam hormon pertumbuhan ikan kerapu kertang rekombinan dengan dosis berbeda pada umur 12 hari [skripsi]. Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor.

Promdonkoy B, Warit S, Panyim S. 2004. Production of a biologically active growth hormone from giant catfish (Pangasianodon gigas) in Escherichia coli. Biotechnology Left. 26:649-653.

Putra HGP. 2011. Pertumbuhan dan kelangsungan hidup benih ikan gurame yang diberi protein rekombinan GH melalui perendaman dengan dosis berbeda [skripsi]. Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor.

Rahmawaty I. 2011. Pertumbuhan dan kelangsungan hidup benih ikan gurame yang diberi pakan alami yang disuplementasi hormon pertumbuhan rekombinan [skripsi]. Bogor (ID) : Institut Pertanian Bogor.

Rousseau K, Dufour S. 2007. Comparative aspects of GH and metabolic regulation in lower vertebrates. Neuroendocrinol. 86:165–174.

Tsai HJ, Hsih MH, Kuo JC. 1997. Escherichia coli produced fish growth hormone as a feed additive to enhance the growth of juvenile black seabream (Acanthopagrus schlegeli). J Appl Ichthyol. 13:78-82.

Utomo DSC. 2010. Produksi dan uji bioaktivitas protein rekombinan hormon pertumbuhan ikan mas [tesis]. Bogor (ID) : Institut Pertanian Bogor. Wiryo. 2010. Budidaya ikan nila [internet]. [diacu 2013Juni 27] Tersedia

dari:http://epetani.deptan.go.id/budidaya/budidaya-ikan-nila-98.

(29)

16

Lampiran 1 Proses kultur bakteri Escherichia coli BL 21 dengan konstruksi hormon pertumbuhan ikan kerapu kertang (rElGH).

Culture

rGH Lisis

rGH Non media

rGH Media

Plate E. coli BL21 hasil

transformasi pCold - ElGH

3 ml 2xYT + Amp

Shake 370C 18 jam 100 ml 2xYT + 100 µl Amp

(shake 3 jam, 370C)

Suhu150C

Cold shock 30 menit

Sentrifuse 12.000 rpm selama 1 menit Sub culture

(30)

17 Lampiran 2 Proses cracking bakteri Escherichia coli BL 21 pembawa rElGH pada

pakan pelet.

+ 10 µl cracking buffer + 10 µl EDTA 10 mM + 1 µl loading cracking buffer(ditutupnya )

Elektroforesis Visualisasi hasil elektroforesis

Larutkan dengan PBS 1ml pada

microtube Plating pd media agar +

ampisilin

Inkubasi selama 16 jam pada suhu

37oC

Spin down 5.000 rpm Kemudian vortex

Sentrifuse 5 menit 12.000

(31)

18

Lampiran 3 Analisis biaya produksi hormon pertumbuhan rekombinan dengan metode penyiapan berbeda.

Nama biaya Keterangan Total

Preparasi bakteri Penyiapan bakteri rElGH Rp. 5000

Sewa alat Shaker, Thermoshake, Sentrifuge Rp. 15000

IPTG 0,8 mL Rp.8568

PBS 100 mL Rp. 2950

Microtube 20 tube Rp.3900

Microtip biru 20 tip Rp. 4340

Microtip kuning 20 tip Rp. 3540

Ampisilin 100 µl Rp. 1000

Operasional Biaya kerja, listrik dll Rp. 150000

Total Rp. 194298 Sedangkan jumlah dosis yang dibutuhkan dalam 1 kg pakan adalah 3 mg. Biaya perlakuan lisis : 3 mg rElGH lisis = Rp. 602,007.

Biaya perlakuan media kultur :

(32)

19 Jadi biaya yang dibutuhkan adalah biaya media ditambah dengan biaya preparasi bakteri dan biaya lain seperti sewa alat, IPTG, ampisilin dan 33% biaya operasional.

Total biaya sebesar : Rp. 5.014 + Rp. 5000 + Rp. 15000 + Rp. 8568 + Rp. 1000 + Rp. 49500= Rp. 84082.

100 mL = 1 gramprotein rekombinan = Rp. 84082atau 1 mg = Rp. 84,082. Biaya perlakuan media kultur : 3 mg rElGH = 300µL rElGH = Rp. 252,246.

Biaya perlakuan non media kultur :

Asumsi : 100 mL menjadi 1 gram protein rekombinan maka, jika dibutuhkannya 3 mg maka dibutuhkan 300µL media kultur kemudian disentrifuse.

Jadi biaya yang dibutuhkan adalah biaya media ditambah dengan biaya preparasi bakteri dan biaya lain seperti sewa alat, IPTG, ampisilin dan 66% biaya operasional.

Total biaya sebesar : Rp. 5.014 + Rp. 5000 + Rp. 15000 + Rp. 8568 + Rp. 1000 + Rp. 99000 = Rp. 133582

(33)

20

RIWAYAT HIDUP

Penulis dilahirkan di Ciamis tanggal 21 Mei 1991 dari Ayah Dani Jatnika dan Ibu Nunung Sumarni. Penulis merupakan anak pertama dari dua bersaudara. Pendidikan formal yang dilalui yaitu SMAN 1 Banjar dan lulus pada tahun 2009. Pada tahun yang sama penulis diterima masuk IPB melalui jalur Ujian Seleksi Masuk IPB (USMI) pada Program Studi Teknologi dan Manajemen Perikanan Budidaya, Departemen Budidaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan. Selama mengikuti perkuliahan penulis pernah magang di Balai Budidaya Air Tawar Sukabumi, Jawa Barat pada tahun 2011 dengan memilih komoditas ikan Nila. Tahun 2012 penulis melakukan praktek lapangan akuakultur di Kolam Percobaan Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan IPB, Jawa Barat komoditas ikan nila merah. Penulis juga pernah menjadi Asisten mata kuliah Dasar-Dasar Genetika semester ganjil tahun ajaran 2012/2013.

Penulis pernah menjadi wakil ketua Himakua (Himpunan mahasiswa Akuakultur) BDP FPIK IPB periode 2010-2011 dan BP Himakua (Badan Pengawas) BDP FPIK IPB periode 2011-2012. Penulis menjadi salah satu delegasi IPB pada Pekan Ilmiah Nasional (PIMNAS) XXV tahun 2012 yang dilaksanakan di Universitas Muhammadiyah Yogyakarta (UMY), melalui Program Kreativitas Mahasiswa bidang penelitian (PKM-P) dan berhasil meraih penghargaan medali perak.

Gambar

Gambar 3 Pertumbuhan bobot rerata ikan nila yang diberi pakan mengandung
Gambar 4 Pertumbuhan panjang ikan nila yang diberi pakan mengandung r ElGH
Tabel 4 Hasil pengukuran suhu, oksigen terlarut (dissolved oxygen/DO), pH,

Referensi

Dokumen terkait

If evidence of rodents (live or dead animals, droppings, urine or nesting material) is found inside the building, then entry and use should be prohibited until rodent contamination

Dalam penelitian ini menjelaskan/ mendeskripsikan Prosedur Pengurangan dan Penghapusan Sanksi Administrasi di PT X Denpasar dengan sumber data dari dokumen PT X yang dimiliki

Kebijakan atau program apakah yang akan dilakukan oleh Kantor Pelayanan Pajak Pratama Bantul dalam mempertahankan ketaatan Wajib Pajak yang telah mengikuti program

Bila bank sentral menetapkan tujuan jangka panjangnya adalah tingkat inflasi yang rendah, dan bank sentral menggunakan suku bunga sebagai variabel operasionalnya, maka kondisi

Implementasi sistem senayan untuk menggantikan sistem RBTC dan DIGILIB dengan cara migrasi data, migrasi proses bisnis dan penambahan modul dapat dilakukan dengan

Meminjam Uang Berbasis Teknologi Informasi yang menyatakan bahwa “Penyelenggara wajib bertanggung jawab atas kerugian Pengguna yang timbul akibat kesalahan dan/atau

Menurut Kertamukti (2015: 71) menyebutkan, penggunaan brand ambassador dimaksudkan untuk memberikan dorongan kepada pesan iklan agar lebih mudah diterima oleh

Dalam media Obor Rakyat yang dijadikan sebagai obyek penelitian adalah bahasa dalam teks. Bahasa yang digunakan dalam teks dijadikan sebagai simbol untuk