PERUBAHAN KARAKTERISTIK KIMIAWI DAN POTENSI PROBIOTIK BAKTERI ASAM LAKTAT DARI FERMENTASI REBUNG BAMBU APUS (Gigantochloa apus) DALAM LARUTAN GARAM 2,5% DAN 5% PADA SUHU 30 oC

(1)

56

7.

LAMPIRAN

Lampiran 1. Tabel Karakteristik Bakteri Asam Laktat.

Tabel 7. Karakteristik Bakteri Asam Laktat

Karakteristik Bentuk Gas CO2 Pertumbuhan Suhu 100_C Suhu 450_C NaCl 6,5% NaCl 18% pH 4,4 pH 9,6 Carnobacterium Batang - + - ND - ND - Lactobacillus Batang -/+ +/- +/- +/- - +/- - Aerococcus Bulat +/- + - + - - + Enterococcus Bulat - + + + - + + Lactococcus Vagococcus Bulat - + - - - +/- - Leuconostoc Bulat - + - +/- - +/- - Pediococcus Bulat + +/- +/- +/- - + - Streptococcus Bulat - - +/- - - - - Tetragenococcus Bulat + + - + + - + Keterangan : + = positif +/- = bervariasi - = negatif ND = tidak diuji (Salminen et al., 2004)

(2)

Lampiran 2. Kemampuan Pertumbuhan Bakteri Asam Laktat pada Suhu,

Kondisi pH dan Kadar NaCl Berbeda.

Tabel 8. Hasil Absorbansi Kemampuan Pertumbuhan Bakteri Asam Laktat pada Suhu

10

o

C dan 45

o

C

Kode

10o_C ₄₅o_C

24 Jam 48 Jam 24 Jam 48 Jam

Ul 1 Ul 2 Ul 1 Ul 2 Ul 1 Ul 2 Ul 1 Ul 2 P1 0,7747 0,3654 0,5400 0,2874 2,2799 2,3223 2,3113 2,4818 P3 0,8851 0,6627 0,6688 0,5414 2,1973 2,2412 2,1499 2,2335 P5 0,7710 0,6556 0,6770 0,5925 2,1809 2,3005 2,1144 2,3051 P6 0,7914 0,7487 0,3845 0,6208 2,3005 2,3223 2,2601 2,2144 P7 0,3687 0,4070 0,3055 0,2862 2,2601 2,3005 2,2321 2,3005 P8 0,6885 0,6882 0,5798 0,5560 2,2321 2,2601 2,2144 2,2799 P9 0,5955 0,6158 0,5588 0,5646 2,2321 2,3005 2,3005 2,3799 P11 0,6165 0,7086 0,4707 0,5284 2,1809 2,2321 2,2601 2,3730 P12 0,5911 0,7697 0,5054 0,5325 2,1425 2,2321 2,1072 2,2900 P13 0,5341 0,5911 0,4580 0,4741 2,1351 2,2601 2,2144 2,3601 P14 0,4126 0,4637 0,4335 0,4788 2,1891 2,2900 2,1809 2,2799 P15 0,6678 0,6648 0,4594 0,4995 2,2699 2,3335 2,2506 2,3005 P17 0,6982 0,6613 0,5525 0,5417 2,2799 2,2412 2,2699 2,2005 P18 0,6873 0,6753 0,5068 0,5745 2,1652 2,2900 2,1575 2,2799 P19 0,6235 0,7921 0,4882 0,5872 2,1973 2,2799 2,1891 2,2058 P20 0,7196 0,8348 0,5880 0,5789 2,1575 2,2506 2,1575 2,2231 P22 0,4954 0,5786 0,4440 0,4747 2,1499 2,3005 2,2412 2,4799 P23 0,5559 0,5963 0,4766 0,4462 2,1575 2,2799 2,2144 2,3113 P24 0,7449 0,5623 0,5568 0,4695 2,1652 2,2799 2,2412 2,3005 R1 0,5696 0,7332 0,5303 0,4994 2,1891 2,3005 2,1809 2,3113 R3 0,5577 0,5153 0,3973 0,4226 2,2231 2,2799 2,1973 2,2321 R5 0,6547 0,6158 0,4460 0,5052 2,2144 2,1973 2,1730 2,1005 R6 0,6097 0,8004 0,4779 0,5341 2,1210 2,2144 2,1425 2,2799 R7 0,4504 0,3104 0,4268 0,4982 2,1072 2,1425 2,1281 2,1144 R8 0,4954 0,5004 0,3690 0,3928 2,1425 2,1809 2,1210 2,1412 R9 0,5592 0,6857 0,4293 0,5645 2,1351 2,2900 2,2144 2,3799 R10 0,4009 0,4353 0,3680 0,4073 2,1499 2,2321 2,2058 2,3799 R11 1,0411 1,2084 1,3870 1,4693 0,4441 1,2500 0,4285 1,2463 R12 0,9635 1,1973 1,2422 1,4122 0,5573 1,3717 0,5741 1,3901 R13 1,0782 1,2050 1,6753 1,5709 0,3608 0,8341 1,3417 1,0477 R17 0,9799 1,0151 1,2339 1,2258 0,3231 0,5436 0,2617 0,5870 R18 1,2223 0,9869 1,5189 1,4435 0,3103 0,5571 0,4294 0,6099 Keterangan : Ul : Ulangan

(3)

Tabel 9.

Hasil Absorbansi Kemampuan Pertumbuhan Bakteri Asam Laktat pada pH

4,4 dan 9,6

Kode

4,4 9,6

Ul 1 Ul 2 Ul 1 Ul 2 Ul 1 Ul 2 Ul 1 Ul 2 P1 2,0620 1,9310 2,1072 2,1809 2,1575 1,8270 2,6581 2,2231 P3 2,1140 2,0157 2,1973 2,2900 1,1786 2,3938 2,7372 2,7092 P5 2,0620 1,9310 2,1072 2,1973 0,0764 0,1366 2,5911 2,6829 P6 2,0103 1,9890 2,1425 2,1425 0,0587 1,6167 0,1172 2,7372 P7 2,0382 1,8881 2,1210 2,1351 1,5422 1,6779 1,5402 1,5799 P8 2,0441 1,9738 2,1210 2,1575 0,1490 0,7855 2,6829 2,7672 P9 2,0325 2,0157 2,1210 2,1730 1,7734 0,0765 2,1210 2,6345 P11 2,0325 1,9591 2,0873 2,1575 1,6392 2,3113 2,3571 2,7092 P12 2,0325 2,0808 2,1809 2,2321 0,1797 1,5631 2,7092 2,1499 P13 2,1005 2,0325 2,1809 2,2412 1,5829 0,0751 1,8096 2,6345 P14 2,0620 2,0620 2,1499 2,2412 2,2412 2,3451 2,6581 2,5911 P15 2,1072 2,0382 2,2499 2,2799 0,1093 2,3451 2,5911 2,4611 P17 2,0325 1,9689 2,1351 2,1575 2,2699 2,3948 2,7092 2,7092 P18 1,9995 2,0325 2,1730 2,1730 2,0382 2,4662 2,7098 2,7372 P19 2,0212 1,9543 2,1210 2,1005 2,214 2,3693 2,6345 2,0792 P20 2,0441 2,0049 2,1575 2,2321 0,0511 0,0844 0,0663 0,1155 P22 2,1425 1,9839 2,2809 2,3005 0,1718 2,2601 2,4362 2,4220 P23 2,0500 2,0049 2,1682 2,9640 2,0620 0,3933 2,4220 2,5911 P24 1,9640 1,9543 2,1072 2,2412 0,1339 2,2231 2,6123 2,4984 R1 2,0382 2,0620 2,1809 2,3223 2,2900 2,3571 2,2984 2,3335 R3 1,9789 1,9890 2,1005 2,1730 2,2058 1,4772 2,2984 1,4281 R5 2,0382 2,0049 2,1281 2,2412 1,4756 1,6438 2,4984 2,1730 R6 2,0938 1,9943 2,1809 2,3571 0,8583 1,4109 2,5331 2,3948 R7 2,0500 2,0500 2,1499 2,1809 0,1084 1,5497 2,6123 2,7092 R8 2,0325 1,9310 2,1499 2,2412 2,3818 1,6556 2,6123 2,1730 R9 2,0560 2,0103 2,1140 2,1891 0,1213 0,0814 0,1211 0,0911 R10 2,0103 1,9689 2,1425 1,1809 0,0629 0,0736 2,2799 2,5911 R11 2,3113 2,3325 2,3693 2,5516 2,2799 2,4220 2,5911 2,7092 R12 2,3451 2,3005 2,4113 2,4984 2,0620 2,3571 2,6581 2,7372 R13 2,3335 2,3571 2,4818 2,4220 2,3818 2,3818 2,7994 2,7092 R17 2,1973 2,1499 2,2321 2,3223 2,2601 2,3818 2,4424 2,4220 R18 2,2601 2,1973 2,3973 2,3005 2,4662 2,3335 2,6581 2,3451 Keterangan : Ul : Ulangan

(4)

Tabel 10. Hasil Absorbansi Kemampuan Pertumbuhan Bakteri Asam Laktat pada NaCl

6,5% dan 18%

Kode

6,5% 18%

Ul 1 Ul 2 Ul 1 Ul 2 Ul 1 Ul 2 Ul 1 Ul 2 P1 1,7119 1,4646 2,3571 2,3948 0,1029 0,0929 0,1182 0,0930 P3 1,8341 2,0269 2,3451 2,3335 0,0956 0,0980 0,0967 0,0923 P5 2,1499 2,1891 2,2900 2,2699 0,0936 0,0940 0,0945 0,0976 P6 2,1140 1,8062 2,2231 2,2900 0,0909 0,1034 0,0973 0,1182 P7 1,9890 2,1730 2,3335 2,3005 0,0948 0,1024 0,0981 0,1166 P8 2,0441 2,0560 2,2799 2,2412 0,1057 0,0878 0,1138 0,0879 P9 2,0745 2,1575 2,2799 2,2699 0,0975 0,0977 0,1108 0,1216 P11 2,0325 2,0682 2,3005 2,2506 0,0923 0,0905 0,0949 0,1046 P12 1,8799 2,1351 2,3335 2,3948 0,1034 0,1139 0,1096 0,1198 P13 1,8234 1,8799 2,2571 2,3451 0,0970 0,1035 0,1107 0,1405 P14 1,6278 1,8378 2,3948 2,3571 0,1055 0,0900 0,1191 0,1033 P15 1,8489 1,7863 2,2571 2,3335 0,0974 0,0879 0,1141 0,1035 P17 1,7579 1,4615 2,3113 2,3005 0,1001 0,0963 0,1227 0,1184 P18 2,0620 1,9890 2,4082 2,3948 0,1144 0,1003 0,1219 0,1085 P19 1,4319 1,6211 2,3005 2,3223 0,0983 0,0963 0,1020 0,1132 P20 2,0049 1,9640 2,3571 2,3571 0,1123 0,1100 0,1256 0,1184 P22 1,6906 1,7119 2,3571 2,3571 0,1018 0,1047 0,1334 0,1328 P23 1,7039 1,8680 2,4220 2,3113 0,0865 0,0983 0,1033 0,1101 P24 2,1281 1,8451 2,2699 2,3335 0,1088 0,0796 0,1208 0,0952 R1 1,9133 2,0103 2,3571 2,3005 0,0988 0,1095 0,1213 0,1268 R3 2,0560 1,9310 2,3451 2,2699 0,0948 0,1052 01195 0,1184 R5 2,0382 2,1140 2,3335 2,3335 0,0907 0,0927 0,1014 0,1115 R6 1,8270 1,7830 2,3818 2,3335 0,1044 0,0768 0,1224 0,0938 R7 1,9640 1,9402 2,3005 2,3223 0,1027 0,1083 0,1206 0,1277 R8 1,8759 1,7703 2,3571 2,3005 0,1000 0,1041 0,1195 0,1246 R9 2,1351 2,1351 2,3571 2,3571 0,1094 0,0957 0,1140 0,1248 R10 2,0938 2,1652 2,2900 2,3113 0,0873 0,0909 0,1006 0,1127 R11 2,2321 2,1809 2,3900 2,3113 0,1715 0,1648 0,1934 0,1980 R12 2,0620 2,1891 2,2321 2,2809 0,1672 0,1696 0,1782 0,1849 R13 2,3005 2,3005 2,3571 2,3571 0,1040 0,1091 0,1160 0,1299 R17 2,2058 2,1652 2,3506 2,2900 0,1537 0,1450 0,1655 0,1650 R18 2,1652 2,1575 2,2506 2,2799 0,1229 0,1289 0,1408 0,1284 Keterangan : Ul : Ulangan

(5)

Lampiran 3. Tabel Hasil Uji SPSS.

Tabel 11. Tabel Duncan Nilai pH dari Fermentasi dalam Larutan Garam 2,5%

pH

Duncan

Hari N Subset for alpha = 0.05

1 2 Hari_Ke-7 6 3,6850 Hari_Ke-10 6 3,7300 Hari_Ke-14 6 3,7867 Hari_Ke-0 6 6,8500 Sig. ,153 1,000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 6,000.

Tabel 12. Tabel Duncan Nilai pH dari Fermentasi dalam Larutan Garam 5%

pH

Duncan

1 2 Hari_Ke-10 6 3,5833 Hari_Ke-7 6 3,6083 Hari_Ke-14 6 3,6150 Hari_Ke-0 6 6,3450 Sig. ,903 1,000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

(6)

Tabel 13. Tabel Duncan Total Asam dari Fermentasi dalam Larutan Garam 2,5%

Total_Asam

Duncan

1 2 3 Hari_Ke-0 6 ,0270 Hari_Ke-7 6 ,4470 Hari_Ke-14 6 ,6330 Hari_Ke-10 6 ,6510 Sig. 1,000 1,000 ,448

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 6,000.

Tabel 14. Tabel Duncan Total Asam dari Fermentasi dalam Larutan Garam 5%

Total_Asam

Duncan

1 2 3 Hari_Ke-0 6 ,0270 Hari_Ke-7 6 ,4686 Hari_Ke-10 6 ,6240 Hari_Ke-14 6 ,6450 Sig. 1,000 1,000 ,477

Tabel 15. Tabel Duncan Total HCN dari Fermentasi dalam Larutan Garam 2,5%

HCN

Duncan

1 2 3 Hari_Ke-14 6 110,3597 Hari_Ke-10 6 139,5906 Hari_Ke-7 6 169,9762 Hari_Ke-0 6 190,6635 Sig. 1,000 1,000 ,062

(7)

Tabel 16. Tabel Duncan Total HCN dari Fermentasi dalam Larutan Garam 5%

HCN

Duncan

1 2 3 Hari_Ke-14 6 99,3613 Hari_Ke-10 6 112,5449 112,5449 Hari_Ke-7 6 128,1305 Hari_Ke-0 6 182,5915 Sig. ,285 ,209 1,000

Lampiran 4. Media Pertumbuhan Bakteri Asam Laktat dalam Penelitian.

Media deMan Rogosa Sharp Agar (MRSA) “MERCK”

Pembuatan media MRSA dilakukan dengan melarutkan sebanyak 68,2 gram MRSA

dalam 1 liter

aquades

. Media MRSA +

aquades

diaduk menggunakan

stirrer

sambil

dipanaskan diatas

hot plate

hingga mendidih. Kemudian disterilisasi menggunakan

autoclave

selama 15 menit pada suhu 121

o

C. Komposisi media MRSA tiap 1 liter yaitu

14 gram agar-agar, 0,2 gram

magnesium sulfate

, 2 gram

ammonium-hydrogencitrate

, 10

gram pepton kasein, 0,04 gram

manganese sulfate

, 4 gram ekstrak

yeast

, 2 gram

di-Kalium hydrogen phosphate

, 1 gram

tween

80, 20 gram D (+)-

glucose

, 10 gram ekstrak

daging dan 5 gram

sodium acetate

.

Media deMan Rogosa Sharpe Broth (MRSB) “MERCK”

Pembuatan media MRSB dilakukan dengan melarutkan sebanyak 52,2 gram MRSB

dalam 1 liter

aquades

. Media MRSB +

aquades

diaduk menggunakan

stirrer

hingga

seluruh media larut. Komposisi media MRSB tiap 1 liter yaitu 5 gram

sodium acetate

, 2

gram

di-ammonium hydrogen citrate

, 10 gram kasein/daging pepton, 1 ml

tween

80, 2

gram

di-Potassium hydrogen phosphate

, 20 gram D (+)-glucose, 4 gram ekstrak

yeast

,

0,04 gram

manganese sulfate

, 0,2 gram

magnesium sulfate

dan 8 gram ekstrak daging.

(8)

Media Nutrient Agar (NA) “MERCK”

Pembuatan media NA dilakukan dengan melarutkan sebanyak 20 gram NA dalam 1

liter

aquades

, kemudian diaduk hingga seluruh media larut menggunakan

stirrer

sambil

dipanaskan diatas

hot plate

. Kemudian disterilisasi menggunakan

autoclave

selama 15

menit pada suhu 121

o

C. Setiap liter NA mengandung 5 gram pepton daging, 12 gram

agar dan 3 gram ekstrak daging.

Lampiran 5. Larutan Standar McFarland No. 3 dan 5 yang Digunakan pada Uji

Aktivitas Antimikroba.

Larutan Standar McFarland No. 3

Pembuatan larutan Standar

McFarland

No. 3 dilakukan dengan mencampurkan 0,3 ml

BaCl

2

1% dengan 9,7 ml H

2

SO

4

1%. Larutan standar

McFarland

No. 3 tersebut

menunjukkan konsentrasi bakteri 900 CFU (x10

6

/ml).

Larutan Standar McFarland No. 5

Pembuatan larutan Standar

McFarland

No. 5 dilakukan dengan mencampurkan 0,5 ml

BaCl

2

1% dengan 9,5 ml H

2

SO

4

1%. Larutan standar

McFarland

No. 5 tersebut

menunjukkan konsentrasi bakteri 1500 CFU (x10

6

/ml).

Lampiran 6. Berbagai Larutan yang Digunakan untuk Uji Kimia.

Larutan NaOH 0,1 N

Sebanyak 2 gram bubuk NaOH dicampurkan dalam 500 ml

aquades

, lalu diaduk hingga

seluruh bubuk NaOH larut.

(9)

Larutan Chloramine T 0,15%

Sebanyak 75 mg (0,075 gram) bubuk

Chloramine T

dicampurkan dalam 50 ml

aquades

,

lalu diaduk hingga seluruh bubuk

Chloramine T

larut.

Larutan CH3COONa.3H2O (Na-asetat) 0,2 M

Sebanyak 27,22 gram bubuk CH

3

COONa.3H

2

O dicampurkan dalam 1000 ml

aquades

,

lalu diaduk hingga seluruh bubuk CH

3

COONa.3H

2

O larut.

Larutan NaH2PO4 0,15 M

Sebanyak 2,67 gram bubuk NaH

2

PO

4

dicampurkan dalam 100 ml

aquades

, lalu diaduk

hingga seluruh bubuk NaH

2

PO

4

larut.

Larutan 1,3 asam dimetilbarbiturat 0,3 M

Sebanyak 70 mg (0,070 gram) bubuk 1,3 asam dimetilbarbiturat dicampurkan dalam 1,4

ml

acetate buffer

, lalu diaduk hingga seluruh bubuk 1,3 asam dimetilbarbiturat larut.

Larutan Acetate Buffer

Sebanyak 4,8 ml asam asetat ditambah dengan 42,5 ml Na-asetat (CH

3

COONa.3H

2

O),