Lampiran 3. Gambar tumbuhan binahong dan daun binahong segar
Gambar tumbuhan binahong
Lampiran 4. Gambar simplisia daun binahong dan serbuk simplisia daun
binahong
Gambar simplisia daun binahong
Lampiran 6. Gambar pemeriksaan mikroskopik daun binahong segar dan serbuk simplisia daun binahong
Gambar penampang melintang daun binahong segar Keterangan (perbesaran 10x40)
1. Kutikula 2. Epidermis atas 3. Jaringan palisade 4. Jaringan spons
5. Kristal kalsium oksalat bentuk druss 6. Epidemis bawah
7. Stomata
Lampiran 6. (Lanjutan)
Gambar penampang membujur daun binahong segar Keterangan (perbesaran 10x40)
1. Stomata tipe parasitik 2. Sel tetangga
3. Sel penutup
Lampiran 6. (Lanjutan)
Gambar mikroskopik serbuk simplisia daun binahong Keterangan (Perbesaran 10x40)
1. Stomata tipe parasitik
2. Berkas pengangkut penebalan spiral 3. Kristal kalsium oksalat tipe druse
Lampiran 7. Hasil karakterisasi simplisia daun binahong 1. Penetapan kadar air
No. Berat sampel (g) Volume awal (ml) Volume akhir (ml)
2. Penetapan kadar sari larut air
Lampiran 7. (Lanjutan)
3. % kadar sari larut air = ,
,
x
x 100% = 28,50%% rata-rata kadar sari larut air = , %+ , %+ , % x 100% = 26,16%
3. Penetapan kadar sari larut etanol
No. Berat sampel (g) Berat sari (g)
4. Penetapan kadar abu total
No. Berat sampel (g) Berat abu (g)
1. 2,0032 0,2524
2. 2,0035 0,2515
Lampiran 7. (Lanjutan)
5. Perhitungan Penetapan kadar abu tidak larut asam
Dimasukkan ke dalam bejana tertutup
Lampiran 8. Bagan alur pembuatan ekstrak etil asetat daun binahong (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis).
Ampas Maserat
Digabung
Dpekatkan diatas penangas air Ekstrak kental (berat 43,8 gram)
Serbuk simplisia (berat 1000 gram)
Ditambahkan pelarut etilasetat (75 bagian) Ditutup rapat
Didiamkan selama 5 hari terlindung dari cahaya sinar matahari, diaduk
Disaring
Maserat Ampas
Diremasesi dengan Pelarut etil asetat (25 bagian), sesekali diaduk
Lampiran 9. Gambar alat dan objek yang digunakan
Microlab 300
Lampiran 9. (Lanjutan)
Lampiran 10. Bagan alur pengujian efek penurunan kolesterol Penyiapan hewan uji hiperkolesterolemia
Pengujian Efek Penurunan Kolesterol Marmot
Marmot Hiperkolesterolemia
Diinduksi dengan campuran kuning telur (dosis 1% bb) dengan lemak kambing 15 g selama 14 hari secara oral
Diukur kadar kolesterolnya
Marmot
Dikondisikan selama 2 minggu Diukur kadar kolesterolnya Kadar kolesterol normal
Diberi perlakuan hiperkolesterol selama 14 hari Diukur kadar kolesterol
Kadar hiperkolesterolemia
Diberi perlakuan dengan pemberian suspensi CMC Na, simvastatin dan suspensi ekstrak etil asetat daun binahong selama 7 hari mulai dari hari ke-15
Diukur kadar kolesterol pada hari ke-17 dan hari ke-21
Lampiran 10. (Lanjutan) Pengambilan darah marmot
Marmot
Darah Marmot
Diambil lapisan atas Dicukur bulu kakinya Dibersihkan dengan alkohol
Dipotong dengan pemotong kuku sampai berdarah
Ditampung dalam mikrotube
Didiamkan pada suhu kamar selama 30 menit Disentrifuge selama 15 menit kecepatan 3000 rpm
Dipuasakan selama 10-18 jam
Lampiran 12. Contoh perhitungan dosis Konversi perhitungan dosis antar jenis hewan
Mencit
Contoh perhitungan dosis simvastatin 0,01% (Rangkuti, 2015) Dosis manusia (berat 70 kg) = 10 mg
Dosis marmot (berat 400 g) = 0,031 x 10 = 0,31 mg = 1000/400 x 0,31 mg = 0, 775 mg/kgbb = 0,8 mg/kgbb
Suspensi simvastatin sebanyak 0,8 mg/kgbb dibuat dalam sediaan 10 ml, dengan
penimbangan 50 mg maka dibuat dalam sediaan
, / = 625 ml.
Dosis untuk marmot (berat 400 g) = 400 g x 0,8 mg/1000 g = 0,32 mg
Jadi volume suspensi yang diberikan ,
, / = 4 ml
Lampiran 12. (Lanjutan)
a. Cara pembuatan suspensi ekstrak etil asetat daun binahong:
Timbang 100 mg, 200 mg, dan 400 mg ekstrak etil asetat daun binahong. Masing-masing dilarutkan dalam 10 ml suspensi CMC.
b. Berapa volume suspensi ekstrak etil asetat daun binahong yang akan diberikan pada marmot hiperkolesterol?
Misal: BB marmot = 400 g
Jumlah Ekstrak etil asetat daun binahong dosis 100 mg/kgbb
=
x mg = 40 mg
Volume larutan yang diberikan = x ml = 4 ml
Jumlah Ekstrak etil asetat daun binahong dosis 200 mg/kgbb
= x mg = 80 mg
Volume larutan yang diberikan = x ml = 4 ml
Jumlah Ekstrak etil asetat daun binahong dosis 400 mg/kgbb
= x 4 mg = 0 mg
Lampiran 13. Perhitungan nilai AUC kadar kolesterol serum darah marmot
Ekstrak Etil Asetat Daun Binahong 100
AUC Kelompok Normal
Lampiran 13. (Lanjutan)
AUCKelompok Simvastatin
1. AUC = + x (17-14)
+
+x
(21-17)= 204 + 180 = 384
Lampiran 13. (Lanjutan)
AUCKelompok Ekstrak Etil Asetat Daun Binahong 100 mg/kgbb
Lampiran 13. (Lanjutan)
= 861 + 234 + 246 = 480
AUCkelompok ekstrak etil asetat daun binahong 200 mg/kgbb
1. AUC = + x (17-14)
+
+x
(21-17) AUC Kelompok Ekstrak Etil Asetat Daun Binahong 400 mg/kgbb
1. AUC =
+
x (17-14)
+
+x
(21-17)Lampiran 13. (Lanjutan) = 390
2. AUC =
+
x (17-14)
+
+x
(21-17)= 192 + 170 = 362
3. AUC =
+
x (17-14)
+
+x
(21-17)= 222 + 206 = 428
4. AUC =
+
x (17-14)
+
+x
(21-17)Lampiran 14. Hasil statistika perhitungan rata-rata AUC kolesterol marmot ANOVA
Nilai AUC
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 474896.677 5 94979.335 13.316 .000
Within Groups 128392.313 18 7132.906
Total 603288.990 23
Simvastatin 4 375.00000 375.00000
EEADB 400 mg/kgbb 4 408.87500 408.87500
EEADB 100 mg/kgbb 4 468.50000
EEADB 200 mg/kgbb 4 542.37500 542.37500
CMC Na 4 718.62500
Sig. .249 .103 .078
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
Lampiran 15. Tabel hasil SPSS rata-rata penurunan kolesterol. Descriptives
N Mean SD SE
95% Confidence Interval for Mean
Hari
Lampiran 15. (Lanjutan)
Hari 0 Tukey HSDa
Kelompok Uji N
Subset for alpha = 0.05
Simvastatin 4 34.2500
Normal 4 34.7500
Sig. .691
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 4.000.
Hari ke-14 Tukey HSDa
Kelompok Uji N Subset for alpha = 0.05
1 2
Normal 4 34.5000
Simvastatin 4 75.0000
Ekstrak 100 mg/Kg BB 4 80.5000
Ekstrak 400 mg/kgbb 4 82.7500
Ekstrak 200 mg/kgbb 4 93.2500
CMC Na 4 101.2500
Sig. 1.000 .061
Lampiran 15. (Lanjutan)
Simvastatin 4 56.0000 56.0000
Ekstrak 400 mg/kgbb 4 60.0000 60.0000
Ekstrak 100 mg/Kg BB 4 68.5000
Ekstrak 200 mg/kgbb 4 78.7500 78.7500
CMC Na 4 104.5000
Sig. .077 .132 .068
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 4.000.
Hari ke-21 Tukey HSDa
Kelompok Uji N
Subset for alpha = 0.05
1 2 3
Simvastatin 4 33.2500
Normal 4 35.0000
Lampiran 16. Laporan hasil pengukuran kadar kolesterol serum marmot