OPTIMASI DAN ANALISIS KADAR CAMPURAN
AMOKSISILIN DAN KALIUM KLAVULANAT
DENGAN METODE SPEKTROFOTOMETRI DERIVATIF
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
HUSNAYANI SARAGIH
NIM 111501068
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
OPTIMASI DAN ANALISIS KADAR CAMPURAN
AMOKSISILIN DAN KALIUM KLAVULANAT
DENGAN METODE SPEKTROFOTOMETRI DERIVATIF
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
HUSNAYANI SARAGIH
NIM 111501068
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
PENGESAHAN SKRIPSI
OPTIMASI DAN ANALISIS KADAR CAMPURAN
AMOKSISILIN DAN KALIUM KLAVULANAT
DENGAN METODE SPEKTROFOTOMETRI DERIVATIF
OLEH:
HUSNAYANI SARAGIH
NIM 111501068
Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal: 1 Juni 2015
Disetujui oleh : Pembimbing I,
Prof. Dr. Muchlisyam, M.Si., Apt. NIP 195006221980021001
Pembimbing II,
Prof. Dr. Siti Morin Sinaga, M.Sc., Apt. NIP 195008281976032002
Panitia Penguji,
Prof. Dr. Ginda Haro, M.Sc., Apt. NIP 195108161980031002
Dra. Siti Nurbaya, M.Si., Apt. NIP 195008261974122001
Prof. Dr. Muchlisyam, M.Si., Apt. NIP 195006221980021001
Dra. Tuty Roida Pardede, M.Si., Apt. NIP 195401101980032001
Medan, Juni 2015 Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara Wakil Dekan I,
iv
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis haturkan kehadirat Allah SWT atas segala limpahan
rahmat dan karunia kepada penulis sehingga dapat menyelesaikan penelitian dan
penyusunan skripsi ini. Skripsi yang berjudul “Optimasi dan Analisis Campuran
Amoksisilin dan Kalium Klavulanat dengan Metode Spektrofotometri Derivatif”
disusun sebagai salah satu syarat mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas
Farmasi Universitas Sumatera Utara.
Pada kesempatan ini penulis hendak menyampaikan rasa hormat dan
terima kasih kepada Prof. Dr. Julia Reveny, M.Si., Apt., selaku Pembantu Dekan I
Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara yang telah memberikan fasilitas dan
masukan selama masa pendidikan dan penelitian, kepada Prof. Dr. Muchlisyam,
M.Si., Apt. dan Prof. Dr. Siti Morin Sinaga, M.Sc., Apt. selaku dosen
pembimbing yang telah banyak memberikan bimbingan dan arahan selama masa
penelitian dan penulisan skripsi ini berlangsung. Penulis juga menyampaikan rasa
terima kasih kepada Prof. Dr. Ginda Haro, M.Sc., Apt., Dra. Tuty Roida Pardede,
M.Si., Apt., dan Dra. Siti Nurbaya, M.Si., Apt. selaku dosen penguji yang telah
memberikan masukan dalam penyusunan skripsi ini serta kepada Prof. Dr. Ginda
Haro, M.Sc., selaku dosen penasehat akademik yang telah banyak memberikan
bimbingan selama masa pendidikan.
Penulis juga ingin menyampaikan rasa terima kasih serta penghargaan
yang tulus kepada kedua orang tua penulis yang tercinta, ayahanda Muhammad
teman-v
teman saya Nanda, Tari, Silvia, Arie, Eka, Tiwi, dan Fhatma atas doa dan
dukungan baik moril maupun materil dalam penyelesaian skripsi ini.
Penulis menyadari bahwa masih banyak kekurangan yang terdapat dalam
skripsi ini. Untuk itu, penulis mengharapkan kritik dan saran yang membangun
dari semua pihak guna perbaikan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga
skripsi ini dapat bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya dalam bidang
farmasi.
Medan, Juni 2015
Penulis,
Husnayani Saragih
vi
OPTIMASI DAN ANALISIS KADAR CAMPURAN AMOKSISILIN DAN KALIUM KLAVULANAT DENGAN METODE SPEKTROFOTOMETRI DERIVATIF
ABSTRAK
Saat ini banyak beredar sediaan obat dengan lebih dari satu komponen zat aktif. Salah satu kombinasi yang sering digunakan adalah amoksisilin dan kalium klavulanat yang tersedia dalam bentuk sediaan tablet dan beredar dengan berbagai merek dagang. Kombinasi amoksisilin dan kalium klavulanat merupakan
kombinasi antibakteri golongan β-laktam dan penghambat β-laktamase.
Tujuan penelitian ini adalah untuk mengoptimasi metode analisis kadar campuran amoksisilin dan kalium klavulanat dengan menggunakan spektrofotometri derivatif dengan metode zero crossing dalam pelarut metanol.
Panjang gelombang analisis untuk menetapkan kadar campuran amoksisilin dan kalium klavulanat pada spektrum serapan derivat kedua masing-masing pada panjang gelombang 279,20 nm dan 338,40 nm.
Penentuan linieritas kurva kalibrasi menghasilkan koefisien korelasi, r = 0,9993 dengan persamaan regresi Y = (59X + 7).10-6 untuk amoksisilin dan r = 0,9999 dengan persamaan regresi Y= (160X – 1).10-6 untuk kalium klavulanat. Batas deteksi (LOD) dan batas kuantitasi (LOQ) untuk amoksisilin berturut-turut adalah 0,8608 mcg/ml dan 2,8694 mcg/ml sedangkan untuk kalium klavulanat adalah 0,0864 mcg/ml dan 0,2881 mcg/ml.
Hasil penetapan kadar campuran amoksisilin dan kalium klavulanat yang dianalisis dalam tablet di pasaran menunjukkan bahwa semua memenuhi persyaratan sesuai dengan persyaratan yang tertera pada USP 30 dan NF 25 (2007) dan Farmakope Indonesia Edisi V (2014). Hasil uji validasi yang dilakukan terhadap tablet memenuhi persyaratan validasi metode, untuk amoksisilin diperoleh % recovery = 99,93% dengan Relative Standard Deviation
(RSD) = 1,11% dan untuk kalium klavulanat diperoleh % recovery = 99,46% dengan RSD = 0,22%. Dari hasil di atas dapat disimpulkan bahwa spektrofotometri derivatif metode zero crossing dapat digunakan untuk analisis campuran amoksisilin dan kalium klavulanat.
vii
OPTIMIZATION AND DETERMINATION OF
AMOXICILLIN AND CLAVULANATE POTASSIUM MIXTURE USING DERIVATIVE SPECTROPHOTOMETRY METHOD
ABSTRACT
Nowadays many dosage form of drug which contain more than one active ingredient. One of combinations which is often used is amoxicillin and clavulanate pottasium in tablet form. The mixture of amoxicillin and clavulanate
pottasium is a combination of the β-lactam antibiotic and β-lactamase inhibitor.
The purpose of this research is to optimize the method for determining amoxicillin and clavulanate pottasium mixture using derivative spectrophotometry with zero crossing method in methanol. Amoxicillin and clavulanate pottasium mixture were determined by measuring the second derivative ratio amplitudes, at 279.20 nm and at 338.40 nm respectively.
The determination of calibration curve linearity showed the correlation coefficient, r = 0.9993 with the regression Y = (59X + 7).10-6 for amoxicillin and r = 0.9999 with the regression Y = (160X – 1).10-6 for clavulanate pottasium. Limit of Detection (LOD) and Limit of Quantitation (LOQ) of amoxicillin 0.8608 mcg/ml and 2.8694 mcg/ml. LOD and LOQ of clavulanate pottasium 0.0864 mcg/ml and 0.2881 mcg/ml.
The result of determination of amoxicillin and clavulanate pottasium mixture the requirement of the thirtieth edition United States Pharmacopoeia and the twenty fifth edition National Formulary (2007) and the fifth edition of
Farmakope Indonesia (2014). The validation test of tablet showed amoxicillin has % recovery = 99.93%, Relative Standard Deviation (RSD) = 1.11% and
clavulanate pottasium has % recovery = 99.46% with RSD = 0.22%. From the result above concluded that derivative spectrophotometry with zero crossing method can be used for analyzing in determination amoxicillin and clavulanate pottasium.
viii DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ... i
LEMBAR PENGESAHAN ... iii
KATA PENGANTAR ... iv
ABSTRAK ... vi
ABSTRACT ... vii
DAFTAR ISI ... viii
DAFTAR TABEL ... xii
DAFTAR GAMBAR ... xii
DAFTAR LAMPIRAN ... xv
BAB I PENDAHULUAN ... 1
1.1 Latar Belakang ... 1
1.2 Perumusan Masalah ... 3
1.3 Hipotesis ... 3
1.4 Tujuan Penelitian ... 4
1.5 Manfaat Penelitian ... 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ... 5
2.1 Amoksisilin dan Kalium Klavulanat ... 5
2.1.1 Amoksisilin ... 5
2.1.2 Kalium Klavulanat ... 6
2.2 Spektrofotometri Ultraviolet-Visibel ... 7
ix
2.2.2 Pembagian Metode Analisis Spektrofotometri
Ultraviolet-Visibel ... 7
2.2.3 Proses Penyerapan Radiasi pada Spektrofotometer Ultraviolet-Visibel ... 7
2.2.4 Kegunaan Spektrofotometri Ultraviolet-Visibel ... 10
2.2.5 Komponen Spektrofotometer Ultraviolet-Visibel ... 11
2.3 Spektrofotometri Derivatif ... 12
2.3.1 Pengertian Spektrofotometri Derivatif ... 12
2.3.2 Metode Evaluasi Spektra pada Spektrofotometri Derivatif ... 14
2.3.3 Kegunaan Spektrofotometri Derivatif ... 15
2.4 Validasi Metode ... 16
2.4.1 Akurasi ... 17
2.4.2 Presisi ... 17
2.4.3 Spesifitas ... 18
2.4.4 Batas Deteksi dan Batas Kuantifikasi ... 18
2.4.5 Linieritas ... 18
2.4.6 Rentang ... 18
BAB III METODOLOGI PENELITIAN ... 19
3.1 Waktu dan Tempat Penelitian ... 19
3.2 Alat ... 19
3.3 Bahan ... 19
3.4 Pengambilan Sampel ... 19
3.5 Prosedur Penelitian ... 20
3.5.1 Pembuatan Larutan Induk Baku Amoksisilin ... 20
x
3.5.3 Pembuatan Spektrum Serapan Maksimum
Amoksisilin ... 21
3.5.4 Pembuatan Spektrum Serapan Maksimum Kalium Klavulanat ... 21
3.5.5 Pembuatan Larutan Standar Amoksisilin ... 21
3.5.6 Pembuatan Larutan Standar Kalium Klavulanat ... 21
3.5.7 Pembuatan Spektrum Serapan ... 22
3.5.8 Pembuatan Spektrum Serapan Derivat Pertama dan Kedua ... 22
3.5.9 Penentuan Zero Crossing ... 22
3.5.10 Penentuan Panjang Gelombang Analisis ... 22
3.5.11 Pembuatan dan Penentuan Linieritas Kurva Kalibrasi Amoksisilin ... 23
3.5.12 Pembuatan dan Penentuan Linieritas Kurva Kalibrasi Kalium Klavulanat ... 24
3.5.13 Penentuan Kadar Amoksisilin dan Kalium Klavulanat dalam Sediaan Tablet ... 24
3.5.14 Uji Validasi ... 25
3.5.14.1 Uji Akurasi ... 25
3.5.14.2 Uji Presisi ... 26
3.5.15 Analisis Data Penetapan Kadar secara Statistik ... 26
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 28
4.1 Penentuan Kurva Serapan Maksimum ... 28
4.2 Penentuan Kurva Serapan ... 29
4.3 Penentuan Kurva Serapan Derivat ... 30
xi
4.3.2 Penentuan Kurva Serapan Derivat Kedua ... 30
4.4 Penentuan Zero Crossing pada Serapan Derivat ... 30
4.4.1 Penentuan Zero Crossing pada Serapan Derivat Pertama ... 30
4.4.2 Penentuan Zero Crossing pada Serapan Derivat Kedua ... 32
4.5 Penentuan Panjang Gelombang Analisis ... 33
4.6 Pembuatan dan Penentuan Linieritas Kurva Kalibrasi ... 40
4.7 Penentuan Kadar Amoksisilin dan Kalium Klavulanat dalam Sediaan Tablet ... 41
4.8 Uji Validasi ... 42
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 45
5.1 Kesimpulan ... 45
5.2 Saran ... 45
DAFTAR PUSTAKA ... 46
xii
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 2.1 Perbandingan antara transisi n→π* dan transisiπ→π* ... 10
Tabel 4.2 Data hasil serapan amoksisilin, kalium klavulanat, dan campuran amoksisilin dan kalium klavulanat pada derivat kedua ... 40
Tabel 4.3 Data hasil perhitungan kadar obat setelah dilakukan uji statistik ... 41
xiii
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Rumus struktur amoksisilin ... 5
Gambar 2. Rumus struktur kalium klavulanat ... 6
Gambar 3. Spektrum serapan normal sampai derivat keempat ... 13
Gambar 4. Kurva aplikasi metode evaluasi spektrum derivatif ... 14
Gambar 5. Kurva sederhana aplikasi zero crossing ... 15
Gambar 6. Kurva serapan amoksisilin 18 mcg/ml ... 28
Gambar 7. Kurva serapan kalium klavulanat 100 mcg/ml ... 28
Gambar 8. Kurva tumpang tindih serapan maksimum amoksisilin dan kalium klavulanat ... 29
Gambar 9. Kurva tumpang tindih serapan amoksisilin ... 29
Gambar 10. Kurva tumpang tindih serapan kalium klavulanat ... 30
Gambar 11. Zero crossing amoksisilin pada serapan derivat pertama .. 31
Gambar 12. Zero crossing kalium klavulanat pada serapan derivat pertama ... 31
Gambar 13. Zero crossing amoksisilin pada serapan derivat kedua ... 32
Gambar 14. Zero crossing kalium klavulanat pada serapan derivat kedua ... 33
Gambar 15. Kurva tumpang tindih serapan amoksisilin dan kalium klavulanat ... 34
Gambar 16. Kurva tumpang tindih serapan amoksisilin, kalium klavulanat, dan campuran amoksisilin dan kalium klavulanat ... 35
xiv
Gambar 18. Kurva tumpang tindih serapan derivat pertama amoksisilin, kalium klavulanat, dan campuran
amoksisilin dan kalium klavulanat ... 36
Gambar 19. Kurva tumpang tindihserapan derivat kedua amoksisilin dan kalium klavulanat ... 36
Gambar 20. Kurva tumpang tindihserapan derivat kedua amoksisilin, kalium klavulanat, dan campuran amoksisilin dan kalium klavulanat ... 37
Gambar 21. Zero crossing amoksisilin ... 37
Gambar 22. Zero crossing kalium klavulanat ... 38
Gambar 23. Panjang gelombang analisis untuk amoksisilin ... 38
xv
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran1. Kurva Serapan Amoksisilin dan Kalium Klavulanat pada
Derivat Pertama ... 49
Lampiran 2. Kurva tumpang tindih Amoksisilin dan Kalium Klavulanat pada Derivat Kedua ... 50
Lampiran 3. Kurva Serapan Penentuan Panjang Gelombang Analisis .. 51
Lampiran 4. Kurva Kalibrasi Amoksisilin dan Kalium Klavulanat ... 53
Lampiran 5. Perhitungan Regresi Kalibrasi Amoksisilin ... 54
Lampiran 6. Perhitungan Batas Deteksi/Limit of Detection (LOD) dan Batas Kuantitasi/Limit of Quantitation (LOQ) Amoksisilin ... 55
Lampiran 7. Perhitungan Regresi Kalibrasi Kalium Klavulanat ... 56
Lampiran 8. Perhitungan Batas Deteksi/Limit of Detection (LOD) dan Batas Kuantitasi/Limit of Quantitation (LOQ) Kalium Klavulanat ... 57
Lampiran 9. Contoh Perhitungan Penetapan Kadar Amoksisilin dan Kalium Klavulanat ... 58
Lampiran 10. Kurva Serapan Penetapan Kadar Tablet Coamoxiclav® ... 60
Lampiran 11. Kurva Serapan Penetapan Kadar Tablet Claneksi® ... 63
Lampiran 12. Kurva Serapan Penetapan Kadar Tablet Augmentin® ... 66
Lampiran 13. Data Kadar Amoksisilin dalam Tablet ... 69
Lampiran 14. Data Kadar Kalium Klavulanat dalam Tablet ... 70
Lampiran 15. Perhitungan Statistik Amoksisilin pada Tablet Coamoxiclav® ... 71
Lampiran 16. Perhitungan Statistik Kalium Klavulanat pada Tablet Coamoxiclav® ... 73
xvi
Lampiran 18. Perhitungan Statistik Kalium Klavulanat pada Tablet
Claneksi® ... 77
Lampiran 19. Perhitungan Statistik Amoksisilin pada Tablet
Augmentin® ... 79
Lampiran 20. Perhitungan Statistik Kalium Klavulanat pada Tablet
Augmentin® ... 81
Lampiran 21. Contoh Perhitungan Persentase Perolehan Kembali
(%Recovery) ... 83
Lampiran 22. Kurva Serapan Claneksi® pada Uji Perolehan Kembali .... 88
Lampiran 23. Data Hasil Persen Perolehan Kembali Amoksisilin pada Tablet Dagang Claneksi® dengan Metode Penambahan
Baku (Standard Addition Methode) ... 93
Lampiran 24. Data Hasil Persen Perolehan Kembali Kalium Klavulanat pada Tablet Dagang Claneksi® dengan Metode
Penambahan Baku (Standard Addition Methode) ... 94
Lampiran 25. Perhitungan Rata-rata, Standar Deviasi, dan Relatif Standar Deviasi Perolehan Kembali Amoksisilin pada
Tablet Claneksi® ... 95
Lampiran 26. Perhitungan Rata-rata, Standar Deviasi, dan Relatif Standar Deviasi Perolehan Kembali Kalium Klavulanat
pada Tablet Claneksi® ... 96
Lampiran 27. Daftar Distribusi Nilai T ... 97
Lampiran 28. Sertifikat Bahan Baku Amoksisilin BPFI dan Kalium
Klavulanat (Phiexia Company) ... 98
Lampiran 29. Daftar Sertifikasi Sampel ... 100
