UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN PENENTUAN
KANDUNGAN FENOLIK TOTAL PADA
PAKKAT (Calamus caesius Blume.)
SKRIPSI
OLEH:
M. ADHLI TAWAKKAL S.B.
NIM 141524045
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN PENENTUAN
KANDUNGAN FENOLIK TOTAL PADA
PAKKAT (Calamus caesius Blume.)
SKRIPSI
Diajukan Sebagai Salah Satu Syarat Untuk Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
M. ADHLI TAWAKKAL S.B.
NIM 141524045
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
PENGESAHAN SKRIPSI
UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN PENENTUAN
KANDUNGAN FENOLIK TOTAL PADA
PAKKAT (Calamus caesius Blume.)
OLEH:M. ADHLI TAWAKKAL S.B. NIM 141524045
Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal: 07 Juni 2017
Pembimbing I, Panitia Penguji,
Prof. Dr. Siti Morin Sinaga, M.Sc., Apt. Prof. Dr. Rosidah, M.Si., Apt. NIP 195008281976032002 NIP 195103261978022001
Pembimbing II, Prof. Dr. Siti Morin Sinaga, M.Sc., Apt. NIP 195008281976032002
Drs. Fathur Rahman, M.Si., Apt. Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt. NIP 195201041980031002 NIP 195707231986012001
Drs. Fathur Rahman, M.Si., Apt. NIP 195201041980031002 Medan, Juli 2017
Fakultas Farmasi,
Universitas Sumatera Utara Dekan,
Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt. NIP. 195707231986012001
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kehadirat Allah SWT yang telah memberikan karunia yang berlimpah sehingga penulis dapat menyelesaikan penyusunan skripsi yang berjudul “Uji Aktivitas Antioksidan dan Penentuan Kandungan Fenolik Total pada Pakkat (Calamus caesius Blume.)”. Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.
Pada kesempatan ini, dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Ibu Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi yang telah menyediakan fasilitas kepada penulis selama perkuliahan di Fakultas Farmasi. Penulis juga mengucapkan terima kasih kepada Ibu Prof. Dr. Siti Morin Sinaga, M.Sc., Apt., dan Bapak Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt., yang telah meluangkan waktu dan tenaga dalam membimbing penulis dengan penuh kesabaran dan tanggung jawab, memberikan petunjuk dan saran-saran selama penelitian hingga selesainya skripsi ini. Ucapan terima kasih juga penulis sampaikan kepada Ibu Prof. Dr. Rosidah, M.Si., Apt., selaku ketua penguji, dan Ibu Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt., selaku anggota penguji yang telah memberikan saran untuk menyempurnakan skripsi ini, dan Ibu Khairunnisa, S.Si, M.Pharm, Ph.D, Apt., selaku dosen pembimbing akademik serta Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi USU yang telah banyak membimbing penulis selama masa perkuliahan hingga selesai. Penulis juga mempersembahkan rasa terima kasih yang tak terhingga untuk yang teristimewa ayahanda Syamsul Bachri dan ibunda Salmah Dan kepada saudara penulis, yaitu
Putri Asymah, Amk, Maega Wahyuni, B.Eng, dan M. Noor Ichsan, Amd yang telah memberi do’a restu, motivasi dan semangat agar penulis tidak pernah berhenti untuk memempuh cita - cita yang diharapkan.
Terimakasih juga penulis ucapkan kepada teman-teman Farmasi Ekstensi angkatan 2014 untuk kebersamaan dan dorongan semangatnya, serta semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu yang telah banyak membantu hingga selesainya penulisan skripsi ini.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa penulisan skripsi ini masih belum sempurna, oleh karena itu penulis mengharapkan saran dan kritik yang membangun demi kesempurnaan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya di bidang farmasi.
Medan, Juni 2017 Penulis,
M. Adhli Tawakkal .S.B NIM 141524045
SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT
Saya yang bertanda tangan dibawah ini :
Nama : M. Adhli Tawakkal .S.B NIM : 141524045
Program Studi : S-1 Ekstensi Farmasi
Judul Skripsi : Uji Aktivitas Antioksidan dan Penentuan Kandungan Fenolik Total pada Pakkat (Calamus caesius Blume.). Dengan ini menyatakan bahwa skripsi ini ditulis berdasarkan data dan hasil pekerjaan yang saya lakukan sendiri, dan belum pernah diajukan orang lain untuk memperoleh gelar kesarjanaan di perguruan tinggi lain, dan bukan plagiat karena kutipan yang ditulis setelah disebutkan sumbernya didalam daftar pustaka. Apabila dikemudian hari ada pengaduan dari pihak lain karena di dalam skripsi ini ditemukan plagiat karena kesalahan saya sendiri, maka saya bersedia menerima sanksi apapun oleh Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara, dan bukan menjadi tanggung jawab pembimbing. Demikian surat pernyataan ini saya perbuat dengan sebenarnya untuk dapat digunakan jika diperlukan sebagai mana mestinya.
Medan, Juni 2017 Yang Membuat Pernyataan
M. Adhli Tawakkal .S.B NIM 141524045
UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN KANDUNGAN FENOLIK TOTAL PADA PAKKAT (Calamus caesius Blume.)
ABSTRAK
Rotan muda atau yang biasa disebut dengan pakkat merupakan makanan khas berbuka puasa masyarakat Mandailing yang dipercaya dapat meningkatkan nafsu makan dan mempunyai khasiat sebagai obat kencing manis dan malaria. Kandungan kimia yang terdapat dalam pakkat antara lain vitamin C, flavonoid, alkaloid, saponin dan glikosida yang berpotensi sebagai antioksidan. Antioksidan adalah senyawa pemberi elektron yang mampu menginaktivasi berkembangnya reaksi oksidasi, dengan cara mencegah terbentuknya radikal bebas dan menghambat reaksi oksidasi. Tujuan penelitian ini adalah untuk menentukan kekuatan aktivitas antioksidan serta menentukan kandungan fenolik total pada pakkat segar, rebus dan bakar.
Metode yang dilakukan untuk uji aktivitas antioksidan adalah metode pemerangkapan radikal bebas 1,1-diphenyl-2-picryhydrazil (DPPH) dan kandungan fenolik total metode Folin-Ciocalteu dengan pembanding asam galat. Kemudian diukur menggunakan spektrofotometer visibel.
Hasil penelitian uji aktivitas antioksidan dengan metode pemerangkapan radikal bebas DPPH pada sampel pakkat yang segar, direbus dan dibakar menunjukkan kekuatan antioksidan dalam kategori yang sangat lemah dengan nilai IC50 masing-masing sebesar 2672,24 μg/ml; 3841,76 μg/ml; dan 1497,74 μg/ml dan vitamin C sebagai control positif menunjukkan kekuatan antioksidan dalam kategori sangat kuat dengan nilai IC50 4,81 μg/ml. Hasil kandungan fenolik total yang didapat dengan metode Folin-Ciocalteau pada pakkat yang segar, pakkat direbus dan pakkat dibakar masing-masing sebesar 2,9674 mg GAE/g; 1,7780 mg GAE/g; dan 5,9856 mg GAE/g.
Kata kunci: Aktivitas antioksidan, DPPH, fenolik total, Folin-Ciocalteau, pakkat
ANTIOXIDANT ACTIVITIES TEST AND THE TOTAL PHENOLIC CONTENT IN PAKKAT (Calamus caesius Blume.)
ABSTRACT
Young rattan or commonly referred to as pakkat is a typical meal of Mandailing peoples at the time of the fast breaking which is believed to increase appetite and has efficacy as a drug diabetes and malaria. Chemical contains contained in pakkat include vitamin C, flavonoids, alkaloids, saponins and glycosides which have potential function as an antioxidant. Antioxidants are compounds electron donor which are able to inactivate the development of the oxidation reaction, by preventing the formation of free radicals and it can inhibit the oxidation reaction. The purpose of this study was to determine the antioxidant activities as well as knowing the total phenolic content in pakkat fresh, boiled and grilled.
The method used to test the antioxidant acitivities of free radical trapping method is 1,1-diphenyl-2-picryhydrazil (DPPH) and total phenolic content of Folin-Ciocalteu method with the comparison of gallic acid. It was then measured using a visible spectrophotometer.
The results of this research test, the antioxidant activities with DPPH free radical trapping method on samples pakkat fresh, boiled and grilled showed those the antioxidant power in the category of very weak with IC50 values of each of 2672.24 μg/ml; 3841,76 μg/ml; and 1497.74 μg/ml and vitamin C as a positive control showed the antioxidant power in the category of very strong with IC50 value of 4.81 μg/ml and the results of total phenolic content by Folin-Ciocalteau method on fresh pakkat, boiled pakkat and grilled pakkat of 2.9674 mg GAE/g, 1.7780 mg GAE/g and 5.9856 mg GAE/g.
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL ... i
LEMBAR PENGESAHAN ... iii
KATA PENGANTAR ... iv
SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT ... vi
ABSTRAK ... vii
ABSTRACT ... viii
DAFTAR ISI ... ix
DAFTAR TABEL ... xiii
DAFTAR GAMBAR ... xiv
DAFTAR LAMPIRAN ... xv BAB I PENDAHULUAN ... 1 1.1 Latar Belakang ... 1 1.2 Perumusan Masalah ... 3 1.3 Hipotesis ... 3 1.4 Tujuan Penelitian ... 4 1.5 Manfaat Penelitian ... 4
1.6 Kerangka Pikir Penelitian ... 4
BAB II Tinjauan Pustaka ... 5
2.1 Pakkat (Calamus Caesius Blume.) ... 5
2.1.1 Deskripsi Rotan ... 6
2.1.2 Tempat Tumbuh dan Penyebaran Rotan ... ... 6
2.2 Antioksidan ... 7
2.3 Senyawa Fenolik ... 9
2.4 Spektrofotometri UV-Visibel ... 10
2.5 Metode Pengukuran Antioksidan ... 11
2.5.1 Pemerangkapan Radikal Bebas DPPH ... ... 11
2.5.2 Penentuan Kandungan Fenolik Total ... 13
BAB III METODE PENELITIAN ... 15
3.1 Alat dan Bahan ... 15
3.1.1 Alat ... 15
3.1.2 Bahan ... 15
3.2 Pembuatan Pereaksi ... ... 16
3.2.1 Larutan DPPH 0,5 mM ... 16
3.2.2 Larutan Natrium Karbonat 20% ... 16
3.3 Prosedur Penelitian ... 16 3.3.1 Pengambilan Sampel ... 16 3.3.2 Penyiapan Sampel ... 16 3.3.2.1 Pakkat Segar ... 16 3.3.2.2 Pakkat Rebus ... 17 3.3.2.3 Pakkat Bakar ... 17
3.4 Pengujian Aktivitas Antioksidan Menggunakan Metode Pemerangkapan Radikal Bebas DPPH ... 17
3.4.1 Pembuatan Larutan Blanko ... 17
3.4.2 Pengukuran Panjang Gelombang Serapan Maksimum DPPH ... 18
3.4.4 Pembuatan Larutan Induk ... 18
3.4.4.1 Pembuatan Larutan Induk Pakkat ... 18
3.4.4.2 Pembuatan Larutan Induk Vitamin C ... 18
3.4.5 Pembuatan Larutan Uji ... 18
3.4.5.1 Pembuatan Larutan Uji Pakkat ... 18
3.4.5.2 Pembuatan Larutan Uji Vitamin C ... 19
3.4.6 Analisis Persen Pemerangkapan Radikal Bebas ... 19
3.4.7 Analisis Nilai IC50 ... 19
3.5 Penentuan Kandungan Fenolik Total ... 20
3.5.1 Pembuatan Larutan Induk Baku Asam Galat ... 20
3.5.2 Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Asam Galat ... 20
3.5.3 Penentuan Waktu Kerja (Operating Time) ... 20
3.5.4 Pembuatan Kurva Kalibrasi Asam Galat ... 21
3.5.5 Pembuatan Larutan Uji Pakkat ... 21
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 22
4.1 Identifikasi Tumbuhan ... 22
4.2 Hasil Analisis Aktivitas Antioksidan Pakkat Metode Metode DPPH ... 22
4.2.1 Hasil Penentuan Panjang Gelombang Serapan Maksimum ... 22
4.2.2 Hasil Penentuan Waktu Pengukuran (operating time).. 23
4.2.3 Hasil Analisis Aktivitas Antioksidan Pakkat ... 23
4.2.4 Hasil Analisis Nilai IC50 ... 25
4.3.1 Hasil Penentuan Panjang Gelombang Maksimum
Asam Galat ... 27
4.3.2 Hasil Penentuan Waktu (operating time) .. ... 28
4.3.3 Hasil Penentuan Kurva Kalibrasi Asam Galat ... 28
4.3.4 Hasil Penentuan Kandungan Fenolik Total pada Pakkat ... 29
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 32
5.1 Kesimpulan ... 32
5.2 Saran ... ... 32
DAFTAR PUSTAKA ... 33
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
3.1 Persen Pemerangkapan DPPH oleh Pakkat Segar, Pakkat Rebus
dan Pakkat Bakkar ... 24 3.2 Persen Pemerangkapan DPPH oleh Vitamin C ... 24 3.3 Hasil Persamaaan Regresi Linier dan Hasil Analisa IC50 dari
Pakkat Segar, Pakkat Rebus Pakkat Bakar dan Vitamin C ... 25 3.4 Kategori Nilai IC50 Sebagai Antioksidan ... 26 3.5 Nilai Absorbansi Asam Galat ... 29 3.5 Hasil Kandungan Fenolik Total dari Pakkat Segar, Pakkat
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
3.1 Kurva Serapan Panjang Gelombang Maksimum Larutan DPPH 40 μg/ml Dalam Metanol Secara Spektrofotometri
Visibel ... 23 3.2 Kurva Serapan Panjang Gelombang Maksimum Larutan
Asam Galat 1000 μg/ml Secara spektrofotometri Visibel ... 27 3.3 Kurva Kalibrasi Larutan Standar Asam Galat ... 29
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1 Identifikasi Tumbuhan ... 36
2 Sampel yang digunakan ... 37
3 Tumbuhan Rotan (Calamus caesius Blume.) ... 38
4. Gambar Alat Spektrofotometer UV-Visibel (shimadzu) ... 39
5 Bagan Alir Persiapan pada Pakkat Segar ... 40
6 Bagan Alir Persiapan pada Pakkat Rebus ... 41
7 Bagan Alir Persiapan pada Pakkat Bakar ... 42
8 Bagan Alir Pembuatan Larutan Blanko DPPH 0,5 mM, Penentuan Panjang Gelombang Maksimum dan Waktu Kerja ... 43
9 Bagan Alir Uji Aktivitas Antioksidan pada Pakkat ... 44
10 Bagan Alir Uji Aktivitas Antioksidan pada Vitamin C ... 45
11 Bagan Alir Pembuatan Larutan Induk Asam Galat, Penentuan Panjang Gelombang Maksimum, Waktu Kerja dan Standar Kurva kalibrasi Asam Galat ... 46
12 Bagan Alir Penentuan Kandungan Fenolik Total Pada Pakkat ... 47
13 Hasil Pengukuran Waktu Kerja Larutan DPPH ... 48
14 Hasil Uji Aktivitas Antioksidan ... 50
15 Contoh Perhitungan Persen Pemerangkapan dan Perhitungan Nilai IC50 ... 51
16 Hasil Pengukuran Waktu Kerja Larutan Asam Galat dengan Pereaksi Folin-Ciocalteu dan Natrium Karbonat ... 59
17 Contoh Perhitungan Kandungan Total Fenol Pakkat segar, Pakkat Rebus dan Pakkat Bakar ... 62
