KARYA TULIS AKHIR
Pengaruh Ekstrak Alpukat (Persea americana) Terhadap Penurunan Kadar
Trigliserida (TG) Pada Tikus Putih Jantan (Rattus novergicus strain wistar) Diet Tinggi Lemak
Oleh:
RACHMA SUSTERIANA PUTRI
09020082
FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG
ii
HASIL PENELITIAN
Pengaruh Ekstrak Buah Alpukat (Persea americana) Terhadap Penurunan Kadar Trigliserida (TG) Pada Tikus Putih Jantan (Rattus novergicus strain
wistar) Diet Tinggi Lemak
KARYA TULIS AKHIR Diajukan kepada
Universitas Muhammadiyah Malang untuk Memenuhi Salah Satu Persyaratan
dalam Menyelesaikan Program Sarjana Fakultas Kedokteran
Oleh :
RACHMA SUSTERIANA PUTRI
09020082
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG FAKULTAS KEDOKTERAN
iii
LEMBAR PENGESAHAN KARYA TULIS AKHIR
Telah disetujui sebagai Karya Tulis Akhir Untuk memenuhi persyaratan Pendidikan Sarjana Fakultas Kedokteran
Universitas Muhammadiyah Malang
Tanggal 20 Mei 2013
Pembimbing I
Prof. Dr. dr. Djoni Djunaedi, Sp.PD., KPTI
Pembimbing II
dr. Bragastio Sidharta, Sp.M
Mengetahui,
Fakultas Kedokteran
Dekan,
iv
LEMBAR PENGUJIAN
Karya Tulis Akhir oleh Rachma Susteriana Putri ini
telah diuji dan dipertahankan di depan Tim Penguji
pada tanggal 20 Mei 2013
Tim Penguji
Prof. Dr. dr. Djoni Djunaedi, Sp.PD., KPTI ,Ketua
dr. Bragastio Sidharta, Sp.M ,Anggota
v
KATA PENGANTAR
Alhamdulillahhirabil’alamin, puji syukur kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan karunianya sehingga penulis dapat menyelesaikan karya tulis akhir ini dengan bantuan dari berbagai pihak. Shalawat dan salam senantiasa tercurahkan pada junjungan Rasulullah Muhammad SAW yang telah membimbing umat manusia dari zaman gelap menuju jalan yang terang benderang yakni agama Islam.
Karya Tulis Akhir dengan judul “Pengaruh Ekstrak Buah Alpukat (Persea americana) Terhadap Penurunan Kadar Trigliserida (TG) Pada Tikus Putih Jantan (Rattus novergicus strain wistar) Diet Tinggi Lemak” ini dilaksanakan untuk memenuhi salah satu persyaratan dalam menyelesaikan program sarjana Fakultas Kedokteran.
Dalam menyelesaikan karya tulis ini, penulis mengucapkan terimakasih kepada:
1. dr. Irma Suswati, M.Kes, selaku Dekan Fakultas Kedokteran
2. dr. Meddy Setiawan, Sp.PD selaku Pembantu Dekan I Fakultas Kedokteran
3. dr. Fathiyah Safitri, M.Kes, selaku Pembantu Dekan II Fakultas Kedokteran
4. dr. Iwan Sys Indrawanto, Sp.KJ, selaku Pembantu Dekan III Fakultas Kedokteran
5. Prof. Dr. dr. Djoni Djunaedi, Sp.PD., KPTI selaku Pembimbing 1 yang telah meluangkan waktu untuk membimbing, memberi saran, nasehat, dan semangat dalam menyelesaikan penelitian ini.
6. dr. Bragastio Sidharta, M.Sc, Sp.M, selaku Pembimbing 2 yang telah meluangkan waktu untuk memberikan bimbingan, memberi saran, nasihat, motivasi dan mengoreksi demi kesempurnaan penelitian ini. 7. dr. Melany Farahdilla, M.Kes, Sp.A, selaku Penguji Utama yang telah
sabar menguji dan memberikan saran yang sangat berharga demi kesempurnaan Tugas Akhir ini.
vi
8. Para dosen pengajar FK UMM yang telah memberikan bekal ilmu dan pengetahuan.
9. Seluruh Staf Tata Usaha FK UMM terima kasih atas bantuannya selama ini.
10. Seluruh staf laboratorium terpadu FK UMM yang telah memberi bantuan dan dukungan selama ini
11. Seluruh keluarga besar angkatan 2009, keluarga besar FK UMM dan semua pihak yang secara langsung maupun tidak langsung membantu dalam penulisan karya tulis akhir ini.
Penulis menyadari bahwa penelitian ini masih belum sempurna, untuk itu kritik dan saran kami harapkan demi kesempurnaan, serta kami mengharapkan agar karya tulis ini dapat berguna bagi kita semua, serta bermanfaat bagi bidang kedokteran
Malang, Juni 2013
vii
UCAPAN TERIMA KASIH
Pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih yang tak terhingga kepada:
1. Allah SWT, dengan rahmat dan hidayahMu karya tulis akhir ini dapat terselesaikan
2. Ibunda Siti Muchayanah dan Abah H. Parkan yang selalu mendoakan, memberi motivasi, semangat dan cinta yang teramat besar kepada penulis. 3. Keluargaku tercinta M. Aan Setiawan, Fitria Susirawati, Desy triwulandari,
Mbak diana, Mas ruly, Tante, Om, Noval, Jack, Pinky, Kazza, Aira, Dedek kecil Azka yang selalu memberikan semangat yang luar biasa.
4. Teman-temanq tersayang, “Geng Berbulu” (Mamiy Indah, Kakek Purna, Makci Hikmatul, Papiy Rijal, Om chandra, Choirina), Tean, Cornelly, Gladiar, Sismy, Hilman, Ayu PD, Nizaar, Mbak Yulia yang telah menjadi teman terbaikku, teman diskusi dan memberi banyak masukan serta dukungan dalam menyelesaikan penelitian ini.
5. Agit brata adhi, terima kasih telah menjadi teman, sahabat, kakak yang selalu memberi doa, support, motivasi, menemani dan memberi nasehat selama ini. 6. Seluruh Dosen Pengajar, Staf Tata Usaha, dan Karyawan Fakultas
Kedokteran Universitas Muhammadiyah Malang yang telah memberikan bekal ilmu dan pengetahuan serta segala fasilitas dalam penelitian ini.
7. Mas miftah, Pak joko, Pak kus, Mbak emi, Mbak dila, Mbak fat dan seluruh staf laboratorium terpadu FK UMM yang telah memberi bantuan dan dukungan selama ini
8. Pak Yono, Bu Rom, Mas didit, Bu endang dan Mas Faisal terima kasih atas bantuannya selama ini.
9. Seluruh teman FK UMM angkatan 2009/2010 yang tidak bisa saya sebutkan satu persatu, terimakasih atas dukungan dan semangat yang diberikan kepada penulis sehingga dapat menyelesaikan tugas akhir ini.
10. Keluargaku jalan raya candi II 158, kos ijo tikungan tercinta yang selama ini menjadi tempat berteduh dan tempat paling nyaman di kota malang.
viii
11. Semua pihak yang tidak bisa saya sebutkan semua, terima kasih atas bantuannya selama ini.
Penulis menyadari bahwa penelitian ini masih belum sempurna, kritik dan saran kami harapkan demi kesempurnaan serta kami mengharapkan agar karya tulis akhir ini dapat berguna bagi kita semua.
Malang, Juni 2013
ix ABSTRAK
Rachma, Susteriana Putri. 2013. Pengaruh Ekstrak Alpukat (Persea americana) Terhadap Penurunan Kadar Trigliserida (TG) Pada Tikus Putih Jantan (Rattus novergicus strain wistar) Diet Tinggi Lemak. Tugas akhir Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah Malang, Pembimbing : (1) Djoni Djunaedi* (2) dr. Bragastio Sidharta**
Latar belakang : Konsumsi alpukat yaitu salah satu makanan yang kaya monounsaturated fatty acid (MUFA) dapat menurunkan low density lipoprotein cholesterol (LDL-C) dan TG serta meningkatkan high density lipoprotein cholesterol (HDL-C). Alpukat merupakan buah yang kaya akan lemak namun 72,2% berupa omega 9-asam oleat, yaitu MUFA yang berfungsi menghambat absorbsi kolesterol dan trigliserida di usus sehingga dapat menurunkan kadar trigliserida dan kolesterol dalam darah.
Tujuan : Membuktikan pengaruh ekstrak alpukat dalam terapi penurunan kadar TG pada tikus putih jantan (Rattus norvegiccus strain wistar) diet tinggi lemak. Metode : True experimental, dengan the post test only control group design. Sampel tikus putih strain wistar dibagi 5 kelompok. Sampel 1 (kontrol negatif), Sampel 2 (kontrol positif) dan 3 kelompok yang lain diberi ekstrak buah alpukat dengan berbagai dosis 100mg/ekor/hari, 200mg/ekor/hari, 300mg/ekor/hari selama 14 hari. Analisis data menggunakan uji One way Anova, uji Tukey 5%, uji korelasi dan uji regresi.
Hasil : Uji ANOVA bernilai sig 0,027< p 0,05 berarti terdapat perbedaan yang signifikan rata-rata penurunan trigliserida tikus putih jantan pada masing-masing perlakuan. Uji tukey 5% menerangkan bahwa pemberian ekstrak alpukat dengan dosis yang berbeda-beda mampu menurunkan TG tikus putih. Pada uji korelasi pearson didapatkan nilai sig (2-tailed) = 0,006 < p (0,05), arah korelasi negatif dan kekuatan korelasi sebesar 0,588 berarti peningkatan dosis ekstrak alpukat cenderung menurunkan TG tikus putih. Uji regresi menunjukkan nilai R2 = 34,6%. Kesimpulan : Alpukat dapat menurunkan TG dan pada dosis 300mg/ekor/hari dapat menurunkan kolesterol TG akhir paling rendah.
Kata kunci : Ekstrak alpukat, MUFA, tikus putih jantan strain wistar, TG
* : Staff Pengajar Ilmu Penyakit Dalam FK UMM ** : Staff Pengajar Ilmu Penyakit Mata FK UMM
x ABSTRACT
Rachma, Susteriana Putri, 2013. The Effect Of Avocado (Persea americana) Extract On The Decrease Of Triacylglycerol (TG) On high fat diet Male White Rat (Rattus novergicus strain wistar).. Final Assignment Medical Faculty, Univesity of Muhammadiyah Malang, Advisors : (1) Djoni Djunaedi* (2) dr. Bragastio Sidharta**
Background : Consumption of avocados are rich food source of monounsaturated fatty acids (MUFA) decreases low density lipoprotein cholesterol (LDL-C) dan TG level and increase high density lipoprotein cholesterol (HDL-C) level. Avocado contain many of fat, but 72,2% is omega-9 oleic acid, MUFA that inhibits the absorption of cholesterol and TG in the intestine so it can lowering TG and cholesterol levels in the blood.
Purpose : To prove the effect of avocado extract to decrease TG in high fat diet male white rat (Rattus norvegiccus strain wistar).
Methode : True experimental, with the post test only control group design. The samples strain wistar white rats were devided into 5 groups. The sample 1 (negative control), sampel 2 (positive control) and the 3 other groups were treated by avocado extract with variouse doses 100mg/rat/day, 200mg/rat/day, 300mg/rat/day for 14 day. The data were analyzed by One way Anova, Tukey test 5%, correlation and regression test.
Result : ANOVA test showed sig 0,027 < p 0,05 means that there is a significant difference in mean TG reduction of white rats in each treatment. Tukey test 5% stated that giving avocado extract with varying doses capable of increasing white rats TG reduction average. Pearson correlation test found sig (2-tailed) = 0,006 < p (0,05), with negative correlation and the strength of correlation is 0,588, means that increase of doses tend to lower TG in white rats. Regression tes showed R2 = 34,6%.
Conclusion : Avocado decreased TG and the lowest TG level was found in rat treated by 300mg/rat/day dose of avocado.
Keyword : Avocado extract, MUFA, strain wistar male white rat, TG
* : Internist Lecturer of Medical Faculty, Muhammadiyah University of Malang
** : Ophtalmology Lecturer of Medical Faculty, Muhammadiyah University of Malang
xi DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL ... ii
LEMBAR PENGESAHAN ... iii
LEMBAR PENGUJIAN ... iv
KATA PENGANTAR ... v
UCAPAN TERIMA KASIH ... vii
ABSTRAK ... ix
ABSTRACT ... x
DAFTAR ISI ... xi
DAFTAR GAMBAR ... xiv
DAFTAR TABEL ... xv
DAFTAR SINGKATAN ... xvi
DAFTAR LAMPIRAN ... xvii
BAB 1 : PENDAHULUAN ... 1 1.1 Latar Belakang ... 1 1.2 Rumusan Masalah ... 3 1.3 Tujuan Penelitian ... 3 1.3.1 Tujuan Umum ... 3 1.3.2 Tujuan Khusus ... 3 1.4 Manfaat ... 3 1.4.1 Untuk Peneliti ... 3 1.4.2 Untuk Masyarakat... 3 1.4.3 Untuk Institusi ... 4
BAB 2 : TINJAUAN PUSTAKA ... 5
2.1 Buah alpukat... 5
2.1.1 Sejarah Singkat ... 5
2.1.2 Toksonomi ... 5
2.1.3 Morfologi Tumbuhan Alpukat ... 6
2.1.4 Kandungan Buah Alpukat ... 7
2.1.5 Efek Farmakologi Buah Alpukat ... 9
2.2 Lipid ... 11
2.2.1 Trigliserida ... 12
2.2.1.1 Pengertian Trigliserida ... 12
xii
2.2.1.3 Metabolisme Lipid dan Trigliserida ... 13
2.2.2 Kolesterol ... 16
2.2.2.1 Metabolisme Kolesterol ... 17
2.2.3 Fosfolipid ... 18
2.2.4 Jalur pengangkutan Lemak dalam Darah ... 19
2.2.4.1 Jalur Eksogen ... 19
2.2.4.2 Jalur Endogen ... 20
2.3 Hiperlipidemia... 20
2.3.1 Hipertrigliseridemia ... 21
BAB 3 : KERANGKA KONSEPTUAL DAN HIPOTESIS ... 23
3.1 Kerangka Konseptual Penelitian ... 23
3.2 Hipotesis ... 25
BAB 4 : METODOLOGI PENELITIAN ... 26
4.1 Rancangan Penelitian ... 26
4.2 Tempat dan Waktu Penelitian ... 26
4.3 Populasi dan Sampel ... 26
4.3.1 Populasi ... 26
4.3.2 Sampel ... 26
4.3.3 Teknik Sampling ... 26
4.3.4 Perkiraan Besar Sampel ... 26
4.3.5 Karakteristik Sampel Penelitian ... 28
4.4 Variabel dan Definisi Operasional ... 28
4.4.1 Variabel ... 28
4.4.1.1 Variabel Bebas ... 28
4.4.1.2 Variabel Tergantung ... 28
4.4.2 Definisi Operasional Variabel ... 29
4.5 Dasar Penentuan Dosis Alpukat ... 29
4.6 Alat dan Bahan Penelitian ... 30
4.6.1 Alat Pembuatan Ekstrak Buah Alpukat ... 30
4.6.2 Alat Pemeliharaan Tikus ... 30
4.6.3 Alat lain ... 31
4.6.4 Bahan ... 31
4.7 Alur Penelitian ... 32
4.8 Prosedur Penelitian... 33
4.8.1 Pembagian Kelompok Tikus ... 33
4.8.2 Adaptasi ... 33
4.8.3 Pemberian Diet Tinggi Lemak ... 33
4.8.4 Pemberian Ekstrak Buah Alpukat ... 34
4.8.5 Cara Pembuatan Ekstrak Buah Alpukat ... 34
4.8.5.1 Proses Pengeringan ... 34
4.8.5.2 Proses Ekstraksi ... 34
4.8.5.3 Proses Evaporasi ... 35
4.8.6 Proses Anastesi dan Pembedahan Hewan Coba ... 35
4.8.7 Pemeriksaan Lipoprotein Plasma ... 36
xiii
4.8.9 Analisis Data ... 38
BAB 5 : HASIL PENELITIAN DAN ANALISIS DATA ... 40
5.1 Hasil Penelitian ... 40
5.2 Analisis Data ... 42
5.2.1 Uji Oneway Anova ... 42
5.2.2 Uji Korelasi ... 43
5.2.3 Uji Regresi ... 43
BAB 6 : PEMBAHASAN ... 46
BAB 7 : KESIMPULAN DAN SARAN ... 51
DAFTAR PUSTAKA ... 53
xiv
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
Gambar 2.1 Buah Alpukat... 6
Gambar 2.2 Kandungan Gizi tiap 100 gram Buah Alpukat ... 9
Gambar 2.3 Struktur Trigliserida ... 13
Gambar 2.4 Reaksi Hidrolisis Trigliserida... 13
Gambar 2.5 Metabolisme Lemak ... 16
Gambar 2.6 Struktur Kimia Kolesterol ... 16
Gambar 2.7 Fosfolipid ... 19
Gambar 2.8 Klasifikasi Total Kolesterol dan LDL kolesterol ... 21
Gambar 2.9 Pola Lipoprotein Pada Berbagai Tipe Hiperlipidemia ... 21
Gambar 2.10Klasifikasi Serum Trigliserida ... 22
Gambar 5.1 Grafik Rata-Rata TrigliseridaTikusPutihJantan ... 41
xv
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
Tabel 5.1 Trigliserida Tikus Putih Jantan ... 41
xvi
DAFTAR SINGKATAN
BMI : Body Mass Index
FFA : Free Fatty Acid
HDL : High Density Lipoprotein
HDL-C : High Density Lipoprotein Choleserol
HMG Ko-A : Hidroxy Metilglutaril Coenzym A
HSD : Honesty Significant Differences
IDL : Intermediate Density Lipoprotein
LDL : Low Density Lipoprotein
LDL-C : Low Density Lipoprotein Cholesterol
LRP :LDL Receptor-Related Protein
MUFA : Monounsaturated Fatty Acid
PJK : Penyakit Jantung Koroner
PUFA : Polyunsaturated Fatty Acid
TG : Triacylglycerol
xvii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1. Hasil Analisis TG Tikus putih Jantan ... 56
2. Surat Keterangan Penelitian Laboratorium Biomedik FK UMM ... 61
3. Kartu Konsultasi Tugas Akhir ... 62
xviii
DAFTAR PUSTAKA
Adrian F, 2011, Khasiat Buah dan Sayur, Depok: Penebar Swadaya.
Angelina G, 2007, Tanaman Obat Indonesia, diunduh tanggal 31 Mei 2012 , tersedia dari :
http://toiusd.multiply.com/photos/album/31?&show_interstitial=1&u=%2 Fphotos%2Falbum
ATP III (Adult Treatment Panel III). the third report of the NCEP Expert Pannel Executive Summary (2001). Detection Evaluation and Treatment of The High Blood Cholesterol in Adult, NCEP, NHL and Blood Institute, NH, NIH Publication No. 01-3679, Mei 2001.
Botham KM, Mayes PA, 2009, Lipid yang Penting Secara Fisiologis, in: Murray,RK, DK. Granner, PA. Mayes, dan VW. Rodwell. Tras. Andry Hartono, Biokimia Harper, edisi 27: 128-138, EGC, Jakarta.
Brown CT, 2006, Penyakit Aterosklerotik Koroner, In : Sylvia Anderson Price, Lorraine McCarty Wilson, Patofisiologi : konsep klinis proses-proses penyakit, Ed.6, EGC, Jakarta, pp. 576-612.
Curtiss L, 2009, Reversing Atherosclerosis, the New England Journal.
Dalimartha S, 2011, Khasiat Buah Dan Sayur, Depok: Penebar Swadaya; hal: 3-5.
Etherton PMK, Pearson TA, Wan Y, Hargrove, RL, Moriarty K, Fishell V, High-monounsaturated fatty acid diets lower both plasma cholesterol and triacylglycerol concentrations. Am J Clin Nutr 1999; 70: 1009-1015. Fauzi, 2011, Fraksi Etil Asetat Ekstrak Metanol Rimpang Temu Giring terhadap
Kadar Kolesterol Darah, Yogyakarta: Bina Pustaka.
Ganong WF, 1995, Proffesor of Physiology, (terj): Dharma.A., Fisiologi Kedokteran (Review of Medical Phisiology), EGC, Penerbit Buku Kedokteran.
Gotto AM Jr, (2003), Treating hypercholesterolemia, looking forward, Clinical Cardiology, 26:121-128.
Guyton, Hall, 2008, Fisiologi Kedokteran, edisi 11, Jakarta: EGC, hal. 889-890.
Halliwell, 1994, Struktur Kimiawi Asam Lemak, In: Haryanti, 2011, Potency Omega-9 Oleic Acid In The Avocado Fruit Mesocarp Cholesterol Lowering Blood Serum IKIP PGRI Semarang.
Hembing, 2006. Mengendalikan Kolesterol Tinggi Dengan Herba Dan Pola Hidup Sehat [online], diunduh tanggal 11 Desember 2012, tersedia dari :
xix
http://portal.cbn.net.id/cbprtl/cybermed/detail.aspx?x=Hembing&y=cyber med|0|0|8|86
Malole, M. B. M dan C. S. U Pramono, 1989, Penggunaan Hewan-Hewan Percobaan di Laboratorium, Departemen Pendidikan dan Kebudayaan Direktorat Jendral Pendidikan Tinggi, Pusat Antar Universitas
Bioteknologi, Institut Pertanian Bogor, Bogor.
Mayes, PA, 2009, Tinjauan Umum Metabolisme dan Penyediaan Bahan Bakar Metabolik, in: Murray,RK, DK. Granner, PA. Mayes, dan VW. Rodwell. Tras. Andry Hartono, Biokimia Harper, ed. 27: 139-151, EGC, Jakarta: EGC
Murray RK, Graner DK, Rodwell VW. 2009. Biokimia Harper edisi 27. Jakarta: EGC.
Nawwar, 1996, Struktur Kimiawi Asam Lemak, In: Haryanti, 2011, Potency Omega-9 Oleic Acid In The Avocado Fruit Mesocarp Cholesterol Lowering Blood Serum IKIP PGRI Semarang.
Ontoseno T , 2006, Pencegahan Primordial Penyakit Jantung Koroner [online] , diunduh tanggal 10 Desember 2012, tersedia dari :
http://old.pediatrik.com/buletin/06224113606-2g3xih.pdf
Pieterse Z, Jerling J, Oosthuizen W, 2003, Avocados (monounsaturated fatty acids), Weight Loss and Serum Lipid, South African Avocado Growers Association Yearbook,Vol 3 No.4,26:65-71.
Povey R, 2002, How to Keep Your Cholesterol in check (terj): Wulandari, Widayanti D, Memantau Kadar Kolesterol Anda, Jakarta : Penerbit Arcan.
Prihatman K, 2000, Alpukat/Avocado (Persea americana Mill / Persea gratissima Gaerth), diunduh tanggal 21 September 2012, tersedia dari : http://digilib.brawijaya.ac.id.
Rukmana R, 1997, Budi Daya Alpokat. Kanisius, Yogyakarta.
Sargowo D, 2002, Peranan Kadar Trigliserida dan Lipoprotein Sebagai Faktor Resiko Penyakit Jantung Koroner (Studi Pendahuluan), Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya, diunduh tanggal 13 Januari 2013, tersedia dari : http://www.tempo.co.id/medika/arsip/072002/art-1.htm.
Sediatama AD, 2000, Ilmu gizi untuk mahasiswa dan profesi, Jilid I, Jakarta: Dian Rakyat.
Supranto J, 2007. Statistik Teori dan Aplikasi, Edisi 6. Jakarta: Penerbit Erlangga.
xx
Suyatna F, 2007, Hipolipidemik, Farmakologi Dan Terapi, Edisi 5, Departemen Farmakologi Dan Terapeutik Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Balai penerbit FKUI, Jakarta; hal. 373-388.
[WHO], 2004, Deaths From Coronary Heart Disease [online], diunduh tanggal 18 Februari 2012, tersedia dari http://www.who.int/.
Zulfikar, 2010, Steroid [online], diunduh tanggal 1 Januari 2013, tersedia dari :
http://www.chem-is-try.org/materi_kimia/kimia-kesehatan/biomolekul/steroid/.
Zulfikar, 2010, Trigliserida [online], diunduh tanggal 1 Januari 2013, tersedia dari