ISOLASI DAN OPTIMASI ENZIM AMILASE DARI ISOLAT BAKTERI AMILOLITIK TANAH TEMPAT PEMBUANGAN AKHIR (TPA)
SAMPAH TERJUN MEDAN
ABSTRAK
Isolasi dan optimasi enzim amylase telah dilakukan dari isolate bakteri amilolitik yang berasal dari tanah Tempat Pembuangan Akhir (TPA) Sampah Terjun Medan. Isolasi bakteri dilakukan menggunakan sampel tanah yang diambil dari tiga titik pada kedalaman ± 15 cm. Isolat-isolat yang ditemukan lalu ditumbuhkan pada media selektif amylase dan dilakukan uji kualitatif dengan meneteskan larutan iodine kedalam media. Isolat positif amilolitik ditandai dengan terbentuknya zona bening disekitar koloni bakteri pada media seleksi. Zona bening yang terbentuk diukur dengan penggaris lalu dipilih tiga isolat untuk dilakukan optimasi produksi enzim amilase. Kondisi optimum yang ditentukan antara lain pH inkubasi, suhu inkubasi, dan waktu inkubasi. Variasi pH inkubasi yang digunakan adalah 6,0 ; 6,5 ; 7,0 ; 7,5 ; dan 8,0. Suhu inkubasi divariasikan dari
25℃, 30℃, 35℃, 40℃, dan 45℃. Inkubasi selama 60 jam dengan pengamatan dilakukan setiap 12 jam. Aktivitas amilase ditentukan dengan metode Bernfeld pada panjang gelombang 540 nm. Hasil isolasi diperoleh 12 isolat berpotensi menghasilkan amilase dan setelah uji kualitatif dipilih tiga isolate yaitu FM 133, FM 134, dan FM 3022. Hasil optimasi produksi enzim untuk isolate FM 133 adalah pH inkubasi 6 pada pada suhu 40℃ selama 12 jam. Isolat FM 134 memiliki nilai optimum pada suhu 40℃ dengan pH 8 selama 60 jam. Sedangkan untuk isolat 3022 memiliki kondisi optimum setelah inkubasi selama 36 jam pada pH 6 dan suhu 40℃.
Kata kunci : amilase, amilase mikrobial, metode DNS, tanah TPA
AMYLASE ENZYME ISOLATION AND OPTIMIZATION FROM AMYLOLITIC BACTERIA ISOLATED FROM THE SOIL
OF TERJUN DUMPSTER IN MEDAN
ABSCTRACT
Isolation and optimization of amylase enzyme is done from amylolitic bacteria isolated from the soil of Terjun dumpster in Medan. Soil sample to isolate the bacteria is taken from three points of the area around 15 cm deep. Isolates found then grew in amylase selective media and qualitatively tested by adding iodine solution into the media. Amylolitic potential isolates is determined by the formation of clear zone around the colony. Clear zone formed on the media is measured by ruler and three isolates are selected to prepare for optimization. Optimum condition observed are incubation pH, temperature, and incubation period. Incubation pH is varied from 6,0 ; 6,5 ; 7,0 ; 7,5 ; to 8,0. The variation of incubation temperature starts from 25℃, 30℃, 35℃, 40℃, until 45℃. Incubation done for 60 hours and activity is checked after every 12 hours. Amylase activity determined by Bernfeld method using spectrophotometer in 540 nm wavelength. From this research, it obtains 12 amylase potential isolates and FM 133, FM 134, and FM 3022 the isolates selected according to the qualitative test. The result shows various optimum condition for each isolates. FM 133 has optimum condition under 6,0 incubation pH and 40℃ incubation temperature for 12 hours. Whereas the optimum activity for isolate FM 134 occurs under 8,0 incubation pH during 60 hours incubation period in 40℃. The last, isolate FM 3022 has the highest activity after 36 hours of 40℃ incubation and under 6,0 incubation pH.
Keywords : amylase, microbial amylase, DNS method, dumpster soil
