Laporan Resmi Praktikum Mikrobiologi Angka Kapang Khamir

(1)

LAPORAN RESMI LAPORAN RESMI

PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI FARMASI PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI FARMASI

PRAKTIKUM XI PRAKTIKUM XI

UJI ANGKA KAPANG/KHAMIR UJI ANGKA KAPANG/KHAMIR

Penyusun : Penyusun : 1

1.. AAnnnniissa a NNiillamamssaari ri UUttaammii 1144//336622887700//FFAA//110000226 6 ((…………)) 2.

2. uu!a!ammmma" a" FaFais!is!al al aa!"!"ii 14/314/3626287873/3/FFAA/1/100002# 2# (…(……)…) 3.

3. A$A$unun$ $ %%iirarantnt& & 'e'etytyaau"u"ii 1414/3/3626287876/6/FFAA/1/1000032 32 (…(……)…) 4

4.. iinnaanntytya a **aalliia a PPararaammiittaa 1144//3366228877##//FFAA//11000033+ + ((…………)) ,elas

,elas : : AA

--&&ll&&nn$$aan / n / ,,eell&&mm&& : :   / / 22 

aarrii  **aann$$$$aal l PPrraattiiuumm : : aauu  113 3 eei i 220011++ 

&&sseen n 55aa$$aa : : rr. . rreerr..nnaatt. . &&ssi i aayyu u uurrttii  ..''ii..  AAtt.. A

Assiisstteen n 55aa$$aa : : iitta a ""aan n aa A

Assiisstteen n ,,&&rreessii ::

LABORATORIUM MIKROBIOLOGI FARMASI LABORATORIUM MIKROBIOLOGI FARMASI

BAGIAN BIOLOGI FARMASI BAGIAN BIOLOGI FARMASI

FAKULT

FAKULTAS AS FARMASIFARMASI

UNIVERSITAS GADJAH MADA UNIVERSITAS GADJAH MADA

YOGYAKARTA YOGYAKARTA 2015 2015 PRAKTIKUM XI PRAKTIKUM XI

(2)

UJI ANGKA KAPANG/KHAMIR

I. Tuju!

enetaan a"anya emaran aan$/!amir "alam se"iaan maanan minuman &smetia "an &at tra"isi&nal.

II. D"# T$%#&

5amur atau 9un$i iala! &r$anisme !eter&tr&9 yan$ ti"a memilii l&r&9il "an memerluan senyaa &r$ani se$ai nutrisinya. Fun$i memunyai si9at "im&r9isme yaitu memilii "ua entu ertumu!an yan$ er$antun$ a"a &n"isi lin$un$an. ,e"ua entu ertumu!an terseut a"ala! aan$ (molds) "an !amir ( yeast ) (5aet; ". 1##+)

,aan$ meruaan 9un$i yan$ mementu !i9a. An$$&ta<an$$&tanya tersear "alam 9ilum Glomeromycota Ascomycota "an Basidiomycota. ,aan$ erer&"usi "an menyear men$$unaan s&ra. '&ra aan$ ter"iri atas "ua =enis yaitu s&ra sesual "an s&ra asesual. '&ra asesual umumnya memilii uuran yan$ eil ("iameternya 1<10>m) "an rin$an se!in$$a umumnya tersear seara asi9 men$$unaan aliran u"ara. Aaila ter!iru "alam =umla! tertentu s&ra aan$ "aat menimulan $an$$uan ese!atan a"a manusia (iett ". 2007).

,!amir meruaan 9un$i ersel satu yan$ mir&s&i "an ti"a memilii 9la$ella. eeraa mementu 9ilament (seu"&miselium). ara !i"unya sea$ai sar&9it "an arasite. i"u "i "alam tana! atau "eu "i u"ara "aun<"aun netar un$a ermuaan u!a<ua!an "i tuu! seran$$a "an airan yan$ men$an"un$ $ula. An$$&ta<an$$&tanya tersear "alam 9ilum Zygomycota Ascomycota "an Basidiomycota. ,!amir umumnya ereman$ ia seara sesual mauun asesual. ara asesual yaitu "en$an "i9usi (en$$aun$an) "ua sel "en$an tie erainan yan$ ere"a. ?i$&t !asil "i9usi ini aan mementu 4 !in$$a 8 s&ra yan$ emu"ian menyear (Pratii 2008).

ai aan$ mauun !amir memilii eeatan rer&"usi yan$ uu tin$$i@ A"anya emaran "alam se"iaan maanan minuman &smetia mauun &at<&atan !arus "i!in"ari se"ini mun$in. 'ala! satu ara untu men$i"enti9iasi eera"aan emaran aan$ "an !amir "alam se"iaan a"ala! "en$an melauan u=i an$a aan$/!amir. eartemen ,ese!atan (searan$ ,ementerian ,ese!atan) euli n"&nesia tela! menetaan atas an$a aan$/!amir tertentu yan$ masi! "ian$$a aman untu "i&nsumsi yaitu  10 4

&l&ni er ml (An&nim 1##2).

Pen$u=ian an$a aan$/!amir "aat "ilauan "en$an sala! satu "ari e"ua met&"e eriut:

1. *eni aan tuan$ ( Pour plate)

et&"e ini "ilauan "en$an menuan$an susensi samel yan$ aan "ierisa e "alam aan etri emu"ian me"ia air "imasuan lalu "i$&yan$<$&yan$an a$ar

(3)

merata etia me"ia mema"at. ,euntun$an met&"e ini antar a lain: lei! !&m&$en ti"a memuu!an ea!lian tertentu "an "aat "i$unaan untu "etesi mir&a a"a &nsentrasi ren"a!. ,eru$iannya met&"e ini !anya sesuai untu mir&a yan$ ta!an ter!a"a anas.

2. *eni searan (Spread plate)

et&"e ini "ilauan "en$an ara menuan$an me"ia terlei! "a!ulu@ setela! mema"at susensi samel yan$ aan "ierisa "imasuan lalu "irataan "en$an spreader glass. et&"e ini !anya memutu!an se"iit samel "an && untu se$ala =enis mir&a namun erlu ea!lian !usus "alam erataan samel a$ar me"ia ti"a rusa.

III. A'( )! B*! A. A'(

1. ,&ta asetis

2. *aun$ reasi (8 ua!) 3. aan etri (10 ua!) 4. -elas uur 10 mB (1 ua!) 5. ir&iet "an blue tip 6. Vorte

B. B*!

1. 'amel u=i erua isi "ari asul estra ulit an$$is ( Garci!ia ma!gosta!a) 2. Pelarut A'A (Air 'ulin$ A$ar) 00+C

3. e"ia PA ( Potato "etrose Agar ) men$an"un$ l&ram9eni&l 100 mB/B IV. +# K$#j

itiman$ 1 $ram samel yan$ aan "ierisa "iamur "en$an 10 mB larutan en$ener (A'A 00+C)

i<#orte amuran samel "an larutan en$ener !in$$a !&m&$en ilauan en$eneran seri !in$$a 10<4_{ "ireliasi seanya satu ali}

iairan me"ia PA "ituan$an e seluru! aan etri masin$<masin$ seanya 10 mB "iiaran mema"at

iiet 0+ mB "ari masin$<masin$ en$eneran "ituan$an a"a er muaan me"ia a"at PA "irataan

iuat &ntr&l me"ia (ti"a "itama!an aaun a"a me"ia a"at PA) "an &ntr&l elarut ("ituan$ 0+ mB elarut A'A a"a ermuaan me"ia a"at PA "irataan)

iinuasi seluru! aan etri a"a su!u 20<2+°C

iamati a"a !ari eti$a samai elima "i!itun$ =umla! &l&ni yan$ tumu! V. H"&' P$!,-(!

(4)

Gambar 1._{Sampel u$i de!ga! pe!ge!cera! 1%}&1

setela' dii!(ubasi selama 5  24 $am. )umla' (olo!i pada seri pe!ge!cera! pertama *(iri+ adala' 34 da! pada seri pe!ge!cera! (edua *(a!a!+ adala' 1%

setela' dii!(ubasi selama 5  24 $am. )umla' (olo!i pada seri pe!ge!cera! pertama adala' 32 da! pada seri pe!ge!cera! (edua adala' 25

setela' dii!(ubasi selama 5  24 $am. )umla' (olo!i pada seri pe!ge!cera! pertama adala' ,% da! pada seri pe!ge!cera! (edua adala' 1%

(5)

Gambar 4._{Sampel u$i de!ga! pe!ge!cera! 1%}&4_{setela' dii!(ubasi selama 5  24 $am. )umla' (olo!i} pada seri pe!ge!cera! pertama adala' 32 da! pada seri pe!ge!cera! (edua adala' 16

Gambar 5._{-o!trol media *(a!a!+ da! (o!trol pelarut *(iri+ setela' dii!(ubasi selama 5  24 $am.} )umla' (olo!i pada (o!trol media adala' 65 da! pada (o!trol pelarut adala' 13

ata =umla! &l&ni "an an$a aan$/!amir (A,,) "ari e"ua seri en$eneran "iurutan "ari yan$ tertin$$i !in$$a teren"a! terantum "alam tael "i aa! ini.

'eri en$eneran ,&nsentrasi 5umla! &l&ni A,, (FU/mB)

 10<3 ₈₀ _800.000  10<1 ₃₄ _340.000  10<2 ₃₂ _320.000  10<4 ₃₂ _320.000  10<2 ₂₊ _2+0.000  10<4 ₁₆ _160.000  10<1 ₁₀ _100.000  10<1 ₁₀ _100.000

A,, yan$ tertera "alam tael "i!itun$ "en$an rumus eriut:

AKK =

Jumlahkoloni× 1

Faktor pengenceran gramsampel

(6)

er"asaran "ata yan$ ter"aat "alam tael terseut samel u=i yan$ "ierisa memilii A,, lei! esar/eil "aria"a yan$ "itetaan &le! eartemen/,ementerian ,ese!atan euli n"&nesia yaitu 104_FU/mB

melei!i/ti"a aman$ atas &nsumsi.

VI. P$-*"!

Pratium ini ertu=uan untu menetaan a"anya emaran aan$/!amir "alam se"iaan maanan minuman &smetia "an &at tra"isi&nal se!in$$a "aat "ieta!ui aaa! r&"u<r&"u terseut aman atau ti"a untu "i&nsumsi. Parameter yan$ "i$unaan untu

menentuan eamanan terseut a"ala! An$a ,aan$/,!amir (A,,) yaitu =umla! &l&ni aan$/!amir "ialian 9at&r en$eneran er &&t samel "alam $ram. enurut eartemen ,ese!atan euli n"&nesia suatu se"iaan "ian$$a aman untu "i&nsumsi =ia A,,<nya uran$ "ari 104_{FU/mB (An&nim 1##2).}

'amel yan$ "iu=i "alam ratium ali ini a"ala! asul estra ,ulit an$$is. et&"e yan$ "i$unaan untu menentuan A,,<nya a"ala! spread plate yaitu teni menanam "en$an menyearan susensi mir&a "i atas ermuaan suatu me"ia untu memer&le! ultur murni (Be&99e E Piere 2010). Per&aan "ilauan seara asetis seluru! alat yan$ "iaai !arus "isterilan terlei! "a!ulu.

Ban$a! ertama a"ala! meniman$ 1 $ram samel yan$ aan "iu=i yaitu isi "ari asul estra ,ulit an$$is emu"ian "imasuan e "alam taun$ reasi erisi 10 mB larutan en$ener A'A (Air 'ulin$ A$ar 00+C) "an "i<#orte a$ar e"ua a!an terseut teramur

seara !&m&$en. amuran "alam taun$ reasi ertama ini memilii &nsentrasi 10<1_.

Ban$a! selan=utnya a"ala! en$eneran seri yan$ ertu=uan untu memu"a!an en$amatan men$&ntr&l serta meminimalisasi esala!an "alam er&aan ini. iamil 1 mB amuran "alam taun$ reasi ertama lalu "iin"a!an e "alam taun$ e"ua se!in$$a &nsentrasinya men=a"i 10<2_{@ selan=utnya "iamil 1 mB amuran "alam taun$}

reasi e"ua lalu "iin"a!an e "alam taun$ eti$a se!in$$a &nsentrasinya men=a"i 10< 3_{@ tera!ir "iamil 1 mB amuran "alam taun$ reasi eti$a lalu "iin"a!an e "alam}

taun$ eemat se!in$$a &nsentrasinya men=a"i 10<4_{. Pr&se"ur ini "ireliasi seanya}

satu ali.

eriutnya "ianasan me"ia PA ( Potato "etrose Agar ) yan$ nantinya aan "i$unaan untu menumu!an aan$/!amir serta untu enumerasi aan$/!amir terseut "alam samel yan$ aan "ierisa. PA men$an"un$ 20C estra entan$ "an 2C "estr&sa (arley E Pres&tt 2001)@ meruaan sumer ar&!i"rat yan$ uu untu ertumu!an aan$/!amir. alam er&aan ini me"ia PA "itama!an ,l&ram9eni&l

(7)

yan$ aan tumu! a"a me"ia. 'etela! menair "ituan$an me"ia PA e "alam seluru! aan etri masin$<masin$ seanya 10 mB lalu "iiaran !in$$a me"ia mema"at.

'etela! me"ia mema"at "iamil 0+ mB samel "ari masin$<masin$ taun$ reasi "ituan$an "i ermuaan me"ia emu"ian "irataan "en$an spreader glass yan$ "isterilan "en$an memaarnya "i atas unsen seelum "an sesu"a! samel "irataan. 'ea$ai eman"in$ "iuat &ntr&l me"ia yan$ !anya erisi me"ia PA tana enama!an aaun serta &ntr&l elarut "en$an menama!an 0+ mB elarut A'A "i ermuaan me"ia. *u=uan emuatan &ntr&l ini a"ala! untu men$eta!ui aaa! &l&ni 9un$i yan$ tumu! !anya erasal "ari samel ataua! =u$a ter"aat "alam me"ia "an elarutnya.

Ban$a! tera!ir "iinuasi seluru! aan etri a"a su!u 20<2+°_{ untu "iamati a"a}

!ari eti$a samai elima setela! er&aan "ilauan. Alasan "iili! su!u 20<2+°_{ arena}

aan$ "an !amir tumu! "an ereman$ ia lei! &timal "alam su!u terseut. 'ementara alasan men$aa inuasi "ilauan selama 3<+ !ari a"ala! ertumu!an 9un$i yan$ memutu!an atu relati9 lei! lama "ian"in$an "en$an ertumu!an mesiun "alam rentan$ atu terseut a"a emun$inan aan$ "an !amir tumu! seara tuman$ tin"i! se!in$$a menyulitan er!itun$an &l&ninya.

Pratian melauan en$amatan a"a !ari e<+ inuasi "an !asilnya ter"aat satu samel yan$ =umla! &l&ninya lei! "ari 40 yaitu samel "ari seri en$eneran ertama "en$an &nsentrasi 10<3_{ yan$ A,,nya ernilai 800.000 FU/mB melei!i aturan =umla!}

A,, yan$ "iersyaratan &le! eartemen ,ese!atan . 'amel lainnya "ari seri en$eneran ertama =umla! &l&ninya men"eati 40@ se"an$an "ari seri en$eneran e"ua =umla! &l&ninya lei! ren"a! erisar antara 10<2+. er"asaran "at a terseut "aat "iataan samel yan$ "iu=i ti"a aman untu "i&nsumsi.

Namun !asil en$u=ian terseut "aat "ien$aru!i &le! &n"isi me"ia "an elarut yan$ ternyata ti"a steril teruti "ari ertumu!an &l&ni yan$ uu anya "alam me"ianya sen"iri seanya 6+0.000 FU/mB "an a"a elarut seanya 130.000 FU/mB.

VII. K$"&-u'!

1. Per&aan ini "ilauan untu men$eta!ui aaa! samel yan$ "iu=i teremar aan$/!amir lei! "ari aman$ atas &nsumsi yan$ tela! "itetaan &le! eartemen/,ementerian ,ese!atan euli n"&nesia yaitu 104_FU/mB.

2. An$a ,aan$/,!amir (A,,) "inyataan sea$ai =umla! &l&ni aan$/!amir "ialian 9at&r en$eneran er &&t samel "alam $ram.

. et&"e enentuan A,, yan$ "ialiasian "alam ratium ini a"ala! met&"e spread plate (teni searan)

. ,asul estra ulit an$$is yan$ "iu=i memilii nilai A,, seesar 8 D 10+_{ melei!i}

(8)

VIII. D(# Pu"(3

An&nim 1##2 Prosedur perasio!al Ba(u Pe!gu$ia! /i(robiologi Pusat Pemerisaan at "an aanan iret&rat 5en"eral Pen$aasan at "an aanan eartemen ,ese!atan euli n"&nesia 5aarta.

arley 5.P. E Pres&tt B.. 2001 0aboratory ercise i! /icrobiology +t!_e".

-ra<ill Ne &r.

iett .'. ". 2007 A !i$!er<leGel !yl&$eneti lassi9iati&n &9 t!e Fun$i /ycol es 111(+):+0#<47.

5aet; H. elni 5.B. A"eler$ H.A. r&&s -.F. utel 5.'. E rnst&n B.N. 1##+ /i(robiologi -edo(tera! e"isi e"uaulu! "iter=ema!an &le! Nu$r&!& E .F. aulany H- 5aarta.

Be&99e .5. E Piere .H. 2010 /icrobiology 0aboratory 'eory  Applicatio! 3r"

e". &rt&n Pulis!in$ &l&ra"&.

Pratii '.*. 2008 Bu(u A$ar /i(robiologi 7armasi Hrlan$$a 5aarta.

&$yaarta 1# ei 201+ Pratian

1. Annisa Nilamsari Utami (10026) (………) 2. u!amma" Fais!al a!"i (1002#) (………) 3. A$un$ %irant& 'etyau"i (10032) (………) 4. inantya *alia Paramita (1003+) (………)