P R O D U K S I B IO M A S S A , L IP ID
D A N P R O T E IN S E L T U N G G A L
M IK R O A L G A N a n n o c h lo ro p s is
s p S E B A G A I S U P L E M E N
M A K A N A N
by
D e w i A n g g r e n i
F IL E L A P O R A N _ A K H I R _ H B _ A N G G R E N I. P D F ( 6 6 4 . 0 7 K )
L A P O R A N T A H U N A N
P E N E L I T I A N H IB A H B E R S A IN G
P R O D U K S I B IO M A S S A , L I P I D D A N P R O T E I N S E L
T U N G G A L M I K R O A L G A
N annochloropsh
sp S E B A G A I
S U P L E M E N M A K A N A N
T A H U N K E -1 » A R I R E N C A N A 2 I A H U N
T I M P E N G U S U L
A . A . M . D e w i A n g g r e n i , S .T P . , M .S i . N I O N : 0 0 1 7 1 1 7 4 0 1 P u tu A r i S a n d h i W . , S .T P ., M .S i. N I D N : 0 0 1 6 0 4 7 4 0 2
B
D ib i a y a i o le h
D i r e k t o r a t P e n e l i t i a n d a n P e n g a b d i a n k e p a d a M a s y a r a k a t D ir e k t o r a t J e n d e r a l P e n d i d i k a n T i n g g i K e m e n t e r ia n P e n d i d i k a n d a n K e b u d a y a a n
S e s u a i D e n g a n S u r a t P e r j a n j i a n P e n u g a s a n P e la k s a n a a n P e n e lit ia n N o m o r : 3 1 1 - 2 6 / U N 1 4 . 2 / P N L . 0 1 .0 3 .0 0 / 2 0 1 5
U N IV E R S IT A S U D A Y A N A
H A L A M A N P E N G E S A H A N P E N E L I T I A N H 1 B A H B E R S A I N G Ju d o ] K * 0 a u n
Kodr/Kama Rumpun Ilmu Krfua Peneliti
A N a m a l. e n g k a p B N I D N C J a b a ta n F u n g s io n a l D P r u g r a m S iu d l F N o t n o r H P F S u r r l ( r - n u l l )
A n g g o t a P en eliti (1)
A . N a m a l. e n g k a p B N I D N C . P e r g u r u a n T i n g g i
L am * P e w U tiar K e selu r u h a n P e n e li tia n T a h u n k e B la y a P e n e li tia n K e se lu ru h a n B l a y i T a h u n B e rja la n
f ! { 9 ! X K ? L B I O M A S S A - 1 l p , [ ) , , A N p r o t e i n s e l t u n g g a l
M I K R O A L C A N a n a o c t ilo r o p s l-s s p S E B A G A I S U P L E M E N M A K A N A N 1 6 5 / T e k n o l o g l P a n g a n d a n G1/1
A A M A D E D E W I A N C G R E N I S T P M S i
0 0 1 7 1 1 7 4 0 1
L c k io t
T e k n o lo g ) In d u M r l P e r ta n ia n 0 6 1 2 3 9 7 1 3 5 6
d e w i a n g g r e r u 6 ^ y a h a o r o m
P U T U A R I S A N D H t W I P R A D N Y A D E W I S T P . M P 0 0 1 6 0 4 7 4 0 2
U n iv e r s it a s U d a v a n a
2 T a h u n
I
R p 1 0 0 .0 0 0 0 0 0 . 0 0 < f tu M ilk a n k e D I K T I d a n a in te r n a l P T d a t u in s t itu s i la in t n k in d s e b u t k a n
R p 5 0 0 0 0 0 0 0 . 0 0 R p 0 .0 0 R p 0 .0 0
D e n p a s a r. 2 2 - 1 0 2 0 1 5 . K e tu a P e n e liti.
( A A M A D E D E W I A N C G R E N I S T P , M S I) N I P / N I K 1 9 7 4 1 1 1 7 1 9 9 9 0 3 2 0 0 1
' f i / : lr I \ w iutn U f a - \m a r ^ . M . L n f l ) ‘N l P f l f l K 1 9 6 4 0 8 0 7 1 9 9 2 0 3 1 0 0 2
A B S T R A K
B e b e ra p a je n is m ik ro a lg a te la h b e rh a s il di iso la si di P e ra ira n P a n ta i P u la u B ali. D ari se le k s i b e b e ra p a je n is m ik ro a lg a , d ip e ro le h iso la t N an n o ch lo ro p sis sp i s a la t K 4 y a n g m e m p u n y a i k e c e p a ta n tu m b u h d a n s ta b ilita s te rtin g g i dari y a n g Iain n y a. B e rk a ita n d e n g a n
k o n d is i ini, m a k a d a la m p e n e litia n a k a n d ik aji p o te n s i m ik ro a lg a N ann och loro psis s p is o la t K 4. d a la m m e n g h a s ilk a n p ro d u k b e ru p a b io m a s s a , lip id d a n p ro te in . P r o d u k -p ro d u k ini d ih a r a p k a n d a p a t d ia p lik a s ik a n s e b a g a i n u trisi p an g a n , a ta u p u n o b a t- o b a ta n m a u p u n s u p le m e n . T u ju a n k h u s u s p e n e litia n in i a d a la h m e n e n tu k a n w a k tu p a n e n y a n g te p a t p a d a
p ro s e s p ro d u k s i b io m a ss a p a d a b erb a g a i m ed ia, m e n e n tu k a n j e n i s m e d ia y a n g te p a t p ad a p ro s e s k u ltiv a si u n tu k m e m p ro d u k s i b io m a ssa , m e n e n tu k a n titik o p tim u m k o n s e n tra s i n itra t
d a n p o s fa t d a la m p r o d u k s i lip id d a n p ro te in , m e n e n tu k a n titik o p tim u m k o n d is i pH d a n s a lin ita s p a d a p r o s e s p ro d u k s i lip id d a n m e n e n tu k a n p ro fil p e n y u s u n k o m p o n e n lip id a
P e n e litia n in i d ia w a li d e n g a n p e n e n tu a n p e rtu m b u h a n m i k r o a l g aN an n o ch lo ro psis sp
p a d a 5 je n is m e d ia s e h in g g a d a p a t d ip e ro le h w a k tu p a n e n y an g te p a t b e rd a s a rk a n b o b o t b io m a s s a k e rin g m ik ro a lg a . S e la n ju tn y a p e n e n tu a n je n is m e d ia k u ltiv a s i y an g te p a t d e n g a n R a n c a n g a n A c a k L e n g k a p m e n g g u n a k a n 5 j e n i s m ed ia . P e rla k u a n y a n g m e n g h a s ilk a n b io m a s s a d a n k a d a r le m a k te rtin g g i d ip e rg u n a k a n u n tu k p e n e litia n s e la n ju tn y a . S e te la h itu,
d ila k u k a n p r o d u k s i b io m a s s a d a n lip id u n tu k ta h a p p e rta m a . P e rc o b a a n p ro d u k s i b io m a s s a
d a n lip id d ira n c a n g d e n g a n m o d e l o p tim a s i C entra l C om posiie D esig n. P e rla k u a n y a n g d ic o b a k a n d a la m ra n c a n g a n ini a d a la h k o n s e n tr a s i n itra t d a n p o sfa t, s e r ta fa k to r lin g k u n g a n
y a n g te rd iri d a ri p H d a n sa lin ita s . D a ta y a n g d ih a s ilk a n d ia n a lis is d e n g a n m e n g g u n a k a n m e to d e response su rfa c e. P ro s e s s e la n ju tn y a a d a la h p ro s e s e k s tra k s i lip id . L ip id y a n g d ip e ro le h k e m u d ia n d ia n a lis a p ro fil a s a m -a s a m le m a k n y a .
I la s il p e n e litia n m e n u n ju k k a n b a h w a w a k tu p a n e n N a n n o ch lo ro psis sp. b e rb e d a -
b ed a p a d a b e rb a g a i m e d ia . W a k tu p a n e n N a n n o ch lo ro psis sp. y an g d ik u ltiv a s i p a d a m e d ia w a ln e , m e d ia p e rta n ia n , d a n m e d ia g u illa rd b e itu r u t- tu r u t a d a la h liari ke 1 0. S. d an II in k u b a si. P ad a m e d ia A lle n M iq u e l d a n m e d ia B lu e G re e n 11, w a k tu p a n e n
N arm ochloropsis sp. a d a la h h a ri ke 12 in k u b a si. K o n s e n tra s i b io m a s s a te rtin g g i (0,21 g /l) d ip e ro le h d a ri m ik ro a lg a N a n n o ch lo ro p sis sp. y an g d ik u ltiv a s i p a d a m e d ia W a ln e , n a m u n tid a k b e rb e d a ja u h d a ri m e d ia g u illa rd . K a d a r le m a k te rtin g g i d ih a s ilk a n o le h
N am toch loropsis sp. y a n g d ik u ltiv a s i p a d a m e d ia g u illa rd s e b e s a r 1 0 .0 0 % b k d a n b e rb e d a tid a k n y a ta d e n g a n m e d ia b lue g re e n - I I . M e d ia g u illa rd s e la n ju tn y a d ip ilih s e b a g a i m e d ia u n tu k k u ltiv a s i p a d a p e n e litia n s e la n ju tn y a . K o n s e n tra s i b io m a s s a
N arm ochloropsis s p b e ra d a p a d a k o n d is i o p tim u m p a d a k o n s e n tra s i n itra t 1 81 ,5 5 g /l d a n k o n s e n tra s i fo s fa t 2 1 ,2 4 g/l d a la m m e d ia g u illa rd d e n g a n k o n s e n tra s i b io m a s s a s e b e s a r 0 ,7 g /l K a d a r le m a k te rtin g g i s e b e s a r 2 5 ,7 0 % b k d ih a s ilk a n d a ri p e rla k u a n k o n s e n tra s i n itra t 3 0 g /l d a n fo s fa t 15 g /l p a d a m e d ia g u illa rd . K o n s e n tra s i b io m a s s a
N ann och loropsis sp. b e ra d a p ad a k o n d is i o p tim u m p a d a s a lin ita s 3 2 , G2 d a n pH 8 ,4 4 d e n g a n k o n s e n tra s i b io m a s s a s e b e s a r 0 ,1 9 g/l. K a d a r le m a k N a n n o ch lo ro p sis sp. b e ra d a p ad a k o n d is i o p tim u m p a d a s a lin ita s 2 9 ,7 6 d a n p H & , ^ ^2iig an k o n s e n tra s i le m a k 3 3 ,3 8 % b k , A s a m le m a k N a n noch lo ro psis sp. te rd iri a ta s a sa m k a p rila t. a s a m k a p ra t, a sa m I a u r a t a s a m m iris ta t, a s a m p a lm ita t, a s a m s t e a r a t asa m p a lm ito le in a t, a s a m o le a t, a sa m lin o le a t d a n asa m lin o le n a t A s a m le m a k j e n u h N an n o ch lo ro p sis sp. te rtin g g i a d a la h a s a m p a lm ita t s e ju m la h 5 4 2 ,4 4 m g asam lem ak /lO O g dan asam lem ak tidak jen u h tertinggi
adalah a sa m lin o le a t s e ju m la h 3 3 2 ,3 4 m g a s a m le m a k lOOg
K a ta K u n c i : b io m a s s a , lip id , m ik ro a lg a , N an n ochlo ropsis sp iso la t K 4 ..
K A T A P E N G A N T A R
P u ji s y u k u r d a n te rim a k asih s e d a la m -d a la m n y a k a m i lia tu rk a n k e h a d a p a n T u h a n
Y a n g M a h a E sa , k a re n a b e rk a t ra h m a t d a n k a ru n ia n y a la p o ra n p e n e litia n v an g b e rju d u l
m
“ P ro d u k s i B io m a s s a , L ip id D a n P ro te in S e l T u n g g a l M ik ro a lg a N an tto ch lo ro p sis S p S e b a g a i
S u p le m e n M a k a n a n " d a p a t d is e le s n ik a iid e n g a n h aik Q |
P a d a k e s e m p a ta n in i k a m i m e n y a m p a ik a n u c a p a n te rim a k as ili k e p a d a D ire k to ra t
J e n d ra l P e n d id ik a n T in g g i (D IK T I) y a n g te la h m e m b ia y a i p e n e litia n ini m e la lu i p r o g r a m
D e s e n tra lis a s i H ib a h B e rs a in g 2 0 1 5 .
A ta s s e g a la k e k u ra n g a n liasil p e n e litia n ini, k a m i d e n g a n s e tu lu s liati m e m o h o n m a a f
d a n k litik d a n s a ra n y a n g b e rs ifa t m e m b a n g u n sa n g a t k a m i lia ra p k a n s e h in g g a la p o ra n
p e n e litia n ini d iw u ju d k a n sesu a i d e n g a n h a ra p a n .
B u k it J im b a r a r t 2 8 O k to b e r 2 0 1 5
P e n e liti
m
D A F T A R I S I
H a la m a n
H A L A M A N S A M P U L i
H A L A M A N P E N G E S A H A N ii
A B S T R A K i i i
K A T A P E N G A N T A R iv
D A F T A R 1S I V
B A l i L P E N D A H U L U A N
1. 1. L a ta r B e la k a n g
B
B A B IL T I N J A U A N P U S T A K A
1
2 .1 M ik ro a lg a N a n n o c h h ro p sis s p 3
2 .2 . M a n fa a t d a n N u tris i N a n n o c h h ro p sis sp 3
2 .3 . l'a k to r - f a k to r y a n g M e m p e n g a ru h i P e rtu m b u h a n M ik ro a lg a 4
2 .4 . R o a d M a p P e n e litia n
m
B A B III. T U J U A N D A N M A N F A A T P E N E L I T I A N
5
3 .1 . T u ju a n P e n e litia n 7
3 .2 . M a n fa a t P e n e litia n 7
B A B IV . M E T O D E P E N E L I T I A N
4.1 ^ ^ m a t i k a d an F is h b o n e U s u la n P e n e litia n 8
4 .2 T e m p a t d a n W a k tu P e n e litia n 9
4 .3 . B a h a n d a n A la t P e n e litia n 9
4 .4 , T a h u n I/T a h a p I : P ro d u k s i L ip id 10
4 . 4 .1. P e re m a ja a n k u ltu r m u m i 10
4 .4 .2 . P e n e n tu a n W a k tu P a n e n 10
4 .4 ,3 P e n e n tu a n Je n is M e d ia 10
4 . 4 4 , P ro d u k s i L ip id 12
4 .4 .5 . E k s tra k s i L ip id d a n P rofil A s a m L e m a k 13
4 .5 . L u aran . I n d ik a to r c a p a ia n P e n e litia n T a h u n I 14
4 .6 . P ro s e d u r A n a lis a 14
4 .7 , T a h u n II/T a h a p II : P ro d u k s i P ro te in 16
4 .7 .1 . P ro d u k s i p ro te in 16
4 .7 .2 . E k s tra k s i d a n p e n e n tu a n p ro fil p ro te in 17
4 .8 . P ro s e d u r A n a lis a
BI
4 .9 . L u a ra n I n d ik a to r C a p a ia n P e n e litia n T a h u n II 18
B A B V . H A S I L D A N P E M B A H A S A N
5.1 P e rtu m b u h a n M ik ro a lg a 19
5 .2 . P ro d u k s i B io m a s s a N a n n o c h h ro p sis sp 2 0
5 .3 K a d a r L e m a k N a n n o c h h ro p sis sp. 21
5 .4 . O p tim a s i N itra t d a n F o s fa t T e r h a d a p K o n s e n tra s i B io m a s s a N a n n o c h h ro p sis s p 2 3 5 .5 . K a d a r L em ak M ik ro a lg a N a n n o c h h ro p sis s p D e n g a n P e r la k u a u K o n s e n tra s i
N itra t d a n F o s fa t
v
5 .6 . O p tim a s i S a lin ita s d a n p H te rh a d a p K o n s e n tra s i B io m a s s a N cam ochloropsis sp. 2 7 5 .7 . O p tim a s i S a lin ita s d a n pH te rh a d a p K a d a r L e m a k N am io ch lo ro p sis sp. 31
5 .S. P ro fil a s a m le m a k N a m o ch lo ro p sis sp. 3 4
B A K V I. R E N C A N A T A H A P A N B E R I K U T N Y A 3 5
3 6 B A IJ V I. K E S I M P U L A N
m
D A F T A R P U S T A K A 3 8
L A M P I R A N 4 0
B A B 1. P E N D A H U L U A N
1*1. L a ta i' l i e l u k a n g
W ila y a li In d o n e s ia s e b a g ia n b e s a r m e ru p a k a n la u t d a n m e m ilik i k e k a y a a n y a n g
b e ra n e k a ra g a m . S a a t ini, p e n g g a lia n p o te n s i b io ta la u t te ru ta m a m ik ro a lg a u n tu k
m e n in g k a tk a n k e ta h a n a n p a n g a n m a sih s a n g a t m in im . D e n g a n w ila y a li p e ra ira n y a n g s a n g a t
lu a s ini, m a k a In d o n e s ia m e m ilik i p o te n s i y a n g s a n g a t b e s a r u n tu k m e n e m u k a n s p e s ie s
m ik ro a lg a y a n g e o e o k u n tu k d ik e m b a n g k a n se b a g a i s u m b e r n utrisi. B e rd a s a rk a n hasil
p e n e litia n A n ia ta et a!., ( 2 0 1 0 ) d ip e ra ira n P a n ta i P u la u B ali t t ^ ^ b e rh a s il d iis o la s i b e b e ra p a
je n is m ik ro a lg a s e p e jli m ik ro a lg a d a ri g e n u s N a n n o ch lo ro p sis sp, N itzsch ia sp. B o tryo co ccu s
sp h C ha etoceros sp r C eratium sp r C losterium sp, C yclo tella sp, dan S keleto n em a D a i i
b e b e ra p a g e n u s y a n g b e rh a sil d iis o la s i, te rn y a ta N anm chlorop& is s p m e m p u n y a i k e c e p a ta n
d a n k e s ta b ila n p e rtu m b u h a n y a n g p a lin g tin g g i d i b a n d in g k a n d e n g a n g e n u s - g e n u s lain n y a .
B e rk a ita n d e n g a n h al in i. m a k a d ip e rlu k a n a d a n y a p e n e litia n leb ih la n ju t m e n g e n a i p o te n s i
m ik ro a lg a k liu s u s n y a N m m o cklo ro p sis sp is o la t K 4 se b a g a i s u m b e r p a n g an .
D e w a s a in i, p e n g e m b a n g a n p ro d u k m ak an an , m in u m a n a ta u p u n s u p le m g g jy a n g
d ik la im m e m b e rik a n efe k k e s e h a ta n s e m a k in b a n y ak , h al ini e ra t k a ita n n y a d e n g a n s e m a k in
m e n in g k a tn y a k e s a d a ra n m a s v a ra k a t a k a n p e n tin g n y a k e s e h a ta n . B e rb a g a i s u m b e r a ia m te ia h
b a n y a k d ite liti u n tu k m e m p e ro le h s e n y a w a b io a k tifn y a u n tu k d ija d ik a n s u p le m e n m a k a n a n ,
d ia n ta r a n y a a d a la h m ik ro a lg a . S aa t in i m ik ro a lg a tid a k sa ja d ip e ru n tu k k a n bagi d u n ia
p e rik a n a n ( s e b a g a i p a k a n ala m i ro tife r) n a m u n s a n g a t p o te n s ia l u n tu k d ik e m b a n g k a n s e b a g a i
s u p le m e n m a k a n a n , u n tu k farm a si, d a n k o s m e tik . K e u n g g u la n d a ri m ik ro a lg a a d a la h lid a k
te r g a n tu n g p a d a m u si m . w a k tu p e rtu m b u h a n e e p a t se h in g g a w a k tu p a n en tid a k te rla lu lam a,
p ro d u k s i d a p a t d ila k u k a n s e c a ra te r u s m e n e ru s , tid a k b e rd a m p a k b u ru k b agi lin g k u n g a n ,
p ro d u k s in y a d a p a t d ila k u k a n se su ai d e n g a n k e b u tu h a n , s e rta am a n b agi k e s e h a ta n . M ik ro a lg a
m e n g a n d u n g b e rb a g a i m a c a m k o m p o n e n y a n g s a n g a t b e rm a n fa a t k h u s u s n y a u n tu k n u tris i
d a la m b a h a n p a n g a n , se p e rti lip id , k a rb o h id ra t, p ro te in d a n a s a m -a s a m n u k le a t ( B r o w n e t
aL, 1993., S a n k a r d i ^ ^ a m a s u b r a m a n i a n . , 2 0 1 2 ). L e m a k y a n g te rk a n d u n g d a la m m ik ro a lg a
u m u m te rd iri a ta s asa m le m a k lid ak je n u h , se p e rti lin o le a t, eic osapen taen o i c a c idE P A
( R e b o llo s o e t a l, 2 0 0 1 ) d a n docosahexaenoic a cid fD U A (H u d a n G a o , 2 0 0 6 ,. C h is ti, 2 0 0 7 ).
A s a m -a s a m le m a t tid a k j e nu h te la h b a n y a k d ila p o rk a n s a n g a t m e n g u n tu n g k a n b agi k e s e h a ta n
te ru ta m a s e b a g a i m a k a n a n s u p le m e n p e n c e g a h a n p e n y a k it k a rd io v a s k u le r, a r t e r o s k k g ^ |S .
d a n k a n k e r ( C o lq u h o u a e t al.} 2 0 0 8 ). E icosapenta en o i c a c id a ta u E P A d a n D I IA
m e m a in k a n p e ra n p e n tin g d a la m p e rk e m b a n g a n o ta k d a n re tin a l b ay i. S ela in lem ak ,
m ik ro a lg a j u g a m e n g a n d u n g p ro te in d a n a s a m - a s a m n u k e la t (S p o la o re et ¿v/., 2 0 0 6 ). S e b a g a i
c o n to h n y a m ik ro a lg a C h lo rella vu lg a ris m e n g a n d u n g p ro te in s e k ita r 51 - 5 8 % d an a s a m
n u k le a t 4 - 5% (B e c k e r, 1994). T e tr a s e lm is ch u ii m e n g a n d u n g p ro te in 4 8 .4 2 % (B ro w n et.a l.,
1997). M ik ro a lg a ju g a b e rp o te n s i m e n g h a s ilk a n p ig m e n y a n g d a p a t d im a n fa a tk a n se b a g a i
b io a ld if, s e p e rti D un a liella m e n g a n d u n g k a ro te n o id s e k ita r 1 2,G% bk (F re te s e i a l, 2 0 1 3 ), d a n N an n o ch lo ro p sis s p m e n g a n d u n g k lo r o f il- a s e k ita r 0 ,7 3 -2 ,8 5 p g /m l (A Ilsu I d a n W an ,
2 0 J 2), B e rb a g a i je n is p ig m e n y a n g d ih a s ilk a n d a r i m ik ro a lg a d a p a t d im a n fa a tk a n se b a g a i
s u m b e r a n tio k s id a n d a la m b a h a n p a n g a n .
D a la m m e m p ro d u k s i k o m p o n e n -k o m p o n e n n u tris i, m a k a je n is m e d ia d a la m k u ltiv a s i
d a n fa k to r lin g k u n g a n s a n g a t b e rp e n g a ru h te rh a d a p p e rtu m b u h a n d a n p e rk e m b a n g a n
m ik ro a lg a (F a ria et al.} 2 0 1 2 ). K o n d is i m e d ia d a n lin g k u n g a n b e rh u b u n g a n la n g su n g d e n g a n
p ro s e s fo to s ín te s is , m e ta b o lis m e , m a u p u n re p ro d u k s i (G ra h a m e t a!., 2 0 0 9 ). D a la m m e d ia
p e rtu m b u h a n u n s u r n itr a t d an p o s fa t m e ru p a k a n d u a u n s u r y a n g m u tla k h a ru s te rs e d ia d a la m
m e d ia k u ltu r m ik ro a lg a N itro g e n d a la m n itra t m e ru p a k a n sala h sa tu m a k io n u trie n y a n g
s a n g a t m e m p e n g a ru h i p e rtu m b u h a n d a n p r o d u k tifita s b io m a s s a a lg a k a re n a d ib u tu h k a n
u n tu k p e m b e n tu k p ro tein , le m a k d a n k lo ro fil (H u d a n G a o . 2 0 0 6 ). L eb ih la n ju t R e n a u d d a n
P a rry ( 1 9 9 4 ) m e n y e b u tk a n b a h w a p e n g a tu r a n f a k to r-fa k to r lin g k u n g a n sep e rti c a h a y a , pH.
te m p e r a tu r d a n s a lin ita s j u g a d ip e rlu k a n d an d a p a t b e rp e n g a ru h te rh a d a p k u a n tita s b io m a s s a
d a n k o m p o s is i k o m p o n e n n u trisi y a n g te rk a n d u n g d a la m m ik ro a lg a .
M e lih a t b a n y a k n y a k e a n e k a ra g a m a n d a n p o te n s i y a n g d im ilik i o le h m ik ro a lg a s e ita
b e lu m d ik e ta h u in y a j e n i s m e d ia , b e b e ra p a fa k to r n u tris i, d a n lin g k u n g a n y a n g o p lim a l d a la m
p e rtu m b u h a n u n tu k m e m p ro d u k s i b io m a s s a d an k o m p o n e n -k o m p o n e n n u tris i, m a k a p e rlu
d ila k u k a n p e n e litia n m e n g e n a i p o te n s i p e n g g u n a a n m ik ro a lg a s e b a g a i s u m b e r p a n g a n
fu n g s io n a l d e n g a n m e m p e rla k u k a n fa k to r - f a k to r je n is m e d ia d a n n u tris i b e s e rta fa k to r - f a k to r
lin g k u n g a n .
B e rd a s a rk a n u ra ia n la ta r b e la k a n g d ia ta s m a k a ru m u s a n p e rm a s a la h a n s e c a ra u m u m
ad a lah : 1) B e ra p a k a h w a k tu p a n e n y a n g te p a t u n tu k p ro d u k s i b io m a s s a ?, 2 ) A p a je n is m e d ia
y a n g te p a t p a d a p ro s e s k u ltiv a s i u n tu k m e m p ro d u k s i b io m a s s a d a n lip id ?, 3 ) B e ra p a k a h
k o n s e n tra s i n itr a t d a n p o s fa t y an g te p a t d a la m p ro d u k s i lip id ?, 4 ) B e ra p a k a h titik o p tim u m
k o n d is i pH d a n s a lin ita s p a d a p ro se s p ro d u k s i lip id ?? 5) B a g a im a n a p ro fil a s a m -a s a m le m a k
lip id a y a n g d ih a s ilk a n d a ri e k s tra k m ik ro a lg a ?
E l
B A B II. T I N J A U A N P U S T A K A
2.1.
M ik r o a lg a N a n n o c h lo ro p sis s pM ik ro a lg a N cam ochloropsis sp. m e r u p i ^ n je n is a lg a h ija u (C h o lo rp h yta ) y a n g
m e m ilik i sel b e rw a rn a h ijau, tid a k b e rm o til, d a n tid a k m em ilik i flagel. S e ln y a b e rb e n tu k b o la
b e ru k u ra n s e d a n g d e n g a n d ia m e te r 2 - 8 (im , te rg a n tu n g s p e s ie s n y a , d e n g a n k h lo ro p la s b e r b e n tu k c a n g k ir. N an n och lo ro psis sp. m e lim p a h d i se p a n ja n g p a n ta i z o n a io tik d e n g a n
k o n s e n tra s i 10:- 1 04 s e l/c m3 (H u d a n G a o, 2 0 0 6 ). N a n n och lo ro p sis sp. d a p a t tu m b u h b aik p a d a k is a ra n p H 7 -9 , te ta p i t u m b u l ^ y n d a h p a d a pH 10 (E lz e n g a e t a i. 2 0 0 0 ).
N a n n och lo ro p sis sp. a d a la h sala h s a tu ta n a m a n y a n g p a lin g e f is ie n d a la m m e n a n g k a p d a n
m e m a n fa a tk a n c a h a v a d a n k a rb o n d io k s id a ( C O ;) u n tu k k e p e rlu a n fo to s in te s is P e rtu m b u h a n
sel N cam ochloropsis sp. sa n g at d ip e n g a ru h i o le h tig a k o m p o n e n p en tin g u n tu k tu m b u h y a itu
c a h a y a , k a rb o n d io k s id a ( C O ;) d a n n u trie n (D ih a rin i, 2 0 0 1 ). N a n n och lo ro psis sp m e m ilik i
s e ju m la h k a n d u n g a n p ig m e n d a n n u trisi s e p e rti p ro te in (5 2 ,1 1 % ), k a rb o h id ra t (1 6 % ), le m a k
(2 7 .6 4 % ), d a n v ita m in C ( 0 ,8 5 % ) (Is n a n s ty o d a n K u rn ia s tu ti, 1 9 95 ).
2 .2 , M a n f a a t d a n N u tr is i N a n n o ch lo ro p sis sp ,
N a n n o ch lo ro psis o culala le b ih d ik e n a l d e n g a n n a m a C hlorella la u t, d a la m
p e m b e n ih a n m e m p u n y a i tig a p e ra jia n y a itu d ig u n a k a n s eb a g a i p a k a n p a d a k lu tu r ro tife r,
u n tu k p e n g k a y a a n ro tife r, d an u n tu k m e n g h a s ilk a n e f e k "green w ater" p a d a p e m e lih a ra a n
la rv a (R ie h m o n d an d C h e n g - W u , 2 0 0 1 ). N a n n o ch lo ro psis o cu la ta d a p a t d ig u n a k a n s e b a g a i
p a k a n r o t i f a t a i a r e n a u k u ra n tu b u h n y a sesu ai d e n g a n b u k a a n m u lu t ro tife r, m e m p u n y a i
a»
k a n d u n g a n v ita m in B 1 2 d a n e ic o s < ^ g ;n ta e n o ie : a e id ( E P A ) s e b e s a r 3 0 .5 % d a n to ta l
k a n d u n g a n co3 I I U F A s e b e s a r 4 2 .7 % . V ita m in B 12 sa n g a t p e n tin g u n tu k p o p u la s i r o tif e r d a n
E P A p e n tin g u n tu k n ilai n u tris i r o tif e r u n tu k p a k a n la rv a d a n ju v e n il ik a n lau t ( I s n a n s e ty o
d a n K u rn ia s tu ty , 1995).
N a n n o ch lo ro psis sp. te la h d im a n fa a tk a n d a la m p ro d u k s i b io m a s s a , p ro d u k s i en erg i,
p ro d u k s i b e rb a g a i p r o d u k b e rm a n fa at, b io a k u m u la s i s e n y a w a te r te n tu s e r ta b e rb a g a i p ro s e s
b io tra n s fo rm a s i P r o d u k - p r o d u k y a n g d ih a s ilk a n N an n o ch lo ro p sis sp. s e b a g ia n b e s a r b e rs ifa t
e k s tra s e lu la r, m u la i d a ri m e ta b o lit s e d e rh a n a h in g g a a n tib io tik k o m p le k s , to k s in , p ig m e n
s e ila s e ju m la h p r o d u k b e rm a n fa a t la in n y a ( B e c k e r , 1 9 9 4 ). C h is ti (2 0 0 7 ) m e n a m b a h k a n
b a h w a , N a n n o ch lo ro psis sp. d a p a t d ig u n a k a n s e b a g a i b a h a n b a k u b io d ie s e l d a n b io d ie se l d a ri
m u d a h d i k u ltiv a s i d a n d a la m w a k tu 2 4 ja m m ik ro a lg a d a p a t b e rta m b a h b a n y a k m e n ja d i d u a
k ali lip at.
2 .3 . F a k t o r - f a k t o r y a n g M e m p e n g a r u h i P e r t u m b u h a n M ik r o a l g a
K u ltiv a s i m ik ro a lg a d ip e n g a ru h i o le h b e b e r a p a f a k to r u m u m s e p e rti fa k to r e k s te rn a l
( lin g k u n g a n ) d an n u trie n . F a k to r - f a k to r lin g k u n g a n d a n n u tr ie n te rs e b u t b e rp e n g a ru h
te rh a d a p la ju p e r t u m b u ^ i d a n m e ta b o lis m e m ik ro a lg a . F a k to r - f a k to r te r s e b u t a d a la h :
(a ) D e ra ja t K e a s a m a n (p H ). D e ra ja t k e a s a m a n a ta u p H d ig a m b a rk a n se b a g a i k e b e ra d a a n io n
h id ro g e n . V a ria s i pH d a la m m e d ia k u ltu r d a p a t m e m p e n g a ru h i m e ta b o lis m e d a n
p e rtu m b u h a n k u ltu r m ik ro a lg a a n ta r a lain m e n g u b a h k e s e im b a n g a n k a rb o n a n o rg a n ik ,
m e n g u b a h k e te rs e d ia a n n u trie n d a n m e m p e n g a ru h i fisio lo g i sel. K is a ra n pH u n tu k k u ltu r alg a
b ia s a n y a a n ta r a 7 -9 , k is a ra n o p tim u m u n tu k a lg a la u t b e rk is a r a n ta ra 7 .8 -8 .5 . S e c a ra u m u m
k is a ra n pH y a n g o p tim u m u n tu k k u ltu r m ik ro a lg a a d a la h a n ta ra 7 -9 (S la m e t, 2 0 0 8 ).
(b ) S a lin ita s . K is a ra n s a lin ita s y a n g b e ru b a h -u b a h d a p a t m e m p e n g a ru h i p e r tu m b u h a n
m ik ro a lg a . B e b e r a p a m ik r o a lg a d a p a t tu m b u h d a la m k is a ra n s a lin ita s y a n g tin g g i te ta p i a d a
ju g a y a n g d a p a t tu m b u h d a la m k is a r a n s a lin ita s y a n g re n d a h. N a m u n , h a m p ir s e m u a je n is
m ik ro a lg a d ap a t tu m b u h o p tim a l p a d a s a lin ita s se d ik it d ib a w a h h a b ita t a sa i. P e n g a tu ra n
s a lin ita s p a d a m e d ia y a n g d ip e rk a y a d a p a t d ila k u k a n d e n g a n p e n g e n c e ra n d e n g a n
m e n g g u n a k a n a ir ta w a r. K is a ra n s a lin ita s y a n g p a lin g o p tim u m u n tu k p e rtu m b u h a n
m i k ^ l g a a d a la h 25-35 % » (S y lv e s te r e t a}., 2 0 0 2 ).
( c ) S u h u . S u h u m e ru p a k a n s a la h s a tu fa k to r p e n tin g y a n g m e m p e n g a r u h i p e rtu m b u h a n
m ik ro a lg a . P e ru b a h a n s u h u b e rp e n g a ru h te rh a d a p p ro s e s k im ia , b io lo g i d a n fisik a,
p e n in g k a ta n s u h u d a p a t m e n u ru n k a n s u a tu k e la ru ta n b a h a n d a n d a p a t m e n y e b a b k a n
p e n in g k a ta n k e c e p a ta n m e ta b o lis m e d a n re s p ira s i m ik ro a lg a d i p e ra ira n . S e c a ra u m u m su h u
o p tim a l d a la m k u ltu r m ik ro a lg a b e rk is a r a n ta r a 2 0 - 2 4 °C . S u h u d a la m k u ltu r d ia tu r
s e d e m ik ia n r u p a b e rg a n tu n g p a d a m e d ia y a n g d ig u n a k a n . S u h u di b a w a h 16 °C d a p a t
m e n y e b a b k a n k e c e p a ta n p e rtu m b u h a n tu ru n , s e d a n g k a n s u h u d ia ta s 3 6 °C d a p a t
m e ^ b a b k a n k e m atia n (T a w , 1 9 90 ).
( d ) C a h a y a . C a h a y a m e ru p a k a n s u m b e r e n e rg i d a la m p ro s e s f o to s ín te s is y a n g b e rg u n a u n tu k
p e m b e n tu k a n s e n y a w a k a rb o n o rg a n ik . I n te n s ita s c a h a y a sa n g a t m e n e n tu k a n p e r tu m b u h a n
m ik ro a lg a y a itu d ilih a t d a ri la m a p e n y in a ra n d a n p a n ja n g g e lo m b a n g y a n g d ig u n a k a n u n tu k
fo to s in te s is . C a h a y a b e r p e r a n p e n tin g d a la m p e rtu m b u h a n m ik ro a lg a . te ta p i k e b u tu h a n n y a
b e rv a ria s i y a n g d is e s u a ik a n d e n g a n k e d a la m a n k u ltu r d a n k e p a d a ta n n y a .
0
(e ) K a rb o n d io k s id a . K a rb o n d io k s id a d ip e rlu k a n o le h m ik ro a lg a u n tu k m e m e n b a n tu p ro s e s
Ib to s in te s is . K a rb o n d io k s id a d e n g a n k a d a r 1 -2 % b ia s a n y a s u d a h c u k u p d ig u n a k a n d a ta m
k u ltu r m ik ro a lg a d e n g a n in te n s ita s c a h a y a y a n g re n d a h . K a d a r k a rb o n d io k s id a y a n g b e rle b ih
d a p a t m e n y e b a b k a n p H k u ra n g d a ri b ata s o p tim u m s e h in g g a a k a n b e rp e n g a ru h te rlia d a p
p e rtu m b u h a n m ik ro a lg a ( T a w , 1 990 ).
( i) N u trie n . M ik ro a lg a m e m p e ro le h n u trie n d a ri a ir la u t y an g s u d a h m en g a n d u n g n u trie n
y a n g c u k u p le n g k a p N a m u n p e r tu m b u h a n m ik ro a lg a d a la m k u ltu r d a p a t m e n c a p a i o p tim u m
d e n g a n m e n c a m p u rk a n a ir la u t d e n g a n n u trie n y a n g tid a k te rk a n d u n g d a la m a ir la u t te rs e b u t.
N u trie n te rs e b u t d ib a g i m e n ja d i m a k ro n u trie n d a n m ik ro n u trien . U n s u r m a k ro n u trie n te rd iri
a ta s N (m e lip u ti n itrat), P (P o sfa t), K (K a liu m ), C (K a rb o n ), Si (s ilik a t), S ( S u lf a t) d a n C a
(K a ls iu m ). U n s u r m ik ro n u trie n te rd iri a ta s F e (B e si), Z n (S e n g ), C u (T e m b a g a ), M g
(M a g n e s iu m ), M o (M o ly b d a te ), C o (K o b a lt), B (B o ro n ), d a n la in n y a (S y lv e s te r e t a!.t 2 0 0 2 ;
E d l ^ / a l.f 2 0 0 3 ; C a h y a n in g s ih , 2 0 0 9 ).
(g ) A era si. A e ra s i d a la m k u ltiv a s i m ik ro a lg a d ig u n a k a n d a la m p ro s e s p e n g a d u k a n m e d ia
k u ltu r P e n g a d u k a n s a n g a t p e n tin g d ila k u k a n b e rtu ju a n u n tu k m e n c e g a h te ija d in y a
p e n g e n d a p a n seL n u trie n te rs e b a r d e n g a n b aik s e h in g g a m ik ro a lg a d a la m k u ltu r m e n d a p a tk a n
n u trie n y a n g s a m a , m e n c e g a h s ra tifik a s i suh u , d a n m e n in g k a tk a n p e r tu k a r a n g as d ari u d a ra
k e m e d ia (T a w , 1990).
2 ,4 . R o a d M a p d a n F is h B o n e P c n d i t i u n
R o a d m ap p e n e litia n in i d is a jik a n p a d a G a m b a r i
B A B III. T U J U A N D A N M A N F A 4 T P E N E L I T I A N
3 ,1 . T u j u a n P e n e li t ia n
T u ju a n y a n g in g in d ic a p a i d a ri p e n e litia n ini a d a la li s e b a g a i b e r i k u t :
1. M e n e n tu k a n w a k tu p an e 11 y a n g te p a t p ad a p ro se s p ro d u k s i b io m a s s a
N u n n o c h lo ro p sh sp is o la t K 4 .
2 . M e n e n tu k a n jen is m e d ia y a n g te p a t p a d a p ro se s k u ltiv a si u n tu k m e m p ro d u k s i
b io m a s s a d an le m a k N a m o c h lo ro p sis sp iso la t K 4.
3 . M e n e n tu k a n k o n s e n tra s i n itra t d a n p o s fa t y an g te p a t d a la m p r o d u k s i lip id .
4 . M e n e n tu k a n titik o p tim u m k o n d is i p H d a n s a lin ita s p a d a p ro se s p ro d u k s i lip id .
5. M e n e n tu k a n p ro fil a s a m - a s a m le m a k lip id a y a n g d ih a s ilk a n d a ri e k s tra k m ik ro a lg a
N arm ochloropsis sp iso la t K 4 .
3 .2 . M a n f a a t P e n e lit ia n
M a n ta a t p e n e litia n in i a d a la h d a p a t d ip e ro le h w a k tu p a n e n y a n g te p a t p a d a p ro s e s
p ro d u k si b io m a s s a N a tm o ch lo m p sis sp is o la t K 4, d ip e r o le h je n is m e d ia y a n g te p a t p ad a
p ro s e s k u ltiv a s i u n tu k m e m p ro d u k s i b io m a s s a N arm o chlorop sis sp iso la t K 4, d ip e ro le h
k o n s e n tra s i p e n a m b a h a n n itra t d a n p o s fa t d a la m p ro d u k s i b io m a s s a d a n lipid, d ip e ro le h
tilik o p tim u m k o n d is i pH d a n s a lin ita s p ad a p ro s e s p ro d u k s i b io m a s s a d a u lip id , s erta
d ip e ro le h p ro 111 a s a m -a s a m le m a k y a n g d ih a s ilk a n d a ri e k s tr a k m ik ro a lg a
B A B IV . M E T O D E P E N E L I T I A N
4 . 1 . S i s t e m a t i k
¡1
d a nF iskbone
P e n e l i t i a nS is te m a tik a p e n e litia n y a n g a k a n d ila k u k a n p a d a p e n e litia n ini d is a jik a n p a d a T a b e l
L s e d a n g k a n b a g a n fish h o n e d is a jik a n p a d a G a m b a r 2.
T a b e l 1. S is te m a tik a P e n e litia n
T a h a p K e g i a t a n I n d i k a t o r c a p a i a n
T a h i n i 1
P r o d u k s i B io m a s s a d a n 1 J p it l • P e s ia p a n ala t d an b a h a n
• P e re m a ja a n k u ltu r m u m i
• P e n e n tu a n je n is m e d ia y a n g se su a i b e rd a s a rk a n k o n s e n tra s i lip id te rtin g g i y a n g d ig u n a k a n u n tu k p e n e litia n s e la n ju tn y a
• w a k tu p mi e n b e rd a s a rk a n k o n s e n tra s i b io m a s s a p a d a k u rv a p e rtu m b u h a n
• O p tim a si f a c to r n u trisi m e d ia d a la m p ro d u k s i lip id y a n g d ip e rg u n a k a n u n tu k p e n e litia n s e la n ju tn y a .
• O p tim a s i f a c to r lin g k u n g a n (p H d a n S a lin ita s ) d a la m p ro d u k s i lip id y a n g d ip e rg u n a k a n u n tu k p e n e litia n s e la n ju tn y a .
■ S c ale u p p e rtu m b u k a n m ik ro a lg a s e s u a i d e n g a n je n is m e d ia , w a k tu p an en , fa k to r n u trisi d a n fa k to r lin g k u n g a n y a n g o p tim a l
• P e n e n tu a n p ro fil a s a m - a s a m le m a k p e n y u s u n lip id m ik ro a lg a
a. D ip e ro le h w a k tu p a n e n y a n g te p a t d e n g a n k o n s e n tra s i b io m a s s a
te rtin g g i
b. D ip e ro le h je n is m e d ia y a n g
te p a t d a la m m e m p ro d u k s i lip id
c. D ip e ro le h k o n d is i o p tim u m k o n s e n tr a s i n itrat d a n p o sfa t d a la m m e m p ro d u k s i Iipid a d. D ip e ro le h k o n d is i o p tim u m
k o n d isi p il d a n S a lin ita s d a la m m e m p ro d u k s i lip id a e. D ip e ro le h p ro iil a s a m - a s a m
le m a k p e n y u s u n lipid
f. D ip e ro le h b io m a s s a d a n
lip id p o te n sin l u(k
d ik e m b a n g k a n s e b a g a i s u p le m e n m a k a n a n
g. M a k a la h u n tu k p u b lik a s i d i ju r n a l n a sio n a l te ra k re d ita s i
b e rto p ik 'o p tim a s i p ro d u k s i lip id d a ri m ik ro a lg a
Normochloropsis
sp ” . T a li i f n2
P r o d u k s i P r o t e i n I n d i k a t o r c a p a i a n
• P e s ia p a n a la t d a n b a h a n
• P e re m a ja a n k u ltu r m u rn i
• O p tim a s i f a k to r n u trisi m e d ia d a la m p r o d u k s i p ro te in y a n g d ip e rg u n a k a n u n tu k p e n e litia n s e la n ju tn y a .
• O p tim a s i f a k to r lin g k u n g a n (p H d a n S a lin ita s ) d a la m p ro d u k s i p ro te in y a n g
d ip e rg u n a k a n u n tu k p e n e litia n s e la n ju tn y a .
• S c a le u p p e rtu m b u h a n m ik ro a lg a se su a i d e n g a n je n is m e d ia , w a k tu p an en , fa k to r
n u tris i d a n fa k to r lin g k u n g a n y a n g o p tim a l d a la m m e m p ro d u k s i p ro te in .
• P e n e n tu a n p ro fil a s a m - a s a m a m in o p e n y u s u n p ro te in m ik ro a lg a
a. D ip e ro le h k o n d is i o p tim u m
k o n s e n tr a s i n itra t d a n p o sfa t d a la m m e m p ro d u k s i p ro te in v a n g tin g g i
b. D ip e ro le h k o n d is i o p tim u m k o n d isi p li d a n S a lin ita s d a la m m e m p ro d u k s i p ro te in v a u g tin g g i
c. D ip e ro le h p ro iil a s a m -a s a m a m in o p e n y u s u n p ro te in . d. D ip e ro le h p ro te in sel
tu n g g g a l p o te n tia l u tk
d ik e m b a n g k a n seb ag ai s u p le m e n m a k a n a n .
e. M a k a la h u n tu k p u b lik a s i d i
ju r n a l n a s io n a l te ra k re d ita s i b e rto p ik “ o p tim a s i p ro d u k s i lip id d a ri m ik ro a lg a
N a m o c h h r o p s i s s p " _ _ _ _ _ _ _
G a m b a r 2. D ia g ra m fis h b o m p e n e litia n p ro d u k s i lip id d a n p ro te in
0
4 .2 . 1 e m p a t d a n W a k tn P e n e lit ia n
P e n e litia n d ila k u k a n d i L a b o ra to riu m B io in d u s tri, L a b o ra to riu m A n á lis is P a n g a n .
F a k u lta s T e k n o lo g i P e rta n ia n U n iv e r s ita s U d a y a n a . W a k tu p e la k s a n a a n p e n e litia n ta liu n
2 0 1 5 .
4 . 3 B a h a n d a n A la t P e n e lit ia n
B a h a n y a n g d ig u n a k a n d ala m p e n e litia n ini a d a la h : s a in p e l m ik ro a lg a y a n g d iis o la s i
d a r i a ir la u t d i s e p a n ja n g p a n ta i K e d o n g a n a n -J im b a ra n , B a d u n g , B ali. B a h a n -b a h a n u n tu k
m e d ia tu m b u h m ik ro a lg a m e lip u ti : m e d iu m G u illa rd , m e d iu m p e rta n ia n , m ed iu m B G - I1, m e d iu m A lle n -M iq u e l, d a n m e d iu m s ta n d a r w a ln e . B a h a n y a n g d ig u n a k a n d a la m p r o s e s
a n a lis is n u trisi a d a la h H2S O4 p e k a t, a q u a d e s , in d ik a to r P P , a n tib u ih , N a O H , H C i, d a n p e la ru t h ek san . A k it y a n g d ip e rg u n a k a n a d a la h tim b a n g a n a n a litik . b o to l sain p e l. to p le s /g a lo n . w a te r
p u m p , a e ra to r, la m p u ta b u n g , s a rin g a n b e rseri, s e n tiifu g e , autoclave, o v en , fre e z e r, la m in a r
JJow, lam p u b u n s e n , p H m e te r, te rm o m e te r, p ip e t m ik ro , ja r u m o se (lo o p ), m ik ro s k o p , d a n
a la t-a la t g e las.
4 .4 .[ < iln m I/ T u Itu p I : P r o d u k s i L ip id 4 .4 .1 . P e r e m a j a a n k u l t u r n iu r n i
P e re m a ja a n k u ltu r d ila k u k a n m e la lu i b e b e ra p a ta h a p a n , y a itu m e n u m b u h k a n k o lo n i
s e c a ra a s e p tik p a d a c a w a n p e tri b e risi m e d iu m s ta n d a r y a n g te la h d ip a d a tk a n m e la lu i
p e n a m b a h a n a g a r s e b a n y a k 1 -1 .5 % m e la lu i m e to d e f o r w ay stre a k K o lo n i y a n g tu m b u h
d ip in d a h k a n s e c a ra a s e p tik p a d a a g a r p e tr i di.sh u n tu k m e n d a p a tk a n k u ltu r m urn i. S e te la h
b e b e ra p a hai i k o lo n i d ip in d a h k a n p a d a te s t tu b e y a n g b e ris i m e d iu m c a ir s e b a g a i s to k bnru.
S to k k u ltu r k e m u d ia n d ip e rg u n a k a n u n tu k p r o s e s s e la n ju tn y a d e n g a n m e la k u k a n p ro p a g a s i
s e c a ra b e rta h a p k e v o lu m e y a n g le b ih b e sar.
4 .4 .2 . P e n e n t u a n W a k t u P a n e n
W a k tu p a n e n d ite n tu k a n d e n g a n m e m b u a t k u rv a p e rtu m b u h a n m ik ro a lg a d e n g a n j e n i s
m e d ia te rp ilih s e s u a i d e n g a n p e n e litia n s e b e lu m n y a . P a d a ta h a p ini p re p a ra s i in o k u lu m
d ila k u k a n d a la m k e a d a a n a s e p tik . S e l m ik ro a lg a s e b a n y a k 3 0 % v /v d iin o k u la s ik a n p a d a
fla s k 2 L y a n g m e n g a n d u n g m e d iu m s es u a i p e rla k u a n . K u ltiv a s i d ila k u k a n d a la m e r le n m e y e r 2 L d e n g a n p i l m e d ia 6. s u h u 2 8 ± 2 °C , in te n s ita s e a h a y a 1,2 ± 0 ,5 k lu x d e n g a n s ik lu s p e rb a n d in g a n te ra n g d e n g a n g e la p 1 2:12 ja m , s a lin ita s 2 7 % , d a n d ila k u k a n a e ra s i d e n g a n
m e n g a lirk a n u d a ra ke d a la m m e d ia . P ro s e s k u ltiv a s i d ila k s a n a k a n s e la m a 2 m in g g u a ta u 14
h ari. P e ru b a h a n b io m a s a k u ltu r d ia m a ti s e tia p 24 ja m s e c a ra a s e p tis . S e tia p p e rla k u a n
d ila k u k a n tig a kali u la n g a n , D a ta y an g d ip e r o le h k e m u d ia n d ib u a tk a n k u rv a p e rtu m b u h a n n y a ,
W a k tu p a n e n d ite n tu k a n b e rd a s a rk a n w a k tu a k h ir fase lo g a ta u w a k tu aw a i fase s ta s io n e r
y a n g m e m b e rik a n k o n s e n tra s i b io m a s s a te rtin g g i. B io m a s s a y a n g d iu k u r b e rd a s a r k a n ju m la h
b o b o t k e rin g b io m a s s a g/l.
4 .4 .3 . P e n e n t u a n J e n i s M e d i a
». R a n c a n g a n p e r c o b a a n
P e n e litia n p a d a ta h a p in i b e rtu ju a n u n tu k m e n e n tu k a n je n is m ed ia y a n g s e s u a i u n tu k
p ro s e s k u ltiv a s i m ik ro a lg a y a n g d ip e r o le h p a d a ta h a p iso lasi. P e rla k u a n d ira n c a n g d e n g a n
R a n c a n g a n A c n k L e n g k a p d e n g a n lim a p e rla k u a n je n is m e d ia y a itu ( I ) m e d iu m p e rta n ia n ,
(2 ) m e d iu m A l l e n - M i q u d ^ 3 ) m e d iu m g u illa rd . (4 ) m e d iu m B lu e G re e n 11 (B G 11) d a n (5 ) m e d iu m s t^ i d j i r w a ln e . M a s in g -m a s in g p e r la k u a n d iu la n g 6 k ali s e h in g g a d ip e r o le h 3 0 u n it p e rc o b a a n . A p a b ila p e rla k u a n b e rp e n g a ru h n y a ta , m ak a d ila n ju tk a n d e n g a n u j i D u n c a n ,
b . P e l a k s a n a a n p e n e l i t i a n d a n p a r a m e t e r y a n g d i a m a t i
P a d a ta h a p ini p re p a ra s i in o k u lu m d ila k u k a n d a la m k e a d a a n a s e p tik , d a n is o lâ t y a n g
d ip e ro le h p ad a ta h a p is o la s i d ik u ltiv a s i d e n g a n m e n g g u u a k a n m e d iu m s e su a i d e n g a n
p e rla k u a n . S e l m ik ro a lg a s e b a n y a k 30 % v /v d iin o k u la s ik a n p a d a lla s k 2 L y a n g
m e n g a n d u n g m e d iu m sesu a i p e rla k u a n . K u ltiv a s i d ila k u k a n d a la m e rle n m e y e r 2 L d e n g a n p H
m e d ia 6. s u h u 2 8 = 2 °C , in te n s ita s e a h a y a 1300 l u x s a lin ita s 31 % , d an d ila k u k a n a e ra s i d e n g a n m e n g a lirk a n u d a r a ke d a la m m e d ia . P ro s e s k u ltiv a s i d ila k s a n a k a n sa m p a i a k h ir fase
log, d ia n a lis is k o n s e n tra s i b io m a s s a d a n lip id a n y a . P e n e n tu a n je n is m e d ia te rb a ik d id a s a rk a n
p a d a m e d ia y a n g m e n g h a s ilk a n k o n s e n tra s i b io m a s s a d a n lip id a te rtin g g i. M e d ia -m e d ia y a n g
d ip e rg u n a k a n d a la m p e n e litia n ini ad a la h :
1) M e d iu m P e rta n ia n m e n g a n d u n g : Z A 160 g /L , U re a 2 4 0 g /L , T S P 8 0 g. L, F e C l 120 g 'L ,
N a E D T A 120 g /L
2 ) M e d iu m A lle n - M iq u e l m e n g a n d u n g : L a ru ta n A d a n L a ru ta n B. L a ru ta n A m e n g a n d u n g :
K N O i 2 0 ,2 g, a q u a d e s t 10 0 m l, L a ru ta n B m e n g a n d u n g : N a : H P 04, I 2 H ; G 4 g. C a C l ^ H ^ G 4 g . FeC l? 2 g, H C I 2 m l a q u a d e s t 8 0 ml
3) K o m p o s is i m e d iu m s ta n d a r walne a d a la h S o lu tio n A ( I m l/L k u ltur}: F e rric c h lo rid e
(F e C I i) 0 .8 g ra m . M a n g a n o u s C h lo rid e ( M n C 1 ^ 5 H ;0 ) 0 ,4 g ram . B o ric a c id ( H3B O3) 3 3 ,6 g ram , E D T A , d i-s o d iu m sa lt 4 5 ,0 g ra m , S o d iu m d i-h y d ro g e n o rth o p H o s p H a te
( N a H ; P 0 j , 2 H : 0 ) 2 0 .0 g ra m . S o d iu m n itrd je (N a N O ^) 1 0 0 ,0 g ram . S o lu tio n B 1,0 ml
( d ila r u tk a n sa m p a i 1 L d e n g a n a ir la u t). S o lu tio n 13 : Z in c c h lo rid e ( Z n C l;) 2,1 g ra m .
C o b a lto u s c h lo rid e ( C o C l : , 6 H : 0 ) 2 ,0 g ra m , A m m o n iu m m o ly b d a te ((N F L V J V Io tO ^
4 1 1 ^0 ) 0 ,9 g ram , C u p ric s u lp H a te ( C u S 04,5 H ^ 0 ) 2 ,0 g ra m . C o n c e n tr a te d f jC | 1 0.0 ml ( d ila r u tk a n sa m p a i 100 m l d e n g a n a ir la u t). S o lu tio n C (0,1 m l/L k u ltu r ) : V ita m in 13]
0 ,2 g ram , S o lu tio n E 2 5 .0 m l (d ila ru tk a n s a m p a i 2 0 0 m l d e n g a n a ir la u t). S o lu tio n E:
v ita m in B12 0,1 g ( d ila ru tk a n sam p ai 2 5 0 ml d e n g a n a ir lau t),
4 ) M e d ia g u illa rd : N a H ; P 0 4. 2 H 20 5 g, N aN O * 4 2 ,1 g , N a ^ E D T A 5 g , N a^SiO ^ 2 5 g,
M n C lj H ; 0 0 ,1 8 g ? FeCl^ 1 ,45 g, A q u a d e s 5 0 0 ml, tra c e e le m e n 0 .5 ml T r a c e e le m e n :
C o C l,. 6 H : 0 1 g , ( N H4)s M o70 :4 , 4 H . 0 0 ,6 3 g , C U S 0 4, 7 H . 0 0 ,9 8 g , F eC I,. 6 H : 0 1 ,6 g. A q u a d e s 1 00 m l (J a ti e t « /., 2 0 1 2 ). K o m p o sisi v ita m in te rd iri d a ri S o l A : v ita m in B1
0 ,2 g /2 0 0 m l a q u a d e s h a n g a t d ita m b a h d e n g a n 2 5 ml so l B. S o l B : v ita m in B 12 0,1
g. 2 5 0 ml a q u a d e s h a n g a t (B B P P B L G o n d o l, 2 0 1 3 ).
5) M e d ia b lu e g r e e n 11 te rd iri d a ri : N a ^ E D T A lO g /1 0 0 m l a q u a d e s : N a N O ^ 1 0 g /1 0 0 ml
a q u a d e s . N a :C O ^ 10 g/lO O m l a q u a d e s : C a C b ,2 H ^ O 10 g/lO O m l a q u a d e s ; M g S 04. 7 H ; 0 10 g / 1 0 0 m l a q u a d e s ; K2H P 04 10 g/lO O m l aqju ad es; Fe(O H ).^ 10 g / 1 0 0 m l a q u a d e s ; a s a m s itra t 10 g / 1 0 0 m l a q u a d e s . T ra c e e le m e n t s o lu tio n : H iB O i 2 ,8 6 g, M n C k 4 H ^O I.S I g,
Z n S 0 4. 7 H . 0 0 ,2 2 g . N a : M o 0 4. 2 H ; 0 0 ,3 9 g, C u S 0 4. 5 H : 0 0 ,0 8 g, C o ( N O ,) ^ 6 H . 0
0 ,0 5 g, di ta m b a h k a n a q u a d e s s a m p a i m e n ja d i 1 0 0 0 m l (K a w a ro e e t a !2 0 1 0 ),
4 .4 .4 . P r o ( l u k s i L ip id
K iiiu :a |i^ in p e r c o b a a n p e n g a r u h n it r a t d a n p o s fa t
R a n c a n g a n p e rc o b a a n y a n g d ig u n a k a n a d a la h R a n c a n g a n A c a k L e n g k a p , y a n g te rd ir i
a ta s 7 p e rla k u a n y a itu :
K l = k o n s e n tra s i n itr a t 3 0 (g/1) d a n k o n s e n tra s i fo s fa t 15 g /l
K 2 = k o n s e n tra s i n itr a t 50 (g /l) d a n k o n s e n tra s i fo s fa t 5 g.;’l
K 3 = k o n s e n tra s i n itr a t 50 (g /l) d a n k o n s e n tra s i fo s fa t 2 5 g /l
K 4 = k o n s e n tra s i n itr a t 1 0 0 (g/J) d a n k o n s e n tra s i fo sfa t 15 g /l
K 5 = k o n s e n tra s i n itr a t 1 0 0 (g /l) d a n k o n s e n tra s i fo s fa t 30 g /l
K6 = k o n s e n tra s i n itr a t 1 5 0 (g /l) d a n k o n s e n tra s i fo sfa t 5 g /l K 7 = k o n s e n tra s i n itr a t 150 (g /l) d a n k o n s e n tra s i fo s fa t 25 g /l
B
P e rc o b a a n d iu la n g s e b a n y a k d u a kali s e h in g g a d ip e r o le h 14 u n it p e rc o b a a n . D a ta
y a n g d ip e r o le h d ia n a lis is d e n g a n s id ik ra g a m , d a n b ila p e rla k u a n b e rp e n g a ru h n y a ta te rh a d a p
v a ria b e l y a n g d ia m a ti d ila n ju tk a n d e n g a n uji d u n c a n t.
b . P e la k s a n a a n p e n e l i t i a n p e n g a r i i l i k o n s e n t r a s i n i t r a t d a n p o s f a t d a n p a r a m e t e r y a n g d i a m a t i
P e n e n tu a n fa k to r n u tris i d ila k s a n a k a n p a d a je n is in e d iu in d a n w a k tti p a n e n te rp ilih
d e n g a n m e m o d ifik a s i s e n y a w a n itra t ( N 0 3 ) d a n fo s fa t (PCU) d e n g a n k o n s e n tra s i se su a i
p e rla k u a n . K u ltiv a s i d ila k u k a n J a k u n s to p le s p la stik d e n g a n v o lm n e 2 0 L d e n g a n p il m ed ia
8.1, su h u 2 8 = 2 CC , in te n s ita s c a h a y a 1 ,2 ± 0 ,5 k lu x , s a lin ita s 31 p p t d a n d ila k u k a n a e ra s i d e n g a n m e n g a lirk a n u d a ra k e d a la in m edia. P e n g a m a ta n te rh a d a p p a ra m e te r p e n e litia n
d ila k u k a n p a d a a k h ir m a s a k u ltiv a si (1 1 h a ri) te rh a d a p k o n s e n tra s i lip id ( m e to d e s o \ h l e t ) d a n b e ra t k e rin g b io m a s s a sel. H a s il o p tim u m p ro d u k s i lipid p a d a k o n s e n tra s i n itr a t d a n
p o s fa t ini s e la n ju tn y a d ip e rg u n a k a n se b a g a i fa k to r te ta p p a d a p ro s e s o p tim a s i fa k to r
lin g k u n g a n (p H d a n s a lin ita s ) te rh a d a p p ro d u k s i lip id .
c . R a n c a n g a n p e r c o b a a n p e n g a r u h p i l d a n s a l i n i t a s
R a n c a n g a n p e rc o b a a n y a n g d ig u n a k a n a d a la h C entra l (’ 'om p o si t e D esig n (C C D ). D a ta
y a n g d ih a s ilk a n d a ri ra n c a n g a n p e rc o b a a n te r s e b u t a k a n d ia n a lis is d e n g a n m e n g g u n a k a n
m e to d e re sp o m e aurface. M e to d e respon.se su tfa c e d ig u n a k a n u n tu k m e lih a t p e n g a ru h
p e rla k u a n k o n s e n tra s i n itra t d a u fo sfa t te rh a d a p p ro d u k s i lip id m ik ro a lg a . D a ta y a n g
d ip e ro le h d ia n a lis is d e n g a n m e n g g u n a k a n p ro g ra m s ta l ^ t i c a 10. B e n tu k d a n k o d e p e rla k u a n
s e jla i a n c a n g a n p e rc o b a a n d e n g a n siste m p e n g k o d e a n d a p a t d ilih a t p a d a T a b e l 4 d a n T a b e l 5
d , P e l a k s a n a a n p e n e li t ia n o p t i m a s i p e n ^ a r u h p H d a n s a li n i t a s d a n p a r a m e t e r y a n g d i a m a t i
O p tim a s i f a k to r lin g k u n g a n p H d a n s a lin ita s d ila k s a n a k a n p a d a jen is m e d iu m d e n g a n
k o n s e n tra s i n itra t d a n p o s fa t sesu ai d e n g a n hasil t itik o p tim u m s e b e lu m n y a . K u ltiv a si
d ila k u k a n d a la m e r lc n m e y e r 2 0 L d e n g a n p H d a n s a lin ita s se su a i d e n g a n p e rla k u a n p ad a
ra n c a n g a n p e rc o b a a n , s u h u 2 8 ± 2 °C, in te n s ita s c a h a y a L 2 ± 0 ,5 k lu x d e n g a n p e rb a n d in g a n
te ra n g d e n g a n g e la p 1 2 : 1 2 ja m , d an d ila k u k a n a e ra s i d e n g a n m e n g a lirk a n u d a ra k e d a la m m e d ia . P e n g a m a ta n te r h a d a p p a ra m e te r p e n e litia n d ila k u k a n p a d a a k h ir m a s a k u ltiv a s i
te rh a d a p k o n s e n tra s i lip id ( m e to d e B lig h a n d d iy e r ) d a n b e ra t k e rin g b io m a s s a sel. H asil
o p tim u m p ro d u k s i lip id p ad a p H d a n s a lin ita s in i in i s e la n ju tn y a d ip e r g u n a k a n s e b a g a i u n tu k
p ro s e s p ro d u k s i d a la m s k a la y a n g leb ih b e sa r.
l ab el 4. P e rla k u a n d a n k o d e p e rla k u a n
P e rla k u a n K o d e p e rla k u a n
- 1 ,4 1 4 -1 0 I 1,414
Ph 4 ,5 9 5 6 7 7.41
S a l i n i t a s ( p p t ) 2 2 ,9 3 25 3 0 35 3 7 ,0 7
T a b e l 5. R a n c a n g a n p e r c o b a a n d e n g a n s i s t e m p e n g k o d e a n
N o K o d e p H K o d e s a l i n i t a s p H S a l i n i t a s ( p p t)
l -1 - i 5 25
2 1 -1 7 25
3 -1 1 5 3 5
4 l i 7 35
5 - L414 0 4,59 30
6 1.414 0 7 30
7 0 -1.414 6 22,93
K 0 1.414 6 37,07
9 0 0 6 30
10 0 0 6 3 0
11 0 0 6 30
12 0 0 6 3 0
4*4.5. E k s t r a k s i L ip id d a n P r o f il A s a in L e m a k
M ik ro a lg a d ik u ltiv a s i se su a i d e n g a n je n is m ed ia , k o n d isi n u tris i d a n lin g k u n g a n
o p tim a l s e rta w a k tu p a n e n y a n g te p a t. B io m a ss a y a n g d ih a s ilk a n d a ri p ro s e s k u ltiv a s i p a d a
k o n d is i o p t i m a l d ip a n e n d a n d ik e rin g k a n d e n g a n m e n g g u n a k a n o v e n p a d a s u h u
s e te la h k e rin g , b io m a s s a d iu k u r k a d a r airn v a . E k s tra k a s a m le m a k d ila k u k a n d e n g a n
m e n g a m b il 20 g r b u b u k m ik ro a lg a d ie k s tra k d e n g a n 150 m l p e la ru t N -h e k s a n d a la m d e n g a n
m et o d e s o k le t s e la m a 7 jam ( K a w a r o e e t a l, 2 0 1 2 ). L e m a k y a n g d ih a s ilk a n d a r i p ro s e s
e k s tra k s i in i k e m u d ia n di a n a lis a p ro fil a s a m - a s a m le m a k n y a d e n g a n m e n g g u n a k a n G C d a n
G C -M S .
4*5. L u a n m / I n d i k a t o r c a p a ia n P e n e li t ia n T a l i u n I
L u a ra n p e n e litia n ta h u n k e-1 a d a la h (1 ) d ip e ro le h w a k tu p a n e n y a n g te p a t d e n g a n
k o n s e n tra s i b io m a s s a te itin g g i. (2) d ip e ro le h j e n i s m e d ia y a n g te p a t d a la m m e m p ro d u k s i lip id te rtin g g i, (3 ) d ip e ro le h k o n d is i o p tim u m k o n s e n tra s i n itra t d a n p o sfa t d a la m m e m p ro d u k s i
lip id te rtin g g i, ( 4 ) d ip e ro le h k o n d isi o p tim u m k o n d is i p H d a n s a lin ita s d a la m m e m p r o d u k s i
lip id te rtin g g i. ( 5 ) d ip e ro le h p ro fil a s a m -a s a m le m a k p e n y u s u n lipid. (6) d ip e ro le h b io m a s s a d a n lip id p o te n tia l u tk d ik e m b a n g k a n se b a g a i s u p le m e n m a k a n a n . (7 ) p e n g a ju a n m a k a la h
u n tu k p u b lik a si di ju r n a l n a s io n a l te ra k re d ita s i b e rto p ik “ o p tim a s i p r o d u k s i lip id d a ri
m ik ro a lg a N a m o cM o ro p sis sp ”
4 .6 . P r o s e d u r A n a lis a
A n a l isis y a n g m e lip u ti k o n s e n tra s i b io m as a , k a d a r air, k a d a r lem ak , p ro te in , p ro fil lip id . d a n
p ro te in a d a la h se b a g a i b e rik u t
a. A n a lis a k o n s e n tra s i b io m a s a d e n g a n m e to d e C o s ta et a l ,(2 0 0 2 ). B io m a s s a d ia m b il
s e b a n y a k 5 m l, d im a s u k k a n ke d a la m ta b u n g falk o n . S e la n ju tn y a d is e n trifu g a s i d e n g a n
k e c e p a ta n 3 0 0 0 rp m s e la m a 5 m en it. E n d a p a n b io m a s s a y a n g d ih a s ilk a n d ic u c i d e n g a n
a q u a d e s h lalu d is e n trifu g a s i u n tu k m e m is a h k a n b io m a s s a d a n a q u a d e s n y a . P e n c u c ia n
d ila k u k a n sa m p a i s a lin ita s a ir n y a 0 p p t. E n d a p a n b io m a s s a y a n g d ip e ro le h s e la n ju tn y a
d ik e rin g k a n d e n g a n o v e n p ad a su h u 80 °C se la m a 2 4 ja m . S e le la h k e rin g b io m a s s a
d itim b a n g .
b. K a d a r air. P e n e ta p a n k a d a r a ir d ila k u k a n d e n g a n m e n g g u n a k a n m e to d e o v e n (A O A C ,
1 99 8 ). S a m p e l d itim b a n g 0 ,5 g, d im a s u k k a n ke d a la m c a w a n o v en , s e la n ju tn y a
d ik e rin g k a n d a la m o v e n p a d a su h u 105°C h in g g a b e ra t k o n stan .
K a d a r a ir ( % ) = (k e h ila n g a n b e ra t s a m p e l/ b e ra t s a m p e l) x 10 0
c. K a d a r le m a k . P e n e ta p a n k a d a r le m a k N an n o ch lo ro p sis sp. d e n g a n p e rla k u a n je n is m ed ia
d a n p e rla k u a n k o m b in a s i n itra t d a n fo s fa t d ila k u k a n d e n g a n m e n g g u n a k a n m e to d e
e k s tra k s i so x h le t (S u d a rm a d ji et a!„ 1 9 84 ). S e b e lu m d ig u n a k a n lab u le m a k d io v e n d a n
d itim b a n g te rle b ih d a h u lu . S a m p e l b u b u k d itim b a n g 1 g. S a m p e l d ibu n g k u s d e n g a n k e rta s
sa rin g , d a n d ie k s tra k s i so xh!et m e n g g u n a k a n p e la ru t h e k s a n s e la m a ± 6 ja m . L a b u le m a k
liasil e k s tra k s i d io v e n d a n d itim b a n g s a m p a i te rc a p a i b e ra t k o n s ta n .
L e m a k ( % ) = (b e ra t le m a k b e ra t s a m p e l) x 100
d. K a d a r le m a k P e n e ta p a n k a d a r le m a k N an n o ch lo ro p sis sp. p a d a p e rla k u a n o p tim a s i
s a lin ita s d a n p H d ila k u k a n d e n g a n m e n g g u n a k a n m e to d e B lig h D y e r (P ra to m y o t et
a l.,2 0 0 5 ). S a m p e l s e b a n y a k 0 ,2 g d ila r u tk a n d e n g a n 3 ,8 m l c a m p u r a n k lo r o f o r m :
m e th a n o l d e n g a n p e rb a n d in g a n 1:2, la lu d iv o r te x s e la m a 10 m e n it D ita m b a h k a n
k lo ro fo rm s e b a n y a k 1 ,3 m l d a n d iv o r te x k e m b a li s e la m a 1 m en it. S e la n ju tn y a
d ita m b a h k a n 1,3 m l a q u a d e s lalu d iv o r te x 1 m e n it, s e h in g g a a k a n te r b e n tu k 2 fase. F a se
b a g ia n b a w a li d ia m b il d e n g a n h a ti- h a ti d a n le ta k k a n p a d a b o to l tim b a n g y a n g te la h
d ik e ta h u i b e ra tn y a . F a se b a g ia n a ta s ( s is a n y a ) d ita m b a h k a n 1,9 m l k lo ro fo rm d a n
d iv o r te x s e la m a 2 m e n it. S e la n ju tn y a d is e n tr iiiig a s i d e n g a n k e c e p a ta n 3 5 0 0 rp m s e la m a 5
m e n it s e h in g g a a k a n te rb e n tu k 2 fase lag i. F a s e b a w a h m e n g a n d u n g p e le t d a n fase a ta s .
F ase b a w a h d ia m b il d e n g a n h a ti-h a ti s u p a y a p e lle t tid a k te ra m b il, d im a s u k k a n k e b o to l
tim b a n g s e b e lu m n y a . U a p k a n p e la ru t d e n g a n o v e n p a d a su h u 5 0 °C s e la m a 2 ja m . L e m a k
y a n g d ih a s ilk a n la lu d itim b a n g
T o ta l lip id = ( W 1 - W 0 ) b k s x 1 0 0 ° o
W 0 = b e ra t a k h ir le m a k (g ); W l = b e ra t a w a i le m a k • p e la ru t (g ); b k s = b e ra t k e rin g
s a m p e l (g )
e. P e n e n tu a n p ro fil a s a m le m a k
• E k s tra s i lip id . T o ta l lip id y a n g d ie k s tra s i d a ri 1 g s a m p e l b a s a h m e n u ru t m e to d e B lig h
d a n D y e r ( P r a to m y o t et a l ,2 0 0 5 ). S a m p e l d ila r u tk a n d e n g a n k lo ro fo rm (m e n g a n d u n g
B H T 0.1 p p m ): m e th a n o l ( m e n g a n d u n g B H T 0,1 p p m ) d e n g a n p e rb a n d in g a n 2 :1 ,
d ic a m p u r d a n d ik e r in g k a n d e n g a n g a s n itro g e n . E s te r m etil a s a m le m a k y a n g d ip r e p a r a s i
d e n g a n k a ta lis a s a m tra n s m e tila s i to ta l lip id (1 0 m l a s a m s u lfu r 2 % d a la m m e th a n o l y a n g
d io v e n p a d a 80° C s e la m a 4 ja m ) . P e n a m b a h a n 5 m l s o d iu m k lo rid a 5 % , 5 ml h e k s a n
p a d a p o ta s iu m b ik a rb o n a t 2 % d a n s e la n ju tn y a d ifiltra s i m e la lu i so d iu m s u lfa t a n h y d r o u s
d a n d ik e r in g k a n d e n g a n g a s n itro g e n (C ris tie s , 1 9 8 2 ).
• A n a lis is a s a m le m a k (P ra to m y o t e t a l.,2 0 0 5 ). P e m is a lw ih d a n id e n tifik a s i a s a m le m a k
m e n g g u n a k a n g a s k ro m a to g ra fi d e n g a n k o lo m k a p ile r ( 3 U i n x 0 .2 5 m in . k e te b a la n 0 ,2 5
jim o l). G a s p e m b a w a m e n g g u n a k a n h e liu m p a d a 1,3 m l m e n it. S a m p e l y a n g d iije k s ik a n
s e b a n y a k 1 m l p a d a k o n d is i y a n g te la h d ite n tu k a n . K o lo m te m p e r a tu r 1 2 0 °C s e la m a 0 ,5
m e n it, g ra d ie n p a n a s 195° C p a d a k e la ju a n 18° C /m e n it, 195 s a m p a i d e n g a n 2 0 5 °C p a d a
k e la ju a n 3 °C m e n it, p e rb a ik a n 7 m en it, 205 h in g g a 2 2 0 °C p a d a k e la ju a n S ° C m e n it.
E s te r m etil a s a m le m a k y a n g d iid e n tifik a s i d e n g a n m e m b a n d in g k a n c a m p u ra n S t a n d a r d
d a n k u a n tita tif a d a la h p e rs e n ta s e lu a s to ta l asa m le m ak ,
4*7. T a h u n I I /T a h a p II : P r o d u k s i P r o t e in 4*7.1. P r o d u k s i P r o te in
T a h a p a n ta h a p a n p a d a p ro d u k s i p ro te in s e c a ra u m u m s a m a d e n g a n ta h a p a n p ad a
p ro d u k s i lip id y a itu d ia w a li d e n g a n p e r e m a ja a n k u ltu r, p ro p a g a s i sel m ik ro a lg a , o p tim a s i
f a k to r n u trisi d a n lin g k u n g a n d a n p e n e n tu a n p ro fil a s a m -a s a m a m in o . P e rb e d a a n y a n g ad a
h a n y a p a d a re s p o n p a r a m e te r y a n g d ia m a ti.
a* R a n c a n g a n p e r c o b a a n p e n g a r u h n i t r a t d a n p o s f a t te r h a d a p k a d a r p r o te in
R a n c a n g a n p e rc o b a a n y a n g d ig u n a k a n a d a la h C en tra l C 'otnposite D esrgfi (C C D ). D a ta
y a n g d ih a s ilk a n d a ri ra n c a n g a n p e rc o b a a n te rs e b u t a k a n d ia n a lis is d e n g a n m e n g g u n a k a n
m e to d e resp o m e su rfa c e. M e to d e respon.se su rfa ce d ig u n a k a n u n tu k m e lih a t p e n g a ru h
p e rla k u a n k o n s e n t r a t n itr a t d a n fo s fa t te r h a d a p p ro d u k s i lip id m ik ro a lg a . D a ta y a n g
d ip e ro le h d ia n a lis is d e n g a n m e n g g u n a k a n p ro g ra m s ta tis tic a 10. B e n tu k d a n k o d e p e rla k u a n
s e rta ra n c a n g a n p e rc o b a a n d e n g a n s is te m p e n g k o d e a n s a m a h a ln y a d e n g a n p ejila^u an p a d a
p ro d u k s i lip id . h a n y a sa ja re s p o n y a n g d ia m a ti a d a la h k a d a r p ro te in . P e rla k u a n d a p a t d ilih at
p a d a T a b e l 2 d a n T a b e l 3.
b . P e l a k s a n a a n p e n e l i t i a n o p t i m a s i p e n g a r u h n i t r a t d a n p o s f a t d a n p a r a m e t e r y a n g d i a m a t i
O p tim a s i f a k to r n u trisi d ila k s a n a k a n p a d a je n is m e d iu m d a n w a k tu p a n e n te rp ilih
d e n g a n m e m o d ifik a s i s e n y a w a n itra t ( N 0 3 ) d a n fo s fa t (P O4) d e n g a n k o n s e n tr a s i se su ai p e rla k u a n . K u ltiv a si d ila k u k a n d ala m e rle n m e y e r 2 L d e n g a n p H m e d ia 6 , s u h u 2 8 ± 2 °C ,
in te n s ita s c a h a y a 1 ,2 ± 0 .5 k lu x d e n g a n p e rb a n d in g a n te ra n g d e n g a n g e la p 1 2:1 2 ja m , s a lin ita s
3 0 ppL d a n d ila k u k a n a e ra s i d e n g a n m e n g a lirk a n u d a ra ke d a la m m ed ia. P e n g a m a ta n
te r h a d a p p a ra m e te r p e n e litia n d ila k u k a n p a d a a k h ir m a sa k u ltiv a s i te rh a d a p k o n s e n tra s i
p ro te in d a n b e ra t k e rin g b io m a s s a sel. H as il o p tim u m p ro d u k s i p ro te in p a d a k o n s e n tr a s i n itra t
d a n p o s fa t ini s e la n ju tn y a d ip e rg u n a k a n se b a g a i f a k to r te ta p p a d a p ro s e s o p tim a s i fa k to r
lin g k u n g a n (p H d a n s a lin ita s ) te rh a d a p p ro d u k si p ro te in .
c* R a n c a n g a n p e r c o b a a n p e n g a r u h p i l d a n s a lin it a s te r h a d a p k a d a r p r o te in
R a n c a n g a n p e rc o b a a n y a n g d ig u n a k a n a d a la h C en tra l C om posite D esign (C C D ). D a ta
y a n g d ih a s ilk a n d a ri ra n c a n g a n p e rc o b a a n te rs e b u t a k a n d ia n a lis is d e n g a n m e n g g u n a k a n
m e to d e resp o m e surface. M e to d e response su rface d ig u n a k a n u n tu k m e lih a t p e n g a ru h
p e rla k u a n k o n s e n tra s i n itra t d a n fo sfa t te rh a d a p p ro d u k s i p ro te in m ik ro a lg a . D a la y a n g
d ip e r o le h d ia n a lis is d e n g a n m e n g g u n a k a n p r o g r a m st^ li^ tie a 10. B e n tu k d a n k o d e p e rla k u a n
s e rta ra n c a n g a n p e rc o b a a n d e n g a n s is te m p e u g k o d e a n d a p a t d ilih a t p a d a T ab el 4 d a n T a b e l 5.
d . P e l a k s a n a a n p e n e l i t i a n » p ti m a s i p c n p i r u h p i l d a n s a l i n i t a s d a n p a r a m e t e r y a n g «I ia m a t i
O p tim a s i fa k to r lin g k u n g a n p H d a n s a lin ita s d ila k s a n a k a n p a d a je n is m e d iu m d e n g a n
k o n s e n tra s i n itra t d a n p o s fa t s e s u a i d e n g a n h a sil titik o p tim u m s e b e lu m n y a . K u ltiv a s i
d ila k u k a n d a la m e r le n m e y e r 2 L d e n g a n p H d a n s a lin ita s s e su ai d e n g a n p e r la k u a n p a d a
ra n c a n g a n p e rc o b a a n , s u h u 2 8 ± 2 UC, in te n s ita s c a h a y a 1,2 ± 0 ,5 k lu x d e n g a n p e rb a n d in g a n
te ra n g d e n g a n g e la p 1 2 :1 2 ja m , d a n d ila k u k a n a e ra s i d e n g a n m e n g a lirk a n u d a ra ke d a la m
m e d ia . P e n g a m a ta n te r h a d a p p a r a m e te r p e n e litia n d ila k u k a n p ad a a k h ir m a sa k u ltiv a s i
te rh a d a p k o n s e n tra s i p ro te in d a n b e ra t k e rin g b io m a s s a sel. H asil o p tim u m p ro d u k s i lip id
p a d a pH
