i
AKTIVITAS ANTIMIKROBA EKSTRAK ETANOL UMBI BIT (Beta
vulgaris), EKTSTRAK KELOPAK BUNGA ROSELLA (Hibiscus sabdariffa)
dan PRODUK HERBAL “Y”
SKRIPSI
Untuk memenuhi sebagian persyaratan mencapai derajat Sarjana S-1
Diajukan Oleh:
SITI MULYANI
1108010046
Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Purwokerto
v
INTISARI
Menurut penelitian dari Rao (2014) menyebutkan bahwa buah bit (Beta vulgaris) memiliki aktivitas antibakteri pada Konsentrasi hambat minimum (KHM) 5 mg/ml terhadap Bacillus subtilis, Pseudomonas aeruginosa dan Escherechia coli sedangkan konsentrasi hambat minimum 0,5mg/ml terhadap Enterobacter aerogenes. KHM ekstrak etanol bunga rosella terhadap Escherichia coli, Salmonella typhy dan Stapylococcus aureus sebesar 0,20 mg/ml. Jenis penelitian ini adalah eksperimental dengan cara menguji aktivitas antimikroba pada ekstrak buah bit, ekstrak bunga rosella dan produk herbal Y. Pengukuran KHM dilakukan dengan parameter kekeruhan yang terlihat setelah di inkubasi. Parameter yang diamati adalah diameter zona hambat yang dihasilkan ekstrak buah bit untuk bakteri E. coli dengan konsentrasi 250 µg/ml, 50 µg/ml dengan masing – masing rataan 8,9 mm dan 6,8 mm sedangkan pada bakteri S. aureus tidak dapat menghambat pertumbuhan baketri, ekstrak bunga rosella hasil zona hambat yang didapat pada bektri E. coli dan S. aureus dengan konsentrasi 500 µg/ml , 250 µg/ml, 100 µg/ml dapat menghambat pertumbuhan bakteri dan produk herbal Y pada konsentrsi 60 % dan 50 % dapat menghambat bakteri E. coli dan S. aureus. Analisis data dilakukan dengan uji Analisis Varian (ANOVA) dan dilanjutkan dengan uji Least Significant Different (LSD) dengan tingkat kepercayaan 95%. Konsentrasi pada buah bit konsentrasi kontrol positif memiliki perbedaan yang signifikan terhadap semua konsentrasi, dan pada konsentrasi 100 µg/ml dengan 250 µg/ml tidak mempunyai perbedaan bermakna. Sedangkan untuk bunga rosella mempunyai perbedaan bermakna pada semua konsentrasi ekstrak.
ABSTRACT
According to the study of Rao (2014) states that beet(Beta vulgaris) have antibacterial activity in the minimum inhibitory concentration(MIC) of 5mg/ml against Bacillussubtilis, Pseudomona saeruginosa and Escherechia coli while the minimum inhibitory concentration of0.5 mg/ml again st Enterobacte raerogenes. MIC rosella flower ethanol extract against Escherichiacoli, Salmonella typhy and Stapylococcus aureus 0.20mg/ml. This type of research is experimental in a way to test the antimicrobial activity of the extracts of the fruit bits, rosella flower extracts and herbal products Y. MIC measurements performed with visible turbidity after incubation. Parameters measured were produced inhibition zone diameter fruit extract bits for the bacteria E.coliat a concentration of 250ug/ml, 50pg/ml with each – each averaging 8.9mm and 6.8mm, while the S.aureus bacteria can not be inhibits the growth of baketri, rosella flower extract result sobtained inhibition zone on bacteri E.coli and S.aureus at a concentration of 500 ug/ml, 250 pg/ml, 100 pg/ml can inhibit the growth of bacteria and herbal products konsentrsi Y at 60% and 50% can inhibit the bacteria E.coli and S.aureus. Data analysis was performed with Varian Analysis test(ANOVA) test followed by Least Significant Different(LSD) with aconfidence level of 95%. Concentrate onthe positive control bits concentration has significant difference to all concentration, and the concentration of 100 ug/ml to 250 pg/ml had no significant difference. As for rosella have significant differences in all the extract concentration.
vii
Ucapan Terimakasih
Sembah sujud serta syukur kepada Allah SWT. Taburan cinta dan kasih sayang- MU telah memberikanku kekuatan, membekaliku dengan ilmu.
Ibu Binar Asrining Dhiani, M.Sc.,Apt. dan Ibu Retno Wahyuningrum ,M.Si.,Apt selaku dosen pembimbing skripsi saya, terima kasih banyak...bu.., selama penyusunan skripsi, terimakasih atas bimbingan, nasehat dan kesabaran yang telah ibu berikan dalam penyusunan skripsi saya.
Seluruh Dosen, Laboran dan staff TU Terima kasih banyak untuk semua ilmu, didikan, bantuan dan pengalaman yg sangat berarti yang telah kalian berikan kepada kami semua…
Bapak, ibu, kakak – kakak ku dan keluarga besar ku terimakasih telah memberikan segala dukungan, semangat dan motivasi dalam mengerjakan skripsi. Sebagai tanda bakti, hormat, dan rasa terimaksih tiada tara
kupersembahkan karya ini untuk bapak, ibu, kakak – kakak ku dan keluarga besar ku.
Ato terimakasih atas kasih sayang, perhatian, nasehat dan memberikanku semangat dan inspirasi dalam menyelesaikan skripsi ini.
Buat sahabtku “Cyntia, Hani, Novita, Turi, Mbii, Lisa, Arum” terimakasih atas do’a, nasehat, hiburan dan semangat yang kalian berikan selama kuliah dan untuk semua keluarga besar kost puri nuran putri.
MOTTO
Orang yang kuat hatinya, Bukan mereka yang tidak pernah menangis, Melainkan Orang yang tetap tegar ketika banyak Orang menyakitinya.
Seberat apapun beban masalah yang kamu hadapi saat ini, percayalah bahwa semua itu tidak pernah melebihi batas kemampuan kamu.
Hargai dia yang membencimu, karena dia adalah penggemar yang telah menghabiskan waktunya hanya untuk melihat setiap kesalahanmu.
Jangan menyerah atas impianmu, impian memberimu
tujuan hidup. Ingatlah, sukses bukan kunci
kebahagiaan, kebahagiaanlah kunci sukses. Semangat !
Jangan iri atas keberhasilan oranglain, karena kamu tidak mengetahui apa yang telah ia korbankan ununtuk mencapai keberhasilannya itu.
ix
PRAKATA
Puji syukur Alhamdulillah penulis panjatkan kehadirat Allah SWT atas berkah, rahmat, taufik dan hidayah-Nya. Penyusun skripsi yang berjudul “Aktivitas Antimikroba Ekstrak Umbi Bit (Beta vulgaris), Ekstrak Kelopak Bunga Rosella (Hibiscus sabdariffa) dan Produk Herbal “Y” ” dapat
diselesaikan dengan baik.
Penulis menyadari bahwa dalam proses penulisan skripsi ini banyak mengalami kendala, namun berkat bantuan, bimbingan kerjasama dari berbagai pihak dan berkah dari Allah SWT sehingga kendala-kendala yang dihadapi tersebut dapat diatasi. Untuk itu pada kesempatan ini penulis menyampaikan ucapan terimakasih kepada :
1. Drs. H. Syamsuhadi Irsyad, SH, M.H. Rektor Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
2. Dr. Nunuk Aries Nurulita, Apt. Selaku Dekan Fakultas Farmasi.
3. Binar Asrining Dhiani, M.Sc.,Apt selaku dosen pembimbing I, yang telah memberikan petunjuk dan motivasi yang tinggi, sehingga penyusunan skripsi ini dapat terlaksana hingga selesai.
4. Retno Wahyuningrum ,M.Si.,Apt selaku dosen pembimbing II, yang telah memberikan bimbingan, arahan dan petunjuk dalam penyusunan skripsi ini dengan penuh kesabaran, ketekunan, sehingga dapat diselesaikan dengan baik.
5. Seluruh dosen Fakultas Farmasi UMP yang telah memberikan ilmunya sehingga dapat membantu penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.
7. Bapak dan ibu karyawan TU Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto yang telah membantu dalam hal administrasi. 8. Kedua orang tuaku tersayang Bapak H. Sodikun dan ibu Hj. Siti Tarmini,
serta seluruh keluarga besar yang telah memberikan dukungan moral, material dan spiritual.
9. Teman-teman satu angkatan Farmasi 2011 dan sahabat-sahabatku tersayang.
10.Semua pihak yang tidak bisa disebutkan satu persatu yang telah turut mendukung dan membantu penyelesaian skripsi ini.
Penulis telah berusaha semaksimal mungkin agar penyusunan skripsi ini dapat tersusun dengan sempurna, namun penulis menyadari bahwa tanpa bantuan dari berbagai pihak penyusunan skripsi ini tidak akan berjalan baik. Dengan segala kerendahan hati dan lapang dada, penulis menerima kritik dan saran yang membangun dari para pembaca untuk kesempurnaan di masa datang.
Purwokerto,
xi
RIWAYAT HIDUP
Nama : Siti Mulyani NIM/Angkatan : 1108010046/2011
Tempat/Tanggal Lahir : Ciamis, 14 Februari 1992
Agama : Islam
Nama Orang Tua : H. Sodikun dan Hj. Siti Tarmini
Alamat : Desa Karangmulya RT 09/ RW 05, Kec. Padaherang, Kab. Ciamis.
Riwayat Pendidikan :
1. SMA : SMK Farmasi Majenang
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL ... i
HALAMAN PERSETUJUAN ... ii
HALAMAN PENGESAHAN ... iii
HALAMAN PERNYATAAN ... iv
INTISARI ... v
DAFTAR LAMPIRAN ... xviii
BAB I PENDAHULUAN A. Latar Belakang ... 1
B. Rumusan Masalah ... 2
C. Tujuan Penelitian... 3
D. Manfaat Penelitian... 3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA A. Buah Bit (Beta vulgaris) ... 4
B. Bunga Rosella (Hibiscus sabdariffa) ... 5
1. Klasifikasi ... 5
xiii
b. Staphylococcus aureus ... 6
2. Jamur ... 7
a. Candida albicans... 7
b. Aspergilus ... 7
D. Uji Aktivitas Antimikroba ... 7
1. Metode difusi... 7
a. Metode disc diffusion ... 7
b. E-test... 7
c. Ditch-plate technique ... 8
d. Cup-plate technique... 8
e. Gradient-plate technique ... 8
2. Metode dilusi ... 9
a. Metode dilusi cair/broth diluton test ... 9
b. Metode dilusi padat/ solid dilution test ... 9
3. Uji aktivitas antifungi ... 10
BAB III METODOLOGI PENELITIAN A. Jenis Rancangan dan Penelitian ... 11
B. Variabel Penelitian ... 11
C. Definisi Variasi Operasional ... 11
D. Waktu Dan Tempat Penelitian ... 12
E. Alat Dan Bahan 1. Alat ... 12
2. Bahan ... 12
F. Cara Penelitian ... 13
1. Pengambilan Bahan ... 13
2. Determinasi Tanaman ... 13
3. Pembuatan Ekstrak Buah Bit dan Ekstrak Bunga Rosella ... 13
4. Pembuatan Seri Konsentrasi Ekstrak Buah Bit dan Bunga rosella ... 14
5. Pembuatan Seri Konsentrasi Produk Herbal Y ... 14
6. Uji Aktivitas Antimikroba (Antibakteri dan Antifungi) ... 15
a. Sterilisasi ... 15
b. Pembuatan medium ... 15
2) Nutrient Broth (NB) ... 15
3) Pembuatan medium agar untuk yeast ... 15
4) Pembuatan Medium Potato Dextrose Agar (PDA) ... 16
c. Peremajaan Biakan Murni ... 16
d. Penanaman Mikroba Uji ... 16
e. Perhitungan Jumlah Mikroba Uji ... 17
f. Penentuan Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) ... 17
g. Uji Aktivitas Antibakteri dan Fungi Dengan Metode Dilusi ... 18
h. Pengukuran Zona Hambat ... 19
G. Analisis Data ... 20
BAB 1V HASIL DAN PEMBAHASAN A. Determinasi Tanaman ... 21
B. Pengolahan Simplisia ... 21
1. Penyerbukan ... 21
2. Pembuatan Ekstrak Etanol Bah Bit dan Bunga Rosella ... 21
3. Uji Aktivitas Antimikroba ... 22
a. Penentuan Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) ... 22
b. Uji Aktivitas Antimikroba Dengan Metode Difusi ... 26
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN A. Kesimpulan... 33
B. Saran ... 33
xv
DAFTAR TABEL
Tabel 1
Rendemen ekstrak ... 22 Tabel 2
Absorbansi pada uji KHM ekstrak umbi bit ... 22 Tabel 3
Absorbansi pada uji KHM ekstrak kelopak bunga rosella ... 23 Tabel 4
Absorbansi pada uji KHM produk Y ... 24 Tabel 5
Hasil perhitungan diameter zona hambat ekstrak umbi bit ... 27 Tabel 6
Hasil perhitungan diameter zona hambat ekstrak kelopak bunga rosella ... 28 Tabel 7
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1
Ekstrak kental kelopak bunga rosella dan umbi bit ... 41 Gambar 2
Seri konsentrasi umbi bit ... 42 Gambar 3
Seri konsentrasi kelopak bunga rosella ... 42 Gambar 4
Hasil KHM ekstrak umbi bit pada A. brasiliensis ... 44 Gambar 5
Hasil KHM ekstrak umbi bit pada C. albicans ... 44 Gambar 6
Hasil KHM ekstrak umbi bit pada S. aureus ... 45 Gambar 7
Hasil KHM ekstrak umbi bit pada E. coli ... 46 Gambar 8
Hasil KHM ekstrak kelopak bunga rosella pada A. brasiliensis ... 46 Gambar 9
Hasil KHM ekstrak kelopak bunga rosella pada C. albicans ... 47 Gambar 10
Hasil KHM ekstrak kelopak bunga rosella pada S. aureus ... 47 Gambar 11
Hasil KHM ekstrak kelopak bunga rosella pada E. coli ... 48 Gambar 12
xvii
Gambar 13
Hasil KHM produk herbal Y pada C. albicans ... 50 Gambar 14
Hasil KHM produk herbal Y pada S. aureus ... 50 Gambar 15
Hasil KHM produk herbal Y pada E. coli ... 51 Gambar 16
Hasil uji aktivitas ekstrak umbi bit pada E. coli ... 53 Gambar 17
Hasil uji aktivitas ekstrak umbi bit pada S. aureus ... 54 Gambar 18
Hasil uji aktivitas ekstrak kelopak bunga rosella pada S. aureus ... 54 Gambar 19
Hasil uji aktivitas ekstrak kelopak bunga rosella pada E. coli ... 55 Gambar 20
Hasil uji aktivitas ekstrak kelopak bunga rosella pada C. albicans ... 56 Gambar 21
Hasil uji aktivitas antimikroba produk herbal Y E. coli ... 57 Gambar 22
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1
Surat determinasi buah bit (Beta vulgaris) ... 37
Lampiran
Surat determinasi bunga rosella (Hibiscus sabdariffa) ... 38
Lampiran 3
Alur penelitian ... 39
Lampiran 4
Ekstrak kental buah bit dan bunga rosella ... 40
Lampiran 5
Seri konsentrasi ekstrak ... 41
Lampiran 6
Hasil perhitungan ... 42
Lampiran 7
Hasil uji Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) ... 43
Lampiran 8
Hasil uji aktivitas antibakteri ... 52
Lampiran 9
Hasil uji ANOVA ... 58
Lampiran 10
Penentuan KHM ekstrak dan produk Y ... 61
Lampiran 11
Hasil uji T test KHM ekstrak dan produk Y ... 63
Lampiran 12
xix
Lampiran 13
