i
UJI IDENTIFIKASI BAKTERI ASAM LAKTAT ISOLAT 18A SECARA
FENOTIPIK
SKRIPSI
Diajukan untuk Melengkapi Tugas-Tugas dan Memenuhi Persyaratan untuk Mencapai Gelar Sarjana Kedokteran Hewan
Oleh
HENDRO SUKOCO
NIM. 1109005062
FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN
UNIVERSITAS UDAYANA
i
UJI IDENTIFIKASI BAKTERI ASAM LAKTAT ISOLAT 18A SECARA
FENOTIPIK
SKRIPSI
Diajukan untuk Melengkapi Tugas-Tugas dan Memenuhi Persyaratan untuk Mencapai Gelar Sarjana Kedokteran Hewan
HENDRO SUKOCO
NIM. 1109005062
Menyetujui / Mengesahkan :
Pembimbing I
Dr. drh. I Wayan Suardana, M.Si
NIP. 19700122 199512 1 001
Pembimbing II
Prof. Ir. Nyoman Semadi Antara, MP., Ph.D NIP. 19610923 198702 1 001
DEKAN FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN UNIVERSITAS UDAYANA
Dr. drh. I Nyoman Adi Suratma, M.P NIP. 19600305 198703 1 001
ii
Setelah mempelajari dan menguji dengan sungguh-sungguh kami berpendapat bahwa tulisan ini baik ruang lingkup maupun kualitasnya dapat diajukan sebagai skripsi untuk memperoleh gelar Sarjana Kedokteran Hewan.
Ditetapkan di Denpasar, tanggal ………
Panitia Penguji,
Dr. drh. I Wayan Suardana, M.Si Ketua
Prof. Ir. Nyoman Semadi Antara, MP.,Ph.D Sekretaris
Prof. Dr. drh. I Nyoman Suarsana, M.Si Anggota
dr. Komang Januartha Putra Pinatih, M. Kes Anggota
i
RIWAYAT HIDUP
ii ABSTRAK
Bakteri Asam Laktat (BAL) memiliki kemampuan dalam menghambat pertumbuhan bakteri patogen, salah satunya adalah BAL isolat 18A. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui spesies BAL dari isolat 18A yang diidentifikasi dengan uji konvensional dan uji KIT API 50 CH.
Penelitian ini merupakan penelitian observasional deskriptif, dengan objek penelitian berupa bakteri asam laktat isolat 18A asal kolon sapi bali. BAL isolat 18A direkulturisasi, dengan penumbuhan pada media MRS, uji katalase, dan pewarnaan Gram. Uji identifikasi isolat dengan uji produksi gas CO2, uji pertumbuhan pada NaCL 15%, uji pertumbuhan pada Suhu 100C, dan uji pertumbuhan pada pH 9,6. Konfirmasi isolat hasil identifikasi juga dilakukan dengan uji kit API (StandardAnalytical Profile Index) 50 CH.
Hasil rekulturisasi menunjukkan isolate 18A mampu tumbuh dengan baik pada media MRS broth, bersifat katalase negatif, Gram positif, berbentuk bulat, dan berantai. Hasil identifikasi mengindikasikan bahwa isolat 18A bersifat homofermentatif, mampu tumbuh pada suhu 100C, dan tidak tumbuh pada pH 9,6. Uji fermentasi dengan menggunakan perangkat kit API 50 CH, menunjukkan bahwa isolat 18A mampu mendegradasi 15 komponen gula, yaitu komponen gula no : 5, 10, 11, 12, 13, 22, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, dan 39.
Hasil identifikasi secara konvensional dapat disimpulkan bahwa isolate 18A merupakan genus Lactococcus. Dan berdasarkan uji konfirmasi menggunakan Kit API 50 CHL disimpulkan bahwa isolat 18A merupakan bakteri Lactococcus Lactis ssp lactis 1.
iii ABSTRACT
Lactic Acid Bacteria (LAB) is a bacteria that has the ability to inhibit the pathogenic bacteria growth, including isolates 18A. The aim of this study is to determine the species of LAB isolates 18A which were identified by conventional tests and API 50 CH test.
This study was a descriptive observational study, with lactic acid bacteria
isolates 18A obtained from bali cattle’s colon as an object. LAB isolates 18A then
were re-cultured, with growth in MRS media, catalase test, and Gram staining. Identification test were performed by CO2 production test, growth in the presence of 15% NaCl, growth at 10°C, and growth at pH 9.6. Confirmation test were performed using API 50 CH (Standard Analytical Profile Index).
The results indicated that LAB isolate 18A were able to grow MRS broth media, catalase-negative, Gram-positive, and spherical-chain in shape. Identification test revealed that the bacteria is homofermentative, were able to grow at 10°C, and do not grow at pH 9.6. Fermentation test using API 50 CH showed that LAB isolates 18A were able to degrade 15 sugar components, consist of no: 5, 10, 11, 12, 13, 22, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30 , 31, and 39.
Based on conventional identification results, it can be concluded that BAL isolates 18A is a Lactococcus. In addition, the result of API 50 CHL test showed that BAL isolates 18A is a Lactococcus lactis ssp lactis 1.
iv
UCAPAN TERIMA KASIH
Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa berkat rahmat dan karuniaNya penelitian dan penulisan skripsi yang berjudul
“Identifikasi Bakteri Asam Laktat Isolat 18A Secara Fenotipik” dapat terselesaikan. Skripsi ini ditulis sebagai salah satu syarat untuk mencapai gelar sarjana kedokteran hewan pada Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Udayana.
Pada kesempatan ini penulis menyampaikan ucapan terima kasih dan penghargaan yang setinggi-tingginya kepada :
1. Bapak Dr. drh. I Nyoman Adi Suratma, M.P, selaku Dekan Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Udayana.
2. Bapak Dr. drh. I Wayan Suardana, M.Si. selaku pembimbing pertama yang telah meluangkan waktu untuk membimbing dalam pelaksanaan penelitian dan penulisan skripsi sehingga skripsi ini dapat terselesaikan dan dengan diikutsertakan dalam program penelitian Hibah Bersaing 2014. 3. Bapak Prof. Ir. Nyoman Semadi Antara, MP., Ph.D selaku pembimbing
kedua yang telah meluangkan waktu untuk membimbing dalam pelaksanaan penelitian dan penulisan skripsi sehingga skripsi ini dapat terselesaikan.
4. Para dosen penguji yang telah memberi masukan yaitu Prof. Dr. drh. I Nyoman Suarsana, M.Si, dr. Komang Januartha Putra Pinatih, M. Kes, dan Dr. drh. I Gusti Ayu Agung Suartini, M.Si
5. Bu Nursini selaku Staf Bagian Laboratorium Biosains Universitas Udayana atas bantuan dan bimbingannya dalam proses penelitian ini. 6. Bapak dan Ibu dosen, staf pimpinan dan pegawai pada Fakultas
Kedokteran Hewan Universitas Udayana atas segala bimbingan dan bantuannya selama mengikuti masa perkuliahan sehingga penulis dapat meraih gelar sarjana kedokteran hewan.
v
selama ini sudah diberikan dengan penuh dengan kesabaran dan pengertian.
8. Kakak-kakak tercinta Haris Krisuma dan Yuli Koestini yang tanpa henti memberi dukungan dan segala kasih sayang sebagai saudara.
9. Yohana Maria Febrisky Bolly dan Ferbian Milas Siswanto yang selama ini memberikan semangat dan motivasi untuk menyelesaikan skripsi ini. 10.Sahabat-sahabatku tercinta yang selalu ada dan memberi semangat dalam
suka maupun duka Sriwahyuni, Yana, Annisa, dan Khoirul Anwar.
11.Teman-teman satu penelitian BAL yang dengan caranya masing-masing telah membantu kelancaran penelitian ini.
12.Rekan-rekan seperjuangan angkatan 2011B yang menemani perjuangan penulis selama mengikuti jenjang perkuliahan dan praktikum dari awal hingga akhir di Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Udayana, terimakasih atas segalanya.
Penulis menyadari skripsi ini masih jauh dari sempurna dan untuk itu segala kritik dan saran penulis harapkan demi sempurnanya skripsi ini. Sebagai akhir kata penulis berharap skripsi ini dapat bermanfaat bagi kita semua.
Denpasar, 3 Maret 2015
vi
2.3 Teknik Identifikasi Konvensional dan Uji Kit API 50 CHL……… 20
2.4 Kerangka Konsep ………. 21
BAB III METODE PENELITIAN………... 23
3.1 Objek Penelitian ………... 23
3.5.2 Uji Identifikasi Isolat 18A….………... 25
3.5.3 Konfirmasi Bakteri Asam Laktat Hasil Identifikasi dengan - Uji Kit API 50 CHL ………. 26
3.6 Analisis Data ……… 26
vii
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ……….. 27
4.1 Kultivasi Isolat 18A ……….. 27
4.1.1 Penanaman Pada Media MRS Broth ……… 27
4.1.2 Uji Katalase ……….. 28
4.1.3 Pewarnaan Gram ……….. 29
4.2 Uji Identifikasi Isolat 18A ……….. 31
4.2.1 Uji Produksi Gas CO2……….. 31
4.2.2 Uji Pertumbuhan Suhu 10oC ………... 31
4.2.3 Uji Pertumbuhan pada pH 9,6 ………. 32
4.2.4 Analisis Genus dari Isolat 18A ………... 32
4.3 Konfirmasi Bakteri Asam Laktat Hasil Identifikasi dengan Uji Kit 50 CHL ………. 34
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN……… 37
5.1 Kesimpulan ……….. 37
5.2 Saran ………. 37
viii
DAFTAR GAMBAR
Gambar Teks Halaman
1. Kerangka Konsep Penelitian ……… 22 2. Hasil Penanaman 18A Pada Media MRS Broth ……… 27 3. Hasil Uji Katalase Pada Isolat 18A………. 28 4. Hasil Pewarnaan Gram Isolat 18A yang Dilihat Di bawah Mikroskop
Dengan Perbesaran 1000 kali ………. 29
5. Hasil uji kit API 50 CHL inkubasi 24 jam ……… 34
ix DAFTAR TABEL
Tabel Teks Halaman
1. Perbedaan antara genus dalam bakteri asam laktat ………... 7
2. Karakteristik 3 sub grup genus Lactobacillus sp ……….. 8
3. Bakteriosin yang mengandung lanthionin ……… 12
4. Berbagai jenis bakteriosin Kelas II dan aktivitasnya ……… 13
5. Bakteriosin Kelas III yang dihasilkan oleh bakteri asam laktat ……… 14
6. Bakteriosin Kelas IV yang dihasilkan bakteri asam laktat……… 14
7. Beberapa bakteri asam laktat yang dapat menghasilkan bakteriosin … 15
8. Sirsak Sebelum dan Sesudah Fermentasi ……….. 18
9. Hasil Kultivasi Isolat 18A……….. 30
10.Hasil Uji Identifikasi Isolat 18A……… 32 11.Identifikasi Bakteri Asam Laktat Isolat 18A Menggunakan Kit API
50 CHL ……….
