Lampiran 1
SKEMA ALUR PIKIR
Latar Belakang
1. Jintan hitam merupakan tanaman herbal yang biasa digunakan sebagai bumbu makanan dan memiliki berbagai efek untuk keperluan medis. (Datta AK, Saha A, Bhattacharya A, Mandal A, Paul R, Sengupta S, 2012)
2. Jintan hitam memiliki beberapa aktivitas biologis, salah satunya adalah bersifat antifungal. (Al-Khalaf MI, Ramadan KS, 2013)
3. Dari senyawa aktif yang dimiliki jintan hitam, senyawa yang mempunyai efek antifungal yaitu timokuinon,timol, dan karvakrol. (Rahmawati A, Al-Anwary N, Sasongkowati R, 2012)
4. Oral candidiasis adalah penyakit infeksi oportunistik pada rongga mulut yang
disebabkan oleh infeksi jamur Candida albicans. (Meurman JH, Siikala E, Richardson M, Rautemaa R, 2007)
5. Oral candidiasis yang berhubungan dengan gigi tiruan disebut dengan denture
stomatitis, dimana terjadi pada 65-70% dari pemakai gigi tiruan. (Williams D,
Lewis M, 2011)
6. Denture stomatitis diobati dengan obat antifungal. Namun, obat tersebut
mempunyai efek samping yaitu mengakibatkan gangguan gastrointestinal, bersifat hepatotoksik serta terjadinya resistensi obat. (Pinto E, Pina-Vaz C, Salgueiro L, Goncalves MJ, Costa-de-Oliveira S, Cavaleiro C, et al, 2006) 7. Penelitian Mashhadian dan Rakhshandeh tahun 2005 di Iran menunjukkan
bahwa ekstrak metanol jintan hitam mempunyai daya antimikroba terhadap
Candida albicans.(Mashhadian NV, Rakhshandeh H, 2005)
9. Penelitian Haloci, Manfredini, Toska, Vertuani, Ziosi, Topi, dan Kolani tahun 2012 di Italia mengemukakan bahwa ekstrak biji jintan hitam mempunyai efek antimikroba terhadap Candida albicans. (Haloci E, Manfredini S, Toska V, Vertuani S, Ziosi P, Topi I, et al, 2012)
10. Penelitian Rahmawati, Al-Anwary, dan Sasongkowati pada tahun 2012 di Surabaya, Indonesia menunjukkan ada pengaruh pemberian infusa jintan hitam terhadap pertumbuhan jamur Candida albicans dengan nilai KHM adalah 20% dan KBM adalah 40%. (Rahmawati A, Al-Anwary N, Sasongkowati R, 2012)
Rumusan Masalah
Apakah terdapat perbedaan efek ekstrak jintan hitam terhadap Candida albicans
denture stomatitis dan Candida albicans (ATCC® 10231™)?
Tujuan Penelitian
a. Tujuan Umum
Untuk mengetahui apakah terdapat perbedaan efek ekstrak jintan hitam terhadap Candida albicans denture stomatitis dan Candida albicans (ATCC® 10231™).
b. Tujuan Khusus
1. Untuk mengetahui berapa konsentrasi Kadar Hambat Minimum (KHM) dan Kadar Bunuh Minimum (KBM) dari ekstrak jintan hitam terhadap Candida
albicansdenture stomatitis.
2. Untuk mengetahui berapa konsentrasi Kadar Hambat Minimum (KHM) dan Kadar Bunuh Minimum (KBM) dari ekstrak jintan hitam terhadap Candida
Hipotesa Penelitian
Hα : Terdapat perbedaan efek ekstrak jintan hitam terhadap Candida albicans
denture stomatitis dan Candida albicans (ATCC® 10231™).
Manfaat Penelitian
a. Manfaat Teoritis
Hasil yang diperoleh dari penelitian ini diharapkan mendapatkan nilai KHM dan KBM dari ekstrak jintan hitam terhadap pertumbuhan Candida albicans.
b. Manfaat Praktis
Mikroskop : amati klamidospora
Ada Tidak ada
Buat suspensi Candida albicans Tanam ulang
pada CMA Tumbuh Tidak tumbuh
Subjek berkumur dengan NaCl 0,9% selama 15 menit Swab dengan batang kapas steril pada daerah denture stomatitis
Tanam pada SDA dengan metode goresan berulang
Inkubasi dalam inkubator selama 24 jam pada suhu 37oC
Amati pertumbuhan jamur
Lampiran 2
SKEMA ALUR PENELITIAN
Sesuaikan kekeruhan dengan 0,5 McFarland
Biji jintan hitam (300 gram) dijemur sampai kadar air berkurang
Blender biji sampai jadi bubuk
Campur bubuk dengan etanol dan biarkan selama ½ jam Hasil dimasukkan ke tabung perkolasi, atur tetesan agar penarikan
ekstrak maksimal (20 tetes per menit)
Tambah pelarut secara terus-menerus dan jaga agar tidak kering
Hentikan jika cairan yang menetes berubah warna menjadi bening
Isi setengah bagian panci dengan air suling dan panaskan di atas kompor gas dan letakkan panci kecil diatasnya yang berisi hasil perkolasi
Larutan hasil perkolasi kemudian diaduk sampai mengental
Pindahkan larutan ke cawan yang lebih kecil agar lebih mudah diaduk Proses ini dihentikan setelah hasil perkolasi menjadi kental
seperti coklat yang dilelehkan
Dry freezing ekstrak pada wadah agar diperoleh ekstrak
Ke dalam 12 tabung reaksi diteteskan 1 ml
media MHB ( )
Pada tabung ke-1, teteskan 1 ml ekstrak jintan hitam dengan konsentrasi 100%
( )
Ambil 1 ml larutan pada tabung ke-1 dan masukkan
ke dalam tabung ke-2 Tabung ke-1 divortex
hingga homogen
Tabung ke-2 divortex hingga homogen (konsentrasi ekstrak
jintan hitam menjadi 50%)
Ambil 1 ml larutan pada tabung ke-2 dan masukkan
ke dalam tabung ke-3
Tabung ke-3 divortex hingga homogen (konsentrasi ekstrak
jintan hitam menjadi 25%)
Lakukan seterusnya sampai tabung ke-10
Pada tabung ke-11, tambahkan 1 ml formalin ( ) dan pada tabung ke-12, tambahkan 1 ml
aquades ( )
Tabung ke-11 dan ke-12 divortex hingga homogen
Pada setiap tabung, tambahkan 1 ml suspensi
Candida albicans ( )
Eramkan deretan tabung dalam inkubator suhu 37oC selama 24 jam
Perhatikan tabung mana yang terbentuk endapan pada dasar tabung ( ) dan mana
yang tidak
Tabung dengan konsentrasi terendah yang tidak terbentuk
endapan KHM
Tabung yang tidak terbentuk endapan dilakukan subkultur
pada SDA
Lakukan hal yang sama menggunakan
Candida albicans (ATCC® 10231™)
Lampiran 3
DEPARTEMEN BIOLOGI ORAL
FAKULTAS KEDOKTERAN GIGI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
PERBEDAAN EFEK EKSTRAK JINTAN HITAM TERHADAP
Candida albicansDENTURE STOMATITIS DAN
Candida albicans (ATCC® 10231™)
NO.
TANGGAL :
KUESIONER PENELITIAN
A. Data Responden
Isilah data-data di bawah ini.
1. Nama :
2. Umur :
3. Jenis Kelamin : 4. Alamat : 5. No. Telp / HP :
B. Kondisi Medis
Jawablah pertanyaan di bawah ini dengan baik dan benar.
1. Apakah Bapak/Ibu memiliki penyakit sistemik? (sakit gula, darah tinggi, jantung, dll)
A. Ya B. Tidak
2. Bila jawaban tidak, apakah Bapak/Ibu sedang meminum obat dari dokter?
C. Status Gigi Tiruan
Jawablah pertanyaan di bawah ini dengan baik dan benar. 1. Apakah Bapak/Ibu sedang memakai gigi palsu?
A. Ya B. Tidak
2. Sudah berapa lama Bapak/Ibu memakai gigi palsu?
………..
3. Berapa kali Bapak/Ibu dalam sehari membuka gigi palsu?
………
4. Apakah Bapak/Ibu merasakan sakit saat memakai gigi palsu?
A. Ya B. Tidak
5. Sudah berapa lama Bapak/Ibu merasakan sakit?
……….
D. Pemeriksaan Intra Oral
1. Gigi tiruan longgar.
A. Ada B. Tidak ada
2. Sisa makanan tertempel pada gigi tiruan.
A. Ada B. Tidak ada
3. Eritema lokal pada jaringan mukosa dibawah gigi tiruan.
4. Tipe Denture Stomatitis
A. Newton’s type I B. Newton’s type II
C. Newton’s type III
Kesimpulan Hasil Screening
Lampiran 4
LEMBAR PENJELASAN KEPADA CALON SUBJEK PENELITIAN
Selamat pagi Bapak/Ibu
Nama saya Steffi Carey, saat ini saya sedang menjalani pendidikan dokter gigi di Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Sumatera Utara. Saya akan mengadakan penelitian dengan judul “Perbedaan Efek Ekstrak Jintan Hitam terhadap
Candida albicans Denture Stomatitis dan Candida albicans(ATCC® 10231™)”.
Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui seberapa besar konsentrasi jintan hitam agar dapat bersifat menghambat dan menghentikan pertumbuhan jamur, serta untuk mengetahui apakah ada perbedaan efek jintan hitam terhadap kedua jenis jamur. Manfaat dari penelitian ini adalah untuk mengetahui nilai konsentrasi tersebut dan hasil penelitian ini dapat digunakan sebagai data awal untuk penelitian lanjutan.
Bapak/Ibu, penggunaan obat antijamur yang tersedia saat ini dapat menyebabkan rasa mual, muntah, dan diare. Hal inilah yang meyebabkan perlunya penelitian tentang tanaman herbal karena dianggap lebih aman untuk dikonsumsi.
Saya akan melakukan pemeriksaan rongga mulut terlebih dahulu kemudian Bapak/Ibu diminta untuk berkumur dengan air garam, kemudian saya akan melakukan pengambilan daerah yang terinfeksi jamur dengan batang kapas steril.
Partisipasi Bapak/Ibu dalam penelitian ini bersifat sukarela. Pada penelitian ini identitas Bapak/Ibu akan disamarkan. Hanya dokter peneliti, anggota peneliti, dan anggota komisi etik yang akan melihat data penelitian ini. Kerahasiaan data Bapak/Ibu akan dijamin sepenuhnya. Bila data Bapak/Ibu dipublikasikan kerahasiaan akan tetap terjaga.
Jika selama menjalankan penelitian ini ada keluhan, Bapak/Ibu dapat langsung menghubungi saya :
Nama : Steffi Carey No.HP : 085658193838
Demikian informasi ini saya sampakan. Atas bantuan, partisipasi, dan kesediaan waktu Bapak/Ibu, saya ucapkan terima kasih.
Medan, 2015 Peneliti,
Lampiran 5
LEMBAR PERSETUJUAN SETELAH PENJELASAN
(INFORMED CONSENT)
Saya yang bertanda tangan di bawah ini : Nama :
Umur : Jenis Kelamin : Alamat :
Setelah mendapat keterangan dan penjelasan secara lengkap pada penelitian yang berjudul :
Perbedaan Efek Ekstrak Jintan Hitam terhadap Candida albicansDenture
Stomatitis dan Candida albicans (ATCC® 10231™)
Maka dengan penuh kesadaran dan tanpa paksaan saya menandatangani dan menyatakan bersedia berpartisipasi dalam penelitian ini.
Medan, 2015
Peserta penelitian,
Lampiran 6
Lampiran 7
HASIL SKRINING PENDERITA DAN PENGAMATAN SAMPEL
1. Skrining penderita denture stomatitis
Karakteristik 01 02 03 04
Usia (tahun) 70 55 69 58
Jenis kelamin Pr Pr Pr Pr
Menderita penyakit sistemik + - - -
Meminum obat dari dokter - - - -
Lama pemakaian gigi tiruan (tahun)
10 5 5 5
Frekuensi membuka gigi tiruan 2x sehari 1x sehari 2x sehari 2x sehari Sakit saat memakai gigi tiruan - + + -
Lama sakit - 2 mggu 4-6 bln -
Gigi tiruan longgar + - + +
Sisa makanan tertempel di gigi tiruan
- - + +
Tipe denture stomatitis 1 2 2 2
Dari hasil skrining, dapat disimpulkan bahwa keempat penderita memenuhi kriteria untuk dilakukan isolasi daerah denture stomatitis.
2. Pengamatan sampel yang diisolasi
Hal yang diamati Sampel 1 Sampel 2 Sampel 3 Sampel 4 Koloni yang tumbuh pada media
SDA
- - + +
Terbentuk klamidospora pada media CMA
- - - +
Lampiran 8
HASIL UJI STATISITIK
Frequencies Statistics KHM_Candida_albicans _klinis KBM_Candida_albicans _klinis
N Valid 3 3
Missing 0 0
Mean 50.00000 50.00000
Std. Deviation .000000 .000000
Frequencies Statistics KHM_Candida_albicans _ATCC KBM_Candida_albicans _ATCC
N Valid 3 3
Missing 0 0
Mean 4.16667 9.37500
Std. Deviation 1.804220 5.412659
T-Test
Group Statistics
Kel N Mean
Std. Deviation
Std. Error Mean KHM 1 3 50.00000 .000000 .000000
Independent Samples Test
Levene's Test for
Equality of Variances t-test for Equality of Means
F Sig. t df
Sig. (2-tailed)
Mean Difference
Std. Error Difference
95% Confidence Interval of the Difference Lower Upper KHM Equal
variances assumed
16.000 .016 44.000 4 .000 45.833333 1.041667 42.941203 48.725464
Equal
variances not assumed
44.000 2.000 .001 45.833333 1.041667 41.351403 50.315263
KBM Equal variances assumed
16.000 .016 13.000 4 .000 40.625000 3.125000 31.948609 49.301391
Equal
variances not assumed
