ISOLASI DAN IDENTIFIKASI BAKTERI RESISTEN
TERHADAP ANTIBIOTIK DARI SAMPEL TANAH
DI RUMAH SAKIT WIJAYAKUSU
UNIVERSITAS
ISOLASI DAN IDENTIFIKASI BAKTERI RESISTEN
TERHADAP ANTIBIOTIK DARI SAMPEL TANAH
DI RUMAH SAKIT WIJAYAKUSUMA PURWOKERTO
LISNA YULIANIS 0808010093
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO
PURWOKERTO
2012
ISOLASI DAN IDENTIFIKASI BAKTERI RESISTEN
TERHADAP ANTIBIOTIK DARI SAMPEL TANAH
MA PURWOKERTO
PERNYATAAN
Yang bertanda tangan dibawah ini, saya :
Nama : Lisna Yulianis
NIM : 0808010093
Program studi : Farmasi
Fakultas / Universitas : Farmasi / Universitas Muhammadiyah Purwokerto
Menyatakan dengan sebenar-benarnya bahwa skripsi ini adalah hasil dari proses penelitian saya yang telah dilakukan sesuai dengan prosedur penelitian yang benar dengan arahan dari dosen pembimbing dan bukan hasil penjiplakan dari karya orang lain atau terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi, dan sepanjang pengetahuan penulis juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan orang lain kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.
Demikian pernyataan ini, dan apabila kelak dikemudian hari terbukti ada unsur penjiplakan maka saya bersedia mempertanggung jawabkan sesuai dengan ketentuan yang berlaku.
Purwokerto, Agustus 2012
Yang menyatakan,
Lisna Yulianis
INTISARI
LISNA YULIANIS. Isolasi dan Identifikasi Bakteri Resisten terhadap Antibiotik dari Sampel Tanah di Rumah Sakit Wijayakusuma Purwokerto.
Dibawah bimbingan BINAR ASRINING DHIANI dan RETNO WAHYUNINGRUM
Latar Belakang: Di lingkungan rumah sakit terdapat bakteri yang hidup dan berkembang pada udara, air, tanah, lantai, makanan dan benda-benda medis maupun non medis. Bakteri-bakteri tersebut dapat menyebabkan infeksi nosokomial yaitu infeksi yang terjadi dan diperoleh penderita selama dirawat di rumah sakit. Penyakit infeksi tersebut dapat diatasi dengan antibiotik tetapi sering terkendala oleh adanya faktor resistensi bakteri terhadap antibiotik yang telah ada.
Tujuan Penelitian: Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi bakteri yang berasal dari sampel tanah di Rumah Sakit Wijayakusuma dan mengidentifikasi resistensi bakteri hasil isolasi terhadap beberapa antibiotik serta mengidentifikasi jenis bakteri berdasarkan pengecatan Gram dan identifikasi biokimia.
Metode Penelitian: Jenis penelitian ini adalah non eksperimental deskriptif. Uji resistensi bakteri menggunakan Metode disc diffusion (tes Kirby & Bauer). Antibiotik yang digunakan yaitu amoksisillin, kloramfenikol, siprofloksasin, gentamisin dan oksitetrasiklin. Uji identifikasi bakteri menggunakan uji biokimia yaitu uji oksidase, uji katalase, uji fermentasi karbohidrat, uji methyl red, uji voges proskauer.
Hasil: Hasil isolasi bakteri yang diperoleh sebanyak 94 bakteri. Berdasarkan pengamatan makroskopis pada masing-masing biakan diperoleh hasil bahwa semua koloni mempunyai bentuk koloni bulat, elevasi koloni rata, struktur permukaan koloni halus dan koloni berwarna putih. Dari total isolat bakteri sebanyak 94, terdapat 54 bakteri yang resisten terhadap satu antibiotik dan terdapat 10 bakteri yang resisten terhadap dua antibiotik. Berdasarkan hasil pewarnaan bakteri dari 64 jumlah bakteri yang resisten terdapat 52 bakteri Gram positif dan 12 bakteri Gram negatif. Bakteri hasil identifikasi yang resisten terhadap 2 antibiotik terdapat 10 bakteri yaitu bakteri WK-5, WK-26, WK-80 dan WK-49 termasuk dalam genus Bacillus. Bakteri WK-76 dan WK-84 termasuk dalam famili Enterobacter. Bakteri WK-9, WK-45 dan WK-91 termasuk dalam genus Streptococcus. Bakteri WK-74 termasuk dalam genus Micrococcus.
Kesimpulan: Dari sampel tanah di rumah sakit Wijayakusuma Purwokerto diperoleh 94 bakteri yang dominan, 64 bakteri resisten terhadap antibiotik, 52 termasuk bakteri Gram positif dan 12 bakteri gram negatif. Dari 10 bakteri yang resisten terhadap 2 antibiotik, kemungkinan terdapat beberapa jenis bakteri dari genus Bacillus, Sterptococcus, Enterobacter dan Micrococcus.
Kata Kunci: isolasi dan identifikasi bakteri, bakteri resisten, antibiotik, sampel tanah, Rumah Sakit Wijayakusuma Purwokerto.
ABSTRACT
LISNA YULIANIS. Isolation and Identification of Antibiotic Bacteria Resistant from Soil Samples in Wijayakusuma Hospital.
Under Supervision of BINAR ASRINING DHIANI and RETNO WAHYUNINGRUM
Background: In the hospital environment there are bacteria that live in the air, water, soil, floor, food, medical and non-medical apparatus. This bacteria can cause nosocomial infections which acquired and obtained during hospitalization. Infectious diseases can be treated by antibiotics but it often problem by caused by this bacterial resistant to antibiotics.
Objetive: The purpose of research was to isolate bacteria from soil samples on Hospital Wijayakusuma and identified the resistance of bacteria isolate of bacteria isolate toward some antibiotics as well as identified the family of bacteria based on Gram staining and biochemical characteristic.
Methods: The method of this research was descriptive non-experimental. Bacterial resistance test used the disc diffusion method (Kirby & Bauer test). Antibiotic which was used were amoxicillin, chloramphenicol, ciprofloxacin, gentamicin and oxytetracycline. Identification bacteria with biochemical test used oxidase test, catalase test, carbohydrate fermentation test, methyl red test and Voges proskauer test.
Result : The research was succeded to isolate 94 bacteria. Based on macroscopic observations of each culture showed that all colonies morphology was round, average elevation showed smooth surface structure and white color colonies. From the total of 94 bacteria, there were 54 bacteria resistant to one antibiotic, and there were 10 bacteria resistant to two antibiotics: amoxicillin and chloramphenicol. Based on the staining of bacteria from 64 resistant bacteria there were 52 bacteria Gram positive and 12 bacteria Gram negative. Identification of bacteria resistant exhibited that bacteria WK-5, WK-26, WK-80 and WK-49 belonged to the genus Bacillus. Bacteria WK-76 and WK-84 belonged to the family Enterobacter. Bacteria-9 WK, WK-45 and WK-91 belonged to the genus Streptococcus. WK-74 bacteria belonged to the genus Micrococcus.
Conclusion:. From soil samples at hospital Wijayakusuma was isolated 94, 64 bacteria resistant to antibiotics, 52 bacteria Gram positive and 12 bacteria Gram negative. From the 10 bacteria which were resistant to two antibiotics, it suggested that some isolate of bacteria belonged to genus Bacillus, Sterptococcus, EnterobacterandMicrococcus.
Keyword : isolation and identification of bacteria, resistant bacteria, antibiotics, soil samples, Wijayakusuma Hospital Purwokerto.
PERSEMBAHAN
Skripsi ini kupersembahkan untuk...
APA n’ MAMAH yang senantiasa mencurahkan kasih sayang
dan untaian doa yang tiada henti serta pengorbanan yang tak
terbatas dan tak terbalas.
Kedua kakaku (teh aas n’ teh nita) serta adeku (de ibang) yang
selalu memberikan doa n’ semangatnya.
Keluarga besar wisma jayanti, moel, mono, t’fuji, vita, inul, tante,
mb nita, mb nurul, dini, wiwi makasih buat kebersamaan,
kekeluargaan, bantuan n’ semangatnya. Buat bunda, pak mico,
kakak gina n’ babay terimakasih atas persaudaraannya selama
ini. Semoga tali silaturahmi kita tetap terjaga.
Teman-teman farmasi angkatan 2008 makasih banyak buat
kebersamaan serta semangatnya.
Belahan jiwaku, seseorang yang akan mengisi hari-hariku dan
menemaniku, yang masih menjadi rahasia Allah SWT.
MOTTO
Usaha, do’a, ikhlas, sabar…
Waktu yang tlah berlalu takkan bisa terulang, so…lakukanlah
yang terbaik…
“Sesungguhnya Allah tidak akan mengubah nasib suatu kaum
kecuali kaum itu sendiri yang mengubah apa apa yang pada
diri mereka” (QS Ar-Rad: 11)
KATA PENGANTAR
Alhamdulillahhirobbil’alamin, puji syukur dan terimakasih penulis panjatkan kehadirat Allah SWT, Yang Maha Pengasih dan Penyayang, yang telah melimpahkan rahmat dan hidayah-Nya sehingga penulis mampu menyelesaikan skripsi ini yang berjudul “ Isolasi dan Identifikasi Bakteri Resisten Terhadap Antibiotik Dari Sampel Tanah Di Rumah Sakit Wijayakusuma Purwokerto”. Skripsi ini disusun sebagai salah satu syarat untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
Penulis sepenuhnya menyadari bahwasannya terselesaikannya skripsi ini tidak terlepas dari bantuan berbagai pihak. Oleh karena itu penulis ingin mengucapkan rasa terimakasih kepada:
1. Bapak Dr. Syamsuhadi Irsyad, S.H.,M.H. selaku Rektor Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
2. Bapak Drs. Moeslich Hasanmihardja, Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
3. Bapak dan Ibu Dosen Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto yang telah memberikan ilmunya.
4. Laboran Mikrobiologi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
5. Segenap Staf dan karyawan Tata Usaha Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
6. Kedua orang tua terima kasih atas doa dan dukungannya sampai selesainya skripsi ini.
7. Dinar, handri, moel, inul terima kasih atas segala bantuan dan dukungan selama penelitian.
8. Sahabat-sahabatku, terima kasih atas dukungan, kebersamaan dan canda tawa yang kalian berikan selama ini.
9. Teman-teman Farmasi angkatan 2008 terima kasih atas kebersamaan dan kekeluargaan yang kalian berikan selama ini.
10. Teman-teman kosan yang selalu ada dalam suka dukaku dan terimakasih atas kebersamaannya.
11. Kakak angkatan yang telah memberikan arahan kepada saya. 12. Semua pihak yang telah membantu hingga selesainya skripsi ini.
Dalam penyusunan skripsi ini penulis menyadari masih terdapat banyak kekurangan, untuk itu penulis mohon maaf. Saran dan kritik yang bersifat membangun sangat penulis harapkan demi penyempurnaan skripsi ini. Sebagai kata penutup, penulis berharap semoga penelitian ini dapat memberikan manfaat bagi penulis pada khususnya dan bagi pembaca pada umumnya.
Purwokerto, Agustus 2012
Lisna Yulianis
DAFTAR ISI
BAB I. PENDAHULUAN ... 1
A. Latar Belakang ... 1
B. Perumusan Masalah ... 2
B. Tujuan Penelitian ... 2
C. Manfaat Penelitian ... 2
BAB II. TINJAUAN PUSTAKA... 3
A. Bakteri ... 3
B. Isolasi Bakteri ... 4
C. Identifikasi Bakteri ... 5
D. Antibiotika ... 6
E. Uji Antibiotika ... 8
BAB III. METODE PENELITIAN... 10
A. Jenis dan Rancangan Penelitian... 10
B. Alat dan Bahan ... 10
C. Cara Penelitian ... 11
1. Tahap Persiapan... 11
a. Pengambilan Sampel ... 11
b. Sterilisasi Alat dan Bahan... 11
c. Pembuatan Medium Nutrient Agar ... 11
d. Isolasi bakteri ... 12
e. Perkiraan Jumlah Sel dan Stok Kultur... 12
2. Tahap Pelaksanaan... 13
a. Uji Resistensi Antibiotik... 13
b. Pewarnaan Gram Bakteri ... 14
3. Identifikasi Bakteri ... 14
a. Pembuatan Medium... 14
b. Uji Biokimia... 15
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN... 18
A. Isolasi Bakteri... 18
B. Uji Resistensi Terhadap Antibiotik ... 19
C. Pewarnaan Gram Bakteri ... 23
D. Uji biokimia ... 24
E. Identifikasi Bakteri... 27
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN... 28
B. Saran... 28
DAFTAR PUSTAKA... 29
LAMPIRAN... 31
DAFTAR TABEL
Halaman
1. Interprestasi zona hambat kirby-bauer terhadap pengujian antibiotik ... 13
2. Hasil uji biokimia ... 40
DAFTAR GAMBAR
Halaman
1. Hasil isolasi awal dari sampel tanah pada pengenceran 10-5……… 18
2. Hasil pemurnian dari isolat bakteri WK-90 ... 19
3. Hasil uji resistensi terhadap antibiotik ………. 19
4. Pewarnaan Gram bakteri pada bakteri WK-2 dan WK-8 ………. 24
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
1. Gambar isolat bakteri ... 32
2. Tabel hasil absorbansi ... 32
3. Gambar hasil uji resistensi ... 34
4. Tabel hasil uji resistensi ... 35
5. Gambar pewarnaan Gram bakteri ... 37
6. Tabel pewarnaan Gram bakteri... 38
7. Gambar hasil uji biokimia ... 39
8. Tabel Hasil uji biokimia ... 40
9. Surat Permohonan Ijin Pengambilan Sampel ... 41
10. Surat Balasan Ijin Penelitian ... 42
