GAMBARAN HISTOLOGI GINJAL TIKUS BETINA (Rattus rattus) YANG DIINJEKSI VITAMIN C DOSIS TINGGI DALAM JANGKA WAKTU LAMA
TIM PENELITI :
1. NI WAYAN SUDATRI, S.Si., M.Si, 2. IRIANI SEYAWATI, S.Si.,M.Si. 1. NI WAYAN SUDATRI, S.Si., M.Si, 2. IRIANI SEYAWATI, S.Si.,M.Si. 3. NI MADE SUARTINI, S.Si.,M.Si. 4. DWI ARIANI YULIHASTUTI, S.Si.,M.Si.
PROGRAM STUDI / JURUSAN BIOLOGI FAKULTAS MIPA
Latar Belakang
- Kesehatan adalah aset paling berharga bagi kita.
-Salah satu vitamin yang dibutuhkan untuk menjaga kesehatan tubuh adalah vitamin C.
- Fungsi vitamin C; meningkatkan sistem imunitas (daya tahan)
Tubuh, mempercepat proses penyembuhan serta membuat kulit lebih segar dan cerah .
- Saat ini untuk mendapatkan kulit cerah dan bersih dengan cara injeksi - Saat ini untuk mendapatkan kulit cerah dan bersih dengan cara injeksi vitamin C sudah banyak ditawarkan baik oleh dokter kulit maupun oleh
praktisi-praktisi kecantikan.
- Sekali injeksi vitamin C dosis yang diberikan sekitar 1000–4000 mg sedangkan
HATI
Organ detoksifikasi
Untuk mengetahui adanya kerusakan hati dilakukan uji kadar
Serum glutamate oxalloacetate transaminase (SGOT) dan Serum
glutamate pyruvate transaminase (SGPT)
Enzim-enzim ini
biasanya terkandung
dalam sel-sel hati. Jika hati terluka, sel-sel
hati menumpahkan enzim-enzim kedalam
hati menumpahkan enzim-enzim kedalam
GINJAL
Fungsi , yaitu menyaring dan mengeluarkan racun maupun kelebihan mineral dari dalam tubuh melalui urin.
Jika fungsi ginjal terganggu akibat peradangan atau karena penyakit batu ginjal maka dengan sendirinya tubuh akan mengalami keracunan.
Selain itu, indikasi adanya kerusakan atau penurunan fungsi ginjal bisa Selain itu, indikasi adanya kerusakan atau penurunan fungsi ginjal bisa dilihat dari kadar kreatinin plasma yang meningkat. Hal ini sebagai akibat ketidakmampuan ginjal mengeluarkan kreatinin ke dalam urin dan dalam jumlah besar kreatinin masuk kembali
1.2.1. Tujuan umum :
Mengetahui efek samping dari injeksi vitamin C dosis tinggi dalam jangka waktu yang lama terhadap kesehatan .
1.2.2 Tujuan khusus
1. Untuk mengetahui kadar kolagen kulit dan tulang tikus betina yang diinjeksi dengan vitamin C dosis tinggi.
2. Untuk mengetahui gambaran histologis hati tikus betina yang diinjeksi dengan vitamin C dosis tinggi.
3. Untuk mengetahui kadar SGPT dan SGOT plasma darah sebagai indikator kerja 3. Untuk mengetahui kadar SGPT dan SGOT plasma darah sebagai indikator kerja
hati tikus betina yang diinjeksi dengan vitamin C dosis tinggi. 4. Untuk mengetahui gambaran histologis ginjal tikus betina yang diinjeksi
dengan vitamin C dosis tinggi.
5. Untuk mengetahui kadar kreatinin plasma darah sebagai indikator fungsi ginjal tikus betina yang diinjeksi vitamin C dosis tinggi.
Bahan penelitian
Bahan utama yang digunakan dalam penelitian ini adalah vitamin C dosis tinggi (4000 mg/sekali injeksi) untuk manusia.
Hewan model yang digunakan adalah tikus betina dewasa usia 3-4 bulan dengan bobot badan antara 150-200 gram.
Dosis yang digunakan dikonversikan dari dosis yang digunakan pada manusia ke tikus. Faktor konversi dari tikus ke manusia adalah 0.14
Tahun sebelumnya
Sediaan Histologi Tulang
Ginjal:
-Kadar kreatinin -Histologi ginjal
Pemeliharaan hewan, aklimatisasi, berat badan awal
Persiapan kandang, vitamin C, zat-zat Kimia
Injeksi vitamin C dosis tinggi sesuai lama perlakuan
Berat badan akhir, pembedahan, plasma darah, organ hati, ginjal, kulit, tulang
TAHUN I
Kadar SGOT, SGPT plasma? Histologis ginjal ?
Pemeliharaan hewan, aklimatisasi, berat badan awal
Persiapan kandang, zat-zat Kimia
Perlakuan injeksi vitamin C dosis tinggi
Berat badan akhir, pembedahan, plasma darah, Panjang siklus estrus
Perkawinan, kemampuan reproduksi ada/tidaknya aborsi
TAHUN 2
Berat badan akhir, pembedahan, plasma darah, organ Ovarium
Kadar Estrogen,Progesteron Perkembangan embrio
Jumlah anak
Proses pembuatan blok parafin dan preparat histologi
1. Fiksasi ; BNF 10 %
2. Dehidrasi di dalam larutan etanol bertingkat 70%, 80%, 95%, dan alkohol absolut
3. Penjernihan (clearing) dengan larutan xilol tiga pemindahan, masing-masing tahap
berlangsung selama 60 menit pada suhu kamar.
4. Infiltrasi parafin dengan memasakkan jaringan pada parafin 4. Infiltrasi parafin dengan memasakkan jaringan pada parafin cair (suhu 60ºC) tiga
kali pemindahan masing-masing selama 45 menit.
5. Embeding/jaringan dibenamkan di dalam cetakan berisi parafin cair, kemudian
didinginkan dalam suhu kamar sehingga menjadi blok parafin. 6. Blok parafin disayat setebal 5μm dengan menggunakan
rotary microtome.
7. Kemudian sayatan diletakkan dipermukaan air hangat
Pewarnaan Hematoksilin Eosin (HE)
Potongan jaringan dalam parafin yang akan diwarnai dengan hematoxilin-eosin
diatur dalam rak untuk pewarnaan, kemudian diinkubasi pada suhu 60ºC selama 45 menit, setelah itu diletakkan pada suhu ruangan sampai dingin.
Selanjutnya dilakukan deparafinisasi melalui tahap-tahap pelarutan parafin dalam xilol sebanyak 3 kali, kemudian dilanjutkan dengan proses rehidrasi dalam alkohol
bertingkat 100%, 95%, dan 80%, 70%m masing-masing tahap berlangsungselama 5 menit, kemudian dimasukkan dalam akuades selama 10 celup atau sampai alkohol larut.
Proses selanjutnya adalah pewarnaan dalam hematoksilin dengan merendam slide dengan larutan hematoxilin selama 5 menit kemudian dicuci pada pada air mengalir selama 5 menit, dan dilanjutkan dengan pewarnaan menggunakan eosin selama 3 menit,
Setelah diwarnai dalam eosin, slide dimasukkan dalam larutan alkohol bertingkat dari 70%, 80%, 90%, sampai 100% masing-masing selama 10 celup., kemudian dilanjutkan dengan proses clearing menggunakan xilol sebanyak dua kali masing-masing selama 2 menit, setelah itu preparat ditutup dengan kaca penutup dengan media balsam
Analisis Data
Data yang didapatkan dianalisis secara statistika
dengan menggunakan software SPSS dan bila
terdapat pengaruh nyata atau sangat nyata akan
dilanjutkan dengan uji Duncan pada taraf
α
0.05 dan
α
0.01.Dan bila data tidak terdistribusi secara normal
α
0.01.Dan bila data tidak terdistribusi secara normal
Histologi ginjal dengan pewarnaan HE (pembesaran 400x) insert 300x)
Tabel 9. Uji ANOVA dan standar error Edema Glomelurus, Penyempitan kapsula
bowman, Kongesti glomelurus Histologi ginjal tikus betina (Mus musculus L.) yang diinjeksi vitamin C dosis tinggi dilanjutkan dengan ujiDuncans
( & &
)
!± ! " ! ± " #$ % &$± $ !' ' !± !
* ! ( $' !± ' #" #& $%± ' ) !"± " '# $ % ±" )$
+ " #! ( '! !± % ) '! !!± % )! )! !!± "! !! & ! ±" &
, )! ( '! !±$ !% '# !!± ! )" '' ± %" % ! ± #)
Tabel 10. Uji ANOVA dan standar error degenerasi di tubulus, inti piknotik di tubulus, infiltrasi sel radang, dan hemorragi ginjal tikus betina (Mus musculus L.) yang diinjeksi vitamin C dosis tinggi dilanjutkan dengan ujiDuncans
( & ' - - .
)
)
) !± "" & !± %) ' !± ! ' !±" $'
* ! ( $$)!± %% $ &%±$ &! % ''±! &) ' ! ± ')
+ " #! ( $) !± ! $& !!± $ ! * !±$ & $ ! ±" &
, )! ( #' !±' &' * #) !!±$ %& * ) ! ± "" & ! ±" &
