ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA
STEROID/TRITERPENOID DARI TINTA SOTONG
(Sepia recurvirostra)
SKRIPSI
OLEH:
DIAN PUSPITA SARI
NIM 131524032
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2016
ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA
STEROID/TRITERPENOID DARI TINTA SOTONG
(Sepia recurvirostra)
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
DIAN PUSPITA SARI
NIM 131524032
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
PENGESAHAN SKRIPSI
ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA
STEROID/TRITERPENOID DARI TINTA SOTONG
(Sepia recurvirostra)
OLEH:
DIAN PUSPITA SARI NIM 131524032
Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada tanggal : 26 Januari 2016 Disetujui Oleh:
Pembimbing II
Prof. Dr. Julia Reveny, M.Si., Apt. NIP. 195807101986012001 Pembimbing I
Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt. NIP. 195107231982032001
Panitia Penguji,
Dr. Panal Sitorus, M.Si., Apt. NIP.195310301980031002
Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt. NIP. 195107231982032001
Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt. NIP.195109081985031002
Dra. Herawaty Ginting, M.Si, Apt. NIP. 195112231980032002 Medan, Maret 2016
Disahkan Oleh: Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara Pejabat Dekan
Dr. Masfria, M.S., Apt. NIP 195707231986012001
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis ucapkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas segala limpahan berkat, rahmat dan karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penyusunan skripsi ini. Skripsi ini disusun untuk melengkapi salah satu syarat mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara, yang berjudul Isolasi dan Identifikasi Senyawa Steroid/Triterpenoid dari Tinta Sotong (Sepia recurvirostra).
Pada kesempatan ini, dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Ibu Dr. Masfria, M.S., Apt., selaku Pejabat Dekan Fakultas Farmasi yang telah menyediakan fasilitas kepada penulis selama perkuliahan di Fakultas Farmasi. Penulis juga mengucapkan terima kasih kepada almarhumah Ibu Dra. Aswita Hafni Lubis, M.Si., Apt., dan ibu Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt., selaku pembimbing yang telah memberikan waktu, bimbingan, motivasi dan saran selama penelitian hingga selesainya skripsi ini. Ucapan terima kasih juga penulis sampaikan kepada Prof. Dr. Julia Reveny, M.Si., Apt., selaku pembimbing yang telah membimbing dan memberikan petunjuk serta saran hingga selesainya skripsi ini. Ucapan terima kasih juga penulis sampaikan kepada Bapak Dr. Panal Sitorus, M.Si., Apt., selaku ketua penguji, Bapak Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt., dan Ibu Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt., selaku anggota penguji yang telah memberikan saran untuk menyempurnakan skripsi ini.
Ucapan terima kasih juga penulis persembahkan kepada Ibu Dra. Juanita Tanuwijaya, M.Si., Apt., selaku penasehat akademik yang selalu memberikan bimbingan kepada penulis selama masa perkuliahan, Bapak dan Ibu staf pengajar
v
Fakultas Farmasi USU yang telah banyak membimbing penulis selama masa perkuliahan hingga selesai.
Penulis juga mempersembahkan rasa terimakasih dan penghargaan yang tiada terhingga kepada Ayahanda Rusli dan Ibunda Suratni Sukaryadi tercinta, kakanda T. Mimi Agus Syahyadi, Novi Reandy Sasmita dan adik-adik tersayang Feby Apriliansyah Sasmita dan Reizky Ade Putra Liansyah yang selalu memberikan doa, nasehat, motivasi, semangat dan pengorbanan baik moril maupun materil dalam menyelesaikan skripsi ini.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa penulisan skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan, oleh karena itu penulis mengharapkan saran dan kritik yang membangun demi kesempurnaan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya di bidang farmasi.
Medan, Maret 2016 Penulis,
Dian Puspita Sari NIM 131524032
SURAT PERNYATAAN TIDAK PLAGIAT
Saya yang bertandatangan dibawah ini :
Nama : Dian Puspita Sari Nomor Induk Mahasiswa : 131524032 Program Studi : Ekstensi Farmasi
Judul Skripsi : Isolasi dan Identifikasi Senyawa Steroid/ Triterpenoid dari Tinta Sotong (Sepia
recurvirostra).
Dengan ini menyatakan bahwa skripsi ini ditulis berdasarkan data dari hasil pekerjaan yang saya lakukan sendiri, dan belum pernah di ajukan oleh orang lain untuk memperoleh gelar kesarjanaan di perguruan tinggi lain, dan bukan plagiat karena kutipan yang ditulis telah disebutkan sumbernya di dalam daftar pustaka.
Apabila di kemudian hari ada pengaduan dari pihak lain karena di dalam skripsi ini ditemukan plagiat karena kesalahan saya sendiri, maka saya bersedia menerima sanksi apapun oleh Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara, dan bukan menjadi tanggung jawab pembimbing.
Demikianlah surat pernyataan ini saya perbuat dengan sebenarnya untuk dapat digunakan jika diperlukan sebagaimana mestinya.
Medan, 18 Maret 2016 Yang membuat pernyataan,
Dian Puspita Sari NIM 131524032
vii
ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA STEROID/TRITERPENOID DARI TINTA SOTONG (Sepia recurvirostra)
yarat untuk memperolehgelar Sarjana bABSTRAK
Sotong merupakan kelas Cephalopoda yang banyak terdapat di perairan pesisir Eropa, Afrika, Asia dan Pasifik Selatan. Sotong merupakan makanan sejenis seafood dengan nilai gizi yang sangat tinggi, namun di Indonesia konsumsi sotong hanya sebatas pada daging saja sedangkan kantung tinta masih dianggap sebagai limbah. Golongan senyawa kimia pada daging dan tinta Sepia
recurvirostra diantaranya ialah steroid/triterpenoid. Senyawa steroid/triterpenoid
digunakan dalam bidang pengobatan sebagai kardiotonik, kontrasepsi oral dan antiinflamasi. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui karakteristik dari tinta sotong meliputi organoleptis, viskositas, bobot jenis dan pH, pemeriksaan golongan senyawa kimia dan isolasi senyawa steroid/triterpenoid dari tinta sotong (Sepia recurvirostra).
Ekstraksi dilakukan secara maserasi menggunakan pelarut n-heksana, ekstrak diuapkan dan di analisis secara kromatografi lapis tipis (KLT) dengan berbagai perbandingan pengembang, dilanjutkan isolasi menggunakan kromatografi lapis tipis (KLT) preparatif. Terhadap isolat yang diperoleh dilakukan uji kemurnian secara kromatografi lapis tipis 2 arah, selanjutnya di identifikasi secara spektrofotometri ultraviolet (UV) dan spektrofotometri infrared (IR).
Hasil karakteristik dari tinta sotong ialah berupa tinta berwarna hitam, bau khas, tidak berasa, viskositas 6500 poise, bobot jenis 4,9 g/ml dan pH tinta sotong konsentrasi 1% adalah 6,9. Hasil pemeriksaan golongan senyawa kimia diperoleh senyawa alkaloid, steroid/triterpenoid, saponin dan glikosida. Hasil isolasi diperoleh 2 isolat (a dan b) dengan fase gerak 1 (n-heksana-etilasetat) (80:20) dan fase gerak ke 2 benzene-etilasetat (80:20) isolat a memliki nilai Rf 0,58 dan isolat b dengan fase gerak 1 (n-heksana-etilasetat) (90:10) dan fase gerak ke 2 benzene-etilasetat (95:5) memiliki nilai Rf 0,88. Hasil analisis isolat secara spektrofotometri UV memberikan absorbansi maksimum pada panjang gelombang 202,40 nm dan secara spektrofotometri IR menunjukkan adanya gugus fungsi –OH, CH-alifatis, C=C, CH2, CH3 dan C=O. Isolat yang diperoleh termasuk golongan senyawa steroid/triterpenoid.
Kata kunci : Sotong, Sepia recurvirostra, isolasi,steroid/triterpenoid.
ISOLATION AND IDENTIFICATION OF STEROIDS / TRITERPENOID OF CUTTLEFISH INK (Sepia recurvirostra)
ABSTRACT
Cuttlefish is a cephalopodeclass commonly found in the coastal waters of Europe, Africa, Asia and the South Pacific. Cuttlefish is a type of seafood with very high nutrition, but in Indonesia cuttlefish consumption just meat alone and the ink sac is still regarded as wastes. Chemical compound of meat and ink of
Sepia recurvirostra contains steroid/triterpenoid. Steroids/triterpenoids as
chemical compound have been widely used in medicine as cardiotonic, oral contraseption and antiinflammatory effect. The aim of these research are characteristics of ink cuttlefish like organoleptis, viscosity, density and pH, Chemical compound analysis and isolation of steroids/triterpenoid compound.
The ink cuttlefish was extracted by maseration method using n-hexane as solvent. The n-hexane extract was fractionated by preparative methode using thin layer chromatography. The isolated was purified test using two-dimention of thin layer chromatography and identifications of pure isolat using ultraviolat spectrophotometry and infrared spectrophotometry.
Characteristics of the cuttlefish ink are the black form ink, specific scent, no taste, viscosity 6500 poise, density 4.9 g/ml and pH of ink consentration 1 % 6.9. Test results of phytochemistry screening showed content alkaloids, steroids/triterpenoids, saponins and glicoside. Results obtained insulation 2 isolates (a and b) with first mobile phase n-hexane-ethylacetate (80:20) and second mobile phase benzene-ethyl acetate (80:20), the isolation gave isolated ware Rf 0.58 from isolate a and isolate b with first mobile phase n-hexane-ethylacetate (90:10) and second mobile phase benzene-n-hexane-ethylacetate (95:5) ware Rf 0.88. The analyzations of isolate using UV spectrophotometry gave maximum absorbance in wave length 202.40 nm and IR spectrophotometry showed OH, CH-alifatis, C=C, CH2, CH3 and C=O as fungtional grups. The isolate were identified as steroids/triterpenoid as chemical compound.
ix DAFTAR ISI Halaman JUDUL ... i PENGESAHAN ... ii KATA PENGANTAR ... iv ABSTRAK ... v ABSTRACT ... vi
DAFTAR ISI ... vii
DAFTAR TABEL ... xi
DAFTAR GAMBAR ... xii
DAFTAR LAMPIRAN ... xiii
BAB I PENDAHULUAN ... 1 1.1 Latar Belakang ... 1 1.2 Perumusan Masalah ... 2 1.3 Hipotesis ... 3 1.4 Tujuan Penelitian ... 3 1.5 Manfaat Penelitian ... 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ... 5
2.1 Uraian Sotong ... 5
2.1.1 Morfologi sotong ... 5
2.1.2 Habitat sotong ... 6
2.1.2 Sistematika sotong ... 6
2.1.3 Manfaat tinta sotong ... 7
2.2 Kandungan Kimia ... 7
2.2.1 Alkaloida ... 7 2.2.2 Glikosida ... 7 2.2.3 Steroid/triterpenoid ... 8 2.2.4 Saponin ... 9 2.3 Ekstraksi ... 9 2.3.1 Metode ekstraksi ... 9 2.4 Kromatografi ... 10
2.4.1 Kromatografi lapis tipis ... 11
2.4.2 Kromatografi preparatif ... 12
2.5 Spektrofotometri ... 13
2.5.1 Spektrofotometri sinar ultra violet (UV) ... 13
2.5.2 Spektrofotometri sinar Infrared (IR) ... 13
BAB III METODE PENELITIAN ... 15
3.1 Jenis Rancangan Penelitian ... 15
3.2 Alat ... 15 3.3 Bahan ... 15 3.4 Lokasi Penelitian ... 16 3.5 Prosedur Penelitian ... 16 3.5.1 Penyiapan sotong ... 16 3.5.2 Identifikasi sotong ... 16 3.5.3 Preparasisotong ... 16 3.5.4 Penentuan pH ... 16 3.5.5 Penentuan viskositas ... 17
xi
3.5.7 Pembuatan larutan pereaksi ... 17
3.5.7.1 Larutan pereaksiasam klorida 2 N ... 17
3.5.7.2 Larutan pereaksi natrium hidroksida 2 N ... 17
3.5.7.3 Larutan pereaksi Bouchardat ... 18
3.5.7.4 Larutan pereaksi Mayer ... 18
3.5.7.5 Larutan pereaksi Dragendorff ... 18
3.5.7.6 Larutan pereaksi besi (III) klorida 1 % ... 18
3.5.7.7 Larutan pereaksi Libermann-Burchard ... 18
3.5.7.8 Larutan pereaksi Molish ... 18
3.5.7.9 Larutan pereaksi asam nitrat 0,5 N ... 18
3.5.8 Skrining golongan senyawa kimia ... 19
3.5.8.1 Pemeriksaan alkaloida ... 19 3.5.8.2 Pemeriksaan flavonoid ... 19 3.5.8.3 Pemeriksaan saponin ... 19 3.5.8.4 Pemeriksaan tanin ... 20 3.5.8.5 Pemeriksaan glikosida ... 20 3.5.8.6 Pemeriksaan antrakinon ... 20 3.5.8.7 Pemeriksaan steroid/triterpenoid ... 21 3.5.9 Pembuatan ekstrak ... 21
3.5.10 Analisa Ekstrak n-heksana secara KLT ... 21
3.5.11 Isolasi Senyawa steroid/triterpenoid secara KLT preparatif ... 22
3.5.12 Uji Kemurnian terhadap isolat ... 22
3.5.12.1Uji KLT dua arah ... 22
3.5.13 Identifikasi isolat ... 23
3.5.13.1 Identifikasi isolat dengan spektrofotometri UV ... 23
3.5.13.2 Identifikasi isolat dengan spektrofotometri IR 24
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 25
4.1 Hasil Identifikasi Sotong ... 25
4.2 Hasil Pemeriksaan Karakteristik ... 25
4.3 Hasil pemeriksaan Golongan Senyawa Kimia ... 25
4.4 Hasil Ekstrasi ... 26
4.5 Hasil Analisis Ekstrak Steroid/Triterpenoid secara KLT ... 26
4.6 Hasil Isolasi Senyawa Steroid/Triterpenoid secara KLT Preparatif ... 27
4.7 Hasil Uji Kemurnian Isolat ... 28
4.8 Hasil Identifikasi Isolat a dengan Spektrofotometri UV ... 29
4.9 Hasil Identifikasi Isolat a dengan Spektrofotometri IR ... 29
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 30
5.1 Kesimpulan ... 30
5.2 Saran ... 30
DAFTAR PUSTAKA ... 31
xiii
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
4.1 Hasil Pemeriksaan Golongan Senyawa Kimia dari Tinta Sotong
Sepia recurvirostra ... 26
4.2 Hasil Analisis Ekstrak Steroid/Triterpenoid secara KLT ... 27
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
2.1 Gambar struktur dasar steroid ... 8 2.2 Gambar struktur dasar triterpenoid ... 8
xv
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1. Gambar hewan sotong segar ... 33
2. Hasil identifikasi sampel ... 34
3. Gambar kantung dan tinta sotong... 35
4. Gambarbagan prosedur preparasi dan ekstraksi tinta sotong ... 36
5. Gambar bagan kerja penelitian ... 37
6. Gambar kromatogram steroid/triterpenoid secara KLT ... 38
7. Gambar kromatogram hasil KL preparatif... 39
8. Gambarkromatogram hasil KLT dua arah isolat a ... 40
9. Gambarkromatogram hasil KLT dua arah isolat b ... 41
10. Gambarspektrum UVdari senyawa isolat a ... 42
11. Gambarspektrum IR dari senyawa isolat a ... 43
12. Gambar alat yang digunakan... 44
13. Perhitungan bobot jenis dan viskositas tinta sotong... 45
