Penetapan Kadar Hidrokortison Asetat Dan Kloramfenikol Dalam Sediaan Krim Secara Spektrofotometri Derivatif Dengan Metode Zero Crossing

(1)

Lampiran 1. Gambar Krim yang Mengandung Hidrokortison Asetat dan Kloramfenikol

(2)

Lampiran 2. Komposisi krim merek X

Contoh produk yang mengandung hidrokortison asetat dan kloramfnikol 1. Chloramfecort® krim (PT. Kimia Farma)

No. Reg : DKL7212416529A1

Expire Date : Agustus 2017

Komposisi :

(3)

Lampiran 3. Gambar Alat

Gambar 2. Spektrofotometer UV-Vis (Shimadzu 1800)

Gambar 3. Neraca analitik (Mettler Toledo)

(4)

Lampiran 4. Bagan Alir Prosedur Penelitian a. Hidrokortison asetat

Dimasukkan ke labu 10 ml dan dicukupkan dengan etanol absolut sampai garis tanda

Dimasukkan ke labu 10mL dan dicukupkan etanol absolut sampai garis tanda

Dimasukkan ke labu 10 ml dan dicukupkan etanol absolut sampai garis tanda

Dimasukkan ke labu 10 ml dan

dicukupkan etanol absolut sampai garis tanda

diambil 5 ml

dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 mL

dilarutkan dan dicukupkan dengan etanol absolut

LIB II hidrokortison asetat 50 g/ml

6 g/ml 10 g/ml 12 g/ml 14 g/ml

diambil 1,2 mL diambil 2 ml diambil 2,4 ml

diambil 1,6 ml

Diambil 2,8 ml

diukur serapan maksimum

pada 200 -400 nm Serapan

Maksimum

Hidokortison asetat

ditimbang 50 mg

dimasukkan ke dalam labu tentukur 100 mL

(5)

Lampiran 4. (Lanjutan)

b. Pembuatan kurva kalibrasi hidrokortison asetat

kortiso

Persamaan regresi

dibuat kurva kalibrasi Larutan Standar Hidrokortison asetat

(6; 8; 10; 12; 14 g/ml )

diukur serapan pada 200-400 nm ditransformasikan ke serapan derivat pertama

ditransformasikan ke serapan derivat kedua

ditentukan zero crossing ditentukan panjang gelombang analisis

(6)

Lampiran 4. (Lanjutan) c. Kloramfenikol

Dimasukkan ke labu 10 ml dan dicukupkan etanol absolut sampai garis tanda

Dimasukkan ke labu 10 mL dan

dicukupkan etanol absolut sampai garis

diambil 5 ml

dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml

LIB II Kloramfenikol 50 g/ml

8 g/ml 12 g/ml 14 g/ml 16 g/ml

diambil 1,6 ml diambil 2,4 ml diambil 2,8 ml

diambil 2 ml

diambil 3,2 ml

diukur serapan maksimum

ditimbang 50 mg

(7)

d. pembuatan kurva kalibrasi kloramfenikol

Persamaan regresi

dibuat kurva kalibrasi Larutan Standar Kloramfenikol

(8; 10; 12; 14; 16 g/ml)

diukur serapan pada 200-400 nm ditransformasikan ke serapan derivat pertama

ditransformasikan ke serapan derivat kedua

ditentukan zero crossing ditentukan panjang gelombang analisis

(8)

e. Penetapan kadar sampel krim merek X

ditimbang

dikeluarkan isi tube, kemudian ditimbang tube kosong

ditimbang setara 25 mg hidrokortison asetat

dihitung kesetaraan kloramfenikol yang terkandung didalamnya (penimbangan dilakukan sebanyak 6 kali pengulangan)

dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml dilarutkan dengan etanol absolut

dihomogenkan dengan sonikator selama 15 menit dicukupkan dengan etanol absolut sampai garis tanda dihomogenkan

disaring

dibuang  10 ml filtrat pertama ditampung filtrat selanjutnya dipipet 0,5 ml

dicukupkan dengan etanol absolut sampai garis tanda

diukur pada 222.20 nm untuk hidrokortison asetat

dan 228.40 nm untuk kloramfenikol

dihitung Nilai Absorbansi

Kadar 10 tube

(9)

Lampiran 5. Spektrum Serapan Baku Hidrokortison Asetat dan Baku Kloramfenikol

A. Hidrokortison Asetat

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.28054

0.20000

0.10000

0.00000

-0.02973

Gambar 5. Spektrum serapan hidrokortison asetat konsentrasi 8 g/ml

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.35989

0.30000

0.20000

0.10000

0.00000

-0.03809

(10)

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.41477

0.30000

0.20000

0.10000

0.00000

-0.04217

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.52578

0.40000

0.20000

0.00000

-0.05206

(11)

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.61627

0.40000

0.20000

0.00000

-0.05932

nm.

201.13 250.00 300.00 350.00 399.44

A

b

s.

0.70000

0.60000

0.40000

0.20000

0.00000

Gambar 10. Tumpang tindih spektrum baku hidrokortison asetat (6 g/ml, 8

(12)

B. Kloramfenikol

nm.

201.13 250.00 300.00 350.00 399.44

A

b

s.

0.60000

0.40000

0.20000

0.00000

Gambar 11. Spektrum serapan kloramfenikol konsentrasi 8 g/ml

nm.

201.13 250.00 300.00 350.00 399.44

A

b

s.

0.60000

0.40000

0.20000

0.00000

(13)

nm.

201.13 250.00 300.00 350.00 399.44

A

b

s.

0.70000

0.60000

0.40000

0.20000

0.00000

nm.

201.13 250.00 300.00 350.00 399.44

A

b

s.

0.70000

0.60000

0.40000

0.20000

0.00000

(14)

nm.

201.13 250.00 300.00 350.00 399.44

A

b

s.

0.90000

0.80000

0.60000

0.40000

0.20000

0.00000

nm.

201.13 250.00 300.00 350.00 399.44

A

b

s.

0.90000

0.80000

0.60000

0.40000

0.20000

0.00000

Gambar 16. Tumpang tindih spektrum baku kloramfenikol (8 g/ml, 10 g/ml, 12

(15)

Lampiran 6. Spektrum Serapan Derivat Pertama Baku Hidrokortison Asetat dan Baku Kloramfenikol

A. Hidrokortison Asetat

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.01121

0.01000

0.00000

-0.01000

-0.01513

Gambar 17. Spektrum serapan derivat pertama hidrokortison asetat konsentrasi 6

g/ml

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.02000

0.01000

0.00000

-0.01000

-0.02013

Gambar 18. Spektrum serapan derivat pertama hidrokortison asetat konsentrasi 8

(16)

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.02000

0.01000

0.00000

-0.01000

-0.02013

Gambar 19. Spektrum serapan derivat pertama hidrokortison asetat konsentrasi 10 g/ml

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.02000

0.00000

-0.02000

-0.03013

(17)

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.02000

0.00000

-0.02000

-0.03013

Gambar 21. Spektrum serapan derivat pertama hidrokortison asetat konsentrasi 14 g/ml

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.03000

0.02000

0.00000

-0.02000

-0.03013

Gambar 22. Tumpang tindih spektrum derivat pertama hidrokortison asetat (6

(18)

B. Kloramfenikol

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.02000

0.00000

-0.02000

-0.03013

Gambar 23. Spektrum serapan derivat pertama kloramfenikol konsentrasi 8 g/ml

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.02000

0.00000

-0.02000

-0.03013

Gambar 24. Spektrum serapan derivat pertama kloramfenikol konsentrasi 10

(19)

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.02000

0.00000

-0.02000

-0.03013

g/ml

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.04000

0.02000

0.00000

-0.02000

-0.04013

(20)

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.04000

0.02000

0.00000

-0.02000

-0.04013

g/ml

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.03000

0.02000

0.00000

-0.02000

-0.04013

(21)

Lampiran 7. Spektrum Serapan Derivat Kedua Baku Hidrokortison Asetat dan Baku Kloramfenikol

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.00500

0.00000

-0.00513

Gambar 29. Spektrum serapan derivat kedua hidrokortison asetat konsentrasi 6

g/ml

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.00500

0.00000

-0.00513

(22)

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.00500

0.00000

-0.00513

g/ml

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.00500

0.00000

-0.00513

(23)

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.00500

0.00000

-0.00513

Gambar 33. Spektrum serapan derivat kedua hidrokortison asetat konsentrasi 14

g/ml

b. Kloramfenikol

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.00500

0.00000

-0.00500

-0.00913

(24)

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.00500

0.00000

-0.00500

-0.01000

-0.01130

Gambar 35. Spektrum serapan derivat kedua kloramfenikol konsentrasi 10 g/ml

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.00500

0.00000

-0.00500

-0.01000

-0.01530

(25)

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.00500

0.00000

-0.00500

-0.01000

-0.01530

Gambar 37. Spektrum serapan derivat kedua kloramfenikol konsentrasi 14 g/ml

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.00700

0.00500

0.00000

-0.00500

-0.01000

-0.01530

(26)

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.00700

0.00500

0.00000

-0.00500

-0.01000

-0.01530

Gambar 39. Tumpang tindih spektrum derivate kedua kloramfenikol (8 g/ml, 10

(27)

Lampiran 8. Spektrum Serapan Panjang Gelombang Analisis Hidrokortison Asetat dan Kloramfenikol

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.00500

0.00000

-0.00513

g/ml pada = 222.20 nm

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.00500

0.00000

-0.00500

-0.00913

(28)

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.0077

0.0000

-0.0100

-0.0200

-0.0300

-0.0332

` Gambar 42. Spektrum serapan derivat kedua campuran hidrortison asetat

(29)

Lampiran 9. Data Kalibrasi Baku Hidrokortison Asetat, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi

Kalibrasi serapan derivat kedua Hidrokortison Asetat pada panjang gelombang 222,20 nm

No. Konsentrasi ( g/ml) (X) Absorbansi (Y)

1. 0,0000 0,00000

2. 6,0000 0,00061

3. 8,0000 0,00080

4. 10,0000 0,00090

5. 12,0000 0,00121

6. 14,0000 0,00137

Perhitungan persamaan garis regresi

Maka, persamaan garis regresinya adalah

No. X Y XY X2` _Y2

1. 0,00000 0,00000 0,00000 0,00000 0,0000000000 2. 6,00000 0,00061 0,00366 36,00000 0,000000372 3. 8,00000 0,00080 0,00640 64,00000 0,00000064 4. 10,00000 0,00090 0,00900 100,00000 0,00000081 5. 12,00000 0,00121 0,01452 144,00000 0,000001464 6. 14,00000 0,00137 0,01918 196,00000 0,000001876

ΣX = 50 = 8,33

ΣY =

0,00489 = 0,000815

ΣXY = 0,05276 ΣY

(30)

Lampiran 9 . (Lanjutan)

Perhitungan Koefisien Korelasi (⥾) ⥾

⥾

=

⥾ = 0,9970

(31)

Lampiran 10. Data Kalibrasi Baku Kloramfenikol, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi

Kalibrasi serapan derivat kedua kloramfenikol pada panjang gelombang 228,4 nm.

No. Konsentrasi ( g/mL) (X) Absorbansi (Y)

1. 0,00000 0,00000

2. 8,00000 0,00146

3. 10,00000 0,00188

4. 12,00000 0,00239

5. 14,00000 0,00246

6. 16,00000 0,00291

Perhitungan Persamaan Garis Regresi

No. X Y XY` _X2 _Y2

1. 0,00000 0,00000 0,00000 0,00000 0,00000

2. 8,00000 0,00146 0,01168 64,00000 0,000002131 3. 10,00000 0,00188 0,0188 100,00000 0,000002534 4. 12,00000 0,00239 0,02868 144,00000 0,000005712 5. 14,00000 0,00246 0,03444 196,00000 0,000006051 6. 16,00000 0,00291 0,04656 256,00000 0,000008468

ΣX = 60 =10,00

ΣY = 0,0111

= 0,00185

ΣXY =

0,14016 ΣX

2_{= 760} ΣY2_{= 0,000025896}

(32)

Perhitungan Koefisien Korelasi (⥾)

⥾

⥾ =

⥾ = 0,997

(33)

Lampiran 11. Perhitungan Batas Deteksi (Limit of Detection, LOD) dan Batas Kuantitasi (Limit of Quantitation,LOQ) Hidrokortison Asetat Persamaan garis regresi hidrokortison asetat adalah

No. X Y Yi Y-Yi (10-5₎ _(Y-Yi)2₍₁₀-10₎

1 0,00000 0,00000 0,00001 -1 1

2 6,00000 0,00061 0,00061 0 0

3 8,00000 0,00080 0,00081 -1 1

4 10,00000 0,00090 0,00101 -11 121

5 12,00000 0,00121 0,00121 -0 0

6 14,00000 0,00137 0,00141 -4 16

Σ(Y-Yi)2 139

58,949.10-6

1,76847 g/ml

(34)

Lampiran 12. Perhitungan Batas Deteksi (Limit of Detection, LOD) dan Batas Kuantitasi (Limit of Quantitation,LOQ) Kloramfenikol

Persamaan garis regresi kloramfenikol adalah Y = 0,00018X + 0,00003

No. X Y Yi Y-Yi (10-5₎ _(Y-Yi)2 (₁₀-10₎

1 0,00000 0,00000 0,00003 -3 9

2 8,00000 0,00146 0,00147 -1 2

3 10,00000 0,00188 0,00183 5 25

4 12,00000 0,00239 0,00219 20 400

5 14,00000 0,00246 0.00255 -9 81

6 16,00000 0,00291 0,00291 0 0

Σ (Y-Yi)2 517

56,844.10-6

0,λ473 g/ml

(35)

Lampiran 13. Spektrum Serapan Derivat Kedua Sampel Krim Merek X

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.0069

0.0000

-0.0100

-0.0200

-0.0266

Gambar 43. Spektrum Serapan Derivat Kedua Sampel Krim Merek X

No Nama Absorbansi Deskripsi

1 Sampel 1 0,00099 Hidrokortison asetat

0,00147 Kloramfenikol

(36)

Lampiran 14. Hasil Analisis Kadar Hidrokortison Asetat Dan Kloramfenikol dalam sediaan Krim

1. Kadar hidrokortison asetat dalam sediaan krim (Tiap gram mengandung 25 mg hidrokortison asetat dalam satu tube)

Nama -si teoritis

( g/mL)

2. Kadar Kloramfenikol dalam sediaan krim (Tiap gram mengandung 20 mg kloramfenikol dalam satu tube)

(37)

Lampiran 15. Contoh Perhitungan Kadar Hidrokortison asetat danKloramfenikol dalam Sediaan Krim

i. Data penimbangan tuber krim merek X Berat tube merek X = 128,2868 g Berat 10 tube kosong = 28,5811 g

Berat krim X = 128,2868 g – 28,5811 g = 99,7057 g

ii. Perhitungan kadar untuk Hidrokortison asetat dan Kloramfenikol a.Perhitungan Kadar Hidrokortison asetat

Sediaan krim yang digunakan sampel krim merek X yang mengandung hidrokortison asetat 25 mg dan kloramfenikol 20 mg.

Ditimbang serbuk setara dengan 25 mg hidrokortison asetat, maka jumlah krim yang ditimbang adalah;

x

1= 25 mg x garis tanda. Larutan kemudian dihomogenkan, disaring, lebih kurang 10 mL filtrat pertama dibuang. Filtrat selanjutnya ditampung (larutan A).

Konsentrasi hidrokortison asetat larutan A x 1000 g = 500 g/ml Kemudian dari larutan A, dipipet 0,5 ml dan dimasukkan kedalam labu tentukur 25 mL dan diencerkan dengan etanol absolut hingga garis tanda (larutan B).

Konsentrasi hidrokortison asetat larutan B =

ml b. Perhitungan Kadar Kloramfenikol

Kemudian dihitung kesetaraan kloramfenikol yang terkandung dalam 1 g krim.

x

2 = garis tanda. Larutan kemudian dihomogenkan, disaring, lebih kurang 10 mL filtrat pertama dibuang. Filtrat selanjutnya ditampung (larutan A).

Konsentrasi kloramfenikol larutan A x 1000 g = 400 g/ml

(38)

Konsentrasi hidrokortison asetat larutan B =

ml

iii.) Contoh perhitungan kadar Hidrokortison Asetat dan Kloramfenikol dari sampel krim X:

Berat krim yang ditimbang adalah 0,9965 g, maka terlebih dahulu dihitung kesetaraan dengan hidrokortison asetat dan kloramfenikol.

Kesetaraan hidrokortison asetat = g

Konsentrasi hidrokortison asetat = x 1000 g = 498,2 g/ml

Konsentrasi teoritis hidrokortison asetat = x 0,5 ml = 9,964 g/ml

Absorbansi hidrokortison asetat pada derivat kedua pada panjang gelombang 222,20 nm adalah 0,00099

Kadar hidrokortison asetat dihitung dari persamaan regresi pada panjang gelombang analisis hidrokortison asetat Y = 0,00010X + 0,00001

Konsentrasi hidrokortison asetat:

(39)

Kesetaraan kloramfenikol = g

g 1 9965 , 0

x 20 mg = 19,93 mg

Konsentrasi kloramfenikol = x 1000 g = 398,6 g/ml

Konsentrasi teoritis kloramfenikol = x 0,5 mL = 7,972 g/ml Absorbansi kloramfenikol pada derivat kedua pada panjang gelombang 228,40 nm adalah 0,00147.

Kadar kloramfenikol dihitung dari persamaan regresi pada panjang gelombang analisis kloramfenikol Y = 0,00018X + 0,00003

Konsentrasi kloramfenikol : Y = 0,00018X + 0,00003 0,00147 = 0,00003X + 0,00003

0,00147 - 0,00003 = 0,00003X

X =

X = 8,0 g/ml

(40)

Lampiran 16. Perhitungan Statistik Hidrokortison Asetat pada krim merek X.

SD =

=

= 3,0729

Pada interval kepercayaan λλ% dengan nilai α = 0,01, dk = n-1= 5, maka t(α/2,dk) = 4,0321

Data diterima jika t hitung < t tabel

t hitung 1 = =

t hitung 2

=

= 0,3905

t hitung 3 = = 3,4669

t hitung 4 = = 1,9128

t hitung 5 = = 1,1317

t hitung 6 = = 1,1158

No. X

Kadar (%)

2

1 98,67 -0,41 0,1681

2 99,59 -0,49 0,2401

3 104,43 4,35 18,9225

4 97,68 -2,4 5,76

5 98,66 -1,42 2,0164

6 101,48 1,4 1,96

(41)

Dari hasil perhitungan tersebut diperoleh bahwa semua t hitung < t tabel, maka semua data tersebut diterima.

Kadar hidrokortison asetat dalam krim merek X: = ± (

t

_{α/2, dk}) x SD/√n)

= 100,08 ± (4,0321 x 3,0729/√6) = (100,08 ± 5,0591)%

Kadar hidrokortison asetat dalam krim merek X tiap gram:

= x 25mg

(42)

Lampiran 17. Perhitungan Statistitik Kloramfenikol pada krim merek X

SD =

=

= 1,9211

Pada interval kepercayaan λλ% dengan nilai α = 0,01, dk = n-1= 5, maka t(α/2,dk) = 4,0321

Data diterima jika t hitung < t tabel

t hitung 1 = = 2,5752

t hitung 2 = = 2,8939

t hitung 3 = = 1,4023

t hitung 4 = = 0,0892

t hitung 5 = = 2,4859

t hitung 6 = = 2,6134

No. X

Kadar (%)

1 100,3 -2,02 4,0804

2 103,05 -2,27 5,1529

3 103,47 1,1 1,21

4 102,39 0,07 0,0049

5 100,37 -1,95 3,8025

6 104,37 2,05 4,2025

(43)

Dari hasil perhitungan tersebut diperoleh bahwa semua t hitung < t tabel, maka semua data tersebut diterima.

Kadar kloramfenikol dalam krim merek X: = ± (t_{α/2, dk)} x SD/√n)

= 102,32 ± (4,0321 x 1,9211/√6) = (102,32 ± 3,1627) %

Kadar kloramfenikol dalam krim merek X tiap gram:

= x 20 mg

(44)

Lampiran 18. Spektrum Serapan Sediaan Krim merek X pada Uji Perolehan Kembali

a. Spektrum serapan perolehan kembali 80% pada sediaan krim merek X

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.00561

0.00000

-0.01000

-0.02001

Gambar 44. Spektrum serapan perolehan kembali 80% pada sediaan krim merek X

Tabel absorbansi perolehan kembali 80% pada sediaan krim merek X: No Perlakuan Panjang gelombang Absorbansi Deskripsi

1 80-1 222,2 nm 0,00083 H. Asetat

228,4 nm 0,00122 Kloramfenikol

2 80-2 222,2 nm 0,00082 H. Asetat

3 80-3 222,2 nm 0,00082 H. Asetat

(45)

Lampiran 18. (lanjutan)

b. Spektrum serapan perolehan kembali 100% pada sediaan krim merek X

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.00718

0.00000

-0.01000

-0.02129

Tabel absorbansi perolehan kembali 100% pada sediaan krim merek X No Perlakuan Panjang gelombang Absorbansi Deskripsi

1 100-1 222,2 nm 0,00104 H. Asetat

2 100-2 222,2 nm 0,00104 H. Asetat

3 100-3 222,2 nm 0,00104 H. Asetat

(46)

c. Spektrum serapan perolehan kembali 120% pada sediaan krim merek X

nm.

200.00 250.00 300.00 350.00 400.00

A

b

s.

0.01142

0.00000

-0.01000

-0.01603

Tabel absorbansi perolehan kembali 120% pada sediaan krim merek X No Perlakuan Panjang gelombang Absorbansi Deskripsi

1 120-1 222,2 nm 0,00123 H. Asetat

2 120-2 222,2 nm 0,00123 H. Asetat

3 120-3 222,2 nm 0,00121 H. Asetat

(47)

Lampiran 19. Data Hasil Persen Perolehan Kembali Hidrokortison Asetat pada sediaan krim merek X

Kon

(48)

Lampiran 20. Data Hasil Persen Perolehan Kembali Kloramfenikol pada sediaan krim merek X.

Kon

(49)

Lampiran 21. Contoh Perhitungan Persentase Perolehan Kembali (%recovery) Sampel yang digunakan adalah krim merek X

Berat kesetaraan penimbangan sampel pada penetapan kadar = 25 mg Perolehan 80%

Hidrokortison asetat 80% = x 25 mg = 20 mg Krim hidrokortison asetat 70% = x 20 mg = 14 mg Penimbangan serbuk setara 14 mg hidrokortison asetat Sampel yang ditimbang =

mg Jumlah kloramfenikol dalam krim yang ditimbang : =

Baku kloramfenikol yang ditambahkan :

= mg = 4,8 mg

Perolehan 100%

Hidrokortison asetat 100% = x 25 mg = 25 mg

Krim hidrokortison asetat 70% = x 25 mg = 17,5 mg Penimbangan krim setara 17,5 mg hidrokortison asetat Sampel yang ditimbang =

g Jumlah kloramfenikol dalam krim yang ditimbang : =

(50)

Perolehan 120%

Hidrokortison asetat 120% = x 25 mg = 30 mg Krim hidrokortison asetat 70% = x 30 mg = 21 mg Penimbangan serbuk setara 21 mg hidrokortison asetat Sampel yang ditimbang =

mg Jumlah kloramfenikol dalam krim yang ditimbang : =

= = 7,2 mg

Contoh perhitungan % perolehan kembali pada perolehan 80% Misalnya absorbansi analisis (Y) :

Penimbangan sampel = 0,5665 mg Hidrokortison asetat (222,20 nm) = 0,00082 Kloramfenikol (228,40 nm) = 0,00121 A. Hidrokortison asetat

Persamaan regresi pada panjang gelombang analisis hidrokortison asetat

( =222,20 nm)μ

Konsentrasi sampel setelah penambahan bahan baku (CF): =

x faktor pengenceran = x 2500 = 20,25 mg

(51)

Keterangan :

A = Berat sampel yang akan ditimbang setara 14 mg krim hidrokortison Keterangan :

D = Baku hidrokortison asetat 30% (yang ditambahkan) E = % kadar baku hidrokortison asetat dari sertifikat analisis ( ) = 6 mg x 100,3% = 6,018 mg

Maka % perolehan kembali hidrokortison asetat: % perolehan kembali

=

x 100 %

% perolehan kembali = x 100%

= 101,03%

B. Kloramfenikol

Persamaan regresi pada panjang gelombang analisis kloramfenikol ( = 228,40

nm): Y= 0,00018X + 0,00003 Konsentrasi kloramfenikol (X):

Y = 0,000018X + 0,00003 0,00121 = 0,00018X + 0,00003 0,000121 - 0,00003 = 0,00018X

X = = 6,55 g/mL

Konsentrasi awal setelah penambahan bahan baku (CF): =

x faktor pengenceran

= x 2500

= 16,375 mg

(52)

Keterangan :

A = Berat sampel yang akan ditimbang setara 14 mg krim hidrokortison asetat 70%

B = Jumlah kloramfenikol dalam 0,5665 g berat sampel yang akan ditimbang C = Kadar rata-rata sampel kloramfenikol

CA =

x

(11,2 mg x 102,38%) = 11,59 mg Jumlah baku yang ditambahkan ( ) = D x E Keterangan :

D = Baku kloramfenikol 30% (yang ditambahkan) E = % kadar baku kloramfenikol dari sertifikat analisis ( ) = 4,8 mg x 99,99%

= 4,799 mg

Maka % perolehan kembali kloramfenikol % perolehan kembali =

x 100 %

% perolehan kembali = x 100%

(53)

Lampiran 22. Perhitungan Rata-Rata, Standar Deviasi dan Relatif Standar deviasi Perolehan Kembali Hidrokortison asetat pada sediaan krim merek X.

SD =

=

= 1,15

RSD =

x

100%

=

x100%

=1,15%

No KadarPerolehan

Kembali[X](%) Xi-X (Xi–X)2

1. 100,69 0,23 0,0529

2. 101,03 0,57 0,3249

3. 101,03 0,57 0,3249

4. 98,63 -1,83 3,3489

5. 101,98 1,52 2,3104

6. 101,92 1,46 2,1316

7. 99,81 -0,65 0,4225

8. 99,59 -0,87 0,7569

9. 99,48 -0,98 0,9604

(54)

Lampiran 23. Perhitungan Rata-Rata, Standar Deviasi dan Relatif Standar Deviasi Perolehan Kembali Kloramfenikol pada sediaan krim merek X

SD =

=

= 1,37

RSD

=

x

100%

= x 100%

= 1,37% No

KadarPerolehan

Kembali [X] (%) Xi-X (Xi–X)2

1. 98,25 -1,87 3,4969

2. 99,70 -0,37 0,1369

3. 100,43 0,36 0,1296

4. 101,85 1,78 3,1684

5. 98,58 -1,49 2,2201

6. 98,53 -1,54 2,3716

7. 101,54 1,47 2,1609

8. 100,98 0,91 0,8281

9. 100,80 0,73 0,5329

(55)

(56)

(57)