KARYA TULIS AKHIR
PENGARUH PEMBERIAN FRAKSI ANTOSIANIN
DARI UBI JALAR UNGU (Ipomoea batatas ) TERHADAP KADAR TOTAL BILIRUBIN PADA TIKUS PUTIH JANTAN ( Rattus novergicus )
YANG DIINDUKSI INH DAN RIFAMPISIN
OLEH:
MUCHAMAT NURIZAL HANAFI NIM 09020098
FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG 2013
ii
LEMBAR PENGESAHAN LAPORAN HASIL PENELITIAN Telah disetujui sebagai hasil penelitian
Untuk memenuhi persyaratan Pendidikan Sarjana Fakultas Kedokteran
Universitas Muhammadiyah Malang
Tanggal: 21 Maret 2013 Pembimbing I dr. Meddy Setiawan, Sp.PD Pembimbing II dr. Erdy Kuswandana Mengetahui, Fakultas Kedokteran Dekan,
iii
LEMBAR PENGUJIAN
Karya Tulis Akhir oleh Muchamat Nurizal Hanafi ini telah diuji dan dipertahankan di depan Tim Penguji pada tanggal 21 Maret 2013
Tim Penguji
dr. Meddy Setiawan, Sp.PD Ketua
dr. Erdy Kuswandana Anggota
iv
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum wr.wb
Alhamdulillaahirobbilalamin puji syukur kehadirat Allah SWT atas segala rahmat dan karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan karya tulis akhir yang berjudul “. Pengaruh Pemberian Antosianin dari Ekstrak Ubi Jalar Ungu (Ipomoea Batatas) terhadap Kadar Total Bilirubin pada Tikus Putih Jantan (rattus novergicus) yang Diinduksi INH dan Rifampisin”. Shalawat dan salam senantiasa tercurahkan pada junjungan Rasulullah Muhammad SAW yang telah membimbing umat manusia dari zaman gelap menuju jalan yang terang benderang yakni agama Islam.
Pada penulisan karya tulis akhir ini, penulis banyak mendapat bimbingan dan bantuan dari berbagai pihak. Oleh karena itu dalam kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih yang tak terhingga kepada :
1. dr. Irma Suswati, M.Kes, selaku Dekan Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah Malang.
2. dr. Meddy Setiawan, Sp.PD, selaku Pembantu Dekan I Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah Malang
3. dr. Fathiyah Safitri, M.Kes, selaku Pembantu Dekan II Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah Malang.
4. dr. Iwan Sys Indrawanto, Sp.KJ, selaku Pembantu Dekan III Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah Malang.
v
5. dr. Meddy Setiawan, Sp.PD, selaku dosen pembimbing I yang telah meluangkan waktu serta banyak memberikan masukan dan dukungan demi kesempurnaan penelitian ini sehingga tugas akhir ini dapat terselesaikan.
6. dr. Erdy Kuswandana, selaku dosen pembimbing II yang telah meluangkan waktu serta banyak memberikan masukan dan dukungan demi kesempurnaan penelitian ini sehingga tugas akhir ini dapat terselesaikan.
7. dr. Diah Hermayanti Sp.PK, selaku dosen penguji proposal dan tugas akhir yang telah memberi tambahan ilmu dan kritik demi kesempurnaan penelitian ini.
8. Semua pihak yang telah membantu dalam menyelesaikan karya tulis akhir ini, penulis ucapkan terima kasih.
Penulis menyadari bahwa penulisan ini masih jauh dari sempurna, oleh karena itu penulis membuka diri untuk segala saran dan kritik yang membangun, serta penulis mengharapkan agar karya tulis akhir ini dapat berguna serta bermanfaat.
Wassalamu’alaikum wr.wb
Malang, Maret 2013
vi ABSTRAK
Hanafi, Muchamat Nurizal. 2013. Pengaruh Pemberian Antosianin dari Ekstrak Ubi Jalar Ungu (Ipomoea Batatas) terhadap Kadar Total Bilirubin pada Tikus Putih Jantan (rattus novergicus) yang Diinduksi INH dan Rifampisin. Tugas Akhir, Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah Malang. (1) dr. Meddy Setiawan Sp PD* (2) dr. Erdy Kuswandana**
Latar Belakang: Pemakaian jangka lama INH dan Rifampisin menyebabkan kerusakan pada hepar sehingga terjadi peningkatan kadar bilirubin total. Fraksi antosianin ubi jalar ungu dapat menurunkan kadar total bilirubin.
Tujuan: Untuk membuktikan pengaruh pemberian fraksi antosianin pada ubi jalar ungu (Ipomoea Batatas) sebagai hepatoprotektor terhadap kadar total bilirubin pada tikus putih (rattus novergicus) yang telah diinduksi INH dan Rifampisin. Metode: Eksperimental, The Post Test Only Control Group Design. Sampel dibagi 5 kelompok. Kelompok kontrol negatif, kelompok kontrol positif diberi isoniasid dan rifampisin masing-masing 200mg/kgBB selama 28 hari, dan 3 kelompok perlakuan diberi fraksi antosianin ubi jalar ungu dosis (269,538,1076)mg/kgBB selama 28 hari. Dianalisis dengan oneway ANOVA, uji korelasi, dan uji regresi.
Hasil Penelitian: K1 = 0,58mg/dl SD + 0,14; K2 = 3,11mg/dl SD + 0,12; K3 = 2,30mg/dl SD + 0,10; K4 = 1,93mg/dl SD + 0,12; K5 = 1,48mg/dl SD + 0,12. One Way Anova sig = 000 (p < 0,05), uji korelasi sig = 0,000 (p < (0,05), ,uji regresi linier sig = 0,000 (p < 0,05)dengan R2=0,900. Fraksi antosianin dapat menurunkan kadar total bilirubin dengan cara antosianin menghambat perubahan isoniazid menjadi hydrazin,serta menurunkan produksi reactive oxygen species (ROS)
Kesimpulan: Fraksi antosianin ubi jalar ungu (Ipomoea Batatas) dapat menurunkan kadar total bilirubin tikus putih yang diinduksi INH dan Rifampisin. 1076 mg/kgBB adalah dosis efektif fraksi antosianin untuk menurunkan kadar total bilirubin.
Kata Kunci: Fraksi antosianin ubi jalar ungu (Ipomoea Batatas), Kadar Total Bilirubin, INH dan Rifampsin.
* : Staff pengajar Ilmu Penyaki Dalam FK UMM ** : Staff pengajar FK UMM
vii ABSTRACT
Hanafi, Muchamat Nurizal. 2013. The Effect of Anthocyanin Fraction of Purple Sweet Potato (Ipoema batatas) to the Mice (rattus novergicus) Levels of Total Bilirubin Induced by INH adn Rifampisin . Final Project, Medical Faculty, University of Muhammadiyah of Malang. (1) dr.Meddy Setiawan Sp PD* (2) dr.Erdy Kuswandana**
Introduction:Long term use of INH and Rifampisin caused the damage of hepar so that increased levels of total bilirubin. anthocyanin fraction of purple sweet potato (Ipoema batatas) could reduced levels of total bilirubin.
Objective:To prove The effect of anthocyanin fraction of purple sweet potato (Ipoema batatas) to reduce increased levels of total bilirubin in mice (rattus novergicus) induced by INH and Rifampisin.
Methode:Experimenal, The post test only control design. Sample are divided into 5 groups. The negative control group , the positive control group was induced by INH and Rif, each 200mg/kgBB for 28 days and the treatment groups was induced by anthocyanin fraction of Purple Sweet Potato dosage (269,538,1076)mg/kgBB started for 28 days. Analysed by oneway ANOVA, correlation test, and regression test.
Result and discussion: K1 = 0,58mg/dl SD + 0,14; K2 = 3,11mg/dl SD + 0,12; K3 = 2,30mg/dl SD + 0,10; K4 = 1,93mg/dl SD + 0,12; K5 = 1,48mg/dl SD + 0,12. . One way anova test sig = 000 (p < 0,05), Correlation test sig = 0,000 (p < (0,05) and linear regression sig = 0,000 (p < 0,05) and R2=0,900.anthocyanin fraction could reduce levels of total bilirubin by barriered modification of isoniazid become hydrazine and reduce production of reactive oxygen species (ROS)
Conclusion:The inducing of anthocyanin fraction of purple sweet potato could reduce levels of total bilirubin in mice induced by INH and Rifampisin. 1076 mg/kgBB is effective dose of anthocyanin fraction to reduced levels of total bilirubin.
Keyword :anthocyanin fraction of purple sweet potato (Ipoema batatas), levels of total bilirubin, INH and Rifamipisin.
* : Staff lecturer division of Internist , Faculty of Medicine, UMM ** : Staff lecturer of Faculty of Medicine, UMM
viii DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL... ... i
LEMBAR PENGESAHAN.. ... ii
LEMBA PENGUJIAN.. ... iii
KATA PENGANTAR ... iv
ABSTRAK ... vi
ABSTRACT ... vii
DAFTAR ISI ... viii
DAFTAR GAMBAR ... xii
DAFTAR TABEL ... xiii
DAFTAR SINGKATAN ... xiv
DAFTAR LAMPIRAN ... xv BAB I PENDAHULUAN ... 1 1.1 Latar Belakang ... 1 1.2 Rumusan Masalah ... 3 1.3 Tujuan Penelitian ... 3 1.3.1 Tujuan Umum ... 3 1.3.2 Tujuan Khusus ... 3 1.4 Manfaat Penelitian ... 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ... 6
2.1 Hepar ... 6
2.1.1 Anatomi Hepar ...6
2.1.2 Fisiologi Hepar ...8
2.1.3 Kerusakan Hepar Akibat Obat ...9
2.2 Ubi Jalar Ungu (Ipomoea batatas) ... 11
2.2.1 Klasifikasi TanamanUbi Jalar Ungu (Ipomoea batatas) ... 11
2.2.2 Morfologi Tanaman Ubi Jalar Ungu(Ipomoea batatas) ... 12
2.2.3 Kandungan Kimia Ubi Jalar Ungu (Ipomoea batatas) ... 13
ix
2.3.1 Efek Antosianin Sebagai Hepatoprotekor...15
2.4 Bilirubin ... 17
2.4.1 Pembentukan Bilirubin Berlebihan...17
2.5 INH dan Rifampisin ... 18
2.5.1 INH ... 18
2.5.1.1 Mekanisme Kerja INH ... 19
2.5.1.2 Farmakokinetik INH ... 19
2.5.2 Rifampisin ... 20
2.5.2.1 Mekanisme Kerja Rifampisin ... 21
2.5.2.2 Farmakokinetik Rifampisin ... 21
2.6 Hepatotoksisitas INH dan Rifampisin ... 22
BAB III KERANGKA KONSEPTUAL DAN HIPOTESIS PENELITIAN ... 24
3.1 Kerangka Konseptual ... 24
3.2 Hipotesis Penelitian ... 26
BAB IV METODE PENELITIAN ... 27
4.1 Jenis Penelitian... 27
4.2 Lokasi dan Waktu Penelitian ... 27
4.3 Populasi dan Sampel ... 27
4.3.1 Populasi ... 28
4.3.2 Sampel ... 28
4.3.3 Besar Sampel ... 28
4.3.4 Teknik Pengambilan Sampel ... 28
4.3.5 Karakteristik Sampel Penelitian ... 28
4.3.5.1 Kriteria Inklusi ... 28
4.3.5.2 Kriteria Eksklusi ... 28
4.3.6 Variabel Penelitian ... 29
4.3.6.1 Variabel Bebas ... 29
4.3.6.2 Variabel Tergantung ... 29
4.3.7 Definisi Operasional Variabel ... 29
x
4.4.1 Alat ... 30
4.4.1.1 Alat Ekstraksi dan Uji Kadar Antosianin ... 30
4.4.4.2 Alat Pembuatan Preparat dan Pemeriksaan kadar total bilirubin pada Hepar tikus putih ... 30
4.4.2 Bahan ... 31
4.4.2.1 Bahan Ekstraksi dan Uji Kadar Antosianin ... 31
4.4.2.2Bahan Pembuatan Preparat dan Pemeriksaan kadar total bilirubin Hepar Tikus ... 31
4.5 Alur Penelitian ... 32
4.6 Prosedur Penelitian ... 33
4.6.1 Pembagian Kelompok Tikus ... 33
4.6.2 Adaptasi Hewan Percobaan ... 33
4.6.3 Penentuan Dosis ... 34
4.6.3.1 Dosis INH dan Rifampisin ... 34
4.6.3.2 Dosis Fraksi Antosianin Ubi Jalar Ungu (Ipomoea batas ) ... 34
4.6.4 Ekstraksi Antosianin Ubi Jalar Ungu(Ipomoea batatas) ... 35
4.6.5 Penentuan Total Antosianin Dengan Metode pH Differensial 35 4.6.6Fraksinasi Ekstrak Antosianin Ubi Jalar Ungu (Ipomoea batatas) ... 36
4.6..6.1 Pembuatan Larutan Buffer pH 1,0 dan pH 4,5 ... 37
4.6..6.2 Pengukuran dan Perhitungan Konsentrasi Antosianin Total ... 38
4.6.7 Pemeriksaan kadar total bilirubin Hepar Tikus ... 39
4.7 Analisis Data ... 40
4.8 Jadwal Penelitian ... 40
BAB V HASIL dan ANALISIS DATA ... 41
5.1 Hasil Penelitian ... 41
xi
BAB VI PEMBAHASAN ... 47
BAB VII SIMPULAN dan SARAN ... 50
7.1 Simpulan ... 50
7.2 Saran ... 50
DAFTAR PUSTAKA ... 52
xii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1 Organ Hati ... 7
Gambar 2.2 Ubi Jalar Ungu ... 11
Gambar 2.3 Struktur Antosianin dalam Ubi Jalar Ungu ... 14
Gambar 2.4 Proses Bilirubin ... 18
Gambar 2.5 Struktur Kimia INH ... 19
Gambar 5.1 Grafik rata-rata kadar total bilirubin pada tikus putih jantan ... 41
Gambar 5.2 Kurva hubungan antara dosis fraksi antosianin dari ubi jalar ungu dengan kadar total bilirubin tikus putih jantan ... 44
xiii
DAFTAR TABEL
Tabel 5.1 Hasil Pengukuran Kadar Bilirubin Tikus Putih Jantan...40 Tabel 5.2Hasil Analisis Oneway ANOVA Data Kadar BILIRUBIN hepar tikus putih jantan ... 41 Tabel5.3Hasil Uji Lanjut Honesty Significant Differences 5%/...42 Tabel 5.4Hasil Uji Korelasi ...43
xiv
DAFTAR SINGKATAN
ATP : Adenosine Triphosphate BM : Berat Molekul
CD8+ : Cluster of differentiation 8 CYP450 : Cytochrome P-450
DNA : Deoxyribonucleic Acid HCL : hydrogen chloride INH : Isoniazid
KCL : kalium chloride
mPT : mitochondrial permeability transition OAT : Obat Anti Tuberkulosis
RNA : Ribonucleic Acid
ROS : Reactive Oxygen Species
SGOT : Serum glutamic-oxaloacetic transaminase
SGPT : Serum glutamic pyruvic transaminase
TBC : Tuberculosis
xv
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1 Hasil Pengukuran Bilirubin ... 55 Lampiran 2 Hasil Analisis ... 57 Lampiran 3 Dokumentasi ... 60
xvi
DAFTAR PUSTAKA
Askgaard DS, Wilcke T, Dossing M, 1994, Hepatotoxicity Caused by the Combined Action of Isoniazid and Rifampicin, Thorax, 50, pp. 213-214. Black, J.M., and Hawks, J.H., (2005). Medical-surgical nursing, clinical
management for positive outcomes 8th ed, St. Louis: Elsevier & Saunders. Chambers, HF 2007, Antimycobacterium drugs, in Katzung BG (ed.), Basic and
clinical pharmacology, 10th edn, McGraw-Hill, London.
Daulay DG, Supriatmo, Sinuhaji AB, Hepatitis Akibat Penyakit Sistemik, Sari Pediatri, vol 4 no 8, pp 294-298
Eaton DL, C KD, 2001, Principle of Toxicology, In: C KD (ed). Toxicology, the Basic Science of Poisons, 6th edn, McGraw-Hill, New York, pp. 11-34. Gaulejac NSCD, Glories Y, Vivas N 1999, Free radical scavenging effect of
anthocyanins in red wines, Food Research International, vol. 32, pp. 327-333.
Giusti MM, Worlstad RE 2000, Characterization and measurement af anthocyanins by UV-visible spectroscopy, Oregon State University, viewed 10 August 2011, <http://does.org/masterli/facsample.htm-37k>. Guyton AC, Hall JE, 2008, Liver as an organ, In: Guyton AC, Hall JE (eds).
Textbook of Medical Physiology, 11th edn, Elsevier, Singapore, pp. 902-907.
Guyton AC, Hall JE, 2008, Pengukuran Bilirubin di Dalam Empedu Sebagai Alat Diagnostik Klinis, In: Guyton AC, Hall JE (eds), pp. 906-907.
Hwang YP, Choi JH, Yun HJ et al 2011, „Anthocyanins from purple sweet potato attenuate dimethylnitrosamine-induced liver injury in rats by reducing Nrf2-mediated antioxidant enzymes and reducing COX-2 and iNOS expression‟, Food and Chemical Toxicology, vol. 49, pp. 93-99. Istiantoro YH , Setiabudy, R 2009, „Tuberkulostatik dan leprostatik‟, in Gunawan SG et al. (edn.), Farmakologi dan terapi, 5th edn, Departemen Farmakologi dan Terapeutik FKUI, Jakarta.
Jusuf M, Rahayuningsih SA, Ginting E, 2008, Ubi Jalar Ungu, Warta Penelitian dan Pengembangan Pertanian, 30(4), pp. 13-14.
xvii
Kalra BS, Anggarwal S , Khurana N 2007, „Effect of cimetidine on hepatotoxicity induced by isoniazid-rifampicin combination in rabbits‟, Indian J Gastroenterol, vol. 26, pp. 18-21.
Katzung BG, 1998, Farmako Terapi dan Farmako Klinik, Prinsip Kerja Antimikroba, Katzung BG, ed 6, Jakarta, 699-702
Kashmir, 2012, Indian Journal for The Practicing Doctor, An Official Publication of Directorate of Health Services, Vol. 7, Issue 1, 67
Kumar GS, Krishna BRB, Kumar GV et al 2010, „Hepatoprotective and antioxidant activity of the alcoholic extract of Ipomoea turpetnm against anti-TB drugs induced hepatotoxicity in rats‟, Journal of Advances in Drug Research, vol. 1, no. 1, pp. 10-19.
Lindseth, Glenda N, 2006, Gangguan Hati Empedu da Pankreas, dalam : Hartanto H, Wulansari P(eds), Pathopyhsiology Clinical Concepts of Disease Proses 6th edn, EGC, Jakarta, hal. 472-485
Prihatni D, Parwati I, Sjahid I et al, 2005, Efek Hepatotoksik Anti Tuberkulosis Terhadap Kadar Aspartate Aminotransferase dan Alanine Aminotransferase Serum Penderita Tuberkulosis Paru, Indonesian Journal of Clinical Pathology and Medical Laboratory, Vol. 12, pp. 1-5.
Panjaitan RGP, Manalu W, Handharyani E et al, 2011, The effect of the extract of pasak bumi roots (Eurycoma longifolia Jack.) on liver function, Jurnal Farmasi Indonesia, 22(1), pp.15-20
Robbins, 2007, Buku Ajar Patologi Edisi 7, Penerbit EGC, Jakarta.
Sakuma T, Kawasaki Y, Jarukamjorn K et al 2009, „Sex Differences of Drug-metabolizing Enzyme: FemalePredominant Expression of Human and Mouse CytochromeP450 3A Isoforms‟, Journal of Health Science, vol. 55, no. 3, pp. 325-337.
Studiawan, Sukardiman, Widyawaruyanti et al 2011, Fitokimia, Program Studi Farmasi Fakultas Imu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang, Malang.
Troughton JA, Woodside J, Young I et al 2007, 'Bilirubin and coronary heart disease risk in the Prospective Epidemiological Study of Myocardial Infarction (PRIME).' European journal of cardiovascular prevention and rehabilitation : official journal of the European Society of Cardiology, Working Groups on Epidemiology, vol 14(1), pp. 79-84.
Tsuda T, 2000, „The role of anthocyanins as an antioxidant under oxidative stress in rats‟, Biofactors, vol. 13, no. 1-4, pp. 133-139.
xviii
Wijaya LS, Widjanarko SB, Susanto, T 2001, „Ekstraksi dan karakterisasi pigmen dari kulit buah rambutan (Nephelium lappaceum) var. BINJAI‟, BIOSAIN, vol. 1, no. 2, pp. 42-53.
World Health Organization, 2010, Indonesian Tuberculosis Profile, viewed 18 December 2011, <http://www.int/tb/data1.com>.
Wang X, Chowdhury JR, Chowdhuryl NR, 2006, Bilirubin metabolism: Applied physiology, Current Paediatrics, 16, pp. 70-74
Zhao CL, Guo HC, Dong ZY et al., 2009, Pharmacological and Nutritional Activities of Potato Anthocyanins, African Journal of Pharmacy and Pharmacology, 2(10), pp. 463-468.
