ISOLAT BAKTERI ASAM LAKTAT (BAL)

Dengan ini saya menyatakan bahwa skripsi berjudul Purifikasi Parsial dan Karakterisasi β -Galaktosidase Dari Isolat Bakteri Asam Laktat (BAL) Strain B134 adalah benar karya saya dengan arahan dari komisi pembimbing dan belum diajukan dalam bentuk apa pun kepada perguruan tinggi mana pun. Penelitian ini didanai oleh Pusat Penelitian Biologi LIPI (Proyek PKPP 2012). Sumber informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan maupun tidak diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam daftar pustaka di bagian akhir skripsi ini.

Bakteri asam laktat (BAL) merupakan bakteri yang tergolong dalam Gram positif, yang memiliki bentuk bulat atau batang. Bakteri asam laktat dapat diperoleh dengan cara mengisolasi dari usus pencernaan Day Old Chiek (DOC) broiler. Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan isolat BAL asal saluran pencernaan DOC broiler, untuk mendapatkan tingkat daya agregasi, mengetahui perlekatan isolat BAL asal kandidat saluran pencernaan DOC. Metode penelitian mengamati daya agregasi (autoagregai maupun koagregasi) sampel bakteri Pediococcus sp. dari usus DOC yaitu mengamati terbentuknya agregat pada dasar tabung dan suspensi media uji terlihat keruh akibat autoagregasi antara Pediococcus sp. dengan Pediococcus sp. Lainnya, koagregasi antara Pediococcus sp. dengan Staphylococcus aureus dan Salmonella thypi, di inkubasi selama 24 jam pada suhu 37 0 C. Daya autoagregasi dan koagregasi dibuktikan lebih lanjut dengan mengamati penempelan Pediococcus sp. pada permukaan epitel usus mencit (Mus musculus) setelah dikutivasi pada MRSA pada suhu 37 0 C selama 24 jam.

Ayam pedaging merupakan ternak unggas yang cukup potensial untuk dikembangkan dan juga memiliki kemampuan menghasilkan daging dalam waktu yang cepat dan sangat efisien dalam pemanfaatan pakan. Ayam pedaging sebagai ayam ras pedaging tumbuh dengan sangat cepat dan mampu mengubah makanan yang dikonsumsi menjadi daging dengan sangat efisien. Pakan merupakan faktor penting dan menentukan bagi keberhasilan usaha peternakan. Peranan probiotik sebagai bahan aditif pemacu pertumbuhan Growth promoter sudah terbukti dapat digunakan. Manfaat langsung dari probiotik tersebut bagi ternak adalah antara lain meningkatkan nafsu makan, menyediakan unsur nutrisi dan membantu proses pencernaan makanan serta menghambat perkembangan bakteri patogen. Selain itu, Cavaazoni et al.,(1998) melaporkan probiotik Bacillus coagulans dapat mempertinggi laju pertumbuhan ayam pedaging.

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui konsentrasi sukrosa yang tepat untuk menghasilkan yoghurt dari susu kulit pisang kepok dan kacang hijau dengan karakteristik yang terbaik. Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Kelompok dengan perlakuan berupa konsentrasi sukrosa yang terdiri atas tujuh taraf, yaitu 0%, 2,5%, 5%, 7,5%, 10%, 12,5%, dan 15%. Parameter yang diamati meliputi total gula, total BAL, total asam laktat, pH, dan sifat sensoris yaitu warna, aroma, rasa, tekstur, konsistensi, dan penerimaan keseluruhan. Hasil penelitian menunjukkan bahwa perlakuan konsentrasi sukrosa berpengaruh sangat nyata terhadap nilai total gula, total bakteri asam laktat (BAL), total asam laktat, pH, tingkat kesukaan terhadap rasa, dan penerimaan keseluruhan, serta berpengaruh nyata terhadap tekstur dari yoghurt susu kulit pisang kepok dan kacang hijau yang dihasilkan. Karakteristik terbaik didapat dari yoghurt dengan penambahan konsentrasi sukrosa sebesar 7,5%, dengan nilai total gula 1,71%, total BAL 7,3x10 9 CFU/ml, total asam laktat 0,89%,

mikroaerofilik dan non motil. Genus bakteri ini membentuk sebagian besar dari kelompok bakteri asam laktat, dinamakan demikian karena kebanyakan anggotanya dapat merubah laktosa dan gula lainnya menjadi asam laktat (Anguirre dan Colins,1993 dalam Hardiningsih et al., 2006 ).

Tiada kalimat yang pantas terucap, selain kalimat Alhamdulillahi Rabbil alamin, yang mana atas berkat rahmat dan hidayah Allah swt sehingga skripsi yang berjudul “ Pengaruh Suplementasi Bakteri Asam Laktat (BAL) Asal Dangke Isolat Enterococcus faecium dan Lactobacillus plantarum Terhadap Survivalitas Mencit (Mus musculus) ICR Jantan yang Ditantang dengan Escherichia coli ” ini dapat terselesaikan, yang merupakan salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Sains (S.Si). Shalawat dan salam semoga tetap tecurah kepada Baginda Rasulullah Saw yang telah mengajarkan beberapa ilmu ini. Pengetahuan yang dijadikan lampu penerang dalam mengarungi bahtera kehidupan ini.

Penelitian ini bertujuan untuk Menguji pengaruh pengendalian Escherichia coli (E.coli) menggunakan bakteri asam laktat (BAL) terenkapsulasi terhadap pertambahan bobot badan dan karkas ayam broiler. Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Biologi Ternak Program Studi Peternakan Fakultas Pertanian Universitas Sumatera Utara, Jl. Prof. Dr.A.Sofyan No 3, Medan. Penelitian dilaksanakan selama 35 hari dimulai dari Oktober-November 2014. Rancangan yang digunakan dalam penelitian ini adalah rancangan acak lengkap (RAL) dengan 4 perlakuan dan 5 ulangan setiap ulangan terdiri atas 5 ekor broiler. Perlakuan ini terdiri atas P0A= (kontrol tanpa infeksi); P0B= (control + infeksi E.coli); P1= (infeksi E.coli + bakteri asam laktat (BAL) tanpa enkapsulasi); P2= (infeksi E.coli + bakteri asam laktat (BAL) terenkapsulasi).

Bakteri Escherichia coli dapat ditemukan dalam litter, feses ayam, debu, atau kotoran dalam kandang. Debu dalam kandang ayam dapat mengandung 105 – 106 Escherichia coli per gram (Tabbu, 2000). Bakteri ini dapat bertahan lama dalam kandang, terutama dalam keadaan kering dan sebagian besar bakteri enterik lainnya membentuk koloni bulat dan cembung. Beberapa strain Escherichia coli menyebabkan hemolisis dalam darah (Jawetz et al., 2001). Kemampuan Escherichia coli dalam menghemolisis dapat menjadi salah satu metode penentuan pathogenitas Escherichia coli (Raji, 2003).

antinutrisi pada silase ransum komplit jagung (SRKJ) sehingga bakteri asam laktat lebih mudah memanfaatkan substrat yang tersedia untuk proses regenerasi lebih lanjut. Mc Donald (1991) menyebutkan kandungan WSC optimal dalam proses fermentasi untuk mendukung pertumbuhan bakteri asam laktat adalah 3-5% BK. Lendrawati et al. (2008) menyatakan kandungan WSC berbasis silase ransum komplit jagung (SRKJ), sawit (SRKS) dan ubi kayu (SRKU) setelah 6 minggu ensilase sebesar (4,54% BK), (3,25% BK) dan (7,46% BK). Meskipun WSC yang terdapat pada ubi kayu lebih tinggi dibandingkan sawit dan jagung, tetapi jumlah koloni bakteri asam laktat pada silase ransum komplit jagung (SRKJ) ternyata lebih tinggi dibandingkan silase ransum komplit sawit (SRKS) dan

Bakteri BAL memanfaatkan serat kasar yang dihidrolisis menjadi asam laktat, asam lemak rantai pendek, dan energi. Asam lemak rantai pendek (SCFA) yaitu asam asetat, asam propionat, dan asam butirat merupakan hasil utama dari fermentasi serat pangan (Miller and Wollin, 1996). Roberfroid (1998), menyatakan bahwa bakteri asam laktat mempunyai kemampuan memfermentasi selulosa menjadi SCFA. Di dalam saluran pencernaan manusia, polisakarida pati yang tidak tercerna di usus halus akan dihidrolisa dalam kondisi anaerob dalam usus besar oleh bakteri menjadi unit-unit monomernya seperti glukosa. Kemudian monomer tersebut difermentasi melalui glikolisis menjadi piruvat yang seterusnya menjadi SCFA dan metabolit yang lain (Cumming and Englyst, 1987; Khattak, 2002). Pemanfaatan serat kasar semakin meningkat dengan semakin meningkatnya total BAL (Lactobacillus casei dan L. plantarum).

melalui bahan tersebut. Teknologi ini berperan dalam melindungi bahan inti dari lingkungan yang merugikan. Bakteri probiotik merupakan salah satu jenis komponen bioaktif yang sebaiknya dilindungi kehidupannya agar dapat dimanfaatkan oleh inangnya. Manfaat enkapsulasi bagi probiotik yaitu untuk mempertahankan viabilitas dan melindunginya dari kerusakan akibat kondisi lingkungan yang tidak menguntungkan.

Hasil penelitian menunjukkan rataan bobot potong (g) P0a, P0b, P1, P2, adalah 1695.83, 1632.62, 1780.51, 1843.31. Bobot Karkas(g) P0a, P0b, P1, P2 adalah 1445.61, 1382.24, 1555.25, 1681.00. Persentase karkas(%) P0a, P0b, P1, P2 adalah 85.22, 84.65, 87.34, 87.77. Hasil analisa keragaman menunjukkan bahwa pengendalian bakteri E.coli dengan bakteri asal laktat (BAL) terenkapsulasi memberikan pengaruh sangat nyata (P<0,05) terhadap bobot potong, bobot karkas dan persentase karkas. Kesimpulan dari penelitian ini bahwa penggunaan bakteri asam laktat (BAL) terenkapsulasi memberikan pengaruh sangat nyata terhadap bobot ayam broiler, namun tidak memberikan pengaruh nyata terhadap organ dalam ayam broiler.

Dari metode berbasis pengkulturan, populasi bakteri yang melimpah di tembolok adalah lactobacilli yang melekat pada epitel melalui komponen karbohidrat pada dinding sel bakteri. Bakteri penghuni tembolok ini memfermentasi makanan yang masuk dan menghasilkan asam laktat yang menyebabkan pH lingkungan tembolok turun menjadi pH 5. Kondisi lingkungan dalam proventrikulus sangat asam sehingga merupakan lingkungan yang kurang menyenangkan bagi sebagian besar bakteri. Ventrikulus/gizzard memiliki pH rendah yang dipengaruhi oleh pH proventrikulus, sehingga lingkungan ini didominasi oleh populasi lactobacilli, meskipun masih dibawah 10 8 cfu/g, selain itu terdapat Enterococcus dan Escherichia coli. Usus halus memiliki daya peristaltik yang tinggi sehingga kurang menguntungkan bagi bakteri untuk berada di lumen. Namun, terdapat lactobacilli dalam jumlah tinggi dan populasi yang stabil setelah usia sekitar dua minggu (Barnes et al. 1972). Lumen usus halus menunjukkan bahwa mayoritas bakteri berupa bakteri fakultatif anaerob, dengan Lactobacillus sp., Enterococcus sp. dan E. coli ( sekitar 60-90 %) dan juga beberapa bakteri anaerob obligat seperti eubacteria, clostridia, propionibacteria dan fusobacteria. Awalnya sekum didominasi oleh lactobacilli, coliform dan enterococci, namun karena rendahnya tingkat aliran peristaltik, mikrobiota sekum lebih stabil dan kompleks dan dalam usia empat minggu ditemukan anggota bacteroides, eubacteria, bifidobacteria, lactobacilli dan clostridia (Salanitro et al. 1978).

Komposisi asam lemak penyusun membran sitoplasma beragam diantara spesies bakteri yang keragamannya tersebut mempengaruhi karakteristik dan permeabilitasnya. Beberapa protein dalam membran secara spesifik juga memfasilitasi pergerakan senyawa melewati membran. Komposisi dan struktur protein yang berbeda pada membran sitoplasma juga menentukan karakteristik dan permeabilitas membran tersebut. Keragaman asam lemak dan protein pada membran sitoplasma diduga juga mempengaruhi keragaman ketahanan bakteri terhadap pH rendah. Pada beberapa bakteri Gram positif terjadi peningkatan sintesis asam amino fosfolipid (Booth et al., 1989) yang bermuatan positif jika ditumbuhkan pada media yang ber-pH rendah. Perubahan ini diduga karena ionisasi asam amino pada pH rendah menyebabkan permukaan membran bermuatan positif sehingga dapat bertindak sebagai barrier proton. Selain itu, bakteri yang tahan asam memiliki enzim yang lebih tahan terhadap pH rendah (asam), faktor lain seperti kapasitas buffering sitoplasma kurang berpengaruh bagi pengaturan pH intraseluler (Bender et al., 1986). Cotter dan Hill (2003) menambahkan bahwa pertahanan bakteri Gram positif terhadap asam juga terjadi karena adanya pompa proton oleh ATP-ase, adanya mekanisme perubahan membran sel bakteri dan dekarboksilasi asam amino.