TESIS
AKTIVITAS ANTI DIABETES EKSTRAK DAUN UBI JALAR
(Ipomoea batatas L) PADA MENCIT YANG DIINDUKSI
STREPTOZOTOCIN
Oleh:
NASDIWATY DAUD
NIM 097014015
PROGRAM STUDI MAGISTER FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
AKTIVITAS ANTI DIABETES EKSTRAK DAUN UBI JALAR
(Ipomoea batatas L) PADA MENCIT YANG DIINDUKSI
STREPTOZOTOCIN
TESIS
Diajukan sebagai Salah Satu Syarat untuk Memperoleh Gelar Magister dalam Ilmu Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
Oleh:
NASDIWATY DAUD
NIM 097014015
PROGRAM STUDI MAGISTER FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
PERSETUJUAN TESIS
Nama Mahasiswa : Nasdiwaty Daud No. Induk Mahasiswa : 097014015
Program Studi : Magister Farmasi
Judul Tesis : Aktivitas Antidiabetes Ekstrak Daun Ubi Jalar (Ipomoea batatas L) Pada Mencit Yang Diinduksi Streptozotocin
Tempat dan tanggal ujian Lisan Tesis : Medan, 25 April 2013
Menyetujui:
Komisi Pembimbing,
Ketua,
Prof. Dr. Rosidah, M.Si., Apt. NIP 195103261978022001
Anggota,
Dr. M. Pandapotan Nasution, MPS., Apt. NIP 194908111976031001
Ketua Program Studi Dekan,
PENGESAHAN TESIS
Nama Mahasiswa : Nasdiwaty Daud
No. Induk Mahasiswa : 097014015
Program Studi : Magister Farmasi
Judul Tesis : Aktivitas Antidiabetes Ekstrak Daun Ubi Jalar (Ipomoea batatas L) Pada Mencit Yang Diinduksi Streptozotocin
Telah diuji dan dinyatakan LULUS di depan Tim Penguji Tesis pada hari Kamis tanggal dua puluh lima bulan April tahun dua ribu tiga belas
Mengesahkan:
Tim Penguji Tesis
Ketua Tim Penguji : Prof. Dr. Rosidah, M.Si., Apt.
Anggota Tim Penguji : 1. Dr. M. Pandapotan Nasution, MPS., Apt.
2. Prof. Dr. Urip Harahap, Apt.
3. Prof. dr. Darwin Dalimunthe, Ph.D.
PERNYATAAN
TESIS
AKTIVITAS ANTI DIABETES EKSTRAK DAUN UBI JALAR (Ipomoea batatas L) PADA MENCIT YANG DIINDUKSI STREPTOZOTOCIN
Saya menyatakan bahwa tesis ini adalah hasil kerja saya sendiri, kecuali beberapa
kutipan dan ringkasan yang masing-masing disebutkan sumbernya
Medan, April 2013
Nasdiwaty Daud NIM 097014015
KATA PENGANTAR
Segala puji bagi Allah SWT atas rahmat karunia dan hidayah-NYA
sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penulisan tesis dengan judul:
“
Aktivitas Antidiabetes Ekstrak Daun Ubi Jalar (Ipomoea batatas L) pada mencit
yang diinduksi Streptozotocin”
Selama menyelesaikan penelitian dan tesis ini penulis banyak mendapat
bantuan dan dorongan dari bernagai pihak, baik moril maupun materil. Untuk itu
dalam kesempatan penulis menyampaikan rasa hormat dan terima kasih yang
sebesar-besarnya kepada:
. Tesis ini sebagai salah satu syarat untuk
mencapai gelar Magister Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera
Utara. Salawat dan salam kepada Rasulullah SAW.
1.Rektor Universitas Sumatera Utara, Bapak Prof. Dr. dr. Syahril Pasaribu,
DTMH&H., M.Sc., (CTM)., Sp.A(K)., atas kesempatan dan fasilitas yang
diberikan kepada penulis untuk dapat menyelesaikan Program Magister.
2. Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara, Bapak Prof. Dr. Sumadio
Hadisahputra, Apt., yang telah menyediakan fasilitas dan kesempatan bagi
penulis menjadi mahasiswa Program Studi Magister Farmasi Fakultas Farmasi.
2. Ketua Program Studi Magister Farmasi Fakultas Farmasi Universitas
Sumatera Utara, Bapak Prof. Dr. Karsono, Apt., yang telah memberikan
dorongan dan semangat sehingga penulis dapat penulis dapat menyelelesaikan
pendidikan Program Magister Farmasi.
3. Ibu Prof. Dr. Rosidah, M.Si, Apt., selaku Sekretaris Program Studi Magister
Farmasi Fakultas Farmasi dan selaku Pembimbing I yang memberikan
dorongan dan semangat sehingga penulis terpacu untuk menyelesaikan
pendidikan.
4. Bapak Dr. M. Pandapotan Nasution, MPS., Apt., selaku Pembimbing II yang
telah membimbing, mengarahkan dan memberikan dorongan dengan sabar
selama penelitian dan penyelesaian tesis ini.
5. Bapak Prof. Dr. Urip Harahap, Apt., sebagai Penguji yang telah banyak
6. Bapak Prof. dr. Darwin Dalimunthe, Ph.D., sebagai Penguji.
7. Ibu Marianne S.Si., M.Si., Apt., Kepala laboratorium Farmakologi beserta staf.
8. Ayahanda tercinta Alm.,Daud, Ibunda tercinta Almh., Sainun, kedua mertua,
Ayahanda Apen dan Bunda Almh Djaumir ketiadaan mereka membuat suatu
dorongan dan dukungan yang luar biasa sehingga memacu penulis untuk
menyelesaikan tesis ini.
9. Suami tercinta Kolonel Ckm., Drs., Firdaus Apen, Apt., dan ananda tercinta
Arif Nasfi, BIFB., yang tiada henti-hentinya memberi semangat dan inspirasi
dengan penuh kesabaran dan ketulusan, doa dan pengorbanan demi
keberhasilan penulis.
Serta buat semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu
yang telah banyak membantu dalam penulisan ini kiranya Allah SWT
memberikan balasan yang berlipat ganda atas kebaikan dan bantuan yang telah
diberikan kepada penulis.
Penulis menyadari bahwa tesis ini masih jauh dari kesempurnaan, sehingga
penulis mengharapkan kritikan dan saran yang bersifat membangun. Akhir kata
semoga tulisan ini dapat menjadi sumbangan yang berarti bagi ilmu
pengetahuan khususnya bidang farmasi.
Medan, April 2013
Penulis
AKTIVITAS ANTI DIABETES EKSTRAK DAUN UBI JALAR (Ipomoea batatas L) PADA MENCIT YANG DIINDUKSI STREPTOZOTOCIN
ABSTRAK
Diabetes melitus (DM) disebabkan oleh kekurangan hormon insulin yang berfungsi memanfaatkan glukosa sebagai sumber energi dan sintesis lemak sehingga kekurangan hormon insulin dapat menyebabkan peningkatan kadar glukosa di dalam darah. Secara tradisional daun ubi jalar digunakan untuk obat kencing manis, penyakit kanker, antioksidan, hiperlipidemi dan juga sebagai obat demam berdarah.
Tujuan penelitian ini adalah untuk menguji efek antidiabetes ekstrak n-heksana (ENH), ekstrak etilasetat (EEA) dan ekstrak etanol (EE) daun ubi jalar pada hewan percobaan mencit yang diinduksi Streptozotocin (STZ) dan untuk mengetahui ekstrak daun ubi jalar yang mempunyai aktivitas anti diabetes paling besar. Penelitian meliputi penyiapan bahan, pembuatan ekstrak, karakterisasi ekstrak, penapisan fitokimia, pengujian aktivitas antidiabetes ekstrak, pengukuran KGD mencit dan analisis data. Hewan percobaan (n=25) dibagi 5 grup: grup kontrol carboksimetilcelulosa (CMC) 0,5%, kontrol positif suspense metformin 65 mg/kg bb, tiga grup uji ENH, EEA, EE daun ubi jalar Uji aktivitas antidiabetes dimulai dengan tes toleransi gluksa untuk mengetahui ekstrak yang lebih berkhasiat. Ekstrak tersebut diuji aktivitas antidiabetes dengan menggunakan mencit yang diinduksi STZ dibagi tiga variasi dosis 100, 200, 300 mg/kg bb. Data dianalisis secara ANAVA dan beda rata-rata Duncan.
Hasil karakterisasi menunjukan ENH: kadar air 1,99%; abu total 1,26%; abu tidak larut asam 0,24%; sari larut etanol 36, 49%; sari larut air 2,05%. EAE: kadar air 7,98%; abu total 1,59%; abu tidak larut asam 0,43%; sari larut etanol 31,4%; sari larut air 4,43%; EE: kadar air 9,96%; abu total 1,44%; abu tidak larut asam 0,32%, sari larut etanol 11,2%; sari larut air 41,61%. Penapisan fitokimia menunjukkan adanya flavonoid, saponin, dan tannin pada EAE, EE daun ubi jalar. Penurunan KGD mencit pada uji pendahuluan sebagai berikut EEDUJ> EEADUJ>metformin>EnHDUJ. Pada hari ke-3 efek antidiabetes EAE 200 mg/kg bb, EE 300 mg/kg bb sama dengan metformin 65 mg/kg bb, EE 200 mg/kg bb sudah timbul efek. Pada hari ke-5 semua sudah menunjukkan efek kecuali CMC 0,5%. Pada hari ke-15 semua perlakuan EEDUJ (100, 200, 300) mg/kg bb, EEADUJ (100, 200, 300) mg/kg bb memberi efek. EEDUJ 300 mg/kg bb dan EEADUJ 100 mg/kg bb berbeda nyata berdasarkan uji beda rata-rata Duncan (α = 0,05).
ANTIDIABETIC ACTIVITY OF SWEET POTATO LEAF EXTRACT (Ipomoea batatas L) IN STREPTOZOTOCIN-INDUCED MICE
ABSTRACT
Diabetes mellitus (DM) is caused by the deficiency of insulin production that functions in the utilization of glucose as the source of energy and fat synthesis so that the lack of insulin hormone will increases the blood glucose level. Traditionally, sweet potato leaves have been used for the treatment of diabetes, cancer, as antioxidant, hyperlipidemic, by natives in different regions and also to cure dengue fever.
The objectives of this study were to analyze antidiabetic activity of n-hexane extract (NHE), ethylacetate extract (EAE), and ethanol extract (EE) of SPLs in streptozotocin-induced mice and to determine the extract of the highest activity. This study consisted of plant material procurement and extract preparation, phytochemical screening, mice blood glucose level examination, and data analysis. The experimental animals (n=25) were divided into 5 groups: control group treated with 0.5% carboxymethylcellulose (CMC) suspension, positive control group treated with metformin suspension with a dose of 65 mg/kg bw, three test groups NHE, EAE, and EE of SPLs. Analysis of their antidiabetic activity was started by measuring glucose tolerance to identify the extract of the highest activity at varied dosages ( 100, 200, and 300 mg/kg bw) of this extract was examined on the streptozotocin-induced mice. Anova and Duncan tests were performed to test the significance of of these extracts,
This study showed that NHE contained: water 1.99%; total ash 1.26%; acid-insoluble ash 0.24%; ethanol-soluble extract 36.49%; water-soluble extract 2.05%. Ethyl acetate extract contained: water 7.98%; total ash 1.59%; acid-insoluble ash 0.43%; ethanol-soluble extract 31.4%; water-soluble extract 4.43%. Ethanol extract contained: water 9.96%; total ash 1.44%; acid-insoluble ash 0.32%; ethanol-soluble extract 11.2%; water-soluble extract 41.61%. Phytochemical screening demonstrated the presence of flavonoid, saponin, and tannin in EAE and EE of SPLs. The antidiabetic activity of extracts in deacreasing order laters their activity was EE, EAE, metformin, and NHE. Three-day treatment with EAE 200 mg/kg bw and 300 mg/kg bw gave the same effect as that of 65 mg/kg bw metformin. At the fifth day of treatment, all extracts at dosages showed exerted antidiabetic effect, except 0.5% CMC. At the fifteenth day of treatment, all extracts at dosages of 100, 200, and 300 mg/kg bw exerted similar effects to those of metformin, except 0.5% CMC. Antidiabetict effect exerted by EE of SPLs 300 mg/kg bw was significantly different from that produced by EAE
100 mg/kg bw (Duncan test; α = 0.05).
effects.
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL ... i
HALAMAN PENGESAHAN ... iii
ABSTRAK ... vii
ABSTRACT ... viii
DAFTAR ISI ... x
DAFTAR TABEL ... xiv
DAFTAR GAMBAR ... xv
DAFTAR LAMPIRAN ... xvi
BAB I PENDAHULUAN ... 1
1.1 Latar Belakang ... 1
1.2 Kerangka Pikir Penelitian ... 4
1.3 Perumusan Masalah ... 5
1.4 Hipotesis ... 6
1.5 Tujuan Penelitian ... 6
1.6 Manfaat Penelitian ... 6
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ... 7
2.1 Uraian Tumbuhan ... 7
2.1.1 Klasifikasi Tumbuhan ... 7
2.1.2 Nama Lain ... 7
2.1.3 Morfologi Tumbuhan ... 7
2.1.5 Khasiat dan Kegunaan Tumbuhan ... 8
2.2 Simplisia ... 9
2.3 Ekstrak ... 9
2.3.1 Ekstraksi ... 9
2.3.1.1 Cara dingin ... 10
2.3.1.2 Cara panas ... 11
2.4 Pengaturan Kadar Glukosa Dalam Darah ... 12
2.5 Diabetes Melitus ... 14
2.5.1 Klasifikasi Diabetes Melitus ... 14
2.5.2 Penyebab Diabetes Melitus ... 16
2.5.3 Diagnosis Diabetes Melitus ... 17
2.5.4 Pengobatan Diabetes Melitus ... 17
2.6 Penilaian Pengontrolan Glukosa ... 20
2.6.1 Metode Pengontrolan Glukosa ... 20
2.6.2 Kadar Glukosa ... 21
2.7 Streptozotocin ... 21
2.8 Metformin ... 23
BAB III METODE PENELITIAN ... 25
3.1 Metode Penelitian ... 25
3.2 Desain Penelitian ... 25
3.3 Tempat dan Waktu Penelitian ... 25
3.4 Alat dan Bahan ... 25
3.4.1 Alat-alat yang Digunakan ... 25
3.5 Hewan Uji ... 26
3.6 Pembuatan Pereaksi ... 26
3.7 Sampel ... 27
3.7.1 Pengambilan Bahan ... 27
3.7.2 Identifikasi Tumbuhan ... 27
3.7.3 Pengolahan Bahan ... 27
3.7.4 Pembuatan Ekstrak Daun Ubi Jalar ... 27
3.7.4.1 Ekstrak n-Heksana ... 27
3.7.4.2 Ekstrak Etil Asetat ... 27
3.7.4.3 Ekstrak Etanol ... 28
3.8 Karakterisasi Ekstrak n-Heksan, Etil Asetat, dan Etanol Daun Ubi Jalar ... 29
3.8.1 Penetapan Kadar Air ... 29
3.8.2 Penetapan Kadar Abu Total ... 29
3.8.3 Penetapan Kadar Abu yang Tidak Larut dalam Asam ... 30
3.8.4 Penetapan Kadar Sari yang Larut dalam Air ... 30
3.8.5 Penetapan Kadar Sari yang Larut dalam Etanol ... 30
3.9 Penapisan Fitokimia Ekstrak Daun Ubi Jalar ... 31
3.9.1 Pemeriksaan Alkaloid ... 31
3.9.2 Pemeriksaan Flavonoid ... 31
3.9.3 Pemeriksaan Glikosida ... 32
3.9.4 Pemeriksaan Glikosida Antrakinon ... 33
3.9.5 Pemeriksaan Saponin ... 33
3.9.6 Pemeriksaan Tanin ... 33
3.10 Penyiapan Hewan Percobaan ... 34
3.11 Pembuatan Sediaan Uji ... 34
3.11.1 Sediaan Suspensi CMC 0,5 % ... 34
3.11.2 Pembuatan Larutan Pembanding Metformin ... 34
3.11.3 Pembuatan Larutan Streptozotocin (STZ) ... 35
3.11.4 Pembuatan Suspensi EnHDUJ, EEADUJ dan EEDUJ . 35
3.12 Pengujian Farmakologi ... 35
3.12.1 Pengukuran Kadar Glukosa Darah Normal Mencit ... 35
3.12.2 Uji pendahuluan ... 35
3.12.3 Penginduksian Diabetes Hewan Uji ... 36
3.12.4 Uji Aktivitas Antidiabetes EnHDUJ, EEADUJ dan EEDUJ ... 36
3.13 Metode Pengambilan Darah ... 37
3.14 Analisis Data ... 38
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 40
4.1 Hasil Identifikasi dan Hasil Ekstraksi ... 40
4.2 Hasil Uji Pendahuluan ... 41
4.3 Hasil Uji aktivitas anti diabetes SEEADUJ dan SEEDUJ .... 44
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 66
5.1 Kesimpulan ... 66
5.2 Saran ... 67
DAFTAR PUSTAKA ... 68
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 2.1 Diagnosis Diabetes Mellitus ... 17
Tabel 3.1 Rancangan Acak Lengkap ... 38
Tabel 3.2 Anava ... 39
Tabel 4.1 Karakterisasi Ekstrak ... 41
Tabel 4.2 Hasil Penapisan Fitokimia EnHDUJ, EEADUJ dan EEDUJ ... 41
Tabel 4.3 Hasil uji beda rata-rata Duncan terhadap KGD mencit pada hari ke-1 ... 50
Tabel 4.4 Hasil uji beda rata-rata Duncan terhadap KGD mencit pada hari ke- 3 ... 52
Tabel 4.5 Hasil uji beda rata-rata Duncan terhadap KGD mencit pada hari ke-5 ... 54
Tabel 4.6 Hasil uji beda rata-rata Duncan terhada KGD mencit pada hari ke-7 ... 56
Tabel 4.7 Hasil uji beda rata-rata Duncan terhada KGD mencit pada hari ke-9 ... 58
Tabel 4.8 Hasil uji beda rata-rata Duncan terhada KGD mencit pada hari ke-11 ... 60
Tabel 4.9 Hasil uji beda rata-rata Duncan terhada KGD mencit pada hari ke-13 ... 61
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1.1 Skema kerangka pikir penelitian ... 5
Gambar 2.1 Rumus Bangun Metformin . ... 23
Gambar 4.1 Grafik pengukuran KGD setelah perlakuan TTGO ... 43
Gambar 4.2 Grafik pengukuran KGD mencit dengan Perlakuan penginduksian STZ ... 48
Gambar 4.3 Grafik pengukuran KGD mencit dengan Perlakuan hari ke- 1 ... 49
Gambar 4.4 Grafik pengukuran KGD mencit dengan Perlakuan hari ke- 3 ... 51
Gambar 4.5 Grafik pengukuran KGD mencit dengan Perlakuan hari ke-5 ... 53
Gambar 4.6 Grafik pengukuran KGD mencit dengan Perlakuan pada hari ke-7 ... 55
Gambar 4.7 Grafik pengukuran KGD mencit dengan Perlakuan pada hari ke- 9 ... 57
Gambar 4.8 Grafik pengukuran KGD mencit dengan Perlakuan pada hari ke- 11 ... 59
Gambar 4.9 Grafik pengukuran KGD mencit dengan Perlakuan pada hari ke- 13 ... 61
Gambar 4.10 Grafik pengukuran KGD mencit dengan Perlakuan pada hari ke- 15 ... 62
Gambar 4.11 Grafik penurunan KGD mencit untuk setiap waktu setelah perlakuan ... 65
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1 Tabel konversi dosis hewan percobaan ... 72
Lampiran 2 Skema alur penelitian ... 73
Lampiran 3 rminasi tumbuhan ubi jalar . . . ………. 74
Lampiran 4 Tumbuhan ubi jalar (Ipomoea batatas L) ……….... 75
Lampiran 5 Daun ubi jalar ……… 75
Lampiran 6 Simplisia daun ubi jalar . . ……….. 76
Lampiran 7 Serbuk simplisia daun ubi jalar ……….... 76
Lampiran 8 Karakterisasi ekstrak daun ubi jalar ……….. 77
Lampiran 9 Surat keterangan stain mencit ………... 92
Lampiran 10 Surat komisi etik ………... 93
Lampiran 11 Mencit galur Swiss albino ………. 94
Lampiran 12 Cara menghitung dosis ………. 95
Lampiran 13 Mengukur KGD mencit ………. 96
Lampiran 14 Data KGD mencit pada TTGO ……… 97
Lampiran 15 Hasil rata-rata dan deviasi KGD mencit pada TTGO …… 99
Lampiran 16 Hasil ANAVA terhadap KGD mencit pada TTGO …….. 100
Lampiran 17 Hasil beda rata-rata Duncan pada TTGO ……… 101
Lampiran 18 Data KGD mencit pada uji aktivitas antidiabetes ………. 105
Lampiran 19 Hasil rata-rata dan standar deviasi KGD mencit pada uji aktivitas antidiabetes ………. 108
DAFTAR SINGKATAN
ADA = American Diabetes Association ANAVA = Analisis Variansi
CMC = Carboxyl Methyl Cellulose
DM = Diabetes Melitus
DMG = Diabetes Mellitus Gestasional DMTI = Diabetes Mellitus Tipe satu DMTII = Diabetes Mellitus Tipe dua DNA = Deoxyribonucleic Acid
EEADUJ = Ekstrak Etil Asetat Daun Ubi Jalar EEDUJ = Ekstrak Etanol Daun Ubi Jalar En-HDUJ = Ekstrak n-Heksan Daun Ubi Jalar GLUT2 = Glucose-trasporter 2
KGD = Kadar Glukosa Darah
MEDA = Medanense
NO = Nitric Oxide
SEEADUJ = Suspensi Ekstrak Etil Asetat Daun Ubi Jalar SEEDUJ = Suspensi Ekstrak Etanol Daun Ubi Jalar SEn-HDUJ = Suspensi Ekstrak n-Heksan Daun Ubi Jalar SMet = Suspensi Metformin
STZ = Steptozotocin
AKTIVITAS ANTI DIABETES EKSTRAK DAUN UBI JALAR (Ipomoea batatas L) PADA MENCIT YANG DIINDUKSI STREPTOZOTOCIN
ABSTRAK
Diabetes melitus (DM) disebabkan oleh kekurangan hormon insulin yang berfungsi memanfaatkan glukosa sebagai sumber energi dan sintesis lemak sehingga kekurangan hormon insulin dapat menyebabkan peningkatan kadar glukosa di dalam darah. Secara tradisional daun ubi jalar digunakan untuk obat kencing manis, penyakit kanker, antioksidan, hiperlipidemi dan juga sebagai obat demam berdarah.
Tujuan penelitian ini adalah untuk menguji efek antidiabetes ekstrak n-heksana (ENH), ekstrak etilasetat (EEA) dan ekstrak etanol (EE) daun ubi jalar pada hewan percobaan mencit yang diinduksi Streptozotocin (STZ) dan untuk mengetahui ekstrak daun ubi jalar yang mempunyai aktivitas anti diabetes paling besar. Penelitian meliputi penyiapan bahan, pembuatan ekstrak, karakterisasi ekstrak, penapisan fitokimia, pengujian aktivitas antidiabetes ekstrak, pengukuran KGD mencit dan analisis data. Hewan percobaan (n=25) dibagi 5 grup: grup kontrol carboksimetilcelulosa (CMC) 0,5%, kontrol positif suspense metformin 65 mg/kg bb, tiga grup uji ENH, EEA, EE daun ubi jalar Uji aktivitas antidiabetes dimulai dengan tes toleransi gluksa untuk mengetahui ekstrak yang lebih berkhasiat. Ekstrak tersebut diuji aktivitas antidiabetes dengan menggunakan mencit yang diinduksi STZ dibagi tiga variasi dosis 100, 200, 300 mg/kg bb. Data dianalisis secara ANAVA dan beda rata-rata Duncan.
Hasil karakterisasi menunjukan ENH: kadar air 1,99%; abu total 1,26%; abu tidak larut asam 0,24%; sari larut etanol 36, 49%; sari larut air 2,05%. EAE: kadar air 7,98%; abu total 1,59%; abu tidak larut asam 0,43%; sari larut etanol 31,4%; sari larut air 4,43%; EE: kadar air 9,96%; abu total 1,44%; abu tidak larut asam 0,32%, sari larut etanol 11,2%; sari larut air 41,61%. Penapisan fitokimia menunjukkan adanya flavonoid, saponin, dan tannin pada EAE, EE daun ubi jalar. Penurunan KGD mencit pada uji pendahuluan sebagai berikut EEDUJ> EEADUJ>metformin>EnHDUJ. Pada hari ke-3 efek antidiabetes EAE 200 mg/kg bb, EE 300 mg/kg bb sama dengan metformin 65 mg/kg bb, EE 200 mg/kg bb sudah timbul efek. Pada hari ke-5 semua sudah menunjukkan efek kecuali CMC 0,5%. Pada hari ke-15 semua perlakuan EEDUJ (100, 200, 300) mg/kg bb, EEADUJ (100, 200, 300) mg/kg bb memberi efek. EEDUJ 300 mg/kg bb dan EEADUJ 100 mg/kg bb berbeda nyata berdasarkan uji beda rata-rata Duncan (α = 0,05).
ANTIDIABETIC ACTIVITY OF SWEET POTATO LEAF EXTRACT (Ipomoea batatas L) IN STREPTOZOTOCIN-INDUCED MICE
ABSTRACT
Diabetes mellitus (DM) is caused by the deficiency of insulin production that functions in the utilization of glucose as the source of energy and fat synthesis so that the lack of insulin hormone will increases the blood glucose level. Traditionally, sweet potato leaves have been used for the treatment of diabetes, cancer, as antioxidant, hyperlipidemic, by natives in different regions and also to cure dengue fever.
The objectives of this study were to analyze antidiabetic activity of n-hexane extract (NHE), ethylacetate extract (EAE), and ethanol extract (EE) of SPLs in streptozotocin-induced mice and to determine the extract of the highest activity. This study consisted of plant material procurement and extract preparation, phytochemical screening, mice blood glucose level examination, and data analysis. The experimental animals (n=25) were divided into 5 groups: control group treated with 0.5% carboxymethylcellulose (CMC) suspension, positive control group treated with metformin suspension with a dose of 65 mg/kg bw, three test groups NHE, EAE, and EE of SPLs. Analysis of their antidiabetic activity was started by measuring glucose tolerance to identify the extract of the highest activity at varied dosages ( 100, 200, and 300 mg/kg bw) of this extract was examined on the streptozotocin-induced mice. Anova and Duncan tests were performed to test the significance of of these extracts,
This study showed that NHE contained: water 1.99%; total ash 1.26%; acid-insoluble ash 0.24%; ethanol-soluble extract 36.49%; water-soluble extract 2.05%. Ethyl acetate extract contained: water 7.98%; total ash 1.59%; acid-insoluble ash 0.43%; ethanol-soluble extract 31.4%; water-soluble extract 4.43%. Ethanol extract contained: water 9.96%; total ash 1.44%; acid-insoluble ash 0.32%; ethanol-soluble extract 11.2%; water-soluble extract 41.61%. Phytochemical screening demonstrated the presence of flavonoid, saponin, and tannin in EAE and EE of SPLs. The antidiabetic activity of extracts in deacreasing order laters their activity was EE, EAE, metformin, and NHE. Three-day treatment with EAE 200 mg/kg bw and 300 mg/kg bw gave the same effect as that of 65 mg/kg bw metformin. At the fifth day of treatment, all extracts at dosages showed exerted antidiabetic effect, except 0.5% CMC. At the fifteenth day of treatment, all extracts at dosages of 100, 200, and 300 mg/kg bw exerted similar effects to those of metformin, except 0.5% CMC. Antidiabetict effect exerted by EE of SPLs 300 mg/kg bw was significantly different from that produced by EAE
100 mg/kg bw (Duncan test; α = 0.05).
effects.
BAB I
PENDAHULUAN
1.1Latar Belakang
Diabetes melitus (DM) adalah penyakit kronis yang disebabkan oleh
ketidak mampuan tubuh untuk memproduksi hormon insulin atau karena
penggunaan yang tidak efektif dari insulin. Hal ini ditandai dengan tingginya
kadar glukosa dalam darah. Penyakit ini membutuhkan perhatian dan perawatan
medis dalam waktu lama baik untuk mencegah komplikasi maupun perawatan
sakit. DM ada yang merupakan penyakit genetik atau disebabkan keturunan
disebut DM tipe 1 dan yang disebabkan gaya hidup disebut DM tipe 2. Gaya
hidup yang tidak sehat menjadi pemicu utama meningkatnya prevalensi DM, jika
dicermati ternyata orang-orang yang gemuk mempunyai resiko terkena DM lebih
besar dari yang tidak gemuk (Tan dan Raharja, 2002).
Mulai dari anak-anak dan remaja, gaya hidup sehat dengan mengkonsumsi
banyak sayur dan buah, membiasakan olah raga dan tidak merokok merupakan
kebiasaan yang baik dalam pencegahan DM. Karena alasan diatas, maka perlu
dicari obat antidiabetes yang relatif murah dan terjangkau oleh masyarakat. Salah
satu alternatif adalah dengan melakukan penelitian terhadap obat tradisional yang
mempunyai efek hipoglikemi. Pada tahun 1980 WHO merekomendasikan agar
dilakukan penelitian terhadap tanaman yang memiliki efek menurunkan kadar
glukosa darah karena pemakaian obat sintetik kurang aman karena banyak efek
samping. Sebagaimana diketahui bahwa penyakit Diabetes melitus merupakan
kardiovaskuler, kegagalan ginjal kronis, kerusakan retina yang dapat
menyebabkan kebutaan, serta kerusakan saraf yang dapat menyebabkan impotensi
dan gangren dengan resiko amputasi sehingga penderita DM harus memakai obat
secara rutin dengan biaya mahal. Di samping itu, pemakaian obat terus menerus
dalam waktu cukup lama bahkan seumur hidup akan menimbulkan efek samping
yang membahayakan bahkan sampai menyebabkan kematian. Pemanfaatan
keaneka ragaman hayati sangat besar sekali dan terus berkembang sampai saat ini.
Menurut catatan WHO diperkirakan hampir 80% umat manusia, terutama di
negara-negara berkembang masih menggantungkan dirinya pada
tumbuh-tumbuhan (ekstrak dan bahan aktif biologi) sebagai bahan obat dan untuk menjaga
kesehatan. Harapan hidup yang lebih panjang pada saat prevalensi penyakit kronis
meningkat, adanya kegagalan penggunaan obat moderen untuk beberapa penyakit
tertentu, serta meluasnya akses informasi mengenai obat herbal diseluruh dunia
merupakan faktor pendorong penggunaan obat herbal di negara maju. WHO
merekomendasikan penggunaan obat tradisional termasuk obat herbal dalam
pemeliharaan kesehatan masyarakat, pencegahan dan pengobatan penyakit,
terutama untuk penyakit kronis, degeneratif dan kanker. Hal ini menunjukkan
dukungan WHO untuk kembali ke alam (back to nature). Penyelidikan secara
ekstensif terhadap tumbuhan berkasiat obat terus dilakukan guna penemuan obat
baru (Anonim, 2011). Beberapa tumbuhan obat dari alam Indonesia yang sudah
diteliti dan dapat digunakan secara efektif sebagai antidiabetes seperti, daun
salam, daun kembang sungsang, kulit buah jengkol, daun bungur, biji mahoni, dan
lain-lain. Obat yang berasal dari tumbuhan ini untuk pemakaian jangka waktu
dibandingkan obat sintetik, harga murah, mudah didapat dan untuk menunjang
program pemerintah dalam pengembangan obat tradisional Indonesia (Yuniarti,
2008).
Berdasarkan hal di atas maka peneliti ingin meneliti salah satu tanaman
yang biasa digunakan masyarakat terutama di pulau Jawa yaitu daun ubi jalar
(Ipomoea batatas L) dipercaya dapat menurunkan kadar glukosa darah yang
tinggi. Secara tradisional daun ubi jalar digunakan untuk obat kencing manis,
penyakit kanker, antioksidan, hipolipidemia dan juga sebagai obat demam
berdarah. Lebih kurang 100 gram daun ubi jalar direbus dengan 1 liter air sampai
tinggal 500 ml, kemudian air rebusan diminum. Daun ubi jalar mengandung
senyawa protein, karbohidrat, karoten, serat, flavonoid, vitamin B1, B2, B6 ,C,
kalsium, fosfor, zat besi. Secara empiris di daerah Bukittinggi Sumatera Barat
daun ubi jalar biasa digunakan untuk obat kencing manis dengan cara daun muda
(pucuk) direbus kemudian dimakan dan airnya diminum atau bisa dimakan
sebagai sayuran. Ekstrak umbi ubi jalar kulit putih dosis 4 g/hari berkasiat
menurunkan glukosa darah dan kolesterol dan berdasarkan penelitian ini ekstrak
umbi ubi jalar kulit putih efektif untuk DM tipe 2 yaitu untuk meningkatkan
sensitifitas insulin dan untuk menurunkan kolesterol. Penelitian ini sudah sampai
pada tingkat uji klinis, (Ludvik, 2002; Kusano, 2000). Di Filipina daun ubi jalar
(Camote) sudah sejak lama digunakan sebagai obat kanker, antidiabetes, anti
mutagenik dan anti bakteri.
Berdasarkan dari hal-hal tersebut di atas maka peneliti tertarik untuk menguji
pengaruh ekstrak daun ubi jalar terhadap penurunan kadar glukosa darah pada
secara ilmiah sementara umbinya sudah dilakukan penelitian sampai tingkat uji
klinis. Sebagai bahan penginduksi digunakan senyawa Streptozotocin.
Pengukuran kadar glukosa darah menggunakan alat glukometer, darah diambil
dari ujung ekor mencit yang sudah dibersihkan dengan alkohol kemudian disayat
dengan silet darah yang keluar diukur dan dicatat.
1.2 Kerangka pikir
Penelitian dilakukan terhadap mencit galur Swiss albino dengan dua
metode yaitu metode tes toleransi glukosa oral (TTGO) dan induksi
Streptozotocin. Terdapat tiga variabel yaitu suspensi CMC 0,5%, variasi dosis
ekstrak daun ubi jalar dan obat pembanding Metformin sebagai variabel bebas dan
kadar glukosa darah (KGD) mencit sebagai variabel terikat seperti yang
Variabel bebas Variabel Terikat Parameter
Gambar 1.1 Skema kerangka pikir penelitian
1.3Perumusan Masalah
Berdasarkan pemaparan latar belakang maka rumusan permasalahan
penelitian adalah sebagai berikut:
a. Apakah En-HDUJ, EEADUJ dan EEDUJ mempunyai aktivitas antidiabetes
b. Pada ekstrak daun ubi jalar mana yang mempunyai aktivitas antidiabetes paling
besar.
1.4Hipotesis
Berdasarkan perumusan masalah diatas, maka hipotesis penelitian ini
adalah:
a. En-HDUJ, EEADUJ dan EEDUJ mempunyai efek antidiabetes pada mencit
yang diinduksi dengan STZ.
b. Aktivitas antidiabetes paling besar diduga terdapat pada ekstrak etil asetat.
1.5Tujuan Penelitian
Berdasarkan hipotesis penelitian diatas tujuan penelitian sebagai berikut
a. Mengetahui efek antidiabetes En-HDUJ, EEADUJ dan EEDUJ pada hewan
percobaan mencit yang diinduksi dengan STZ.
b. Mengetahui aktivitas antidiabêtes paling besar dari En-HDUJ, EEADUJdan
EEDUJ.
1.6 Manfaat
Penelitian
Hasik penelitian ini diharapkan dapat memberikan tambahan
pemahaman.yaitu:
a. Memberikan informasi dan pengetahuan kepada masyarakat tentang
penggunaan Daun ubi jalar terhadap pengobatan diabetes.
b. Menunjang program pemerintah dalam pengembangan obat tradisional dan
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Uraian tumbuhan
Uraian tumbuhan meliputi klasifikasi tumbuhanan, nama lain, morfologi
tumbuhan, kandungan kimia, kasiat dan kegunaan.
2.1.1 Klasifikasi tumbuhan
Tumbuhan ubi jalar dapat diklasifikasikan sebagai berikut (Rukmana,
1997):
Divisi : Spermatophyta
Sub divisi : Angiospermae
Kelas : Dicotyledoneae
Ordo : Solanales
Famili : Convolvulaceae
Genus : Ipomoea
Spesies : Ipomoea batatas L.
2.1.2 Nama lain:
Indonesia : Ubi jalar (nama umum), ketela, ketela rambat, telo rambat (Jawa), patatas (Papua), mantang (Sunda).
Inggris : Sweet potato. Melayu : Ubi keledek. Thailand : Phak man thet.
Pilipina : Kamote.
Jepang : Satsumaimo, Caiapo.
Secara morfologi tumbuhan ubi jalar adalah tumbuhan merambat yang
bercabang, batang gundul atau berambut, kadang-kadang membelit dan bergetah.
Panjang batang sampai lima meter, tangkai daun 4-20 cm, helai daun lebar, mulai
bentuk telur sampai membulat dengan pangkal yang berbentuk jantung atau
terpancung rata, bersudut sampai berlekuk. Karangan bunga diketiak daun, bentuk
payung. Daun pelindung kecil dan rontok. Daun kelopak memanjang bulat telur
dan runcing. Mahkota terluar paling kecil berbentuk lonjong sampai bentuk
terompet. Warna bunga ungu muda, panjang 3-4 cm. Benang sari tertanam tidak
sama panjangnya. Tangkai putik bentuk benang, kepala putik bentuk bola
rangkap. Buah kotak bentuk telur. Ditanam pada ketinggian 2-2.000 m di atas
permukaan laut. Kadang-kadang menjadi liar. Pada tumbuhan ubi jalar (Ipomoea
batatas L) cadangan makanan disimpan terutama didalam umbi.
2.1.4 Kandungan kimia tumbuhan
Daun ubi jalar biasa digunakan sebagai sayuran. Tumbuhan ubi jalar juga
merupakan sumber vitamin dan mineral, vitamin yang terkandung dalam
tumbuhan ubi jalar antara lain vitamin A, vitamin C, thiamin (vitamin B1), dan
riboflavin. Sedangkan mineral diantaranya adalah zat besi (Fe), fosfor (P), dan
kalsium (Ca). Kandungan lainnya adalah protein, lemak, serat kasar dan abu
(Kumalaningsih, 2006).
2.1.5 Khasiat dan kegunaan tumbuhan
Daun ubi jalar digunakan sebagai obat diabetes melitus, obat luka akibat
terluka benda tajam, untuk obat rambut rontok dan kebotakan, obat kanker,
antioksidan dan sebagai obat mata (Islam.I). Daun ubi jalar digunakan sebagai
airnya tinggal 500 ml, kemudian air rebusan diminum . Selain dari itu daun ubi
jalar bisa digunakan untuk sayur sedangkan umbinya bisa digunakan untuk
berbagai macam makanan (Setiawan, 2009).
2.2 Simplisia
Simplisia adalah bahan alamiah yang dipergunakan sebagai obat yang
belum mengalami pengolahan apapun juga kecuali dinyatakan lain berupa bahan
yang telah dikeringkan. Simplisia dikelompokkan menjadi tiga macam yaitu
simplisia nabati, hewani, dan mineral. Simplisia nabati adalah simplisia yang
berupa tanaman utuh, bagian tanaman atau eksudat tanaman. Simplisia hewani
berupa zat-zat berguna yang dihasilkan oleh hewan dan belum berupa zat-zat
kimia murni. Simplisia mineral merupakan simplisia yang berasal dari bumi, baik
telah diolah atau belum, tidak berupa zat kimia murni.
2.3 Ekstrak
Ekstrak adalah sediaan kering, kental atau cair yang diperoleh dengan
mengekstraksi senyawa aktif dari simplisia nabati atau simplisia hewani
menggunakan pelarut yang sesuai, kemudian semua atau hampir semua pelarut
diuapkan dan masa atau serbuk yang tersisa diperlakukan sedemikian hingga
memenuhi baku yang telah ditetapkan (Ditjen POM, 1995).
2.3.1 Ekstraksi
Ekstraksi adalah proses penarikan komponen atau zat aktif suatu simplisia
dengan menggunakan pelarut tertentu. Pemilihan metode ekstraksi dipengaruhi
oleh beberapa faktor, yaitu sifat jaringan tumbuhan, sifat kandungan zat aktif serta
kelarutan dalam pelarut yang digunakan. Prinsip ekstraksi adalah melarutkan
polar. Ekstraksi bertingkat secara umum dilakukan secara berturut-turut mulai
dengan pelarut non polar (n-heksana), lalu pelarut kepolarannya menengah (diklor
metan atau etilasetat) kemudian pelarut bersifat polar (metanol atau etanol)
(Harborne, 1987). Metode ekstraksi dengan menggunakan pelarut dibagi menjadi
2 yaitu cara dingin dan cara panas.
2.3.1.1 Cara Dingin
a. Maserasi
Maserasi adalah proses pengekstrakan simplisia dengan cara perendaman
menggunakan pelarut dengan beberapa kali pengocokan atau pengadukan pada
temperatur ruangan. Maserasi sering digunakan dalam penelitian karena cara ini
tidak merusak zat kandungan simplisia. Proses ini sangat menguntungkan karena
dengan perendaman sampel tanaman akan mengakibatkan pemecahan dinding sel
dan membran sel akibat perbedaaan tekanan antara di dalam sel dan di luar sel
sehingga metabolit sekunder yang ada dalam sitoplasma akan terlarut dalam
pelarut organik dan ekstraksi senyawa akan sempurna karena dapat diatur lama
perendaman yang dilakukan. Pemilihan pelarut dalam proses maserasi akan
memberikan efektifitas yang tinggi dalam memperhatikan kelarutan senyawa
bahan alam dalam pelarut tersebut. Secara umum, pelarut etanol merupakan
pelarut yang paling banyak digunakan dalam proses isolasi senyawa organik
bahan alam karena dapat melarutkan golongan metabolit sekunder seperti
alkaloid, tanin, flavonoid (Anonim, 1993). Lebih lanjut, untuk bahan serbuk dari
tumbuhan dapat juga diekstraksi dengan n-Heksana untuk memecahkan
phenolnya. Namun pendekatan ini tidak cocok dengan senyawa-senyawa yang
sensitif terhadap panas.
b. Perkolasi
Perkolasi adalah ekstraksi dengan pelarut yang selalu baru sampai
sempurna yang umunya dilakukan pada temperatur ruangan. Proses terdiri dari
tahapan pengembangan bahan, tahap maserasi antara, tahap perkolasi sebenarnya
(penetesan atau penampungan ekstrak), terus menerus sampai diperoleh ekstrak
(perkolat).
2.3.1.2 Cara Panas
a. Infundasi
Infundasi adalah ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur penangas air
(bejana infus diatas penangas air mendidih, temperatur terukur 90o
a. Dekoktasi
C) selama 15
menit. Cara ini biasa digunakan untuk zat yang akan diekstraksi tahan pemanasan.
Jika tidak ada ketentuan lain infus biasanya disaring panas.
Dekoktasi adalah sama dengan infundasi pada waktu yang lebih lama (≥
30 menit).
b. Soxhletasi
Soxhletasi adalah ekstraksi menggunakan pelarut yang selalu baru
dilakukan dengan alat soklet sehingga terjadi ekstraksi berkelanjutan dengan
jumlah pelarut konstan dengan adanya pendingin balik. Keuntungan cara ini
adalah pelarut yang digunakan lebih sedikit dan pelarut murni sehingga dapat
dibanding dengan maserasi atau perkolasi. Kerugian cara ini adalah tidak dapat
digunakan untuk senyawa-senyawa termo labil (Harborne, 1987).
c. Refluks
Refluks adalah ekstraksi dengan pelarut pada temperatur titik didihnya,
selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang relatif konstan dengan
adanya pendingin balik. Umunya dilakukan pengulangan proses pada residu
pertama sampai 3-5 kali.
d. Digesti
Digesti adalah maserasi kinetik (dengan pengadukkan kontinyu) pada
temperatur ruangan (kamar).
2.4 Pengaturan Kadar Glukosa Dalam Darah
Pengaturan kadar glukosa dalam darah dipengaruhi oleh organ-organ
tertentu yang paling penting adalah pankreas dan hati.
a. Pankreas
Pankreas adalah suatu organ lonjong kira-kira 15 cm, yang terletak
dibelakang lambung dan sebagian di belakang hati. Organ ini terdiri dari jaringan
eksokrin dan endokrin. Sel endokrin mensekresikan beberapa jenis hormon. Jenis
hormon yang paling banyak dijumpai adalah sel-α (mensekresikan hormon glukagon), sel-ß (mensekresikkan hormon insulin), sel-D (memproduksi
somatostatin), dan sel yang bekerja memproduksi pankreas polipeptida (Tan dan
Raharja, 2002). Hormon yang berperan paling penting dalam pengaturan glukosa
kadar glukosa darah, sedangkan glukagon bekerja meningkatkan glukosa darah
dengan cara mengubah glikogen menjadi glukosa (Faigin, 2001).
b. Hati
Hati merupakan organ utama yang menstabilkan keseimbangan glukosa
antara absorbsi dan penimbunannya sebagai glikogen (Tan dan Raharja, 2002).
Pada keadaan setelah makan, sebanyak dua pertiga glukosa yang diabsorbsi dari
usus segera disimpan di hati dalam bentuk glikogen. Jika glukosa tidak memasuki
tubuh selama beberapa jam, glikogen hati diubah atas perintah glukagon (yang
mengaktifkan enzim pengubah glikogen, phosporilase). Degradasi glikogen
menghasilkan glukosa, yang kemudian dilepaskan kedalam aliran darah sehingga
konsentrasi dalam darah meningkat. Sebagai reaksi dari kegiatan glukagon yang
menaikkan glukosa darah, insulin diproduksi untuk membawa glukosa yang baru
saja dilepaskan kedalam aliran darah menuju sel-sel tubuh. Hal ini mempercepat
turunnya glukosa darah, jika masukan karbohidrat ditiadakan, aksi
hormon-hormon ini secara perlahan menghilang karena glikogen hati habis (Faigin, 2001).
c. Insulin.
Insulin merupakan protein kecil yang mengandung dua rantai
polipeptida yang dihubungkan oleh ikatan disulfida. Disintesis sebagai protein
perkusor yang mengalami pemisahan proteolik untuk membentuk insulin dan
autonomik sekresi insulin dipacu karena kadar glukosa dalam darah meningkat
dan di fosfolirasi dalam sel β-pankreas.
Gejala hipoglikemia merupakan reaksi samping yang paling serius dan
umum dari kelebihan dosis insulin. Diabetes jangka lama sering tidak
memproduksi sejumlah hormon yang menghalangi pengaturan insulin (glukagon,
epineprin, kortisol dan hormon pertumbuhan) yang secara normal memberikan
pertahanan efektif terhadap hipoglikemia reaksi samping lainnya berupa
klipoodistrofi dan reaksi alergi (Price dan Wilson, 2006).
2.5 Diabetes melitus
Diabetes melitus adalah suatu penyakit yang ditandai dengan adanya
hiperglikemia kronik dan gangguan metabolisme khususnya karbohidrat di dalam
tubuh karena defisiensi insulin relatif maupun absolut. Kekurangan insulin relatif
terjadi jika produksi insulin tidak sesuai dengan kebutuhannya, kerja insulin pada
sel yang dituju diperlemah oleh antibodi insulin, jumlah reseptor insulin pada
organ yang dituju berkurang atau ada cacat reseptor insulin sedangkan
kekurangan insulin absolut terjadi jika pankreas tidak mampu untuk
mensekresikan insulin. Gejala diabetes melitus berupa poliuria (sering buang air
kecil), polidipsia (banyak minum), berat badan menurun walaupun polifagia
(banyak makan) dan rasa lemas (Mutschler, 1999).
2.5.1 Klasifikasi DM
Klasifikasi diabetes melitus dan kategori lain intoleransi glukosa
berdasarkan National Diabetes Data Group of the National Institutes of Health
adalah:
i. Diabetes melitus tipe I tergantung insulin (DMTI)
Penderita tipe ini umumnya timbul pada masa kanak-kanak. Pada diabetes
melitus tipe I terdapat destruksi dari sel-sel-ß pankreas, sehingga tidak
memproduksi insulin lagi dengan akibat sel-sel tidak bisa menyerap glukosa
dan glukosa akan tetap berada di dalam pembuluh darah yang artinya kadar
glukosa darah akan meningkat.
ii. Diabetes melitus tipe II tidak tergantung insulin (DMTII)
Diabetes tipe II lebih sering dijumpai dibandingkan dengan diabetes melitus
tipe I dan biasanya penderita berusia di atas 40 tahun dan disertai kegemukan.
Pada diabetes melitus tipe II jumlah insulin yang diproduksi normal tetapi
jumlah reseptor insulin yang terdapat pada permukaan sel sedikit sehingga sel
akan kekurangan glukosa dan glukosa di dalam pembuluh darah meningkat
menyebabkan terjadinya hiperglikemia.
iii. Diabetes melitus tipe lain yang berkaitan dengan sindroma tertentu seperti
penyakit pankreas, penyakit hormonal, obat/bahan kimia dan kelainan
reseptor.
b. Gangguan toleransi glukosa
i. Gangguan toleransi glukosa pada orang yang tidak gemuk
ii. Gangguan toleransi glukosa pada orang yang gemuk
iii. Gangguan toleransi glukosa yang berkaitan dengan sindroma tertentu.
c. Diabetes Melitus pada kehamilan
Diabetes Melitus Gestasional (DMG) adalah keadaan diabetes atau
intoleransi glukosa yang timbul selama masa kehamilan dan biasanya berlangsung
DMG dan umumnya terdeteksi pada atau setelah trisemester kedua. Kebanyakan
kembali normal setelah melahirkan, tetapi 30% - 50% berkembang menjadi DM
type 2 atau intoleransi glukosa. Kontrol metabolisme yang ketat dapat mengurangi
resiko tersebut.
2.5.2 Penyebab diabetes
Diabetes melitus dapat disebabkan oleh faktor-faktor sebagai berikut
(Soegondo, 2002):
a. Kelainan fungsi sel-sel ß pankreas yang bersifat genetik (menurun)
Faktor genetik/keturunan biasanya memegang peranan penting pada
mayoritas penderita diabetes melitus.
b. Faktor lingkungan
Faktor lingkungan dapat mengubah integritas dan fungsi sel ß-pankreas
pada individu yang rentan. Faktor-faktor tersebut antara lain:
i. Agen yang dapat menimbulkan infeksi virus seperti virus penyebab
penyakit gondongan dan coxackievirus B4
ii. Obesitas
. Virus ini kemungkinan
berperan sebagai pemicu terhadap destruksi pulau Langerhans
secara langsung atau secara autoimun.
Obesitas berkaitan dengan resistensi insulin menyebabkan
kemungkina besar gangguan toleransi glukosa dan diabetes melitus tipe II.
c.Faktor demografi
Faktor demografi yaitu jumlah penduduk meningkat, penduduk berumur di
atas 40 tahun meningkat dan adanya urbanisasi merupakan penyebab
d. Gangguan sistem imunitas
Gangguan sistem imun mungkin merupakan dasar timbulnya diabetes pada
orang-orang tertentu. Sistem ini dapat dilakukan oleh autoimunitas disertai
pembentukan sel-sel antibodi terhadap sel-sel ß pankreas dan akhirnya
akan menyebabkan kerusakan sel-sel pensekresi insulin.
2.5.3 Diagnosis diabetes
Kriteria yang biasa digunakan untuk menegakkan diagnosis diabetes
mellitus adalah dari gejala yang timbul dan glukosa plasma. Adapun gejala
diabetes ditandai dengan poliuria, polidipsia serta penurunan berat badan
walaupun terjadi polifagia (peningkatan nafsu makan). Gejala lainnya adalah
glikosuria, ketosis, asidosis dan koma. Untuk parameter glukosa plasma,
American Diabetes Association (ADA) merekomendasikan parameter glukosa
puasa sebagai acuan utama untuk mendiagnosis diabetes melitus pada orang
dewasa. Namun selain itu bisa juga ditetapkan dari glukosa plasma sewaktu
maupan 2 jam setelah mengkonsumsi glukosa. Jika nilai glukosa plasma masih
belum dapat ditentukan dengan tegas, maka pengujian dapat diulangi pada hari
yang berbeda (Triplitt, dkk., 2005).
Tabel 2.1 Diagnosis diabetes melitus
Parameter Normal
Pengobatan diabetes melitus pada dasarnya ada 3 hal yaitu diet, olah raga
dan obat-obatan. Dalam penanggulangan diabetes melitus, obat hanya merupakan
pelengkap dari diet. Obat hanya perlu diberikan bila pengaturan diet secara
maksimal tidak berhasil mengendalikan kadar glukosa darah. Peranan diet dalam
pengobatan diabetes sangat besar, oleh karena itu bila dengan diet saja tidak
berhasil boleh diberikan insulin, sedang antidiabetik oral hanya diberikan pada
penderita bila benar-benar dibutuhkan (Ganiswara, 1995). Obat yang sering
digunakan dalam mengatasi penyakit diabetes melitus adalah insulin dan non
insulin.
a. Insulin (parentral)
Pemberian insulin dilakukan apabila pankreas dari pasien tidak dapat bekerja
memproduksi insulin secara maksimal. Insulin tidak dapat digunakan secara oral
karena dirusak oleh enzim-enzim protease di lambung, maka selalu diberikan
secara parentral.
Insulin parentral ada 4 tipe:
i. Rapid acting (reaksi cepat), contoh Aspart, onset 15-30 menit, puncak 1-2
jam, durasi 3-5 jam, durasi maksimum 5-6 jam. Lispro, onset 15-30 menit,
puncak1-2 jam, durasi 3-4 jam, durasi maksimum 4-6 jam.
ii. Short–acting (kerja singkat) contoh,Reguler, onset 0,5-1,0 jam, puncak 2-3
jam, durasi 3-6 jam, durasi maksimum 6-8 jam.
iii. Intermediate–acting (kerja sedang) contoh, Lente, onset 3-4 jam, puncak
6-12 jam, durasi 6-12-18 jam, maksimum20 jam.6-10 jam, puncak 10-16
iv.Long-acting (kerja panjang) contoh, Ultralente, onset 6-10 jam, puncak
b. Obat antidiabetik oral
Obat antidiabetik oral digolongkan menjadi beberapa golongan, yaitu
i. Golongan sulfonilurea
Golongan ini bekerja dengan merangsang produksi insulin pada sel ß
pankreas untuk mempertinggi sekresi insulinnya. Oleh karena itu, obat
golongan sulfonilurea ini hanya efektif pada penderita diabetes melitus tipe II
yang sel-sel-ß pulau Langerhansnya masih dapat berfungsi karena merangsang
sekresi insulin di pankreas. Obat-obat yang termasuk golongan sulfonylurea
seperti klorpropamida, tolbutamid, glibenklamid, asetoheksamida dan lain-lain
(Katzung, 1998).
ii. Golongan biguanida
Golongan biguanida berbeda dengan sulfonilurea karena tidak
merangsang sekresi insulin. Golongan biguanida bagi penderita obesitas
refrakter dimana hiperglikemianya disebabkan karena kerja insulin yang tidak
efektif, sebagai terapi kombinasi dengan golongan sulfonilurea bila dengan
sulfonilurea gagal diobati dan sebagai terapi kombinasi dengan insulin
(Katzung, 1998). Golongan biguanida mempunyai mekanisme kerja sebagai
berikut : mengurangi glukoneogenesis di hati, memperlambat absorbsi glukosa
dari saluran pencernaan dan peningkatan penyerapan glukosa di jaringan
perifer.
iii. Penghambat α-glukosidase
glukosa dan menurunkan hiperglikemia. Obat ini tidak menyebabkan
hipoglikemia. Absorbsinya sangat sedikit dan efek samping utama adalah
perut kembung, diare dan kram abdominal. Contoh obat yang termasuk dalam
golongan ini adalah akarbose, pemakaiannya per oral sebagai obat aktif pada
pengobatan penderita DMTI dan sebagai tambahan memungkinkan dengan
insulin pada DMTI. Akarbose menghambat a glukosidase pada vili- vili usus
sehingga menurunkan absorbsi glukosa. Tidak seperti obat oral hipoglikemik
lainnya, akarbosa tidak merangsang pelepasan insulin dari pankreas (Mycek,
2001).
iv. Golongan thiazolidinediones
Thiazolidinediones adalah golongan obat baru yang mempunyai efek
farmakologis meningkatkan sensitivitas insulin. Dapat diberikan secara oral.
Obat ini bekerja dengan jalan mengurangi produksi glukosa di hati. Golongan
obat ini baru mulai dicoba dan belum beredar di pasaran. Obat yang termasuk
ke dalam golongan ini adalah pioglitazone dan rosiglitazone.
v. Golongan miglitinida
Kelompok obat terbaru ini bekerja menurut suatu mekanisme khusus
yaitu mencetuskan pelepasan insulin dari pankreas segera sesudah makan.
Miglitinida harus diminum sebelum makan dan karena resorpsinya cepat,
maka mencapai kadar darah puncak dalam 1 jam. Insulin yang dilepaskan
menurunkan glukosa darah secukupnya. Obat yang termasuk golongan
miglitinida adalah repaglinida (Tan dan Raharja, 2002).
2.6 Penilaian Pengontrolan Glukosa
Metoda yang digunakan untuk pengontrolan glukosa pada semua tipe
diabetes adalah pengukuran glikat hemoglobin. Hemoglobin pada keadaan normal
tidak mengandung glukosa ketika pertama kali keluar dari sumsum tulang. Selama
120 hari masa hidup hemoglobin didalam eritrosit normalnya hemoglobin sudah
mengandung glukosa. Bila kadar glukosa meningkat di atas normal, maka jumlah
glikat hemoglobin juga akan meningkat karena pergantian hemoglobin yang
lambat, nilai hemoglobin yang tinggi menunjukkan bahwa kadar glukosa darah
tinggi selama 4 hari hingga 8 minggu.
2.6.2 Kadar glukosa
Kadar glukosa serum puasa normal adalah 70 sampai 110 mg/dl.
Hiperglikemi didefenisikan sebagai kadar glukosa puasa yang lebih tinggi dari
110 mg/dl, sedangkan hipoglikemi bila kadarnya lebih rendah dari 70 mg/dl.
Glukosa difiltrasi oleh glomerulus ginjal dan hampir semuanya diabsorbsi oleh
tubulus ginjal selama kadar glukosa dalam plasma tidak melebihi kadar ini. Jika
glukosa keluar bersama urin, maka keluarnya glukosa dalam urin merupakan
pertanda DM (Price dan Wilson, 2006).
2.7Streptozotocin
Streptozotocin dengan nama IUPAC
2-deoxy-2[(methylnitrosoamino)-carbony-L-amino)-D-glukopyranose] Memiliki rumus molekul C8H15N3O7
Streptozotocin adalah senyawa yang dihasilkan dari Streptomyces
acromogenes yang merupakan suatu senyawa nitroso urea analog glukosa.
Streptozotocin mudah larut dalam air, sedikit larut dalam alkohol dan keton.
ini mempunyai spesifitas yang tinggi terhadap sel-β. Penyuntikan secara intraperitonial dosis 55 mg/kg bb, dosis tunggal akan menyebabkan hiperglikemia
secara cepat (Mc Neill, 1999). Streptozotocin mempunyai aktivitas
anti-neoplasma dan antibiotik spektrum luas. Streptozotosin dapat secara langsung
merusak masa kritis sel-β-Langerhans atau menimbulkan proses autoimun terhadap sel-β. Streptozotocin menginduksi diabetes pada berbagai spesies hewan sehingga menyerupai adanya hiperglikemik pada manusia. Efek ini secara
ekstensif sudah kelihatan dengan adanya penurunan sel beta nicotinamide adenine
dinucleotide (NAD+) dan menghasilkan perubahan histopatologi sel beta
pankreas. Streptozotocin secara efektif dapat menginduksi diabetes pada kelinci
yang ditandai dengan polidipsia, poliuria, polipagia dan hiperglikemia
STZ menembus sel-β-Langerhans melalui tansporter glukosa GLUT 2. Aksi STZ intraseluler menghasilkan perubahan DNA sel-β pankreas. Alkilasi DNA oleh STZ melalui gugus nitrosourea mengakibatkan kerusakan pada sel-β pankreas. STZ merupakan donor NO (nitric oxide) yang mempunyai kontribusi
terhadap kerusakan sel tersebut melalui peningkatan aktivitas guanil siklase dan
pembentukan cGMP. NO dihasilkan sewaktu STZ mengalami metabolisme dalam
sel. Selain itu, STZ juga mampu membangkitkan oksigen reaktif yang mempunyai
peran tinggi dalam kerusakan sel-β-pankreas. Pembentukan anion superoksida karena aksi STZ dalam mitokondria dan peningkatan aktivitas xantin oksidase.
Dalam hal ini, STZ menghambat siklus Krebs dan menurunkan konsumsi oksigen
mitokondria. Produksi ATP mitokondria yang terbatas selanjutnya mengakibatkan
Streptozotocin menghasilkan efek sitotoksiknya melalui pemutusan
spontan menjadi gugus pengalkilasi dan pengkarbonilasi. Obat ini khususnya
bermanfaat pada pengobatan tumor sel beta pankreas fungsional yang ganas. Obat
ini mempengaruhi sel-sel pada semua tahap dalam siklus sel mamalia. Absorpsi
dan sekresi streptozotocin diberikan secara parenteral setelah pemberian infus
intravena 200-1600 mg/m2, konsentrasi puncak dalam plasma adalah 30-40
μg/ml. waktu paruh obat tersebut mendekati 15 menit. Hanya 10-20% dosis yang ditemukan kembali dalam urin (Goodman dan Gilman, 1998).
2.8 Metformin
Rumus Metformin Hidroklorida (C4H11N5
Mudah larut dalam air, praktis tidak larut dalam eter dan dalam
kloroforom, sukar larut dalam etanol.
.HCl) dengan BM 165,6
(Gambar 2.1). Pemerian Serbuk hablur putih, tidak berbau atau hampir tidak
berbau, higroskopik.
Gambar 2.1 Rumus bangun Metformin.
Metformin adalah obat hipoglikemik oral yang termasuk kedalam
golongan biguanida. Penggunaan utama metformin untuk pengobatan pada DM
tipe 2, terutama pada orang yang mengalami obesitas (Katzung, 2007).
Kerjanya dalam menurunkan glukosa darah tidak menyebabkan ransangan
langsung pada jaringan perifer dengan peningkatan pengeluaran glukosa dari
darah, mengurangi glukoneogenesis hati, memperlambat absorbsi glukosa dari
saluran pencernaan, pengurangan kadar glukagon plasma dan meningkatkan
pengikatan insulin pada reseptor insulin (Katzung, 2007).
Metformin mempunyai waktu paruh 1,5–3 jam, tak terikat protein plasma,
tidak dimetabolisme dan diekskresi oleh ginjal sebagai senyawa aktif. Kerjanya
pada glukoneogenesis di hati dan diduga mengganggu ambilan asam laktat oleh
hati (Ediningsih, 2006).
Metformin diabsorbsi dengan lambat dan tidak mengalami metabolisme
dan dibersihkan dari tubuh dengan sekresi tubular dan diekskresikan lewat urin
dalam bentuk yang tidak berubah. Metformin dikontra indikasikan untuk orang-
orang dengan kondisi yang dapat meningkatkan resiko asidosis laktat (metabolik),
termasuk kelainan ginjal (kadar kreatinin lebih dari 150 µmol/l), kelainan
paru-paru dan hepar. Kegagalan jantung kongestif juga meningkatkan resiko asidosis
laktat dengan metformin.
Efek samping yang paling sering pada metformin yaitu kelainan pada
gastrointestinal, termasuk diare, mual, muntah dan peningkatan flatus. Pontensial
yang paling serius dari efek samping penggunaan metformin adalah asidosis
laktat, meskipun begitu ini sangat jarang dan kebanyakan kasus berkaitan dengan
BAB III
METODE PENELITIAN
3.1 Metode Penelitian
Metode penelitian yang digunakan adalah penelitian eksperimental
dimaksudkan untuk mengetahui pengaruh atau hubungan antara variabel bebas
yang disebut faktor perlakuan dengan variable terikat yang disebut faktor
pengamatan (Hanafiah, 2005).
3.2 Desain penelitian
Penelitian yang dilakukan meliputi pengumpulan dan pengolahan sampel,
identifikasi tumbuhan, pembuatan ekstrak, karakterisasi ekstrak, persiapan hewan
uji, penginduksian hewan uji dengan streptozotocin, pembuatan sediaan dan
bahan uji ekstrak, uji pendahuluan, uji aktivitas anti diabetes ekstrak n-heksana,
ekstrak etilasetat, ekstrak etanol dengan pengukuran kadar glukosa darah hewan
uji dan analisis data.
3.3Tempat dan waktu penelitian
Penelitian dilakukan di laboratorium Farmakognosi dan Laboratorium
Farmakologi Fakultas Farmasi USU. Waktu penelitian dilakukan selama 4 bulan.
3.4Alat dan bahan
3.4.1 Alat-alat yang digunakan
Alat-alat yang digunakan pada penelitian ini adalah: Alat gelas
dryer ( Modulyo, Edward, serial no; 3985), timbangan analitik, timbangan hewan,
alat suntik, oral sonde, glukometer dan strip glukotes.
3.4.2 Bahan penelitian
Bahan yang digunakan adalah Daun ubi jalar yang diperoleh dari daerah
Pancur batu, streptozotocin (Calbiochem), metformin (Sigma), etanol 96%
(Merck), etil asetat (Merck), n-heksana (Merck), asam khlorida, kalium iodida,
iodium, sublimat, asam sulfat,
3.5 Hewan uji
bismut subnitrat. Bahan kimia yang digunakan
kecuali dinyatakan lain adalah berkualitas pro analisa.
Hewan uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah mencit putih jantan
yang diperoleh dari Balai Penyidikan dan Pengujian Veteriner Regional I Medan,
berat badan rata-rata 20-30 g, sehat. Hewan diaklimatisasi di laboratorium selama
lebih kurang satu minggu. Hewan diberi makanan dan minuman yang sesuai.
Hewan uji digunakan untuk uji pendahuluan dibagi 5 kelompok masing-masing
kelompok terdiri dari 5 ekor yaitu: Kelompok I adalah kontrol negatip (CMC
0,5%), Kelompok II kontrol positip (metformin 65 mg/kg bb), Kelompok III
En-HDUJ, Kelompok IV EEADUJ, Kelompok V EEDUJ dan untuk uji kerja induksi
antidiabetes dibagi 8 kelompok masing-masing kelompok terdiri dari 5 ekor
hewan uji yang sudah diinduksi yaitu:
a) Kelompok I adalah kelompok diberi CMC 0,5% sebagai kontrol negatip
b) Kelompok II adalah kontrol positif, yang diberi metformin.
c) kelompok uji III , IV, dosis 100 mg/kg bb, V, VI, dosis 200 mg/kg bb,VII dan
VIII dosis 300 mg/kg bb ekstrak daun ubi jalar.
Pembuatan larutan pereaksi menurut Depkes RI (1995) asam klorida 2N,
asam sulfat 2N, pereaksi Bouchardat, kloralhidrat, pereaksi Mayer, pereaksi
Molish, natrium hidroksida 2N, timbal (II) asetat 0,4 M, asam sulfat 50% dalam
metanol, besi (III) klorida 1%, pereaksi Dragendorff, pereaksi
Liebermann-Bouchardat.
3.7 Sampel
3.7.1 Pengambilan Bahan
Pengambilan bahan dilakukan secara purposive, yaitu tanpa
membandingkan dengan tumbuhan serupa dari daerah lain. Bahan yang digunakan
adalah daun ubi jalar diambil dari daerah Pancur Batu.
3.7.2 Identifikasi tumbuhan
Identifikasi tumbuhan dilakukan di Herbarium Medanense (MEDA)
Universitas Sumatra Utara.
3.7.3Pengolahan bahan
Daun ubi jalar segar dicuci sampai bersih, selanjutnya dipotong- potong
dan diangin-anginkan sampai kering, kemudian diserbuk dan diayak sehingga
diperoleh serbuk yang homogen.
3.7.4 Pembuatan ekstrak daun ubi jalar
Pembuatan ekstrak daun ubi jalar dilakukan secara ekstraksi bertingkat yaitu
maserasi dengan menggunakan beberapa pelarut seperti n-heksana, etilasetat dan
etanol 96% (Ditjen POM, 1972).
3.7.4.1 Ekstrak n-Heksana
Sebanyak 10 bagian serbuk kering daun ubi jalar dengan derajat halus B
n-heksana, tutup, biarkan selama 5 hari terlindung dari cahaya sambil
berulang-ulang diaduk, serkai, peras, cuci ampas dengan cairan penyari secukupnya hingga
diperoleh 100 bagian. Pindahkan ke dalam bejana bertutup, biarkan di tempat
yang sejuk, terlindung dari cahaya, selama 2 hari. Enap tuangkan atau saring.
Pelarut diuapkan dengan rotary evaporator pada suhu 40oC hingga diperoleh
ekstrak kental kemudian dikeringkan dengan Freeze dryer pada suhu ± - 40o
3.7.4.2 Ekstrak etil asetat
C
sehinggga diperoleh ekstrak n-heksana kering sebanyak 43 gram. Ampas
dikeringkan dengan menganginkan (Ditjen POM, 1972).
Ampas yang sudah dikeringkan dimasukkan ke dalam wadah maserasi dan
dimaserasi dengan 75 bagian etil asetat , tutup, biarkan selama 5 hari terlindung
dari cahaya sambil berulang-ulang diaduk, serkai, peras, cuci ampas dengan cairan
penyari secukupnya hingga diperoleh 100 bagian. Pindahkan ke dalam bejana
bertutup, biarkan di tempat yang sejuk, terlindung dari cahaya, selama 2 hari.
Enap tuangkan atau saring. Pelarut diuapkan dengan rotary evaporator pada suhu
400C hingga diperoleh ekstrak kental kemudian dikeringkan dengan Freeze dryer
pada suhu ± - 400
3.7.4.3 Ekstrak Etanol
C sehinggga diperoleh ekstrak etilasetat kering sebanyak 49
gram. Ampas dikeringkan dengan menganginkan (Ditjen POM, 1972).
Ampas yang sudah dikeringkan dimasukkan ke dalam wadah maserasi dan
dimaserasi dengan 75 bagian etanol 96%, tutup, biarkan selama 5 hari terlindung
dari cahaya sambil berulang-ulang diaduk, serkai, peras, cuci ampas dengan cairan
penyari secukupnya hingga diperoleh 100 bagian. Pindahkan ke dalam bejana
tuangkan atau saring. Pelarut diuapkan dengan rotary evaporator pada suhu 400C
hingga diperoleh ekstrak kental kemudian dikeringkan dengan Freeze dryer pada
suhu ± - 400
3.8 Karakterisasi Ekstrak n-Heksana, Etil asetat dan Etanol daun ubi jalar C sehinggga diperoleh ekstrak Etanol kering sebanyak 123 gram
(Ditjen POM, 1972).
Dilakukan pemeriksaan karakteristik dari ekstrak daun ubi jalar yaitu
dengan cara sebagai berikut (Ditjen POM, 1989).
3.8.1 Penetapan Kadar Air
Penetapan kadar air dilakukan dengan metode Azeotropi (destilasi toluen).
Alat ini terdiri dari labu alas bulat 500 ml, alat penampung, pendingin, tabung
penyambung dan tabung penerima 5 ml.
Cara kerja: Sebanyak 200 ml toluen dan 2 ml air suling dimasukkan kedalam labu
alas bulat. Kemudian didestilasi selama 2 jam, setelah itu didinginkan selama 30
menit dan dibaca volume air dengan ketelitian 0,05 ml (volume I). Ke dalam labu
alas bulat tersebut kemudian dimasukkan 5 g ekstrak Daun ubi jalar yang telah
ditimbang dengan seksama, lalu dipanaskan hati-hati selama 15 menit. Setelah
toluen mulai mendidih, destilasi dengan kecepatan 2 tetes perdetik hingga
sebagian besar air terdestilasi. Kemudian kecepatan destilasi dinaikkan hingga 4
tetes perdetik. Setelah semua air terdestilasi, bilas bagian dalam pendingin dengan
toluen. Destilasi dilanjutkan selama 5 menit, kemudian labu penerima dibiarkan
dingin sampai suhu kamar dan bersihkan tetesan air yang mungkin masih terdapat
pada dinding tabung penerima. Setelah air dan toluen memisah sempurna, baca
volume air (volume II). Hitung kadar air dalam persen (WHO, 1992).
Sebanyak 2 g ekstrak daun ubi jalar yang telah digerus dan ditimbang
seksama dimasukkan dalam krus porselin yang telah dipijar dan ditara, kemudian
diratakan. Krus dipijar perlahan-lahan hingga arang habis, pemijaran dilakukan
pada suhu 500o
3.8.3 Penetapan Kadar Abu yang Tidak Larut Dalam Asam
C selama 2 jam kemudian didinginkan dan ditimbang sampai
diperoleh bobot tetap. Kadar abu dihitung terhadap berat ekstrak awal.
Abu yang telah diperoleh dalam penetapan kadar abu dididihkan dalam
25 ml asam klorida encer selama 5 menit, bagian yang tidak larut dalam asam
dikumpulkan, disaring melalui kertas saring dipijarkan sampai bobot tetap,
kemudian didinginkan dan ditimbang. Kadar abu yang tidak larut dalam asam
dihitung terhadap berat ekstrak awal.
3.8.4 Penetapan Kadar Sari yang Larut Dalam Air
Sebanyak 5,0 g ekstrak daun ubi jalar dimaserasi selama 24 jam
dengan 100 ml air-kloroform (2,5 ml kloroform dalam air suling sampai 1 1iter)
menggunakan labu bersumbat sambil berkali-kali dikocok selama 6 jam pertama
dan kemudian didiamkan selama 18 jam. Disaring, uapkan 20 ml filtrat hingga
kering dalam cawan dangkal berdasar rata yang telah ditara, panaskan residu pada
suhu 105°C hingga bobot tetap. Hitung kadar dalam persen senyawa yang larut
dalam air, dihitung terhadap berat ekstrak awal.
3.8.5 Penetapan Kadar Sari yang Larut Dalam Etanol
Lakukan maserasi sejumlah 5,0 g ekstrak daun ubi jalar selama 24 jam
dengan 100 ml etanol (95%), menggunakan labu bersumbat sambil berkali-kali
cepat dengan menghindarkan penguapan etanol, kemudian uapkan 20 ml filtrat
hingga kering dalam cawan dangkal berdasar rata yang telah ditara, panaskan
residu pada suhu 105°C hingga bobot tetap. Hitung kadar dalam persen sari yang
larut dalam etanol 95%, dihitung terhadap berat ekstrak awal.
3.9 Penapisan Fitokimia Ekstrak Daun ubi jalar
Penapisan fitokimia ekstrak meliputi pemeriksaan senyawa golongan
alkaloida, flavonoida, glikosida antrakuinon, saponin, tannin dan
steroida/triterpenoida (Ditjen POM, 1989).
3.9.1 Pemeriksaan Alkaloida
Ekstrak Daun ubi jalar ditimbang sebanyak 0,5 g kemudian ditambahkan
1 ml asam klorida 2 N dan 9 ml air suling, dipanaskan diatas penangas air selama
2 menit. Dinginkan dan saring. Filtrat dipakai untuk percobaan berikut:
a. Filtrat sebanyak 3 tetes ditambah dengan 2 tetes larutan pereaksi
Bouchardat, akan terbentuk endapan berwarna coklat sampai hitam.
b. Filtrat sebanyak 3 tetes ditambah dengan 2 tetes larutan pereaksi
Dragendorff, akan terbentuk warna merah atau jingga.
c. Filtrat sebanyak 3 tetes ditambah dengan 2 tetes larutan pereaksi
Mayer, akan terbentuk endapan menggumpal berwarna putih atau kuning.
d. Alkaloida positif jika ada terjadi endapan atau kekeruhan paling sedikit
dua dari tiga percobaan.
3.9.2 Pemeriksaan Flavonoid
Ekstrak Daun ubi jalar ditimbang sebanyak 0,5 g kemudian ditambahkan
10 ml metanol, refluk selama 10 menit dan disaring dalam keadaan panas. Filtrat
