• Tidak ada hasil yang ditemukan

PCR Protocols A GUIDE TO METHODS AND APPLICATIONS | Suhardi.Universitas Mulawarman.Kalimantan Timur.Indonesia

N/A
N/A
Info
Unduh - Bebas
Protected

Academic year: 2017

Membagikan "PCR Protocols A GUIDE TO METHODS AND APPLICATIONS | Suhardi.Universitas Mulawarman.Kalimantan Timur.Indonesia"

Copied!
481
0
0

Memuat.... (Lihat teks lengkap sekarang)

Unduh sekarang ( 481 Halaman )

Teks penuh

(1)
(2)
(3)
(4)
(5)
(6)
(7)
(8)
(9)
(10)
(11)
(12)
(13)
(14)
(15)
(16)
(17)
(18)
(19)
(20)
(21)
(22)
(23)
(24)
(25)
(26)
(27)
(28)
(29)
(30)
(31)
(32)
(33)
(34)
(35)
(36)
(37)
(38)
(39)
(40)
(41)
(42)
(43)
(44)
(45)
(46)
(47)
(48)
(49)
(50)
(51)
(52)
(53)
(54)
(55)
(56)
(57)
(58)
(59)
(60)
(61)
(62)
(63)
(64)
(65)
(66)
(67)
(68)
(69)
(70)
(71)
(72)
(73)
(74)
(75)
(76)
(77)
(78)
(79)
(80)
(81)
(82)
(83)
(84)
(85)
(86)
(87)
(88)
(89)
(90)
(91)
(92)
(93)
(94)
(95)
(96)
(97)
(98)
(99)
(100)
(101)
(102)
(103)
(104)
(105)
(106)
(107)
(108)
(109)
(110)
(111)
(112)
(113)
(114)
(115)
(116)
(117)
(118)
(119)
(120)
(121)
(122)
(123)
(124)
(125)
(126)
(127)
(128)
(129)
(130)
(131)
(132)
(133)
(134)
(135)
(136)
(137)
(138)
(139)
(140)
(141)
(142)
(143)
(144)
(145)
(146)
(147)
(148)
(149)
(150)
(151)
(152)
(153)
(154)
(155)
(156)
(157)
(158)
(159)
(160)
(161)
(162)
(163)
(164)
(165)
(166)
(167)
(168)
(169)
(170)
(171)
(172)
(173)
(174)
(175)
(176)
(177)
(178)
(179)
(180)
(181)
(182)
(183)
(184)
(185)
(186)
(187)
(188)
(189)
(190)
(191)
(192)
(193)
(194)
(195)
(196)
(197)
(198)
(199)
(200)

Gambar

Figure 1. v i s u a l i z e do fcyclesc a t e dA m p l i f i c a t i o n  o f / 3 ­ g l o b i n  f r a g m e n t s  r a n g i n g  f r o m  150  t o 2951  b p . S a m p l e s   100 fx� c o n t a i n i n g  s t a n d a r d  b u f f e r ,  200 ixM  e a c h  d N T P ,  a n d 250 nM  e a c h  p r i m e r ,  100 n g  o f  h u m a n  g e n o m i c  D N A , a n d 2.5  u n i t s  o f  Taq  p o l y m e r a s e  w e r e  s u b j e c t e d  t o 30   o f  a m p l i f i c a t i o n .  Each  s a m p l e  (2 /xl) w a s  r e s o l v e d  o n  a  1.6%  a g a r o s e  g e l a n d   b y e t h i d i u m  b r o m i d e  f l u o r e s c e n c e .  T h e  l e n g t h s  o f t h e p r o d u c t s  a r e  i n d i ­  at t h e t o p o f  e a c h  l a n e .  T h e  m a r k e r s  are  BstEll­digested p h a g e  X  (500 ng)  a n d H a e l l l ­ d i g e s t e d  <£x174­RF  (250  n g ) . 
Figure  2 S e q u e n c i n g  o f  s i n g l e ­ s t r a n d e d  t e m p l a t e s  p r o d u c e d  f r o m  a  X  gt11 p l a q u e s a m p l e .  A n  8 5 0 ­ b p  i n s e r t  w a s  a s y m m e t r i c a l l y  a m p l i f i e d  w i t h  N e w E n g l a n d B i o L a b s p r i m e r s  # 1 2 1 8  a n d  # 1 2 2 2 ,  t h e  r e a c t i o n s  w e r e  p u r i f i e d  b y  s p i n  d i a l y s i s ,  a n d  t h e  s a m e p r i m e r s  w e r e  s u b s e q u e n t l y  u s e d  in  D N A  s e q u e n c i n g  r e a c t i o n s  w i t h  A m p l i T a q D N A p o l y m e r a s e  ( P e r k i n ­ E l m e r  C e t u s ) .  PCRs  c o n t a i n e d  (A)  50  p m o l  p r i m e r  1218  :  1  p m o l p r i m e r  1222,  (B)  50  p m o l  p r i m e r  1222  :  1  p m o l  p r i m e r  1218. 
Figure  2 b a n c eH P L C  p u r i f i c a t i o n  o f  b i o t i n y l a t e d  o l i g o n u c l e o t i d e s .  Vertical  scale  is  a b s o r ­  at 260 n m . R e t e n t i o n  t i m e s  s h o w n  are i n  m i n u t e s .  T h e  d a s h e d  l i n e  s h o w s  t h e p e r c e n t a g e  o f  b u f f e r  B in t h e e l u t i o n  s o l v e n t .  Details  are g i v e n  i n t h e  t e x t . 
Figure 4 t h e  p e r c e n t a g es o r b a n c eH P L C  p u r i f i c a t i o n  o f  S ­ t r i t y l m e r c a p t o  o l i g o n u c l e o t i d e s .  Vertical  scale  is  a b ­  at 260  n m .  R e t e n t i o n  t i m e s  s h o w n  are  in  m i n u t e s .  T h e  d a s h e d  l i n e  s h o w s   o f  b u f f e r  B i n t h e e l u t i o n  s o l v e n t .  Details  are g i v e n  i n t h e  t e x t . 
+7

Referensi

Unduh sekarang ( PDF - 481 Halaman - 10.80 MB )

Garis besar

PCR Protocols A GUIDE TO METHODS AND APPLICATIONS | Suhardi.Universitas Mulawarman.Kalimantan Timur.Indonesia

Dokumen terkait