Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Kulit Buah Semangka Merah (Citrullus lanatus (Thunb.) Matsum & Nakai) terhadap Escherichia coli dan Staphylococcus aureus

(1)

(2)

Lampiran 2. Gambar buah dan kulit buah semangka merah

Buah semangka merah

(3)

Lampiran 3. Gambar simplisia dan serbuk kulit buah semangka merah

Simplisia

(4)

Lampiran 4. Hasil pemeriksaan mikroskopik serbuk simplisia kulit buah semangka merah (perbesaran 10 x 40)

Keterangan:

1. Jaringan parenkim

(5)

(6)

Lampiran 6. Perhitungan penetapankadar sari larutdalam air simplisia kulit buah

semangka merah

a. Berat sampel = 5,00 g

Kadar sari rata-rata = (20+20,95+19)%

3 = 19,98%

Kadar sari = Berat sari Berat sampel x

100

(7)

Lampiran 7.Perhitungan penetapankadar sarilarutdalam etanol simplisia kulit

buah semangka merah

Kadar sari rata-rata = (21,95+18+16)%

3 = 18,65% Kadar sari = Berat sari

Berat Sampel x 100

(8)

Lampiran 8.Perhitungan penetapankadarabutotal simplisia kulit buah semangka

merah

Berat abu = 0,150 g

Kadar abu = 0,150

2,015 x 100 % = 7,44 %

b. Berat sampel = 2,010 g

Berat abu = 0,170 g

Kadar abu = 0,170

2,010 x 100% = 8,458%

c. Berat sampel = 2,015 g

Berat abu = 0,1552 g

Kadar abu = 0,1552

2,015 x 100% = 7,702%

Kadar abu total rata-rata = (7,44+8,458+7,702)%

3 = 7,86%

Kadar abu total = Berat abu

(9)

Lampiran 9.Perhitungan penetapankadarabu tidaklarutdalamasam simplisia kulit

buah semangka merah

Sampel I Berat sampel = 2,015 g

Berat abu = 0,042 g

Kadar abu = 0,042

2,015 x 100% = 2,80 %

Sampel II Berat sampel = 2,010 g

Berat abu = 0,040 g

Kadar abu = 0,040

2,010 x 100% = 1,99%

Sampel III Berat sampel = 2,015 g

Berat abu = 0,044 g

Kadar abu = 0,044

2,015x 100% = 2,18 %

Kadar abu yang tidaklarutdalamasam rata-rata = (2,08+1,99+2,18)%

3 = 2,083% Kadar abu yang tidaklarutdalamasam

=

Berat Abu

(10)

Lampiran 10. Bagan kerja penelitian

dicuci dari pengotor sampai bersih ditiriskan

ditimbang berat basahnya

pemeriksaan organoleptis

dikeringkanpada lemari pengering dengan suhu 40-50°

ditimbang berat keringnya

dihaluskan dengan blender disimpan dalam wadah yang tertutup rapat sebelum digunakan Kulit buah semangka merah

Simplisia

Serbuk simplisia

Ekstraksi Skrining fitokimia

Karakterisasi

• kadar air

• kadar sari larut dalam air

• kadar sari larut dalam etanol

• kadar abu total

• kadar abu tidak larut dalam asam

senyawa golongan:

• flavonoid

• glikosida

• saponin

• tanin

(11)

Lampiran 10. (Lanjutan)

dimasukkan ke dalam wadah

dituangi dengan etanol 96% dan ditutup direndam selama 3 jam

dimasukkan massa ke dalam perkolator sedikit-demi sedikit

dituang cairan penyari diatas simplisia dan masih terdapat selapis cairan penyari ditutup mulut perkolator, dibiarkan cairan perkolat menetes dengan kecepatan 1 ml/menit ditambahkan cairan penyari secukupnya berulang-ulang hingga selalu terdapat selapis cairan penyari diatas simplisia, hingga diperoleh 80 bagian perkolat

diperas massa, dicampurkan cairan perasan kedalam perkolat, ditambahkan cairan penyari secukupnya hingga diperoleh 100 bagian. Pindahkan kedalam bejana, ditutup, dibiarkan selama 2 hari di tempat sejuk, terlindung dari cahaya, dienap tuangkan atau disaring. Sisa penguapan dilakukan dengan menguapkan 3 g sampai 5 g di atas tangas air

dipekatkan denganrotaryevaporator 400 g serbuk simplisia

Ekstrak kental (51,19 g)

Uji aktivitas antibakteri Skrining fitokimia

senyawa golongan:

• flavonoid

• glikosida

• saponin

• tanin

(12)

Lampiran 10. (Lanjutan)

diambil dengan jarum ose steril

ditanam pada media nutrient agar miring diinkubasi pada suhu 37oC selama 24 jam

disuspensikan dalam 10 ml media nutrient

broth steril

diukur kekeruhan suspensi bakteri

menggunakan spektrofotometer visible pada panjang gelombang 580 nm sampai

diperoleh nilai transmitan 25%

dimasukkan 0,1 ml inokulum ke dalam cawan petri

ditambahkan 15 ml media nutrient agar ke dalam cawan petri

dihomogenkan dan dibiarkan hingga memadat

diletakkan pencadang kertas yang telah direndam ke dalam larutan uji ekstrak dengan berbagai konsentrasi dan pelarut DMSO sebagai blanko

diinkubasi pada suhu 37oC selama 18 - 24 jam

diukur diameter daerah hambatan di sekitar pencadang kertas dengan menggunakan jangka sorong

Biakan murni bakteri

Stok kultur bakteri

Inokulum bakteri

(13)

Lampiran 11. Hasil pengukuran daerah hambat pertumbuhan bakteri dari ekstrak

etanol kulit buah semangka merah

Konsentrasi Ekstrak (mg/ml)

Diameter Daerah Hambat Pertumbuhan Bakteri (mm)

Staphylococcus aureus Escherichia coli

(14)

Keterangan:

D = Diameter daerah hambatan 1,2,3 = Perlakuan

* = Rata-rata

(15)

Lampiran 12. Gambar pengujian aktivitas antibakteri ekstrak etanol kulit buah

semangka merah terhadap bakteri Staphylococcus aureus

(16)

E F

Keterangan

A : Konsentrasi 500; 400; 300 dan 200 mg/ml B : Konsentrasi 100; 75; 50 dan 25 mg/ml C : Konsentrasi 22; 20; 15 dan 12,5 mg/ml D : Konsentrasi 19; 18; 17 dan 16 mg/ml E : Konsentrasi 14; dan 13 mg/ml

F : Konsentrasi Blanko

Blanko S.a

(17)

Lampiran 13. Gambar pengujian aktivitas antibakteri ekstrak etanol kulit buah

semangka merah terhadap bakteri Escherichia coli

(18)

E F

Keterangan

A : Konsentrasi 500; 400; 300 dan 200 mg/ml B : Konsentrasi 100; 75; 50 dan 25 mg/ml C : Konsentrasi 22; 20; 15 dan 12,5 mg/ml D : Konsentrasi 19; 18; 17 dan 16 mg/ml E : Konsentrasi 14; dan 13 mg/ml

F : Konsentrasi Blanko

14 13

E.c