Kajian kesan media terhadap pertumbuhan dan perkembangan protokom orkid (Phalaenopsis gigantea)

KAJIAN KESAN MEDIA TERHADAP PERTUMBUHAN DAN PERKEMBANGAN PROTOKOM ORKID (PHALAENOPSIS GIGANTEA). MUSLIM BIN RAZANI. PERPUSTAKAAN UlMRSITI MALAYSIA SABA". DISERTASI YANG DIKEMUKAKAN UNTUK MEMENUHI SEBAHAGIAN DARlPADA SYARAT MEMPEROLEHI UAZAH SARJANA MUDA SAINS DENGAN KEPUJIAN. PROGRAM TEKNOLOGI TUMBUHAN SEKOLAH SAINS DAN TEKNOLOGI UNIVERSITI MALAYSIA SABAH. April 2008.

PUMS99:1. UNIVERSITI MALAYSIA SABAH BORANG PENGESAHAN STATUS TESIS@ JUDUL:. Pf\-~. SAY A. l<.4r:1H'~- ~SPl."". f'E~~f"IYlPJM-l~f\tJ. ~'IV ~L-11't\. hltt>lPt le"tm~1tP. fltaTol41tl O~F-!£l (~"IC4f'n~rSl'S. 3. 4.. ~l''1ant~'''). ,. ---lOOS-/~ ,. ~.Jfl..lT~ \ (HURUF BESAR). BIN. SESI PENGAJIAN :. mengaku membenarkan tesis (LPSMlSarjana/Do\ctor Falsafah) ini Malaysia Sabah dengan syarat-syarat kegunaan seperti berikut:\. 2.. te~1Vft\IWlt1tN. ~isimpan. di Perpustakaan Universiti. Tesis adalah hakmilik Universiti Malaysia Sabah. Perpustakaan Universiti Malaysia Sabah dibenarkan membuat salinan untuk tujuan pengajian sahaja. Perpustakaan dibenarkan membuat salinan tesis ini sebagai bahan pertukaran antara institutsi pengajian tinggi. Sila tandakan ( I ). D. SULIT. 1/ I. TERHAD. I I. TIDAK TERHAD. (Mengandungi maklumat yang berdarjah keseIamatan atau Kepentingan Malaysia seperti yang termaktub di dalam AKTA RAHSIA RASMI (972) (Mengandungi maklumat TERHAD yang telah ditentukan oleh organisasilbadan di mana penyelidikan dijalankan) Disahkan Oleh\JURULAIN BIN I iSMAll. ~~ ~N. (TAND:. AN PENULIS). Alamat Tetap:~~~"-S. Tarikh:~~1 {1i. !. -::(=t,=fi:-:-N~A~T::CA-:-N-:-:G:-AN-::-+P=-=U-:-S::-=T:-AKA-:7-~W-A-N)-::-. i. ffJ1t~T. ~'" 1k1K~ 11¥"~110 ,tWtt1lMi'... ~I"!Y..\0 t'. ~. LlBRARIJ~ I iNIVERSITI MALA' ~IA SABAH. -- ----------~--~--~--. Nama Penyelia. Tarikh :_ _._. CAT AT AN :- *Po tong yang tidak berkenaan. *. Jika tesis ini SULIT atau TERHAD, sila lamp irk an surat daripada pihak berkuasa /organisasi berkenaan dengan menyatakan sekali sebab dan tempoh tesis ini perlu dikelaskan sebagai SULIT dan TERl-IAD. @Tesis dimaksudkan sebagai tesis bagi Ijazah Doktor Falsafah dan Sarjana secara penyelidikan atau disertai bagi pengajian secara kerja kursus dan Laporan Projek Sarjana Muda (LPSM).. UMS. UNIVERSITI MALAYSIA SABAH.

11. PENGAKUAN. Saya akui karya ini adalah basil kerja saya sendiri kecuali nukilan dan ringkasan yang setiap satunya telah dijelaskan sumbemya.. 10 April 2008. UMS. UNIVERSITI MALAYSIA SA BAH.

111. DIPERAKUKAN OLEH. Tandatangan. 1. PENYELIA. (PROF. MADYA DATIN DR. MARIAM ABD. LATIP). 2. PEMERIKSA (pN. MARY MAGDALINE SIAMBUN). 3. DEKAN (SUPTJ KS. PROF. MADYA DR. SHARIFF A.K. OMANG).

IV. PENGHARGAAN. Syukur kepada hadrat Ilahi kerana dengan izin dan kurniaNya dapat saya menyiapkan laporan akhir Projek II (tesis) denganjayanya.. Ribuan terima kasih kepada semua pensyarah yang membantu saya menyiapakan projek ini terutamanya Prof. Madya Dr. Mariam Abdul Latip iaitu penyelia saya yang tidak jemu-jemu memberikan nasihat dan tunjuk ajar supaya penyelidikan ini dapat disiapkan. Nasihat dan sumbangan beliau tidak akan saya lupakan buat selamanya.. Penghargaan terima kasih juga kepada Kak Fifi, En. Airen, Kak Christina dan semua kakitangan VMS. Tidak lupa juga kepada rakan-rakan seperjuangan kerana memberikan semangat dan kerjasama terutama rakan-rakan yang menjalankan projek kultur tisu iaitu Haziq, Helmi, Amirul, Najib, Aqram, Yann, Sin Li, Eileen, dan semua rakan seperjuangan yang terlibat dan tidak terlibat secara langsung.. Akhir sekali, sekalung ucapan terima kasih kepada honda tercinta iaitu Zakiah Yusof dan ayahanda Razani Hassan yang tidak habis-habis memberi dorongan kepada anakmu ini. Tidak lupa adik-adik tersayang Addnin, Afini, Asmaq, Mukmin, Anis, Azlin, Mukhlis, Aimi yang memberikan semangat kepada abangnya ini.. UMS. UNIVERSITI MALAYSIA SABAH.

ABSTRAK. Kajian telah dilakukan selama ISO hari untuk menentukan kesa~ kompleks additif berbeza ke atas perkembangan dan pertumbuhan protokom Phaiaellopsis gigalltea. Protokom di peringkat ke 3 telah dikultur di atas media as as KC dan baja komersial Florica yang ditambah dengan 1% (w/v) ekstrak ubi kentang, 10% (v/v) air kelapa dan. IS% (w/v) jus tomato, sarna ada secara sendiri atau kombinasi. Hasil kajian yang dijalankan menunjukkan bahawa indeks pertumbuhan protokom yang dikulturkan pada media KC tanpa bahan additif memberikan nilai yang terbaik (S4S.00±25.00) diikuti media KC yang ditambahkan 1% ekstrak ubi kentang (496.67±64.49), media KC yang ditambahkan 10% air kelapa (4S8.33±34.03) dan media KC yang ditambahkan dengan 15% jus tomato (4SS.00±134.35). Antara semua media kombinasi kompleks additif,. media KC yang ditambahkan 10% air kelapa dengan 1% ekstrak ubi kentang mempunyai indeks pertumbuhan yang tertinggi. Perbandingan antara media asas yang berbeza dalam kajian ini mendapati media KC adalah lebih baik daripada media Florica sementara kesan kombinasi kompleks additif menunjukkan pertumbuhan protokom kurang baik berbanding dengan penambahan satu kompleks additif sahaja. Sebagai kesimpulan media KC adalah yang terbaik berbanding Florica dan penambahan. kompleks. additif tidak. perkembangan protokom P. gigantea.. dapat. meningkatkan. pertumbuhan. dan.

VI. ABSTRACT. This study was performed in 150 days to determine the effect of different complex additive on growth and development of Phalaellopsis gigantea protocorms. Protocorms at stage 3 were cultured on KC and commercial fertilizer Florica basal media plus 1% (w/v) potato extract, 10% (v/v) coconut water and 15% (w/v) tomato juice, alone or in combination on Knudson C basal media and commercial Florica fertilizer media. Results obtained showed that, the value of growth index of protocorms culture of on KC medium without additive (545 .00±25.00) showed the best, followed by KC media plus 1% potato extract (496.67±64.49), KC media plus 10% coconut water (458.33±34.03) and KC media supplemented with 15% tomato juice (455.00±134.35). Amongst the combination of complex additive treatments, KC media supplemented with combination of 10% coconut water and 1% potato extract gave the highest value of growth index whereas between the two basal medium used, KC media was significantly better than Florica media. In combination, KC basal medium was better in promoting growth and development of P. gigantea protocorms. in vitro and the addition of complex additive either alone or in combination did not enhance significantly growth and development as compared to KC medium without additive..

Vll. KANDUNGAN Muka Surat PENGAKUAN. 11. PENGESAHAN. III. PENGHARGAAN. IV. ABSTRAK. v. ABSTRACT. VI. SENARAI KANDUNGAN. Vll. SENARAI JADUAL. x. SENARAI RAJAH. XI. SENARAI FOTO. Xll. SENARAI 51MBOL. X111. BABI. PENDAHULUAN. 1. l.1. Pengenalan. 1. l.2. Objektif Kajian. 3. ULASAN PERPUSTAKAAN. 4. 2.1. Orkid: Taksonomi dan Taburan. 4. 2.2. Sifat Biologi Orkid. 5. 2.3. Genus Phalaenopsis. 7. 2.4. Phalaenopsis gigantea. 8. 2.5. Teknik Kultur Tisu. 9. 2.6. Percambahan Biji Benih Orkid. 11. 2.7. Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Pertumbuhan Dan. 13. BAB2. ... Perkembangan Protokom Secara In-Vitro. 2.7.1. Komposisi Medium. 14. 2.7.2 Suhu. 15. 2.7.3 Kesan Arang. 15. UMS. UNIVERSITI MALAYSIA SABAH.

2.7.4. 2.8. BABl 3.1. 3.2. Kesan Kompleks Tabii. 16. a) Air Kelapa. 16. b) Ekstrak Ubi Kentang. 17. c) Jus Tomato. 18. Sumber Karbon. 19. BAHAN DAN KAEDAH. 21. Bahan. 21. 3.l.1. Protokom. 21. 3.1.2. Medium. 22 22. Kaedah 3.2.1. Penyediaan Larutan Stok KC. 22. 3.2.2. Penyediaan Medium Knudson C. 23. 3.2.3. Penyediaan Medium Menggunakan Baja Komersial. 24. (FLORICA - 21N:21P:21K) 3.2.4. 3.2.6. Penyediaan Kompleks Tabii. 25. a) Air Kelapa. 25. b) Ekstrak Ubi Kentang. 25. c) Jus Tomato. 26. Pengkulturan Dan Subkultur. 26. 3.3. Rekabentuk Eksperimen. 27. 3.4. Pencerapan Data. 27. 3.5. Analisis Data. 28. KEPUTUSAN. 29. Kesan Media Ke Atas Pertumbuhan Dan Perkembangan. 30. BAB4 4.1. Protokom P. gigantea 4.1.1. Kesan Media Ke Atas Pertumbuhan Dan Perkembangan. 33. Protokom P. gigantea selepas 30 Hari Dikultur 4.1.2. Kesan Media Ke Atas Pertumbuhan Dan Perkembangan Protokom P. gigantea selepas 60 Hari Dikultur. 35.

IX. 4.1.3. Kesan Media Ke Atas Pertumbuhan Dan Perkembangan. 37. Protokom P. gigantea selepas 90 Hari DikuItur 4.1.4. Kesan Media Ke Atas Pertumbuhan Dan Perkembangan. 39. Protokom P. gigantea selepas 120 Hari DikuItur 4.1.5. Kesan Media Ke Atas Pertumbuhan Dan Perkembangan. 41. Protokom P. gigantea selepas 150 Hari DikuItur 4.2. Kesan Penambahan Kompleks Additif Ke Dalam Media Asas. 43. 4.3. Kesan Kompleks AdditifTerhadap Kematian Protokom. 53. BABS. PERBINCANGAN. 59. BAB6. KESIMPULAN. 65. RUJUKAN. 67. LAMPlRAN. 75. UMS. UNIVERSITI MALAYSIA SA BAH.

SENARAI JADUAL. No. Iadual 3.1. Muka Surat. Keperluan bahan kompleks additif yang ditambahkan di dalam media. 4.1. Iadual ANOY A bagi pertumbuhan dan perkembangan protokom pada cerapan hari ke 30 selepas pengkulturan. 4.2. 44. Kesan media yang berbeza ke atas kematian protokom berdasarkan bilangan hari pengkulturan (purata±sisihan piawai). 4.8. 41. Kesan Media yang berbeza ke atas pertumbuhan dan perkembangan (Indeks Pertumbuhan) protokom P. gigantea. 4.7. 39. Iadual ANOY A bagi pertumbuhan dan perkembangan protokom pada cerapan hari ke 150 selepas pengkulturan. 4.6. 37. Jadual ANOYA bagi pertumbuhan dan perkembangan protokom pada cerapan hari ke 120 selepas pengkulturan. 4.5. 35. Iadual ANOYA bagi pertumbuhan dan perkembangan protokom pada cerapan hari ke 90 selepas pengkulturan. 4.4. 33. Iadual ANOYA bagi pertumbuhan dan perkembangan protokom pada cerapan hari ke 60 selepas pengkulturan. 4.3. 24. 55. Iadual ANOYA bagi peratus kematian protokom pada cerapan hari ke 150 selepas pengkulturan. 67. UMS. UNIVERSITI MALAYSIA SABAH.

Al. SENARAI RAJAH. No. Rajah. 2.1. Peringkat-peringkat di dalam percambahan pada embrio orkid dan perkembangan biji benih (Arditti, 1967). 4.1. 38. Histogram min indeks pertumbuhan kompleks additif untuk tempoh bilangan hari ke 120. 4.7. 36. Histogram min indeks pertumbuhan kompleks additif untuk tempoh bilangan hari ke 90. 4.6. 34. Histogram min indeks pertumbuhan kompleks additif untuk tempoh bilangan hari ke 60. 4.5. 32. Histogram min indeks pertumbuhan kompleks additifuntuk tempoh bitangan hari ke 30. 4.4. 32. Graf min indeks pertumbuhan media F10rica untuk tempoh selama 150 hari kultur. 4.3. 13. Graf min indeks pertumbuhan media Knudson C untuk tempoh selama 150 hari kultur. 4.2. Muka Surat. 40. Histogram min indeks pertumbuhan kompleks additifuntuk tempoh bilangan hari ke 150. 42. 4.8. Graf peratus protokom media KC pada bilangan hari tertentu. S3. 4.9. Graf peratus protokom media Florica pada bilangan hari tertentu. 54. UMS. UNIVEASITI MALAYSIA SABAH.

All. SENARAI FOTO. No. Foto 2.1. Bunga Phalaenopsis gigantea di Orchid De Villa, Inanam, Sabah. 4.1. Kesan kompleks additifke atas pertumbuhan dan perkembangan. Muka Surat. protokom P. gigantea pada hari ke 30 selepas dikultur 4.2. 48. Kesan kompleks additifke atas pertumbuhan dan perkembangan protokom P. gigantea pada hari ke 150 selepas dikultur. 4.6. 47. Kesan kompleks additifke atas pertumbuhan dan perkembangan protokom P. gigantea pad a hari ke 120 selepas dikultur. 4.5. 46. Kesan kompleks additifke atas pertumbuhan dan perkembangan protokom P. gigantea pada hari ke 90 selepas dikultur. 4.4. 45. Kesan kompleks additifke atas pertumbuhan dan perkembangan protokom P. gigantea pada hari ke 60 selepas dikultur. 4.3. 9. 49. Peringkat Pertumbuhan Dan Perkembangan Protokom Phalaenopsis gigantea pada hari 150 selepas kultur. 50. UMS. UNIVEASITI MALAYSIA SABAH.

Xlll. SENARAI SIMBOL. KC. KnudsonC. %. peratus. v/w. isipadu per jisim. w/v. jisim per isipadu. em. sentimeter. °C. darjah Celeius. ml. mililiter. grl. gram per liter. N p. Natrium. K. Kalium. I. liter. kPa. kilopascal. Fosforus.

BABt. PENDAHULUAN. t.t. Pengenalan. Famili Orchidaceae yang mewakili tumbuhan orkid merupakan famili terbesar dalam keseluruhan tanaman berbunga di dunia. Di Borneo sahaja 148 - 450 genus yang meliputi 2500 hingga 3000 spesies orkid. Sebanyak 138 genus yang terdiri daripada 1500 bingga 2000 spesies dilaporkan terdapat di Sabah sahaja yang kebanyakkannya tumbuh liar di kawasan hutan tropika di negeri ini (Lamb, 1991). Mengikut Comber (1990) di Sabah., kebanyakkan spesies orkid dilaporkan boleh didapati di kawasan hutan sekeliling Gunung Kinabalu. Untuk genus Phalaenopsis, dilaporkan terdapat sekurang-kurangnya 60 spesies di dunia ini dan di Malaysia hanya terdapat tujuh spesies sahaja. Di antara spesies-spesies terancam di Sabab seperti dinyatakan oleh Lamb (1991) adalah Arachis hoo/ceriana, Yanda lamellate, Renathera bella,. Rhycostylis gigantea, Paphiopedi/um dayamun dan Phalaenopsis gigenlia.. UMS. UNIVERSITI MALAYSIA SABAH.

Kultur in-vitro merupakan satu teknik barn yang membolehkan pengeluaran anak orkid dilakukan secara besar-besaran. Dengan teknik ini beribu-ribu anak benih orkid boleh dihasilkan dalam jangka masa yang pendek berbanding dengan cara pembahagian pokok atau perlakuan bebawang semu tua. Walau bagaimanapun pokok daripada cara pembahagian pokok dan perlakuan bebawang semu tua dapat menghasilkan bunga dalam jangka masa beberapa bul~ manakala pokok daripada cara kultur in-vitro akan berbunga selepas dua tabun atau bergantung kepada jenis. Untuk tumbuhan orkid, kaedah in-vitro sangat penting dalam menghasilkan percambahan biji yang efisien. Keadaan biji benih yang terlalu keeil menyebabkan ia sukar atau tidak boleh langsung bereambah secara semulajadi. lni disebabkan oleh bahan makanan yang terkandung dalam biji benih tidak cukup untuk menampung tumbesaran embrio. Dalam keadaan semulajadi, biji-biji benih ini boleh bercambah dengan pertolongan mikroorganisma kulat (Nuraini et al., 1991). Kadar pertumbuhan yang perlahan bagi anak benih orkid yang ditumbesarkan secara in-vitro adalah disebabkan kekurangan beberapa faktor nutrien untuk. pertumbuhan dalam media kultur yang digunakan (Hinnen et al., 1989)..

Untuk orkid Phaiaenopsis gigantea, beberapa kajian awal telah dilakukan bagi menghasilkan protokol terbaik bagi membesarkan anak be nih orkid secara in vitro seperti kajian lepas yang dilakukan oleh Zuraidah Binti Mohd Zain dan Ann Jasmine. Anak Micheal. Berbagai media asas serta penglibatan penambahan bahan-bahan organik seperti air kelap~ jus tomato, ekstrak ubi kentang dan homegenat pisang telah dilakukan. Walau bagaimanapun, hasil kajian belum dapat memberikan satu protokol efisien untuk tujuan tersebut. Oleh itu, kajian ini dilakukan untuk menentukan media terbaik bagi pertumbuhan dan perkembangan anak orkid P. gigantea. Hasil penemuan ini kelak diharap dapat membantu usaha pemuliharaan spesies ini daripada kepupusan. Spesies ini adalah di antara spesies orkid liar di Sabah yang tersenarai sebagai terancam (CITES). Spesies ini juga adalah merupakan spesies endemik di Borneo dan dilaporkan hanya boleh didapati di Kepulauan Borneo (Lamb, 1991).. 1.2 Objektif Kajian. Diantara objektifkajian adalah untuk, a) menentukan kesan jenis media asas dan kompleks additif air kelapa 10% (v/v), ekstrak ubi kentang 1% (w/v) dan ekstrak tomato 15% (v/v) terhadap pertumbuhan dan perkembangan anak benih orkid P. gigantea. b) mendapatkan kombinasi terbaik di antara media asas dan kompleks additif untuk pertumbuhan dan perkembangan anak benih orkid P. gigantea.. UMS. UNIVERSITI MAlJIYSIA SABAH.

BAB2. ULASANPERPUSTAKAAN. 2.1. Orkid: Taksonomi dan Taburan. Orkid tergolong dalam famili Orchidaceae. Famili ini mengandungi lebih kurang 750 genus, 35000 spesies dan kultivar dan lebih daripada 57000 kacukan yang dihasilkan oleh manusia. Bunga orkid merupakan bunga yang indah dan sering menyerikan majlis rasmi, diabadikan dalam setem kenang-kenangan dan juga mengindahkan halaman. rumah pemiliknya. Di Malaysia terdapat banyak orkid-orkid liar yang belurn diperkenalkan lagi tetapi mempunyai roang yang luas untuk diperbaiki mutunya dan potensi pasaran. Keindahan orkid terletak pada bunganya yang wujud di dalam pelbagai bentuk dan wama serta tahan untuk beberapa minggu selepas berkembang. Pendebungaan orkid liar dilakukan oleh serangga (Mustafa, 1989)..

Di Malaysia sahaja terdapat sebanyak 220 genus orkid rnerangkwni lebih dari 1700 spesies. Fakta ini menunjukkan Malaysia memiliki satu per empat daripada kirakira 800 genus orkid yang terdapat di seluruh dunia. Terdapat kira-kira 138 genus dengan 1500 - 2000 spesies yang dieatat di Sabah dengan 1200 spesies dari 107 genus ditemui di kawasan pergunungan Gunung Kinabalu (Lamb, 1991). Pada keadaan semulajadi, orkid ini bekerjasama dengan kulat (endomycorrhizal basidiomycetes) secara simbiosis ketika pembentukan dan perkembangan anak benih. Orkid di hutan adalah penyumbang besar kepada 'kelembapan' hutan itu (Yong, 1990). Taburan orkid sangat luas, baik di daerah Artik (Kutub Utara) mahupun di Antartika (Kutub Selatan). Keadaan habitat yang sangat berbeza-beza itu membuatkan orkid itu bervariasi dalam bentuk dan ukurannya. Orkid terkecil berukuran 0.75 em dan yang terbesar meneapai 20 kaki iaitu sekitar 6.08 meter (Sutiyoso & Sarwono, 2003). Secara amnya orkid. i. :c ..... boleh dikenali melalui bentuk bunga, akar, daun,batang dan buahnya. Walau ~ ~. ::;:j"". i~. bagaimanapun, genus dan varieti orkid lebih mudah dikenalpasti melalui bahagian r-~ -- ~ bunga (MARDI, 1991).. ae :. 31 CA. » . CD » %'. 2.2. Sirat Biologi Orkid. Allan & Woods (1993) melaporkan bahawa orkid boleh dikelaskan kepada tumbuhan berbunga atau angiosperma. Ia adalah jenis monokotiledon kerana mempunyai satu kotiledon. Bagaimanapun tidak semua orkid adalah monokotiledon kerana ada sesetengah orkid tidak mempunyai kotiledon. Spesies orkid boleh dibahagikan kepada dua kumpulan iaitu yang berada di daratan dan epifit..

v. Orkid yang berada di daratan hidup dengan akar berada didalam tanah. lni adalah kerana akamya tidak boleh terdedah kepada udara. Di Malaysia orkid yang. berada di daratan boleh dibahagikan kepada dua iaitu orkid yang mempunyai sistem akar terhad dan sistem akar yang besar. Orkid yang mempunyai sistem akar terhad biasanya berbatang tebal manakala orkid yang mempunyai sistem akar besar biasanya berdaun kasar. Wama bunga orkid adalah campuran wama atau wama seperti pelangi. Julat warna bunga adalah dari putih, merah cerah atau oren. Jangka hayat bunga orkid adalah pendek (Teo, 1985).. Orkid epifit terbahagi kepada dua iaitu jenis simpodium dan jenis monopodium. Orkid simpodial cuma mengeluarkan satu jambak bunga pada satu batang. Pengeluaran jambak bunga seterusnya adalah daripada pucuk baru yang keluar daripada rizom. Pengeluaran batang-batang atau bebawang-bebawang palsu daripada rizom ini membuat orkid jenis ini serumpun. Orkid monopodiwn pula mempuyai sifat pertumbuhan yang berbeza. Orkid-orkid ini mempunyai daun-daun dan akar-akar yang keluar daripada sisinya. Daun-daun dan akar-akar ini menyebabkan orkid monopodial kelihatan seperti lipan (Mustafa, 1989).. UMS. UNIVERSITI MALAYSIA SA BAH.

I. 2.3. Genus Phaiaenopsis. Comber (1990) menyatakan bahawa genus Phalaenopsis ini adalah berbatang pendek dan diklasifikasikan dalam kumpulan monokotiledon kerana mempunyai satu embrio. Ia biasanya mempunyai daun yang lebar dan panjang. Bunga pada genus ini pada perbandingannya adalah besar dan terbuka luas. Hanya 40 spesies diketahui dimana ia berada di kawasan India, China, New Guinea, Australia dan negara-negara di Asia Tenggara. Oi Borneo dan Filipina terdapat 13-15 spesies. Oi semenanjung Malaysia mempunyai tujuh spesies, Sumatera dan Burma enam spesies, Thailand dua spesies dan Kepulauan Jawa empat spesies. Menurut kenyataan Teo (1985) genus. Phalaenopsis diketahui dengan keanggunan dan kecantikan bunganya Pada pokoknya, ia seperti rama-rama dengan sayapnya yang membuka luas. Di Filipina genus ini dipanggil mariposa bennaksud rama-rama. Di Indonesia pula, genus ini dipanggil. anggerik bulan kemungkinan daripada bulan mengambang penuh yang romantik. Bunga jenis ini adalah keeil dan berbentuk bintang.. Phalaenopsis adalah sejenis orkid epifit monopodium yang penting dan amat popular dimana ia dikomersialkan bagi penghasilan tanaman berpasu dan industri penjualan bunga Kebanyakkan genus ini dikacukkan dan menghasilkan satu varieti yang baru bagi perubahan saiz dan tahan penyakit (Chai et al., 2002). Ia juga mempunyai nilai ekonomi yang tinggi dalam pasaran dunia bagi bunga Kebanyakkan kaedah propagasi bagi genus ini dilakukan menggunakan kaedah in-vitro (Chen & Chang, 2006).. UMS. UNIVERSITI MAlJIYSIA SABAH.

". "-. Young et al. (2000) melaporkan bahawa Phalaenopsis adalah sejenis orkid hiasan yang sukar dibiak melalui kaedah semulajadi. Walau bagaimanapun eara yang sesuai untuk digunakan adalah dengan menggunakan kaedah kultur tisu. Permasalahan utama menggunakan kaedah kultur tisu bagi genus ini adalah pembebasan fenolik yang tinggi oleh tisu yang mana ia menyebabkan keadaan toksik bagi orkid itu sendiri. Keadaan begini boleh diatasi dengan menggunakan arang teraktif kerana ia boleh menyerap fenolik yang dikeluarkan oleh orkid itu.. 2.4. Phalaenopsis gigantea. Lamb (1991) menyatakan bahawa P. gigantea (Foto 2.1) merupakan spesies yang istimewa bagi kepulauan Borneo. Ia juga dikenali sebagai orkid telinga gajah kerana mempunyai daun yang lebar dan besar. Menurut Smith (1986) P. gigantea ini merupakan spesies epifit monopodial yang memiliki daun yang lebar dengan lima hingga enam helai daun pada satu pokok. Secara semulajadi menurutnya lagi, daunnya adalah 56-91 em panjang dan mempunyai permukaan yang licio, berkilat dan kenyal. Selain i~ spesies ini juga memerlukan keadaan yang berteduh dan dengan itu spesies ini sering dilihat terlekat di atas pokok lain pada kanopi yang rendah. P. gigantea adalah di antara spesies yang berstatuskan terancam dan memiliki nilai hortikultur yang tinggi. Memandangkan keadaan sebegini maka spesies ini kini berada di bawah pengawalan ex-situ..

Foto 2.1 Bunga Phaiaenopsis gigantea di Orchid De Vi11~ Inanam, Sabah.. 2.5. Teknik Kultur Tisu. Kepentingan bagi menghasilkan protocol efisien untuk percambahan biji dan propagasi secara aseksual bagi pemuliharaan spesies yang hamper pupus pada kebanyakkan tumbuhan angiosperma termasuk orkid telah ditekankan (Roy & Banerjee, 2001). Langkah pemuliharaan orkid melalui penggunaan teknik propagasi biasa adalah terlalu lambat dan penghasilannya juga adalah rendah. Teknik kultur tisu adalah satu jalan penyelesaian bagi meningkatkan penghasilan dalam masa yang singkat. (puchoo~. 2004). Teknik ini boleh digunakan kerana percambahan dapat dipercepatkan dan boleh dilakukan pada skala yang besar disamping juga untuk pemuliharaan spesies yang terancam. Banyak protokol yang diperkembangkan untuk propagasi pada skala yang besar bagi orkid tennasuk Cymbidium, Yanda, Phaphiopedi/um and Phaiaenopsis (Arditti and Ernst. 1993).. UMS. UNIVEASITI MALAYSIA SABAH.

lU. Kaedah kultur tisu merupakan kaedah membiak tumbuhan dalam media menggunakan bahan tanaman (eksplan) untuk menghasilkan pokok atau tanaman barn. Kaedah ini mampu menghasilkan tanaman denga Iebih banyak dan stabil. Teknik pembiakkan melalui tisu kultur mla diperkenalkan oleh Morel (1960) ke atas orkid. Cymbidium. Kejayaan cara ini bergantung penuh pada keupayaan tisu-tisu tumbuhan untuk membentuk pucuk dan akar ataupun membentuk struktur-struktur berupa embrio. Kultur tisu dilakukan dengan mengambil tisu daripada berbagai-bagai bahagian tumbuhan seperti bahagian vaskular,. b~. endosperma, debunga dan juga. embrio. Walau bagaimanapun didapati tisu-tisu daripada bahagian vaskular tumbuhan dapat memberi kejayaan yang lebih. Tisu-tisu ini kemudiannya diletakkan di dalam medium yang sesuai untuk tisu-tisu membiak (Mustafa, 1989).. Kultur tisu secara in-vitro adalah berdasarkan bahagian tumbuhan yang boteh dibahagikan kepada beberapa bahagian seperti organ, tisu, atau sel dimana boteh dilakukan secara in-vitro dan ia akan tumbuh menjadi tumbuhan yang sempurna (Trigiano. 1996). Prinsip yang digunakan dalam teknik kultur tisu mengikut Purohit (2004) adalah totipotensi yang bermaksud kebolehan sel berkernbang menjadi tumbuhan yang sempurna. Ia adalah ringkas dimana setiap bahagian sel boleh dikembangkan menjdi tisu dan seterusnya organ. Kaedah kultur tisu pada orkid adaIah penting bukan sahaja untuk propagasi klon tetapi juga untuk percambahan.. UMS. UNIVERSITI MALAYSIA SABAH.

RUJUKAN. Abdul Karim A. G. & Hairani, H . 1989. Perambatan Orkid Melalui Tisu Kultllr. Universiti Kebangsaan Malaysia, Bangi.. Allan, B. & Woods, P. 1993. Wild Orchids of Scotland. Royal Botanic Garden Edinburgh.. Arditti, 1. 1966. The effect of niacin, adenine, ribose and niacinamide coenzyme on germination orchids seeds and young seedlings. A mer. Orchid Soc. Bull. 35, ms.892-898. Arditti, 1., 1911. Orchid Biology Review and Per~pective, I. Cornell University. Press, Ithaca.. Arditti, 1. 1961. Factors affecting the germination of orchid seeds. Bet. Rev. 33, ms. 191.. Arditti, J. 1982. Orchid Biology: Reviews and Perspectives II. Cornell University Press, Ithaca, ms. 261-265.. Arditti, J. 1992. Fundamentals of Orchid Biology. John Wiley & Sons, New York. Arditti, J. & Ernst, R. 1993. Micropropagation Of Orchids. John Wiley & Sons Inc.,. Canada, ms. 682.. Arditti, 1. & Harrison, C. R. 1918. Physiological changes during the germination of. Cattleya Aurantiaca (Orchidaceae). Bot. Gaz. 139 (2), ms. 180-189.. Arditti, 1. 1982. Orchid Biology. Reviews and Perspective, II. Cornell University Press..

Butcher, D. & Marlow, S. A. 1989. Asymbiotic germination of epiphytic and terrestrial orchids. DIm Pritchard, H. W. (editor). Modem Method in Orchid. Conversation: The Role of Physiology, Ecology and Management: 31-37. Cambridge University Press.. Chai, M. L., Xua, C. 1., Senthil, KK, Kim, 1.Y. & Kim, D.H. 2002. Stable transformation of protocorm-like bodies in Phalaenopsis orchid mediated by Agrobacterium tumefaciens. Scientia Horticulturae 96, ms. 213-224.. Chang, C., Chen, Y. C. & Yen H. F. 2005. Protocorm or rhizome? The morphology of seed germination in Cymbidium dayanum Reichb. Botanical Bulletin of. Academia Sinica 46, ms. 71 -74. Chen, 1. T. & Chang W . C. 2006. Direct somatic embryogenesis and plant regeneration from leaf explants of Phalaenopsis amabilis. Bilogia Plantarum 50, ms. 169173.. Collins, M. T. & Dixon, K W. 1992. Micropropagation of an Australian terrestrial orchid Diuris longifolia R Br. Australian Journal of Experimental Agriculture. 32, ms. 131-135.. Comber, lB. 1990. Orchids of Java. Royal Botanic Gardens Kew, Convention Trade vin Endangered Species, CITES. Appendix II, ms. 305-306.. Concepcio'n, S. M., Luct'a, P., Begon~a D. A. & Cano, M. P. 2006. Nutritional characterisation. of commercial. traditional. pasteurised. tomato. juices:. carotenoids, vitamin C and radical-scavenging capacity. Food Chemistry 98, ms. 749-756.. UMS. UNIVERSITI MALAYSIA SA BAH.

Deberg, P.C. 1991. Control of ill vitro plant propagation. In: Crocomo, 0.1.; Sharp, W.R.; Melo, M. (Ed.) Biotecnologia para prodlU;ao vegetal. Piracicaba: CEBTEC, FEALQ, ms. 3-8.. Dix. L & Van, S. J. 1982. Plant Cell Tissue Organ Cult 1, ms. 239-245.. Ernest, R. 1967. Effects of Carbohydrate Selection On The Growth Raten of Freshly Germinated Phalaellopsis and Delldrobium seed. American Orchid Society. Bulletin 36, ms. 1068-1073. Ernst, R. 1986. Seed and clonal of Phalaenopsis. Proceedings of thr 5th A SEAN orchid. congress seminar, Singapore, ms. 31-38.. Faria, R. T. D., Rodrigues, F. N., Luciana, D. V. R. O. & Muller, C. 2004. In vitro Dendrobium. nobile. plant. growth. and. rooting. in. different. sucrose. concentrations. Horticultura Brasileira, Brasilia 22, ms. 780-783.. Gamborg, O. L. & Philips G. C. 1995. Fundamental Methods. Plant Cell, Tissue and. Organ Culture. Springer - Verlag Berlin Heidelberg.. Goh, C. 1. 1989. In: Ammirato P V, Evan D A, Sharp W R, Bajaj Y P S (eds). Handbook Of Plant Cell Culture 5. Mcgraw-Hill, New York, ms. 598-637.. Grout, W. W. & Price, F. 1987. The establishment of photosynthetic independence in strawberry cultures prior to transplanting. In: Ducate, G., Jacob, M. & Simeon, A. (Ed.) Plant micropropagation in horticultural industries. Symposium. Florizel Arion: Belgium, ms. 55-60.. Hadley, G. (1983). Symbiotic Germination Of Orchid Seed. Orchid Review 91, ms. 744.. UMS. UNIVERSITI MALAYSIA SABAH.

Hegarty, C. P. 1955. Observation On The Germination of Orchid Seed American. Orchid Society Bulletin, ms. 457-464.. Hinnen, M. G. 1., Pi erik, R. L. M. & Bronsema, F. B. F. 1989. The Influences of Macronutrient and Some Other Factors On Growth of Phalaenopsis Hybrid Seedlings In Vitro. Scientia Horticuiturae 41, ms. 105-116.. Ichihashi, S. & Islam. M. O. 1999. Effects of complex organic additives on callus growth in three orchid genera, Phalaenopsis, Doritaenopsis and Neofinetia. J.. Jpn. Soc. Hort. Sci., 68, ms. 269-274.. Ishii, Y., Takamura, T., Goi, M. & Tanaka, M. 1998. Callus induction and somatic embryogenesis of Phalaenopsis. Plant Cell Reports 17, ms. 446-450.. Islam, M. 0., Rahman, A. R. M. M., Matsui, S. & Prodhan, A. K. M. A. 2003. Effects of Complex Organic Extracts on Callus Growth and PLB Regeneration through Embryogenesis in the Doritaenopsis Orchid. JARQ 37, ms. 229-235.. Kull, T. & Arditti, 1. 2002. Orchid Biology: Reviews and perspective VIII. Kluwer Academic Publisher, ms. 1-8l.. Islam, M. 0., Rahman, A. R. M. M., Matsui, S. & Prodhan, A. K. M. A. 2003. Effect of complex organic extract on callus growth and PLB regeneration through embryogenesis in the Doritaenopsis orchid. JARQ 37, ms. 229-235.. Lamb, A. 1991. Orchids of Sabah and Sarawak. The State of Nature Conservation In. Malaysia: 78 -88. Selangor. Malayan Nature Society.. Loh, C. S., Goh, C. 1. & Rao, A. N. 1978. Some factors affecting morphogenesis of. Aranda orchid tissue culture. Proceedings of the Symposium on Orchidology..

MARDI, Institut Penyelidikan dan Kemajuan Pertanian Malaysia. 1991. Pel1GnGmal1. Orkid.. Meyer, 1. R. 1944. The use of tomato juice in the preparation of a medium for the germination of orchid seeds and young seedlings. Amer. Orchid Soc. Bull. 35, ms. 892-898.. Meyer, G. M. 1960. Proceeding virus free Cymbidium. Amer. Orchid Soc. Bull. 29, ms. 45.. Morel, G. 1960. Tissue Culture - A new means of clonal propagation of orchid.. American Orchid Society Buletin 33, ms. 473-479.. Murashige, T. & Skoog, F. 1962. A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures. Physiol. Plant 15, ms. 473-497.. Mustafa Kamal Mohd. Shariff. 1989. Hortikultur Hiasan & Landskap. Dewan Bahasa & Pustaka Kuala Lumpur.. Nath, M., Devi, 1., Borthakur, B., Sharma, J. & Deka, P. C. 1991. Embryo Culture Of Rhynchostylis retusa and Yanda coerulea. 1. Orchid Soc. Ind 5, ms. 79-101.. Nuraini, 1., Mohd Shaib, J. & Zaharah, H. 1991. Penallaman Orkid. MARDI: Kuala Lumpur.. Overbeek, J. V., Conklin, M. E. & Blakeslee, A. F. 1941. Factors In Coconut Milk Essential For Growth and Development Of Very Young Datura Embryos. Sci. 94, ms. 350-352.. UMS. UNIVERSITI MALAYSIA SABAH.

Park. S. Y., Murthy, H. N. & Paek, K. Y. 2003. Protocorm-like Body Induction and Subsequent Plant Regeneration From Root Tip Cultures of Doritaenopsis.. Plant Sci. 164, ms. 919-923 . Puchooa, D. 2004. Comparison of Different Culture Media for the In Vitro Culture of Dendrobium (Orchidaceae). Internatiollal Journal of Agriculture & Biology 6, ms. 884-888.. Purohit, S. S. 2004. Plant Tissue Culture. Student Edition, India.. Rahman, A. R. M. M., Islam, M. 0 ., Prodhan, A. K. M. A & Ichihashi, S. 2004. Effect of Complex Organic Extracts on Plantlet Regeneration from PLBs and Plantlet Growth in the Doritaenopsis Orchid. JARQ 38, ms. 55-59.. Rao, A. N. 1995. Tissue Culture in the Orchid Industry. In Reinert, 1. & Bajaj, Y. P. S. (editor). Applied and Fundamental Aspects of Plant Cell, Tissue and Organ. Culture, New Delhi: Narosa publishing House, ms. 44-69.. Rasmussen, H.N. 1995. Teresstrial Orchids From Seed To Mycotrophic Pla11l. Cambridge University Press.. Reneirt, R A. & Mohr, H. C. 1967. Propagation of Cattleya by tissue culture of lateral bud meristem. Proc. Amer. Soc. Hort. Sci. 91, ms. 664-671.. Ricardo T. D. F., Fabiana. N. R, Luciana. D. V. R O. & Claudio, M. 2004. In vitro Dendrobium. nobile. plant. growth. and. rooting. in. different. sucrose. concentrations. Horticultura Brasileira 22, ms. 780-783.. Roy, J. & Banerjee, N. 2001. Rhizome and Shoot Development During In-Vitro Propagation of Geodorum densiflorum (Lam.) Schltr. Scientia Horticul/urae 94, ms. 181-192.. UMS. UNIVERSITI MALAYSIA SA8AH.

Smith, S. G. 1986. Using a microwave oven sterilize agars. Orchid Rev. 94, ms. 334335 .. Sutiyoso, I. Y. & Sarwono, B. 2003. Merawal Anggrek. Ed ke-3 . Penebar Swadaya.. Teo, C. K. H. 1985. Native Orchids of Peninsular Malaysia. Times Edition.. Tokuhara. K. & Mii, M. 1993. Micropropagation of Phalaenopsis and Dorilaenopsis. by culturing Shoot Tips of Flower Stalk Buds. Chiba University, Japan.. Tokuhara, K. & Mii, M . 2001. Induction of embryogenic callus and cell suspension culture from shoot tips excides from flower stalk buds of Phalaenopsis. (orchidaceae). In Vitro Cell Dev. Bioi. -Plant 37, ms. 457-461.. Tombolato, A. F. C. & Costa, A. M . M. 1998. Microproga~iio de plantas ornamentais. (Bole tim Tecnico, no 174), Campinas: Instituto Agronomico, ms. 72.. Trigiano, R. N. 1996. Plant Tissue Culture Concepts and Laboratoy Exercises. CRC Press.. Tulecke, W., Weinsten, L., H, Rutner, A. & Laurencat, H. 1. 1961. The biochemical composition of coconut water as related to its used in plant tissue culture.. Contr. Boyce, Thompson Inst. 21, ms. 115-128.. Yam, T . W., Ernst, R., Arditti, 1. & Ichihashi, S. 1991. The effects of complex additives and 4-dimethylamino pyridine on the proliferation of Phalaenopsis protoconns. Lindleyana 6 (1), ms. 24-26.. Yong, H. S. 1990. Orchid Potraits. Wild Orchids of Malaysia & SOlllhesl Asia. Tropical Press.. UMS. UNIVERSITI MALAYSIA SABAH.

Young, P. S., Murthy H. N. & Yoeup, P. E. 2000. Mass Multiplication of Proto cormlike Bodies Using Bireactor System and Subsequent Plant Regeneration In Phalaenopsis. Plant Cell, Tissue, Organ Culture 63, ms. 67-72..