KAJIAN ASOSIASI
Rhizobium
sp,
Rhizobakteri
Osmotoleran
DAN MIKORIZA PADA KEDELAI LOKAL TAHAN
CEKAMAN KEKERINGAN DI TANAH MEDITERAN, SIMO,
BOYOLALI
SKRIPSI
Oleh : Jumiati 20110210043
Program Studi Agroteknologi
FAKULTAS PERTANIAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH YOGYAKARTA YOGYAKARTA
ii
KAJIAN ASOSIASI
Rhizobium
sp,
Rhizobakteri
Osmotoleran
DAN MIKORIZA PADA KEDELAI LOKAL TAHAN
CEKAMAN KEKERINGAN DI TANAH MEDITERAN, SIMO,
BOYOLALI
SKRIPSI
Diajukan kepada Fakultas Pertanian
Universitas Muhammadiyah Yogyakarta untuk memenuhi salah satu persyaratan
guna memperoleh Derajat Sarjana Pertanian
Oleh: Jumiati 20110210043
Program Studi Agroteknologi
FAKULTAS PERTANIAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH YOGYAKARTA YOGYAKARTA
3
Skripsi yang berjudul
KAJIAN ASOSIASI Rhizobium sp, Rhizobakteri Osmotoleran DAN MIKORIZA PADA KEDELAI LOKAL TAHAN CEKAMAN KEKERINGAN DI TANAH MEDITERAN, SIMO, BOYOLALI
Yang dipersiapkan dan disusun oleh :
Jumiati 20110210043
Telah dipertahankan di depan penguji Pada tanggal,...
Skripsi tersebut telah diterima sebagai sebagian persyaratan yang diperlukan guna memperoleh drajat Sarjana Pertanian
Pembimbing/ Penguji Utama : Anggota Penguji
Ir. Agung Astuti, M.Si Ir. Sarjiyah, MS NIK. 19620923199303133017 NIP. 196109081991032001 Pembimbing/ Penguji Pendamping:
Ir. Mulyono, MP
NIP. 19600806198903002
Yogyakarta, Juni 2016 Dekan
Fakultas Pertanian
Universitas Muhammadiyah Togyakarta
4
PERNYATAAN Dengan ini saya menyatakan:
1. Karya tulis saya, skripsi ini adalah asli dan belum pernah diajukan untuk mendapatkan gelar akademik, baik di Universitas Muhammadiyah Yogyakarta maupun di perguruan tinggi lainnya.
2. Karya tulis ini merupakan bagian dari proyek penelitian hibah tim Ir. Agung Astuti, M.Si.
3. Karya tulis ini merupakan gagasan, rumusan masalah dan penilaian saya setelah mendapatkan arahan dan saran dari dosen pembimbing. Oleh karena itu, saya menyetujui pemanfaatan karya tulis ini dalam berbagai forum ilmiah, maupun pengembangannya dalam bentuk karya ilmiah lain oleh Tim Pembimbing.
4. Dalam karya tulis ini tidak terdapat karya atau pendapat yang telah ditulis atau dipublikasikan oleh orang lain, kecuali secara tertulis dengan jelas dicantumkan sebagai acuan dalam naskah dengan disebutkan nama pengarang dan dicantumkan dalam daftar pustaka.
5. Pernyataan ini saya buat sesungguhnya dan apabila dikemudian hari terdapat penyimpangan dan ketidakbenaran dalam pernyataan ini, maka saya bersedia menerima sanksi akademik berupa pencabutan gelar yang telah saya peroleh karena karya tulis ini, serta sanksi lainnya sesuai dengan norma yang berlaku di perguruan tinggi ini.
Yoyakarta, 7 Juni 2016 Yang membuat pernyataan Materai
ABSTRACT
The purpose of this research for isolation and characterize and to learn the association of Rhizobium sp, Rhizobakteri and Mycorrhizae with local varieties soybean in soil drought resistant Mediterranean, Simo, Boyolali.
The research was conducted degan two methods: obsevation methods and experimental exploration methods. Observasion carried out in the land of the Mediterranean, the village of Simo, District Simo, Boyolali and exploratory research experiment conducted in the Laboratory Agrobioteknology and Soil Laboratory, Faculty of Agriculture, University of Muhammadiyah Yogyakarta. The research was conducted in September-December 2015. The survey method is performed on drought resistant soybean cultivation in the Mediterranean lands, Simo, Boyolali and exploration of experimental methods to study the characteristics of the soil and the association Rhizobium sp, Rhizobakteri and Mycorrhizae with soybean plants dryland
From the results of isolation found eight isolates of Rhizobium sp, that R5, R6, R7, R8, R9, R10, R13, R15 with cell shape and are gram-negative bacilli and eight isolates of Rhizobakteri that Rb1, RB3, RB4, RB5, RB6, RB8, Rb9, Rb10, Rb11 with cell shape and negative cocci, as well as Mycorrhizae’s spores and as much 20,46x106 spores/ml. This indicates between association Rhizobium sp, Rhizobakteri and Mycorrhiza to soy Petek who live in the land of the Mediterranean in Simo, Boyolali with pH 7,6, KL-Kl 18,92%, and water condition in area is 1,97% from 17,92% and Soybean yield is 0,60 t/ha..
varietas lokal yang tahan kering di tanah Mediteran, Simo, Boyolali.
Penelitian dilakukan dengan 2 metode yaitu metode observasi dan metode eksplorasi eksperimen. Observasi dilaksanakan di tanah Mediteran, Desa Simo, Kecamatan Simo, Kabupaten Boyolali dan penelitian eksplorasi eksperimen dilaksanakan di Laboratorium Agrobioteknologi dan Laboratorium Tanah Fakultas Pertanian Universitas Muhammadiyah Yogyakarta. Penelitian dilaksanakan pada bulan September – Desember 2015. Metode survei dilakukan pada budidaya kedelai tahan kering di tanah Mediteran, daerah Simo, Boyolali dan metode eksplorasi eksperimental untuk mengkaji karakteristik tanah dan asosiasi Rhizobium sp, Rhizobakteri dan Mikoriza dengan tanaman kedelai lahan kering
Dari hasil isolasi ditemukan 8 isolat Rhizobium sp, yaitu R5, R6, R7, R8, R9, R10, R13, R15 dengan bentuk sel basil dan bersifat gram negatif, dan 8 isolat Rhizobakteri yaitu, Rb1, Rb3, Rb4, Rb5, Rb6, Rb8, Rb9, Rb10, Rb11 dengan bentuk sel kokus dan bersifat negatif, dan infeksi Mikoriza dengan spora Mikoriza sebanyak 20,46x106 spora/ml. Hal ini menunjukkan adanya asosiasi antara Rhizobium sp, Rhizobakteri dan Mikoriza terhadap kedelai Petek yang hidup di tanah Mediteran di Simo, Boyolali dengan pH 7,6, kadar lengas lapangan 18,92%, dengan kondisi air tersedia lapangan 1,97% dari 17,92% dan hasil kedelai 0,60 t/ha.
1
I. PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Tingkat kebutuhan konsumsi kedelai yang mencapai lebih dari 2,24 juta ton setiap tahunnya. Padahal pada kenyataannya produktifitas hasil kedelai di tingkat petani baru mencapai 1,0 – 1,5 ton/ha. Hasil ini masih tergolong rendah karena potensi biologis dapat mencapai 3,3 ton/ha dan hasil penelitian rata-rata telah mencapai 2,5 ton/ha atau 75% dari potensi biologisnya (Sudantha, 1997). Di Indonesia kedelai merupakan komoditas pangan yang strategis sehingga upaya swasembada tidak hanya untuk memenuhi kebutuhan tapi juga untuk mendukung agroindustri. Menurut Purwanto dan Agustono (2010) dalam Surtianingsih dkk (2009), produksi kedelai Indonesia saat ini masih dalam tingkat yang belum dapat mengimbangi laju peningkatan kebutuhan kedelai sehingga Indonesia termasuk pengimpor kedelai yang cukup banyak. Rendahnya produktivitas di Indonesia antara lain disebabkan oleh faktor alam, biotik, teknik budidaya serta fisiologi tanaman kedelai. Menteri Pertanian (Mentan) Suswono mengakui kebutuhan kedelai di Indonesia masih mengandalkan dari impor sebesar 60%. Pasalnya produksi dalam negeri yang hanya memasok 800.000 ton dari kebutuhan hingga 3 juta ton per tahun (Marsela, 2012).
lahan mengalami kekeringan. Kondisi lahan yang kritis dengan tanah yang mengering dan retak-retak, tanaman kedelai yang sudah berumur dua bulan mengalami pertumbuhan yang tidak maksimal, begitu juga untuk tanaman yang sudah berbuah, kondisi buah tidak layak jual karena kondisi kulit yang mengering dan menghitam. Pertumbuhan tanaman kedelai yang ditanam di sela-sela bekas rumpun tanaman padi tampak kerdil, meskipun sudah berumur dua bulan, bekas rumpun tanaman padi yang sudah memutih tampak lebih dominan dibandingkan dengan tanaman kedelai. Terdapat 300 ha tanaman kedelai mati dengan kondisi daun menguning (Metrotvnews, 2014).
Pada Agustus 2015 ditemukan ada varietas lokal yang tahan kemarau panjang di tanah Mediteran daerah Simo Boyolali penanaman dengan cara tanpa adanya pengolahan (no tilage) dan selama 8 minggu tanpa ada pengairan. Kondisi tanah sangat kering, sampai terlihat retakan-retakan tanah, namun kedelai tetap hidup dan berbuah dengan baik (Komunikasi pribadi, Ir. Mulyono MP).
B. Permasalahan
1. Mengapa kedelai varietas lokal di tanah Mediteran daerah Simo Boyolali, dapat tumbuh tahan kering, tanpa pengairan selama 8 minggu?
3
C. Tujuan
1. Isolasi dan karakterisasi Rhizobium sp, dengan kedelai varietas lokal yang tahan kering di tanah Mediteran.
2. Isolasi dan karakterisasi Rhizobakteri dengan kedelai varietas lokal yang tahan kering di tanah Mediteran.
3. Isolasi dan karakterisasi Mikoriza dengan kedelai varietas lokal yang tahan kering di tanah Mediteran.
4. Mempelajari asosiasi Rhizobium sp, Rhizobakteri dan Mikoriza dengan tanaman kedelai varietas lokal yang tahan kering di tanah Mediteran, Simo, Boyolali.
D. Manfaat Penelitian
1. Penelitian ini diharapkan memberikan informasi tentang budidaya kedelai di tanah Mediteran, yang tahan kondisi cekaman kekeringan selama kemarau panjang di daerah Simo, Boyolali.
2. Diharapkan dengan terungkapnya asosiasi Rhizobium sp, Rhizobakteri dan Mikoriza pada tanaman kedelai varietas lokal yang tahan cekaman kekeringan maka selanjutnya inokulum dapat dikembangkan menjadi pupuk hayati yang spesifik untuk tanaman kedelai yang tahan terhadap cekaman kekeringan.
E. Batasan Studi
Batasan Selatan merupakan tanaman Tebu. Batasan Timur adalah tanaman Padi. Batasan Barat adalah pohon Sengon.
Populasi dalam penelitian ini adalah tanaman kedelai varietas lokal yang tahan terhadap cekaman kekeringan pada musim kering di bulan Juni-Oktober. Lahan pengamatan tanaman sampel kedelai terdiri dari 3 blok, yaitu blok A yang seluas 2,95 x 4,70 m2, terdapat 309 tanaman kedelai. Blok B luasan 3,85 x 2,45 m2 terdapat 313 tanamam dan blok C terdapat 350 dengan luasan 4,30 x 2,45 m2( Lay Out lampiran 1.)
F. Kerangka Pikir
Tanaman kedelai dapat tahan terhadap cekaman kering karena adanya asosiasi dengan beberapa mikroba, yaitu: Rhizobium sp, Rhizobakteri dan Mikoriza (Artha 1993; I nyoman Adijaya, dkk., 2004; Yuwono et. al., 1999; Setiadi, 2003).
Di daerah Simo, Boyolali ditemukan tanaman Kedelai yang tahan terhadap cekaman kekeringan, selama 8 minggu tanpa adanya penyiraman dan dapat hidup serta berbuah dengan baik di tanah Mediteran. Untuk itu perlu dikaji dan dipelajari tentang asosiasi antara tanaman kedelai dengan Rhizobium sp, Rhizobakteri dan Mikoriza.
5
Jika data menunjukan keberadaan asosiasi tersebut maka isolat mikroba akan dikembangkan menjadi pupuk hayati yang spesifik untuk tanaman kedelai yang tahan terhadap cekaman kekeringan.
Gambar 1. Kerangka Pikir Penelitian Lahan Tanah Mediteran, seluas 500 m2, di Kec. Simo,
Kab. Boyolali ditanami Kedelai varietas lokal
Sampel Tanah Sampel tanaman
Kedelai
Penyajian Hasil, Informasi tentang kondisi tanah dan tanamn kedelai yang tahan cekaman kekeringan serta Asosiasi tanaman kedelai dengan
Rhizobium sp, Rhizobakteri, dan Mikoriza Tanah (Kadar
lengas, pH, Bo, N, dan C/N
Tanah )
Asosisasi tanaman kedelai dengan
Rhizobium sp, Rhizobakteri, dan
Mikoriza Pertumbuhan dan
6
II. TINJAUAN PUSTAKA
A. Budidaya Kedelai Tahan Kering Tanpa Olah Tanah (no tillage) Kedelai adalah salah satu komoditas pangan utama setelah padi dan jagung. Kedelai merupakan bahan pangan sumber protein nabati utama bagi masyarakat. Pada awalnya tanaman kedelai merupakan tanaman sub tropika hari pendek, namun setelah didomestikan dapat menghasilkan banyak kultivar lokal. Para pemulia tanamanpun telah mengintroduksi kultivar yang dapat beradaptasi pada kondisi yang berbeda, karena kemampuan tanaman dimana saja (Rubatzky dan Yamaguchi, 1998).
7
dibudidayakan pada MKI (Pebruari-Mei) dan MK2 (Juli-Oktober). Di lahan kering, kedelai dibudidayakan pada MHI (Desember-Maret) dan MH2 (April-juli).
Varietas kedelai tahan kering yang di lepas pada tahun 2001 yaitu Tanggamus yang berumur panen 88 hari, berukuran sedang sekitas 11,0 g/100 biji. Selain itu varietas Sibayak juga merupakan varietas yang dilepas pada tahun 2001 berumur panen 89 ukuran biji 12,5 g/100 biji, varietas lain yang dilepas pada tahun 2001 yaitu varietas Nanti berumur panen 92 hari, ukuran sedang yaitu 11,5g/100 biji. Pada tahun 2014 Indonesia melepaskan 2 varietas lagi yang tahan kering yaitu Seulawah dan Rantai usia panen 93 dan 90 hari, ukuran biji kecil yaitu 9,5 g/100 biji dan 10,5g/100 biji (Novita, 2011). Selain itu, salah satu varietas yang banyak tumbuh di daerah Jawa Tengah adalah kedelai varietas Petek. Kedelai ini hasil pemutihan varietas lokal Kab. Kudus, Jawa Tengah. Hasil rata-rata kedelai ini adalah 1,2 t/ha, dan bobot 100 biji 100 8,3 g. Ciri-ciri dari varietas Petek adalah: warna batang hijau, warna bunga ungu, warna kulit biji kuning bersih, warna polong tua coklat muda, umur matang 75 hari, tinggi tanaman 40 cm. Varietas Petek ini diusulkan dan dilepas oleh Dinas Pertanian Propinsi Jawa Tengah (Suhartina, 2005).
pengolahan tanah menyebabkan air tanah akan menguap sehingga tanah cepat menjadi kering dan kedelai yang ditanam akan terhalang pertumbuhannya serta juga akan menyebabkan tertundanya waktu tanam. Hasil penelitian menunjukkan bahwa kedelai yang ditanam sesudah padi sawah dengan cara TOT lebih baik dibanding dengan cara pengolahan tanah karena pada pengolahan tanah air menguap lebih cepat sehingga persediaan air tanah tidak mencukupi untuk pertumbuhan tanaman. Selain itu, pengolahan tanah menyebabkan tertundanya waktu tanam sehingga tanaman akan mengalami kekeringan pada stadia perkembangan dan pengisian biji, khususnya dimusim kemarau. Penanaman kedelai di lahan sawah sesudah panen padi juga dapat meningkatkan efisiensi pemanfaatan lahan sawah tadah hujan atau yang beririgasi sederhana dan irigasi desa sehingga dapat meningkatkan Indeks Pertanaman (IP). Keuntungan lain yang didapat adalah putusnya siklus hidup hama dan penyakit padi serta dapat melaksanakan usaha optimasi pola tanam di lahan sawah namun pada hasil jumlah biji dan berat polong lebih banyak dan lebih besar apabila tanah diolah 1 dan 2 minggu sebelum tanam kedelai (Jeane, 2010).
9
Meski toleran terhadap kering pada prinsipnya semua jenis tanaman memerlukan air untuk kelangsungan hidupnya, mulai dari berkecambah sampai panen. Air di dalam jaringan tanaman selain berfungsi sebagai penyusun utama jaringan yang aktif mengadakan kegiatan fisiologis, juga berperan penting dalam memelihara turgiditas yang diperlukan untuk perbesaran dan pertumbuhan sel. Peranan yang penting ini menimbulkan konsekuensi bahwa secara langsung atau tidak langsung, defisit air tanaman air akan mempengaruhi semua proses metabolisme dalam tanaman yang mengakibatkan terganggunya proses pertumbuhan (Gardner et al., 1991).
Menurut Borges (2003), pada stadia vegetatif tanaman kedelai yang mengalami cekaman kekeringan menunjukkan pertumbuhan lambat dan daun sempit serta buku batang yang pendek sehingga penampilan tanaman akan kerdil dengan daun kecil, cepat berbunga, defisiensi unsur hara baik mikro maupun makro dan potensi hasilya yang rendah. Cekaman kekeringan pada waktu pembungaan menyebabkan kerontokan bunga. Cekaman kekeringan pada stadia pembentukan polong akan menyebabkan jumlah polong yang terbentuk turun jumlahnya dan terjadi kerontokan. Cekaman kekeringan pada pada stadia pengisian polong menyebabkan menurunnya jumlah polong isi dan ukuran biji.
kekeringan dengan meningkatkan akumulai senyawa tertentu seperti glisin, betanin, gula, alkohol atau prolin untuk osmotic adjusmen, 4) mengoptimalkan peranan stomata untuk mencegah hilangnya air melalui daun, dengan adanya osmotic adjusment tersebut memungkinkan pertumbuhan tetap berlangsung dan stomata tetap membuka.
B. Asosiasi Rhizobium sp dengan Tanaman Kedelai
Tanaman kedelai dapat tumbuh tanah yang kandungan Nitrogennya rendah. Hal ini dikarenakan jenis kacang-kacangan bersimbiosis dengan bakteri pengikat Nitrogen dari genus Rhizobium sp. yang berfungsi membentuk nodul akar (Rao, 1994). Menurut Asti (2014), kemampuan penambatan Nitrogen pada simbiosis Rhizobium sp. dapat mencapai 80 kg/ha/thn atau lebih. Hal ini selaras dengan pemikiran Winarso (2005), bahwa pemanfaatan mikroorganisme penambat N2 akan mengurangi biaya produksi. Penambatan N2 di atmosfer oleh mikroorganisme dapat membantu ketersediaan unsur N2, sehingga dapat mengurangi penggunaan pupuk N. Pengaplikasian Rhizobium sp. mampu mencukupi 75 % kebutuhan N pada tanaman.
11
meristem nodul dan perlukaan nodul dengan pembelahan sel-sel korteks, dan penggandaan sel tidak terkendali sehingga lama-kelamaan akan membuat akar menggelembung. Bakteri akan berubah menjadi bakterioid dan Leghaemoglobin yang berbentuk seperti balon untuk menggambil O2, untuk keperluan sintesis protein dengan bantuan nitrogenase, untuk mereduksi N2 menjadi NH4+ (Asam Amino) (Pelczar dan Chan, 1988).
Secara umum sel-sel bakteri Rhizobium sp. berbentuk batang, aerobik, berukuran 0,5x1,2-3,0 mikro meter. Pada umumnya bersifat pleomorfik yaitu mempunyai bentuk yang bermacam-macam dalam keadaan pertumbuhan yang kurang menguntungkan. Rhizobium sp. tidak mempunyai spora, bersifat gram negatif, kemoorganotrof yaitu sumber energinya berasal dari oksidasi senyawa-senyawa organik (Pelczar dan Chan, 1988). Tipe pertumbuhannya cenderung lebih lambat dari pada bakteri lain yaitu membutuhkan waktu lebih dari 4 jam untuk pertumbuhan sedangkan bakteri lain hanya membutuhkan 2-4 jam untuk perkembang biakannya (Elkan, 1987).
Rhizobium sp. mempunyai karakteristik yang spesifik pada media Yeast Mannitol Agar (YMA) seperti: bentuk, warna dan tekstur dari koloni dalam pertumbuhannya. Bentuk koloni umumnya datar, bulat dan cembung dalam petridis. Warna koloni bisa putih, warna susu atau tranlucen (putih agak keruh). Sedangkan tekstur koloni biasanya lengket ( Herridge dan Roghly, 1975).
(5-7 hari) contohnya berasal dari tanaman Macroptilium, Desmodium dan Galictia sedangkan untuk Stylosanthes dan Lupinus memerlukan waktu inkubasi 7-12 hari. Identifikasi Rhizobium sp. dapat dilakukan dengan beberapa cara bisa menggunakan media YMA + Congo Red, Rhizobium sp. tidak dapat mengabsorbsi Congo Red selama masa inkubasi tanpa cahaya sehingga koloni yang terbentuk akan berwarna putih. Selain itu dapat juga menggunakan YMA + Bromothymol Blue yang berwarna hijau pada pH 6,8. Rhizobium sp. yang termasuk kelompok pertumbuhan lambat bereaksi basa pada media dan merubah warna media jadi biru. Untuk Rhizobium sp. pertumbuhan cepat bereaksi asam dan merubah media menjadi kuning (Hahn, 1966).
Hasil penelitian Artha (1993) menunjukkan bahwa, inokulasi Rhizobium sp. pada lahan kering dapat meningkatkan bintil akar dan hasil biji kedelai. Sedangkan hasil penelitian Rahayu (2004) menunjukkan bahwa pemberian Rhizoplus pada tanaman kedelai varietas Willis dapat meningkatkan pertumbuhan
13
C. Asosiasi Rhizobakteri dengan Tanaman Kedelai
Rhizobakteri merupakan salah satu bakteri yang hidup di daerah perakaran
mempunyai kemampuan mensintesis senyawa osmotoleran glisin betanin (Le Redulier et al., 1984; Bosford dan Lewis, 1989). Khusus pada kemampuan melarutkan Phospat, Rhizobakteri seperti Pseudomonas sp. dan Bacillus sp. dapat mengeluarkan asam- asam organik, seperti: asam formiat, asetat, dan laktat yang bersifat dapat melarutkan bentuk-bentuk fosfat yang sukar larut tersebut sehingga menjadi bentuk yang tersedia bagi tanaman (Rao, 2007).
Bakteri yang termasuk dalam Rhizobakteri, sebagian besar berasal dari kelompok Gram negatif dari genus Pseudomonas dan beberapa dari genus Serratia (Kloepper 1993). Selain kedua genus tersebut, genus dari Azotobacter,
Azospirillum, Acetobacter, Burkholderia, dan Bacillus juga termasuk dalam Rhizobakteri (Glick 1995).
erdasar an er ey’s Manual of Detem nat ve acter olo y ole J on, G.
Holt et. al.(1994) Rhizobakteri bersifat gram negatif dan mempunyai bentuk batang. Genus yag termasuk dalam Rhizobakteri memiliki bentuk dan sifat gram yang bermacam-macam diantaranya genus yang memiliki gram negatif yaitu Pseudomonas memiliki bentuk sel lurus atau batang sedikit bengkok, Serratia yang mana memiliki sel berbentuk batang lurus, Azotobacter dan Acetobacter memiliki bentuk sel batang atau kokus, sedangkan Azospirillum memiliki bentuk batang atau pulmp vibrioid.
ml media Jensen cair. Setelah dibiarkan tumbuh selama inkubasi, dilakukan penggoresan secara kuadran ke media agar-agar nutrien (NA) dan media agar-agar Jensen (JA) masing-masing sebanyak dua kali ulangan untuk setiap satu sampel tanah. Kemudian, dilakukan pengenceran serial (Hadioetomo 1993), seri pengenceran 10-3 dan 10-4 digunakan untuk disebar ke media NA dan media JA. Setelah 24 jam bakteri yang tumbuh di media NA dimurnikan pada media NA, kemudian diinkubasi lagi selama 24 jam. Koloni tunggal yang tumbuh pada media NA dipindahkan ke media agar-agar miring NA. Koloni tunggal yang tumbuh pada media JA setelah diinkubasi selama 5 hari dipindahkan ke media JA. Setelah 48 jam, koloni tunggal dimurnikan ke dalam media agar miring JA.
15
dan Amonifikasi, sehingga tanaman padi IR64 yang berasosiasi tahan terhadap cekaman kekeringan (KL 40%) dengan interval penyiraman 6 hari sekali.
Berdasarkan penelitian Ikhwan dan Muhidin (2000) telah dikaji isolat Rhizobakteri yang berpotensi sebagai pupuk hayati pada tanaman kedelai. Ini
dilihat dari kemampuannya yang dapat menghasilkan hormon pertumbuhan dan osmoprotektan yang dapat meningkatkan ketahanan tanaman dari cekaman kekeringan dan mampu memfiksasi N dari udara. Penelitian tersebut telah menguji isolat Rhizobakteri campuran memberikan hasil yang lebih baik. Selain itu, Rhizobakteri mampu menghasilkan hormon pertumbuhan berupa IAA dan Giberellin yang dapat memacu pertumbuhan rambut akar, percabangan akar yang memperluas jangkauan akar, sehingga tanaman berpeluang besar untuk menyerap hara lebih banyak. Disamping itu juga mempunyai kemampuan fiksasi N yang dapat meningkatkan pertumbuhan tanaman sehingga hasil tanaman meningkat 20,67% (Yusmira dkk, 2013).
D. Asosiasi Mikoriza dengan Tanaman Kedelai
MVA dimasukan kedalam keluarga Edogoneceae, Ordo Edogonales, kelas Phycomycetes. Tipenya dibedakan berdasarkan tipe spora. Jamur ini hanya dapat
berfungsi untuk menyerap hara dari sekeliling tanaman yang terinfeksi MVA, yang selajutnya melalui arbuskul diberikan ketanaman inang (Suhardi, 1990).
Berdasarkan struktur tubuh dan cara infeksi terhadap tanaman inang,
mikoriza dapat digolongkan menjadi 2 kelompok besar (tipe) yaitu Ektomikoriza
dan Endomikoriza (Rao, 1994). Namun ada juga yang membedakan menjadi 3
kelompok dengan menambah jenis ketiga yaitu peralihan dari 2 bentuk tersebut
yang disebut Ektendomikoriza. Pola asosiasi antara cendawan dengan akar
tanaman inang menyebabkan terjadinya perbedaan morfologi akar antara
ektomikoriza dengan Endomikoriza. Pada Ektomikoriza, jaringan hifa cendawan
tidak sampai masuk ke dalam sel, tapi berkembang diantara sel kortek dan akar
membentuk hartig net dan mantel dipermukaan akar. Sedangkan Endomikoriza, jaringan hifa cendawan masuk kedalam sel kortek akar dan membentuk struktur
yang khas berbentuk oval yang disebut vesicle dan sistem percabangan hifa yang disebut arbuscule, sehingga Endomikoriza disebut juga Vesicular-Arbuscular
Micorrhizae (VAM).
17
logam berat dalam tanah, dapat memperbaiki struktur tanah, meningkatkan nodulasi serta penyematan Nitrogen oleh Rhizobium sp. pada kedelai.
Hasil penelitian dari Husnul Jannah (2011) menyatakan bahwa, tanaman kedelai pada lahan kering yang diinokulasi mikoriza memberikan respon yang menguntungkan baik pada fase vegetatif maupun pada fase generatif. Respon yang utama dengan inokulasi mikoriza adalah pada akar tanaman kedelai, yaitu terbentuknya hifa mikoriza sehingga dapat memperluas bidang serapan air dan menyerap unsur-unsur hara makro maupun mikro lainnya di dalam tanah dengan baik. Menurut Prihastuti (2007) mengungkapkan bahwa, infeksi mikoriza pada sistem perakaran tanaman dapat meningkatkan serapan Phospat pada tanah-tanah yang kahat unsur hara. Lebih lanjut Setiadi (2003) menegaskan bahwa, dengan meningkatnya unsur hara Phospat di dalam tanah, diharapkan keragaan tanaman menjadi lebih baik, tanaman menjadi lebih tahan terhadap serangan pathogen. Akar mikoriza juga mampu meningkatkan penyerapan unsur hara lainnya seperti Ca, Mg, K, Zn, dan Cu, meningkatkan ketahanan terhadap kekeringan dan melindungi tanaman dari keracunan logam-logam berat, sehingga tanaman mampu hidup pada kondisi yang tidak menguntungkan.
E. Tanah Mediteran
19
III. METODELOGI PENELITIAN
A. Tempat dan Waktu Penelitian.
Penelitian Observasi dilaksanakan di tanah Mediteran, Desa Simo, Kecamatan Simo, Kabupaten Boyolali dan penelitian eksplorasi eksperimen dilaksanakan di Laboratorium Agrobioteknologi dan Laboratorium Tanah Fakultas Pertanian Universitas Muhammadiyah Yogyakarta. Penelitian dilaksanakan pada bulan September – Desember 2015.
B. Bahan dan Alat.
Bahan yang digunakan berupa tanah dan tanaman kedelai yang dipanen dari lahan Mediteran, Simo, Boyolali dengan kondisi cekaman kekeringan, medium YMA, medium LB+NaCl. Sublimat, alkohol, cat Eritrosin, cat alkohol asam, NaOH, HCl, cat acid Fuhsin, air steril.
Alat yang digunakan adalah timbangan, meteran, tabung reaksi, petridis, erlenmeyer, auotoklaf, pisau tajam, pipet steril, mikroskop, haemacytometer, saringan spora mikoriza, cat gam, oven, otoklaf, lampu busen, shaker, penggaris, dan jarum ose.
C. Metode Penelitian. 1. Jenis Penelitian
Mikoriza dengan tanaman kedelai lahan kering. Observasi dilakukan untuk mendapatkan informasi tentang kondisi eksisting wilayah yang menggambarkan keadaan awal kawasan tersebut. Pemilihan lokasi observasi dengan cara purposive yaitu pengambilan sampel yang secara sengaja dipilih berdasarkan tujuan penelitian (Masri Singarimbun, 1989 dalam Rosdiana R. 2015).
a. Diobservasi kondisi lahan, meliputi: batas lahan, vegetasi sekeliling, irigasi, kondisi tanah dan tanaman.
b. Penentuan Tanaman Korban
Sampel tanaman diambil dari beberapa titik di lokasi pengambilan sampel. Hal ini agar sampel mewakili tanaman yang akan diamati. Kemudian akan diidentifikasi dari pertumbuhan dan hasil tanaman setiap tanaman kedelai.
2. Metode Penetapan Lokasi
Penelitian dilakukan di lahan Mediteran daerah Simo, Boyolali yang terdapat tanaman kedelai tahan terhadap cekaman kekeringan selama 8 minggu tanpa adanya penyiraman ataupun pengairan (berdasarkan informasi dari Ir. Mulyono MP.)
3. Metode Penetapan Sampel
21
D. Cara Penelitian. 1. Penelitian obsrvasi
Teknis Penelitian dilakukan dengan mengobservasi kondisi tanah dan kondisi tanaman pada lahan Mediteran, di Simo, Boyolali. Serta menggunakan data-data yang diperlukan. Data dalam penelitian ini berupa data primer dan data sekunder, yang mana data primer merupakan data yang diperoleh dari hasil observasi secara langsung dan hasil wawancara langsung di lapangan. Data sekunder merupakan data yang diperoleh dari hasil studi pustaka dan penelusuran ke berbagai insansi terkait dengan penelitian (Adhi Sudibyo, 2011). Nurliasari (2006) menyatakan data-data yang mendukung dalam penelitian ini meliputi:
a. Data Primer
Data primer adalah data yang diperoleh secara langsung baik melalui penyelidikan di lapangan maupun di laboratorium.
b. Data Sekunder
Data sekunder adalah data yang diperoleh melalui studi literatur sebagai pendukung dan pelengkap dari data-data primer. Berupa kondisi lapangan saat pengambilan sampel, ketentuan-ketentuan dari standard pengukuran, hasil percobaan-percobaan sebelumnya dan buku-buku literatur lainnya. a. Lokasi Pengamatan
iii. Mengetahui kondisi lahan untuk mendapatkan pengairan baik berupa irigasi dan sebagainya dengan wawancara dengan petani setempat
2. Penelitian Eksperimen
a. Penentuan dan Pengamatan Tanah
Pada setiap blok diambil dari 3 dengan 3 lapisan yaitu lapisan dengan kedalaman 0-10 cm2, 10-20 cm2, dan 10-30 cm2, sehingga total tanah 27 sampel tanah. Masing-masing sampel akan diamati dari Kadar Lengas, kandungan Bahan Organik, pH, N, dan N/C rasio.
b. Penentuan blok tanaman Sampel
i. Lahan sudah berbentuk bloking, yaitu terdapat 3 blok yang mana 2 terletak di tepi dan 1 terletak di tengah.
ii. Penentuan persentase luasan blok yang diteliti yaitu dengan mengukur luasannya total keseluruhan luasan blok dikompersikan dan dipresentasekan dari total keseluruhan luasan lahan. ( Lampiran I)
c. Penentuan tanaman sampel
i. Menghitung keseluruhan populasi pada setiap blok.
23
d. Pengamatan Tanaman sampel
Untuk mengetahui bagaimana pertumbuhan kedelai dan hasil dari tanaman tersebut. Pengamatan meliputi: Tinggi tanaman (cm), Berat segar tanaman (g), Berat kering tanaman (g), Panjang akar (cm), Berat segar akar (g), Berat kering akar (g), Proliferasi akar,Jumlah polong, Berat polong (g), dan Hasil kedelai (g/tanaman), Jumlah biji, Berat Biji (g), dan Berat Biji 100 (g).
e. Sterilisasi Alat
Sterilisasi alat bertujuan untuk membunuh mikroba yang tidak diinginkan pada alat sehingga terjaga dari kontaminasi pada saat proses. Tahap pertama yaitu merebus semua alat yang akan digunakan sampai mendidih, lalu ditiriskan, setelah penerisan alat di cuci lalu ditiriskn dan kemudian penyeterilan dengan menggunakan autoclaf dengan suhu 1210 C, dan dengan tekanan 1 atm selama 20 menit.
f. Pembuatan Medium
g. Isolasi Rhizobakteri
Akar tanaman kedelai disemprot-semprot dengan perlahan dengan aquades yang airnya ditampug di petridis 1 ml yang akan diisolasi dimedia LBA pada uji pendahuluan dengan cekaman NaCl dengan konsentrasi 0,17 N, 1 N, 1,5 N, 2 N kemudian diterapkan pada sampel dengan kondisi kemampuan pada cekaman tertinggi.
Untuk mengisolasi Rhizobakteri yaitu dengan cara mencairankan medium LBA (Luria Bertani Agar) dan dimasukkan ke dalam petridis dan didiamkan sampai padat, lalu membuat suspensi bakteri dan ambil dari air semprotan perakaran yang diambil 1 ml dengan pengenceran 102, 104, dan 106 dan kemudian diambil 0,1 ml lalu diinokulasikan kepermukaan media padat cawan petri dengan metode surface dan streak, selanjutnya diinkubasikan secara terbalik pada suhu kamar, setelah tumbuh koloni yang terpisah dengan zona jernih di sekitarnya menunjukan bakteri dapat diisolasi. Isolasi dapat dilakukan dengan mengambilnya dengan cara aseptik dengan ose satu koloni yang dikehendaki dan suspensi dalam air steril. Memeriksa morfologi sel dengan mikroskop, dilanjutkan dengan pengecatan gram dan menggambar.
h. Isolasi dan karakterisasi Rhizobium sp.
25
diameter nodul diukur dengan menggunakan jangka sorong, 20 nodul setiap tanaman, kemudian nodul dibelah untuk uji efektivitas noduldilanjutkan dengan menumbuk nodul setiap tanaman. Nodul yang digunakan merupakan nodul masih segar dibersihkan dengan sublimat atau alkohol 70% dalam cawan selama 2-6 menit, lalu dicuci 3-5 kali dan ditumbuk hingga keluar cairan berwarna merah, kemudian diambil 1 ose nodul akar dan dibuat goresan pada media YMA di petridish. Pada bekas goresan akan tertinggal sedikit suspensi Rhizobium sp. lalu digoreskan lagi ke medium dengan ose yang telah dibakar. Kemudian cawan petri yang telah diberi Eriket di letakan dalam posisi terbalik, diinkubasikan pada suhu temperatur kamar. Koloni yang terpisah dan berwarna merah jambu dan kemudian diidentifikasi dari bentuk koloni, struktur dalam, betuk tepi dan elevasi kemudian ambil dengan ose 1 koloni dan suspensikan dengan air steril kemudian untuk diperiksa morfologinya di bawah mikroskop dengan pengecatan gram. Kemudian digambar bentuk selnya.
i. Karakteristik Mikoriza i. Pengamatan
dengan HCl 1 % selama 1 jam yang dilanjutkan dengan pemberian cat Acid Fuhsin. Lalu diamati jumlah vesikel, arbuskul, presentase infeksi MVA.
ii. jumlah spora dan karakterisasi spora
Cara mengamati jumlah spora yaitu tanah dari tanaman diambil sebanyak 250 gram, kemudian direndam dengan air 1 L, lalu saring dengan penyaring Mikoriza. Pengambilan koloid pada cairan menggunakan 0,1 ml diletakan diatas preparat kemudian diamati di bawah mikroskop jumlah dan karakteristik spora Mikoriza.
E. Parameter Yang Diamati. 1. Penelitian Survei :
a. Lokasi Penelitian Survei lokasi meliputi :
i. letak lahan batas lahan dan ukuran luasannya
ii. vegetasi apa saja yang berada di lokasi dan sekelilingnya
iii. Bagaimana lahan mendapatkan air salah satunya mungkin bagaimana dengan pengirannya seperti irigasi dll.
iv. kondisi tanah dan tanaman pada lahan Mediteran tersebut b. Tanah Mediteran Simo, Boyolali
i. Kadar Lengas, dengan rumus: K=
Keterangan:
K: Kadar Lengas Tanah A: Bobot Wadah/Cawan B: Bobot Tanah Awal
27
ii. pH Tanah
Pengukuran pH tanah merupakan pengukuran sifat keasaman dan kebasaan tanah atau aktivitas konsentrasi ion hidrogen (H+) diukur dengan menggunakan kertas ukur.
iii. Kadar Bahan Organik
Kadar bahan organic ditentukan menggunakan metode Walkley dan Black yaitu dengan rumus
adar a an Or an O adar C Keterangan:
A = Banyaknya FeSO4 yang digunakan dalam titrasi baku B = Banyaknya FeSO4 yang digunakan dalam titrasi blangko
iv. Kandungan N dalam tanah
Kandungan N total tanah diukur melalui tahapan Destruksi, Destilasi, dan Titrasi, untuk perhitungna menggunakan rumus sebagai berikut
Keterangan:
A = Banyaknya NaOH 0,1 N yang digunakan dalam titrasi baku B = Banyaknya NaOH 0,1 N yang digunakan dalam titrasi blangko KL = Kadar lengas sampel tanah
v. Kandungan C/N Rasio
c. Tanaman korban
i. Tinggi tanaman (cm)
Tinggi tanaman diukur dari pangkal tanaman yaitu batas akar sampai dengan ujung titik tumbuh, dinyatakan dalam satuan cm.
ii. Berat segar tanaman (g)
Dengan cara ditimbang menggunakan timbangan elektrik, dinyatakan dalam gram. Bagian yang ditimbang adalah kesulurahan tanaman, dari akar dan keseluruhan tanaman kecuali hasil dari tanaman kedelai.
iii. Berat kering tanaman (g)
Dengan mengeringkan keseluruhan bagian tanaman yang telah ditimbang berat segarnya dibawah sinar matahari selama 24 jam, lalu dioven dengan suhu 600C. Penimbangan dilakukan berulang-ulang sehingga diperoleh berat kering tanaman secara konstan, dinyatakan dalam gram.
iv. Panjang akar (cm)
Dengan mengukur akar setiap tanaman kedelai dengan menggunakan penggaris dari pangkal tanaman hingga akar terpanjang pada pengamatan tanaman sampel.
v. Berat segar akar (g)
Dengan cara mencabut tanaman, memotong akarnya kemudian ditimbang menggunakan timbangan elektrik, dinyatakan dalam gram
vi. Berat kering akar (g)
29
berulang-ulang sehingga diperoleh berat kering akar secara konstan, dinyatakan dalam gram.
vii.Proliferasi akar dan ketebalan akar
Pengamatan dilakukan dengan melihat penyebaran perakaran tanaman pada saat pemanenan kedelai dengan cara mengambil gambar akar dan pengamatan ada tidaknya penebalan lapisan kulit akar dengan melihat irisan akar.
viii. Jumlah Polong
Menghitung jumlah polong dalam setiap tanamannya ix. Berat polong (g)
Jumlah polong setiap tanamannya ditimbang dan dibagi keseluruhan sehingga diperoleh rata-rata berat polong pertanaman.
x. Jumlah Biji
Perhitungan biji dengan cara menghitung semua biji pada setiap tanamannya, biji sudah dipisahkan dengan polongnya.
xi. Berat Biji (g)
xii.Berat biji 100
Pengamatan berat 100 biji dilakukan dengan cara menimbang berat kedelai 100 biji dari masing-masing blok yang telah dikeringkan, kemudian mengukur kadar airnya dengan dikonversikan pada kadar air 11% dengan rumus :
gram =
a = berat 100 biji pada kadar air 11 % b = berat 100 biji pada kadar air terukur
xiii. Hasil kedelai ( ton/ha)
Hasil tanaman kedelai dinyatakan dalam gram.Pengamatan dilakukan pada saat panen dari tiap unit hasil perlakuan yaitu dengan mengeringkan biji kemudian ditimbang diukur kadar airnya kemudian dikonversikan dalam ton/ha pada kadar air 11% dengan rumus :
A a C
Keterangan:
H = hasil panen/ha pada kadar air 11% A = luas lahan dalam satuan ha (10.000 m2) B = Luas Petak hasil (m2)
31
2. Penelitian Eksperimen a. Rhizobium sp
i. Diameter nodul
Diameter diukur dengan jangka sorong, nilai dari keseluruhan nodul pada setiap tanaman dipersentasekan sehingga menghasilkan nilai rata-rata dari ukuran diameter nodul. Satuan dalam pengukuran diameter adalah cm. ii. Sebaran nodul
Sebaran nodul diamati bagaimana sebarannya, dan diambil gambar, untuk mengetahui seberapa luasan sebarannya
iii. Jumlah nodul
Jumlah nodul ditentukan dengan cara menghitung semua nodul yang terdapat pada akar pada setiap tanaman sampel
iv. Berat nodul (gram)
Berat nodul diketahui dari menimbang keseluruhan nodul yang ada pada setiap tanaman sampel.
v. Nodul efektif (%)
Isolasi dan karakterisasi Rhizobium sp: hasil isolasi akan mengidentifikasi Rhizobium sp., baik dari bentuk koloni, struktur dalam, betuk tepi, elevasi
serta morfologi selnya. a. Rhizobakteri
i. Isolasi Rhizobakteri dan screening osmotoleran NaCl
ii. Karakterisasi Rhizobakteri: Isolat yang paling tahan cekaman NaCl dengan tingkatan Molaritas yang berbeda dikarakterisasi koloni, sifat gram, bentuk sel, sifat fisiologi.
b. Mikoriza
i. Persentase infeksi MVA diukur dengan (%)
Keterangan :
A= Jumlah akat yang trifeksi B=jumlah total akar yang diamati.
ii. Jumlah vesikel, arbuskul
Jumlah vesikel dan arbuskul dengan menghitung berapa jumlah akar yg terinveksi vesikel atau arbuskul, diamati dengan mikroskop.
iii. Jumlah spora dan karakterisasi spora
33
F. Analisis Data
Analisis data pada penelitian ini dengan menggunakan eksploratif, yaitu mencocokkan serta mengevaluasi data karakteristik tanah, Rhizobium sp Rhizobakteri, dan Mikoriza. Analisis dilakukan di laboratorium dengan kriteria
34
Dari hasil observasi pada tanggal 2 September 2015, dapat dinyatakan lokasi penelitian, pada lahan kedelai yang tahan kering di daerah Simo Boyolali, dengan jenis tanah Mediteran, yang merupakan milik petani setempat. Letak lahan tersebut tidak jauh dari perumahan penduduk, batasan lahannya dari batas sebelah utara lahan berbatasan dengan pemukiman penduduk yang dibatasi oleh jalan raya dan pohon Kapas serta pohon Jati, batasan Selatan merupakan tanaman Tebu, batasan Timur merupakan tanaman Padi, dan batasan Barat adalah pohon Sengon. Kondisi Tanah di lahan Meditera tersebut, sangat kering bahkan sampai terlihat retakan tanah.
Gambar 1. Retakan tanah 6-10 cm
35
pengairan tambahan selain itu. Tanaman kedelai hanya terkena hujan pada awal tanam sampai 2 MST saja, setelah itu tidak memperoleh air sama sekali baik dari irigasi ataupun hujan karena kemarau panjang.
Lahan tersebut berukuran 500 m2 dengan bagian penelitian yang terdiri dari 3 blok penelitian yaitu blok A, Blok B dan blok C. luasan setiap bloknya yaitu: Blok A dengan luasan 2,95x470 m2, blok B dengan luasan 3,85 x 2,45 m2, blok C dengan luasan 4,30 x 2,45 m2, skema lahan terlampir pada Lampiran 1.
Pola tanam yang dilakukan petani dari musim sebelumnya yaitu padi-padi-kedelai. Varietas kedelai yang ditanam yaitu varietas Petek. Jumlah populasi setiap bloknya yaitu, pada blok A berjumlah 309 tanaman kedelai, blok B berjumlah 313 tanaman, dan pada blok C 350 tanaman.
2. Sifat Tanah Mediteran Simo, Boyolali
Tabel 1. Hasil pengamatan laboratorium Kl-kl, Bo, N, C/N, dan pH di Tanah Mediteran Simo, Boyolali
Blok BO N C/N pH
A 0,80 % 0,33 % 1,36 % 7,6 B 1,51 % 0,79 % 1,11 % 7,7 C 1,96 % 2,78 % 0,40 % 7,6 Rerata 1,42 % 1,30 % 0,96 % 7,6 b. Kandungan bahan organik tanah
Bahan organik tanah adalah bagian dari tanah yang merupakan suatu kompleks yang dinamis, yang bersumber dari sisa tanaman atau binatang yang terdapat dalam tanah yang terus menerus mengalami perubahan bentuk, karena dipengaruhi oleh faktor biologi, fisika dan kimia (Kononova, 1961). Bahan organik mencakup semua bahan yang berasal dari jaringan tanaman dan hewan, baik yang hidup maupun yang sudah mati pada bagian tahapan dekomposisi.
Bahan organik lebih mengacu pada bahan sisa (tanaman dan tumbuhan) yang mengalami perombakan atau dekomposisi baik sebagian maupun keseluruhan. Pengukuran kandungan bahan organik dengan metode walkey and black yaitu dengan ditentukannya berdasarkan kandungan C. Hasil perhitungan
37
Arsyad (1989) peranan bahan organik dalam pembentukan agregat yang stabil terjadi karena tanah mudah untuk membentuk komplek dengan bahan organik, selain itu Bahan organik juga dapat meningkatkan populasi mikroorganisme tanah diantaranya jamur dan cendawan, bahan organik digunakan sebagai penyusun tubuh dan sumber energi. Miselia atau hifa cendawan tersebut mampu menyatukan butir tanah menjadi agregat sedangkan bakteri berfungsi sebagai penyatu agregat. Kondisi kandungan bahan organik yang rendah dapat dipengaruhi dari berbagai faktor, diduga salah satu faktor yang mempengaruhi adalah sejarah tanah, tanah Mediteran di daerah Simo, Boyolali selalu ditanami padi dengan menggunakan pupuk kimia.
a. Kandungan Nitrogen (N)
Nitrogen memberikan pengaruh besar terhadap perkembangan pertmbuhan. Fungsi N adalah memperbaiki pertumbuhan vegetatif tanaman dan pembentukan protein. Gejala-gejala kebanyakan unsur N adalah memperlambat kematangan tanaman, batang lemah dan mudah roboh, dan mengurangi daya tahan terhadap penyakit (Hardjowigeno, 2003).
berkriteria sedang, 0,52-0,75 berkriteria tinggi sedangkan >0,75 termasuk kedalam kriteria sangat tinggi (Hardjowigeno, 2003). Pada hasil analisis tanah Mediteran di Simo, Boyolali memiliki kandungan Nitrogen dengan rerata 1,3 % ( tabel 1). Jika dibandingkan pada kriteria kandungan N Standar Internasional maka tanah tersebut termasuk kedalam kriteria tanah yang memiliki kandungan N sangat tinggi. Faktor yang dapat mempengaruhi nilai N yaitu bahan organik, menurut Kemas (2005) jika bahan organik tinggi maka kandungan N akan tinggi, begitu pula sebaliknya. Namun hal ini tidak sesuai dengan kondisi pada tanah Mediteran Simo, Boyolali karena pada kandungan bahan organik sedang, sedangkan kandungan N tinggi ( tabel 1). kandungan N yang tinggi dapat dipengaruhi oleh kondisi tanah tersebut. Tanah Mediteran Simo, Boyolali memiliki tekstur yang sedikit liat sehingga unsur yang berada ditanah tidak mudah terlindi dan tertahan di tanah, selain itu juga dilihat dari sejarah pratanam yang selama ini selalu ditanami padi dan kondisi tanah selalu di memberikan penambahan unsur N pada pemupukan, sehingga N dalam tanah menumpuk. Hal ini juga yang dapat memengaruhi tanah sehingga tanah menjadi bongkahan yang keras.
b. Kandungan C/N Ratio
39
ketersediaan N. Apabila ketersediaan karbon terbatas (kadar C/N terlalu rendah) maka akan kekurangan senyawa sebagai sumber energi yang dapat dimanfaatkan mikroorganisme untk mengikat Nitrogen bebas. Pada tabel 1 dapat dilihat kadar C/N pada tanah Mediteran di Simo, Boyolali yaitu dengan rerata 0,96 %. Menurut Hardjowigeno (2003) kondisi C/N dengan kadar kecil dari 5 maka masuk kepada kriteria sangat rendah. Jika dibandingkan hasil analisis Hardjowigeno (2003), dengan hasil analisis tanah Mediteran di Simo, Boyolali maka tanah tersebut masuk pada kriteria N/C rendah. Hal ini selaras karena kandungan N total yang sangat tinggi yaitu 1,3 %
c. pH Tanah
pH netral 5,5-6,5, selain dari kondisi tanaman hal ini juga berkaitan dengan kondisi tanamn yang bersimbiosis dengan bakteri Rhizobium sp. Menurut Danu dan Hanafiah (2015) Rhizobium sp tidak dapat hidup pada pH lebih kecil dari 4,3 karena bakteri ini peka terhadap keasaman. Menurut Danu dkk (2015) tanaman kedelai sebaiknya dibudidayakan pada pH <5,0 agar mendapatkan hasil yang maksimal dalam pertumbuhan dan produksi tanaman pada setiap jenis varietas kedelai. Jika dibadingkan dari referensi tanah Mediteran memiliki pH yang cukup tinggi dibandingkan dengan kondisi pH standar untuk hidup tanaman kedelai sehingga dapat tumbuh dan berproduksi dengan baik.
a. Hasil Kadar lengas tanah
Lengas tanah merupakan fase cair pada tanah. Tanah memiliki kemampuan menyerap dan menahan air, keberadaan lengas tanah dipengaruhi oleh pengikat spesifik yang berhubungan dengan tekanan air. Pemenuhan air bagi tanaman tergantung pada ketersediaan air di wilayah sekitar perakaran. Kadar lengas tanah pada kondisi dilapangan dapat dilihat pada tabel 2.
Tabel 2. Kadar Lengas Tanah Mediteran Simo, Boyolali Blok Lapisan 1
( 0-10 cm)
Lapisan 2 (10-20 cm)
Lapisan 3
(20-30 cm) Rearata
A 15,01 % 18,39 % 26,93 % 20,11 %
B 7,12 % 14, 61 % 25,39 % 16,25 %
C 8,94 % 19,97 % 29,33 % 19,41 %
Rerata 10,35 % 19,18 % 27,21 % 18,92 %
41
Pengukuran Kadar lengas kapasitas lapang guna untuk mengetahui ketersediaan air pada tanah, yang untuk mengetahui keadaan air normal. Kondisi normal pada tanah yaitu kondisi unsur makro terisi air dan mikro terisi udara.
Kondisi kadar lengas berpengaruh pada kondisi perakaran memberikan efek pada kesuburan tanaman, karena kadar lengas merupakan kemampuan tanah mengikat partikel air dalam tanah. Dari tabel 2 dapat dilihat rerata kadar lengas pada setiap blok per lapisannya, kondisi kadar lengas pada lapisan 0-10 cm memiliki kadar lengas 10,35% , lapisan 10-20 cm yaitu 17,65 %, dan 20-30 cm yaitu 27,21 %. Kadar lengas terbesar dimiliki oleh lapisan 20-30 cm. Hal ini kemungkinan dipengaruhi dari kondisi tanah yang kering dan kemarau sehingga pada lapisan atas terjadi penguapan yang besar sehingga pada lapisan atas kadar lengas yang dimiliki kecil yaitu 10,35%.
Untuk mengetahui seberapa air yang harus tersedia di tanah dan kondisi air yang tersedia di lapangan maka perlu mengetahui kadar lengas kapasitas lapang, kadar lengas kondisi lapangan, dan kadar lengas kering angin, data dapat dilihat pada tabel 3.
Tabel 3. Kandungan Kadar Lengas Tanah Mediteran
Blok Kl-KL KL
dilapangan Kl-Ka
Air tersedia( teori) Kl-kl – Kl-ka
Air tersedia (kondisi lapangan) KL lapangan – K-Ka
A 34,48% 20,11% 20,05% 14,43% 0,06%
B 38,80% 16,26% 13,80% 25,00% 2,46%
C 31,33% 19,41% 17,00% 14,33% 2,41%
Jika dilihat pada tabel 3 kondisi kadar lengas kondisi di lapangan 18,92% dan pada ketersediaan airnya yaitu 1,97% pada tanah Mediteran Simo, Boyolali ini memiliki kondisi ketersedian air yang sangat kecil karena dari kemampuan mengikat air dan kondisi air pada kapasitas lapang yaitu memiliki kemampuan tersedia yaitu 17,92%. Perbandingan pada kondisi air tersedia dengan kondisi air di lapangan sangat tinggi, maka dapat disimpulkan kondisi tanah mengalami cekaman yang tinggi karena hanya mampu memenuhi kurang dari satu persennya saja. Jika dihubungkan dengan tanaman kondisi tanaman berada pada kondisi kritis karena rerata panjang perakaran hanya mampu mencapai 0-11 cm sedangkan kondisi kadar lengas terbesar pada kedalaman 20-30 cm. Hal ini memberikan efek pada kondisi pertumbuhan dan hasil tanaman kedelai tersebut kurang optimal karena penyerapan hara tergantung pada kondisi perkaran. Namun kedelai tetap masih bertahan hidup dan berbuah dan baik, hal ini diduga adanya peranan dari rhizobakteri dan mikoriza sehingga tanaman kedelai dapat bertahan hidup.
B. Karakterisasi Rhizobium sp, Rhizobakteri dan Mikoriza 1. Rhizobium sp.
Rhizobium sp. berasal dari dua kata yaitu Rhizo yang artinya akar dan bios
43
nodul akar pada satu spesies tanaman legume saja. Bakteri Rhizobium sp. adalah organotrof, aerob, tidak berspora, pleomorf, gram negatif dan berbentuk batang.
a. Karakterisasi Nodul akar kedelai Petek Simo, Boyolali
Nodul akar merupakan organ simbiosis yang mampu melakukan fiksasi N2 dari udara, sehingga nitrogen yang dihasilkan dapat dimanfaatkan oleh tanaman leguminosa. Sumber nodul akar diperoleh dari akar kedelai Petek yang tumbuh di
daerah Simo, Boyolali. Aktivitas Nodulasi dapat diamati berdasarkan: Sebaran nodul, jumlah Nodul, diameter nodul, berat nodul, dan nodul. Berikut sebaran nodul jumlah nodul, diameter nodul, berat nodul dan bentuk nodul tersaji pada tabel 4.
Tabel 4. Nodul Akar Tanaman Kedelai Petek di Simo, Boyolali pada tanah Mediteran
Blok Sebaran Jumlah Nodul
Diameter nodul (cm)
Berat Nodul (gram)
Bentuk Nodul Nodul
Blok A Akar pokok 4, 7 0,06-0,15 0,07 Irregular Nodul
Blok B Akar pokok 3,8 0,03–0,36 0,28 Irregular Nodul
Blok C Akar pokok 6,67 0,09–0,44 0,08 Irregular Rerata Akar pokok 5,06 0,09-0,15 0,14 Irregular
1. Sebaran Nodul
dalam sistem perakaran kedelai, pengamatan sebaran nodul dilakukan dengan mengambil gambar akar yang terdapat di akar perimer maupun di akar sekunder. Gambar sebaran nodul akar kedelai dapat dilihat pada gambar 2 yang menunjukkan nodul akar terdapat di akar primer dan sekunder, nodul akar terlihat paling banyak berada pada akar primer yaitu pada pangkal akar.
Gambar 2. Sebaran Nodul Akar kedelai Petek Simo, Boyolali
2. Jumlah Nodul
45
dan pH dengan hasil pembintilan yang lebih besar pada tanaman kedelai adalah 6,8 pada varietas Detam 1 dan efektifitas pemfiksasian yang tinggi dibandingkan varietas lain.
Selain itu kondisi pola tanaman pada lahan tersebut juga diduga mempengaruhi perkembangan perbintilan karena menurut Panday (1994) dalam Suharno (2014) kondisi tanah yang sebelumnya telah ditanami kedelai akan memiliki populasi Rhizobium sp. yang lebih tinggi yaitu 5-30 bintil/tanaman. Sedangkan tanah yang sebelumnya tidak ditanami kedelai akan memiliki pembintilan 1-10 bintil/tanaman. Kondisi pola tanamn di tanah Meditera Simo, Boyolali yaitu Padi-Padi-Kedelai sehingga tanah tersebut telah memiliki riwayat ditanami kedelai sebelumnya..
3. Diameter Nodul
di tanah Mediteran di Simo, Boyolali yang memiliki pH yang tinggi yaitu 7,6 namun diameter nodul yang dimiliki yaitu 0,009-0,15. Perbedaan ini diduga dipengaruhi kondisi tanah yang memiliki pH yang agak basa yaitu 7,6 dan memiliki kadar lengas yang tinggi dan berada pada cekaman kekekringan karena memiliki ketersediaan air 1,97% dari 17,92%, sehingga nodul terhambat pada perkembangannya.
4. Berat Nodul
47
Mediteran hanya memenuhi 1,97% dari 17,92% juga memengaruhi perkembangan nodul.
b. Karakterisasi Koloni Rhizobium sp
Untuk dapat mengidentifikasi dan mengklasifikasi suatu mikroorganisme maka harus mempelajari karakteristiknya terlebih dahulu. Karakteristik berdasarkan berdasarkan bentuk koloni, diameter koloni, serta warna koloni, dapat dilihat pada tabel 5.
dan warna maka ditemukan 18 isolat dapat dilihat pada tabel yang bersumber dari sampel blok A, B dan C (Lampiran II).
Hasil pengamatan bentuk koloni dari nodul akar kedelai di Simo, Boyolali yaitu berbentuk Circular, Culed dan Irregular, dengan warna dan diameter berbeda-beda. Untuk memastikan isolat pada tabel 5 benar-benar isolat Rhizobium sp. maka dilanjutkan dengan uji sel yaitu berdasarkan bentuk dan sifat gram sehingga hasil cat grap tersaji pada tabel 6.
Tabel 6. Sifat gram dan bentuk sel isolat Rhizobium sp. pada kedelai Petek di tanah Mediteran Simo Boyolali
Nama Sampel
Ulangan 1 Sifat Gram Bentuk sel
Ulangan 2
Sifat Gram Bentuk sel
R1 Negatif Kokus Negatif Kokus
R4 Negatif Kokus Negatif Kokus
R5 Negatif Basil Negatif Basil
R6 Negatif Basil Negatif Basil
R7 Negatif Basil Negatif Basil
R8 Negatif Basil Negatif Basil
R9 Negatif Basil Negatif Basil
R10 Negatif Basil Negatif Basil
R12 Positif Kokus Positif Kokus
R13 Negatif Basil Negatif Basil
R14 Negatif Basil Negatif Basil
R15 Negatif Kokus Negatif Kokus
R17 Negatif Kokus Negatif Kokus
R18 Negatif Kokus Negatif Kokus
Hasil cat gram pada tabel 6 menunjukkan hasil yang berbeda pada setiap isolatnya, negatif kokus, negatif basil dan positif kokus. Berdasarkan Bergey’s manual of Determinative Bacteriology oleh Jhon G. Holt et. al (1994) Sifat sel
49
oleh Pelczar dan Chan (1988) secara umum sel-sel bakteri Rhizobium sp. berbentuk batang, aerobik dan bersifat gram negatif. Jika dibandingkan pada hasil cat gram pada isolat Rhizobium sp. pada tanah Mediteran Simo, Boyolali yang termasuk ke dalam Rhizobium sp. hanya 8 isolat yaitu yang memiliki bentuk sel batang dan bersifat negatif yaitu R5, R6, R7, R8, R9, R10, R13, dan R14.
Selanjutnya pengamatan secara mikroskopis yang mengamati berdasarkan Elevasi koloni, bentuk tepi dan struktur dalam. Hasil pengamatan dapat dilihat pada tabel 7.
Tabel 7. Deskripsi Isolat Rhizobium sp, di Tanah Mediteran Simo, Boyolali Nama
Bakteri Elevasi Bentuk Tepi Struktur dalam
R5 Effuse Entire Transparent
R6 Effuse Entire Coarsely granular
R7 Umbonate Crenate Arborescent
R8 Effuse Entire Translucent
R9 Effuse Lobate Coarsely granular
R10 Effuse Entire Transparent
R13 Conuex Rugose Ramose Filamentous R14 Conuex Papillate Undulate Finely granular
Kedelapan isolat mempunyai kesamaan bentuk koloni (Circular). Elevansi lima dari delapan bakteri tersebut yaitu berbentuk tipis dan rata (Effuse), sedangkan yang lainnya bergelombang (Umbulate), berkert dan berlipat (Regose), dan cembung (Conuex Papilate). Menurut Elkan (1987), bentuk elevasi Rhizobium sp. secara umum berbentuk datar (Plate), Cembung (Conuex), dan Krucut (Pulvnate).
(Translucent), dua berbentuk (Coarsely granula), dan tiga lainnya berbentuk (Arborescent), (Filamentous), dan (Finely granular).
Gambar 3. Delapan Isolat Rhizobium sp. pada kedelai Petek di tanah Mediteran Simo, Boyolali
51
menghasilkan. Hal ini berpengaruh dengan adanya peranan Rhizobium sp. di tanah Mediteran Simo, Boyolali dibuktikan dengan ditemukannya 8 isolat Rhizobium sp. Berdasarkan sejarah tanam di lahan Mediteran, Simo, Boyolali yaitu dengan siklus padi-padi-kedelai hal ini diduga sebagai sumber dari mana Rhizobium sp. berasal.
2. Rhizobakteri Osmotoleran
pada tahapan pengamatan berdasarkan bentuk koloni, diameter, dan warna (Lampiran III).
Tabel 8. Delapan Isolat Rhizobakteri pada cekaman 2 M
No Nama
Bakteri Bentuk Diameter Warna Lendir 1
Rb.1 Circular < 0,1 cm Putih cream
pekat +
2
Rb.2 Circular 0,1 cm Putih cream
pekat +
3 Rb.3 Circular 0,2 cm putih +
4 Rb.4 Circular 0,1 cm putih cream + 5 Rb.5 Circular 0,3 cm putih cream + 6 Rb.6 Irregular 0,3 cm putih cream + 7 Rb.7 Circular 0,1 cm Putih susu + 8 Rb.8 Circular 0,1 cm Putih susu + 9 Rb.9 Circular 0,1 cm Putih susu + 10 Rb.10 Circular 0,1 cm Putih Cream +
11 Rb.11 Circular 0,1 cm Putih +
Bentuk koloni pada isolat Rhizobakteri di tanah Mediteran Simo, Boyolali yaitu berbentuk Circular dan Irregular, sedangkan diameternya memiliki ukuran yang berbeda-beda dapat dilihat pada lampiran III. Untuk warna koloni yaitu Putih kream pekat, Putih kream, Putih dan Putih susu hal ini sesuai dengan pendapat Holt, et. al. (1994) bahwa Rhizobakteri memiliki warna yaitu Putih atau kuning, pada hasil pengamatan Rhizobakteri memiliki warna putih kream pekat, putih kream, putih dan putih susu. Hal ini menunjukan ada beberapa strain Rhizobakteri.
53
isolat yang berbeda. Untuk visualisasi dapat dilihat pada gambar 4 sedangkan deskripsi 8 isolat Rhizobakteri disajikan pada tabel 6.
Gambar 4. Delapan isolat Rhizobakteri tanah Mediteran di Simo, Boyolali
Tabel 9. Deskripsi 8 isolat Rhizobakteri secara morfologis Mikroskopis
No Bakteri Nama Elevasi Bentuk Tepi Struktur dalam
1 Rb1 Effuse Entire Opaque
2 Rb3 Effuse Entire Opaque
3 Rb4 Raised with Concave Bevelfed edge
Csiliate Wavy enteriaced
4 Rb6 Effuse Entire Trnslucent
5 Rb8 Umbonate Undulate Opaque
6 Rb9 Effuse Entire Coaarsely granular
7 Rb10 Effuse Entire Translucent
8 Rb11 Effuse Entire Opaque
Selanjutnya adalah pengamatan berdasarkan bentuk dan sifat gram sel. Karakterisasi sel dilakukan dengan cara pengecatan garm, yang mana organisme yang dapat menahan kompleks pewarna primer ungu kristal iodium sampai pada akhir prosedur (sel-sel tampak biru gelap atau ungu) disebut gram positif sedangkan organisme yang kehilangan kompleks warna ungu kristal pada pembilasan, dan terwarnai dengan safranin sehingga sel nampak merah disebut gram negatif (Hadioetomo dan Ratnasari, 1985).
Dari delapan isolat hasil pengamatan dilakukan karakterisasi sel meliputi bentuk sel dan sifat sel, yang tersaji dalam tabel 9.
Tabel 10. Deskripsi Karakterisasi Sel Isolat Rhizobakteri pada Kedelai Petek di Tanah Mediteran Simo Boyolali
No Nama Sampel Sifat gram Bentuk
1 RB.1 Negatif Kokus
2 RB.3 Negatif Kokus
3 RB.4 Negatif Kokus
4 RB.6 Negatif Kokus
5 RB.8 Negatif Kokus
6 RB.9 Negatif Kokus
7 RB.10 Negatif Kokus
8 RB.11 Negatif Kokus
Tabel 10, menunjukkan bahwa kedelapan isolat memiliki bentuk sel kokus dan bersifat gram negatif dengan ditunjukan warna merah. Menurut Jhon G. Holt et. al.(1994) beberapa genus dari Rhizobakteri memiliki bentuk batang atau basil,
55
dengan pH yang tinggi yaitu dari genus Azotobacter dapat tumbuh dengan pH antara 4,8-8,5 sedangkan Acetobakter pH optimumnya yaitu antara 5,4-6,3.
Jika dibandingkan antara hasil pengamatan isolat di tanah Meditera Simo, Boyolali dan pendapat Jhon, G. Holt et. al. merupakan ciri-ciri dari Rhizobakteri dengan genus Azotobacter karena memiliki kesamaan gram dan bentuk sel dan tumbuh dengan pH optimum yaitu antara 4,8-8,5 yang mana kondisi tanah Mediteran di Simo, Boyolali memiliki pH 7,6.
Dari hasil pengamatan delapan isolat Rhizobakteri memiliki sel yang berbentuk kokus dan memiliki sifat gram negatif namun memiliki diameter, warna, struktur dalam, bentuk tepi dan elevasi yang berbeda-beda.
Hasil Penelitian Agung-Astuti (2012) yaitu isolat Rhizobacteri indigenous lahan pasir vulkanik Merapi memiliki sifat gram negatif, dengan bentuk Baccil dan Coccus, selain itu juga pada hasil penelitian Erma (2013) sifat gram Rhizobateri bersifat negatif dan memiliki bentuk yang kokus dan basil. Hal ini
sesuai dengan pengamatan pada Rhizobakteri yang bersumber dari tanah Mediteran Simo, Boyolali memiliki betuk sel kokus dan bersifat negatif.
Simo, Boyolali selain berada pada cekaman kekeringan, pH dengan konsentrasi agak basa yaitu 7,6, serta kondisi ketersediaan air rendah yaitu 1,97 dari 17,92%, kedelai tetap tumbuh baik, ini di duga karena adanya peranan Rhizobakteri hal ini dibuktikan dengan ditemukannya 8 isolat Rhizobakteri yang tahan pada cekaman 2 M, hal ini dapat dilihat pada tabel berikut:
Tabel 11. Isolat Rhizobakteri di tanah Mediteran Simo, Boyolali Kode
Dari tabel 11, dapat dilihat koloni Rhizobakteri rata-rata berdiameter antara <0,1-0,2 cm, untuk elevasi enam dari delapan berbentuk (Effuse), sedangkan dua lainya berbentuk (Umbonate), dan (Raised withConcave Bevelfed edge) juga sama dari bentuk koloni (Circular), dan bentuk tepi (Entire) namun
dari keenam isolat tersebut berbeda dalam struktur dalam yaitu (Opaque, Wavy enteriaced, Trnslucent, Coaarsely granular). Untuk warna koloni yaitu Putih
57
Menurut Le Redulier et al., (1984) Rhizobakteri merupakan salah satu bakteri yang hidup di daerah perakaran mempunyai kemampuan mensintesis senyawa osmotoleran glisin betanin.
Mekanisme asosiasi antara Rhizobakteri dan tanaman berlangsung di sekitar akar tanaman, yaitu sejumlah eksudat akar dalam berbagai bentuk senyawa karbon organik, akan berfungsi sebagai substrat penyokong pertumbuhan dan aktivitas hidup Rhizobakteri. Sedangkan Rhizobakteri memiliki kemampuan menghasilkan fitohormon tertentu, seperti IAA, GAA dan kemampuan memfiksasi N serta menghasilkan senyawa osmoprotektan sehingga tanaman dapat bertahan pada kondisi cekaman kekeringan
3. Mikoriza
Mikoriza bersimbiosis melalui perakaran tanaman dan secara obligat bergantung pada tanaman hidup untuk perkembangannya. Untuk membuktikan asosiasi mikoriza pada akar tanaman maka dilakukan pengamatan persentase infeksi mikoriza pada akar dan menghitung jumlah spora yang terdapat di sekitar perkaran tanaman. Pengambilan sampel akar untuk mengamati infeksi mikoriza akar yang digunakan akar sekunder.
Tabel 12. Rerata Infeksi dan Jumlah Spora Mikoriza
Blok Rata-rata Infeksi Rata-rata Spora Mikoriza x106
A 21,0 % 20,23 Spora/ml
B 15,0 % 22,26 Spora/ml
C 10,0 % 18,90 Spora/ml
1. Infeksi Mikoriza
Kedelai Petek di Simo Boyolali, menurut tabel 10 ternyata memiliki interaksi dengan mikoriza yang ditandai dengan adanya spora yang terdapat pada tanah yang memiliki rata-rata 15,3 %. Hal tersebut diduga berasal dari tanaman yang inang yang terinfeksi. Berdasarkan penelitian Della (2013) infeksi mikoriza dapat menginfeksi 77,5% pada tanaman kedelai. Menurut Kabirun (1990), Mikoriza mempunyai peran yang sangat penting dalam peningkatan produktifitas tanaman, yaitu meningkatkan penyerapan air dan beberapa hara tanaman, menghasilakan hormon pemacu pertumbuhan tanaman, dapat mengurangi cekaman tanaman oleh air, dan dapat memperbaiki struktur tanah, meningkatkan nodulasi serta penyematan Nitrogen oleh Rhizobium sp pada kedelai. Selain itu hasil penelitian dari Husnul Jannah (2011) menyatakan bahwa, tanaman kedelai pada lahan kering yang diinokulasi mikoriza memberikan respon yang menguntungkan baik pada fase vegetatif maupun pada fase generatif selain itu inokulasi mikoriza juga meningkatkan vigor benih kedelai dan meningkatkan hasil biji serta kadar protein masing-masing 1,7 ton ha.
59
dengan kondisi cekaman, dan dapat tumbuh dengan baik sehingga meningkatkan penyerapan air dan beberapa hara tanaman seperti Cu dan Zn, terutama Phosphat karena mengandung Fosfatase, menghasilakan hormon pemacu pertumbuhan tanaman, bertindak sebagai pengendali hayati patogen tanaman terbawa tanah, dapat mengurangi cekaman tanaman oleh air, kemasaman, salinitas, suhu, dan logam berat dalam tanah, dapat memperbaiki struktur tanah, meningkatkan nodulasi serta penyematan Nitrogen oleh Rhizobium sp. pada kedelai.
Selanjutnya untuk mengatahui seberapa infeksi Mikoriza pada akar kedelai maka Infeksi pada akar kedelai petek yang diamati dapat dilihat pada gambar 5.
Keterangan: 1. Vesikel 2. Hifa lnternal 3. Hifa Eksternal
Gambar 5. Bentuk visual Mikoriza pada kar Kedelai Petek dengan perbesaran 400 kali.
