LAMPIRAN
Lampiran 1
Tabel 1: Hasil Analisis Bakteri Koliform dengan Metode MPN
Sampel Kode sampel Tes perkiraan
Tes
penegasan
MPN
Air Bersih
290/B/AB/02/201 4
Lampiran 2 Flowsheet
Pembuatan Media Lactose Broth
Ditimbang seksama media Lactose Broth sebanyak 52 gr.
Dimasukkan ke dalam beker gelas. Dilarutkan dalam 1 liter aquadest. Dimasukkan magnetic stirrer.
Dipanaskan diatas hot plate sampai larut.
Dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi tabung durham masing-masing 5 ml dalam 5 tabung.
Disterilkan di dalam oven dengan tekanan atm pada suhu 121˚C selama 15 menit.
Setelah dingin di simpan di tempat yang bersih dan kering.
Pembuatan Media Lactose Broth Double D bl
Ditimbang seksama media Lactose Broth sebanyak 13 gr.
Dimasukkan ke dalam beker gelas. Dilarutkan dalam 1 liter aquadest. Dimasukkan magnetic stirrer.
Dipanaskan diatas hot plate sampai larut.
Dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi tabung durham masing-masing 10 ml dalam 10 tabung.
Disterilkan di dalam oven dengan tekanan atm pada suhu 121˚C selama 15 menit.
Setelah dingin di simpan di tempat yang bersih dan kering.
Pembuatan media lactose broth single
Ditimbang seksama media Brilliant Green Lactose Broth sebanyak 40 gr.
Dimasukkan ke dalam beker gelas. Dilarutkan dalam 1 liter aquadest. Dimasukkan magnetic stirrer.
Dipanaskan diatas hot plate sampai larut.
Dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi tabung durham masing-masing 10 ml. Disterilkan di dalam oven dengan tekanan atm pada suhu 121˚C selama 15 menit.
Setelah dingin di simpan di tempat yang bersih dan kering.
Media Brilliant Green Lactose Broth
Pada tes perkiraan digunakan media Lactose Broth. Tes perkiraan dilakukan dengan 2 cara,
yaitu single dan double. Single :
13 gram Lactose Broth dalam 1000 ml aquadest.
Caranya : Siapkan 10 buah tabung reaksi yang telah diisi dengan tabung durham dengan posisi terbalik. 10 tabung diisi dengan masing-masing 10 ml media.
Double :
52 gram Lactose Broth dalam 1000 ml aquadest.
Caranya : Siapkan 5 buah tabung reaksi yang telah diisi dengan tabung durham dengan posisi terbalik. 5 tabung tersebut diisi dengan 10 ml media.
Uji Perkiraan
Masukkan sampel yang sudah dihomogenkan secara aseptik ke dalam masing-masing tabung media LB.
Tabung-tabung dalam rak digoyang, supaya sampel air dengan media bercampur rata.
Inkubasikan pada inkubator pada suhu 35°C selama 24 jam. Reaksi dinyatakan positif bila terbentuk asam dan gas dalam tabung fermentasi.
Bila tidak ada reaksi asam atau gas, inkubasikan kembali sampai 48 jam.
Bila pada tabung fermentasi tidak terbentuk asam dan gas dalam waktu 48 jam, maka tes perkiraan dinyatakan negatif. Bila pada tabung fermentasi terbentuk asam dan gas dalam waktu 48 jam, maka tes perkiraan dinyatakan positif.
kemudian tabung-tabung yang positif dilanjutkan ke tes penegasan.
Sampel
Setiap tabung yang positif pada tes perkiraan dikocok. kemudian dipindahkan dengan ose/lop ke dalam media Brilliant Green Lactose Broth (BGLB).
Inkubasikan pada inkubator pada suhu 35°C selama 24 jam. Reaksi dinyatakan positif bila terbentuk gas dalam tabung fermentasi.
Bila tidak ada reaksi gas, inkubasikan kembali sampai 48 jam.
Bila pada tabung fermentasi tidak terbentuk gas dalam waktu 48 jam, maka tes penegasan dinyatakan negatif.
Bila pada tabung fermentasi terbentuk gas dalam waktu 48 jam, maka tes penegasan dinyatakan positif.
Hitung MPN total koliform dengan menggunakan tabel MPN dari jumlah tabung BGLB yang positif, dibaca pada tabel MPN. Uji Penegasan
Tabung yang dinyatakan positif pada uji perkiraan, diinokulasikan kedalam tabung yang berisi media Brilla. Masing-masing diisi satu sampai dua ose yang pengerjaanya dilakukan secara aseptis.
Diinkubasi pada suhu 35˚C selama 2x24 jam. Dilakukan pengamatan dengan melihat tabung yang menunjukkan adanya terbentuk gas dalam tabung durham yang menyatakan positif.
Pembacaan hasil dilakukan dengan menghitung jumlah tabung yang positif.
Angka yang diperoleh dicocokkan dengan tabel MPN.
Total Koliform
Lampiran 3
Tabel 2. Perkiraan Terdekat Jumlah (MPN) Koliform Untuk Kombinasi Porsi: 5 x 10 ml; 5 x 1 ml; 5 x 0,1 ml dengan 95% batas kepercayaan Jumlah tabung yang positif MPN /
100 ml
95% batas kepercayaan 5 tabung
Lebih rendah Lebih tinggi
5 3 2 140 52 400
5 3 3 170 70 400
5 3 4 210 70 400
5 4 0 130 36 400
5 4 1 170 58 400
5 4 2 220 70 440
5 4 3 280 100 710
5 4 4 350 100 710
5 4 5 430 150 1100
5 5 0 240 70 710
5 5 1 350 100 1100 5 5 2 540 150 1700 5 5 3 920 220 2600
5 5 4 1600 400 4600
Lampiran 4
Tabel 3. BAKU MUTU MIKROBIOLOGI AIR NOMOR : 492/MENKES/PER/IV/2010
TANGGAL : 19 APRIL 2010 NO JENIS
Lampiran 5
Tabel 4.Hasil Pengamatan Bakteri Koliform Jenis
Sampel
Nomor Sampel Hasil Test Perkiraan
Koliform MPN Air Minum 289/B/AM/02/2014 1-0-0 1-0-0 2,0
Air Bersih 290/B/AB/02/2014 5-1-0 5-1-0 33 Air Badan
Air
291/B/ABA/02/2014 5-1-1 5-1-1 46 Air
Limbah
292/B/AL/02/2014 4-3-1 4-3-1 33 Air Minum 293/B/AM/02/2014 5-5-5 5-5-5 >1600
Air Limbah
294/B/AL/02/2014 5-5-4 5-5-4 1600 Air
Limbah
295/B/AL/02/2014 5-5-3 5-5-3 920 Air
Limbah
296/B/AL/02/2014 5-4-5 5-4-5 430 Air
Limbah
297/B/AL/02/2014 5-5-5 5-5-5 >1600 Air Bersih 298/B/AB/02/2014 3-0-0 3-0-0 7,8 Air Minum 299/B/AM/02/2014 5-0-1 5-0-1 31 Air Minum 300/B/AM/02/2014 2-1-0 2-1-0 6,8 Air Minum 301/B/AM/02/2014 0-0-0 0-0-0 <1,8
Air Limbah
Air Limbah
314/B/AL/02/2014 5-5-5 5-5-5 >1600 Air
Limbah
315/B/AL/02/2014 5-4-1 5-3-1 110 Air Bersih 316/B/AB/02/2014 5-5-5 5-5-5 >1600 Air Badan
Air
324/B/ABA/02/2014 5-5-5 5-5-5 >1600 Air Badan
Air
323/B/ABA/02/2014 5-5-5 5-5-5 >1600
Lampiran 6
Gambar Alat dan Bahan
Gambar 1. Alat Timbangan Analitik Gambar 2. Hot Plate
