x DAFTAR ISI
Halam an
HALAM AN JUDUL...i
HALAM AN PEN GESAH AN ...iii
HALAM AN PERNY ATAA N ... iv
PRAKATA...v
HALAM AN PERSEM BAHA N... ...ix
DAFTAR ISI...x
DAFTAR TABEL...xii
DAFTAR GAM BAR ...xiii
DAFTAR LAM PIRAN ...xv
DAFTAR SINGKAT AN ...xvi
INTISARI...xvii
ABSTRACT...xviii
I PENDAHULUA N ... 1
A. Latar Belakang ... 1
1. Perum usan M asalah ... 9
2. Keaslian Penelitian ... 10 3. M anfaaat Penelitian ... 13 B. Tujuan Penelitian ... 14 1. Tujuan Um um ... 14 2. Tujuan Khusus... 14 II TINJAUAN PUSTAK A ... 16 A. Telaah Pustaka ... 16
1. Korosi pada Kom ponen Alat Cekat Ortodonti ... 16
1.1. Peran Saliva terhadap Terjadinya Korosi ... 19
2. Pengaruh Ion Nikel yang Terle pas dari Ala t Ortodonti Cekat terhadap Jaringan di Rongga M ulut ... 21
2.1. Sitotoksitas...25
2.2. Pengaruh Ion Nike l terhadap Fibroblas G ingiva ... ...26
2.2.1 Kerusakan DNA ... 28
2.2.2 Apoptosis Sel ... 30
3. Pengaruh Pem akaian Alat Ortodonti terhadap Peningka tan Pertum buha n Bakteri dan Fungi di Rongga M ulut ... 31
3.1. Streptococcus m utans ...34
3.2. Candida albicans ...35
4. Kitosan ... 37
4.1. Sifat Adsorbsi Kito san ...38
4.2. Interaksi Kitosa n dengan Ion logam ... 40
4.3. Kitosan sebagai A ntibakteri da n A ntifungi ...41
4.4. Nanokitosa n ... 43
5. Hidrogel Gelatin ... 45
xi
C. Kerangka Teori ... 53
D. Hipote sis ... 54
III M ETODE PENELITIAN...56
A. Jenis Penelitian ... 56
B. Identifikasi Variabel Penelitian ... 56
C. Definisi Operasiona l Variabel ... 57
D. Bahan dan Alat Penelitian ... 61
E. Jalannya Penelitian ... 64
1. Pem bagian Kelom pok Penelitian ... 64
2. Pem buatan Larutan Nikel pada Saliva Tiruan...64
3. Prosedur Pem buatan Nanokitosan ... 65
4. Preparasi Pem buatan Hidrogel Gelatin ... 65
5. Karakterisasi M em bran Hidroge l Nanokitosan... ...66
6. Penentuan Daya Serap M em bran Hidrogel Nanokitosan dengan Variasi Berat Nanokitosan...66
7. Penentuan Daya Serap M em bran Hidrogel Nanokitosan dengan Variasi W aktu Perendam an ... 67
8. Pengam bilan Sam pel Jaringan Gingiva ... 67
9. Persiapan Kultur Prim er Sel Fibroblas G ingiva M anusia ... 67
10. Pem buatan Sub kultur ... 68
11. Pem buatan Sam pel untuk Uji Sitotoksisitas: ... 69
12. Pem buatan Sam pel untuk Uji Proliferasi S el ... 70
13. Uji Apoptosis... 71
14. Pengujian Daya Ham bat Pertum buha n S. mutans... 72
15. Pengujian Daya Ham bat Pertum buha n C. albicans ... 73
16. Bagan Penelitian … … … …… … …… … …… … …… … … ..… … ….76
F. Analisis Hasil ... 81
IV HASIL DAN PEM BAHASAN… … … … .… … …..…...…… ..… … …… … … .. 83
A. Hasil Penelitian … … .… … … …… … …..…… … ….… ...… … …… … …… … ...83
B. Pembahasan… …… … …… … …… … … …… … …… … …...… … .… … …… … 118
V. KESIM PULAN DAN SARAN ...142
A. Kesim pulan...142 B.Saran...143 RINGKASAN...145 SUM M ARY...153 DAFTAR PUSTAKA… ..… ...… …… … …… … ..… …… … …… … ...…… … …...160 LAM PIRAN...…… … ...…...… …… … ..… …… … …… ...… …… ...171
xii DAFTAR TABEL
Halam an
Tabel 4.1 Rerata penyerapan ion nikel ole h m em bran hidrogel na nokitosan ... 86
Tabel 4.2 Hasil uji anova dua jalur penyerapan ion nike l...89
Tabel 4.3 Ringkasan uji LSD pe nyerapan ion nikel...89
Tabel 4.4 Rerata dan sim pangan baku viabilitas sel fibroblas... 91
Tabel 4.5 Hasil uji anova dua jalur viabilita s sel fibroblas...93
Tabel 4.6 Ringkasan uji LSD viabilitas se l fibrobla s...94
Tabel 4.7 Rerata nilai persentase viabilita s/ proliferasi se l fibroblas. … … … … 96
Tabel 4.8 Hasil uji anova dua jalur nilai proliferasi sel fibroblas.... ...101
Tabel 4.9 Ringkasan uji LSD proliferasi sel fibroblas...102
Tabel 4.10 Rerata apoptosis sel fibrobla s terhadap m em bran hidrogel nanokitosan-nikel...106
Tabel 4.11 Hasil analisis Friedm an untuk ke lom pok m em bran hidroge l nanokitosan dan kelom pok wa ktu perendam an… … .… …..…… … ..107
Tabel 4.12 Ringkasan uji W ilcox on apoptosis se l fibroblas… … … ..…… ..108
Tabel 4.13 Rerata zona ham bat pertum buhan S. mutans... 109
Tabel 4.14 Analisis statistik dengan Anova dua jalur zona ham bat S. mutans... 111
Tabel 4.15 Ringkasa n uji LS D zona ham bat S. Mutans...112
Tabel 4.16 Rerata zona ham bat pertum buhan C. albicans ... ...114
Tabel 4.17 Analisis statistik dengan A nova dua jalur zona ham bat C. albicans...116
xiii DAFTAR G AM BAR
Halam an
Gam bar 2.1 Struktur kitosan ... ...38
Gam bar 2.2 Bagan kerangka teori...53
Gam bar 3.1 Pengukuran diam eter zona ham bat ...… .75
Gam bar 3.2 Bagan penelitia n penyerapan ion nikel ... ...76
Gam bar 3.3 Bagan penelitia n viabilitas sel fibroblas... ...77
Gam bar 3.4 Bagan penelitian proliferasi sel fibroblas...78
Gam bar 3.5 Bagan penelitian apoptosis se l fibroblas...79
Gam bar 3.6 Bagan penelitian zona ham bat per tum buhan S. mutans...80
Gam bar 3.7 Bagan penelitian zona ham bat pertum buhan C. albicans...80
Gam bar 4.1 Karakteristik fisik m em bran hidrogel nanokitosan sebelum dan sesudah perendam an...83
Gam bar 4.2 Foto TEM nanokitosan perbesaran 2 0.000x ...85
Gam bar 4.3 Foto TEM nanokitosan perbe saran 40.000x...85
Gam bar 4.4 Gam baran proliferasi sel fibroblas sete lah diberi paparan m em bran Hg NK 0,6g - Ni, (b) m em bran Hg NK 0,8g – Ni, m em bran Hg NK 1g – Ni, jam ke-24 dilihat m enggunakan m ikroskop cahaya perbesaran 100x. ... ... 99
Gam bar 4.5 Gam baran proliferasi se l fibroblas sete lah diberi paparan m em bran Hg NK 0,6g - Ni, (b) m em bran Hg NK 0,8g – Ni, m em bran Hg NK 1g – Ni, jam ke-48 dilihat m enggunakan m ikroskop cahaya perbesaran 100x... 99
Gam bar 4.6 Gam baran proliferasi sel fibroblas sete lah diberi paparan m em bran Hg NK 0,6g - Ni, (b) m em bran Hg NK 0,8g – Ni, m em bran Hg NK 1g – Ni, jam ke-72 dilihat m enggunakan m ikroskop cahaya perbesaran 100x… … … ... 99
Gam bar 4.7 Gam baran sel setelah pewarnaan double staining pada paparan m em bran Hg NK 0,6g – Ni dengan lam a peredam an (a) 15, (b) 30 dan (c) 45 menit ... 105
xiv Gam bar 4.8 Gam baran sel setelah pewarnaan double staining pada paparan
m em bran Hg NK 0,8g – Ni dengan lam a peredam an
(a) 15, (b) 30 dan (c) 45 menit ... 105 Gam bar 4.9 Gam baran sel setelah pewarnaan double staining pada paparan
m em bran Hg NK 1g – Ni dengan lam a peredam an
(a) 15, (b) 30 dan (c) 45 menit...105 Gam bar 4.10 Gam baran sel setelah pewarnaan double staining pada paparan
kontrol m em bran NK 0,8g – Ni dengan lam a peredam an (a) 15, (b) 30 dan (c) 45 m enit ... 105 .
Gam bar 4.11 Zona ham bat S. mutans da lam sum uran setelah
diberi perla kuan (a) m em bran Hg NK 0,6g; (b) m em bran
Hg NK 0,8g; (c) m em bran Hg NK 1g... 109 Gam bar 4.12 Zona ham bat C. Albicans dalam sum uran sete lah
diberi perla kuan (a) m em bran Hg NK 0,6g; (b) m em bran
Hg NK 0,8g; (c) m em bran Hg NK 1g… … … …… … ..… …… .. ... 113 Gam bar 4.13 Gam bar ikatan ion nike l dengan gugus am ina dan hidroksil
nanokitosan ...,...122 Gam bar 4.14 Pengaruh logam berat pada kerja enzim ...126
xv DAFTAR LAM P IRAN
Halam an Lam piran 1 Hasil uji statistik untuk perbedaan pe ngaruh varia si
berat kitosan dan waktu perendam an terhadap penyerapan
ion nikel… … … …… … …… … …… … … …… … ...…… .171 Lam piran 2 Hasil uji statistik untuk perbedaan pe ngaruh varia si
berat kitosan dan waktu perendam an terhada p viabilitas
sel fibroblas… … … …… … …… … … …… … …… … … ...175 Lam piran 3 Hasil uji statistik untuk perbedaan pe ngaruh varia si berat
kitosan dan waktu perendam an terhada p proliferasi sel
fibroblas… … … …… … …… … …… … …… … …… … … 179 .
Lam piran 4 Hasil uji statistik untuk perbedaan pe ngaruh varia si berat kitosan dan waktu perendam an terhada p apoptosis
sel fibroblas… … … …… … …… … … …… … .… … .… … .182 Lam piran 5 Hasil uji statistik untuk perbedaan pe ngaruh varia si
berat kitosan dan waktu perendam an terhada p pertum buhan
bakteri S. Mutans… … … …… … …… … …...184 Lam piran 6 Hasil uji statistik untuk perbedaan pe ngaruh varia si
berat kitosan dan waktu perendam an terhada p pertum buhan
C. Albican… … … …… … …… … …… … … …… … ...187 Lam piran 7 Surat-surat perijinan dan ke terangan sele sai penelitia n… ..… … ..190 Lam piran 8 Data hasil penelitian penyerapan ion nikel... ...196 Lam piran 9 Data hasil penelitian sitotoksisitas se l fibroblas… … … .… … ..… 200 Lam piran 10 Data hasil pene litian proliferasi sel fibroblas… ...… … …..…...201 Lam piran 11 Data hasil pene litian zona ham bat C. albic ans … ...204 Lam piran 12 Data hasil pene litian zona ham bat S. mutans… ...205