JURNAL PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI LANJUT JURNAL PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI LANJUT
UJI KATALASE DAN FERMENTASI KARBOHIDRAT UJI KATALASE DAN FERMENTASI KARBOHIDRAT
Oleh : Oleh : Nama
Nama : Afifah Thahirah: Afifah Thahirah NIM
NIM : 1147020001: 1147020001 K
Keelloommppookk : : 66 D
Doosseenn : : OOppiik k TTaauuffiiqquurrrroohhmmaann !!""!!ii A
Assiiss##eenn :: Devra Ardhitya TrisandyDevra Ardhitya Trisandy T
Taann$$$$aal l %%rraakk##iikkuumm : 1: 14 4 AApprriil l 22001166 T
Taan$n$$al $al MaMasusuk &k &apapororanan : 2: 21 1 ApApriril 2l 2010166
JURUSAN BIOLOGI JURUSAN BIOLOGI
FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI
UNIVERSITA
UNIVERSITAS ISLAM S ISLAM NEGERINEGERI SUNAN GUNUNG DJATI SUNAN GUNUNG DJATI
BANDUNG BANDUNG
2016 2016
I %'NDA()&)AN 1 Tu*uan
• )n#uk men$u*i kemampuan mikro+a pen$hasil en,im ka#alase -alam men-e$ra-asi
hi-ro$en peroksi-a"
• Mempela*ari kemampuan mikro+a un#uk men-e$ra-asi -an memfermen#asi
kar+ohi-ra# .an$ -iser#ai pro-uksi asam a#au asam -an $as" 2 Dasar Teori
/ak#eri a-alah or$anisme mikro -an #i-ak -apa# -iliha# -en$an ma#a#elan*an$" Ke+era-aan +ak#eri umumn.a +ersifa# meru$ikan or$anisme lainn.a .an$-ikenal -en$an is#ilah pa#o$en seper#i: 'sherihia coli, Vibrio sp, Shalmonella sp" -an se+a$ain.a" /ak#eri ini +an.ak -i#emukan hampir -iseluruh me-ia#empa#seper#i: #anah u-ara air -i #u+uh makhluk hi-up -an se+a$ain.a A$ar3al 2005"
)*i ka#alase -i$unakan un#uk men$e#ahui ak#ii#as ka#alase pa-a +ak#eri .an$ -iu*i" Ke+an.akan +ak#eri mempro-uksi en,im ka#alase .an$ -apa# memeah (2O2 men*a-i (2O
-an O2" 'n,im ka#alase -i-u$a pen#in$ un#uk per#um+uhan aero+ik karena (2O2 .an$
-i+en#uk -en$an per#olon$an +er+a$ai en,im pernafasan +ersifa# raun #erha-ap sel mikro+a" /e+erapa +ak#eri .an$ #ermasuk ka#alase ne$a#if a-alah !#rep#oous &euonos#o &a#o+aillus -an los#ri-ium As#a3an 2005"
Or$anisme .an$ #i-ak mempro-uksi ka#alase -ilin-un$i oleh penanaman -en$an *arin$an he3an a#au #um+uhan a#au or$anisme lain .an$ mempun.ai kemampuan
mempro-uksi en,im" Ka#alase -ipro-uksi oleh +e+erapa +ak#eri" /e+erapa +ak#eri -ian#aran.a mempro-uksi ka#alase le+ih +an.ak -aripa-a .an$ lain" Ini -i#un*ukkan -en$an *umlah .an$ +an.ak pa-a +ak#eri aero+" !e-an$kan en,im #i-ak -ipro-uksi oleh +ak#eri
anaero+ o+li$a# karena mereka #i-ak memerlukan en,im #i-ak -ipro-uksi oleh +ak#eri anaero+ o+li$a# karena mereka #i-ak memerlukan en,im #erse+u# Karmana 20085"
/ak#eri ka#alase posi#if +isa men$hasilkan $elem+un$9$elem+un$ oksi$en karena a-an.a pemeahan (2O2 hi-ro$en peroksi-a5 oleh en,im ka#alase .an$ -ihasilkan oleh
+ak#eri i#u sen-iri" Komponen (2O2 ini merupakan salah sa#u hasil respirasi aero+ik +ak#eri
-imana hasil respirasi #erse+u# *us#ru -apa# men$ham+a# per#um+uhan +ak#eri karena +ersifa# #oksik +a$i +ak#eri i#u sen-iri" Oleh karena i#u komponen ini harus -ipeah a$ar
#i-ak +ersifa# #oksik la$i" /ak#eri ka#alase ne$a#if #i-ak men$hasilkan $elem+un$9 $elem+un$" (al ini +erar#i (2O2 .an$ -i+erikan #i-ak -ipeah oleh +ak#eri ka#alase
ne$a#if misaln.a L. casei sehin$$a #i-ak men$hasilkan oksi$en" /ak#eri ka#alase ne$a#if #i-ak memiliki en,im ka#alase .an$ men$uraikan (2O2 (as#u#ik 20025"
Enzim merupakan katalisator sejati, dimana molekul ini meningkatkan dengan nyata kecepatan reaksi kimia spesifk yang tanpa enzim akan berlangsung sangat lambat. Enzim tidak dapat mengubah titik keseimbangan reaksi yang dikatalisnya, enzim juga tidak akan habis dipakai atau diubah secara permanen oleh reaksi-reaksi ini. Enzim merupakan biokatalis yang berungsi untuk membantu proses metabolisme. Enzim memiliki kemampuan untuk mengkatalisis suatu reaksi. !uatu enzim adalah suatu katalis biologis. "ampir tiap rekasi biokimia dikatalis oleh enzim#$elczar, %&&'(
Enzim merupakan katalis yang lebih efsien daripada kebanyakan katalis laboratorium atau industri. Enzim juga memungkinkan suatu selektivitas pereaksi-pereaksi dan suatu pengendalian laju reaksi yang tidak dimungkinkan oleh kelas katalis lain. )espesifkan enzim disebabkan oleh bentuknya yang unik dan oleh gugus-gugus polar #atau nonpolar( yang terdapat dalam struktur enzim tersebut.*eberapa enzim bekerja bersama suatu koaktor nonprotein, yang dapat berupa senya+a organik maupun anorganik #ehninger, /(. "idrolisis 0elatin terdapat
Enzim-enzim yang menguraikan golongan potein disebut
protenase1protease, kedua nama ini dianggap sinonim. 2ontoh pada hidrolisis gelatin dimana protein diperoleh dari hidrolisis kalogen, yaitu zat pada jaringan penghubung dan tendon dari he+an. 0elatin akan terurai oleh mikrobia yang mensintesis enzim proteolisis. arutan gelatin bersiat cair pada suhu ruang atau suhu kamar dan padat apabila berada di dalam rerigerator. Dan apabila gelatin sudah dihidrolisis oleh mikroba, maka akan tetap bersiat cair #Taylor, 3%(.
Me#a+olisme merupakan reaksi9reaksi kimia .an$ #er*a-i pa-a makhluk hi-up" %roses me#a+olisme -i+e-akan men*a-i -ua *enis .ai#u ana+olisme -an ka#a+olisme" Ana+olisme Biosintesis5 .ai#u reaksi +iokimia .an$ meraki# molekul9molekul se-erhana men*a-i molekul9 molekul .an$ le+ih kompleks" Misaln.a p em+en#ukkan pro#ein -ari asam
amino" !eara umum proses ana+olik mem+u#uhkan ener$i" !e-an$kan ka#a+olisme .ai#u reaksi +iokimia .an$ memeah a#au men$uraikan molekul9molekul kompleks men*a-i molekul9molekul .an$ le+ih se-erhana" %roses ka#a+olik melepaskan ener$i .an$ -i+u#uhkan oleh sel alu.o 20045"
/ak#eri memiliki ,a#9,a# #er#en#u +aik un#uk men$am+il ,a#;,a# makanan maupun un#uk mem+on$karn.a" <a#;,a# i#u seara umum -ise+u# sekre# .ai#u hasil sekresi +ahasa la#in secernere=memisahkan5 en,im9en,im #eru#ama -ari $olon$an hi-rolase merupakan sekre# .an$ +an.ak -ihasilkan oleh +ak#eri" !isa -ari ,a# makanan .an$ -i+on$kar .an$ kemu-ian -ikeluarkan oleh +ak#eri -ise+u# hasil ekskresi a#au ekskret " Ekskret i#u -i+uan$ karena #i-ak la$i +er$una +a$i +ak#eri +ahkan ekskret -apa# men$$an$$u kehi-upann.a *ika -i+iarkan +er#im+un9#im+un D3i-*osepu#ro 200>5"
4ermentasi merupakan salah satu aktivitas biokimia yang dilakukan oleh mikroba. 4ermentasi adalah proses pengubahan senya+a makromolekul organik menjadi senya+a yang lebih sederhana oleh aktivitas mikrobia pada kondisi anaerob. 4ermentasi dapat menghasilkan berbagai senya+a akhir, contohnya ermentasi karbohidrat yang dapat menghasilkan berbagai senya+a asam seperti asam laktat dan propionet, ester-ester, keton dan gas #$elczar, %&&'(.
5enis karbohidrat yang digunakan pada uji ermentasi karbohidrat antara lain , sukrosa, laktosa, maltosa dan manitol. 0lukosa dapat langsung masuk dalam jalur ermentasi tahap pertama sedangkan sukrosa, laktosa, manitol dan maltosa akan dihidrolisis terlebih dahulu menjadi monosakarida penyusunnya. aktosa dihidrolisis menjadi galaktosa dan glukosa. !ukrosa dihidrolisis menjadi glukosa dan ruktosa. 6anitol diubah menjadi manosa atau galaktosa. !edangkan maltosa akan dihidrolisis menjadi dua molekul glukosa. 6onosakarida jenis manosa dan galaktosa terlebih dahulu akan diubah menjadi glukosa melalui reaksi epimerisasi . !edangkan ruktosa akan diubah terlebih dahulu menjadi ruktosa osat dan kemudian ruktosa 7-osat diubah menjadi glukosa 7- 7-osat. 0lukosa 7-7-osat dan glukosa hasil epimerisasi galaktosa dan manosa akan masuk dalam tahap a+al
proses ermentasi untuk menghasilkan asam piruvat, asam asetat dan 28% dan kemudian pada tahap kedua ermentasi asam piruvat dan
asam asetat direduksi kembali oleh atom hidrogen yang dilepaskan dalam tahap pertama, membentuk asam laktat dan etanol #9utter, %&%(.
6enurut 4ardiaz, #%&&%(, Degradasi ermentasi dalam kondisi anaerob dilakukan dalam kaldu ermentasi yang mengandung tabung durham, sebuah botol batin terbalik untuk mendeteksi produksi gas sebagai ilustrated. media ermentasi karbohidrat yang khas mengandung:
• ;utrisi bahan kaldu untuk mendukung pertumbuhan semua
organisme.
• )arbohidrat tertentu yang berungsi sebagai substrat untuk
menentukan kemampuan ermentasi organisme.
• <ndikator ph merah enol, yang ber+arna merah pada ph netral #3(
dan perubahan kuning pada ph sedikit asam dari 7,' menunjukkan bah+a jumlah sedikit asam akan menyebabkan perubahan +arna.
IIM'TOD' K'?@A
Alat dan *ahan
Alat 5umlah *ahan 5umlah
$embakar bunsen
unit )ultur e-coli%=-=' jam !ecukupnya
up inokulasi buah )ultur S. aureusberumur %=-=' jam
!ecukupnya
Tabung reaksi % buah "idrogen $eroksida >? !ecukupnya
9ak tabung unit 6edia 6iring T!A buah
Termometer buah 6edia kaldu laktosa merah
enol
% buah
$ipet tetes buah 6edia kaldu laktosa merah Dekstrosa
% buah
sukrosa <nkubator buah
% 2ara kerja
a. Uji Katalase
• Digoreskan #streak( dengan teknik aseptik dan sisakan satu tabung
untuk kontrol
• Diinkubasikan pada kultur pada suhu >3 &2 selama %=-=' jam
b. Fermentasi Karbohidrat
• Diinokulasikan pada media yang telah ditentukan dengan teknik
aseptik
• Diperhatikan untuk tidak mengocok tabung ermentasi karena akan
memaksa udara masuk kedalam tabung durham. Tabung terakhir digunakan sebagai kontrol
• Diinkubasisemua tabung pada suhu >3&2 selama %= jam
DAFTAR PUSTAKA
A$ar3al A" up#a !" !harma ?"K" 200" ?ole of OBi-a#ie !#ress in Cemale ?epro-u#ion" Journal Reproductive Biology and Endocrinology" 14>5 :>928"
As#a3an M Tu#ik An,s /(" 200" %emanfaa#an rumpu# lau# se+a$ai sum+er sera# pan$an un#uk menurunkan koles#erol -arah #ikus" J Hayati" 1215:2>;7"
D3i-*osepu#ro D" 200>5" asar!asar "ikrobiologi" @akar#a: @am+a#an" *akteri pada media
"asil
6ikroba @ji
Car-ia, !rikan-i" 20025" "ikrobiologi #angan $" @akar#a: rame-ia %us#aka"
(as#u#ik !ri u#ami 2002. #etun%uk #raktikum "ikro" Malan$ :)MM press
Karmana Oman" 2008" Biologi" @akar#a : %T rafin-o Me-ia %ra#ama
$elczar. %&&'. Dasar-dasar Mikrobiologi. 6alang :Djambatan.
9utter, 5. 6. %&%. A !tudy 8 The 2arbohydrate 4ermentation 9eactions 8 2lostridium 8edematiens .Med. Microbiol.> #/( : %'>-%'.
Taylor, elton <. and David Achanzar . 3% .2atalase Test as an Aid to the <dentifcation o Enterobacteriaceae. Appl Microbiol. %=#(: /'B7. alu.o &" 20045" "ikrobiologi &mum" Malan$: )niersi#as Muhama-i.ah"
