SCANNING ELECTRON MICROSCOPY DARI Clinostomum
complanatum (DIGENEA: CLINOSTOMIDAE) PADA IKAN BETOK
(Anabas testudineus) DI YOGYAKARTA, INDONESIA
M or i n a Ri au w at y* ), Ku r n i asi h* * ), Jok o Pr ast ow o* * ), d an Wi n d ar t i* )
* ) Fakult as Perikanan dan Ilm u Kelaut an, Universit as Riau
Kam pus Bina Widya km 12,5 Sim pang Baru, Pekanbaru 28293, Telp.: (0761 63275) E- m ail: [email protected]
* * ) Fakult as Kedokt eran Hewan, Universit as Gadjah Mada
Jl. Fauna No.2, Karangm alang, Yogyakart a
(Naskah diterima: 23 Juni 2011; Disetujui publikasi: 29 November 2011)
ABST RAK
Pen el i t i an i n i b er t u j u an u n t u k m en g et ah u i t o p o g r af i p er m u k aan Clinostomum complanatum (Digenea: Clinostom idae) yang m enginfeksi ikan air tawar di Yogyakarta. Ikan bet ok (Anabas testudineus) diperoleh dari Kali Progo, Yogyakarta. Metaserkaria
Clinostomum complanatum yan g d i t em u k an d i i n san g , d i k el u ar k an d en g an m enggunak an j ar um dan diawet k an dalam et anol absolut . Pengam at an t opogr af i perm uk aan t egum ent dengan Scanning Electron Microscopy (SEM). Dat a m orf ologi d i anal i si s secar a d esk r i p t i f . Top og r af i t eg um ent d ar i m et aser k ar i a Clinostomum complanatum pada ikan bet okm enunjukkan adanya perbedaan struktur. Oral sucker
terletak di ujung term inal, berbentuk elips dengan perm ukaan halus. Ventral sucker
t erlet ak dekat dengan oral sucker, berada di ant erior dan m em iliki papila sensoris, tetapi tidak m em iliki spina. Perm ukaan tubuh cekung dan m em iliki tonjolan yang tidak beraturan. Lubang ekskretori terletak di ujung posterior tubuh cacing.
KATA KUNCI: Cl i n ost om u m com p l an at u m , An ab as t est u d i n eu s, m or f ol og i , SEM , Y o g y a k a r t a
ABST RACT : Scan n i n g el ect r on m i cr oscop y of Clinostomum complanatum ( D i g en ea : Cl i n ost om i d a e) f r om i n f ect ed cl i m b i n g g ou r a m y (Anabas testudineus) i n Yo g y a k a r t a , I n d o n e si a . By : M o r i n a Ri auw at y, Kur ni asi h, Jok o Pr ast ow o, and Wi nd ar t i
The aim of the study was to determine the topography of Cl i n o st o m u m complanatum (Digenea: Clinostomidae) infecting freshwater fishes in Yogyakarta. Climbing gouramy infected by Clinostomum complanatum were caught from Progo River of Yogyakarta. Excysted Clinost om um com planat um found in gills were aseptically taken using needle, preserved in absolute ethanol. Morphological examination was done with Scanning Electron M icroscopy (SEM). Morphological data obtained was analyzed descriptively. Topography of the tegument of Clinost om um com p lanat um metacercariae collected from Climbing gouramy (Anabas t er st udineus) showed different structure. Oral sucker located at the terminal end, ellips, and smooth. The ventral sucker was close to oral sucker, anteriorly, had round sensory papillae without spinae. The body surface was concave, had distributed irregular protrusion. Excretory pore was at the posterior of the worm.
PENDAHULUAN
Clinost om iasis adalah salah sat u penyakit pada ik an air t awar yang disebabk an oleh trematoda digenea Clinostomum complanatum
dan dikenal dengan ‘yellow grubs’, dit andai d en g an ad an y a t o n j o l an y an g b er i s i m et aser k ar i a b er war n a k u n i n g k ep u t i h an berbent uk elips at au nodul yang berdiam et er 2 m m (Eiras et al., 1999). Parasit ini bersif at Tiewchaloern et al. (1999) m enem ukan kasus Clinost om iasis pada m at a m anusia. Inf eksi
Clinostomum complanatum pada ikan air tawar d ap at m en g ak i b at k an k em at i an i k an d an kerugian ekonomi (Kagei et al., 1984). Di Indo-n esi a, i Indo-n f ek si Clinostomum sp . p er n ah d i l ap o r k an m en y er an g i k an g u r am i (Osphronemus gouramy) yang dipelihara di sawah di wilayah Purwokert o, Jawa Tengah (Handajani & Samsundari, 2005).
Inf eksi Clinostomum complanatum pada ikan m enunjukkan perubahan t ingkah laku, p er t u m b u h an t er g an g g u , b o b o t b ad an m enurun, kehilangan nafsu m akan, frekuensi b er en an g m en u r u n , w ar n a t u b u h p u cat , berenang lam bat , dan ik an ak an m at i bila dit ransport asikan dalam jarak jauh (Lo et al., 1982). Selam a ini t elah dit em ukan beberapa ik an air t awar sebagai hospes int erm edier
Clinostomum complanatum sepert i Carassius carassius (Chung et al., 1995), Cyprinus carpio
(Aohagi et al., 1993), Oreochromis niloticus dan
Cobitis anguillicaudatus (Dias et al.,2006). Di Indonesia belum pernah dilaporkan adanya kasus akibat Clinostomum complanatum.
Penelit ian t ent ang t opograf i perm ukaan
Clinostomum pada ikan nila (Tilapia nilotica) dari Assiut t elah dilaporkan oleh Marwan & Moham m ed (2003). Beberapa penelitian yang t elah dilak uk an t er hadap Digenea dengan
Scanning Electron Microscopy (SEM) yaitu pada
Cryptocotyle lingua (Ko i e et al., 1 9 7 7 ),
Cynodiplostomum azimi (Kh al i l , 1 9 9 0 ),
Procerovum varium (Ku r n i asi h , 1 9 9 0 ),
Prohemistomum vivax (Khalil & Helal, 1992) dan Fasciola gigantica (Dangprasert et al., 2 0 0 1 ). Pen el i t i an u n t u k m en g i d en t i f i k asi
Clinostomum sp. dengan Scanning Electron microscopy (SEM) belum banyak dilakukan, t erut am a Clinostomum sp. yang berasal dari
In d on esi a. Pen el i t i an i n i b er t u j u an u n t u k m en g et ah u i t o p o g r af i p er m u k aan d ar i
Clinostomum complanatum pada ikan bet ok (Anabas testudineus) yan g d i t em u k an d i Yogyakarta, Indonesia.
BAHAN DAN METODE
Ikan betok (Anabas testudineus) ditangkap dari Sungai Kali Progo, Yogyak art a m eng-gunakan jaring dengan m at a jaring 1,75 inci. Ikan yang t ert angkap dim asukkan ke dalam em ber yang t elah diberi aerasi, dibawa ke laboratorium untuk diam ati dan diidentifikasi (Saanin, 1 9 8 4 ). Ik an sam pel yang diam at i b er j u m l ah 1 0 ek o r y an g t er i n f ek s i
Clinostomum complanatum dengan ukuran panjang berkisar antara 9,3- 13,8 cm dan bobot 18,34- 37,12 g.
Pem er i k saan m ak r o sk o p i s d i l ak u k an dengan melihat perubahan klinis dan patologis pada perm uk aan t ubuh ik an. Pem erik saan m ikroskopis dilakukan pada organ saluran pencernaan ik an. Kist a yang dit em uk an di insang ikan betok, dikeluarkan dengan jarum, lalu dipindahkan ke dalam cawan pet ri yang berisi garam f isiologis 0,9% dan diawet kan dalam et anol absolut unt uk proses Scanning Electron Microscopy (SEM).
Perm ukaan parasit diam at i dengan Scan-ning Electron Microscopy dengan prosedur: metaserkaria Clinostomum complanatum yang telah difiksasi dalam etanol absolut dilakukan preparasi spesim en padat pada suhu 4oC.
Proses preparasi spesimen terdiri atas 5 tahap. Tahap pert am a, cacing dibersihkan dengan car a d ir end am k ur ang leb ih 2 j am d alam
t ert ier but anol selam a 10 m enit sebanyak 2 kali, dibekukan dalam freezer dan dimasukkan ke freezed drier sampai kering. Setelah sampel kering m aka sam pel akan dilekat kan dalam
stube, dilapisi t em baga dengan m esin Ion Coates selam a 15 m enit dan diam at i dengan
Scanning Electron Microscope m o d el JSM 5310LV dan didokumentasi.
HASIL DAN BAHASAN
Hasil penangkapan ikan air t awar dari Kali Progo, Yogyakart a diket ahui t erdapat 7 jenis ikan yait u: ikan m as (Cyprinus carpio), lele (Clarias batrachus), n i l a (Oreochromis niloticus), baung (Mystus nemurus), gabus (Channa striata), sepat rawa (Trichogaster tricopterus), dan bet ok (Anabas testudineus). Dari 7 jenis ikan air tawar tersebut ditem ukan hanya ikan bet ok yang t erinfeksi m et asekaria
Clinostomum complanatum. Met aser k ar i a
Clinostomum complanatum yang t elah keluar dari sista terlihat berwarna putih kekuningan, berbentuk seperti daun (Gam bar 1).
Hasil pem eriksaan inf est asi m et aserkaria
Clinostomum complanatum pada ikan bet ok yan g b er asal d ar i Kal i Pr og o, Yog yak ar t a diketahui bahwa dari 87 ekor ikan betok yang diperiksa terdapat 10 ekor ikan yang terinfeksi m et aser k ar i a Clinostomum complanatum
dengan prevalensi sebesar 8,1%. Prevalensi metaserkaria Clinostomum complanatum pada ikan betok jantan (51,7%) lebih tinggi daripada i k an b et o k b et i n a (4 8 , 3 %). D i s t r i b u s i
m et aser k ar i a Clinostomum complanatum
b er d asar k an u k u r an p an j an g b ad an i k an dik et ahui prevalensi t erendah (1,2%) pada u k u r an i k an d i at as 1 3 ,8 cm ; sed an g k an t ert inggi (49,4%) pada ukuran 9,3- 11,5 cm . Bo b o t i k an b et o k j an t an yan g t er i n f ek si
Clinostomum complanatum adalah 18,34-34,29 g dan bobot ikan bet ok bet ina adalah 2 0 ,2 0 - 3 7 ,1 2 g . Pr eval en si m et aser k ar i a
Clinostomum complanatum p ad a Hoplias malabaricus ad al ah 2 , 4 5 % d an p ad a
Loricariichthys platymetopon sebesar 60,8 % dengan inf est asi berkisar ant ara 1- 2 ekor/ lokasi (Dias et al., 2003). Jumlah metaserkaria
Clinostomum complanatum p ad a Capoeta capoeta gracilis (Ost eicht hys: Cyp r inid ae) berkisar 1- 60/ ikan dan prevalensi pada ikan bet ina (54,4%) lebih t inggi dari ikan jant an (36,4%) (Malek & Mobedi, 2001). Metaserkaria
Clinostomum complanatum yang dit em ukan pada ikan Channa punctatus bet ina sebanyak 50 ekor, sedangkan pada ikan jant an hanya 33 ekor. Inf eksi Clinostomum complanatum
pada Aphanius dispar (47,5%) bet ina lebih t inggi daripada ikan Aphanius dispar jant an (55,9%) (Firdaus, 1988).
Ikan bet ok yang t erinf eksi Clinostomum complanatum yang berasal dari Yogyakart a, menunjukkan tanda- tanda klinis seperti warna t ubuh pucat , produksi lendir banyak, sirip ekor, dada, punggung dan perut robek, ikan kehilangan selera makan, sisik rontok, dan ikan sel al u b er en an g d ek at p er m u k aan ai r . I n v es t as i m et as er k ar i a Clinostomum complanatum pada insang ikan betok (Anabas testudineus) d i t an d ai d en g an i n s an g m em bengk ak dan berwarna pucat . Hal ini sesuai dengan pendapat Lacerda et al., 2008; Mwita & Nkwengulila (2008), gejala klinis ikan yang t erinf eksi Clinostomum complanatum
adalahikanmenjadi letargik, tidak mau makan seh i n g g a i k an m en j ad i k u r u s, k u l i t ak an k eh i l an g an si si k p ad a p er l ek at an caci n g , m eng eluar k an lend ir yang b anyak , war na tubuh pucat, ulcer, sirip ekor rontok, operkulum tidak dapat menutup sempurna, dan ikan suka menggosokkan badannya ke dasar kolam atau ke benda- benda keras lainnya. Menurut Eiras
et al.(1999), ikan yang terserang metaserkaria
Clinostomum complanatum dit andai dengan kehilangan nafsu m akan, frekuensi berenang berkurang, dan ikan m enjadi st res. Inf eksi
Clinostomum complanatum b o b o t p ad a insang dapat m enyebabkan gangguan per-n af asaper-n , i per-n saper-n g p u cat , l aj u p er per-n af asaper-n Gambar 1. M et aser k ar i a Clinostomum
complanatum p ad a i k an b et o k (Anabas testudineus)
m en i n g k at , d an i k an ser i n g m u n cu l d i p er m uk aan air unt uk m end ap at k an ud ar a (Iriant o, 2005). Sist a Clinostomum tilapiae
yang ditem ukan pada kulit atau rongga tubuh ikan nila (Oreochromis niloticus) dapat m eng-akibatkan iritasi pada kulit dan sekresi m ukus yang berlebihan (Lo et al., 1981).
Hi st o p at o l o g i t u b u h i k an b et o k yan g t er i n f ek s i Clinostomum complanatum
m enunjukkan adanya perubahan degenerasi p ad a j ar i n g an o t o t sek i t ar k i st a, at r o f i , d egener asi hat i, inf ilt r asi sel p ad a ginj al, hem oragik pada ot ot ikan, dan degenerasi hyalin dengan indikasi m yosit is pada t ubuh i k an . M en u r u t Lo et al. , 1 9 8 2 , i n f ek si
Clinostomum complanatum pada Misgurnus anguillicaudatus dit andai adanya at ropi ot ot , k erusak an yang serius pada j aringan ik an d an d i n d i n g t u b u h ser t a ak h i r n ya d ap at m en y eb ab k an k em at i an i k an . I n f ek s i metaserkaria Clinostomum complanatum pada kulit ikan Tilapia dapat mengakibatkan derma-titis, nekrosis insang, proliferasi eosinofil pada lamella sekunder (Garacia et al., 1993). Infeksi metaserkaria Clinostomum tilapiae pada organ d alam m enyeb ab k an lesu, d an p r olif er asi eosinof il pada insang dan kongest i kapiler d en g an k eb er ad aan m el an o m ak r o f ag (Coulibay et al.,1995). Inf eksi m et aserkaria
Clinostomum detruncatum pada ot ot ikan air t awar (Rhamdia quelen) d i t an d ai d en g an degenerasi jaringan ot ot (Bello et al., 2000).
Met aserkaria yang dikeluarkan dari kist a, berbent uk sepert i daun dan pipih. Panjang m et aserkaria sekit ar 7,5 m m (6,5- 8 m m ) dan lebar 4,3 mm (4,1- 5,2 mm). Hasil pengamatan dengan Scanning Electron Microscopy (SEM) menunjukkan permukaan tubuh Clinostomum complanatum halus t anpa spina, dilengkapi dengan papila berbent uk bulat . Oral sucker
t er lihat di uj ung t er m inal ber bent uk elips dengan permukaan halus, berlekuk agak dalam (Gam bar 2A). Uk uran panj ang oral sucker
265 µm (260- 300 µm) dan lebar 176 µm (170-225 µm ). Jarak ant ara oral sucker dengan
ventral sucker adalah 216 µm (210- 225µm ) (Gambar 2B). Panjang oral sucker metaserkaria
Clinostomum complanatum pada Carassius auratus di Korea berkisar 220- 320 µm dan lebar berkisar 270- 430 µm (Chung et al., 1995). Menurut El- Naggar et al. (1993), oral sucker
dari Orientocreadium batrachoides (Trem a-toda: Allocreadiidae) memiliki spina dan papila sensoris. Papila sensoris ini berfungsi sebagai tango- , mechano- , rheo- , dan chemoreseptor
(Smyth & Halton, 1983). Permukaan tegument trematoda memiliki fungsi untuk absorpsi, alat pelindung dan kekebalan tubuh (Fried, 1997).
Oral sucker m et aserkaria Clinostomum yang d i t em u k an p ad a i k an n i l a (Oreochromis niloticus) t erlet ak di ujung t erm inal dengan lubang ber bent uk elips dik elilingi dengan pelebaran dinding t ubuh yang m em bent uk lipatan bulat dan tipis (Marwan & Mohammed, 2003).
Ventral sucker berada dekat oral sucker
(216 µm), memiliki papila sensoris bulat tanpa spina. Di beberapa t em pat lekukan ini m em -bent uk st rukt ur yang halus dan ada t onjolan kecil sepert i nodul. Nodul ini m em iliki papila sensoris yang berukuran kecil. Ventral sucker
dikelilingi lipat an sirkuler, dan spina kecil, m ikroporus di ant ara lipat an (Gam bar 2C). Pan j an g ventral sucker m et as er k ar i a
Clinostomum complanatum yang dit em ukan pada Carassius auratus di Korea berkisar 510-7 510-7 0 µ m d an l eb ar b er k i sar 5 2 0 - 510-7 5 0 µ m (Chung et al., 1 9 9 5 ). Menur ut Dias et al. (2 0 0 3 ), p er m u k aan ventral sucker d ar i
Ichtyoclinostomum dimorphum yan g d i -t em ukan pada burung Ardea cocoi m em iliki dua st rukt ur poligonal t egum ent al dan papila sensoris. Struktur oral dan ventral sucker pada
Neorilepturus aegyptensis m em iliki st rukt ur yang serupa, sedangkan pada m et aserkaria
Clinostomum complanatum m em iliki struktur yang sangat berbeda (Shalaby & Hassanine, 1996).
Di b ag i an ak h i r g ar i s t en g ah t u b u h d i sepert iga ant erior t ubuh t erdapat st ruk t ur spina yang berbeda (Gam bar 2D). Perm ukaan dorsal m em iliki banyak pori dan lubang yang t erdist ribusi di seluruh perm uk aan dorsal. Ujung t erm inal post erior t am pak ada lubang eksret ori berbent uk bulat dikelilingi dengan l i p at an (Gam b ar 2 E). Lu b an g ek sk r et o r i
Clinostomum complanatum berada di ujung posterior tubuh dan membuka ke arah dorsal, sedangkan pada Orientocreadium batrachoides
terbuka ke arah ventral (Khalil, 1990). Pad a p en el i t i an i n i d i t em u k an b ah wa perm ukaan vent ral dan dorsal Clinostomum complanatum tidak memiliki spina, sedangkan pada Prohemistomum vivax (Khalil & Helal, 1 9 9 2 ), Orientocreadium batrachoides (El-Naggar et al., 1993) dan Fasciola gigantica
m em punyai spina dengan ukuran bervariasi dan terdistribusi pada permukaan tubuh. Pada
KESIMPULAN
Oral sucker t erlet ak di uj ung t erm inal, ber bent uk elips dik elilingi dengan lipat an dengan permukaan halus. Ventral sucker dekat dengan oral sucker, m em iliki papila sensoris yang bulat t anpa spina. Perm uk aan dorsal
dit ut upi spina. Lubang ekskret ori t erlet ak di ujung post erior t ubuh.
SARAN
Pen el i t i an yan g l eb i h d et ai l t en t an g t opograf i Clinostomum dari daerah lain di Indonesia perlu dilakukan.
Gambar 2. Perm ukaan tubuh Clinostomum complanatum pada ikan betok (Anabas testudineus) asal Yogyakarta
Figure 2. Body surface of Clinostomum complanatum on Climbing gouramy from Yogyakarta
(2A) Scalebar: 1,76 m m . 1. Oral sucker, 2. Ventral sucker, 3. Papila sensoris; (2B) Oral sucker.
Scalebar: 264 µm . 1. Spina, 2. Lipat an; (2C) Ventral sucker. Scalebar: 377 µm , 1. Spina, 2. Lipat an; (2D) Permukaan dorsal. Scalebar: 37,7 µm; 1. Spina pendek, 2. Spina panjang; (2E) Lubang ekskretori. Scalebar: 176 µm , 1. Lekukan dalam , 2. Papila panjang
A B
C D
UCAPAN TERIMA KASIH
Pen el i t i an i n i m er u p ak an b ag i an d ar i Pen el i t i an Hi b ah Di ser t asi Do k t o r , yan g dibiayai oleh Direkt orat Jenderal Pendidikan Ti n g g i , Dep ar t em en Pen d i d i k an Nasi o n al sesuai dengan Surat Perjanjian Pelaksanaan Penelitian Hibah Disertasi Doktor Nomor: 481/ SP2 H/ PP/ DP2 M/ VI/ 2 0 1 0 Tan g g al 1 1 Ju n i 2010.
DAFTAR ACUAN
Aohagi, Y., Shibahara, T., Machida, N., Yamaga, Y., & Kag o t a, K. 1 9 9 3 . Clinostomum complanatum (Trematoda: Clinostomidae) in wild herons and egret s, Tot t ori Prefec-ture. J. Wildl. Dis., 28: 470- 471.
Bello, A.R.R., Fortes, E., Klein, A.B., Bello, A.A., Llesuy, S.F., Robaldo, R.B., & Bianchini, A. 2 0 0 0 . Li p i d p er o x i d at i o n i n d u ced b y
Clinostomum detruncatum in muscle of the freshwat er fish Rhamdia quelen. Dis. of Aqua. Org., 42: 233- 236.
Chung, D., Kong, H.H., & Joo, C.Y. 1995. Dem-onstration of the second intermediate hosts of Clinostomum complanatum in Korea.
The Korean J. Parasitol, 33(4): 305- 312. Coulibay, N.D., Salembere, S., & Bessin, R. 1995.
Larval Clinostomiasis in cichlid fish in lake Kom peinga, Burkina Faso. A t hreat t o fish and public healt h. Francophones sante, 5(3): 199- 205.
Dangprasert , T., Khawsuk, W., Meepool, A,. Wanichanon, C., Viyanant, V., Upatham, E.S., Wongratanacheevin, S., & Sobhon, P. 2001.
Fasciola gigantica: surface t opography of t he adult t egum ent . J. Helminthol.,75(1): 43- 50.
Dias, M.L.G.C., Eiras, J.C., Machado, M.H., Souza, G.T.R., & Pavanelli, G.C. 2003. The life cycle of Clinostomum complanatum Rudolphi, 1819. (Digenea, Clinost om idae) on t he floodplain of the High Parana River, Brazil.
Parasitol. Res., 89: 506- 508.
Dias, M.L.G.G., Mint e- Vera, C.V., Eiras, J.C., Machado, M.H., Souza, G.T.R., & Pavanelli, G. C. 2 0 0 6 . Eco l o g y o f Clinostomum complanatum Rudolphi, 1814 (Trematoda: Clinost om idae) inf ect ing f ish f rom t he floodplain of the high Parana River, Brazil.
Parasitol. Res., 99: 675- 681.
Eiras, J.C., Dias, M.L.G.G., Pavanelli, G.C., & Machado, M.H. 1999. Histological studies on the effects of Clinostomum marginatum
(Digenea, Clinost om idae) in it s second
i n t er m ed i at e h o st Loricariichths platymetopon (Osteichthyes, Loricariidae) of t he upper Parana River, Brazil. Acta Scientiarum, 21(2): 237- 241.
El- Naggar, M.M., Ibrahim, H.A., & Hamada, S.F. 1993. Scanning and transmission electron m icroscope observat ions on t he general body t egum ent and vent ral pads of t he digenean Orientocreadium batracoides
Tubangui 1931. J. Egypt-Ger. Soc. Zool., 10: 245- 264.
Fi r d au s, S. 1 9 8 8 . Seaso n al i n ci d en ce o f helm int ic infect ion in relat ion t o sex of host , Chana punctatus (Blockh). Rivista di Parasitol.,3(47, 2): 215- 20.
Garacia, M.L.J., Osorio, S., & Const ant ino, F. 1993. Prevalence of parasites and the his-t ological lesions his-t he produce in Tilapia from Am ela Lakes. Tecom an Colim a. Vet. Mex., 4(3): 199- 205.
Handajani, H. & Sam sundari, S. 2005. Parasit dan Penyakit Ikan. Universit as Muham -madiyah Malang, 201 hlm.
Irianto, A. 2005. Patologi Ikan Teleostei. Gadjah Mada Universit y Press. Yogyakart a, 255 hlm.
Kagei, N., Yanohara, Y., Uchinawa, R., & Sato, A. 1984. On the yellow grubs, m etacercariae of Clinostomum complanatum (Rudolphi, 1819), found in t he cult ured loach. Japa-nese J. Parasitol., 33: 59- 62.
Khalil, A.I. 1990. Scanning Electron Microscopy o f t h e t eg u m en t al su r f ace o f
Cynodiplostomum azimi (Gohear, 1933) Dubois, 1936 (Trematoda) during develop-ment from metacercariae to adult. Bull. Fac. Sci. Zagazig Univ., 12(2): 1,070- 1,087. Khalil, A.I. & Helal, H.I.B. 1992. Scanning
Elec-tron Microscopy of the tegumental surface of adult Prohemistomum vivax (Sonsino, 1 8 9 2 ) A z i m , 1 9 3 3 (T r em at o d a: Cyat hocot ylidas). J. Egypt-Ger. Soc. Zool., 7: 459- 473.
Kifune, T. & Kousaka, M. 1994. The second case of hum an i nf ect i on wi t h Clinostomum
(Trematoda: Clinostomidae) in Saga Prefec-ture. Med. Bull. Fukuaka Univ., 21: 99- 103. Koie, M., Nnsen, P., & Christensen, N.O. 1977.
St ereoscan st udies of rediae cercariae, cy st s, ex cy st ed m et acer car i ae an d m igret ory st ages of Fasciola hepatica.Z. Parasitenkd., 54: 289- 297.
Lacerda, A.C.F., Takemoto, R.M., & Pavanelli, G. 2008. Digenea, Nem at oda, Cest oda, and A can t h o cep h al a, p ar asi t es i n Pot am ot rygonidae (Chondricht hyes from t he upper Parana River floodplain) st at es of Parana and Mat o Grosso do Sul. Brazil.
Check list, 4(2): 115- 122.
Lo, C.F., Huber, F., Kou, G.H., & Lo, C.J. 1981. St ud i es of Clinostomum complanatum
(Rudolphi 1819). Fish Pathol., 15: 219- 227. Lo, C.F., Wang, C.H., Huber, F., & Lo, C.J. 1982. The st udy of Clinostomumcomplanatum
(Rudolphi, 1819). II.CAPD Fisheries series No. 8. Reports on Fish Disease Research, IV: 26- 56.
Malek, M. & Mobedi, I. 2001. Occurance of
Clinostomum complanatum (Rud olp hi, 1 8 1 9 ) (Di g en ea: Cl i n o st o m at i d ae) i n
Capoeta capoeta gracilis (Ost eicht hys: Cyprinidae) from Shiroud River, Iran. Ira-nian J. Publ. Health, 30: 95- 98.
Marwan, A. & Mohammed, T.A. 2003. Scanning El ect r o n Mi cr o sco p y o f Clinostomum complanatum m et acer car i a f r o m
Oreochromis niloticus from Assiut , Egypt .
Egyptian J. Biol., 5: 70- 77.
Mwita, C. & Nkwengulila, G. 2008. Determinants of the parasite community of clariid fishes from Lake Victoria, Tanzania. J. Helminthol., 82: 7- 16.
Saan i n , H. 1 9 8 4 . Tak so n o m i d an Ku n ci Identifikasi Ikan. Jilid I dan II. Cetakan ketiga. Bina Cipta. Jakarta, 205 hlm.
Shalab y, I.M.I. & Hassanine, R.M.A. 1 9 9 6 .
Neorilepturus aegyptensis new genus, new species, (Platyhelminthes, Trematoda, Digenea) from Red Sea Fishes: light and scanning electron m icroscopy description of the tegumental surface. J. Egypt-Ger. Soc. Zool.,12: 89- 106.
Shirai, R., Mathubara, K., Ohnishi, T., Nishiyama, H., Wat anabe, A., Harada, R., Kadut a, J., & Kohno, S. 1998. A case of human infection wi t h Clinostomum sp . Kansenshogaku Zasshi, 72(11): 1242- 5.
Sm yth, J.D. & Halton, D.W. 1983. The physiol-ogy of t rem at odes, 2nd edn. Cam bridge
University Press. Cam bridge.
Tiewchaloern, S., Udomkijdecha, S., Suvouttho, S., Chungham sri, K., & Waikagul, J. 1999.
Clinostomum trem atode from hum an eye.
