DOSEN PENGAMPU : apt. Haiyul Fadhli, M.Farm
Kromatografi Kilat (Flash
Chromatography)
Kelompok 18 S1’5B
Anggota Kelompok 18 KBA II S1’5B
1. Santri Zia Muna (2001078)
2. Wahyu Azizah (2001086)
S U B M A T E R I
Pengertian Kromatografi Kilat
Persiapan Sampel dan Cara
Penggunaan
03 PENGEMASAN KOLOM
02
04
Bagian-bagian kromatografi
flash
01
PENGERTIAN
KROMATOGRAFI KILAT
0
1
Kromatografi kolom kilat adalah
teknik umum yang digunakan di
laboratorium sintesis untuk pemurnian
cepat molekul organik dari campuran
reaksi dan saat memisahkan isomer.
PRINSIP
Kromatografi kolom menggunakan prinsip
yang sama seperti KLT, tetapi dapat digunakan
pada skala persiapan. Campuran reaksi kompleks
dan isomer stereo dari mg hingga g dapat
dimurnikan menggunakan kromatografi kolom
flash.Eluen akan didorong oleh tekanan udara ke
dalam kolom kaca pendek (15 cm) dengan
diameter dalam kolom yang besar (1-5 cm).
Bagian-bagian kromatografi flash
0
2
Sistem pompa
1. Pompa pengendali
Tekanan berkisar baik 10 bar hingga 50 bar. Memberikan hasil
pemisahan yang optimal untuk berbagai aplikasi. Modul pompa
dapat dikendalikan oleh tiga unit yang berbeda. Pompa
Pengendali C610 (untuk pemisahan isokratik hingga 10 bar),
Pompa Manajer C615 (untuk pemisahan isokratik dan gradien
hingga 50 bar) dan Unit Kontrol C620.
2. Pompa
1. Vakum Pompa / peristaltik Pompa
Mentransfer pelarut dari fase pembawa Reservoir untuk pompa flash.
2. Sampel Sistem Injeksi
Sistem injeksi dirancang untuk memfasilitasi pengisian kolom dengan cairan dan minyak yang memiliki kelarutan rendah dan padatan
3. Katup injeksi
Untuk injeksi sampel 0-5 ml.
4. Elusi Kolom Kaca
Kolom Kaca untuk digunakan dalam kombinasi dengan Unit Injeksi untuk memuat sampel kering atau tidak larut hingga 18 ml atau 53 ml.
Rentang tekanan 50 bar hingga 40 bar.
5. Chamber Sampel 100 ml
Sampel Chamber 100 ml untuk digunakan dalam kombinasi dengan Unit Injeksi untuk volume sampel 10-100 ml termasuk katup gas N2 (on / off).
Kolom
1 Kolom kaca
kolom kaca memiliki maksimum fleksibilitas untuk setiap situasi.
2. Plastik + Kaca Kolom [1,11]
Kolom Kaca berlapis Plastik + Glas tersedia untuk jumlah sampel yang lebih besar dan aplikasi tekanan yang lebih tinggi pada tingkat keamanan yang tinggi.
3. Plunger Kolom C-695
Kolom plunger yang kuat, tahan kimia dan biokompatibel dirancang untuk kinerja operasional optimal dan keselamatan.
1-100 g dan tekanan sampai 50 bar selama pemisahan preparatif.
4. Prakolom
Precolumn meminimalkan volume yang habis dan
meningkatkan waktu hidup dari kolom utama dengan menjebak
kontaminan.
Set Pengisi (Filling Set ) untuk Kolom Kaca 1. Set Pengisi kering (Dry Filling Set)
Digunakan untuk mengisi kolom kaca dengan silika gel menggunakan gas terkompresi.
2. Set Pengisi Basah (Slurry Filling Set)
Digunakan untuk pengisi basah dan penyejuk
kolom kaca dengan partikel silika gel lebih kecil
dari 25 um.
Kolektor Fraksi
Untuk pemisahan sederhana kolom, pompa dan pompa kontroler mungkin cukup. Untuk tingkat yang lebih besar dari otomatisasi dengan presisi, kinerja dan kemudahan penggunaan Kolektor Fraksi dapat dimasukkan ke dalam sebagian besar setup.
Detektor dan Perekam / Software
detektor memberikan analisis pemisahan hasil yang
sangat tepat. Untuk sebagian besar aplikasi salah satunya
detektor UV / Vis akan cukup untuk kebutuhan sistem
deteksi. Kedua detektor disampaikan dalam kombinasi
dengan aliran sel preparatif.
Sistem Pelarut
kromatografi kolom Flash biasanya dilakukan dengan campuran dua pelarut, polar dan komponen nonpolar.
1. Sistem pelarut satu-komponen :
Hidrokarbon: pentana, petroleum eter, heksana 2. Ether dan diklorometana (polaritas sangat mirip) 3. Etil asetat
Sistem pelarut dua-komponen :
1. Eter / Petroleum Ether, Ether / Hexane, dan Ether / Pentane: Pemilihan komponen hidrokarbon bergantung pada ketersediaan dan persyaratan untuk rentang titik didih.
2. Etil Asetat / Hexane: Standar, baik untuk senyawa biasa dan pemisahan yang sulit.
3. Methanol / Dichloromethane: Untuk senyawa polar.
4. 10% Amonia di Methanol Solusi / Dichloromethane
5. Untuk senyawa utama(yaitu mengandung nitrogen), kadangkadang diperlukan untuk penambahan sejumlah kecil trietilamina atau piridin untuk campuran pelarut (sekitar 0,1%).
6. Untuk senyawa asam, sejumlah kecil asam asetat
kadangkadang berguna.
PENGEMASAN KOLOM
03
Sebagian besar pengemasan kolom adalah silika gel. Still menemukan ukuran partikel terbaik yaitu 40-63 mata jala. Pemisahan diberi tanda sebagai penerimaan waktu (r) dibagi luas puncak (w)
Metode Pembungkus Basah Metode Pembungkus Kering
PENGEMASAN KOLOM
PERSIAPAN 04
SAMPEL DAN CARA
PENGGUNAAN
PERSIAPAN SAMPEL
1. Sampel dilarutkan dalam pelarut, lalu dimasukkan kedalam kolom. Hati-hati Ketika memasukkannya agar permukaan bagian atas gel tidak rusak.
2. Kemudian stopcock kolom dibuka dan tekanna diatur sehingga pelarut akan mendorong sampel sehingga meresap kedalam silika
3. Bilas kolom dengan sedikit mungkin pelarut untuk memastikan tidak ada sampel yang tertinggal didalam kolom
4. Kumpulkan fraksi sampel kemudian uji dengan TLC untuk melihat kandungan senyawa yang didapat
