i
TESIS
PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAUN TUMPANG
PAYUK (
ACALYPHA INDICA
L.) MEMPERPANJANG
WAKTU PERDARAHAN DAN KOAGULASI DARAH
MENCIT (
MUS MUSCULUS
) JANTAN GALUR BALB/C
NI MADE SUMETRI NIM 139076100
1
PROGRAM MAGISTER
PROGRAM STUDI ILMU BIOMEDIK
PROGRAM PASCASARJANA
UNIVERSITAS UDAYANA
DENPASAR
ii
PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAUN TUMPANG
PAYUK (
ACALYPHA INDICA
L.) MEMPERPANJANG
WAKTU PERDARAHAN DAN KOAGULASI DARAH
MENCIT (
MUS MUSCULUS
) JANTAN GALUR BALB/C
Tesis untuk Memperoleh Gelar Magister pada Program Magister, Program Studi Biomedik,
Program Pascasarjana Universitas Udayana
NI MADE SUMETRI NIM 1390761001
PROGRAM MAGISTER
PROGRAM STUDI ILMU BIOMEDIK
PROGRAM PASCASARJANA
UNIVERSITAS UDAYANA
DENPASAR
iii
Lembar Persetujuan
TESIS INI TELAH DISETUJUI TANGGAL JUNI 2015
Pembimbing I, Pembimbing II,
Prof. dr. IGM. Aman, Sp.FK Dr. dr. I Made Jawi, M.Kes
Mengetahui
Ketua Program Studi Ilmu Biomedik Direktur Program Pascasarjana Program Pascasarjana Universitas Udayana Universitas Udayana
Dr.dr. Gde Ngurah Indraguna Pinatih., M.Sc, Sp.GK Prof.Dr.dr.A.A.Raka Sudewi,Sp.S(K)
iv
Tesis ini Telah Diuji pada Tanggal 12 Juni 2015
Panitia Penguji Tesis Berdasarkan SK. Rektor Universitas Udayana, No. 1585/UN 14.4/HK/2015
Tanggal 4 Juni 2015
Ketua : Prof.dr.I Gusti Made Aman, Sp.Fk Sekretaris : Dr. dr. I Made Jawi, M.Kes
Anggota :
1. Prof.Dr.dr. Alex Pangkahila, M.Sc., Sp.And 2. Prof.Dr.dr.Nyoman Mangku Karmaya, M.Repro 3. Dr.dr. Bagus Komang Satriyasa, M.Repro
v
KEMENTERIAN PENDIDIKAN DAN KEBUDAYAAN
UNIVERSITAS UDAYANA
PROGRAM MAGISTER ILMU BIOMEDIK
PROGRAM PASCASARJANA UNIVERSITAS
UDAYANA
Alamat : Sekretariat Pascasarjana Universitas Udayana.-Jalan Panglima Sudirman Denpasar,Bali Tel. 0361-7475076, 7425201.Fax 0361-246656, 223797.email .csaam_fkunud@yahoo.com
SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT
Nama : Ni Made Sumetri
NIM : 1390761001
Program Studi : Magister Ilmu Biomedik
Judul : Pemberian Ekstrak Etanol Daun Tumpang Payuk (Acalypha
Indica L.) Memperpanjang Waktu Perdarahan dan Koagulasi
Darah Mencit (Mus Musculus) Jantan Galur BALB/C
Dengan ini menyatakan bahwa karya ilmiah Tesis ini bebas plagiat.
Apabila di kemudian hari terbukti terdapat plagiat dalam karya ilmiah ini, maka saya bersedia menerima sanksi sesuai peraturan Mendiknas RI No. 17 tahun 2010 dan Peraturan Perundang-undangan yang berlaku.
Denpasar, 6 Juni 2015
Yang membuat pernyataan,
vi
UCAPAN TERIMA KASIH
Pertama-tama perkenankanlah penulis memanjatkan puji dan syukur
kehadapan Ida Sang Hyang Widi Wasa, Tuhan Yang Maha Esa karena berkat
karunia-Nya, penulis dapat menyelesaikan penelitian yang berjudul “Pemberian
Ekstrak Etanol Daun Tumpang payuk (Acalypha indica L.) Memperpanjang Waktu
perdarahan dan Koagulasi Darah Mencit (Mus musculus) Jantan Galur Balb/c”.Penelitian ini disusun sebagai syarat untuk meraih gelar magister pada Program Pasca Sarjana Ilmu Biomedis Kekhususan Ilmu Kedokteran Dasar Bidang
Farmakologi Universitas Udayana.Penulis telah banyak dibantu oleh berbagai pihak
dalam penyelesaian tesis ini. Oleh karena itu penulis ingin mengucapkan terima kasih
kepada:
1. Prof. Dr. dr.I Ketut Suastika, Sp.PD (KEMD) selaku rektor Universitas Udayana.
2. Prof. Dr. dr. A.A. Raka Sudewi, Sp.S(K) selaku Direktur Program PascaSarjana
Universitas Udayana.
3. Dr. dr. Gde Ngurah Indraguna Pinatih, M.Sc, Sp. GK selaku Ketua Program
Studi Pasca Sarjana Biomedis Universitas Udayana.
4. Prof. dr. I Gusti Made Aman, Sp.FK selaku pembimbing I yang telahmemberi
banyak masukan, saran ilmiah serta dorongan
5. Dr. dr. I Made Jawi, M.Kes selaku pembimbing II yang telah memberi banyak
vii
6. Prof. Dr. dr. Alex Pangkahila, M.Sc., Sp.And selaku penguji tesis yang telah
banyak memberi masukan.
7. Prof. Dr. dr. Nyoman Mangku Karmaya, M. Repro selaku penguji tesis yang telah
banyakmemberi masukan.
8. Dr. dr. Bagus Komang Satriyasa, M. Repro selaku penguji tesis yang telah banyak
memberimasukan.
9. dr. I GMG. Surya C. Trapika, M.Sc, selaku Ketua Bagian Farmakologi atas ijin
yang diberikan kepada penulis untuk melakukan penelitian di Laboratorium hewan
bagian Farmakologi Universitas Udayana.
10.IGede Wiranata, yang telahmembantu penulis selama penelitian.
11. Dosen-dosen lain yang telah banyak memberikan saran selama penulisan tesis
12. Keluarga tercinta yang dengan kasih sayang selalu mendukung penulis dalam
menyelesaikan pendidikan ini
13. Rekan-rekan yang telah banyak memberi masukan selama proses penulisan
tesis berlangsung.
Penulis menyadari bahwa tesis ini masih jauh dari kesempurnaan, maka kritik
dan saran sangat diharapkan demi kesempurnaan tesis ini. Semoga penelitian ini
dapat bermanfaat bagi banyak pihak.
Denpasar, 7 Mei 2015
viii
ABSTRAK
PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAUN TUMPANG PAYUK (ACALYPHA
INDICA L.) MEMPERPANJANG WAKTU PERDARAHAN DAN KOAGULASI
DARAH MENCIT (MUS MUSCULUS) JANTAN GALUR BALB/C
Obat yang tersedia untuk thrombosis cukup banyak namun karena efek samping yang ditimbulkan menjadi pertimbangan untuk mencari alternatif yang lebih murah, terjangkau dan efek samping yang relatif kecil. Tumpang payuk (Acalypha indica L.) merupakan golongan tumbuhan dalam family Euphorbiaceae.Ekstrak etanol daun Tumpang payuk mengandung saponin, fenol, steroid dan flavonoid.Flavonoid terutama quercetin diduga dapat mengatasi gangguan pada pembuluh darah seperti thrombosis yang merupakan salah satu penyebab stroke iskemik.Thrombosis merupakan ketidaknormalan dari hemostasis.Parameter hemostsis yang dapat diukur adalah perpanjangan waktu perdarahan dan koagulasi.Tujuan penelitian ini adalah untuk membuktikan pemberian ekstrak etanol daun Tumpang payuk (Acalypha indica L.) dapat memperpanjang waktu perdarahan dan koagulasi darah mencit.
Penelitian ini adalah penelitian eksperimental murni dengan randomized pretest-posttest control group designyangdilaksanakan di Laboratory Animal Unit
bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Udayana.Penelitian inidilakukan selama 14 hari. Sampel yang digunakan sebanyak 18 ekor mencit jantan galur balb/c dan dibagi menjadi 2 kelompok yaitu kelompok kontrol (P0) diberi aquades dan kelompok perlakuan (P1) diberi ekstrak etanol daun Tumpang payuk 200mg/kgBB.
Hasil penelitian menunjukkan rerata waktu perdarahan kelompok kontrol 78,68,8 detik menjadi 90,819,2 detik (p>0,05) dan waktu koagulasi 27,111,9 detik menjadi 31,58,4 detik (p>0,05) sedangkan kelompok perlakuan mengalami peningkatan dari 84,012,0 detik menjadi 465,666,0 detik (p<0,05) dan waktu koagulasi 39,615,0 detik menjadi 140,440,2 detik (p<0,05). Ekstrak etanol
Acalypha indica L. dapat memperpanjang waktu perdarahan dan koagulasi darah mencit.
Penelitian ini menyimpulkan ekstrak etanol daun Tumpang payuk pada dosis 200mg/kgBB dapat memperpanjang waktu perdarahan dan koagulasi darah mencit jantan galur balb/c. Disarankan penelitian lebih lanjut untuk mencari konsentrasi optimal terhadap peningkatan waktu perdarahan dan koagulasi.
ix
ABSTRACT
ACALYPHA INDICA L. LEAVES EXTRACT PROLONG BLEEDING TIME AND BLOOD COAGULATION IN MALE MICE (Mus musculus) BALB/C
A number of medicine for thrombosis are available. However, by several side effect due to the treatment, there are a consideration to find an alternative treatment that is cheaper and lower side effect. Tumpang payuk ( Acalypha indica L.) is a plant in the family of Euphorbiaceae. Ethanol extract of Acalypha indica L. is containing saponin, phenol, steroid and flavonoid. Flavonoid especially quercetin is though to have a beneficial in the treatment of vascular disorder such as thrombosis, one of the cause of ischemic stroke. Thrombosis is an abnormality of hemostasis. Parameter of hemostasis that measurable are the prolongation of bleeding time and coagulation. The purpose of this study is to prove that the ethanol extract of Acalypha indicaL. are beneficial to prolong bleeding and coagulation time of mice.
This study was a trueexperimental using randomized pre-test post-test control group design performed in the Laboratory Animal Unit, in Departement of Pharmacology, Faculty of Medicine University of Udayana. Study carried out for 14 days. Samples using in this study were 18 male mice in strain of balb/c, divided into 2 groups. The control groups (K) received aquadest and the treatment groups (P) received ethanol extract of Acalypha indica L. in dose of 200mg/kgbw.
Result shown that the mean of bleeding time of control group78,68,8 second to 90,819,2 second (p>0,05) and coagulation time 27,111,9 second to 31,58,4 second (p>0,05). The treatment group has increased from 84,011,7 second to 465,566,1 second (p<0,05) and the mean of coagulation time has increased from 39,714,7 second to 140,240,4 detik (p<0,05). This study significantly found that the ethanol extract of Acalypha indica L. able to prolong bleeding and coagulation time in mice blood.
The study concluded that the ethanol extract of Tumpang payuk in dose of 200mg/kgbw could prolong bleeding time and blood coagulation in male mice strain of balb/c. Further study is needed to find out the optimal concentration to prolong bleeding and coagulation time.
x DAFTAR ISI
SAMPUL DALAM ……… PRASYARAT GELAR ……….. LEMBAR PENGESAHAN ……… PENETAPAN PANITIA PENGUJI ……… SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT ……… UCAPAN TERIMA KASIH ……… ABSTRAK ………... ABSTRACT ………. DAFTAR ISI ……… i ii iii iv v vi viii ix x DAFTAR GAMBAR DAFTAR TABEL ……… ……… xiv xv DAFTAR SINGKATAN DAFTAR LAMPIRAN ……… ……… xvi xvii BAB I PENDAHULUAN ……… 1 1.1 1.2 1.3 Latar belakang ……….. Rumusan masalah ……… Tujuan Penelitian ………. 1 5 5 1.3.1 1.3.2 Tujuan umum ………... Tujuan khusus ……….. 6 6 1.4 Manfaat Penelitian ……… 6 1.4.1 1.4.2 Manfaat ilmiah ……….. Manfaat aplikasi ……… 6 7 BAB II KAJIAN PUSTAKA ………... 8 2.1 Tumpang Payuk ……….. 8
2.1.1 2.1.2
Deskripsi tanaman ……… Klasifikasi tumpang payuk………
8 9
xi 2.1.3 2.1.4 Pemakaian empiris………. Kandungan kimia……….. 10 10 2.2 2.3 2.4 Trombosis ……… 2.2.1 Stroke iskemik……… Fisiologi Pembekuan Darah ………. Fungsi Trombosit……….. 11 11 12 15 2.4.1 2.4.2
Adhesi dan agregasi trombosit sebagai respon terhadap cedera vaskuler ……… Reaksi pelepasan trombosit ………..
17 18 2.5 Flavonoid dan Trombosit………. 19 2.6
2.7
Tumpang Payuk dan Trombosis ………. Hewan Percobaan………. 20 21 2.7.1 2.7.2 2.7.3 Anatomi ………. Fisiologi ……….. Perilaku ………... 22 23 23 2.8 Ekstrak ……….. 24 BAB III KERANGKA BERPIKIR, KONSEP, DAN HIPOTESIS
PENELITIAN ……… 25 3.1 3.2 3.3 Kerangka berpikir ………. Konsep penelitian ………. Hipotesis ……… 25 27 27 BAB IV METODE PENELITIAN ……… 28
4.1 4.2 4.3
Rancangan penelitian ……….. Tempat dan waktu penelitian ..……… Populasi dan Sampel ..………..
28 29 29 4.3.1
4.3.2
Perhitungan besar sampel penelitian ……. Kriteria sampel ………
29 30 4.4 Variabel Penelitian ……….. 31
xii
4.5 4.6 4.7
Hubungan Antar Variabel ……….. Definisi Operasional Variabel ………. Alat, Bahan dan Hewan Percobaan ………
32 32 33 4.7.1 4.7.2 4.7.3 Alat ………. Bahan ………. Hewan percobaan ……….. 33 33 34 4.8 Prosedur Penelitian ………. 34 4.8.1 4.8.2 4.8.3 4.8.4 4.8.5 4.8.6 4.8.7 Penetapan dosis ………. Preparasi Simplisia ……… Ekstraksi ………. Identifikasi flavonoid dalam ekstrak ……. Prosedur penelitian , uji waktu perdarahan, uji waktu koagulasi ……… Alur penelitian ……… Analisis data ……… 34 34 35 35 36 39 40 BAB V HASIL PENELITIAN ……… 41
5.1 5.2 5.3
Uji Normalisasi Data ………. Uji Homogenitas Data ………... Analisis Uji Waktu Perdarahan ……….
41 42 42 5.3.1 Uji komparabilitas ………... 42 5.3.1.1 5.3.1.2 5.3.1.3
Uji perbandingan waktu perdarahan sebelum dan sesudah perlakuan… Uji perbandingan waktu perdarahan antar kelompok sebelum perlakuan
(pretest) ………
Uji efek pemberian perlakuan antar kelompok (posttest) ………
42
43
xiii
5.4 Analisis Uji Waktu Koagulasi ……… 45 5.4.1 Uji komparabilitas ……… 45
5.4.1.1
5.4.1.2
5.4.1.3
Uji perbandingan waktu koagulasi sebelum dan sesudah perlakuan .. Uji perbandingan antar kelompok sebelumdiberikanperlakuan (pretest)
Uji efek pemberian perlakuan (posttest)……….
45
46
47
BAB VI PEMBAHASAN HASIL PENELITIAN ……….. 49 6.1 Subyek Penelitian ………... 49 6.2 Distribusi dan Homogenitas Data Hasil Penelitian ……. .. 49 6.3 Pengaruh Pemberian Ekstrak Daun Acalypha Indica Terhadap
Waktu dan Koagulasi ………. ………. 50 BAB VII SIMPULAN DAN SARAN ………... 53
7.1 7.2 Simpulan ……… Saran ……….. 53 53 DAFTAR PUSTAKA ……….. 54 LAMPIRAN – LAMPIRAN ……… 60
xiv
DAFTAR GAMBAR
Halaman
2.1 Tanaman Tumpang Payuk………. 9
2.2 Antitrombosis……….. 14
2.3 Protrombosis……… 15
2.4 Fungsi trombosit………. 16
2.5 Adhesi trombosit ……….. 17
2.6 Sintesis prostasiklin dan tromboksan……… 19
2.7 Mencit……… 23
3.1 Konsep Penelitian……… 27
4.1 Rancangan Penelitian………. 28
4.2 Alur penelitian………... 39
5.1 Perbandingan Waktu Perdarahan Antara Kelompok Kontrol Dengan Kelompok Perlakuan ……… 45
5.2 Perbandingan Koagulasi Antara Kelompok Kontrol Dengan Kelompok Perlakuan ……….. 48
xv DAFTAR TABEL 5.1 5.2 5.3 5.4 5.5 5.6
Hasil Uji Normalitas Data Waktu Perdarahan dan Koagulasi Sebelum dan Sesudah Perlakuan ……….
Homogenitas Data Waktu Perdarahan dan Koagulasi Antar Kelompok Perlakuan ………
Perbandingan Waktu Perdarahan Sebelum dan Sesudah Perlakuan…. Perbedaan Rerata Waktu Perdarahan Antar Kelompok Sebelum dan Setelah Diberikan Perlakuan ……….. Perbandingan Koagulasi Sebelum dan Sesudah Pemberian Perlakuan .. Perbedaan Rerata Koagulasi Antar Kelompok Sebelum dan Setelah Diberikan Perlakuan ……… 41 42 43 44 46 47
xvi
DAFTAR SINGKATAN
ADP : Adenosin Diposfat
C AMP : cyclic Adenosinmonophosfat TXA2 : Tromboksan A2
TXB2 : Tromboksan B2
t-PA : tissue Plasminogen Aktivator
PGI2 : Prostacyclin
NO : Nitrit Oksida AT : Antitrombin
vWF : von Willebrand Faktor
xvii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1 : Keterangam kelaikan Etik
Lampiran 2 : Hasil determinasi tanaman Tumpang Payuk Lampiran 3 : Surat keterangan hasil laboratorium
Lampiran 4 : Hasil analisis fitokimia ekstrak Acalypha indica
Lampiran 5 : Profil Kromatogram ekstrak Acalypha indica
Lampiran 6 : Uji waktu perdarahan Lampiran 7 : Uji waktu koagulasi
Lampiran 8 : Uji Normalitas Data Waktu Perdarahan dan Koagulasi
Lampiran9 : Uji t-independent Data Waktu Perdarahan dan Koagulasi antar Perlakuan
Lampiran 10 :Uji t-paired Data Waktu Perdarahan dan Koagulasi pada Masing-masing Kelompok Perlakuan antara Sebelum dengan Sesudah Perlakuan
