16
L a m p ir a n 1 T a h ap P e n el it ia n . T ik u s n = 4 0 N o rm al n = 1 0 H ip er li p id em ia n = 1 0 P er la k u an I n = 5 P er la k u an I I n = 5 P er la k u an I V n = 5 P er la k u an I II n = 5 A d ap ta si 2 m in g g u I n d u k si k o le st er o l 9 m in g g u P em b ed a h a n a w al @ 5 e k o r A n al is is L ip id p er o k si d a h at i P em b u at an p a k an k o le st er o l A n al is is k o le st er o l P en ce k o k a n e k st ra k se la m a 5 m in g g u P em b ed a h a n a k h ir @ 5 e k o r A n al is is st at is ti k
18
Lampiran 2 Perhitungan dosis jumlah kolesterol kuning telur, lemak kambing dan PTU.
1. kolesterol kuning telur
Jika diketahui kolesterol kuning telur 60 mg, jumlah pakan kolesterol yang diinginkan sebesar 30 Kg dengan persentase kolesterol kuning telur sebesar 1.5%, maka kuning telur yang dibutuhkan adalah:
1.5 g x 30.000 g pakan = 450 g kolesterol 100 g
450 g x 1 g kuning telur = 750 g kuning telur 0.060 g
2. Lemak kambing (5% b/b)
5 g x 30.000 g pakan = 1500 g lemak kambing 100 g
3. PTU 0.01% b/V (0.5 mg/Kg BB)
Diketahui konsentrasi PTU 0,01%, PTU 100 mg dengan bobot tablet PTU 236 mg, maka jumlah PTU yang ditimbang:
0.01% = 0.01 g/100 mL air = 10 mg/100 mL = 0.1 mg/1mL PTU 100 mg ∞ 236 mg 1 mg ∞ 2.36 mg
10 mg/100 mL PTU, maka 0.0236 g/100 mL air
Jika dosis yang ingin dicekokan 0.5 mg/Kg BB pada tikus dengan bobot 200 g, maka volume yang dicekokan:
0.5 mg x 0.2 Kg = 0.1 mg 1 Kg
Dosis PTU yang diinginkan: 0.1 mg = 0.1 mg 1 mL x mL = 1mL
Lampiran 3 Hasil kurva standar TMP. Serapan (A) Konsentrasi (nmol/mL) A1 A2 Rata-rata 0.1 0.011 0.018 0.014 0.3 0.022 0.030 0.026 0.5 0.039 0.040 0.040 0.8 0.064 0.065 0.064 1.0 0.088 0.090 0.089 2.0 0.183 0.192 0.188 3.0 0.286 0.274 0.280 6.0 0.571 0.592 0.582 9.0 0.858 0.870 0.864 12.0 1.128 0.958 1.043 14.0 1.210 1.346 1.278
Kurva standar TMP rata-rata
y = 0,0915x - 0,0063 R2 = 0,9947 -0,2 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2 1,4 0 2 4 6 8 10 12 14 16 Konsentrasi A b s o rb a n Contoh perhitungan:
Dari persamaan garis pada kurva standar: y= 0.0915x – 0.0063, r = 99.47% Misal absorbansi sampel 0.070, maka: 0.070= 0.0915x – 0.0063
x= 0.8338 µM Volume total homogenat hati = 10.281 mL
Volume total homogenat hati yang digunakan= 0.1 mL
Bobot hati pada 10% b/v = 1.0281g yang berasal dari 1.0281g/10.281 mL Konsentrasi lipid peroksida dalam nmol/g:
= C (µM) x volume total homogenat hati (mL)/ volume homogenat hati yang direaksikan (mL) bobot hati pada 10% b/v homogenat (g)
= 0.8338 µM x 10.281 mL/0.1 mL 1.0281 g
20
Lampiran 4 Perubahan rata-rata bobot badan tikus selama percobaan. Rata-rata bobot badan (g) kelompok
minggu
ke- normal hiperlipidemia ekstrak 1x:1y:1z ekstrak 2x:1y:1z ekstrak 1x:0y:1z ekstrak 1x:0y:0z 0 191.00 211.00 252.00 256.00 240.00 234.00 1 210.00 226.00 268.00 258.00 262.00 250.00 2 209.00 226.00 273.00 275.00 271.00 251.00 3 216.00 264.00 317.00 321.00 310.00 287.00 4 222.50 286.00 347.00 345.00 349.00 316.00 5 227.00 292.50 357.00 352.00 360.00 320.00 6 234.00 296.50 373.00 380.00 382.00 337.00 7 238.50 323.00 374.00 389.00 384.00 349.00 8 246.50 354.50 419.00 429.00 425.00 385.00 9 246.00 367.50 441.00 446.00 447.00 394.00 10 252.00 382.00 459.00 474.00 469.00 417.00 11 255.50 394.50 473.00 478.00 474.00 416.00 12 251.50 403.50 478.00 476.00 475.00 420.00 13 267.00 468.00 472.00 470.00 476.00 422.00 14 264.00 452.00 467.00 468.00 466.00 411.00 15 256.25 451.00 463.00 468.00 466.00 432.00 16 267.50 459.00 469.00 479.00 476.00 427.00
Lampiran 5 Data konsentrasi lipid peroksida hati saat peningkatan kolesterol pada minggu ke-9. Normal Hiperlipidemia No A Konsentrasi lipid peroksida (nmol/g)
No A lipid peroksida Konsentrasi (nmol/g) 1 0,070 83,388 1 0,298 332,568 2 0,023 32,021 2 0,703 775,191 3 0,061 73,552 3 0,218 245,137 4 0,058 70,273 4 0,672 741,312 5 0,155 176,284 rata-rata 0,473 523,552 rata-rata 0,073 87,104 SD 0,25 273,70 SD 0,05 53,54
Lampiran 6 Data konsentrasi lipid peroksida hati diakhir perlakuan pada minggu ke-14. Normal Hiperlipidemia No A Konsentrasi lipid peroksida (nmol/g) No A Konsentrasi lipid peroksida (n mol/g) 1 0,126 144,590 1 0,683 753,333 2 0,029 38,579 2 1,166 1281,202 3 0,087 101,967 3 0,751 827,650 4 0,075 88,852 4 0,662 730,382 Rata-rata 0,079 93,497 5 0,796 876,831 SD 0,04 43,66 Rata-rata 0,8116 893,879 SD 0,21 224,27
Lampiran 6 (Lanjutan)
Kelompok perlakuan ekstrak 1x:1y:1z Kelompok perlakuan ekstrak 2x:1y:1z
No A Konsentrasi lipid peroksida (nmol/g) No A Konsentrasi lipid peroksida (nmol/g) 1 0,364 404,699 1 0,855 941,312 2 0,771 849,508 2 0,202 227,650 3 1,010 1110,710 3 0,616 680,109 4 0,841 926,011 4 0,965 1061,530 5 1,121 1232,022 5 0,878 966,448 Rata-rata 9,046 904,590 Rata-rata 0,703 775,409 SD 3,17 317,44 SD 0,31 337,27
Kelompok perlakuan ekstrak 1x:0y:1z Kelompok perlakuan ekstrak 1x:0y:0z
No A Konsentrasi lipid peroksida (nmol/g) No A Konsentrasi lipid peroksida (nmol/g) 1 0,447 495,409 1 0,712 785,027 2 0,522 577,377 2 0,774 852,787 3 0,707 779,563 3 0,874 962,076 4 0,661 729,289 4 0,852 938,033 5 0,645 711,803 5 0,550 607,978 Rata-rata 0,596 658,688 Rata-rata 0,752 829,180 S D 0,11 117,99 S D 0,13 142,26
Lampiran 7 Data konsentrasi kolesterol hati.
Normal Hiperlipidemia
No
Konsentrasi kolesterol hati
(mg/g bobot hati)
No Konsentrasi kolesterol hati (mg/g bobot hati) 1 0,227 1 0,827 2 0,141 2 1,197 3 0,216 3 0,867 4 0,198 4 1,432 5 0,170 5 0,493 6 0,504 6 1,139 7 0,234 7 0,626 8 0,351 8 1,148 9 0,269 9 0,728 rata-rata 0,257 rata-rata 0,940 SD 0,11 SD 0,31
Kelompok perlakuan ekstrak 1x:1y:1z Kelompok perlakuan ekstrak 2x:1y:1z No Konsentrasi kolesterol hati
(mg/g bobot hati) No
Konsentrasi kolesterol hati (mg/g bobot hati) 1 0,547 1 0,710 2 0,511 2 0,810 3 0,998 3 0,564 4 1,123 4 0,600 5 1,051 5 0,827 rata-rata 0,846 rata-rata 0,702 SD 0,29 SD 0,12
22
Lampiran 7 (Lanjutan)
Kelompok perlakuan ekstrak 1x:0y:1z Kelompok perlakuan ekstrak 1x:0y:0z No Konsentrasi kolesterol hati
(mg/g bobot hati) No
Konsentrasi kolesterol hati (mg/g bobot hati) 1 0,614 1 0,907 2 1,184 2 1,029 3 0,819 3 0,614 4 0,751 4 0,974 5 1,270 5 0,894 rata-rata 0,927 0,883 SD 0,28 rata-rata SD 0,16
Keterangan : data kolesterol hati adalah data sekunder. Lampiran 8 Analisis statistik rancangan acak lengkap. Analisis ragam konsentrasi lipid peroksida hati minggu ke-16
Jumlah kuadrat Derajat bebas Kuadrat tengah F p Perlakuan 2228504.460 5 445700.892 11.418 .000 Galat 897838.161 23 39036.442 Total 3126342.621 28
Analisis ragam konsentrasi kolesterol selama lima minggu perlakuan
Jumlah kuadrat Derajat bebas Kuadrat tengah F p. Perlakuan 4722.291 5 944.458 1.366 .273 Galat 15899.920 23 691.301 Total 20622.211 28
Uji Duncan konsentrasi lipid peroksida hati minggu ke-16
Subset for alpha = 0.1
Perlakuan N 1 2 3 1.00 4 93.4966 5.00 5 658.6874 4.00 5 775.4094 775.4094 6.00 5 829.1803 829.1803 2.00 5 893.8790 893.8790 3.00 5 1008.8532 Sig. 1.000 .103 .106
Uji Duncan konsentrasi kolesterol selama lima minggu perlakuan
Subset for alpha = 0.1
VAR00001 N 1 2 1.00 4 80.5000 3.00 5 86.8824 6.00 5 89.9412 89.9412 4.00 5 97.1176 97.1176 5.00 5 103.9412 103.9412 2.00 5 119.9412 Sig. .228 .118
Lampiran 8 (Lanjutan)
Uji Duncan bobot badan hewan coba pada minggu kelima perlakuan
Subset for alpha = .05
VAR00001 N 1 2 1.00 4 267.5000 6.00 5 427.0000 2.00 5 459.0000 3.00 5 469.0000 5.00 5 476.0000 4.00 5 479.0000 Sig. 1.000 .128
Uji Duncan bobot badan hewan coba setelah satu minggu induksi pada kelompok normal
Subset for alpha = .05
VAR00003 N 1 1.00 10 191.0000 3.00 10 209.0000 2.00 10 210.0000 4.00 10 216.0000 Sig. .051
Uji Duncan bobot badan hewan coba setelah satu minggu induksi pada kelompok perlakuan
Subset for alpha = .05
VAR00005 N 1 2 3 1.00 10 231.6000 2.00 10 250.6000 3.00 10 253.8000 4.00 10 295.9000 Sig. 1.000 .644 1.000
Lampiran 9 Hasil analisis korelasi antara lipid peroksida hati dan kolesterol hati serta TPC.
Korelasi antara lipid peroksida hati dan kolesterol hati serta TPC kelompok hiperlipidemia.
Lipid peroksida hati
Kolesterol
hati TPC
Lipid peroksida hati Correlation Pearson 1 .182 .336
Sig. (2-tailed) . .639 .377
N 9 9 9
Kolesterol hati Pearson
Correlation .182 1 .413 Sig. (2-tailed) .639 . .270 N 9 9 9 TPC Pearson Correlation .336 .413 1 Sig. (2-tailed) .377 .270 . N 9 9 9
24
Lampiran 9 (Lanjutan)
Korelasi antara lipid peroksida hati dan kolesterol hati serta TPC kelompok perlakuan ekstrak 1x:1y:1z.
Lipid peroksida hati
Kolesterol
hati TPC
Lipid peroksida hati Pearson
Correlation 1 .732 .742
Sig. (2-tailed) . .159 .151
N 5 5 5
Kolesterol hati Pearson
Correlation .732 1 .357 Sig. (2-tailed) .159 . .555 N 5 5 5 TPC Pearson Correlation .742 .357 1 Sig. (2-tailed) .151 .555 . N 5 5 5
Korelasi antara lipid peroksida hati dan kolesterol hati serta TPC kelompok perlakuan ekstrak 2x:1y:1z.
Lipid peroksida hati
Kolesterol
hati TPC
Lipid peroksida hati Pearson
Correlation 1 -.310 -.477
Sig. (2-tailed) . .612 .417
N 5 5 5
Kolesterol hati Pearson
Correlation -.310 1 -.126 Sig. (2-tailed) .612 . .840 N 5 5 5 TPC Pearson Correlation -.477 -.126 1 Sig. (2-tailed) .417 .840 . N 5 5 5
Korelasi antara lipid peroksida hati dan kolesterol hati serta TPC kelompok perlakuan ekstrak 1x:0y:1z.
Lipid peroksida hati
Kolesterol
hati TPC
Lipid peroksida hati Pearson
Correlation 1 .171 .069
Sig. (2-tailed) . .784 .912
N 5 5 5
Kolesterol hati Pearson
Correlation .171 1 -.061 Sig. (2-tailed) .784 . .922 N 5 5 5 TPC Pearson Correlation .069 -.061 1 Sig. (2-tailed) .912 .922 . N 5 5 5
Lampiran 9 (Lanjutan)
Korelasi antara lipid peroksida hati dan kolesterol hati serta TPC kelompok perlakuan ekstrak 1x:0y:0z.
Lipid peroksida hati
Kolesterol
hati TPC
Lipid peroksida hati Pearson
Correlation 1 -.286 .359
Sig.
(2-tailed) . .641 .552
N 5 5 5
Kolesterol hati Pearson
Correlation -.286 1 -.065 Sig. (2-tailed) .641 . .917 N 5 5 5 TPC Pearson Correlation .359 -.065 1 Sig. (2-tailed) .552 .917 . N 5 5 5
Korelasi antara lipid peroksida hati dan kolesterol hati pada seluruh kelompok perlakuan ekstrak. Correlations 1 .174 .463 20 20 .174 1 .463 20 20 Pearson Correlation Sig. (2-tailed) N Pearson Correlation Sig. (2-tailed) N
Lipid peroksida hati
Kolesterol hati
Lipid peroksida hati
Kolesterol hati
Korelasi antara lipid peroksida hati dan TPC pada seluruh kelompok peerlakuan ekstrak. Correlations 1 .032 .893 20 20 .032 1 .893 20 20 Pearson Correlation Sig. (2-tailed) N Pearson Correlation Sig. (2-tailed) N
Lipid peroksida hati
TPC
Lipid