LECTURE 3A: ENZYME CHARACTERISTICS

(1)

LECTURE 3A:

(2)

Struktur Enzim

M+ Protein Molekul organik Aktivator ion logam Tempat aktif

Apoenzyme + Coenzyme = Holoenzyme

Bagian protein Grup prostetik Enzim lengkap

(tidak aktif) (tidak aktif) (aktif) Apoenzim _Coenzim

Substrat

(3)

Apoenzyme

the protein part of the enzyme molecule – Struktur protein enzim sangat kompleks dan

berfungsi menyediakan lingkungan untuk

kelangsungan reaksi dengan mekanisme tertentu

– Fungsi lain adalah sebagai tempat patron

(template) substrat, dan karenanya protein enzim berfungsi mengenal substrat yang

berfungsi mengenal substrat yang

dipertimbangkan menjadi dasar spesifitas enzim

Cofactor

the additional chemical groups appearing in those enzymes that are conjugated proteins.

(4)

Cofactor

These cofactors are required for enzyme activity and may consist of metal ions or complex organic

molecules. Some enzymes require both types of cofactors.

Cofactors can be divided into three groups Cofactors can be divided into three groups

(i) Prosthetic group (ii) coenzyme

(5)

Prosthetic group

– In the enzyme molecule, the cofactor may be

weakly attached to the apoenzyme, or it may be tightly bound to the protein. If it is tightly bound, the cofactor is called a prosthetic group

– Example: bagian porphyrin (moiety) dari hemoprotein

peroxidase dan flavin-adenine dinucleotide dalam succinic peroxidase dan flavin-adenine dinucleotide dalam succinic dehydrogenase

Coenzyme

– When the cofactor of an enzyme is a complex

organic molecule other than a protein, the cofactor is called a coenzyme

– Example: NAD+, NADP+, tetrahydrofolic acid dan thyamin pyrophosphate

(6)

• Perubahan Glucose 6-phosphate ke 6 Phosphogluconic acid lactone oleh

suatu enzim

dehydrogenase

.

– Coenzymenya adalah coenzyme II; NADP+_{& TPN (Triphosphopyridine}

nucleotide) yang disebut

Zwischenferment pada awalnya. nucleotide) yang disebut

Zwischenferment pada awalnya.

– Reaksi ini terjadi melalui dua tahap

reaksi yaitu oksidasi fosfat gula (glucose 6-phosphate) dan reduksi coenzyme

(7)

(8)

Activator

– When the cofactor of an enzyme is a metal

ion, such as the ions of magnesium, zinc, ion

or manganese), the cofactor is called an

activator

– Examples: K+, Mn+2, Mg+2, Ca+2 dan Zn+2

Isoenzyme

– Enzymes that perform the same catalytic function in

different body tissues or different organisms, but which have different sequences of amino acids in

various portions of their polypeptide chain are called isoenzymes. Isoenzymes can be separated from one another by electrophoresis.

(9)

Proenzyme or zymogen

− Proenzyme (or zymogen) is the name given to the inactive form of an enzyme. Enzymes (especially

digestive enzymes) are often secreted in their inactive form, transported to the place where activity is desired, and then converted to their active forms.

Substrates

− The substrate is the chemical substance or

substances upon which the enzyme acts substances upon which the enzyme acts

(10)

• Enzim monomerik;Enzim monomerik;Enzim monomerik;Enzim monomerik; yang memiliki hanya satu yang memiliki hanya satu yang memiliki hanya satu yang memiliki hanya satu rantai polipeptida dimana terdapat tempat aktif. rantai polipeptida dimana terdapat tempat aktif. rantai polipeptida dimana terdapat tempat aktif. rantai polipeptida dimana terdapat tempat aktif.

• Enzim oligomerik;Enzim oligomerik;Enzim oligomerik;Enzim oligomerik; yang memiliki paling sedikit 2 yang memiliki paling sedikit 2 yang memiliki paling sedikit 2 yang memiliki paling sedikit 2 dan sebanyak 60 atau lebih subunit yang terikat dan sebanyak 60 atau lebih subunit yang terikat dan sebanyak 60 atau lebih subunit yang terikat dan sebanyak 60 atau lebih subunit yang terikat kuat dalam pembentukan protein enzim aktif. kuat dalam pembentukan protein enzim aktif. kuat dalam pembentukan protein enzim aktif. kuat dalam pembentukan protein enzim aktif.

• Kompleks multienzim;Kompleks multienzim;Kompleks multienzim;Kompleks multienzim; yang terdiri dari sejumlah yang terdiri dari sejumlah yang terdiri dari sejumlah yang terdiri dari sejumlah

• Kompleks multienzim;Kompleks multienzim;Kompleks multienzim;Kompleks multienzim; yang terdiri dari sejumlah yang terdiri dari sejumlah yang terdiri dari sejumlah yang terdiri dari sejumlah enzim yang terikat kuat

enzim yang terikat kuat enzim yang terikat kuat enzim yang terikat kuat

(11)

Enzym

Enzym----Substrate Interaction

Substrate Interaction

• Lock and Key" HypothesisLock and Key" HypothesisLock and Key" HypothesisLock and Key" Hypothesis

• The "Induced Fit" Hypothesis The "Induced Fit" Hypothesis The "Induced Fit" Hypothesis The "Induced Fit" Hypothesis

"Lock and Key" Hypothesis "Lock and Key" Hypothesis"Lock and Key" Hypothesis "Lock and Key" Hypothesis

Emil Fischer in 1890 proposed Emil Fischer in 1890 proposed Emil Fischer in 1890 proposed Emil Fischer in 1890 proposed "Lock and Key" Hypothesis "Lock and Key" Hypothesis "Lock and Key" Hypothesis "Lock and Key" Hypothesis Emil Fischer in 1890 proposed Emil Fischer in 1890 proposed Emil Fischer in 1890 proposed Emil Fischer in 1890 proposed "Lock and Key" Hypothesis "Lock and Key" Hypothesis "Lock and Key" Hypothesis "Lock and Key" Hypothesis The shape, or configuration, of the active site is especially The shape, or configuration, of the active site is especially The shape, or configuration, of the active site is especially The shape, or configuration, of the active site is especially

designed for the specific substrate involved. designed for the specific substrate involved. designed for the specific substrate involved. designed for the specific substrate involved.

(12)

Because the configuration is determined by the Because the configuration is determined by the Because the configuration is determined by the Because the configuration is determined by the amino acid sequence of the enzyme, the native amino acid sequence of the enzyme, the native amino acid sequence of the enzyme, the native amino acid sequence of the enzyme, the native

configuration of the entire enzyme molecule must be configuration of the entire enzyme molecule must be configuration of the entire enzyme molecule must be configuration of the entire enzyme molecule must be intact for the active site to have the correct

intact for the active site to have the correct intact for the active site to have the correct intact for the active site to have the correct

configuration. In such a case, the substrate then fits configuration. In such a case, the substrate then fits configuration. In such a case, the substrate then fits configuration. In such a case, the substrate then fits into the active site of the enzyme in much the same into the active site of the enzyme in much the same into the active site of the enzyme in much the same into the active site of the enzyme in much the same way as a key fits into a lock.

way as a key fits into a lock. way as a key fits into a lock. way as a key fits into a lock. way as a key fits into a lock. way as a key fits into a lock. way as a key fits into a lock. way as a key fits into a lock.

(13)

Lock & Key Model

(14)

The "Induced Fit" Hypothesis The "Induced Fit" Hypothesis The "Induced Fit" Hypothesis The "Induced Fit" Hypothesis

• Enzymes are highly flexible, conformationally Enzymes are highly flexible, conformationally Enzymes are highly flexible, conformationally Enzymes are highly flexible, conformationally

dynamic molecules, and many of their remarkable dynamic molecules, and many of their remarkable dynamic molecules, and many of their remarkable dynamic molecules, and many of their remarkable properties, including substrate binding and catalysis, properties, including substrate binding and catalysis, properties, including substrate binding and catalysis, properties, including substrate binding and catalysis, are due to their structural pliancy.

are due to their structural pliancy. are due to their structural pliancy. are due to their structural pliancy.

• Realization of the conformational flexibility of Realization of the conformational flexibility of Realization of the conformational flexibility of Realization of the conformational flexibility of

proteins led Daniel Koshland to hypothesize that the proteins led Daniel Koshland to hypothesize that the proteins led Daniel Koshland to hypothesize that the proteins led Daniel Koshland to hypothesize that the binding of a substrate (S) by an enzyme is an

binding of a substrate (S) by an enzyme is an binding of a substrate (S) by an enzyme is an binding of a substrate (S) by an enzyme is an binding of a substrate (S) by an enzyme is an binding of a substrate (S) by an enzyme is an binding of a substrate (S) by an enzyme is an binding of a substrate (S) by an enzyme is an

interactive process. That is, the shape of the enzyme's interactive process. That is, the shape of the enzyme's interactive process. That is, the shape of the enzyme's interactive process. That is, the shape of the enzyme's active site is actually modified upon binding S, in a active site is actually modified upon binding S, in a active site is actually modified upon binding S, in a active site is actually modified upon binding S, in a process of dynamic recognition between enzyme and process of dynamic recognition between enzyme and process of dynamic recognition between enzyme and process of dynamic recognition between enzyme and substrate aptly called induced fit.

substrate aptly called induced fit. substrate aptly called induced fit. substrate aptly called induced fit.

(15)

• In essence, substrate binding alters the conformation In essence, substrate binding alters the conformation In essence, substrate binding alters the conformation In essence, substrate binding alters the conformation of the protein, so that the protein and the substrate of the protein, so that the protein and the substrate of the protein, so that the protein and the substrate of the protein, so that the protein and the substrate "fit" each other more precisely. The process is truly "fit" each other more precisely. The process is truly "fit" each other more precisely. The process is truly "fit" each other more precisely. The process is truly interactive in that the conformation of the substrate interactive in that the conformation of the substrate interactive in that the conformation of the substrate interactive in that the conformation of the substrate also changes as it adapts to the conformation of the also changes as it adapts to the conformation of the also changes as it adapts to the conformation of the also changes as it adapts to the conformation of the enzyme.

enzyme. enzyme. enzyme.

(16)

(17)

Enzyme Kinetics

• Enzymes follow zero order kinetics when substrate

concentrations are high. Zero order means there is no increase in the rate of the reaction when more substrate is added.

• Given the following breakdown of sucrose to glucose and fructose

Sucrose + H20 Glucose + Fructose Sucrose + H20 Glucose + Fructose

O H HO H HO H OH OH H H OH OH HO H H OH O H H HO H H H OH

(18)

(19)

(20)

• Reaksi bersifat dapat balik yaitu Reaksi bersifat dapat balik yaitu Reaksi bersifat dapat balik yaitu Reaksi bersifat dapat balik yaitu sebagian senyawa sebagian senyawa sebagian senyawa sebagian senyawa dapat disintesis kembali dari zat yang terdapat

dapat disintesis kembali dari zat yang terdapat dapat disintesis kembali dari zat yang terdapat dapat disintesis kembali dari zat yang terdapat dalam reaksi

dalam reaksi dalam reaksi dalam reaksi

• Jika faktor lingkungan tetap, kecepatan Jika faktor lingkungan tetap, kecepatan Jika faktor lingkungan tetap, kecepatan Jika faktor lingkungan tetap, kecepatan pembentukan produk (kecepatan reaksi) pembentukan produk (kecepatan reaksi) pembentukan produk (kecepatan reaksi) pembentukan produk (kecepatan reaksi)

ditentukan oleh konsentrasi enzim dan substrat ditentukan oleh konsentrasi enzim dan substrat ditentukan oleh konsentrasi enzim dan substrat ditentukan oleh konsentrasi enzim dan substrat

V V V

V = kecepatan reaksi, = kecepatan reaksi, = kecepatan reaksi, = kecepatan reaksi,

V V V

V = kecepatan reaksi, = kecepatan reaksi, = kecepatan reaksi, = kecepatan reaksi,

[E] [E] [E]

[E] ==== konsentrasi enzim & konsentrasi enzim & konsentrasi enzim & konsentrasi enzim &

[S] [S] [S]

(21)

V _[E]

2 1

3 V

Apabila [S] tetap, kecepatan reaksi me Apabila [S] tetap, kecepatan reaksi meApabila [S] tetap, kecepatan reaksi me

Apabila [S] tetap, kecepatan reaksi me----ningkat sebanding ningkat sebanding ningkat sebanding ningkat sebanding

dengan peningkatan [E] dengan peningkatan [E]dengan peningkatan [E] dengan peningkatan [E]

W aktu [E]

4

Gambar 6. Hubungan antara kecepatan reaksi (V) dengan Gambar 6. Hubungan antara kecepatan reaksi (V) dengan Gambar 6. Hubungan antara kecepatan reaksi (V) dengan Gambar 6. Hubungan antara kecepatan reaksi (V) dengan

konsentrasi enzim (kiri), dan dengan waktu pada [E] yang berbeda konsentrasi enzim (kiri), dan dengan waktu pada [E] yang berbeda konsentrasi enzim (kiri), dan dengan waktu pada [E] yang berbeda konsentrasi enzim (kiri), dan dengan waktu pada [E] yang berbeda (kanan)

(kanan)(kanan) (kanan)

(22)

• Apabila konsentrasi enzim tetap dan substrat Apabila konsentrasi enzim tetap dan substrat Apabila konsentrasi enzim tetap dan substrat Apabila konsentrasi enzim tetap dan substrat meningkat, V akan meningkat mula

meningkat, V akan meningkat mula meningkat, V akan meningkat mula

meningkat, V akan meningkat mula----mula dan mula dan mula dan mula dan

proporsional dengan peningkatan [S], tapi pada [S] yang proporsional dengan peningkatan [S], tapi pada [S] yang proporsional dengan peningkatan [S], tapi pada [S] yang proporsional dengan peningkatan [S], tapi pada [S] yang lebih tinggi, laju peningkatan V menurun secara

lebih tinggi, laju peningkatan V menurun secara lebih tinggi, laju peningkatan V menurun secara lebih tinggi, laju peningkatan V menurun secara perlahan

perlahan perlahan

perlahan----lahan hingga kemudian V hampir tidak lahan hingga kemudian V hampir tidak lahan hingga kemudian V hampir tidak lahan hingga kemudian V hampir tidak tergantung pada [S]. tergantung pada [S]. tergantung pada [S]. tergantung pada [S]. Vmax V Gambar 2.2. Hubungan Gambar 2.2. Hubungan Gambar 2.2. Hubungan Gambar 2.2. Hubungan

K_M [S]

Gambar 2.2. Hubungan Gambar 2.2. Hubungan Gambar 2.2. Hubungan Gambar 2.2. Hubungan antara kecepatan reaksi (V) antara kecepatan reaksi (V) antara kecepatan reaksi (V) antara kecepatan reaksi (V) dengan konsentrasi

dengan konsentrasi dengan konsentrasi dengan konsentrasi

substrat ([S]) pada reaksi substrat ([S]) pada reaksi substrat ([S]) pada reaksi substrat ([S]) pada reaksi yang dikatalisis oleh suatu yang dikatalisis oleh suatu yang dikatalisis oleh suatu yang dikatalisis oleh suatu enzim

enzimenzim enzim

(23)

• Leonor Michaelis dan Maud Menten pada tahun 1913 Leonor Michaelis dan Maud Menten pada tahun 1913 Leonor Michaelis dan Maud Menten pada tahun 1913 Leonor Michaelis dan Maud Menten pada tahun 1913 mengusulkan suatu model untuk menjelaskan kinetik mengusulkan suatu model untuk menjelaskan kinetik mengusulkan suatu model untuk menjelaskan kinetik mengusulkan suatu model untuk menjelaskan kinetik reaksi enzimatis untuk satu substrat dan satu enzim reaksi enzimatis untuk satu substrat dan satu enzim reaksi enzimatis untuk satu substrat dan satu enzim reaksi enzimatis untuk satu substrat dan satu enzim (Uni

(Uni (Uni

(Uni----Uni reaction)Uni reaction)Uni reaction)Uni reaction)

Hipotesisnya adalah bahwa Hipotesisnya adalah bahwa Hipotesisnya adalah bahwa Hipotesisnya adalah bahwa

MICHAELIS-MENTEN MODEL

Hipotesisnya adalah bahwa Hipotesisnya adalah bahwa Hipotesisnya adalah bahwa Hipotesisnya adalah bahwa

Enzim (E), yang bertindak sebagai reaktan tapi Enzim (E), yang bertindak sebagai reaktan tapi Enzim (E), yang bertindak sebagai reaktan tapi Enzim (E), yang bertindak sebagai reaktan tapi

tidak digunakan dalam reaksi, menyatu dengan tidak digunakan dalam reaksi, menyatu dengan tidak digunakan dalam reaksi, menyatu dengan tidak digunakan dalam reaksi, menyatu dengan substrat (S) dalam suatu kompleks ES dalam

substrat (S) dalam suatu kompleks ES dalam substrat (S) dalam suatu kompleks ES dalam substrat (S) dalam suatu kompleks ES dalam pembentukan produk

pembentukan produk pembentukan produk pembentukan produk

(24)

3 k 1 k

E

S

E+

S

k

E+

P

2 k 4

E = Enzyme, S = Substrate, P = Product E = Enzyme, S = Substrate, P = ProductE = Enzyme, S = Substrate, P = Product E = Enzyme, S = Substrate, P = Product ES = Enzyme

ES = EnzymeES = Enzyme

ES = Enzyme----Substrate complex Substrate complex Substrate complex Substrate complex k1, k2, k3 & k4 = rate constants k1, k2, k3 & k4 = rate constantsk1, k2, k3 & k4 = rate constants k1, k2, k3 & k4 = rate constants

(25)

When the substrate concentration becomes large enough to force When the substrate concentration becomes large enough to force When the substrate concentration becomes large enough to force When the substrate concentration becomes large enough to force the equilibrium to form completely all ES the second step in the the equilibrium to form completely all ES the second step in the the equilibrium to form completely all ES the second step in the the equilibrium to form completely all ES the second step in the reaction becomes rate limiting because no more ES can be made reaction becomes rate limiting because no more ES can be made reaction becomes rate limiting because no more ES can be made reaction becomes rate limiting because no more ES can be made and the enzyme

and the enzymeand the enzyme

and the enzyme----substrate complex is at its maximum value.substrate complex is at its maximum value.substrate complex is at its maximum value.substrate complex is at its maximum value.

[ ]

P

_{[ ]}

_ES 2 k dt d v = =

[ES] is the difference between the rates of [ES] is the difference between the rates of [ES] is the difference between the rates of [ES] is the difference between the rates of ES formation minus the rates of its

ES formation minus the rates of its ES formation minus the rates of its ES formation minus the rates of its disappearance. disappearance. disappearance. disappearance. disappearance. disappearance. disappearance. disappearance.

[ ] [ ][ ] [ ] [ ]

ES

k

₁

E

S

k

₁

ES

k

₂

ES

dt

d

−

=

₋ 1

(26)

Assumption of equilibrium

kkkk----1>>k2 (k2>>k3) the formation of product is so much slower 1>>k2 (k2>>k3) the formation of product is so much slower 1>>k2 (k2>>k3) the formation of product is so much slower 1>>k2 (k2>>k3) the formation of product is so much slower than the formation of the ES complex. That we can assume: than the formation of the ES complex. That we can assume:than the formation of the ES complex. That we can assume: than the formation of the ES complex. That we can assume:

3 k 1 k

E

S

E+

S

k

E+

P

2 k 4

Ks is the dissociation constant for the ES complex. Ks is the dissociation constant for the ES complex.Ks is the dissociation constant for the ES complex. Ks is the dissociation constant for the ES complex.

]

ES

[

]

S

][

E

[

K

1 2 S

=

(27)

Assumption of steady state

Transient phase where in the course of a reaction the concentration of ES does not change

2

[ ]

ES

₀

=

dt

d

(28)

V

S

K

_M

S

=

+

max

[ ]

Michaelis MichaelisMichaelis

Michaelis----Menten Model Menten Model Menten Model Menten Model

[ ] [ ] [ ]

E

_T

=

E

+

ES

The Km is the substrate The Km is the substrate The Km is the substrate The Km is the substrate concentration where vo concentration where vo concentration where vo concentration where vo equals one

equals oneequals one

(29)

There are a wide range of KM, Vmax , and efficiency seen in There are a wide range of KM, Vmax , and efficiency seen in There are a wide range of KM, Vmax , and efficiency seen in There are a wide range of KM, Vmax , and efficiency seen in enzymes

enzymesenzymes enzymes

But how do we analyze kinetic data? But how do we analyze kinetic data? But how do we analyze kinetic data? But how do we analyze kinetic data?

(30)

Penetuan K

_M_M_M_M

dan Vmax

• Harga KHarga KHarga KHarga K_M_M_M_M bervariasi sangat besar, tapi dari kebanyakan bervariasi sangat besar, tapi dari kebanyakan bervariasi sangat besar, tapi dari kebanyakan bervariasi sangat besar, tapi dari kebanyakan enzim berkisar diantara 10

enzim berkisar diantara 10 enzim berkisar diantara 10

enzim berkisar diantara 10----1111 _{---- 10}₁₀₁₀₁₀----6666 _{M (Tabel 2.1)}_{M (Tabel 2.1)}_{M (Tabel 2.1)}_{M (Tabel 2.1)}

tergantung substrat dan lingkungan seperti suhu dan tergantung substrat dan lingkungan seperti suhu dan tergantung substrat dan lingkungan seperti suhu dan tergantung substrat dan lingkungan seperti suhu dan kuantitas ion

kuantitas ion kuantitas ion kuantitas ion

• Untuk mendapatkan harga KUntuk mendapatkan harga KUntuk mendapatkan harga KUntuk mendapatkan harga K_M_M_M_M dan Vmax, analisis dan Vmax, analisis dan Vmax, analisis dan Vmax, analisis langsung persamaan diatas dapat dilakukan, tapi cara langsung persamaan diatas dapat dilakukan, tapi cara langsung persamaan diatas dapat dilakukan, tapi cara langsung persamaan diatas dapat dilakukan, tapi cara MMMM langsung persamaan diatas dapat dilakukan, tapi cara langsung persamaan diatas dapat dilakukan, tapi cara langsung persamaan diatas dapat dilakukan, tapi cara langsung persamaan diatas dapat dilakukan, tapi cara ini membutuhkan waktu yang lama, dan bantuan

ini membutuhkan waktu yang lama, dan bantuan ini membutuhkan waktu yang lama, dan bantuan ini membutuhkan waktu yang lama, dan bantuan

komputer sangat penting untuk mengoptimasi harga komputer sangat penting untuk mengoptimasi harga komputer sangat penting untuk mengoptimasi harga komputer sangat penting untuk mengoptimasi harga parameter persamaan dengan cepat.

parameter persamaan dengan cepat. parameter persamaan dengan cepat. parameter persamaan dengan cepat.

(31)

(32)

PENDEKATAN LAIN

• Linierisasi persamaanLinierisasi persamaanLinierisasi persamaanLinierisasi persamaan

Modifikasi persamaan ke bentuk linier Modifikasi persamaan ke bentuk linier Modifikasi persamaan ke bentuk linier Modifikasi persamaan ke bentuk linier sehingga dapat dianalisis dengan mudah sehingga dapat dianalisis dengan mudah sehingga dapat dianalisis dengan mudah sehingga dapat dianalisis dengan mudah

1. Persamaan “double 1. Persamaan “double 1. Persamaan “double

1. Persamaan “double----reciprocal” reciprocal” reciprocal” reciprocal” 1. Persamaan “double

1. Persamaan “double 1. Persamaan “double

1. Persamaan “double----reciprocal” reciprocal” reciprocal” reciprocal” atau “Lineweaver

atau “Lineweaveratau “Lineweaver

atau “Lineweaver----Burk” Burk” Burk” Burk” 2. Persamaan “Eadie

2. Persamaan “Eadie 2. Persamaan “Eadie

2. Persamaan “Eadie----Hofstee” Hofstee” Hofstee” Hofstee” 3. Persamaan “Hanes

3. Persamaan “Hanes 3. Persamaan “Hanes

(33)

Persamaan “double

Persamaan “double----reciprocal”

reciprocal”

atau “Lineweaver

atau “Lineweaver----Burk”

Burk”

• Jika ruas kiri dibalik dan demikian juga ruas kanan, Jika ruas kiri dibalik dan demikian juga ruas kanan, Jika ruas kiri dibalik dan demikian juga ruas kanan, Jika ruas kiri dibalik dan demikian juga ruas kanan, maka maka maka maka V V S K_M S = + max[ ] [ ] maka maka maka maka

• Sekarang persamaan ini akan mudah dianalisis dengan Sekarang persamaan ini akan mudah dianalisis dengan Sekarang persamaan ini akan mudah dianalisis dengan Sekarang persamaan ini akan mudah dianalisis dengan metode linier sedehana

metode linier sedehana metode linier sedehana metode linier sedehana

max max M V 1 ] S [ 1 . V K V 1 ++++ ====

(34)

• SekarangSekarangSekarangSekarang y = 1/V ; x = 1/[S] y = 1/V ; x = 1/[S]y = 1/V ; x = 1/[S] y = 1/V ; x = 1/[S] a = 1/Vmax ; b = K a = 1/Vmax ; b = K a = 1/Vmax ; b = K

a = 1/Vmax ; b = K_M_M_M_M/Vmax/Vmax/Vmax/Vmax

dapat dianalisis dengan y = a + bx dapat dianalisis dengan y = a + bx dapat dianalisis dengan y = a + bx dapat dianalisis dengan y = a + bx

• Jika 1/V dihubungkan dengan 1/[S], suatu garis Jika 1/V dihubungkan dengan 1/[S], suatu garis Jika 1/V dihubungkan dengan 1/[S], suatu garis Jika 1/V dihubungkan dengan 1/[S], suatu garis lurus akan dihasilkan yang memotong sumbu y lurus akan dihasilkan yang memotong sumbu y lurus akan dihasilkan yang memotong sumbu y lurus akan dihasilkan yang memotong sumbu y lurus akan dihasilkan yang memotong sumbu y lurus akan dihasilkan yang memotong sumbu y lurus akan dihasilkan yang memotong sumbu y lurus akan dihasilkan yang memotong sumbu y pada 1/Vmax dan sumbu x pada

pada 1/Vmax dan sumbu x pada pada 1/Vmax dan sumbu x pada

pada 1/Vmax dan sumbu x pada ----1/K1/K1/K1/K_M_M_M_M serta serta serta serta membentuk sudut terhadap sumbu x sebesar membentuk sudut terhadap sumbu x sebesar membentuk sudut terhadap sumbu x sebesar membentuk sudut terhadap sumbu x sebesar K

K K

(35)

K_M/Vmax

-1/K_M

1/[S] 1/Vmax

(36)

Persamaan “Eadie-Hofstee”

] S [ V ]) S [ K ( V _M ++++ ==== _max V V S K_M S = + max[ ] [ ] ] S [ V VK ] S [ V [S ] ==== −−−− VK _M ++++ V _max [ S ] V ==== −−−− _M ++++ _max ] S [ ] S [ V VK V ==== −−−− M ++++ max max M

V

]

S

[

V

K

V

====

−−−−

++++

(37)

• SekarangSekarangSekarangSekarang y = V ; x = V/[S] y = V ; x = V/[S]y = V ; x = V/[S] y = V ; x = V/[S] a = Vmax ; b = a = Vmax ; b = a = Vmax ; b = a = Vmax ; b = ----KKKK_M_M_M_M

• Jika V dihubungkan dengan V/[S], suatu garis Jika V dihubungkan dengan V/[S], suatu garis Jika V dihubungkan dengan V/[S], suatu garis Jika V dihubungkan dengan V/[S], suatu garis lurus akan dihasilkan yang memotong sumbu y lurus akan dihasilkan yang memotong sumbu y lurus akan dihasilkan yang memotong sumbu y lurus akan dihasilkan yang memotong sumbu y lurus akan dihasilkan yang memotong sumbu y lurus akan dihasilkan yang memotong sumbu y lurus akan dihasilkan yang memotong sumbu y lurus akan dihasilkan yang memotong sumbu y pada Vmax dan sumbu x pada Vmax/K

pada Vmax dan sumbu x pada Vmax/K pada Vmax dan sumbu x pada Vmax/K

pada Vmax dan sumbu x pada Vmax/K_M_M_M_M serta serta serta serta membentuk sudut terhadap sumbu x sebesar K membentuk sudut terhadap sumbu x sebesar K membentuk sudut terhadap sumbu x sebesar K membentuk sudut terhadap sumbu x sebesar K_M_M_M_M

(38)

Persamaan Eadie-Hofstee V Vmax V/[S] Vmax/K_M

(39)

Persamaan “Hanes-Woolf”

M [S ] K ] S [ ++++ ==== ] S [ V ]) S [ K ( V _M ++++ ==== _max V V S K_M S = + max[ ] [ ] max M V ] S [ K V ] S [ ++++ ==== ] S .[ V 1 V K V ] S [ max max M ₊₊₊₊ ==== ] S .[ V 1 V K V ] S [ max max M ₊₊₊₊ ====

(40)

• SekarangSekarangSekarangSekarang y = [S]/V ; x = [S] y = [S]/V ; x = [S]y = [S]/V ; x = [S] y = [S]/V ; x = [S] a = K a = K a = K

a = K_M_M_M_M/Vmax ; b = 1/Vmax/Vmax ; b = 1/Vmax/Vmax ; b = 1/Vmax/Vmax ; b = 1/Vmax

• Jika [S]/V dihubungkan dengan [S], suatu garis Jika [S]/V dihubungkan dengan [S], suatu garis Jika [S]/V dihubungkan dengan [S], suatu garis Jika [S]/V dihubungkan dengan [S], suatu garis lurus akan dihasilkan yang memotong sumbu y lurus akan dihasilkan yang memotong sumbu y lurus akan dihasilkan yang memotong sumbu y lurus akan dihasilkan yang memotong sumbu y lurus akan dihasilkan yang memotong sumbu y lurus akan dihasilkan yang memotong sumbu y lurus akan dihasilkan yang memotong sumbu y lurus akan dihasilkan yang memotong sumbu y pada K

pada K pada K

pada K_M_M_M_M/Vmax dan sumbu x pada /Vmax dan sumbu x pada /Vmax dan sumbu x pada /Vmax dan sumbu x pada ----KKKK_M_M_M_M serta serta serta serta membentuk sudut terhadap sumbu x sebesar membentuk sudut terhadap sumbu x sebesar membentuk sudut terhadap sumbu x sebesar membentuk sudut terhadap sumbu x sebesar 1/Vmax.

1/Vmax. 1/Vmax. 1/Vmax.

(41)

Persam aan H anes-W oolf [S]/V -K_M [S] KM/V m ax