NAMA : LINA ROSYDHA ROHMAWATI
NIM : 27216685A
KELAS : TEORI 3
KISI-KISI SOAL KARAKTERISASI PROTEIN REKOMBINAN
1. Sebutkan tahapan umum produksi protein rekombinan Jawab : tahapan umum produksi protein rekombinan yaitu :
Kloning protein
Produksi protein skala besar
Ekstraksi , pemurnian , karakterisasi protein
Formulasi
2. Tujuan dari karakterisasi protein rekombinan adalah
Jawab : Mengkonfirmasi kebenaran identitas protein rekombinan
3. Sebutkan lima metode karakterisasi protein rekombinan Jawab : lima metode karakterisasi protein rekombinan yaitu :
a. SDS PAGE ( Sodium Dodesil Sulfat Poliakrilamid Gel Elektroforesis) b. Western Blot
c. Sekuensing protein
d. Isoelektro fokusing (Isoelectro focusing/IEF)
e. Elektroforesis dua dimensi (Gabungan Antara IEF dan SDS-PAGE)
4. Metode karakterisasi protein rekombinan berdasarkan bobot molekul protein adalah Jawab : SDS PAGE ( Sodium Dodesil Sulfat Poliakrilamid Gel Elektroforesis)
5. Metode karakterisasi protein rekombinan berdasarkan reaksi antigen antibody (atau Immunoblotting) adalah
Jawab : Western Blot
6. Fungsi SDS pada SDS-PAGE adalah
Jawab : Melarutkan molekul hidrofobik yang memberikan muatan negatif pada protein 7. Fungsi betamerkaptoetanol pada SDS-PAGE adalah
Jawab : Mendegradasi protein
8. Gel yang digunakan pada SDS-PAGE adalah Jawab : Gel Poliakrilamid-berpori
9. Pada SDS-PAGE protein bergerak dari kutub … ke kutub … Jawab : Dari kutub negatif ke kutub positif
10. Sebutkan dua pewarna yang digunakan untuk mewarnai protein setelah SDS-PAGE?
Jawab : dua pewarna yang digunakan untuk mewarnai protein setelah SDS-PAGE yaitu : 1. Coomassie Brilliant Blue (CBB)
2. Silver stain
11. Prinsip dari CBB (Coomassie brilliant blue) dalam mewarnai protein setelah SDS-PAGE adalah?
Jawab : Berikatan dengan asam amino untuk menghasilkan warna biru pada gel Poliakrilamid
12. Western blot adalah
Jawab : Western blot adalah karakterisasi protein berdasarkan reaksi antigen – antibodi untuk mendeteksi protein spesifik
13. Fungsi antibodi primer yang digunakan pada proses western blot adalah Jawab : Spesifik yang mengenali protein (antigen)
14. Fungsi antibodi sekunder yang digunakan pada proses western blot adalah Jawab : Mengikat antibodi primer
15. Tahap ke-1 dari proses western blot adalah Jawab : pemisahan protein dengan SDS-PAGE
16. Tahap ke-2 dari proses western blot adalah
Jawab : Transfer protein ke membran nitroselulosa untuk dideteksi antibodi
17. Tahap ke-3 dari proses western blot adalah
Jawab : Pemblokiran yaitu mencegah antibodi mengikat membran secara non-spesifk
18. Tahap ke-4 dari proses western blot adalah
Jawab : Inkubasi antibodi yaitu protein pada membran nitroselulosa diinkubasi dengan antibodi primer dan antibodi sekunder yang berlabel.
19. Tahap ke-5 dari proses western blot adalah
Jawab : Reaksi antara protein (Ag) dan Antibodi (Ab) ditandai oleh adanya pita protein pada membran nitroselulosa
20. Fungsi dari enzim SOD adalah
Jawab : Enzim SOD ( Superoksida Dismutase) berfungsi sebagai bakteri penghasil.