PENDAHULUAN
Rumusan masalah
Tujuan penelitian
Hipotesis
Kerangka teori
Kerangka konsep
Manfaat penelitian
TINJAUAN PUSTAKA
Sifat fisik dan kimia aspartam
Metabolisme aspartam
- Metabolisme aspartat
- Metabolisme metanol
- Metabolisme formaldehid
Fenilketonuria merupakan kelainan tidak adanya enzim fenilalanin hidroksilase (PAH), sehingga fenilalanin terakumulasi dalam darah dan jaringan sedangkan kadar tirosin dalam darah rendah. Akumulasi fenilalanin dalam cairan tubuh dapat merusak pertumbuhan sistem saraf pusat dan mempengaruhi kematangan otak pada anak yang masih sangat kecil. Penghapusan metanol dari darah tampaknya sangat lambat pada semua spesies dibandingkan dengan etanol.
Penelitian Konvusalo menunjukkan bahwa laju eliminasi metanol pada kelinci bergantung pada konsentrasi metanol dalam darah. McMartin et al (1975) menemukan bahwa konsumsi metanol 3 g/kg berat badan yang diberikan kepada monyet akan meningkatkan kadar metanol darah hingga 300 mg/dl dan memperpanjang waktu dari 24 jam menjadi 49 jam jika dibandingkan dengan dosis 1 g/kg. berat badan. Gejala yang terjadi antara lain ataksia, penurunan refleks normal, dan gejala depresi sistem saraf pusat lainnya.
Namun penelitian Watkins et al (1970) dan Clay et al (1975) menunjukkan bahwa setelah pemberian metanol 1 g/kg BB, laju eliminasi metanol melalui ginjal pada tikus adalah 3,7 mg/dL dan pada monyet 3,9 mg/dL. . Namun penelitian Konvusalo (1956) dan Scott et al, (1933) membuktikan bahwa tidak ditemukan formaldehida dalam darah, urin, dan jaringan sirkulasi pada keracunan metanol.
Toksisitas akut dan kronik aspartam
Metabolisme asam arakidonat
- Jalur siklooksigenase
- Jalur lipooksigenase
Setelah dilepaskan dari membran fosfolipid, asam arakidonat akan dimetabolisme melalui jalur siklooksigenase atau jalur lipoksigenase. mekanik, atau asil hidrolase, dll. Sebaliknya, COX-2 umumnya tidak terdeteksi dalam kondisi normal, namun akan dengan cepat diinduksi dan diekspresikan di tempat peradangan atau kerusakan jaringan sebagai respons terhadap sitokin (TNF-α, IL-1), mitogen, dan faktor pertumbuhan (GF. Keduanya). prekursor ini tidak stabil dan kemudian mengalami oksidasi enzimatik dan non-enzimatik menjadi PGE, PGF dan PGD.
PGG2 dan PGH2 memiliki efek yang bervariasi, terkadang menyebabkan vasokonstriksi dan terkadang menyebabkan vasodilatasi. Di saluran pernafasan PGF2 - alpha, PGG2, PGH2 dan TXA2 menyebabkan kontraksi sedangkan PGE2 menyebabkan bronkodilatasi yang kuat. PGE2 dan PGF2-alpha menyebabkan kontraksi kuat pada rahim normal dan gravid, sedangkan aktivitas ini ditentang oleh PGI2.
PGD2 merupakan mediator vasodilatasi lokal dan peningkatan permeabilitas pembuluh darah (crack and flare react) pada respon alergi yang juga dimediasi oleh IgE. TXA2 adalah produk paling melimpah yang dihasilkan oleh trombosit normal, namun juga dapat diproduksi oleh sel berinti seperti monosit.
Inflamasi
- Inflamasi akut
- Inflamasi kronis
Respons perubahan jaringan terhadap peradangan pada umumnya hampir sama, perubahan ini tampaknya disebabkan oleh zat antara yang dilepaskan, yang disebut mediator inflamasi. Peradangan akut merupakan respon awal yang timbul akibat kerusakan jaringan, infeksi dan berbagai sebab lainnya. PGE2 dan PGI2, produk reaksi enzimatik yang dikatalisis oleh COX-1 dan COX-2, merupakan jenis prostaglandin utama yang terlibat dalam timbulnya nyeri, vasodilatasi, dan edema pada inflamasi akut, namun diperlukan amplifikasi dengan mediator lain. , yaitu histamin, bradikinin dan .
Seperti pada peradangan akut, produk reaksi enzimatik yang dikatalisis oleh COX-1 dan COX-2, yang diklasifikasikan sebagai prostanoid, juga ditemukan dalam jumlah tinggi pada peradangan kronis. Yang membedakan inflamasi akut dan kronik adalah pada inflamasi kronik terdapat peran beberapa sel yang memediasi respon imunologi seperti limfosit T dan makrofag yang berperan lebih penting dibandingkan inflamasi akut. Diketahui juga bahwa beberapa jenis antigen menginduksi sel yang memediasi respons imunologis, seperti makrofag, yang mengakibatkan pembentukan granuloma.
PGE2 yang disekresikan oleh makrofag kemungkinan besar berperan dalam mekanisme umpan balik negatif sehingga menyebabkan penekanan fungsi kekebalan tubuh.
Mediator kemotaksis
Antiinflamasi nonsteroid ( AINS )
- Aspirin
- Natrium diklofenak
- Indometasin
Jenis ini dianjurkan digunakan bila diindikasikan sebagai anti inflamasi untuk mengurangi efek samping NSAID pada saluran pencernaan. Selain itu, efek samping pada saluran cerna juga disebabkan karena NSAID umumnya merupakan asam organik yang dapat mengganggu fungsi sel-sel saluran cerna pada saat terjadinya peristiwa penyerapan dan pelepasan proses fosforilasi oksidatif di mitokondria. Natrium diklofenak merupakan inhibitor siklooksigenase dengan potensi lebih kuat dibandingkan indometasin, naproxen dan sejumlah NSAID lainnya.
Natrium diklofenak dapat menurunkan konsentrasi asam arakidonat bebas intraseluler dalam leukosit, kemungkinan karena mempengaruhi pelepasan atau penyerapan asam lemak. Natrium diklofenak diserap dengan cepat dan sempurna setelah pemberian oral, mencapai kadar plasma maksimum dalam waktu 2-3 jam. Hal ini dapat menjelaskan mengapa durasi efek terapeutik natrium diklofenak lebih lama dibandingkan waktu paruh plasma.
Dibandingkan dengan indometasin, aspirin, dan piroksikam, efek samping natrium diklofenak berupa gangguan saluran cerna jauh lebih kecil. Aktivitas penghambatan terhadap COX-1 dan COX-2 hampir sama, sebagaimana dibuktikan oleh studi kultur sel oleh Bennett dkk (1993) yang menemukan rasio IC50 COX-2/COX-1 untuk natrium diklofenak adalah 0,7.
Granuloma
Terjadi dalam beberapa jam hingga beberapa hari setelah terpapar antigen, ketika sel Th 1 CD 4+ bermigrasi ke area yang penuh dengan mikrosirkulasi. Sel-sel lain termasuk neutrofil dan sel B ditemukan dalam proporsi yang bervariasi dalam granuloma dewasa. Sebagai salah satu bentuk reaksi peradangan, dilihat dari jenis sel yang membentuknya, granuloma tergolong peradangan kronis.
Pemeriksaan kadar tromboksan B 2 dengan metode Enzyme Immunoassay
Definisi-definisi dalam pemeriksaan kadar tromboksan B 2 dengan
METODE PENELITIAN
Desain percobaan
Tikus Sprague–Dawley jantan, umur 12–16 minggu, dengan berat 225–275 gram, diaklimatisasi selama satu minggu di ruangan khusus bersuhu 250 C dengan siklus terang/gelap 12 jam dan mendapat makanan tikus standar (rodent chow) dan air secukupnya. . Kemudian masing-masing kelompok mendapat perlakuan sebagai berikut: diberi aquades 2 ml, diberikan 1 kali per hari. mendapat Na-diklofenak dalam 2 ml aquades dengan dosis 1 mg/kgBB dikalikan 10 kali sehari. mendapat aspartam 2 ml dalam air suling dengan dosis 40 mg/kgBB dikalikan 10 kali sehari. mendapat aspartam 2 ml dalam air suling dengan dosis 40 mg/kgBB dikalikan 20 kali sehari. Saat menentukan kadar tromboksan B2 serum dan menguji pengaruh aspartam terhadap berat granuloma yang diinduksi, awalnya digunakan jumlah kelompok perlakuan = 4, sehingga jumlah hewan percobaan per kelompok perlakuan adalah ≥ 6. Pada penelitian ini, n = 7 digunakan berdasarkan jumlah sampel yang terbatas.. kimia, Ann Arbor, MI) no.
Karena kelompok kontrol positif tidak menunjukkan perbedaan berat granuloma yang signifikan dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif, maka kelompok kontrol positif ditambahkan ke 1 kelompok dan mendapat perlakuan berikut. Jadi, untuk menguji pengaruh aspartam terhadap berat granuloma yang diinduksi, digunakan 5 kelompok perlakuan, setelah itu berdasarkan rumus Federer, jumlah hewan per kelompok perlakuan adalah ≥ 5. N = 8 digunakan berdasarkan keterbatasan jumlah dan sumber daya. jumlah tikus dan adanya tikus yang mati pada saat induksi atau adanya tikus yang tidak dapat digunakan lagi karena tidak memenuhi kriteria inklusi mengenai bobot badan tikus.
Kelompok kontrol positif tambahan-2 terdiri dari 10 ekor tikus yang dibagi menjadi 2 kelompok, namun tidak lagi menggunakan sistem pengundian dengan menggunakan tabel acak karena hanya berisi satu jenis perlakuan untuk setiap kelompok. Pada kelompok tambahan ini 1 ekor mati karena anestesi, 1 ekor tidak digunakan karena tidak memenuhi kriteria inklusi bobot badan tikus.
Tempat dan waktu penelitian
Cara kerja
- Pemberian obat dan pengambilan sampel darah
- Pemeriksaan kadar tromboksan B 2
- Preparasi pre-uji
- Pemeriksaan dengan metode EIA
- Penimbangan granuloma
Secara umum, supernatan serum, urin, dan kultur sel dapat diencerkan dengan larutan buffer EIA dan ditambahkan langsung ke dalam sumur. Kemudian tambahkan 900 µl EIA Buffer Solution ke Tabung 1 dan 500 µl EIA Buffer Solution ke Tabung 2 - 8. Pencucian ini dapat ditambahkan ke tracer jika diinginkan untuk memudahkan visualisasi tracer di dalam sumur.
Pencucian ini dapat ditambahkan ke antiserum untuk memudahkan visualisasi antiserum, yang telah diencerkan hingga konsentrasi akhir 1:100 (60 µl pencuci ditambahkan ke 6 ml antiserum. Bila Anda siap untuk melapisi aktivasi , “botol 100 dtn” yang berisi reagen Ellman diencerkan dengan 20 ml air ultra murni (20 ml reagen cukup untuk mengaktifkan 100 sumur. Reagen Ellman yang diencerkan tidak stabil dan harus digunakan pada hari yang sama dengan persiapan; lindungi dari cahaya saat tidak digunakan.
Pastikan reagen Ellman tidak terciprat ke bagian atas penutup pelat karena kekurangan reagen Ellman akan mempengaruhi pembacaan absorbansi. Jika terlalu banyak reagen Ellman yang terciprat ke kaca penutup, untuk memudahkan redistribusi ke dalam sumur, pelat dicuci 3 kali dengan buffer pencuci dan aktivasi diulangi dengan reagen Ellman yang baru.
Analisis statistik
Nilai rerata persentase kenaikan kadar tromboksan B2 pada kelompok kontrol positif (Na-diklofenak 10 mg/kg BB) sebesar 69,54% dari kadar tersebut. Antara kelompok kontrol negatif dengan kelompok yang mendapat aspartam 10 kali dosis ADI (40 mg/kg BB) terdapat perbedaan yang besar sehingga kedua kelompok dibandingkan dengan uji perbandingan berganda Scheffe. Efek anti-inflamasi; dalam hal ini, Na-diklofenak, yang hanya terlihat pada kelompok kontrol positif-2 (Na-diklofenak 20 mg/kg BB), dimana terjadi penurunan rata-rata berat granuloma per 100 g BB tikus sebesar 30, 38% adalah. jika dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif (aquades), namun tidak berbeda nyata.
Pada kelompok kontrol positif-1 (Setelah diklofenak 10 mg/kg BB) hanya terjadi penurunan rata-rata berat granuloma per 100 g BB tikus sebesar 1,47% atau besarnya relatif sama dibandingkan kelompok kontrol negatif. Sedangkan nilai rerata berat granuloma per 100 g BB tikus kelompok dosis aspartam 10 kali dosis ADI (40 mg/kg BB) relatif sama dengan kelompok kontrol negatif dan kelompok kontrol positif-1. Nilai rerata berat granuloma per 100 g BB tikus kelompok aspartam 10 kali dosis ADI lebih tinggi 41,52% dibandingkan kelompok kontrol 2 positif namun tidak berbeda nyata.
Nilai rata-rata berat granuloma per 100 g bb tikus kelompok dosis aspartam 20 kali dosis ADI lebih besar 59,71% dibandingkan kontrol positif kelompok-2 namun juga tidak berbeda nyata. Meski tidak menunjukkan signifikansi statistik, penurunan peningkatan kadar tromboksan B2 pada kelompok tikus yang mendapat aspartam 10 kali lipat dan dosis ADI 20 kali lipat dibandingkan kelompok kontrol negatif dan positif dapat memperkuat dugaan bahwa perpanjangan waktu perdarahan. efek yang dicapai dalam penelitian oleh Edmundson et al. Aspartam menghambat aktivitas enzim siklooksigenase. Pemberian aspartam 10 kali dan 20 kali dosis ADI (40 mg/kg bb) selama 3 hari berturut-turut pada tikus yang diinduksi granuloma subkutan cenderung menurunkan peningkatan kadar tromboksan B2 serum dibandingkan dengan kelompok kontrol yang mendapat aquades.
Perhitungan dosis Na-diklofenak untuk kelompok kontrol positif-1 dan positif-2: 50 mg/hari (dewasa 50 kg BB.
HASIL PENELITIAN
Uji pengaruh aspartame terhadap granuloma hasil induksi
PEMBAHASAN
KESIMPULAN DAN SARAN
Saran
Pengaruh aktivitas aspartam pada aktivitas siklooksigenase bila diberikan bersamaan dengan obat lain yang juga melawan agregasi trombosit harus diselidiki lebih lanjut. Untuk industri makanan dan minuman kemasan, minuman instan, dan suplemen makanan: Pertimbangkan perlunya label peringatan untuk berhati-hati saat mengonsumsi produk yang mengandung aspartam dengan obat antiplatelet. Diberikan pada tikus = 1 mg/kg berat badan/hari X faktor 10 = 10 mg/kg berat badan/hari Diberikan 1 X/hari pada kontrol positif kelompok-1.
Diberikan pada tikus = 1 mg/kgBB/hari X faktor 20 = 20 mg/kgBB/hari Diberikan dalam 2 dosis terbagi untuk kelompok kontrol positif-2. Demonstrasi eksperimental pertama dari efek karsinogenik multipotensial dari aspartam yang diberikan dalam pakan tikus Sprague – Dawley. Pengaruh pola makan tinggi sukrosa atau aspartam terhadap perilaku dan kinerja kognitif anak.
A high degree of selectivity of cyclooxygenase-2 inhibitors is associated with reduced interference of aspirin inactivation of platelet cyclooxygenase-1. Effect of indomethacin on the mRNA expression of angiogenic factors in the renal cortex of healthy rats.
Rumus bangun aspartam
Metabolisme metanol, aspartat dan glutamat
Metabolisme asam arakidonat
Rumus bangun aspirin
Rumus bangun natrium diklofenak
Rumus bangun indometasin
Gambaran histologi granuloma
Klasifikasi proses inflamasi
Perhitungan dosis
Contoh data kurva standar
Data penelitian
Hasil analisis statistik
Certificate of analysis
