ÃZ̳¿Y{
Ê°a
½YËY
ÃÁ{
, ÃZ¼
,
½Zf]ZeÁZÆ]
)
- (
*
¾¨¸e :
adizaji@ut.ac.ir E-mail:
ʳËÁ ËY|mÊ°Ìf¿Â¸Ì§ÁÊ°Ë·ÂÌ]ÉZÅ
È ZÌ]·{®ÌËY» ÁËÁ¶ËԳʿYËY
(BYMV)
¹Z¿Ê¨ËZËa
{Z]M Ê^Ì^uÊůZÀÌ», ÊmË{^¯Y,
Éf¿Ô¯®»ZÌ,*
Á
¹|«Y^n¿Ä»Â »
,, . ÉÂn¿Y{
,|YÊZÀZ¯ª]Z
ÃZ̳ÃÁ³,ZË{ZfYÁZÌ¿Y{
,Ê°a
|°¿Y{
Ç Ê|ÀÆ»Á¹Â¸
k¯,½YÆeÃZ´¿Y{,Ê Ì^]ZÀ»ÁÉÁZ¯Ë{a,ÉÁZ¯
. ÃÁ³,ZË{ZfY
|°¿Y{,Ê¿Z^£Z]¹Â¸
Ç
½YÆeÃZ´¿Y{,Ê Ì^]ZÀ»ÁÉÁZ¯Ë{a,ÉÁZ¯Ê|ÀÆ»Á¹Â¸
k¯,
|°ÅÁa, Ç
Ë^e,¯[£Á[£µZ¼ÉÁZ¯É·ÂÀ°eÂÌ]
) d§ZË{xËZe :
/ / -
\ËÂexËZe :
/ / (
Ã|Ì°q
{Y| e ,- ÉZŵZ {
ÃY|a ËÂe ¯Y» Y ÃY|a k¯ { ¶ËÔ³ ÉZÅ
¼m ÄeÂ] ±] d§Z] Ê] ,d¯ Y a Á ÉÁM
½Â»M Z] ZÅ
DAS-ELISA
Y ʯZu
ʳ{·M /
|{
ÄeÂ]
ZÌ]·{®ÌËY» ÁËÁÄ]ZÅ )
Bean yellow mosaic virus,
(BYMV
{Â]
.
·ZyYa ÄËY|mÌj°eÁÊ°Ë·ÂÌ]ÉZ
¹Z¿Ä]ÉY
BYMV-GPK
À»Y{, Ä
|¾ÌÌ e½MÊ¿Z]Ì»
.
ÁYÃ{Z¨fYZ]ÄËY|mÊÂa¾ÌXeÁaʷ°·Â»½Á
SDS- PAGE
,
|Ë{³Ä^Zv»½Âf·Y{¸̯
ªËYÁ
||ÌËPecÔ]½fÁ½Â»M .
dÌZuÊ]
½Â»M Å ÊÀ¼ËYÊ°Ë·ÁÉZ nÀ
Ê d§Z]iY
(TPIA) DAS-ELISA ϭ
Ê]ZË{{
{BYMV
d§Z]
ZÅ ÃY|aÁ±]É Ä]Y ÁËÁÁÁ{Å{Y{½Z¿ZÅ
ÄeÂ]±]d§Z]{Ê¿ZM ÉZÅ
Ê]ZË{ Ã{·M ¶ËÔ³
¯
pÌÅ Z»Y |¿{
d§Z] { ÁËÁ Ê]ZË{ Ä] {Z« Á Á{ ¾ËY Y ®Ë
ÃY|a ZÅ {Â^¿Ã{·MÉ .
Á{
ÉZÆf¿Yz]
´ ÄÌuZ¿Á
HC-Pro
Ä],ÄËY|m¾ËY¹Â¿
Ä]\Ìee
|¿Y ÇY Á
ÁZ],Z]d¨m
RT-PCR
|Ë{³Ìj°e .
ZY]Ê°Ìf¿Â¸Ì§¶Ì¸ve{
¥{Ye
¼meÁÉ|ÌeÂX¸¯Â¿
È ÄÀÌ»M|ÌY ÄËY|m,ÊuY¿¾ËYÉY
ÁËÁ¦¸fz»ÉZÅ
|®Ì°¨e
ÈËY|mÁ GPK
ÄËY|mZÀ¯{
Ô³ÉZÅ d§³Y«|^ZË¶Ë .
ÃYÁ É|̸¯ÉZÅ :
,cÔ]½fÁ,¶ËÔ³,ʿ¸̧
,BYMV DAS-ELISA
, .TPIA
Ä»|¬»
|̨¶ËÔ³ )
Gladiolus grandiflorus L.
( ºÆ»Y
¾Ëe
¶³
®e ÊfÀË ÉZÅ Äb·
ÄyZ Á ÉY ZÌ¿{ { Ã|Ë]
d
)
Anonymous, 1997
.(
¶ËÔ³
¸¼u{»
/ Ì]È / ÉZ
Y
¶»YÂ
Z¼Ì]
É ÉY
,ÊqZ«
ËZËf¯Z]
/ Ê Á ÊÁËÁ
«/
Y
Ê»
{ į {̳
¾Ì]
¾ËY ,¶»YÂ
ÉZųZ¼Ì]
ÊÁËÁ
d̼ÅY ÃËÁ
ÉY
|¿Y{
)
Katoch et al., 2003
.(
Ä]
Â
¹Z«Y Ê Ì^
Y ¶ËÔ³ ªË
¹Y|¿Y ÊËÁ
¹Z¿ Ä]
ÃY|a ) (corm
Ìj°e Ê»
|¿Â
.
¾ËY]ZÀ]
ÃY|a ÉZÅ Ã{·M Ä]
Ä], ÁËÁ ÊfuY
\^
f³ Ä] ÁËÁ
Z¬¿
¦¸fz»
ZÌ¿{
Ê»
|¿{³ . dÌ Á {
Ê Ì^
¹Z«Y
¶ËÔ³ Ä]
ÁËÁ ÉZÅ Ã{·M É{| f»
Ê»
|¿Â
į
\^
ÅZ¯
Ä] Á d̼¯
|Ì·Âe d̨̯ ÃËÁ Ê»
/Â { . ËÔ³ Y /
¶
ÁËÁ ÉZŠʨ¸fz»
|À¿Z»
Ä°·Ê³{»a Äm³ÉY
Ê´¿§
)
Tomato spotted wilt virus
( ij,
½ÂeÂeÉY )
Tobacco
streak virus
(
¢m , ½ÂeÂe ®¤m )
Tobacco rattle
virus
( d§Z],
½ÂeÂeʳ{»
)
Tobacco necrosis virus
( ,
Ê´¿§{Âz¿ ®ÌËY»
)
Pea mosaic virus
(
®ÌËY» ,
Ì]YM )
Arabis mosaic virus
( ZË ®ÌËY» ,
)
Soybean mosaic virus
( Ä°· Á f¨Æ¿ ɬ¸u È
cÂe Ê´¿§
)
Strawberry latent ringspot virus
(
Y
dYÃ|Y³ZÌ¿{¦¸fz»ªZÀ»
)
Bridgmon &
Walker, .DWRFKet al., 2003
.(
{
Ì]
¾
ÁËÁ ÉZÅ Ã{·M
|ÀÀ¯
Ç
¾ËY ÁËÁ,ÃZ̳
®ÌËY»
{
id13195468 pdfMachine by Broadgun Software - a great PDF writer! - a great PDF creator! - http://www.pdfmachine.com http://www.broadgun.com
ÃZ̳¿Y{
Ê°a
½YËY ÃÁ{
ÃZ¼,
½Zf]ZeÁZÆ],
ZÌ]·
Bean yellow mosaic virus, BYMV)
( Á ÁËÁ
®ÌËY»
ZÌy )
Cucumber mosaic virus
(
{
ªZÀ»
¦¸fz»
\·Z£
|¿Y Á Ä]
u É|
f³
|¿Y{
į
Ä]
Êfz
Ê»
ÊÅZ̳½YÂe Y
d§ZË Ä¯
ÉZ
Y
¾ËY ÁËÁ ZÅ
|Z]
)
Bridgmon &Walker, 6WDQLXOLV, 1967
.(
{
ZÌ¿{
ÁËÁ
Âe Z] ¾Ì·ÁY ZÌ]· { ®ÌËY»
Ì·ÂÌ¿ZfY )
Staniulis, 1967
(
Y ZaÁY Y ¶ËÔ³ ÉÁ
|Y³ .
YËY{
½
Ì¿
ÂeZ]¾Ì·ÁY,¶ËÔ³ÉÁY
Kamran & Izadpanah
) (1981
Y³
| .
¾ËY
Àm Ä] ÁËÁ Á ÊeÂa
Ë Á
)
Potyvirus
( ,
Ìe Y Ç
ÁÊeÂa Ë
Ë Ã|
)
Potyviridae
( {Y{ª¸ e .
¹Â¿
½M
|À¿Z»
Z
Ë ÉZY
{Y¿Zy Ç ÊeÂa Ã|ËËÁ dÌ^« Z] ,RNA
®eÁd^j»
Äf
ÉY dY Ä]Á ʸacÂ
eÁa
½ZÌ]¾ÌX
Ê»
Â
{ .
¹Â¿
ÁËÁÊeÂa ZÅ
[ÂqZq®ËÉYY{
Ê¿
)
open reading frame, ORF
( dY į
ÉZÆf¿Y{
'
½M
ÌuZ¿
È Ä¼me Ã|¿Â¿
)
(untranslated regions, 3'-UTR
µÂ Ä]
- {Y{ Y« |ÌeÂX¸¯Â¿
)
Revers &
Candresse, 2004
.(
ÁËÁ{
ÌuZ¿,¦¸fz»ÉZÅ È
3'-
UTR
¿ Y
¨f» ¥{Ye Á µÂ
/ cÁZ
Y / ,d
»Y /
{ Z
ÄËÂ
YÌ] ÁËÁ®ËÉZÅ
|{
dÅZ^
{ÂmÁ
{Y{
)
Frenkel et al., 1989
.
(|ÀÀ¯|¯ ½
Ç
¾ÌXeÁa
ÊÂa ) (CP
ÁËÁ ÊeÂa ZÅ
ÉZÆf¿Y {
'
Y« ¹Â¿
Äf§³ dY Á Ŀ³¾Ì]{
¾ËY¦¸fz»ÉZÅ ÃÌe
ÂÀe
{Y{É{Z/Ë
)
Shukla & Ward, 1988 & 1989
.(
¾ËY
¾ÌXeÁa Ç|¿Ì³]{
ÉZÆf¿YË~aÌ̤eÊuYÂ/¿
ÊÀÌ»M Á
¸Ì¯Â]¯ ÉZÆf¿Y Ê
ÌuZ¿ Á È Ê¿ZÌ»
) ( core
dY . ÌuZ¿
È
ÉZÆf¿Y ÊÀÌ»M ÊaY¾ËfÌ]ÉÁZu _Âe
ÊZ/fyYÉZ//Å
Á/ËÁ dY
{ Á ÁËÁ ÊeÂa
¿ Y ¦¸fz» ÉZÅ
{Y{É{ZËcÁZ¨e¥{YeÁµÂ
. Z]µZ¬f¿Y{ CP
Äf
,
®Ì¼fÌ Á µÂ¸ Ä] µÂ¸ d¯u
ºÌÀe Á
ÉZ|À¿Z¼Å d·Zy{RNA
{Y{
.
¦Ìe»
dZ¨uÉZÅ
Ç|
{ DAG
ÊÀÌ»MÉZÆf¿Y ÊÂa¾ÌXeÁa
Á
{ KITC
Ê°¼¯ ¾ÌXeÁa
(HC-Pro)
µZ¬f¿Y ÉY]
ÊeÂa ÉZËZaZ¿
ÁËÁ ÄfÂe ÉÁ
dY )
Atreya et al., 1995;
Valkonen et al., 2002
.(
eÁa Ê°¼¯ ¾ÌX dÌZy
ÁÄfY{ÉZÀÌXeÁa
{
,Ìj°e ÁµÂ¸Ä]µÂ¸µZ¬f¿Y
|¿ÁM É ÊeÂa ÁËÁ {Y{d̼ÅY )
Urcuqui-Inchima et
al., 2001
.( ZÌ]· { ®ÌËY» ÁËÁ º« Ä] Äf]
±]{®ÌËY»ºWÔ¶ËÔ³
Y|¿YÅZ¯,ZÅ Ç
ÃY|a ÁZÅ
±^¸³ { ²¿ Ê´f°
Ê» {ZnËY Y ZÅ
|À¯
)
Bridgmon & Walker, 1DJHOet al., 1983
.(
Ä]d Ì^{ ÁËÁ¾ËY
¸ÌÁ È
YÌ]
ÄfĿ³
Ìe Ä] ª¸ f»
Ç
Aphididae
Ä] Á ËZaZ¿ cÂ
/
¬fÀ» Z /
¶
Ê»
{Â
)
Skaf & Makkouk, 1988
( Á ÃZ´ËZ»M{
Y
Ë Ê°Ì¿Z°» ª
Ì¿
dY µZ¬f¿Y ¶]Z«
.
¾ËY {
ÅÁa
ʳËÁ ÉZÅ Ê°Ë·ÂÌ]
ʷ°·Â»Á
®Ë ËY|m È
¶ËÔ³
¾ËY
ÁËÁ
(BYMV-GPK)
Á dÌZu
Á
Ê°Ë·ÁÉZÅ
ÊËZZÀ{ʷ°·Â»Á BYMV
±]{
ÃY|aÁZÅ ÉZÅ
Ê]¶ËÔ³ Ã|
dY .
ÁÁ{Y»
ZÅ
Ê]ZË{
ÈËY|m Ìj°e ,BYMV GPK
ÈÀ»Y{ ¾ÌÌ e Á
½MÊ¿Z]Ì»
µZÊ
ÉZÅ Á {Y| e, Y|aĿ¼¿
YÃ
ÃY|a ËÂe ¯Y»
¼m k¯ { ¶ËÔ³ ÉZÅ ÉÁM
| .
ÃY|a
Á{½{¯ÉbYaZÅ Ç
ÉZ»{{[YÂy
ZÆq
m{
È Â̸
½Y|¸³{, ÉZÅ
ÉÁZu®q¯ʰÌfÔa
Zy
½Áf
)
¶»Z
, Zy Ã|ÌÂaÊ¿YÂÌu{¯
,
d̷°̻ÁZy
ÄZ»Á d^¿Ä]
/ ( ÄfZ¯
|¿|
.
{ Ä¿Zz¸³ ÉZ»{
µÂ
|
¾Ì] ¶§ Ä] Äf]
- Êf¿Z Èm{
{Y³ {Â] ̤f»
. Ä¿YÂm Y a Ê¿
ÃY|a Ŀ¼¿,ZŠʳ]ÉZÅ ÄeÂ]¹Z¼e
ZÅ ) YY{
½Á|]Á ºWÔ
(
Z]
Y{ ½Â»M -
YËÓY )
double antibody sandwich
enzyme-linked immunosorbent assay, DAS- ELISA
(
Clark & Adams, 1977)
( Á
¨fY //
Z
Y Ã{
Êf¿M Ä¿Z¼Å|ÀqÊZfyY¹
ÉY
)BYMV
DSMZ-
AS-0717
( , ) TSV DSMZ-AS-0903
( ,
TSWV
)
DSMZ-AS-0105
( ,
) CMV
DSMZ-AS-0929
( Á
)TMV DSMZ-AS-0041
( Ê]
|¿|
½Â»MlËZf¿ .
Ä]
Y ²¿ Ì̤e cÂ
Ë ÃY|¿Y Á Ã|ÅZ» ª
³Ì É
»
Y|¬
k» µÂ { ¿ [~m
f»Â¿Z¿
Ä]
ȸÌÁ
{ ÃZ´f
d̸a
½YÂy )
ELISA-Reader,Beckman, AD
340S, CA, USA
( d^i Ä] Ã{·M ½ZÅZ̳ Á BYMV
|¿| z»
. ÄËY|m ¹Z¿ Ä] ÁËÁ Y ÉY
BYMV-
GPK
[Zzf¿Y Á
ÁZ]
µZ¬f¿Y
®e Ä°·
»«Ä¼¸ÉÁ
)
Chenopodium amaranticolor L.
(
·Zy ÉZ
]Ì
| Ê°Ë· .
b
¾ËY ÉÁ ÄËY|m
eÂe ÃZ̳
½Â
{Z]M¹Z¿Ê¨Ë
½YZ°¼ÅÁ :
ʳËÁ
¶ËԳʿYËYÈËY|mÊ°Ìf¿Â¸Ì§ÁÊ°Ë·ÂÌ]ÉZÅ ...
)
Nicotiana clevelandii L.
( Z»
ËÄ Ê¿
|
Ä] Á
½YÂÀ
ÉY|Æ´¿Ä¿Zz¸³{ ÁËÁ^À»
| .
ÄËZ» ÉY]
Ê¿
ÁËÁ
§Z] Y
Zfa cZ¨§
Ì º /
Ó»
) ( pH
ÉÁZu / ʸ̻
µÂ»
NaDIECA
)
Natrium
diethyldithocarbamate
( , /
|{
, {Âa } µZ£
µZ § Á
ZÆq ʸ̻
µÂ»
(Na2-Ethylenediaminetetraacetic
acid)
Y Ã{Z¨f
|
. ÉY]
ʳËÁÈ ·Z»
Ê°Ë·ÂÌ]ÉZÅ
ËY|m È
BYMV-GPK
ÈÀ»Y{
» Ì
¿Z]
Ê
½M
ËY {
Ä¿Zz¸³ Ê]
|
.
ÂÀ»¾Ë|]
ËY|m È ËÁ / Á
ÉÁ
] ª¸ f» Ŀ³ /
ÅZ̳ ÇÌe Ä Ä /
Ê )
Chenopodiaceae
,
Solanaceae
Á
Papilionaceae
(
Y°eÄ{Á Ä]
Á
» Ê°Ì¿Z°»
ÄËZ
¿ Y ½ZÅZ̳ ¾ËY À¯YÁ Á | Ê¿
|Ä ·Z»ºWÔËY|Ìa )
µÁ|m ( .
YaÄf¨ÅÄ
ÄËZ»
ÄeÂ] ʳ{·M ,Ê¿
Á Ä] ÁËÁ Ä] ZÅ
DAS-
ELISA
|Ê]
.
¾ÌÌ e ÊÂa¾ÌXeÁaʷ°·Â»½Á ËY|m
È BYMV-
GPK
Ä]
ÊÂa ¾ÌXeÁa ʷ°·Â» ½Á ¾ÌÌ e ÂÀ»
¾ËY
ËY|m
YÄ Ê¸aµ{¾ÌXeÁaÉ{¼§Áf°·Y
¯Y Ë
¶
»M Ì
|ÉÁZu|
Ë
{Á{º Ì cZ¨·Â¶
)
Sodium dodecyl
sulfate- polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-
(PAGE
]/
Z µ
ËZ¼f»
ÀÀ¯
//
| Ç
{
/
| µ Á
º¯Yf»
|ÀÀ¯
Ç
|{
Ì»M ¶Ë¯Y /
| ]/
ʸ¼· Á Ä
)
Laemmli,1970
( Z]
ʯ|¿Y Ì̤e / cY
(Sambrook &
Russell, 2001)
Ã{Z¨fY
| .
¾ÌXeÁa
¶¯
Y
±]
ÉZÅ
½ZÅZ̳ º·Z
Á
·M / {Â Ç ËÔ³ /
¶ Á Ì¿
/
ÄeÂ]
ÉZÅ Ç{·M
½ZÅZ̳
®v»
C. amaranticolor
,
Nicotiana
benthamiana L.
Á
N. clevelandii
Á ¾Ì¼Å Z]
|kYzfY .
ļ̿Ç{»M¾ÌÀr¼Å
Ya, ÁËÁ·Zy
·Zy /
/ ÉZ
°Ȩ̈
/
»|¬»Ê / ÄeÂ]YÊeZ Ç{·MÉZÅ
N.
clevelandii
Ä]
Á
³ZmÁYf°Ë{
)
Dijikstra &
Jager, 1998
(
|Ã{Z¨fY½Â»M¾ËY{Ì¿, .
d]Zi Zf·Á Z] §Áf°·Y
½ZËm c| Á d·Á
,̤f»
c|Ȁ]
ÄZeÁ{
Ŀ¼¿½|ÌZedZ
Ä]ZÅ
d§³¹Zn¿YÃ|ÀÀ¯Y|mµÉZÆf¿Y
.
]
ZY
½YÌ»
d¯u
Ê^¿
Â]»
Ä]
Z]
|¿
¾ÌXeÁa ÉZÅ {Y|¿ZfY
{
µ
ʸa
¶Ë¯Y ,|Ì»M
y Ê¿Â̳
¾Ì]
ºfËZ´·
½Á
ʷ°·Â»
¾ËY
¾ÌXeÁa ZÅ Á
½YÌ»
d¯u Ê^¿
ZÆ¿M ºÌe
Á
½Á ʷ°·Â»
Z]
|¿
Â]»
Ä]
BYMV-GPK
{ÁM]
|
Á Z]
Ê]
½fÁ cÔ]
,
Á ZY]
YZ°¼ÅÁ¾Ì]Âe
½ )
Towbin et al., 1979
( Á ÁÁ^»Z
½YZ°¼Å )
Sambrook & Russell, 2001
( ,
|ÌËPe
|
.
{
Y|f]Y
|¿Z]
Ä] µ Y ZÅ Z£
É É·Â¸ÁfÌ¿
/
Éf»Á°Ì»
)
Optitran BA-S 85 Reinforced NC,
DasseÉ, Germany
( d]Zi Ê°Ëf°·Y ½ZËm c| {
ʸ̻
c|»Ä]b»M
/ Ze dZ
¬f¿Y
|Àf§Z˵Z
.
µZ¬f¿Y Y a
|¿Z]
Ä] ZÅ ÉZ£
¶¼ ɷ¸ÁfÌ¿
¯Ô]
Ì
²À
®yÌ|{Á{µÂ¸v»Z]
{Ê]q½Á|]
m{ ZÆq ÉZ»{
È Â̸
¹Zn¿Y d§³ .
Y a
d
ÂÁ
¿ÉZ£É Ì
§Z]Âeɷ¸Áf d
ÂÁ
) (PBST
Z]ÅÁZ]Ä, c|»Ä]
,Ĭ̫{lÀa
{Z£
µÂ¸v»
Êf¿M ZfyYÉ{Z]
Ê
ÁËÁ ) (IgG
«
Ì ª
{Ã|
§Z]
d
ÂÁ Ä]
d^¿
) ( Ä] Á c|»
ZÆq
Y« °Ì ÉÁ dZ
| Ã{Y{
. Y a d
ÂÁ É
¿ ÉZ£
Ì É·Â¸Áf Ä]
ȸÌÁ §Z]
d
ÂÁ , ÇÂÌ Ä]
¶^«
, Z£
Ä]
\®Ëc|»
{
µÂ¸v»
Êf¿M
¹Á{É{Z]
)
Goat-antirabbit IgG alkaline-phosphatase conjugate, IgG-AP
(
«
Ì ª §Z] { Ã|
d
ÂÁ Ä]
d^¿
) : (
ÉZ»{{,
m{ZÆq È
Â̸
Y«
| Ã{Y{
. Y a d
ÂÁ ÂÌ Ä]
Ç ,¶^«
dËZÆ¿ {
½Á{ À¯YÁ
ʸ̻
fÌ·
§Z]
ÄÀÌ»
ÉÁZu ¸]ÁfÌ¿
¹ÂÌ·ÁYfe )
Nitro-BlueTetrazolium Chloride
( Á -
»]
- - Á¸¯
- -
¶Ì·Á|ÀËY
§
cZ¨
)
5-Bromo-4-
Chloro-3'-Indolyphosphate
( Ê°ËZe{
¹Zn¿Y d§³ .
Ya
ËY|Ìa Z]À¯YÁ,ZÅ|¿Z]
d
ÂÁ
{Z£É
½ZËZa¬»[M d§ZË
Z£Á
®yʧZ~£Z¯Á{¾Ì]
d§³Y«
.
ÊËZ¿YÂe
½Â»M ÉZÅ
°Ë·Á
Ê ÊÀ¼ËY d§Z] iY ÊnÀ
(TPIA) Á DAS-ELISA
{
Ê]ZË{
Y|a{BYMV Ã
Á{
Ê°Ë·Á ½Â»M ÊÀ¼ËY
nÀ
Ê d§Z] iY
TPIA)
(tissue print immunoassay,
)
Huth et al., 1997
(
Á
DAS-ELISA
Ê]ZË{{
BYMV
{
d§Z]
Á±]ÉZÅ
ÃY|a ZÅ
|Ê]
.
Ê]Y¶ZulËZf¿ ZY]
±]
ÄeÂ]
ÄeÂ] ,½Â»M Á{ Å Z] ¶ËÔ³ ÉZÅ Ä] Ã{·M ÉZÅ
BYMV
»{Á¾ÌÌ e
| ]ȸu d¼«Y
¦¸fz»ÉZÅ
ÃZ̳¿Y{
Ê°a
½YËY ÃÁ{
ÃZ¼,
½Zf]ZeÁZÆ],
Êv
Á ʸyY{
ÃY|a ÉZÅ ÄeÂ] ½Z¼Å Ä] Â]»
ÉZÅ
Ŀ¼¿ , ÁËÁ Ä] Ã{·M Á ÄÌÆe ÊËZÅ
Á{ Å Z]
½Â»M
Ê]
|
.
ÌuZ¿ Ìj°e È
HC-Pro Á
ÉZÆf¿Y ' ¹Â¿
ËY|m È
BYMV-GPK .½Y.MkYzfY
¶¯ÉY ) Total RNA (
Ä]
ÂÀ»
MkYzfY .
½Y . Y É
¶¯
Y ʸ̻
d§Z]¹³
±]
ÉZÅ
Ze Ç ÃZ̳
»« ļ¸ ®v»
Ä] Ã{·M ËY|m
È
GPK BYMV-
Á d̯
RNeasy
d¯
½Z̯
)
RNeasy
Plant Mini Kit,Qiagen, Hilden,Germany
( Ã{Z¨fY
| . Ä]
Ìj°e ÂÀ»
ÌuZ¿
È
HC-Pro
,
³Z£M d¨m Y
ÊZfyY
ÄÌuZ¿¾ËY )
BYMV F1370
)
5' – CT (AC)
CA (AG) ATG GAGAA (CT) CC (CT) GC-3'
( Á
R 2340
)BYMV
5' – CCA AAG TTC CAA TCA
CCA CC -3'
( )
Nakazono-Nagaoka et al., 2004a
( Á
ÉZÆf¿Y ÈÌuZ¿ Ìj°e ÉY]
'
¹Â¿
) ȼ̿ ¶»Z
Ê¿ [ÂqZq ʸ̯Â]¯
CP
Á
3'-UTR
( d¨m Y
ÁËÁÊeÂaÀmʻ¼³Z£M )
POTFOR
)
5' –
TGA GGA TCC TGG TG (CT) AT (ACT) GA (AG) AA (CT) GG -3'
( Á )POTR 5' – GCG GGA
TCC TTT TTT TTT TTT TTT TTT T (AGC) (AGCT) -3'
(
(Langeveld et al., 1991)
Ã{Z¨fY
| .
MÊÊaÊeMÀ¯YÁ )
RT-PCR (
Å É{dyZÀ¯YÁ .
½Y . Y É
¶¼°»
) (cDNA
ºnu{
ÊËZÆ¿
fÌ·Á°Ì»
,
¶»Z
|uYÁ
RNaseinhibitor
,
mM
/
dNTPs
, mM
/
,DTT
pM
³Z£M
° » ,
fÌ·Á°Ì»ZÆq
§Z]
RT-5X
fÌ·Á°Ì»Ä Á
ÉRNA
·Zy Ã|
{Â]
. Y|f]Y Ĭ̫{lÀaZeÄc|»Ä]
ÉZ»{{
Êf¿ZÈm{
Z¼Ìe{Y³
½{Á§YYaÁ
¿Ye ºË¿M |uYÁ Ä¿ÁYÁ Zfb˯
(M-MuLV,
Fermentase)
Ä]
Å
À¯YÁ c|» Ä] ,
{ Ĭ̫{
ÉZ»{
Êf¿Z Èm{
{Y³
| Ã{Y{ Y«
. Å
À¯YÁ
Êa Ê
M ÊËZÆ¿ ºnu Ä]
fÌ·Á°Ì»
, mM
/
dNTPs
, mM MgCl2
, pM
ÁºÌ¬f»³Z£MÅY
, ° »
/ Êa§Z]fÌ·Á°Ì»
Ê
M Á /
|uYÁ ºË¿M
É{
.
½Y . ʸa Y
Y»
)
SmarTaq DNA Polymerase,
Sinaclone
( Á lÀa É{ fÌ·Á°Ì»
.
½Y . Y É Ã{Á§Y ¶¼°»
|
.
¸°ËZ»eÃZ´f{Z]¹Â¿¿{»ÈÌuZ¿Ìj°e )
thermal cycler
µ|»
Palm cycler
Z¼Ä]
Ç
,CG1-
96 ,Corbett Research Australia
( ª^ Á
»Z¿]
È
ÊaÊeYu Ê
M Èyq®Ë¶»Z
dYÁ ÄÌ·ÁYÉZ
{
f¿ZÈm{
Ê {Y³ Ĭ̫{Äc|»Ä]
, Äyq :
dYÁ
{ÉZ
Êf¿ZÈm{
{Y³
®Ëc|»Ä]
ijÁ{,Ĭ̫{
{ÉZ
ºC
],Ĭ̫{®Ëc|»Ä]
{
Êf¿Z Èm{
{Y³ Ĭ̫{ ®Ë c|» Ä]
Á
®Ë
Èyq
{ÊËZÆ¿]
Êf¿ZÈm{
{Y³ c|»Ä]
Ĭ̫{
d§³¹Zn¿Y .
cÓÂv»
RT-PCR
µ{
ÁZ³M
§Z]{|{®Ë )TBE
Tris-Borate-EDTA
(
®Ì°¨e
²¿ Y a Á
µÂ¸v» Z] ÉÌ»M
µg/ml
¹ÂË|ÌeY
|Ê]Zf¿Y{»ÇY|¿Y{cZ «Ìj°e,|ËZ»Á]
.
kYzfY cÓÂv»
RT-PCR
Ä]Â]»
ÌuZ¿
È
HC-Pro
Ä] Z³M µ Y
¸ÌÁ È
·Zy d̯
ÉZ
d¯
½Z̯
)
QIAEX II Agarose Gel Extraction Protocol
(
¹Zn¿Y
Ã|Ìj°ecZ «Á Ä]
ÂÀ»
É|ÌeÂX¸¯Â¿¥{Ye¾ÌÌ e
ÄÂ]»ÉZųZ£MYÃ{Z¨fYZ]ÁdÆmÁ{Å{
Ä]
½Â¸¯ZÀÌd¯
µZY
|
.
§Ê]
Ì Ê°Ìf¿Â¸
ËZ¬»Ya È
¥{Ye Ä «Å
¹Y³ÂeZ»Á¯Z]
ÁÄÂ]»
ÊWmsÔY )
ZÌ¿cÂ{
( , Ye
¥{
ZÅ
Y]YYÃ{Z¨fYZ]
dm Á ÉÂm )
Biological Local Alignment Search
(Tool BLAST
¥{Ye Z]
½ ®¿Z] { {Âm» ÉZÅ
National Center for Biotechnology Information)
(NCBI
|ÄËZ¬»
.
ºÅ
¦Ë{
¿Z³|ÀqÉZ
È
¥{Ye ȼmeÁÉ|ÌeÂX¸¯Â¿
ÄÀÌ»M |ÌY
Y Ã|Ìj°e cZ « ÉY
ÈËY|m
BYMV-
GPK
ÄËY|m ZÀf» ÊuY¿ ¥{Ye Z]
¦¸fz» ÉZÅ
d^i
½®¿Z]{Ã|
)NCBI
µÁ|m (
YÃ{Z¨fYZ]
¹¿
Y§Y
DNAMAN 4.02
)
Lynnon Biosoft, Quebec,
Canada
( Á|ÀËÁ ¶»Z ºfÌ dve d§³ ¹Zn¿Y
Á
Â]» ʿ¸̧ dy{
ʻ¿ ÈÌuZ¿ Å Ä]
Á Ä]
neighbor-joining (Saitou & Nei, 1987)
Z]Á
Y°e ºÌe
| .
¶Ì¸ve {
ÄËY|m ʿ¸̧ ÉZÅ
Y ÉY
|^ É{ ±^³ ÁËÁ
(ClYVV)
Z]
Z¼
AB011819
, Ä]
½YÂÀ
½Á]
ÃÁ³ Ã{Z¨fY
|
.
{Z]M¹Z¿Ê¨Ë
½YZ°¼ÅÁ :
ʳËÁ
¶ËԳʿYËYÈËY|mÊ°Ìf¿Â¸Ì§ÁÊ°Ë·ÂÌ]ÉZÅ ...
µÁ|m . ÄËY|m ÉZÅ ªÌ¬ve¾ËY{Ê°Ìf¿Â¸Ì§ÉZŶ̸ve{Ã{Z¨fY{»BYMV
ÊËZ̧Y¤mZÀ» Z¼ ½Z]Ì» ÄËY|m¹Z¿
¾Ìq EF592168 Canna sp. Chz
¾Ìq EF592169 Canna sp. Csz
ZÌ·YfY JX173278 Diuris magnifica L. KP2
ZÌ·YfY JX156423 Diuris sp. SW3.2
Ê]ÂÀmï FJ492961 Freesia sp. Fr
¾aY AB029438 Gladiolus hybrida L. E-24N
¾aY AB029439 G. hybrida E-92C
¾aY AB029435 G. hybrida S-22N
¾aY AB029436 G. hybrida S-22C
¾aY AB079886 G. hybrida M11
¾aY AB079887 G. hybrida IbG
¾aY AB439730 G. hybrida G1
¾aY AB439729 G. hybrida Gla
Z°Ë»Y AY192568 G. hybrida GDD
Z¼¿Y{ X53684 G. hybrida Danish
½ZfÁ|ÀÅ AJ844916 G. hybrida E441
½ZfÁ|ÀÅ EF611822 G. hybrida Solan
½ZfÁ|ÀÅ KF155421 Gladiolus cv. Video Glad-7
½ZfÁ|ÀÅ KF155420 Gladiolus cv. Regency Glad-13
½ZfÁ|ÀÅ KF155422 Gladiolus cv. Tiger flame Glad-20
¾aY AB079888 Gladiolus sp. GB2
ËY
½Y - Gladiolus sp. BYMV-GPK
ZÌ·YfY EU082118 Lupinus angustifolius L. LDw-NN
Ä̯e EU082119 L. pilosus LP-1
Ä̯e EU082120 L. pilosus LP-2
ZÌ·YfY EU082122 L. luteus LutKP-2
ÄÌÁ EU082125 L. luteus RLut-2
Z°Ë»M EU144223 L. luteus Pullman
¾aY AB373203 Pisum sativum L. CS
¾aY AB041971 P. sativum P242
¾aY AB439732 Trifolium pratense L. 92-1
½ZfÁ|ÀÅ AY845012 Vanilla fragrans L. VM-23
Z°Ë»Y AY520092 Verbena × hybrida Verbena
¾aY AB439731 Vicia faba L. 90-2
¾aY AB041970 V. faba (cv. Boushu-hachibu) V124
¾aY AB029437 V. faba (cv. Ryosia-issun) Sb-50C
¾aY AB029440 V. faba (cv. Sanuki-nagasaya) Sb-12C
½YËY - V. faba BYMV-IRAN
ZÌ·YfY EU082116 V. faba FBI-1
ZÌ·YfY EU082114 V. faba FBI-2
ZÌ·YfY EU082115 V. faba FBI-3
ZÌ·YfY EU082113 V. faba FBD3
hv]ÁlËZf¿
Y,YËÓY½Â»MlËZf¿ ZY]
ÇY|a
¼m ÉÁM Ã|
Y|aËÂe¯Y»Y k¯½ZfÆÇ
, Ŀ¼¿
) /
|{
( Ä] Ã{·M BYMV
{Â]
Ê·Zu{ ,
į
] ʳ{·M Ä
ÁËÁËZ
¿Ã|ÅZ»Ê]{»ÉZÅ
| . ]
¾ËY ZY
lËZf¿
ºÆ»BYMV
¾Ëe ËÁ Á
³Z¼Ì]
¾ËY{¶ËÔ³
½ZfÆ
dY .
{
±]
Ä]Ã{·M¶ËÔ³½ZÅZ̳ÉZÅ
¾ËY
| Ã|ÅZ» |Ë| Ze ¦Ì¨y ®ÌËY» ºWÔ , ÁËÁ )
¶°
.(
ʳ{·M ÉÓZ] ½YÌ» ¾ËY Ä]
BYMV
½Z¿
|ÀÅ{
Ç {f³ÂÌ
Ç
¶ËÔ³{ ÁËÁ¾ËY dY
Y
Y| ] BYMV
¾Ì»Á{
ÁËÁ
\·Z£
{Y{cËZ¤»|¿{Â]
BYMV-GPK
¿®
/
|
¶°
, D
³{
¿Â / Ä Å/
ÉZ
C.
C. album
Ä] Ê Â» ºWÔ
Ä°· cÂ
ÉZÅ
±] ÉÁ { Ze ¾Á ^ Ë
ÄËZ» ÉZÅ Ê¿
Ã|
ÉËYº«Ô«Z]ÃZ̳{
V. faba cv.
Ä]ZÅ
±]Ây YÂmÉZÅ
ÁÊËÓZ]½
|Ã|Ë{{®ÌËY»ºWÔÃ|{ZnËYÉZÅ É]wZº«Ô«Z]ÃZ̳{
V. faba cv.
ÊÀÁ ±^³
{
±]
½YÂm ÉZÅ
º«Ô«Z]ÃZ̳{
V. faba cv. VC 1973
ºWÔ ½Á|] ®Ì¼fÌ Ê³{·M {Y{ w
ZY]
ÄËY|m ÁËÁ¶ËÔ³ÉZÅ {®ÌËY»
ÉZ¼Ì] ¿ Y ½ÂeÂe ½ZÅZ̳ ÉÁ ÊËY
N.
¦Ì¨y Á |Ë| ÃÁ³ Á{ Ä] Ô«Z] Á
Nakazono-Nagaoka et al., 2004a
ȸÌÁ ËY|m È
BYMV-GPK
ÃZ̳{
N. benthamiana
Ä]ÄÌ^ZÌ]
ËY|mºWÔ
È
BYMV
Á
S-22N
ÁËÁ ¾ËY dY
ªÌ¬ve¾ËY{Ê]{»ÈËY|m
ÉÁ
ËY|mºWÔÄ]ÄÌ^ZÌ]
È
|Ë|
{Â] ÁËÁ¾ËY
¾ËYY lËZf¿¾ËY ZY]Á
BYMV-GPK
mY
L ÄËY|m
|Ë|ÉZÅ
ÃZ̳¿Y{
Ê°a
½YËY ÃÁ{
ÃZ¼,
½Zf]ZeÁZÆ],
Bridgmon & Walker 1952,
{Y{d¬]Z»
ʷZu{, į
¹|
ÄeÂ]{ZÌy®ÌËY» ÁËÁÊ]ZË{
¶Zu¶ËÔ³ÉZÅ
½Z¬¬v»lËZf¿Z]ªÌ¬ve¾ËY{Ê]{»ÉZŠį¯~»
CMV
Y
Ã{¯Ê§ »¶ËÔ³
{Y{cËZ¤»|¿{Â]
¶°
ÌËY»ºWÔ
ij®
|̨¶ËÔ³{ÉY
Ã{·M ÄËY|mÄ]
GPK
BYMV-GPK
{
Ä¿Zz¸³ËY
ÉY
Ê°Ì¿Z°» Ê¿
ËY|m È
BYMV-GPK
ÉÁ
ÉÁ®Ì¼fÌZËÊ Â»ºWÔ, Êy]
{ºWÔ
N. benthamiana
Ã|ÅZ»®Ì
|
¶°
, A
N. clevelandii
pÌÅÁ{Â]½Zƿʳ{·M
Ân¿Y{º«ÊfÌqZÌ]·{
P.
±^³,{®ÌËY»ºWÔ
Y|¿YÅZ¯,|ÅZ¯,Ã{·MÉZÅ Ç
±]Êy]{¶°Ì̤eÁZÅ ÉZÅ
Ã|ÅZ»½YÂm
ZÌ]·ÃZ̳{
P. vulgaris cv.
®ÌËY» ºWÔ
{^
, ÅZ¯
|
Á
Ã|ÅZ» ½YÂm Á ÊËÓZ] ÉZÅ
|
{
P. vulgaris cv. Red
ºWÔ
| Ã|ÅZ» ¦Ì¨y ®ÌËY»
º« »« ZÌ]· ÃZ̳ {
P. vulgaris
{Á{®ÌËY»ºWÔ
½{ÂypÌaÁÃY|¿YÅZ¯,|ÅZ¯Ã{·MÉZÅ Ã|ÅZ»¶]Z«½YÂmÁÊËÓZ]ÉZÅ
»« ļ¸ ®v» ÃZ̳ {
C. amaranticolor
±] ÉÁ { Ê Â»
ÄËZ» ÉZÅ Ê¿
Ã|
±^³{É{Á
f³ZÅ ,d§ZË
·Á //
̼fÌÊ /
¿®
quinoa
Á
C. album
±] ÉÁ { Ze ¾Á ^ Ë
Ã|ÅZ»
| ÉËYº«Ô«Z]ÃZ̳{
Saraziri
±]{
Ä]ZÅ
ÂmZaÉÁ
|Ã|Ë{{®ÌËY»ºWÔÃ|{ZnËYÉZÅ
¶°
, E
É]wZº«Ô«Z]ÃZ̳{
Shakh bozi
ÊÀÁ ±^³
|Ã|ÅZ»
º«Ô«Z]ÃZ̳{
ºWÔ ½Á|] ®Ì¼fÌ Ê³{·M cZ¬Ì¬ve
¾ÌÌa ÄËY|m
ZÌ]·
ÉZ¼Ì] ¿ Y
benthamiana
¦Ì¨y Á |Ë| ÃÁ³ Á{ Ä] Ô«Z] Á
Ê»ºÌ¬e
|¿Â
2004a
Ã|{ZnËYºWÔ
Ä]
ȸÌÁ
½ÂeÂe
N. benthamiana
|Ë|
BYMV-GB2
¾ÌÀr¼Å ºWÔ
ªÌ¬ve¾ËY{Ê]{»ÈËY|m
Ô«Z]
ÉËYº«
BYMV-IbG
{Â] ÁËÁ¾ËY
Ê»
ËY|m½YÂe È
GPK
į
lËZf¿Z]
¬¬v»ËZ
Z
½
Bridgmon & Walker 1952,
Nagel et al., 1983
Ì¿
{Y{d¬]Z»
ÄeÂ]{ZÌy®ÌËY» ÁËÁÊ]ZË{
ÃY|aY
½Z¬¬v»lËZf¿Z]ªÌ¬ve¾ËY{Ê]{»ÉZÅ
¶°
È ·Z»
ÈÀ»Y{
»Ì
Ê¿Z]
GPK
ÄËZ» Y a Ê°Ì¿Z°» Ê¿
®v»½ZÅZ̳ ÉÁ®Ì¼fÌZËÊ Â»ºWÔ,
Y
|ÅZZÆ¿M
µÁ|m
Ä]
¼fÌ®ÌËY»cÂ
Ã|ÅZ»®Ì
{
Ê·Zu
{į
N. clevelandii
|¿Ã|ÅZ»Ê¼WÔ
Ân¿Y{º«ÊfÌqZÌ]·{
vulgaris cv. Daneshjou
ÄeÂ]{ÁÉ{
Y|¿YÅZ¯,|ÅZ¯,Ã{·MÉZÅ
Är³]
±]Êy]{¶°Ì̤eÁZÅ
|
¶°
, B
Á C
ZÌ]·ÃZ̳{
Bountiful
®ÌËY» ºWÔ
±] { ʸ°|]
Ã|ÅZ» ½YÂm Á ÊËÓZ] ÉZÅ
»«ZÌ]·ÃZ̳
Kidney
| Ã|ÅZ» ¦Ì¨y ®ÌËY»
{ZÌ
P. vulgaris cv. Sayad
ÄeÂ]
½{ÂypÌaÁÃY|¿YÅZ¯,|ÅZ¯Ã{·MÉZÅ
±]{¾ÌËZad¼Ä]
Ã|ÅZ»¶]Z«½YÂmÁÊËÓZ]ÉZÅ
{Â]
»« ļ¸ ®v» ÃZ̳ {
°· ºWÔ
È
±] ÉÁ { Ê Â»
Ã|ÅZ»
|,
|uZeZ»Y
±^³{É{Á
¶ËԳʿYËYÈËY|mÊ°Ìf¿Â¸Ì§ÁÊ°Ë·ÂÌ]ÉZÅ
BYMV
ÉÁ
C. quinoa
ÄËY|m¾ËY,
{
Ê»Y«
{̳ ÉÁÃ|{ZnËYºWÔ¿YZ»Y
ËY|mÄ]ÄÌ^½ÂeÂe È
S-22N
dY ÃÁ³{į
µÁY NS
dY Äf§³ Y«
ËY|m È
BYMV-GPK
À»Y{ ¿ Y È
ËY|mZ]®v»½ZÅZ̳ÉÁÃ|{ZnËYºWÔ
È
(BYMV
Rohani, 2008
{Y{d¬]Z»
BYMV-GPK
^³,®
/
¯ÁÉ{±
/ ÅZ /
/
{|
P. vulgaris
{®Ì¼fÌ®ÌËY»ºWÔ
V. faba cv. Saraziri
BYMV
¶ËÔ³YÃ|Y|m,
Ã{Y¿Zy
Chenopodiaceae
Solanaceae
Papilionaceae
±]{ʸ°|]
ZÅ , LR
±]ʳ|ÌrÌa ZÅ
, M ,®ÌËY»
V
{Y|¿ZfY ÉZÅ
Á µ {
ʷ°·Â» ½Á ºfËZ´·
Z]ʷ°·Â»½Á
Ä]Â]»|¿
ÊÂa¾ÌXeÁa
ËY|m È
,
¯ Ì {ÁM]½Âf·Y{¸
|
½Â»MZ]Á
{Z]M¹Z¿Ê¨Ë
½YZ°¼ÅÁ
ʳËÁ
¶ËԳʿYËYÈËY|mÊ°Ìf¿Â¸Ì§ÁÊ°Ë·ÂÌ]ÉZÅ
ZÌ]· { ®ÌËY» Á
É
Y Ã|Y|m
cZ¬Ì¬ve ZY]
½YZ°¼ÅÁY{YÁ
ËÔ³ ÉZ / ËY ¶ / ËÁ ¾ /
¿ Y Á
/
®v»ÃZ̳ÉÁÊËY
C. quinoa
ÃÁ³Á{Ä]
NS
ËY|mÁ{¶»Z
È
E-24N
Á
S-22N
Á
ËY|m Á{ ¶»Z
È
E-92C
Á
S-22C
|Ì·ÂeÄ]ÄmÂeZ]
Ä°·
ÉZÅ {^
Âe ËY|m
È
BYMV-GPK
ÃÁ³ CS
Ê»Y«
ËY|mÄ]ÄÌ^½ÂeÂe dY Äf§³ Y«
ÁÊ¿Z]Ì»
ËY|mZ]®v»½ZÅZ̳ÉÁÃ|{ZnËYºWÔ
Ô«Z]
BYMV-IRAN)
¶°
ÄËY|mZ]®v»½ZÅZ̳ʿÄËZ»YÊZ¿ºWÔ
GPK
̼f̮
//
{®
N. benthamiana ,
,C B
/
WÔ / ÌËY»º /
^³,®
, D
±]{{Ê Â»Ä°·ºWÔ
,»«Ä¼¸ÉZÅ E
{®Ì¼fÌ®ÌËY»ºWÔ
Z]Ê°Ì¿Z°»Ê¿ÄËZ»Ya®v»½ZÅZ̳À¯YÁ ÄËY|m
BYMV-GPK
®v»ÃZ̳ʼ¸¹Z¿ Ã|{ZnËYºËÔ
®Ì¼fÌ
»
Ê
Chenopodium album L. CLL / -
C. amaranticolor L.
CLL / -
C. quinoa L. CLL / -
C. murale L. -
Capsicum annuum L.
-
Datura metel L.
-
D. stramonium L.
-
Nicotiana benthamiana L.
- / M
N. clevelandii L.
- / L
N. debneyi L.
-
N. glutinosa L.
-
N. rustica L.
-
N. tabacum L. cv. Samsun
-
N. tabacum L. cv. Burley
-
Nicandra physalodes L. -
Physalis floridana L. -
Solanum nigrum L.
-
Phaseolus vulgaris L. cv. Bountiful
- / M, LD
P. vulgaris L. cv. Red Kidney
- / M
P. vulgaris L. cv. Sayad
- / M, D, LR
P. vulgaris L. cv. Daneshjou
- / M, LD, D
Vicia faba L. cv. Saraziri - / M
V. faba L. cv. VC 1973
- / L
V. faba L. cv. Shakh bozi
- / V
Vigna unguiculata L. cv. Kamran
-
Ê Â»Ä°·
{^
, D
|ÅZ¯
, L
½ZÆÀaʳ{·M ,
LD
±]{ʸ°|]
ÁÊÀÁ±^³
- ÄËZ»{ ÁËÁÊ]ZË{¹|ÁºWÔ½Á|]
Êf³]Ê¿
ËY|mÊÂa¾ÌXeÁaʷ°·Â»½Á È
BYMV-GPK
½Â»M ¹Zn¿Y Y
SDS-PAGE
¶°
, A
,
Ì
/ ½Â Ì]
/ ¾ u /
¯
/
^¿ d / Ê
¾ÌXeÁa {Y|¿ZfY ÉZÅ
,ZÆ¿M Z]ʷ°·Â»½Á
BYMV-GPK
,
ÉZ¼Ì]
ËÁ ÉY
ZÌ]· { ®ÌËY» Á
ÃÁ³¶ËÔ³ {¯É|À]
m / ÄËY|
Å/
ËÔ³ ÉZ
ÉZ¼Ì]
®v»ÃZ̳ÉÁÊËY
°·
Ã{»d§Z]È
ËY|mÁ{¶»Z
CS
°·
È {^
ËY|m Á{ ¶»Z
Ê»ºÌ¬e
|¿Â
|Ì·ÂeÄ]ÄmÂeZ]
A WÔ
//
ÌËY»º / ̼fÌ®
cv. Daneshjou ,
µÁ|m
Ã|{ZnËYºËÔ
®Ì¼fÌ
M, LD M, D, LR M, LD, D
CLL Ê Â»Ä°·
ÁÊÀÁ±^³
ËY|mÊÂa¾ÌXeÁaʷ°·Â»½Á a/
½Â»M ¹Zn¿Y Y ]/
Y
/ y Z /
³ / Ì
ÃZ̳¿Y{
Ê°a
½YËY ÃÁ{
ÃZ¼,
½Zf]ZeÁZÆ],
fÁ / ]½
/ cÔ Ì¿
/ Ä]
eP ÌË /
| Ì
/
| )
°
/
¶ , (B
¯ / Ä
]/
f¿ Z / ËZ / l
¬Ì¬ve / cZ ÌÌa /
¾ )
Hollings & Brunt, 1981; Rohani, 2008
(
¬]Z»
/
Y{d / d .
º·Z½ZÅZ̳±]YÃ|kYzfY¶¯¾ÌXeÁaÃ{»M (B)cÔ]½fÁÁ(A )ɧÁf°·Y¬¿. ¶°
N. glutinosa
)
®ÅZq (
Á Ã{·M
¶ËÔ³ ) ÉZÅ®ÅZq
Á ( , Ã{»M
¿ ļÌ
·Zy ÄËY|m
BYMV-GPK
)
®ÅZq ( Á Ã{»M
¾ÌXeÁa
¶¯
±]YÃ|kYzfY
½ZÅZ̳ Ã{·M
»«Ä¼¸
,
N. benthamiana
Á
N. clevelandii
) ] Ä
\Ìee
®ÅZq ZÅ É , Á .(
´¿Z¿, M
¾ÌXeÁa ÉZÅ {Y|¿ZfY .
ÊËZ¿YÂeÊ]
½Â»M ÉZÅ
°Ë·Á
Ê ÁTPIA DAS-
ELISA
{
Ê]ZË{
{BYMV ÃY|a
±]ÁÄ¿YÂmd§Z]Ê]Z]
Á{Å,
»M
½Â Ê°Ë·Á
)TPIA
¶°
( Á
DAS-ELISA
Ä]
ÄeÂ]ʳ{·MÊ]Ây -
Ä] ¶ËÔ³ ÉZÅ BYMV
į Ê·Zu{ , {¯ Z°M Y
pÌÅ
Y ÁËÁ Ê]ZË{ Ä] {Z« ½Â»M Á{ ¾ËY Y ®Ë d¼«
ÃY|aÊvÁʸyY{ÉZÅ ÉZÅ
½Z¼ÅÄ]Â]»
ÄeÂ]
ÉZÅ ÁËÁÄ]Ã{·M
į{Â^¿
ªÌ¬velËZf¿Z]
et al.,
Katoch
) (2003
{Y{ d¬]Z»
. lËZf¿ Ä] ÄmÂe Z]
cZ¬Ì¬ve
¬¬v» Y ÊÅÁ³ Z
,½ BYMV
Á Z]
ÉZÅ
Êa°Á°Ì»½Áf°·YÁÉ·ÁªÌ¨¸e,cÔ]½{¿
ISEM)
( ,
DAS-ELISA
Á
RT-PCR
ÃY|a {
Á ZÅ
Y|a ¶]Z« ¶ËÔ³ ÉZÅ Ê]ZË{
¿ ,dÌ
±] { Z»Y ZÅ
Ä]
ÊfuY
Ê]ZË{
Ê»
Â
{ )
Stein et al., 1989XQVKet
al 6WHLQet al., 1994
.(
Stein et al.,
) (1986
Êf¿M ¿ į |¿|¬f »
Á { Ã{Z¨fY {» É{Z]
ÉZÅ
dve d¸Ê]
¹|
ÃY|a{ ÁËÁ¾ËYÊ]ZË{
ÁZÅ
Y|a ZÅ dY . į ZÀ » ¾Ë|]
Êf¿M É{Z]
ZÅ Ã||Ì·Âe É
ÄËY|m ÉY]
½Z]Ì» ÉZÅ ] {Z« ¶ËÔ³ Ì£ ÉZÅ
Ä Ê]ZË{
ÃY|a{ ÁËÁ¾ËY
Y|aÁZÅ dÌ¿¶ËÔ³ÉZÅ
, Z»Y
Ê»
z] { Y ÁËÁ ¾ËY ½YÂe Z] ,ÃZ̳ ÊËYÂÅ ÉZÅ
Êf¿M¾ËYYÃ{Z¨fY
¹
ZÅ Ê]ZË{
{¯
.
¬¬v»Êy]
Z
½
¾ËY {ZË Ê°Ë·Á ÂÀe lËZf¿ ¾ËY d¸ Y ÁËÁ
ÁÄf¿Y{
Êf¿MYÃ{Z¨fY É{Z]
Ä¿Z¼Å|Àq ÉY
{
TAS-
ELISA
)
Triple antibody sandwich ELISA
( Y
ÉY]
Ê]ZË{
Ã{¯{ZÆÀÌa ÁËÁ¾ËY
|¿Y )
Sasaya et al.,
¶ËԳʿYËYÈËY|mÊ°Ìf¿Â¸Ì§ÁÊ°Ë·ÂÌ]ÉZÅ
ÄÂyYÊ°Ë{¶ËÔ³ÉZÅ
ZÅ ÈÂyËÁ{
ÈËY|mÁ|¿Y GPK
ÈËY|mÁ{ZÀ¯{
Gla
Á
|^ ÈËY|m Á ¶ËÔ³
(92-1)
|¿Y{ Y«
Y
¬§ ¶ËÔ³ ÉZÅ ÈËY|m Á{
IBG
Á M11
{
ÄËY|m ZÀ¯ { Á ´Ë{ ÉY
½Z¿Z]Ì» ËZ Y ÊËZÅ
|¿Y{Y«cZ]Â^uÁÊfÀË
RT-PCRµÂv»É§Áf°·Y Ä]Â]»
ÊÂa¾ÌXeÁaÌj°e
CP
Á ÄÌuZ¿
HC-Pro
ÄËY|m
YÃ{Z¨fYZ]
ÃZ̳¶¯Y½YMÃ{»M
¶ËÔ³
®ÅY
, Á º·ZÃZ̳,
®ÅY
Á Á
ʻ¼
POT R / POT FOR
Á ÊZfyY
BYMV F1370 / BYMV R2340
,M
ÃY|¿Y´¿Z¿
DNA
,ÉZ]¸̯®Ë
Gene RulerTM 1Kb DNA Ladder
]»Ê°Ìf¿Â¸Ì§dy{
/ Ä]Â e/
¼me¥{Y
/ È
|ÌY
ÄËY|m ¾ËY ÉY
» Ì¿ ZÅ Ä]Z
Ê°Ìf¿Â¸Ì§ dy{
{Â]É|ÌeÂX¸¯Â¿
ZY]
ËZ¬»Y¶ZulËZf¿
È
Á É|ÌeÂX¸¯Â¿ ¥{Ye ȼme
ÀÌ»M |ÌY Ä
ÈÌuZ¿ ÉY
HC-Pro
ÄËY|m , ÉZÅ Á Gla BYMV-
\Ìee ÈËY|mZ]YdÅZ^¾Ëf¼¯Á¾ËfÌ]
|ÀfY{
µÁ|m
ËY|m È GlaÃZ̳Y
Gladiolus hybrida
ÉZY|m
¿YÁÃ|
m ºWÔ c| Á ÊËY
L ÄËY|m
|Ë| ÉZÅ
Â
{
Nakazono-Nagaoka et al.,
ËY|m Âe Ã|{ZnËY ºWÔ Ä] ÄmÂe Z]
È
{Z]M¹Z¿Ê¨Ë
½YZ°¼ÅÁ
ʳËÁ
¶ËԳʿYËYÈËY|mÊ°Ìf¿Â¸Ì§ÁÊ°Ë·ÂÌ]ÉZÅ
Vunsh
d·Zy{ Ì¿ 1991
{Y»
Y|aÉZÅ Ã
{ZÅ ÃÌn¿À¯YÁ ÉY
{Á¾ËYd°d¸
Ê]ZË{
ÁËÁ¾ËY
TPIA
Ê]ZË{{
BYMV
±]d§Z]{
BYMV-GPK
Á Á d¼«
ÉZÅ
ÄeÂ]½Z¼ÅÄ]Â]»
¶ËÔ³ , Á
{
¶ËÔ³º·ZÃZ̳Z]ÄËZ¬»
²¿cÂÄ]d^j»À¯YÁ
Ê»Ã|ÅZ»É·Â¸ÁfÌ¿ÉZ£t{ÃZ̳d§Z]iY
{Â
ÊZfyYÉZųZ£Md¨mYÃ{Z¨fYZ]
½Â»M{
RT-
µÂÄ]Ê
Y ÌuZ¿
È
(HC-
Z] d¨m
Y ÉZÆf¿Y '
¹Â¿
Ìj°e
|
É|ÌeÂX¸¯Â¿¥{Ye¾ÌÌ e
z], ÉZÅ
dÌ «Â»
Ze
¹Â¿Y Á
Ze
¹Â¿Y Ä]
Â]»\Ìee
ÊÂa¾ÌXeÁaÁ
ļ̿
ʸ̯Â]¯
ÈÌuZ¿Ä]Â]»Z]d¨m
3'-UTR
ÊuY¿ É|ÌeÂX¸¯Â¿ Ê¿Z°Ë ½YÌ»
,HC
Á ÊÂa ¾ÌXeÁa
3'-UTR
Á
É «
cZ Ã|Ìj°e
HC-Pro
Á
ËY|m / È
BYMV-GPK
Z]
/
ËZ
½®¿Z]{{Âm»ÉZÅ
µÁ|m{
dYÃ|»M
Ê°Ìf¿Â¸Ì§ dy{
Ä]
d{
Ã|»M
¥{Ye ZY]
HC-Pro
ÈËY|m BYMV
Y
ZÌ¿{ ¦¸fz»
Á Ä]
neighbor-joining
,
ÄÂy d¨ÅÁ
|Àf§³Y«ÃÁ³
¶°
{¶ËÔ³ÉZÅ Á{Å
ÄÂy
|ÀfY{Âu
ÄËY|m\¸£Y ÄÂyYÊ°Ë{¶ËÔ³ÉZÅ
Yn»
«YÁ ÈËY|mÁ|¿Y
Glad-20
|^ ÈËY|m Á ¶ËÔ³
ÄËY|m
¬§ ¶ËÔ³ ÉZÅ ÄÂy ÄËY|m ZÀ¯ { Á ´Ë{ ÉY
|¿Y{Y«cZ]Â^uÁÊfÀË
¶°
¬¿
ÊÂa¾ÌXeÁaÌj°e
BYMV-GPK
Ä]Ã{·M
\Ìee
®ÅY
ÉZųZ£M
ʻ¼
BYMV F1370 / BYMV R2340
,ÉZ]¸̯®Ë
]»Ê°Ìf¿Â¸Ì§dy{
ÀÌ»M Ä ÄËY|m ¾ËY ÉY
¥{Ye {Â]É|ÌeÂX¸¯Â¿
Á É|ÌeÂX¸¯Â¿ ¥{Ye Ã|Ìj°e
Y
Pro
IRAN
Ä]
\Ìee
BYMV-GPK
|ÀfY{
¶ËÔ³
hybrida
ÉZ¼Ì]
m ºWÔ c| Á ÊËY
ÃÁ³ Ê» É|À]
Â
ËY|m Âe Ã|{ZnËY ºWÔ Ä] ÄmÂe Z] 2009
1998b Vunsh et al.,
|¿Y{Z]
Ç d§Z]¶yY{
Y|aÉZÅ
ʸa YY»
{Á¾ËYd°d¸
Ê»
|À¿Y{
¶°
½Â»MlËZf¿
TPIA
Ã{·M¶ËÔ³
ÄËY|mÄ]
GPK
ÃY|a¦¸fz»
ÄeÂ]½Z¼ÅÄ]Â]»
¶ËÔ³º·ZÃZ̳Z]ÄËZ¬»
»«
Ê»Ã|ÅZ»É·Â¸ÁfÌ¿ÉZ£t{ÃZ̳d§Z]iY
Ê°Ìf¿Â¸Ì§Ê]
ÊZfyYÉZųZ£Md¨mYÃ{Z¨fYZ]
,PCR
Ä]
\Ìee
«
eZ µÂÄ]Ê
Pro
Á Z] d¨m
¶°
Ya É|ÌeÂX¸¯Â¿¥{Ye¾ÌÌ e
Z]d¨m
dÌ «Â»
Z]d¨m
dÌ «Â»
ÊuY¿Ä]
HC-Pro
ÊÂa¾ÌXeÁaÁ
CP
¾ÌÀr¼ÅÁ
Ä]
|»M d{
ÊuY¿ É|ÌeÂX¸¯Â¿ Ê¿Z°Ë ½YÌ»
Ã|Ìj°e
Y
HC-Pro
ÄÀÌ»M |ÌY ȼme Y
É
Âa ¾ÌXeÁa /
Ê ËY|m
ÄËY|m
½®¿Z]{{Âm»ÉZÅ {
Ê°Ìf¿Â¸Ì§ dy{
ÌuZ¿ É|ÌeÂX¸¯Â¿
È
Pro
½Z]Ì»
ÉZÅ ZÌ¿{ ¦¸fz»
ÄËY|m {ZÅ
Ä
ÄÂy
į
ÄËY|m
{¶ËÔ³ÉZÅ
