هدکشناد مولع یهاپ
یشزومآ هورگ یسانش تسیز
اپ ی نا همان ارب ی رد ی تفا اپ هجرد ی نا همان سانشراک ی دشرا
هتشر یسانش تسیز ارگ
ی ش و یلولس یلوکلوم
نایب و یزاس نولک نیئتورپ
noggin یناسنا
هب لصتم بیکرتون GFP spark
یاهلولس هدر رد
هنیس یناطرس
رگشهوژپ :
ینارهت یماوقا هدازآ
داتسا نا امنهار :
دیون یفیطل دیعس رتکد یرهز رباص روسفورپ
رواشم داتسا :
اقس نسحم رتکد
رویرهش 1398
ناونع و :روآدیدپ مان نایب و یزاس نولک
نیئتورپ noggin هب لصتم بیکرتون یناسنا GFP spark
هدر رد
هنیس یناطرس یاهلولس /
ینارهت یماوقا هدازآ
داتسا نا امنهار : دیعس رتکد دیون یفیطل
و یرهز رباص روسفورپ
داتسا :رواشم اقس نسحم رتکد
خیرات :عافد
دادعت حفص :تا 102
ص
نایاپ هرامش :همان
اپ هرامش / هورگ مان ی
نا همان
:هدیکچ :فده نانز نیب رد ناطرس نیرتعیاش ناتسپ ناطرس و ناریا
وماع نیومود ناوونع هب و دشاب یم ناهج
ایند رد گرم ناطرس یاهلولس یاه یگژیو زا یکی .تسا هدش هتخانش
ی وماع هک تساهنآ زاتساتم تیلباق
زا شیب 90
% .تسا ناطرس زا یشان ریم و گرم هداوناوخربا هب قلعتم هک دنتسه یمهم یاهنیئتورپBMPs
ندرووخ موه هوب و دونراد دولوس تاویح و تکرح ،ریثکت ،زیامت میظنت رد یمهم شقن و دنشاب یمTGFβ
نت .ددرگ روموت تفرشیپ و ییازروموت هب رجنم دناوت یم اه نآ میظ .دونراد اهروموت رد ییلااب نایب اهBMP
رد یضقانتم تارثا اهنیئتورپ نیا رد هولمج زا نآ ددوعتم وحارم و فلتخم یاه ناطرس
EMT (Epithelial
mesenchymal transition)
ک دنراد ییازگر و راد یگتسب یروموت طیحم زیر هب ه
د
؛ هتسب رگید ترابعب عوون هب
.دنشاب هدننک راهم مه و هدننک کیرحت دنناوت یم مه ناطرس سکیرتام بیرخت و مجاهت دناوت یمBMP4
ناویب شیازفا قیرط زا ار ناتسپ ناطرس رد وMMP2
یاوه هدر ددوعتم عاوونا رد و دونک کویرحتMMP9
ددرگ یم ترجاهم ثعاب ناتسپ ناطرس یلولس .
NOGGIN
هوک توسا ناسر مایپ دوکلوم کی رد ارBMP4
.دنک یم راهم نیوکت دوط یحوشرت دیتپپ یلپ
NOGGIN
هداوناوخربا یاوضعا هوب هولمج زاTGFβ
BMP2
،
وBMP4
و دنک یم داعف ریغ ار اهنآ و دوش یم صتمBMP7
هدنریگ هب اهنآ داصتا زا ناوش
یوم توعنامم
تسینوگاتنآ عقاو رد دنک .تساهBMP
شور سانش :شهوژپ ی یناویب روتکو هعلاطم نیا رد
pCMV3-C-GFPspark
یواوح
cDNANoggin
یناوسنا
داقتنا زا سپ .دش هیهت یرتکاوب نورد هب بیکرتونDNA
Ecoli DH5α
اوب هارومه دیموسسپ رویثکت
cDNA
Noggin
نورد هوب هدش صلاخ بیکرتون دیمسسپ سپس ،تفرگ تروص دیمسسپ یزاس صلاخ و دش ماجنا
یناتسپ یناطرس یاهلولس هدر زاMCF7
دش قتنم نشیروپورتکلا قیرط .
هتفای اه یریگ هجیتن و نژ:
Noggin
هب صتم تروص هب
GFPspark
یاهلولوس نورد رد MCF7
ناویب
دش و یاهلولوس نورد رد رونر زبوس اوقن مکارت ساسا رب ،سناسرولف رکرام نیا دوجو رطاخ هب
قیرط زا نیئتورپ نیا دوجو .دش ییاسانش سناسرولف پوکسورکیم طسوت MCF7 SDS-PAGE
زوین
.دیدرگ یریگهر هژاو :یدیلک یاه
EMT , BMPs , Noggin ,MCF7, GFP
1 فده و همدقم -
1-1 -
؟تسیچ ناطرس
یعیبط ریغ یاهلولس شرتسگ و درتنک باق ریغ دشر نآ ی هصخاش هک تسا یرامیب ناطرس رگا هک تسا ندب رد یوم گرم هب رجنم تیاهن رد دوشن درتنک و هدش شخپ ندب رد یرامیب نیا
ددرگ . دشاب ینوریب دناوت یم ناطرس داجیا ماع ،
تایناخد دامعتسا دننام ،
ینووفع ماوع ،
وماوع
دووشاب یوولخاد اووی و عووشعشت و ییایمیووش دووننام
یووکیتنژ یاووه شووهج: ،
طیارووش و اووه نووومروه
درف یکیژولونومیا .
مه اب ماوع نیا ناطروس تفروشیپ ای عورش رد دنناوت یم مه دابند هب ای رگید
دنشاب رثوم .
ناطرسرثکا تفرشیپ و شرتسگ نایلاوس یوط رد هوک تسا هلحرم نیدنچ دنمزاین اه
دهد یم خر یدامتم .
ره زا 8 گرم ، رد گرم تلع نیمود و دهد یم خر ناطرس رثا رد گرم کی
تسا هتفای هعسوت یاهروشک .
رد یاهروشک دننامه زا یوبرغ یاهرووشک یگدنز کبس هعسوت داح
ندیشک راگیس یبق ،
یندوب تیلاعف شهاک و یرلاک رپ یاهاذغ و عابشا یاه یبرچ یلااب فرصم ،
تسا هداد شیازفا یبرغ یاهروشک رد ار ناطرس عویش نازیم (
Garcia, Jemal et al. 2007 )
.
دوش ناطرس راچد دناوت یم ندب زا یتفاب ره ابیرقت ،
نیدنچ دنناوت یم اه تفاب زا یضعب یتح
دنراد یدرف هب رصحنم یاه یگژیو مادک ره هک دننک داجیا یمیخدب عون ،
وحارم داح نیعرد اما
نیا ی هیاپ تسا ناسکی اه یمیخدب
. ناطرس حسطصا عقاو رد cancer”
زا رتشیب هب“ 100
عوون
ددرگ یم رب یرامیب نیا زا .
دودح 30 ندب رد سکلپمک و هدیچیپ تروص هب دامرن دولس نویلیرت
هک دراد دوجو ملاس یم درتنک ار یرگید ریثکت مادک ره
یناومز طوقف یوعیبط دولس ره و دننک
دوش ریثکت دناوت یم و دونک تفایرد ار مزلا روتسد شرواجم یاهلولس زا هک
یاروب یراوکمه نویا
ظفح هزادنا تسا مزلا تفاب ره بسانم یرامعم و .
یمن مع هیور نیا قبط یناطرس یاهلولس اما
دننک
؛ یوب دراد دووجو رویثکت یارب هک دومعم یاه درتنک هب اه نآ تواوفت
تاروتوسد زا و هدوش
و دننک یم یوریپ دوخ یلخاد یبق زا یصاخ یاه تیلباق
: هیلوا روموت هاگیاج زا ترجاهم ،
مجاهت
ندوب رود هاوگیاج رد ییاوه هدوت داجیا و اهتفاب هب یزادنا تسد و دونروآ یوم توسد هوب ار
. نویا
اتیاهن و هدش رت میخدب نامز تشذگ اب میخدب یاهلولس
"
اوهناگرا و اهتفاب یریگرد زا دعب ،
هدنوشک
دوب دنهاوخ .
سامروفسنارت اه شهج عمجت ی هجیتن رد دوش یم یمیخدب ثعاب هک دولس کی نوی
اهلولس نیا یاهنژ زا یصاخ یاه هتسد رد ا
تس ( Weinberg 1996 )
. هولحرم هب ناطرس هکینامز
اقم اه نامرد هب دیسر زاتساتم ی رد ناطروس هوب نایستبم زا ییلااب دصرد هکیلاح رد دوش یم مو
دنتسه نامرد باق ییادتبا حارم نامه .
مرف عورش زا یریگولج یارب هیلوا روموت نامرد نیاربانب
دسر یم رظن هب یرورض کیزاتساتم (Devita, Lawrence et al. 2018)
.
1-1-1 - روموت یدنب هجرد
ت ناومز رد یرامیب شرتسگ ساسا رب روموت یدنب هجرد یاروب و درویگ یوم ترووص صیخوش
تسا یرورض نامرد عون باختنا .
ساوسارب ناطروس یدونب هتوسد یاههار زا یکی Grade
دولوس
اه تسیژولوتاپ و تسا یناطرس ،
یوم یدونب هوقبط ار اوه نآ یرووموت دولس یژولوفروم ساسارب
دننک . ساسا نیارب ،
روب نآ یناطروس یاوه دولوس دشر و زیامت نازیم هب روموت کی ی هجرد یوم
دراد توافت یداع دولس اب یزیامت ظاحل زا ردقچ هکنیا و ددرگ .
داومرن دولوس هب اه دولس هچ ره
تسا رتشیب نامرد تیقفوم سناش و دنراد یرت مک ریثکت تعرس دنشاب رت هیبش .
–G1 (well differentiated) -
:low grade یاهلولوس اوب یومک تواوفت یناطرس یاهلولس
دشر و دنراد یعیبط دنا هتفای زیامت یبوخ هب لاومعم و دنراد یرت یمارآ
.
–G2 moderately differentiated) )
- intermediate grade دولووس :
یتهابووش اووه هووب
دامرن یاهلولس زا رتشیب یمک ناشدشر نازیم و دنرادن دامرن یاه دولس تسا
.
–G3 poorly differentiated) – )
:high grade تبوسن یرووموت یاهلولس
یاهلولوس هوب
ی هولحرم ویاوا رد و و دونراد ییلااوب رویثکت تعروس و دنیآ یم رظن هب یعیبط ریغ رایسب دامرن دنتسه راشتنا (
Admin 2016 )
.
ناطروس یدونب هوجرد یاهمتسیس زا یکی ،
یدونب هوجرد متوسیس (
, Metastastic spread
TNM (Tumor, Nude involvement ساسا رب هک تسا
روموت هجرد (
(stage هوک توسا نآ
هون اوی توسا هدش شخپ اهمادنا ریاس رد ایآ هکنیا و نآ تیعقوم و هیلوا روموت ی هزادنا ی هیاپ رب دوش یم ماجنا .
هیلوا روموت شرتسگ نازیم و هزادنا =(T)
Tumor ، یواوفنل ددوغ یرویگرد مدوع ای یریگرد
(N)
= Nude involvement رترود مادنا هب زاتساتم دوجو مدع ای دوجو و
(M)
= Metastastic
spread . رایعم هس نیا زا هدمآ تسدب جیاتن ،
ی هلحرم (stage)
یوم نیویعت ار دروف روه ناطرس
دنک . هکنیا زا دعب ی هرامش زا دش نییعت روموتTNM
اتI دووش یم یدنب هجردV .
ی هوجرد I
ی هجرد و روموت عورش دهد یم ناشن ار هتفرشیپ روموتV
ناراکمه و یمظاک) ،
1394 ) .
1-2 - ناطرس یهگآ شیپ رد رثوم لماوع
یهگآ شیپ یاهروتکاف تخانش ،
تشاد دهاوخ نامرد و هجیتن رد یمهم ریثات .
موهف ماوع نیا
ناطرس ی هچخیرات رتشیب دنهد یم شیازفا ار نامرد دابند هب هجیتن ینیب شیپ و
. اوهروتکاف نیا
ار یصاصتخا نامرد ناطرس ره یارب هک دهد یم ار هزاجا نیا کشزپ هب دریگب راکب
. زا ماوع نیا
نیا هب ناوت یم درک هراشا دراوم
.
ی هدوننک نیویعت یدودح ات نامرد عورش رد یمومع تمسس طیارش و رامیب نس :رامیب نس دنتسه یهگآ شیپ .
دنتسه فیعض یهگآ شیپ یاراد ناگدروخلاس و نادازون .
دونراد یبوخ یهگآ شیپ اه ناطرس زا یخرب :ناطرس عون ،
اوح رد اوه ناطروس یوضعب هوک یل
دنراد ییلااب ریم و گرم نازیم و دنتسه یمجاهتو کیزاتساتم .
تسا رثوم نآ یهگآ شیپ رد یناطرس ددغ یریگ رارق حم :ناطرس حم .
هوک رتلااوب حارم هب تبسن تسا رت مهم رایسب هیلوا حارم رد یهگآ شیپ :ناطرس ی هلحرم هداد زاتساتم رگید یاه تفاب هب تسا
.
د یوهگآ شیوپ دنراد یرتلااب تاجرد ای و دنراد یرتمک زیامت هک ییاه ناطرس : روموت ی هجر
دنراد یفیعض .
یوافنل ددغ یریگرد تیعضو رگید یاهروتکاف زا ،
ناووت یوم ار نآ رویثکت نازیم و روموت زیاس
درب مان ( Gospodarowicz, Hermanek et al. 1995 )
1-3 - ناتسپ یژولویب
ماش یناتسپ هدغ ره 25
- 15 وشرت اه نآ ی هفیظو هک دشاب یم رلاوئولآ یاهبول عون زا بول
تسا ریش .
بوول ریاوس زا یبرچ تفاب یناوارف ریداقم هارمه هب مکارتم دنبمه تفاب طسوت بول ره
ادج اه دشاب یم دوخ هب صوصخم یریش ی هدننک جراخ یارجم کی یاراد و دوش یم .
مادوک ره
یراجم نیا زا 2
ات 5 / 4 دنووش یوم زاوب ناتوسپ پوون رد قتوسم و دنراد دوط رتم یتناس .
پوون
یاراد ناتسپ 15
ات 25 روطق هوب راد ذفنم خاروس 5
/ 0 دوشاب یوم روتمیلیم .
ددوغ یتفاوب راتخاوس
سنج ساسا رب یناتسپ ،
نس دوب دهاوخ توافتم کیژولویزیف یاه تیعضو و .
ددوغ غوولب زا وبق
بعوشنم یراوجم و ناتوسپ پوون یکیدزن رد یریش یاه سونیس ماش سنج ود ره رد یناتسپ دنشاب یم اه سونیس نیا زا هدش جراخ کچوک یلیخ .
غوولب دسوخ رد نارتخد رد ،
یلااوب طوس
ت زا یشان هک ددرگ یم اه ناتسپ دشر ببس نژورتسا متوسیس ندوش ویوط و یوبرچ تفاب عمج
دشاب یم یراجم .
هوک توسا یدایز یاه دوبول ماش یناتسپ هدغ بول ره هلماح ریغ غلاب نانز رد
ییاوهتنا یاروجم رلاووبول یاوه دحاو تاقوا یهاگ TDLU (Terminal Duct Lobular Unit)
دنوش یم هدناوخ .
دراد بعشنم و کچوک دحاو نیدنچ دوبول ره .
یاوه سونیوس طوسوت یریوش
و هداوس یوبعکم یوششوپ تفاب اب ییاهتنا یراجم و یریش یراجم و قبطم یبعکم یششوپ تفاب ویم یاهلولس زا ییاه هتسد دنوش یم هدیشوپ دایلت یپا
. تسس دنبمه تفاب طسوت ارجم متسیس
دونک یوم ادوج موه زا ار اوه بوول زوین دولس مک مکارتم دنبمه تفاب و هدش هطاحا قورع رپ .
رد
لحرم ناتوسپ دنبمه تفاب یلثم دیلوت ی هخرچ یگدعاق زا شیپ ی ه ،
اوه ناتوسپ و هدوش مرووتم
دنوش یم رتگرزب یکدنا (
Mescher and Junqueira 2009 )
.
لکش 1 - 1 - ناتسپ یموتانآ .
تسا هدش هداد ناشن ناتسپ جراخرد نآ فارطا هلاه و ناتسپ کون .
اهبول ، اهلوبول ،
دوش یم هدید ناتسپ لخاد رد اهتمسق رگید و یریش یراجم .
1-4 - ناتسپ ناطرس
درویگ یوم اوشنم ددغ ییاهتنا یاه دوبول دایلتیپا یاهلولس زا ناتسپ ناطرس دراوم رتشیب رد .
وخاد یراوجم یزسپووئن یاهلولوس نآ رد هک تسا یراجم یمجاهت یامونیسراک نآ نیرت عیاش رتکچوک یاه هخاش ای یلوبول راروق مجاوهت درووم ار فاروطا یامورتسا سورف یتکلا یراجم
یوم
دننک یم داجیا ار سمل باق ی هدوت کی و دنهد .
1-4-1 - ناتسپ ناطرس هچخیرات
دوسر یوم روظن هوب و دوش هداد صیخوشت ناوسنا رد ناتوساب نارود زا ناتسپ ناطرس یرامیب تسا هدش نامرد و هدهاشم ناتساب رصم رد راب نیتسخن .
یاه داس رد 1600
دسیوم زا شیپ داس
رد یرامیب نیا زا یتاعسطا هدوش توبث تیموسا نویودا ماون هب )سوریپاپ( نایرصم یکشزپ نوتم
تسا . نوتم نیا یاه هتشون قبط ،
هوک ناتوسپ زا یتموسق یراومیب نویا نامرد یارب نامز نآ رد
هدش یم سمل هیحان نآ رد روموت ،
دش یم غاد ای هدنازوس .
داس رد 460 دسیم زا شیپ ،
زا اروقب
جازما زا یکی ناونع هب ناطرس یرامیب ادووس شیازوفا ار نآ ویلد و دروب ماون ندوب ی هوناگراهچ
تسناد . وا مان ناطرس یارب (
(karkinus یناونوی ی هملک کی هک دیزگرب ار
یاونعم هوب رونچرخ
اهروموت اریز تسا هیبش
رنچرخ یاهاپ کخاش یرهاظ
دننام دنراد .
داس رد 200 پایرت دننام ییاهوراد زا نآ نامرد یارب نلاگ دسیم زا سپ ،
دامض عاونا و درگوگ
درک هدافتسا .
داس رد 1375 نردول یرنه یدسیم ،
یوسنارف یورشیپ کشزپ
؛درک اعدا نتوشادرب
دنک کمک یرامیب نامرد هب دناوت یم یحارج قیرط زا یناطرس روموت .
متوسیب نروق ات هویش نیا
دوب ناتسپ ناطرس نامرد یارب دوجوم یاه هنیزگ زا یکی و تفای همادا یدسیم .
د داوس ر 1895 ،
نورتوسژورپ و نژورتوسا وشرت یلوصا وماع هوک اه نادمخت نتشادرب اب تفایرد نوتسیب جروج اه نادمخت نتشادرب زا سپ یلو دندرگ یم کچوک اهروموت دنتسه ،
ی هوفیظو یوویلک قوف ددغ
دنریگ یم هدهع هب نانز نیا رد ار نژورتسا دیلوت .
داس رد 1952 فلار و زنیجاه زلراچ یدسیم هدوغ و یوویلک قووف ددغ نتشادرب هب مادقا تفل
دندومن نژورتسا دیلوت عبانم ناونع هب زیفوپیه (
ISNA 1392 )
. رد یناومرد یمیوش و یپارتویدار
داس 1930 و 1940 جویار یاهشور هب و تفرگ تروص ناطرس نامرد رتمک یاه بیسآ روظنم هب
یفارگوماووم ماووش ناوومرد و صیخووشت ،
درووک کوومک یووپارت نووومروه و یناتووسپ ددووغ یووحارج .
(Mandell 2005)
1-4-2 - ناتسپ ناطرس عاونا
اموکراوس و امونیسراک دنوش یم میسقت هتسد ود هب ناتسپ یاه ناطرس .
رد اوشنم امونیوسراک
توفاب زا یناطرس یاهلولس اموکراس رد اما تسا )اهلوبول و یراجم( یلایلت یپا یاهلولس زا ناطرس یدنویپ ، دنریگ یم اشنم یبرچ و یا هچیهام (
Kelly, Kim et al. 2003 )
. ناطرس فلتخم عاونا
یمجاهت ریغ ناتسپ ناطرس ماش ناتسپ ،
دشاب یم هدنهد زاتساتم و یمجاهت .
1-4-2-1 -
لحم رد لاتکاد یامونیسراک )
DCIS ( Ductal Carcinoma In Situ
هدوش یتارییغت راچد ییارجم یاهلولس هک تسا یمجاهت شیپ ای یمجاهت ریغ ناتسپ ناطرس توفاب هوب و دنتوسه یریوش یراجم هب دودحم زونه یلو دنوش یم یدبت یناطرس یاهلولس هب و
دنا هدرکن یزادنا تسد ناتسپ فارطا (
Welch, Woloshin et al. 2008 )
.
1-4-2-2 -
مجاهم لاتکاد یامونیسراک IDC ( Infiltrating Duct Carcinoma)
تسا ناتسپ ناطرس جیار عون ،
دوسر یم ارجم ی هراوید هب و هدش عورش یریش یارجم کی زا
تسپ یبرچ تفاب رد سپس و هوب نووخ شدرگ و یفنل متسیس قیرط زا دنرداق و دننک یم دشر نا
دونبای شرتوسگ ندوب رگید قطانم رد و دنبای هار ناتسپ تفاب زا نوریب .
عوون زا ناطروس ردIDC
هرانک زا هدش عشعشتم پزان کش یا هلیم ماسجا زا کشتم یا هدوت تروص هب مارگومام ریواصت یزیف تاونیاعم رد و دووش یم هدید اه دووش یوم سومل یتخوس و تفوس ی هدووت یوک
(Welch, Woloshin et al. 2008) .
1-4-2-3 -
مجاهم رلاوبول یامونیسراک ILC (Invasive Lobular Carcinoma)
دننام و دنریگ یم اشنم ریش ی هدننک دیلوت ددغ زا ندوب یاهوشخب ریاوس هب دنناوت یمIDC
دنبای شرتسگ .
ره زا 10 عون زا یکی ناتسپ یمجاهت ناطرس تساILC
. صیخشت هب تبسنILC
تسا رتراوشد یفارگومام ردIDC (
Welch, Woloshin et al. 2008 )
.
1-4-2-4 -
یباهتلا ناتسپ یامونیسراک IBC (Inflammatory Breast Cancer)
دودح هک دوش یم بوسحم یمجاهت ناتسپ ناطرس جیارریغ دراوم زا 1
- 3
% یاوه ناطرس ک
یم ماش ار ناتسپ لاومعم هک دوش
"
روموت لاومعم نییاپ حارم رد و دوش یمن هدید یدرفنم
"
اوب
دوش یم هتفرگ هابتشا ناتسپ تنوفع .
روگید عاوونا زا روت تخوس رایوسب ناطرس عون نیا صیخشت
دراد شرتسگ یارب یرتشیب سناش رطاخ نیمه هب تسا (
Welch, Woloshin et al. 2008 )
.
1-4-3 - ناتسپ ناطرس مئلاع
ناتسپ ناطرس مئسع زا ،
ناتسپ رد مروت ای هدوت :درک هراشا ریز دراوم هب ناوت یم ،
رویز ای هوقرت
غب ، یزمرق و تسوپ ندش میخض ،
ناتسپ تسوپ شراخ و امرگ ،
ناتوسپ پون تارییغت ،
زا وشرت
ناتسپ پون ،
دوشاب ناطروس زا یکاوح دناوت یم مه ناتسپ کش و هزادنا رد رییغت و درد (
Koo,
von Wagner et al. 2017 )
.
1-4-4 - ناتسپ ناطرس هب لاتبا رد اهروتکاف کسیر
نس ، هب ستبا رد زاس رطخ یاهروتکاف نیرت مهم زا نوس شیازوفا ارویز توسا ناتوسپ ناطرس
،
یاوهمناخ یاروب یفارگوماوم تولع نیمه هب دهد یم شیازفا ار ناطرس عویش 40
لااوب هوب داوس
دوش یم داهنشیپ .
کوی هجرد ماوقا رد صوصخب یرامیب یگداوناخ ی هقباس ،
توفاب یلااوب مکاروت
یناتسپ ، زا بق تروص و هنیس ی هسفق ینامرد وترپ یلااب زود 30
داس ، فرصم و ندیشک راگیس
دوهد یوم شیازوفا ار ستوبا کوسیر نییاوپ نس رد کلا .
روگید وماوع زا ،
یولثم دویلوت روتکاوف
(reproductive factores) رد هنایهام تداع یبق زا تسا
رید یگسئای و نییاپ نس ماگنه
، هوک
دهد یم شیازفا ار ستبا کسیر .
ایوق یلثم دیلوت روتکاف
"
اب تسا ابترا ردER .
رگید ماوعزا هوک
دهد یم شیازفا ار ناتسپ ناطرس کسیر ،
نژورتوسا هوک توسا سوونژوزگا و سونژودنا نژورتسا
صروق طسوت مه سونژوزگا نژورتسا و دوش یم دیلوت یگسئای زا بق نادمخت طسوت سونژودنا دووش یم تفایرد ینامرد نومروه و یرادراب دض یاه .
داروفا یگدونز کبوس روگید یاوهروتکاف زا
سا ت . نوس زا دوعب یقاوچ و عابوشا یوبرچ اوصوصخم داویز یوبرچ اب ییاذغ میژر و نردم یگدنز
دهد یم شیازفا ار ستبا کسیر یگسئای .
نتوشادن هوب ناوت یم زاس رطخ رگید ماوع زا نینچمه
زا دعب دنزرف نیلوا دلوت و دنزرف 30
کش درک هراشا یگلاس (
1 - 2 ) . رتشیب رگا اصوصخم یهدریش
ب داس کی زا دشا
، یوشزرو تاوکرح ماجنا ،
دداوعتم نزو نتوشاد و یفارگوماوم یا هرود تاونیاعم
دهد یم شهاک ار ناتسپ ناطرس هب ستبا کسیر (
Sun, Zhao et al. 2017 )
.
لکش 1 - 2 - ناتسپ ناطرس رد اهروتکاف کسیر زا کیتامش یامن .
یگدنز کبس ،
نژورتسا ، یلثم دیلوت یاهروتکاف ،
نس و یگداوناخ ی هقباس 5
تسا ناتسپ ناطرس هب لاتبا رد مهم لماع .
1-4-5 - ناهج و ناریا رد ناتسپ ناطرس یژولویمدیپا
ناتسپ ناطرس دوح اوب ناوهج ناونز نایم رد ناطرس نیرتعیاش
دو 7 / 1 دویدج درووم نوویلیم
داس رد هدش هداد صیخشت 2012
دشاب یم . هعسوت داح رد یاهروشک رد دروم نیا فصن زا شیب
دودح هک تسا هداد خر 82
دوهد یوم یکشت ار ناهج تیعمج دصرد (
Garcia, Jemal et al.
)2007 . و دوشاب یوم ناوهج ناونز و نادروم رد پرتوشم ناطروس نیرتوشیب و نیمود ناتسپ ناطرس
رد نانز نیب رد هدش هداد صیخشت ناطرس نیرتشیب 140
زا رووشک 184
نیولوا و توسا رووشک
و ناهج رد نانز گرم تلع 60
% رد یاهروشک رد اه گرم یلاموش یاوکیرمآ( هعسوت داح
، اوپورا ،
ایلارتسا ، دووش یم ماش زین ار ) نپاژ و دنلیزوین (
Rafiemanesh, Salehiniya et al. 2016 )
.
یبرغ و یقرش یاپورا یاهروشک رد عویش نازیم نیرتلااب ،
ایلارتسا ، یلاموش یاوکیرمآ و دونلیزوین
توسا هدوش هدید (
Jemal, Bray et al. 2011 )
. داوس رد 1990 ، دودوح 59
% ناتوسپ ناطروس
یلامش یاکیرمآ( هعسوت داح رد یاهروشک رد رتشیب ،
اپورا ، ایلارتسا ، یوم هدوید ) نپاژ و دنلیزوین
دش . ره زا ایلارتسا رد و تسا یبرغ یاهروشک زا رت نییاپ یرامیب نیا عویش ییایسآ یاهروشک رد
10 رفن ش یم ستبم رفن کی و دنو
ره زا یزلام رد 20
دنووش یم ستبم رفن کی رفن (
Pathy, Yip
et al. 2011 )
. ناهج طس رد عویش نازیم 39
یازا هب رفن 100000
ناریا رد و رفن 24
هوب روفن
یازا 100000 دشاب یم رفن
( Mousavi, Gouya et al. 2009 )
.
ینوس یاههورگ رد عویش نازیم هک دهد یم ناشن ناریا رد تاعلاطم 44
- 40 ، 49 - 45 و 59 -
55 بویترت هوب ی هنلااوس نیگناویم اب داس 2
/ 6 ، 5 / 3 و 3 / 5 توسا شیازوفا داوح رد (
Tazhibi,
Dehkordi et al. 2014 )
. هوک داد ناوشن روگید تاعلاطم Infiltrating Duct Carcinoma)
)
IDC=
تووسا ناروویا رد ناتووسپ ناطرووس پرتووشم یژووولوفروم نیرتووشیب (Naghibi,
Shojaizadeh et al. 2013) .
1-4-6 - ناتسپ ناطرس یلوکلوم کیتنژ
ومرن یاه دولس یکیتنژ تارییغت ی هجیتن رد رگید میخدب یاه ناطرس و ناتسپ ناطرس و دا
دولوس اوب شنکناویم رد اوهنآ )یوکیتنژ یپا( یکیتنژ ریغ تارییغت دیاش ای یرووموت یاه
، ویبق زا
دولس ینمیا یاه ،
یم دوجو هب ییامورتسا و یگر دیآ
( Nowell 1976 )
. هاووخ یوکیتنژ یرادویاپان
هن ای دشاب یثرا ،
زا تسا یکیتنژ عیسو تارییغت هجیتن رد نژ نتوفر توسد زا یبق
، یونژ رویثکت ،
هطقن نویساتوم ییاجباج و یا
یموزوومورک یاه .
یم تاروییغت نویا زا یوضعب نژ یور دوناوت
یاوه
تایح رد هک یدیلک ،
ریثکت ، مجاوهت ، توکرح ، روگید و ناومرد هوب تومواقم هوصخشم
داوجیا یاه
هدننک دشاب هتشاد ریثات دنراد شقن یمیخدب ی .
یمونژ یراجنهان نیا یم ناتسپ ناطرس رد
نتفر تسدزا( ینوگمهان نتفر تسد زا ماش دناوت
یم رظن هب هک دشاب نژ یپک دادعت رد تارییغت و )نژ رپیاوه تولاح زا داوقتنا شیازوفا ثعاب دسر
( هوب اویزسپ )DCIS
Ductal Carcinoma In Situ یوم
دووش ( Waldman, DeVries et al.
)2000 . نژ زا یم یدوویلک یاووه نژوکنا هووب ناوووت
هدووننک بوکرووس یاووه نژ و اووه روووموت ی
(=TSGs Tumor Suppressor Genes درک هراشا )
.
1-4-7 - نژوکنا ناتسپ ناطرس رد لیخد یاه
وکنا نژ اه ، نژ یم ناطروس هعوسوت ثوعاب اوهنآ ندش داعف هک دتسه ییاه ددروگ
. ندوش داوعف
یم ینژ ریثکت قیرط زا دناوت ،
هطقن نویساتوم یموزومورک ندش اجباج و یا
دشاب .
1-4-7-1 -
نژوکنا Her-2 :
HER-2 ( Human epidermal receptor 2 ناووونع هووب هووک )
HER-2/neu اووی
erbB-2
موزومرک یور رد هک تسا ینژ تسا هدش هتخانش روتپوسر و دراد رارق17q
نیزورویت ییاوشغارت
روتکاف کی هک یزانیک ار تسا دشر
یم دک دنک نآ هب دناگیل داصتا اب دشر روتکاف روتپسر نیا هک
یم داعف دوش ( Yarden and Sliwkowski 2001 )
رگا ای و روتپوسر نویا مکارت راکدوخ روط هب
هزادنا هب اشغ طس یور ددرگ روتپسر نیا نویسسیرفسفوتا و ندش هزیرمیاد ثعاب هک دشاب یا ی
راشبآ ندش داعف هب رجنم اگ دونچ داقتنا یاه
یم فولتخم یاهریوسم و هون ددروگ
، نویا هولمج زا
اهریوسم (mitogen – activated protein kinase)
= ( وMAPK (3-kinase AKt
= PI3K
ریثکت رد هک تسا ،
ییازگر ، شنکنایم تارییغت دولس یاه
دولس و ، یلولس تکرح شیازفا ،
زاتساتم
( دنراد شقن زوتپاپآ هب تمواقم و yarden, 2002
) . نژووکنا HER-2
% رد -30
% ناطروس20 یاه
یمجاهت ناتسپ ،
و ریثکت یم نایب شیازفا دبای
( Slamon, Clark et al. 1987 )
.
1-4-7-2 -
س ا نیلکی هدننک میظنت و اه هخرچ یاه
: یلولس
هخرچ هب دورو داعف ریثکت و یلولس ی
، تسا هدش میظنت رایسب دنیآرف کی .
زانیک هتوسباو یاوه
س هب ا نیلکی (Cyclin-Dependent Kinases)
= هتسدCDKs نیئتورپ زا یا رد هوک دنتوسه اوه
دندوجوم یلولس ی هخرچ رساترس ،
هلیرفوسف ار روگید یاه نیئتورپ دنناوت یم ندش داعف زا سپ
دننک . ( اموتسسبونیتر نیئتورپ هدننک کچ نیلوا )PRb
یم هزاجا هک تسا هخرچ ی زا دولوس دهد
تحارتسا زاف G0
زوتیم و داعف کیس دراو دوش
.
س نایب طس ا
نیلکی س وD
ا نیلکلی شوقن ود روه و توسا بواونتم یلولوس هوخرچ روه ردE
ک دولوس یوروشیپ رد یدیل زاوف زا
هوبG1 دونرادS ( Vermeulen, Van Bockstaele et al.
)2003 .
نژ هدووننک دووک یاووه ووس ی
ا نیلکی موزووومورک یورD
11q13 رد و دوونراد رارووق 50
% - 40
%
ناطرس یمجاهت ناتسپ یاه ،
یم ادیپ نایب شیازفا دننک
. وس ناویب شیازفا ا
نیلکی ،E رپیاوه ثوعاب
( نویسسیرفسف ی هخرچ ی هدننک کچ هطقن نیا زا روبع و )PRb
شیازوفا هوجیتن رد و یلولوس
یم ریثکت ددرگ ( Steeg and Zhou 1998 )
.
1-4-7-3 -
نژوکنا c-myc :
موزمورک یور رد نژوکنا نیا هتسه نیئتورپوفسف و دراد رارق8q24
یم دک ار یا هوب هوک دونک
هدوننک میوظنت ناونع یلولوس رویثکت رد یوسیونور ی
، دراد شوقن زوتپاوپآ و زیاومت (
Nass and
Dickson 1997 )
. رد نژوکنا نیا 25
% - 15
% دبای یم نایب شیازفا و ریثکت ناتسپ یاه ناطرس
هرهچ کی و دراد شقن ینامرد یمیش هب تمواقم رد و هتشاد یمجاهت ی
(Carroll, Swarbrick
et al. 2002) .
لودج 1 - 1 - نژوکنا ناتسپ ناطرس رد لیخد یاه ناش ینامرد فادها و درکلمع ،
1-4-8 - نژ ( روموت ی هدننک بوکرس یاه Tumor suppressor genes
)
نژ زا هتسد نیا تیلاعف نتفر تسد زا اه
، ددرگ یم میخدب یاهروموت داجیا ببس .
اوه نژ نویا
لاومعم گید ای دشر یفنم یاه هدننک میظنت مجاوهت هوک دنتوسه دولوس یاوهتیلاعف ر
یوسناتپ و
یم درتنک ار یزائتورپ تیلاعف میظنت و یلولس یگدنبسچ یبق زا کیزاتساتم دننک
.
هیضرف قبطرب هبرض ود
ر دروم رد نوسدان درفلآ یا یت
اموتسسبون ،
میخدوب بویتونف هوکنیا یارب
لآ ود ره دیاب دوش داجیا دورب تسد زا نژ نیا یاه
. ومحتم هوک تسا مزلا ندش یناطرس یارب
دنوش هدنامیقاب لآرد یگدش فذح کی و لآ کی رد شهج کی (
Knudson 1971 )
.
رد شهج تسا نکمم دراوم یضعبرد نژ
هدننک بوکرس یاه یلو دهدن خر روموت ی
دنناوت یم
اب رگید یاهمسیناکم ،
نویوسسیتم دننام دنوش اهنژ نیا درکلمع ای نایب رد خادت ثعاب رووتومورپ
یراجنهان داجیا ثعاب ای و ددرگ یم یموزائتورپ بیرخت شیازفا و یسیونور راهم ثعاب هک رد ییاه
دوش یم دنراد شنکنایم نژ نیا دوصحم اب هکرگید یاهنیتورپ .
1-4-8-1 P53-
شهج یاووه ناطرووس ی هوومه زا یوومین زا شیووب ردp53
% دودووح رد و یناووسنا یاه 30
-
% 20
ناطروس خر ناتوسپ یاه یم
دوهد ( Hollstein, Sidransky et al. 1991 )
. نژ یور ردp53
مزومورک میسناکم میظنت یعیبط طیارش رد هک دراد رارق17p
دراد هدهع هب ار یلولس میسقت یاه .
دامرن طیارش رد ،
نژ دننک میظنتp53 ه
توسا یلولوس میسقت مسیناکم ی .
بیوسآ ماوگنه رد
،DNA یم هدش داعفP53
روط هب دناوت اب میقتسم
ییاوهنژ زا یوسیونور ات هداد شنکنایمDNA
میمرت دوئسم هک رد ار یلولس هخرچ تقوم روط هب و دریگب تروص دنتسهDNA
هولحرم ایG1
ات هدرک فقوتمG2/M ددرگ زوتیم دراو هکنیا زا بقDNA
، دووش میمرت .
نیونچمه رداوقP53
ار اهنآ و دهد شنکنایم رگید یلولس یاهریسم اب تسا زیامت ای زوتپاپآ دراو
( دویامن Lane et al ,
)1994 . نیئتوروپ نووچ هراوک دونچ نیئتوروپ کویP53
multi functional) شوهج و توسا )
نیمودرد دمایپ فلتخم یاه تشاد دهاوخ دابند هب ار یصاخ یاه
، رکراوم کی ناونع هب نژ نیا زا
شیپ هدننک ینیب هتسد ی
یم هدافتوسا ناتوسپ ناطروس ردII دووش
( Fitzgibbon, Page et al.
)2000 .
1-4-8-2 SKP2-
P27 و
نژ رگید زا دننک بوکرس یاه
روموت ی هدننک میظنت هک دنتسه
هدووب یلولس هخرچ یفنم یاه
و یم یمیخدب ثعاب ناشتیلاعف نتفر تسد زا ددرگ
. هداوناوخ هوب قولعتمP27 هدوننک راوهم یا
ی
هتسباو زانیک نیئتورپ نیکلیس هب
CKIs = Cyclin-dependent protein kinase inhibitor
ناونع هب هک تسا cip/kip
یم هتخانش دنوش
.
ًامومع یم شیوپ ار یلولوس هوخرچ یمارآ هب اهCKIs
و دونرب زا یدادوعت هوب توسا رداوقp27
سکلپمک نیلکیس درف هب رصحنم یاه صتمCDK
دنک فقوتم ار ناشتیلاعف و هدش ،
اوصوصخم
"
هلحرم زا ار دولس دناوت یم ( فقوت تمس هبG1
arrest ) دربب شیپ .
شقنP27 دراد یداویز یاه
ییوراد تمواقم یدعت هلمج زا ،
زا تظافح و یلولس زیامت باهتلا
( St Croix, Florenes et al.
)1996 . نادقف شیوپ بویتونف تموس هوب داومرن تولاح زا دولوس داقتنا ثعاب تسا نکممp27
ددرگ یمیخدب سپسو یمیخدب (
Fredersdorf, Burns et al. 1997 )
.
S- phase Kinase – associated protein) SKP2 هولحرم زاونیک اوب هارومه نیئتورپ )
،S
بیرخت یارب هطساو هبp27
نیتیئوک یبوی ی ناتسپ ناطرس رد و تسا مزلا نویسا
HER 2 و
ER دبای یم نایب شیازفا .
1-4-8-3 - BRC1
زیلانآ هیاپ رب هداوناخ
دنتشاد ددعتم ناتسپ ناطرس هک ییاه ،
یور نژ نویا هوک دوش صخوشم
موزمورک 17q21 دراد رارق . شهج BRCA-1
زا رتشیب رد 50
% ناطرس همه ریز هک یناتسپ یاه
نس 40 یم خر دنتسه داس هقباسرد هک یدارفا رد اما دهد
نآ یگداوناخ ی اه
4 رتوشیب اوی درووم
زا شیب هب ستبا دامتحا دراد دوجو ناتسپ ناطرس 90
% یم شیازفا دوبای
( Ford, Easton et al.
)1995 . BRCA-1 روموت یگدننک بوکرس شقن یاراد هک
تسا ، یم دوک ار ینیئتورپ یاراد هوک دونک
اوهتنا رد یراروکت یلاووت ود و ددعتم یاهنیمود زا یرایوسب رد هوچنآ هیبوش توسا یوسکوبرک ی
دوننک میمروت یاوهمیزنآ ی ه
هولمج زاDNA Rad 9
یم هدوید دووش
( Scully, Chen et al.
)1997 .
زا شیب 200 رد شهج BRCA-1
رد هک تسا هدش هدید یم خر نژ دوط رس اترس
روگا دهد
یم بووسحم شوهج غاد اوقن ناوونع هب قطانم یضعب هچ دنووش
( Couch, DeShano et al.
)1997 . دراد شهج هاگیاج هب یگتسب یرامیب تدش ،
شهج اوی یونیمآ هویحان یاهتنا رد هک ییاه
یم خر یلیسکوبرک ثکت تدش دهد
یم بجوم ار یرتلااب ری دوش
( Sobol, Stoppa-Lyonnet et
al. 1996 )
. روط هب نیگنایم ، روموت شهج زا یشان یاه BRCA-1
هجرد دونراد یرتلااوب روموت ی
( Breast Cancer Linkage Consortium 1997 )
.
1-4-8-4 BRCA-2 -
نژ BRCA-2 رد
اوب تایوصوصخ زا یرایوسب BRCA-1
روگا توسا پرتوشم زا هوچ
ظاوحل
اب یتهابش ینامتخاس دنرادن مه
. نیئتوروپ BRCA-2 هوب
Rad 51
یتوسرد یاروب شگولاراوپ و
ریمعت یم صتمDNA
تسا مزلا یرهاوخ دیتامورک یوگلا هتشر تاهابتشا حسصا یارب هک دوش .
یتقو نژ ود ره یم شهج راچد
ناطروس موه و ناتوسپ ناطرس مه داجیا رد ییلااب کسیر دنوش
یم دوجو هب نادمخت دنروآ
.
زا شیب 100 درف هب رصحنم شهج BRCA-2
نآ رتشیب هک تسا هدش ییاسانش داح هب ات اه
نیئتورپ داوجیا تولع هب ان یاوه
( هدویرب مد غلاوب truncation
توسا ) . شوهج رد هوک روطناومه
BRCA-1
م هدش هدهاش ،
شهج BRCA-2 رد هوک لااوب هوجرد اوب رووموت داوجیا اب
BRCA-1
ابترا رد هدش هدید یمن
دشاب ، دولوس رد اوما دوبوت میخدوب یاه
یم یکوشت یروتمک یاوه دووش
( Breast Cancer Linkage Consortium 1997 )
. شهج BRCA-2 کسیر شیازفا نینچمه
ناطرس ریاس هب ستبا یم شیازفا زین ار اه
امونسم هلمج زا دهد ،
تاتسورپ ناطرس ،
و هدوعم ناطرس
یوارفووص ناطرووس .
توافت نژ ناوویب وویافورپ یاووه
ن یاووهروموترد ار یراد یوونعم شووهج زا یووشا
BRCA-1
و BRCA-2 یم ناشن
دهد ( Hedenfalk, Duggan et al. 2001 )
.
1-4-8-5 -
روموت هدننک بوکرس یاه نژ رگید
نژ هدننک بوکرس یاه ناطرس رد زین هک یرگید روموت ی
دندوش ییاوسانش ناتوسپ .
ساوسارب
یوه و توسلااب اوهنآ رد ناطروس نیا هب ستبا ی هقباس هک ییاه هداوناخ رد ناتسپ ناطرس عویش نژ زا یشهج یاه
BRCA-1
ای BRCA-2 نآرد
تسا هدشن ییاسانش اه ،
نژ دووجو BRCA-3
تسا هدش هتفرگرظن رد هیضرف ناونع هب
؛ هدوشن ادویپ نژ نویا یارب زین یوق هاگیاج یه هچ رگا
تسا ( Kerangueven, Essioux et al. 1995 )
.
1-4-8-5-1 PTEN -
یزاتافسف ندرک دک اب هک تسا ینژPTEN ،
هدننک میظنت ناونع هب یفنم ی
معAKT
Title and Author:
Cloning and Expression of Recombinant Human Noggin Protein fused with GFP spark in Breast Cancer Cell line / Azadeh Aghvami Tehrani
Supervisor: Dr. S. Latifi-Navid & Dr. S. Zahri Graduation date: 17.9.2019
Number of pages: 102 Abstract
Research Aim: Breast cancer metastasis is the expansion of cancer cells to tissues beyond where the tumor initially forms. During this process, the epithelial cells transform to mesenchymal cells (EMT) by different signaling pathway including TGFβ1 superfamily protein (such as BMPs). This study was aimed at cloning and overexpressing of NOGGIN protein, as a potent BMP antagonist in breast cancer cells.
Research method: The human breast cancer cell line, MCF7 was grown in DMEMHG+10% FBS at 37oC with 5% CO2 to reach up to 70-80% confluency.
The harvested cells underwent to transient transfection with pCMV3-NOG- GFPspark including GFP as a reporter gene gene which was already transformed in DH5α bacterial cells and subjected to PCR by using the specific primers.Then, the transfected cells examined24h post- electroporation by using epifluorescent microscopy.
Findings & Conclusion: pCMV3-noggin-GFPspark had been cloned successfully in DH5α and PCR confirmed the extracted plasmid containing the desired fragment (noggin +GFP sequences). Our results also showed that the highly expression of NOGGIN protein following transient transfection in MCF-7 and expression of the gene were studied by the SDS-PAGE electrophoresis.
Keywords: BMPs, EMT, GFP, MCF7, noggin
University of Mohaghegh Ardabili Faculty of science Department of Biology
Thesis submitted in partial fulfillment for the degree of M.Sc. in Cellular and Molocular Biology
Cloning and Expression of Recombinant Human Noggin Protein Fused with GFP spark in Breast Cancer Cell line
By:
Azadeh Aghvami Tehrani
Supervisor:
Dr. S. Latifi-Navid Dr. S. Zahri
Advisor:
Dr. M. Sagha
Sep 2019