* Corresponding author E-mail: [email protected]
قیلعت دوبهب هدروآرف ینیگآرهز و یراگدنام ،یریذپ
ب یراجت یاه یرتکا
Bacillus thuringiensis
یعجشا ارهز ییولنسح ییلاط اضر ،1
*
داژن مرخ ادیآ ،2
یمرهج یبلاط لیلخ و3 2
1 - هرشح دشرا یسانشراک هتخومآ شناد اگشناد یعیبط عبانم و یزرواشک سیدرپ یکشزپ هایگ هورگ ،یزرواشک یسانش
،جرک ،نارهت ه
.ناریا
2 - هرشح داتسا .ناریا ،جرک ،نارهت هاگشناد یعیبط عبانم و یزرواشک سیدرپ یکشزپ هایگ هورگ ،یزرواشک یسانش
3 - هرشح یرتکد هتخومآ شناد .ناریا ،جرک ،نارهت هاگشناد یعیبط عبانم و یزرواشک سیدرپ یکشزپ هایگ هورگ ،یزرواشک یسانش
:تفایرد خیرات(
11 / 33 / 99 - :شریذپ خیرات 11
/ 30 / 99 )
هدیکچ
یندوزفا داوم یخرب رثا نییعت ،هعلاطم نیا زا فده قیلعت و یراگدنام دوبهب رد
یرتکاب لباتو ردوپ نویسلاومرف یریذپ Bacillus
thuringiensis Bt(
هدروآرف و هاگشیامزآ رد هدش هیهت ) ( یراجت یاه
وA وپ زا هنیهب لباتو ردوپ هیهت یارب .دوب )B هدش کشخ رد
یانبم هک ،دش هدافتسا رامیت ود رد ،موینیمولآ تاکیلیس ،لیگران ربیف ،میدس تانیجلآ ،زوتکلا ،زراکاس هارمه هب یرتکاب نویسناپسوس هدش هنیهب نویسلاومرف( موینیمولآ تاکیلیس رامیت ود توافت 1
هدش هنیهب نویسلاومرف( لیگران ربیف و ) 2
هرشح .تفرگ رارق ) یشک
ردوپ
تو لبا ،هنیهب بش یاهورلا یور ،یساملا تشپ هرپ
Plutella xylostella (L.) (Lep.: Plutellidae) تفرگ رارق نومزآ دروم
.
هسیاقم یسررب زا لصاح جیاتن ناشن ،یراگدنام یا
.دوب نویسلاومرف یرادرابنا ظفح رد داوم نیا تبثم ریثأت هدنهد قیلعت نازیم
یریذپ
،هدش هیهت نویسلاومرف 03
د قیلعت اب هسیاقم رد هک دش تبث دصر نویسلاومرف یریذپ
یراجت یاه وA
ینعم روطب ،رازاب رد دوجومB -
یراد ن .دوب رتلااب ریداقم شهاک( ینیگآرهز شیازفا بجوم هدروآرف ود ره رد زراکاس ندوزفا هک داد ناشن جیات
(LC50
یلاح رد دش
قیلعت روتکاف هک آرف تیهام و عون هب هتسب ،یریذپ
رد و تمیق نازرا یباختنا هارمه داوم ندوزفا تیاهن رد .درک لمع توافتم هدرو
یگژیو دوبهب بجوم ،سرتسد نویسلاومرف یتسیز و یکیزیف یاه
یرتکاب یاه تفآ نیا زا هدافتسا هعسوت رد رما نیا هک دش Bt
شک
.دراد ییازسب ریثأت یبورکیم
ژاو ه یاه یدیلک : تفآ لباتو ردوپ ،یبورکیم شک هنیهب ،
، ،نویسلاومرف ،یزاس Plutella xylostella
.
Optimizing suspensibility, stability and virulence of commercial products of Bacillus thuringiensis
Z. Ashjaei1, R. Talaei-Hassanloui2*, A. Khorramnejad3 and Kh. Talebi-Jahromi 2
1. M.Sc. graduated, Department of Plant Protection, College of Agriculture and Natural Resources, University of Tehran, Karaj, Iran.
2. Professor, Department of Plant Protection, College of Agriculture and Natural Resources, University of Tehran, Karaj, Iran. 3. Ph.D. graduated, Department of Plant Protection, College of Agriculture and
Natural Resources, University of Tehran, Karaj, Iran.
(Received: May 31, 2020 - Accepted: August 4, 2020) ABSTRACT
The purpose of this study was to determine the effect of some additives on stability and suspensibility of wettable powder (WP) formulation of Bacillus thuringiensis (Bt) in laboratory products (optimized formulation) and commercial formulations. For preparation of optimized formulation; sucrose, lactose, sodium alginate, coconut fiber and aluminum silicate were added to the dried powder of bacterial product in two different treatments; which were different in aluminum silicate (optimized formulation 1) and coconut fiber (optimized formulation 2). The efficacy and toxicity of wettable powders were tested on diamondback moth, Plutella xylostella (L.) (Lep.: Plutellidae) larvae. The results of various tests for stability showed that the additives had positive effects on the storage life of the optimized formulation.
The suspensibility of the optimized formulations (70%) was significantly higher than those of the commercial formulations. Our results showed that adding sucrose in both commercial products caused an increase in toxicity (lower LC50s), whereas, the suspensibility parameter varied depending on the type and feature of the products.In conclusion, selecting low-costand available additives would improve the physical and biological characteristics of Bt formulations, which has a significant effect on the development and application of biopesticides.
Keywords: wettable powder, optimization, microbial pesticide, formulation, Plutella xylostella.
همدقم
دودح هنلااس 01
تفآ نت رازه شک
ییایمیش رد
یزرواشک فرصم روشک
یم دوش لباق شخب یارب هک
یم ،نآ زا یهجوت تفآ زا هدافتسا ناوت
شک یاه
تسناد یبسانم نیزگیاج ار یبورکیم (
Khorramvatan et al., 2014
تسایر شرازگ ،
،تاتابن ظفح نامزاس
1089 -
https://www.irna.ir/news/83289319
.) نیب رد
یرتکاب ،یبورکیم لماوع هب ،اه
یرتکاب هژیو
Bacillus
thuringiensis (Bt)
هیوس عونت تلع هب ،دایز یا
ینمیا نینچمه و یصاصتخا رثا هنماد و لااب ییاراک هژیو هاگیاج یناهج حطس رد ،یتسیز هدرک ادیپ یا
سا ابیرقت و ت 91
تفآ یناهج رازاب زا دصرد شک
یاه
یم لماش ار یتسیز ( دوش
Palma, 2017
.) نیا یرتکاب
یم زا شیب دناوت 0111
قلعتم تافآ و تارشح زا هنوگ
هتسار هب یاه
نارادکلوپلاب ،
باق نلااب و ار نلاابود
دنک لرتنک (
Lacey et al., 2001; Zhang et al.,
)2016
. سلاومرف رتشیب نوی
یرتکاب یاه Bt
یاراد
رد اما ،دنتسه یرتکاب ینیئتورپ لاتسیرک و روپسا یم لاعفریغ اهروپسا تلاوصحم زا یضعب -
دنشاب
(Khaliq and Haquz, 2007)
. و روپسا طولخم
یب هدام هارمه دیاب لاتسیرک رجنم ات ،دشاب یبسانم رثا
روپسا طولخم زا تظافح هب -
،هدش هیهت لاتسیرک
و تارشح طسوت طولخم نیا شریذپ شیازفا هرشح صاوخ رب یطیحم تاریثأت زا یریگولج یشک
رب ینتبم هدروآرف ( دوش Bt
Rosas-García et al.,
.)2009
شهوژپ رثکا داوم یور رب هتفرگ تروص یاه
نویسلاومرف هارمه تفآ یاه
شک یور ،یتسیز یاه
هدش زکرمتم یتابیکرت تیمس شیازفا هب رجنم هک دنا
ج شیازفا ای و فده تفآ یارب نویسلاومرف بل
دوش تارشح
(Goerge and Crickmore, 2012)
.
دننام تابیکرت نیا زا یخرب کیروب دیسا
(
Morris
et al., 1995
) و
Camptothecin
(
Sun et al., 2012
)
دننام رگید یخرب و هتشاد یتسیژرنیس رثا ،Coax
و Pred Gustole
(
Sneh et al.,1983
) هیذغت کرحم
یم دنشاب میدس تانیجلآ . (
Zhang et al., 2016
،)
( نوتیز دنامسپ
Jallouli et al., 2014
ن و ) هتساش ( ییاذغریغ
Singh et al., 2007
) زا تفآ شک ز ی تس ی
رد ربارب هعشا اروام ی شفنب یطیحم طیارش و تظافح
م ی نک ن د . نویسلاومرف و نویسناپسوس ،لباتو ردوپ یاه
رتکاب جیار نویسلاومرف هس ،لونارگ ی
یم Bt
.دنشاب
لماوع هوبنا دیلوت یارب نویسلاومرف عون باختنا یفلتخم یاهرایعم نتفرگ رظن رد اب یبورکیم لرتنک تردق یرادیاپ ،یرادرابنا ،لقن و لمح ،دربراک هلمج زا یارب تیمومسم داجیا مدع ،دیلوت هنیزه ،نویسلاومرف یم تروص هایگ ( دریگ
Bryant, 1994
.) نایم رد
ویسلاومرف ن
لباتو ردوپ نویسلاومرف ،کشخ یاه
و لمح .تسا هدرک بلج دوخ هب ار هجوت نیرتشیب هگن ،لقن مک ،ناسآ دربراک و یراد یارب ندوب رطخ
ربراک هفرص ، زا دایز تظلغ هب زاین مدع و یداصتقا ی
هگن داوم یگژیو هلمج زا ،هدنراد نویسلاومرف یاه
یاه
یم لباتو ردوپ س( قیلعت تیلباق .دشاب
و )نویسناپسو
هریخذ ماگنه یرادیاپ یزاس
رب راذگریثأت لماوع زا
( تسا لباتو ردوپ نویسلاومرف تیفیک
Couch and
Jurat-Fuentes, 2013; Salehi Jouzani et al.,
)2014
لیلد نیمه هب . تیعضو دوبهب یارب
نویسلاومرف هنیمز رد یتاعلاطم ،لباتو ردوپ یاه
یاه
تبوطر دوبهب ناسآ یریذپ
قیلعت و بوخ جازتما ،ردوپ
یم رظن هب یرورض بآ رد نیا رد ور نیا زا .دسر
هنیهب یور شهوژپ قیلعت و یرادرابنا رمع یزاس
یریذپ
یرتکاب لباتو ردوپ نویسلاومرف
B. thuringiensis
رد .تسا هدش زکرمت )یهاگشیامزآ نویسلاومرف هئارا(
هب یارب هدمآ تسدب جیاتن زا هک هدش شلات همادا دوب
هرشح ییاراک نینچمه و یشک
دوبهب قیلعت یریذپ
نویسلاومرف لباتو ردوپ یراجت یاه
B. thuringiensis
)روشک لخاد دیلوت(
.دوش هدافتسا شور و داوم اه
هیوس اه هدروآرف و م یاه
یرتکاب زا هدافتسا درو
Bt
یرتکاب زا شهوژپ نیا رد
subsp. kurstaki B.
thuringiensis
دیلوت هدش ود و روتنامرف یجورخ
یراجت ردوپ نویسلاومرف ناریا رد هدش دیلوت Bt
فورح قلاطا(
و A
تاعلاطا ظفح تهج هب B
تکرش یاه )هدننکدیلوت .دش هدافتسا
نابزیم هرشح شرورپ هریفش ،ورلا لماک هرشح و
بش
،یساملا تشپ هرپ
Plutella xylostella
رهشدمحم رد عقاو ملک عرازم زا
جرک مج ع دشر کقاتا رد و لقتنم هاگشیامزآ هب و یروآ
اب 11 و ییانشور تعاس 9
تبوطر ،یکیرات تعاس
یبسن
±11 11 یامد و دصرد
±1 52 هجرد ی
( دندش هداد شرورپ سویسلس
Khoramnezhad et
al., 2015
لسع بآ زا لماک تارشح هیذغت یارب .) 11
ملک هایگ زا هرشح نیا یاهورلا و دش هدافتسا دصرد چ مه روظنم هب .دندش هیذغت ینی اهورلا ندومن نس
تسیز ماجنا یارب مخت ،یجنس
یاه 15 زا هتعاس
لماک تارشح بش
یساملا تشپ هرپ هتفرگ
.دش
یرتکاب زا لباتو ردوپ نویسلاومرف هیهت
Bt
یرتکاب
B. thuringiensis
عیام تروص هب زا لصاح
روتنامرف یکی تکرش زا هدننک دیلوت یاه
ش هیهت .د
تظلغ
CFU/ml
117
× 8 و هدش هیهت نویسناپسوس زا
یامد اب نوآ رد 02
هجرد کی تدم هب سویسلس ی
زا سپ .دیدرگ کشخ زور یرتکاب نویسناپسوس لیدبت
،یندوزفا داوم ندرک هفاضا اب ،کشخ ردوپ هب .دش هیهت رامیت ود بلاق رد یهاگشیامزآ نویسلاومرف یرتکاب ردوپ لماش اهرامیت 51
،ینزو % زوتکلا
و هدننکرپ(
لماع هطوغ شیازفا )یرو
12 ،ینزو %
قیلعت دوبهب( زراکاس )هیذغت کرحم و یریذپ
12 %
نویسلوما ( میدس تانیجلآ و ینزو تیبثت و هدننک
-
هدننک 52 (
رامیت .دندوب ینزو % 1
یواح 52 ینزو %
رامیت و موینیمولآ تاکیلیس 5
یواح 52 ربیف ینزو %
.دوب )هدننک لمح( لیگران نویسلاومرف یراگدنام نازیم نییعت یهاگشیامزآ ،نویسلاومرف ره یراگدنام نازیم نییعت یارب هدروآرف رظ رد رامیت ره ییاهن ی و
هشیش ف هریت یا
تبوطر و امد طیارش رد هام جنپ تدم هب گنر دودح امد( هاگشیامزآ 52
و سویسلس هجرد 21
هگن )تبوطر دصرد ی ینامز لصاوف رد .دندش یراد
،ک
هنومن هام جنپ و هس هدروآرف زا یرادرب
،هدش هیهت یاه رد لاتسیرک و روپسا تظلغ سپس و تفرگ تروص
هنومن هنومن تظلغ .دیدرگ نییعت اه تظلغ اب اه
هسیاقم ،شیامزآ عورش نامز رد هدش هیهت هدروآرف ساسا رب تظلغ نییعت .دندش
CFU/g
روپسا یارب
اتلد تظلغ و دش شرازگ -
نیسکوتودنا نازیم نییعت اب
دروفدرب شور هب هنومن نیئتورپ (
Bradford, 1976
)
.دش هدز نیمخت تظلغ نییعت )فلا (
CFU/g نویسلاومرف )
یهاگشیامزآ اب نویسلاومرف ره زا مرگ کی 88
یلیم رفاب رتیل
لیرتسا تافسف 1
/ 1 ،رلاوم
~7 ،pH
طولخم و تدم هب
دش هتشاد هگن رکیش یور قاتا یامد رد تعاس کی .
هیهت اب سپس تقر ،تقر یرس ی
زا یتوافتم یاه 111
ات 117 تقر همادا رد .دیدرگ لصاح هب هدش هیهت یاه
تدم 12 مرگ بآ مامح رد هقیقد 91
سویسلس هجرد
تقر زا .دندش هتشاد هگن یاه
111 ، 112
0 و 11 رادقم
1 / 1 یلیم
،راگآ ییاذغ طیحم رد رتیل
NA (Nutrient
Agar)
کرش زا هدش هیهت ت
Merck
هداد تشک ،ناملآ
طیحم .دش تدم هب تشک یاه
15 یامد رد تعاس
01 .دندش هتشاد هگن روتابوکنا رد ،سویسلس هجرد
ینلک دادعت سپس یور هدرک دشر یایرتکاب یاه
و شرامش تشک طیحم
CFU/g
دیدرگ هبساحم
et
al., 2003) Teera-Arunisiri
.)
ویسلاومرف نیئتورپ لک نازیم نییعت )ب ن
یهاگشیامزآ نویسلاومرف لک نیئتورپ نازیم یهاگشیامزآ
لماش هک
یم زین نیسکوتودنا اتلد ،شیامزآ عورش نامز رد ،دوش
هریخذ زا دعب هام جنپ و هس ،کی نومزآ اب یزاس
هزادنا دروفدارب کی .دش یریگ
یلیم نویسلاومرف مرگ
رد طیحم تشک
NB (Nutrient Broth)
زا هدش هیهت
تکرش
Merck
آ لح ،نامل سپس و
هب تدم 11 هقیقد
رد
×g
11111 ژویفیرتناس هت .دیدرگ
تسد هب نیشن
هدمآ ود راب اب لولحم کمن
NaCl
کی رلاوم و ود راب اب
بآ رطقم تسش و وش هداد سپس .دش رد
کی
یلیم لولحم رتیل 21
یلیم میدس دیسکوردیه رلاوم
( 2 / 15
pH~
تسد هب نویسناپسوس .دیدرگ طولخم )
ب هدمآ یامد رد تعاس ود تدم ه 01
سویسلس هجرد
هبوکنا نازیم سپس و دش نیئتورپ
لک هب نیشنور
شور گ هبساحم دروفدرب دیدر
ینحنم مسر یارب .
تظلغ زا ،درادناتسا مرس نیئتورپ توافتم یاه
( یواگ نیموبلآ هب ،)BSA
درادناتسا نیئتورپ ناونع
( دیدرگ هدافتسا
Zouari et al., 2002
.)
م نییعت قیلعت نازی
یریذپ نویسلاومرف رد یاه
Bt
ب قیلعت تیصاخ نییعت یار مرگ هس یریذپ
زا ردوپ
لباتو نویسلاومرف(Bt
یهاگشیامزآ نویسلاومرف و
یاه
،)یراجت اب
87 یلیم رتیل بآ و دیدرگ طولخم رطقم
کی تدم هب سپس هتشاد هگن طیحم یامد رد تعاس
زا .دش تمسق ییلااب هدمآ تسد هب طولخم جنپ ،
یلیم یامد اب نوآ رد و هتشادرب رتیل 112
هجرد
،سویسلس رارق
دش هداد ات هب نزو تباث تیلباق .دسرب
قیلعت یریذپ هیاپ رب نزو ره رامیت تبسن هب نزو
لرتنک تبثم اب لوصحم(
قیلعت تیصاخ یریذپ
)لماک
هزادنا یریگ هس رامیت ره یارب نومزآ نیا .دیدرگ راب
دش رارکت
et al., 2003) Teera-Arunisiri
.)
نییعت زا سپ قیلعت نازیم
یریذپ رد
سلاومرف ی نو یاه
،Bt
نیا دوبهب صاخ
ی ت ( لعت ی -ق
ذپ ی ر رد )ی نویسلاومرف یاه
( یراجت و A
زا ،)B
تاکیلیس ،زوتکلا ،زراکاس داوم ندوزفا قیرط ( لوتیبروس نینچمه و لیگران ربیف و موینیمولآ رثوم
قیلعت تیصاخ رد ریذپ
)ی هب تبسن ینزو فلتخم یاه
( 11 ، 12 ، 51 و 52 و 01 اب و دش یسررب )ینزو دصرد
صاخ ی ت لعت ی ق ذپ ی ر ی سلاومرف ی نو یهاگشیامزآ
اقم ی هس درگ ی د .
هدروآرف ینیگآرهز یسررب اه
یارب هزادنا یریگ نازیم
LC50
نویسلاومرف
یهاگشیامزآ توافتم تظلغ جنپ ،
شیپ جیاتن یانبم رب
،نومزآ زا
CFU/g
115 ات 111 نس یاهورلا یور
مود بش یساملا تشپ هرپ مزآ
شیا کسید .دش یاه
یتناس جنپ رطق هب ینیچ ملک هایگ یگرب هد رد رتم
یلیم صخشم تظلغ اب یرتکاب نویسناپسوس زا رتیل هطوغ
گرب ندش کشخ زا سپ .دیدرگ رو هب ،اه
هلیسو لقتنم لیرتسا یرتپ فورظ هب لیرتسا سنپ ی
رد .دندش کسید ،دهاش دروم
رطقم بآ رد یگرب یاه
هطوغ لیرتسا تیاهن رد .دیدرگ رو
12 ددع ورلا نس
کسید ره هب مود هفاضا یگرب
راهچ و تسیب .دش
تعاس سپ زا ةیذغت یاهورلا هرشح زا هدولآ گرب هب
Bt
، گرب یاه ملاس رد رایتخا اهورلا رارق تفرگ . دادعت
یاهورلا هدرم رد ره
،فرظ 09 و 75 س تعا دعب زا
هب هدولآ یاذغ زا اهورلا هیذغت
،Bt
شرامش تبث و
نویسلاومرف ینیگآرهز نازیم نییعت شیامزآ .دیدرگ
ًلاماک حرط بلاق رد هنیهب یارب .تفرگ ماجنا یفداصت
هسیاقم و هبساحم
LC50
مرن زا رازفا
2.0 POLO-
.دش هدافتساPlus
ثحب و جیاتن
ب نویسلاومرف رد یراگدنام نازیم هنیه
نییعت زا لصاح جیاتن ساسا رب یرتکاب تظلغ
CFU/g
لودج(
1 ) داد ناشن یهاگشیامزآ نویسلاومرف رد
1 رد
هزاب رد و شیامزآ عورش نامز و هس ،کی ینامز یاه
ینعم فلاتخا هام جنپ هدنز روپسا ریداقم رد یراد
(CFU/g)
( تشاد دوجو
F3,8=22.94, P<0.0001
اما .)
نویسلاومرف رد شیامزآ
یهاگ 5 نامز نیب ، یرامیت یاه
روپسا نازیم رد
(CFU/g)
دوجو یراد ینعم فلاتخا ،
( تشادن
F3,8=0.51, P=0.6865
.) نیئتورپ نازیم
هدش کشخ ردوپ رد دوجوم نویسلاومرف و یرتکاب
بیترت هب هنیهب 91
و 72 یلیم یلیم رب مرگ نییعت رتیل
ک نیئتورپ نازیم هسیاقم زا لصاح جیاتن و دیدرگ ل
یم زین نیسکوتودنا اتلد لماش هک رد ،دوش
نویسلاومرف یهاگشیامزآ
1 (
F3,8=1.43, P=0.3045
و )
نویسلاومرف یهاگشیامزآ
5 (
F3,8=0.50, P=0.6909
)
جنپ نایاپ رد رد بسانم یرادیاپ رگنایب ،هام
نویسلاومرف هدش هنیهب یاه
.دوب نویسلاومرف یرادیاپ
تفآ رد شک لماوع زا یتسیز یاه دیلوت رد مهم
داوم اب و ناققحم طسوت اهراب هک تسا نویسلاومرف ( تسا هتفرگ رارق نومزآ دروم فلتخم یندوزفا
Glare
and O'Callaghan, 2000; Brar et al., 2005; Koul,
.)2011
یردوپ نویسلاومرف یاهروپسا یرادیاپ یاراد
زکولگ و کلات
Bacillus subtilis
لاس کی زا دعب
یریگرارق قاتا یامد رد
(El‐Hassan and Gowen,
2006)
و یرتکاب یردوپ نویسلاومرف یرادیاپ
B.
subtilis
هریخذ لاس ود ات قاتا یامد رد یزاس
(
Jayaraj et al., 2005
نینچمه ) ینلاوط
رمع ندوب رت
یرتکاب یرادرابنا
Pseudomonas chlororaphis
اب
( لیگران ربیف زا هدافتسا
et al., 2015 (Corrêa
، -ناشن نویسلاومرف یرادیاپ رب یندوزفا داوم ریثأت هدنهد
.تسا هب لیگران ربیف لمح کی ناونع
تبوطر اب هدننک
ریثأت هدش هیهت هنیهب نویسلاومرف یرادیاپ رد دایز دراد یتبثم .
یم نیاربانب ظفح تفرگ هجیتن ناوت
هدنز رب نویسلاومرف تبوطر ینام
یرادیاپ ای روپسا
رد یرتکاب ف
.دنتسه رثوم نویسلاومر
لودج 1 - تظلغ نییعت زا لصاح جیاتن روپسا
(
CFU/g
نیئتورپ و )
(mg/ml)
نویسلاومرف ود رد
.هام جنپ رد یهاگشیامزآ
Table 1 - Results of determining the concentration of spore (CFU/g) and protein (mg/ml) in the laboratory formulations during 5 months.
Protein concentration (mg/ml) Mean ±SE
Spore concentration (CFU/g) Mean
±SE Maintenance time
(month) Treatment
75.83±0.16 ns 2.67×1010 +1.3×107 a*
0 Laboratory
formulation 1
75.63±0.01 2.75×1010 +3.3×107 a
1
75.56±0.12 2.72×1010 +5.7×107 b
3
75.43±0.12 2.71×1010 +5.7×107 b
5
76.40±0.20 ns 3.60×109 +1.2×107 ns
0 Laboratory
formulation 2
76.10±0.55 3.59×109 +8.8×107
1
75.96±0.17 3.58×109 +3.2×107
3
75.85±0.13 3.57×109 +6.6×107
5
* Means followed by the different letters in column for each treatment are significantly different (Tukey, P<0.05). ns= Non significant
قیلعت نازیم یریذپ
نویسلاومرف رد یاه
Bt
قیلعت تیصاخ یریذپ
یهاگشیامزآ لباتو ردوپ رد 1
،
71 لباتو ردوپ رد و % یهاگشیامزآ
5 ، 18 تسد هب %
.دمآ قیلعت نومزآ جیاتن پ
داد ناشن رامیت ود یریذ
ینعم فلاتخا تیصاخ نیب یراد
قیلعت یریذپ
نویسلاومرف یاه
1 و 5 ( درادن دوجو لودج
5 .) رد اما
تیصاخ قیلعت یریذپ نویسلاومرف نیب یراجت یاه
و A
یهاگشیامزآ یاهردوپ وB
1 و 5 ینعم توافت ، دوجو راد
تشاد (
(F3,8=385.48, P<0.0001
ناراکمه و یحلاص .
صاخ تی قیلعت یریذپ نویسلاومرف ناشدوخ راک بختنم
ار 71 ات 70 ( دندرک شرازگ دصرد
Salehi Jouzani et
al., 2014
،) تیصاخ هب هیبش هک قیلعت
یریذپ
هنیهب نویسلاومرف دودح( تسا یا
71 نیا رد هک )%
هدش هیهت قیقحت یسررب نمض ناراکمه و اریت .تسا
لباتو ردوپ هیهت یارب فلتخم داوم هک دندرک شرازگBt
هدش هدافتسا یرتشیب زراکاس رادقم هک ییاهرامیت رد تیصاخ ،دوب
قیلعت یریذپ نازیم یور و هتفای دوبهب
سیخ ( یگدنوش
Wettability
) ریثأت نویسلاومرف یفنم
تیصاخ ،دوب هتشاذگن قیلعت
یریذپ رد هنیهب رامیت
اهنآ شهوژپ 22
تسا هدش شرازگ دصرد
et al., 2003)
Teera-Arunisiri
) هدام ناونع هب زوتکلا نینچمه .
لباتو ردوپ یارب بسانم هدننکرپ یم یفرعمBt
هک دوش
هطوغ ببس تیبثت ،یرو
هخولک زا یریگولج و یگدننک
یم نویسلاومرف رد ندش دوش
(
Burges and Jones.,
)1998
تیصاخ نییعت زا سپ . قیلعت
یریذپ رد
نویسلاومرف یراجت یاه
و A
داوم ،B
باختنا یندوزفا
لماش هدش ربیف و موینیمولآ تاکیلیس ،زوتکلا ،زراکاس
لوتیبروس نینچمه و لیگران نویسلاومرف هب
یاه
هدام ود .دش نییعت یریذپ قیلعت نازیم و هفاضا یراجت هنیهب یارب لیگران ربیف و زراکاس نویسلاومرف یزاس
یراجت وزفا هک داد ناشن جیاتن .دندش باختناB
ربیف ند
یراجت نویسلاومرف هب زراکاس و لیگران رد یریثأت ،B
تیصاخ دوبهب قیلعت
یریذپ ( درادن
F2,6=3.35,
P=0.1054
).
هدام هس
،زراکاس بروس ی لوت و ف ی گرانرب ی ل
نویسلاومرف یزاس هنیهب یارب جیاتن ،دندش باختنا A
هک داد ناشن هدام هس نیا هنیهب رامیت هسیاقم زا لصاح عم فلاتخا ین
قیلعت دصرد نیگنایم رد یراد نیب ،یریذپ
( دراد دوجو فلتخم یاهرامیت
F3,8=152.58, P<0.0001
.) قیلعت دصرد نیگنایم هسیاقم یریذپ
اب اهرامیت
،هک داد ناشن A
دوبهب ببس لیگران ربیف
قیلعت تیصاخ یمن یریذپ
و زراکاس ندوزفا اما ،دوش
قیلعت تیصاخ رب لوتیبروس تسا رثؤم یریذپ
نیب رد .
ینعم شیازفا ببس زراکاس زین رامیت ود نیا رد یراد
قیلعت تیصاخ لودج( دش یریذپ
0 .)
لودج 5 - ( نیگنایم
±SE
قیلعت دصرد ) نویسلاومرف رد یگدنوش
یراجت و یهاگشیامزآ یاه
Table 2- Mean (±SE) percentages of the suspensibility in the laboratory and commercial formulations
* Means followed by the different letters are significantly different (Tukey, P<0.05)
لودج 0 - ( نیگنایم دصرد )±SE
لعت ی ق یگدنوش رد سلاومرف ی نو یراجت یاه اب
هدافتسا زا یندوزفا داوم
Table 3. Mean (±SE) percentages of suspensibility in commercial formulations by using additives
Commercial formulation Adjuvants Suspensibility percentage
Mean ±SE A
--- 36.39±0.7 c*
Sucrose 77.58±1.8 a
Coconut fiber 39.36±1.2 c
Sorbitol 71.19±2.4 b
B
--- 61.03±0.7 ns
Coconut fiber 61.02±0.8
Sucrose 65.13±1.2
*Means followed by the different letters in column for each formulation are significantly different (Tukey, P<0.05). ns= Non significant
ریداقم و ینیگآرهز
LC50
نویسلاومرف زا هدافتسا هب هجوت اب یرتکاب فلتخم یاه
لرتنک یارب Bt
بش یساملا تشپ هرپ تیمها و
نآ لرتنک یارب کیژولویب لرتنک لماوع زا هدافتسا
(Talekar and Shelton., 1993)
هب تفآ نیا زا ناونع
نازیم و هدافتسا لدم هرشح
LC50
یرتکاب لباتو ردوپ رادقم .دش هبساحمBt
LC50
تیبورپ هیزجت زا لصاح
هدش هنیهب نویسلاومرف یارب هدمآ تسد هب 1
،
(
CFU/g
) 110
× 0 / 5 رادقم .دوب
LC50
هیزجت زا لصاح
هدش هنیهب نویسلاومرف یارب هدمآ تسد هب تیبورپ 5
(
CFU/g
) 110
× 5 / 5 لودج( دوب 0
.)
لودج –0 ریداقم
LC50
ود
نویسلاومرف یهاگشیامزآ
B. thuringiensis
یاهورلا یور
P. xylostella
Table 4. LC50 values of the optimized laboratory formulations of B. thuringiensis on P. xylostella larvae
Treatment No. Slope ± SE χ2 df LC50 C.I. 95% C.I. 95%
(CFU/g) Lower Upper
Optimized Formulation 1 270 0.704±0.084 6.339 13 2.4×103 1.2×103 4.7×103 Optimized Formulation 2 270 0.677±0.083 5.339 13 2.2×103 1.0×103 4.1×103
Suspensibility (%) Mean ± SE Treatment
70.72±0.8 a* Laboratory formulation 1
65.50±0.9 a Laboratory formulation 2
36.39±0.7 c Trade formulation A
61.03±0.7 b Trade formulation B
هنیهب زا لصاح جیاتن هب هجوت اب تیصاخ یزاس
قیلعت نویسلاومرف رد یریذپ نازیم ،یراجت یاه
LC50
نویسلاومرف یارب یراجت
نویسلاومرف یواح رامیت ،A
یراجت یراجت نویسلاومرف ،زراکاس هارمه هب A
و B
یراجت نویسلاومرف یواح رامیت هب B
اب زراکاس هارمه
مرن زا هدافتسا رازفا
Polo-Plus
لودج( دش هبساحم 2
.)
هب زراکاس زا هیذغت کرحم ناونع
هک نویسلاومرف یا
هرشح تیصاخ رب تسا هدش دای ،تسا رثؤم یشک
(
Teera-Arunisiri et al., 2003.
ببس هدام نیا .)
( هدش یهایگ تفاب زا هیذغت هب تفآ کیرحت
Salehi
Jouzani et al., 2014
ینیگآرهز رب هجیتن رد و ) دندرک شرازگ ناراکمه و رارب .تسا رثوم نویسلاومرف
هب زراکاس و زکولگ زا شوخ ناونع
هدننک معط
نویسلاومرفرد یم Bt
درک هدافتسا ناوت (
Brar et al.,
2006a
یم رظن هب .) نیا زا هدمآ تسدب جیاتن دسر
ژپ ریاس طسوت هدمآ تسدب جیاتن اب شهوژپ نارگشهو
شهاک و هیذغت کیرحت ببس زراکاس و دراد تقباطم نازیم
LC50
یم دوش هک یروط هب.
دودح هب هجوت اب
نانیمطا 82
نیب ،دصرد
LC50
نویسلاومرف یاه
و یراجت
LC50
ینعم فلاتخا زراکاس یواح یاهرامیت -
نازیم و دراد دوجو راد
LC50
نویسلاومرف زا اهرامیت
.تسا رتمک یراجت
لودج 2 - ریداقم
LC50
نویسلاومرف یراجت
رامیت وA
یراجت نویسلاومرف ،زراکاس +A
یراجت نویسلاومرف رامیت وB
نویسلاومرف
یراجت +B
زراکاس بش یاهورلا یور
،یساملا تشپ هرپ
Plutella xylostella
Table 5. The LC50 values of commercial formulation A, commercial formulation A+ Sucrose treatment and commercial formulation B, commercial formulation B+ Sucrose treatment on Plutella xylostella
larvae
Treatment LC50(CFU/g) Slope (±SE) Relative ratio (95% CI)
A 1×104 0.561±0.045
(5.1×103-1.8×104) 0.095 A+ Sucrose 9.9×102 0.526±0.052 (0.037-0.244) (3.9×102-1.9×103)
B 1.8×104 0.677±0.048
(1.2×104-2.7×104) 0.144 B+ Sucrose 2.6×103
0.540±0.048 (0.068-0.306) (1.3×103-4.6×103)
زا هدافتسا اب دیلوت هنیزه شهاک تیمها هب هجوت اب یراجت دیلوت یارب سرتسد رد و تمیق نازرا داوم
نویسلاومرف یاه
(Bt Brar et al., 2006b
نیا رد ،)
و سرتسد رد داوم زا نکمم یاج ات دش شلات شهوژپ و دیلوت رد یندوزفا هدام ناونع هب بسانم تمیق اب جیاتن ساسا رب .دوش هدافتسا لباتو ردوپ یزاس هنیهب یاراد ،هدش هیهت هنیهب نویسلاومرف ،هدمآ تسد هب صاخ ظاحل زا و تسا یبسانم یراگدنام یکیزیف تی
قیلعت نویسلاومرف هب تبسن یرتهب طیارش یریذپ یاه
نیا یجنس تسیز جیاتن .دراد یسررب دروم یراجت مود نس یاهورلا یور زین لوصحم بش
تشپ هرپ
یساملا ناشن هب تبسن نویسلاومرف نیا یرترب هدنهد ،هدمآ تسدب جیاتن هب هجوت اب .دوب یراجت نویسلاومرف
ب تاعلاطم لیمکت نمض هب ،نویسلاومرف نیا یور ر
یم رظن رد یریگراکب تیلباق هلصاح یاهدرواتسد دسر
.دراد ار تعنص یرازگساپس
رضاح قیقحت نایاپ حرط زا یشخب
لوا هدنسیون همان
و هدوب یسدنهم و مولع هدکشناد یلام تیامح اب
یزرواشک یعیبط عبانم و یزرواشک سیدرپ
هاگشناد
نارهت هرامش هب
73132800/6/23
ماجنا تفای ه ، نیدب
بتارم هلیسو ت
ردق و رکش د
یم ملاعا ار ینا .دراد
REFERENCES:
1. Bradford, M.M. (1976). Rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding, Analytical Biochemistry, 72 (1–2): 248–254, doi:10.1016/0003-2697(76)90527-3.
2. Bryant, J .(1994). Commercial production and formulation of Bacillus thuringiensis. Agriculture, Ecosystems & Environment ,49(1): 31-35.
3. Brar, SK., Verma, M., Tyagi, R., Valéro, J. (2006 a). Recent advances in downstream processing and formulations of Bacillus thuringiensis based biopesticides. Process Biochemistry ,41(2): 323-342.
4. Brar, SK., Verma, M., Tyagi, R., Valéro J., Surampalli, RY .(2005). Starch Industry Wastewater- Based Stable Bacillus thuringiensis Liquid Formulation. Journal of Economic Entomology ,98(6):1890-1898.
5. Brar, SK., Verma, M., Tyagi, R., Valéro, J., Surampalli, RY. (2006 b). Screening of Different Adjuvants for Wastewater/Wastewater Sludge-Based Bacillus thuringiensis Formulations. Journal of Economic Entomology ,99(4):1065-1079.
6. Burges, HD., Jones, KA. (1998) Formulation of bacteria, viruses and protozoa to control insects, In Burges HD (Ed.), Formulation of microbial biopesticides: beneficial organisms, nematodes & seed treatments.(pp.34-109). Kluwer Academic Publishers, Netherlands.
7. Corrêa, EB., Sutton, JC., Bettiol, W. (2015). Formulation of Pseudomonas chlororaphis strains for improved shelf life. Biological Control, 80 :50–55.
8. Couch, TL., Jurat-Fuentes, JL. (2013). Commercial Production of Entomopathogenic Bacteria, In:
Morales-Ramos, JA,. Rojas, MG.and Shapiro-Ilan, DI (Ed.), Mass production of beneficial organisms: invertebrates and entomopathogens. 1st Edition.(pp.415-436). Academic Press, United States of America.
9. El‐Hassan, S., Gowen, S. (2006). Formulation and delivery of the bacterial antagonist Bacillus subtilis for management of lentil vascular wilt caused by Fusarium oxysporum f. sp. lentis. Journal of Phytopathology, 154(3): 148-155.
10. Glare, TR., Ocallaghan, M. (2000) Bacillus thuringiensis : biology, ecology and safety. New York: Wiley.
11. Goerge, Z., Crickmore, N. (2012). Bacillus thuringiensis Application in Agriculture, In: Sansinenea (Ed.), Bacillus thuringiensis Biotechnology.(pp.19-39). Springer, Netherlands.
12. Jallouli, W., Sellami, S., Sellami, M., Tounsi, S. (2014). Efficacy of olive mill wastewater for protecting Bacillus thuringiensis formulation from UV radiations. Acta Tropica, 140: 19–25.
13. Jayaraj, J., Kannan,R., Sakthivel, K., Suganya, D., Venkatesan, S., Velazhahan, R. (2005).
Development of new formulations of Bacillus subtilis for management of tomato damping-off caused by Pythium aphanidermatum. Biocontrol Science and Technology, 15(1): 55-65.
14. Khaliq, MSAA., Haque, M .(2007). Scope of commercial formulations of Bacillus thuringiensis Berliner as an alternative to methyl bromide against Trogoderma granarium Everts larvae. Pakistan Journal of Botany, 39(3): 871-880.
15. Khoramnezhad, A., Talaei-Hassanloui, R., Ghassemi-Kahrizeh, A. (2015). Evaluating the virulence of Bacillus thuringiensis strains isolated from host and different habitats on diamondback moth, Plutella xylostella (Lep.: Plutellidae). Biological Control of Pests and Plant Diseases, 4(2): 168-172.
(In Farsi)
16. Khorramvatan, S., Marzban, R., Ardjmand, M., Seifkordi, A., Askary, H. (2014) .Preparation of concentrated suspension of microencapsulated formulation of Bacillus thuringiensis. Biocontrol in Plant Protection ,2 (1):81-89. In Farsi.
17. Koul, O. (2011). Microbial biopesticides: opportunities and challenges. CAB Reviews: Perspectives in Agriculture, Veterinary Science, Nutrition and Natural Resources, 6(056): 1-26.
18. Lacey, LA., Frutos, R., Kaya, HK., Vail, P. (2001). Insect pathogens as biological control agents: do they have a future?. Biological Control, 21(3): 230-248.
19. Morris, ON., Convers, V., Kanagratnam, P. (1995). Chemical additive effects on the efficacy of B.t.
var. kurstaki against Mamestria configurata. Journal of Economic Entomology, 88(4): 815-824.
20. Palma, L .(2017). Bacillus thuringiensis-based biopesticides, are they as effective as they should be?.
Revista Argentina de microbiologia, 49(1): 119.
21. Rosas-García, NM., Villegas-Mendoza, JM.,Torres-Ortega JA. (2009). Design of a Bacillus thuringiensis-based formulation that increases feeding preference on Spodoptera exigua (Lepidoptera: Noctuidae) larvae. Journal of Economic Entomology, 102(1): 58-63.
22. Salehi Jouzani, GH., Moaven, E., Morsali, H. (2014). Optimization of a wettable powder formulation for two native Bacillus thuringiensis strains. Biological Control of Pests and Plant Diseases, 3(1): 7- 15. (In Farsi)
23. Singh, A., Boora, SK., Chaudhary, K .(2007). Effect of different additives on the persistence and insecticidal activity of native strains of Bacillus thuringiensis. Indian Journal of Microbiology, 47(1):
42–45.
24. Sneh, B., Schuster, S., Gross, S. (1983). Improvement of the insecticidal activity of Bacillus thuringiensis var. entomocidus on larvae of Spodoptera littoralis (Lepidoptera, Noctuidae) by addition of chitinolytic bacteria, a phagostimulant and a UV‐protectant. Journal of Applied Entomology, 96(1-5): 77-83.
25. Sun, S., Cheng, Z., Fan, J., Cheng, X., Pang, Y. (2012). The utility of camptothecin as a synergist of Bacillus thuringiensis var. kurstaki and nucleopolyhedroviruses against Trichoplusia ni and Spodoptera exigua. Journal of Economic Entomology, 05(4): 1164-1170.
26. Talekar, N., Shelton, A. (1993). Biology, ecology, and management of the diamondback moth.
Annual Review of Entomology, 38: 275-301.
27. Teera-Arunsiri, A., Suphantharika, M., Ketunuti, U. (2003). Preparation of spray-dried wettable powder formulations of Bacillus thuringiensis-based biopesticides. Journal of Economic Entomology, 96(2): 292-299.
28. Zouari, N., Achour O., Jaoua S. (2002). Production of delta‐endotoxin by Bacillus thuringiensis subsp kurstaki and overcoming of catabolite repression by using highly concentrated gruel and fish meal media in 2‐ and 20‐dm3 fermenters. Journal of Chemical Technology and Biotechnology, 77(8):
877-882.
29. Zhang, L., Zhang, X., Zhang, Y., Wu, S., Gelbic, I., Xu, L., Guan, X. (2016). new formulation of Bacillus thuringiensis: UV protection and sustained release mosquito larvae studies. Scientific Reports, 6: 39425.