The effect of HCV Core protein on the expression of miR-150

(1)

نﺎﺘﺳﺮﻟ ﯽﮑﺷﺰﭘ مﻮﻠﻋ هﺎﮕﺸﻧاد ﯽﺸﻫوﮋﭘ ـ ﯽﻤﻠﻋ ﻪﻣﺎﻨﻠﺼﻓ

* ﻪﺒﺗﺎﮑﻣ سردآ

،دﺎﺑآ مﺮﺧ : نﺎﺘﺳﺮﻟ ﯽﮑﺷﺰﭘ مﻮﻠﻋ هﺎﮕﺸﻧاد

، ﺖﯿﺗﺎﭙﻫ تﺎﻘﯿﻘﺤﺗ ﺰﮐﺮﻣ .

ﺖﺴﭘ ﮑﻟا ﮏﯿﻧوﺮﺘ : [email protected]

ﺳرﺮﺑ ﯽ ﺮﺛا ﺌﺗوﺮﭘ ﯿ ﻦ و core ﯾ سوﺮ ﺗﺎﭙﻫ ﯿ ﺖ ) C ( HCV ﺮﺑ ور ي ﺑﯿ نﺎ miR-150

ﺻ ﯿ ﻧﺎﺧ دﺎ ﯽ هداز ﮐ ،1

ﯿ ﻧﺎﻣز هﺎﺷ ﺎﻧﺎ

2ﯽ دﺎﻫ ، ي ﻮﺿر ي ﻧ ﯿ

3ﻮﮑ ، ﻌﻤﺳا ﺪﻣﺎﺣ ﯿ

ﺮﮕﺸﻟ ﻞ ﯾ

*نﺎ

4

1 - دﺎﺘﺳا ﯾ ﻘﺤﺗ ﺰﮐﺮﻣ ،ﯽﺳﺎﻨﺷ بوﺮﮑﯿﻣ هوﺮﮔ ،رﺎ ﯿ

ﺗﺎﭙﻫ تﺎﻘ ﯿ ﮑﺷﺰﭘ مﻮﻠﻋ هﺎﮕﺸﻧاد ،ﺖ ﯽ

ا ،دﺎﺑآ مﺮﺧ ،نﺎﺘﺳﺮﻟ ﯾ

ناﺮ .

2 - دﺎﺘﺳا ﯾ ز هوﺮﮔ ،رﺎ ﯾ ﺳﺎﻨﺷ ﺖﺴ ﯽ ا ،دﺎﺑآ مﺮﺧ ،نﺎﺘﺳﺮﻟ هﺎﮕﺸﻧاد ،ﻪﯾﺎﭘ مﻮﻠﻋ هﺪﮑﺸﻧاد ، ﯾ

ناﺮ .

3 - دﺎﺘﺳا ﯾ و هوﺮﮔ ،رﺎ ﯾ ﺳﺎﻨﺷ سوﺮ ﯽ

ﻘﺤﺗ ﺰﮐﺮﻣ ، ﯿ يرﺎﻤﯿﺑ تﺎﻘ ﺎﻫ

ي ﻧﻮﻔﻋ ﯽ ﮑﺷﺰﭘ مﻮﻠﻋ هﺎﮕﺸﻧاد ، ﯽ

ا ،نﺎﮔﺮﮔ ،نﺎﺘﺴﻠﮔ ﯾ

ناﺮ .

4 - دﺎﺘﺳا ﯾ ﺘﻧژ هوﺮﮔ ،رﺎ ﯿ

ﻘﺤﺗ ﺰﮐﺮﻣ ،ﮏ ﯿ

ﺗﺎﭙﻫ تﺎﻘ ﯿ ﮑﺷﺰﭘ مﻮﻠﻋ هﺎﮕﺸﻧاد ،ﺖ ﯽ

ا ،دﺎﺑآ مﺮﺧ ،نﺎﺘﺳﺮﻟ ﯾ

ناﺮ .

ﻪﺘﻓﺎﯾ / هرود ﺠﻫ ﻢﻫﺪ / هرﺎﻤﺷ 2

/ نﺎﺘﺴﺑﺎﺗ 95

/ ﻞﺴﻠﺴﻣ 68

ﻪﻟﺎﻘﻣ ﺖﻓﺎﯾرد :

29 / 2 / 95 ﻪﻟﺎﻘﻣ شﺮﯾﺬﭘ :

24 / 4 / 95

ﻪﻣﺪﻘﻣ  :

و ﯾ ﺗﺎﭙﻫ سوﺮ ﯿ ﺖ )C (HCV ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ ﯾ ﮑ ﯽ ﻠﺻا ﻞﻣاﻮﻋ زا ﯽ

ﺑ ﯿ رﺎﻤ ي اﺮﺑ از ي يرﺎـﻤﯿﺑ ﺎـﻫ ي ﺪـﺒﮐ ﻦﻣﺰـﻣ ي

بﻮﺴـﺤﻣ ﯽـﻣ

دﻮـﺷ .

ﻠﺒﻗ تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ ﯽ

نﺎﺸﻧ هداد ﺪﻧا ﻪﮐ ﭘ ﻦﯿﺌﺗوﺮ يﺎﻫ و ﯾ سوﺮ ﯽﻣHCV ﺪﻨﻧاﻮﺗ ﺎﻫ ﻪﮑﺒﺷ ﺎﺑ ي

ﻈﻨﺗ ﯿ ﻤ ﯽ ﺒﻗ زا نژ ـﯿ ﻞ microRNAs ﻣ

ـﯿ راﺮـﻗﺮﺑ ﺶﻨﮑﻧﺎ

ﺪﻨﻨﮐ . ا زا فﺪﻫ ﯾ ﺳرﺮﺑ ﻪﻟﺎﻘﻣ ﻦ ﯽ

ﺌﺗوﺮﭘ ﺮﺛا ﯿ ﻦ و core ﯾ سوﺮ ور ﺮﺑ HCV

ي ﺑ ﯿ نﺎ miR-150 رد

ﯾ ﻟﻮﻠﺳ ﺖﺸﮐ لﺪﻣ ﮏ ﯽ

دﻮﺑ .

شور و داﻮﻣ  ﺎﻫ

:

ﻤﺳﻼﭘ ﯿ ﺎﻫﺪ ي ﺑ ﯿ ﺌﺗوﺮـﭘ ﻞﻣﺎﮐ لﻮﻃ هﺪﻨﻨﮐ نﺎ ﯿ

ﻦ و Core ـﯾ سوﺮ ﻟﻮﻠـﺳ هدر ﻞـﺧاد ﻪـﺑ HCV

ﯽ ﺖﮑﻔﺴـﻧاﺮﺗ Huh7

دﺮﮔ ﯾ ﻟﺎﺣ رد ،ﺪﻧﺪ ﯿ

زا نآ رﺎﻨﮐ رد ﻪﮑ ﯾ

ﻤﺳﻼﭘ ﮏ ﯿ ﺑ ﺪ ﯿ هﺪﻨﻨﮐ نﺎ ﻟﺎﺧ GFP

ﯽ ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ ﯾ ﻔﻨﻣ لﺮﺘﻨﮐ هوﺮﮔ ﮏ ﯽ

ﺪـﺷ هدﺎﻔﺘﺳا .

ﺲﭙـﺳ مﺎـﺗ RNA

و هﺪﺷ جاﺮﺨﺘﺳا Real-Time PCR

ﮔ هزاﺪﻧا ﺖﻬﺟ ﯿ

ﺮ ي ﺑ ﺢﻄﺳ ﯿ نﺎ miR-150 ﺪﺷ مﺎﺠﻧا

. اﺮﺑ هوﻼﻋ ﯾ ﺖﺴـﺗ ،ﻦ trypan blue exclusion

ﺳرﺮﺑ ﺖﻬﺟ ﯽ

ﺌﺗوﺮﭘ ﺮﺛا ﯿ ﻦ ور ﺮﺑ core ي هﺪﻧز ﯽﻧﺎﻣ ﻟﻮﻠﺳ ﯽ ﻧ ﯿ ﺖﻓﺮﮔ مﺎﺠﻧا ﺰ .

ﻪﺘﻓﺎﯾ  ﺎﻫ :

ﻟﺎﻧآ ﯿ ﺑ ﺰ ﯿ نژ نﺎ miR-150 رد

لﻮﻠﺳ يﺎﻫ ﺌﺗوﺮﭘ ﻪﮐ داد نﺎﺸﻧ Huh7

ﯿ ﻦ و داز نورد core ـﯾ

سوﺮ ﯽـﻣHCV

ﺪـﻧاﻮﺗ ﻪـﺑ رﻮـﻃ

رادﺎﻨﻌﻣ ي ﺑ ﺶﻫﺎﮐ ﺚﻋﺎﺑ ﯿ

نﺎ miR-150 ﻗ رد

ﯿ ﻤﺳﻼﭘ ﺎﺑ سﺎ ﯿ

ﺑ لﺮﺘﻨﮐ ﺪ ﯿ هﺪﻨﻨﮐ نﺎ ﺒﻃ لﻮﻠﺳ وGFP

ﯿﻌ ﯽ دﻮﺷ ) 01 /0 P<

.(

ا رﺎﻨﮐ رد ﯾ ﺌﺗوﺮـﭘ ،ﻦ ﯿ ﻦ

ﻫcore ﯿ ﮔﺪﻨﺸﮐ تاﺮﺛا ﻪﻧﻮﮕﭽ ﯽ

ﻟﻮﻠﺳ ﯽ ﯾ ﺮﺤﺗ ﺎ ﯾ هﺪﻨﻨﮐ ﮏ ور ﺮﺑ ار يا ي لﻮﻠﺳ ﺪـﺒﮐ يﺎﻫ ي ﺖﺴـﺗ مﺎـﺠﻧا زا ﺲـﭘ trypan blue exclusion

داﺪﻧ نﺎﺸﻧ ) 05 /0 P<

.(

ﻪﺠﯿﺘﻧ و ﺚﺤﺑ يﺮﯿﮔ

: نﺎﺸﻧ ﺎﻣ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﯽﻣ

ﺪﻫد ﺌﺗوﺮﭘ ﻪﮐ ﯿ ﻦ و core ﯾ سوﺮ ﯽﻣHCV ﻧاﻮﺗ ﺪ ﺑ ﺶﻫﺎﮐ ﻪﺑ ﺮﺠﻨﻣ ﯿ

نﺎ miR-150 دﻮﺷ

.ا ـﯾ ﻦ

ﺎﺘﻧ ﯾ ﺑ ﺞ ﯿ ﻣ ﻪﮐ ﺖﺴﻧآ ﺮﮕﻧﺎ ﯿ

ﺶﻨﮑﻧﺎ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ يﺎﻫ ﺷﺎﻣ ﺎﺑ HCV

ﯿ ﻈﻨﺗ ﻦ ﯿ ﻤ ﯽ ﻟﻮﻠﺳ ﯽ ﻦﻣﺰﻣ ﺰﻧژﻮﺗﺎﭘ رد ﺖﺳا ﻦﮑﻤﻣ يرﺎﻤﯿﺑ

ﺎﻫ ي ﺪﺒﮐ ي ﻪﺘـﺷاد ﺶﻘﻧ

ﺪﺷﺎﺑ .

هژاو يﺪﯿﻠﮐ يﺎﻫ :

وﯾ ﺗﺎﭙﻫ سوﺮ ﯿ ﺖ ﺗﺎﭙﻫ ،C ﯿ ،ﺖ ،core وﺮﮑﯿﻣ .RNA

هﺪﯿﮑﭼ

(2)

ﻪﻣﺪﻘﻣ

و ــﯾ ﺗﺎﭙﻫ سوﺮ ــﯿ

ﺖ ) C (HCV ﯾ ــﮑ ﯽ ا ﻢــﻬﻣ ز و ﻦﯾﺮــﺗ

ﻊﯾﺎﺷ ﺖﯿﺗﺎﭙﻫ ﻞﻣاﻮﻋ ﻦﯾﺮﺗ و يﺎﻫ

ﯾ ﺳوﺮ ﯽ ﯽﻣ ـﺑ ﻪـﮐ ﺪﺷﺎﺑ ﯿ

زا ﺶ

170 ﻣ ﯿﻠ ﯿ ﻧد ﺮﺳﺎﺗﺮﺳ رد ار ﺮﻔﻧ نﻮ ﯿ

ﻦﻣﺰـﻣ ﺖـﻧﻮﻔﻋ ﻞﮑﺷ ﻪﺑ ﺎ

ﺖﺳا هدﺮﮐ ﻼﺘﺒﻣ .ﺑ

ﯿ ﺖﻧﻮﻔﻋ ﺮﺘﺸ

ﺷﺎﻧ يﺎﻫ ﯽ و زا ﯾ ﻪﺑ سوﺮ ـﯾ ﮏ

ﭘ ﻦﻣﺰﻣ ﺖﻧﻮﻔﻋ ﯿ

ﯽﻣ ﺖﻓﺮﺸ ا ﻪﮐ ﺪﻨﻨﮐ

ﯾ ﯽﻣ ﻦ ـﻃ رد ﺪﻧاﻮﺗ ﯽ

20

ﺎﺗ 30 ﭘ ﻪـﺑ ﺮـﺠﻨﻣ لﺎﺳ ﯿ

ﺎﻫﺪـﻣﺎ ي ﻟﺎـﺑ ﯿﻨ ﯽ ﺧو ﯿ ـﻤ ﯽ ﺒﻗ زا ـﯿ ﻞ

ﺳ ﯿ لﻮﻠﺳ نﺎﻃﺮﺳ و زوﺮ ﺪﺒﮐ يﺎﻫ

ي ) (HCC دﻮﺷ ) 1،2 .(

ﻘﻓﻮﻣ ﯿ ا رد ﺖ ﯾ ﺎﭘ ﺖﻧﻮﻔﻋ دﺎﺠ ـﯾ

ـﺷﺎﻧ راﺪ ﯽ و زا ـﯾ ﻪـﺑ سوﺮ

و ﻦﺘـﻓر هﺮﻔﻃ ﻞﯿﻟد ـﯾ

ﺳ زا سوﺮ ـﯿ

ا ﻢﺘﺴ ﯾ ـﻨﻤ ﯽ ﻣ و ـﯿ و ﺶﮑﻧﺎ

ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ ﻞﺧاﺪﺗ

و يﺎﻫ ﯾ ﺴﻣ ﺎﺑ سوﺮ ﯿ

ﺎﻫﺮ ي ـﺳ ﯿ و هﺪـﻨﻫد لﺎﻨﮕ

ﻨﭽﻤﻫ ﯿ ﻈﻨﺗ يﺎﻫﺮﯿﺴﻣ ﻦ ﯿ

ﻤ ﯽ ﻟﻮﻠﺳ ﯽ ﯽﻣ ﺪـﺷﺎﺑ . ارادHCV ي

ﺪﻨﭼ ﯾ ﺌﺗوﺮﭘ ﻦ ﯿ رﺎﺘﺧﺎﺳ ﻦ ي

ﻏ و ﯿ رﺎﺘﺧﺎـﺳ ﺮ ي

ﺒﻗ زا ـﯿ ﻞ ،core

،E1/2 NS3/4 و ﯽﻣ NS5 ﯽـﻣ ﻪـﮐ ﺪﺷﺎﺑ

رﺎـﻬﻣ رد ﺪـﻨﻧاﻮﺗ

ا ﺦﺳﺎﭘ ﯾ ﻨﻤ ﯽ ﺗاذ ﯽ ﺪﻨﺷﺎﺑ راﺬﮔ ﺮﯿﺛﺄﺗ )

3،4 .(

microRNAs لﻮﮑﻟﻮﻣ ،

يﺎـﻫ ﻏ ﮏـﭼﻮﮐ RNA

ـﯿ ﺮ

هﺪﻨﻨﮐ ﺪﮐ ﯽﻣ يا ﺑ ﻪﮐ ﺪﻨﺷﺎﺑ ﯿ

نآ نﺎ ﺴﺑ ﺢﻄﺳ رد ﺎﻫ ﯿ

ﻻﺎـﺑ رﺎ ﯽﯾ

ـﻈﻨﺗ ﯿ ا ،ﺖـﺳا هﺪـﺷ ﻢ ـﯾ

لﻮــﮑﻟﻮﻣ ﻦ ﯽـﻣ ﺎـﻫ

ﺪـﻨﻧاﻮﺗ ﺮﻃ زا ــﯾ ﻖ

ﻈﻨﺗ ﯿ ﻮﻧور زا ﺲﭘ تﺎﻤ ﯾ

ﺴ ﯽ ﺖﻤﺴـﻗ ﻪـﺑ لﺎﺼﺗا ﺎﺑ و 3

ﻪـﯿﺣﺎﻧ

ﻏﯿ ﻪﻤﺟﺮﺗ ﻞﺑﺎﻗﺮ )

UTR (٣

نژ ﻪـﺑ طﻮـﺑﺮﻣ ﺖـﺷﻮﻧور

يﺎـﻫ

ﻟﻮﻠــﺳ ﯽ ــﻈﻨﺗ ﺚــﻋﺎﺑ ﯿ

ﺑ ﻢ ــﯿ نژ نﺎ ﻟﻮﻠــﺳ يﺎــﻫ ﯽ

ﺪﻧﻮــﺷ .ا ــﯾ ﻦ

لﻮﮑﻟﻮﻣ ﺧ ﺎﺑ ﺎﻫ ﯿﻠ ﯽ اﺮﻓ زا ﯾ ﺎﻫﺪﻨ ي ﻟﻮﻠﺳ ﯽ ﺎﭘ ﯾ ﺒﻗ زا ﻪ ـﯿ گﺮـﻣ ﻞ

ﻟﻮﻠﺳ ﯽ ﺜﮑﺗ ، ﯿ ﺎﻤﺗ و ﺮ ﯾ ﯽﻣ طﺎﺒﺗرا رد ﺰ ﺪﻨﺷﺎﺑ

) 5 .(

تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ ﻪـﮐ ﺖـﺳا هداد نﺎﺸﻧ هدﺮﺘﺴﮔ microRNAs

ﺑ ﺰﻧژﻮﺗﺎﭘ رد ﯿ

رﺎﻤ ي ﺷﺎﻧ ﯽ زا ﯽﻣ HCV ا ﺶـﻘﻧ ﺪﻨﻧاﻮﺗ ﯾ

و هدﺮـﮐ ﺎـﻔ

ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ و يﺎﻫ ﯾ ﯽﻣ سوﺮ ﺷﺎﻣ ﺎﺑ ﺪﻨﻧاﻮﺗ ﯿ

ﻦ microRNA لﻮﻠـﺳ

ﺪﻨﻨﮐ راﺮﻗﺮﺑ طﺎﺒﺗرا )

5 .(

ﻪـﮐ ﺖﺳا هﺪﺷ هداد نﺎﺸﻧ لﺎﺜﻣ ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ

اﺰﻓا ﯾ ﺑ ﺶ ﯿ نﺎ miR-122 ﻃ

ﯽ ﺖﻧﻮﻔﻋ ﯽﻣ HCV

ﺮﻃ زا ﺪﻧاﻮﺗ ﯾ

ﻖ

ــﺳد رد ــﺷﺎﻣ نداد راﺮــﻗ سﺮﺘ ﯿ

ر ﻦ ﯾ ﻣوزﻮــﺒ ﯽ ﻪــﺑ لﻮﻠــﺳ RNA

وﯾ ﺳوﺮ ﯽ ﺮﺤﺗ ﺚﻋﺎﺑ ﯾ

ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ ﻪﻤﺟﺮﺗ ﮏ

و يﺎﻫ ﯾ ـﺳوﺮ ﯽ ﻊـﻗاو رد و

اﺰﻓا ﯾ ﺜﮑﺗ ﺶ ﯿ و ﺮ ﯾ ﺷﺎﻧ ﺖﻧﻮﻔﻋ و سوﺮ ﯽ

دﻮـﺷ نآ زا )6

.(

ﺺﺨﺸـﻣ

ﻈﻨﺗ رد لﻼﺘﺧا ﻪﮐ ﺖﺳا هﺪﺷ ﯿ

ﺑ ﻢ ﯿ نﺎ microRNAs ﻃ ﺎﺑ

ـﯿ ﻒ هدﺮﺘﺴﮔ

يرﺎﻤﯿﺑ زا يا

هدﻮـﺑ طﺎـﺒﺗرا رد نﺎﻃﺮـﺳ صﻮﺼـﺧ ﻪـﺑ ﺎﻫ

ﯽﻣ ﺪﺷﺎﺑ ) 5 .(

ﻪــﮐ ﺖــﺳا هداد نﺎﺸــﻧ تﺎــﺷراﺰﮔ miR-150

ﺶــﻘﻧ

ﺴﺑ ﯿ ﻤﻬﻣ رﺎ ﯽ لﻮﻠﺳ بﻮﮐﺮﺳ رد ار

ﻧﺎﻃﺮﺳ يﺎﻫ ﯽ

ا ﯾ ﯽﻣ ﺎﻔ ،ﺪـﻨﮐ

ﻨﭽﻤﻫ ﯿ ﻪـﮐ ﺖﺳا هﺪﺷ هﺪﻫﺎﺸﻣ ﻦ miR-150

ﯽـﻣ رد ﺪـﻧاﻮﺗ

يرﺎﻤﯿﺑ ﺰﻧژﻮﺗﺎﭘ

ﺎﻫ ي يرﺎـﻤﯿﺑ ﻪـﻠﻤﺟ زا ﻒـﻠﺘﺨﻣ

ﺎـﻫ ي ﺪـﺒﮐ ي

ﻪــﺑ ،ﺪــﺷﺎﺑ ﻪﺘــﺷاد ﺶــﻘﻧ رﻮــﻃ

ي ﺑ رد لﻼﺘــﺧا ﻪــﮐ ــﯿ

ا نﺎ ــﯾ ﻦ

microRNA ﯿﺑ ﺰﻧژﻮﺗﺎﭘ رد

يرﺎﻤ ﺎﻫ ي ﺪﺒﮐ ي هدﻮﺑ راﺬﮔﺮﯿﺛﺄﺗ

ﺖﺳا ) 7،8 .(

ـﺳرﺮﺑ ﺮـﺿﺎﺣ ﻪـﻌﻟﺎﻄﻣ زا فﺪـﻫ ﯽ

ﺌﺗوﺮـﭘ ﺮـﺛا ﯿ

ﻦ

و ﻪﺑ طﻮﺑﺮﻣ core ﯾ

سوﺮ ور ﺮﺑ HCV

ي ﺑ ﺢﻄﺳ ـﯿ نﺎ miR-

اﺮﺷ رد 150 ﯾ ﺎﻣزآ ﻂ ﯾ ﻫﺎﮕﺸ ﯽ رد ﯾ ﻟﻮﻠﺳ ﺖﺸﮐ لﺪﻣ ﮏ ﯽ

دﻮﺑ

.

شور و داﻮﻣ ﺎﻫ

ﻤﺳﻼﭘ ﺖﮑﻔﺴﻧاﺮﺗ و لﻮﻠﺳ ﺖﺸﮐ ﯿ

ﺎﻫﺪ

ﻟﻮﻠﺳ هدر ﯽ ﺎﻣﻮﺗﺎﭙﻫ ي ﻧﺎﺴﻧا ﯽ ) Huh7 ﺘـﺳﺎﭘ ﻪﺴﺳﻮﻣ رﻮ

ا ــﯾ ناﺮ ( ــﺤﻣ رد ﯿ ﺖﺸــﮐ ﻂ )

DMEM, Gibco USA (

ﺎﺑ هاﺮﻤﻫ 10 % وﺎـﮔ مﺮـﺳ ي

، 100 ﺪـﺣاو ﻣ ﺮـﻫ رد ﯿ ـﻠ ﯽ ﻟ ﯿ ﺮـﺘ

ـﺤﻣ ﯿ ﻂ ﺖﺸـﮐ ) FBS, Sigma, St. Louis, USA (

،

100 ﻣ ﯿ ﻣ ﺮﻫ رد مﺮﮔوﺮﮑ ﯿﻠ

ﯽ ﻟ ﯿ ﺤﻣ ﺮﺘ ﯿ ﺘﻧآ ﺖﺸﮐ ﻂ ﯽ

ﺑﯿ ﺗﻮ ـﯿ ﮏ

ﯽﻨﭘ ﻦﯿﻠﯿﺳ ﺴﯾﺎﻣﻮﺘﭘﺮﺘﺳا – ﯿ

ﻦ ) Gibco ( ، 2 ﻣ ﯿ لا لﻮﻣ وﺮﮑ -

ﻣﺎﺗﻮﻠﮔ ﯿ اﺮﺷ رد و ﻦ ﯾ

ﺮﻔﺴﻤﺗا ﻂ ي

5 % Co₂ ﺎﻣد و ي 37 ﻪﺟرد

ﺪﻧﺪﺷ هداد ﺪﺷر .

دوﺪﺣ ،ﻦﺸﮑﻔﺳاﺮﺗ زا ﻞﺒﻗ زور رد 400

راﺰﻫ

لﻮﻠﺳ ور ﺮﺑ Huh7

ي ﮏﺳﻼﻓ ﺎﻫ ي ﻟﻮﻠﺳ ﺖﺸﮐ ﯽ

6 ﻪـﻧﺎﺧ يا

ﺪﻧﺪﺷ هداد ﺪﺷر .

زا ﺪﻌﺑ 36 ﻟﻮﻠﺳ ﺪﺷر زا ﺖﻋﺎﺳ ﯽ

رد و ﻢﮐاﺮﺗ

ﻟﻮﻠﺳ ﺪﺷر ﯽ 70 % لﻮﻠﺳ يﺎـﻫ ﻤـﺳﻼﭘ ﻂـﺳﻮﺗ Huh7

ﯿ ﺎﻫﺪ ي

ﺑ ـﯿ هﺪـﻨﻨﮐ نﺎ )

pAAV/Full core (

ﻟ ﻂـﺳﻮﺗ ﯿ ﻮﭙ ﻣﺎـﺘﮑﻓ ﯿ ﻦ

2000 ) Invitrogen (

نآ هﺪﻧزﺎــﺳ ﻞﻤﻌﻟارﻮﺘــﺳد ﻖــﺒﻃ ﺮــﺑ

ﺪﻧﺪﺷ ﺖﮑﻔﺴﻧاﺮﺗ .

ﻤﺳﻼﭘ ﯿ ﺪ ـﯾpAAV ﻤـﺳﻼﭘ ﮏ ﯿ

ﺪ عﻮـﻧ زا

Adeno-associated virus لﻮﻃ ﺎﺑ

9380 و زﺎـﺑ ﺖـﻔﺟ

ﻪﺑ ﺖﻣوﺎﻘﻣ نژ ﯽﺘﻧآ

ﮏﯿﺗﻮﯿﺑ ﯽﭙﻣآ ﻦﯿﻠﯿﺳ ﯽﻣ ﺪﺷﺎﺑ ﻤـﺳﻼﭘ ، ﯿ ﺪ

ﻟاﻮﺗ هﺪﻧرادﺮﺑرد ﺮﻈﻧ درﻮﻣ ﯽ

ﺗﻮﺌﻠﮐﻮﻧ ﯿ ﺪ ي لﻮـﻃ ﺎﺑ 361 ﺖـﻔﺟ

ﺖﻬﺟ زﺎﺑ ﺑ ﯿ نﺎ ﺌﺗوﺮـﭘ ﻞﻣﺎﮐ لﻮﻃ ﯿ

ﻦ و core ـﯾ ﺗﺎﭙﻫ سوﺮ ـﯿ

ﺖ

ﺳ ﯽ ﯽﻣ ﺪﺷﺎﺑ ﺎـﻗآ زا ﻪﮐ ي

ﺴـﺣ ﺮـﺘﮐد ﯿﻨ

ﯽ ﻘﺤﺗ ﺰـﮐﺮﻣ ، ﯿ

تﺎـﻘ

(3)

ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ ﺮﺛا ﯽﺳرﺮﺑ ﺖﯿﺗﺎﯿﻫ سوﺮﯾو core

نﺎﯿﺑ يور ﺮﺑ C mir-150

هداز ﯽﻧﺎﺧ و

نارﺎﮑﻤﻫ



ﮑﺷﺰﭘ مﻮﻠﻋ هﺎﮕﺸﻧاد ﺪﺒﮐ و شراﻮﮔ ﯽ

ﺷ ﯿ ﺪﻫ زاﺮ ﯾ ﻪﺘﻓﺮﮔ ﻪ ﺪـﺷ .

زا نﺎﻣﺰﻤﻫ ﯾ

ﻤﺳﻼﭘ ﮏ ﯿ ﻟﺎﺧ ﺪ ﯽ ﺑ ﯿ هﺪﻨﻨﮐ ﻦ ناﻮـﻨﻋ ﻪـﺑ GFP

ﯾ ﻔﻨﻣ لﺮﺘﻨﮐ ﮏ ﯽ

ﺪﺷ هدﺎﻔﺘﺳا .

8 ﻦﺸـﮑﻔﺴﻧاﺮﺗ زا ﺲﭘ ﺖﻋﺎﺳ

ﺤﻣ ﯿ ﺖﺸﮐ ﻂ لﻮﻠﺳ

ﺎﻫ ﺗ ﻮﻌ ﯾ دﺮﮔ ﺾ ﯾ ﺲﭙﺳ ،ﺪ لﻮﻠﺳ

ﺎﻫ ﺎـﺗ 18

دﺮﮔ ﻪﺑﻮﮑﻧا ﺖﻋﺎﺳ ﯾ

ﺪﻧﺪ .

هﺪﻧز ﺖﺴﺗ ﻟﻮﻠﺳ ﯽﻧﺎﻣ

ﯽ

ﭘ ﺖﻬﺟ ﯽ ﻤﺳﻼﭘ ﺮﺛا ﻪﺑ ندﺮﺑ ﯿ

ﺑ ﺪ ﯿ ﺌﺗوﺮﭘ هﺪﻨﻨﮐ نﺎ ﯿ

ﻦ core

وﯾ ﺗﺎﭙﻫ سوﺮ ﯿ ﺳ ﺖ ﯽ ور ﺮﺑ ي نﺪﻧﺎﻣ هﺪﻧز ﯾ

ﻣ ﺎ ﯿ ﻟﻮﻠـﺳ گﺮـﻣ ناﺰ ﯽ

لﻮﻠﺳ ﺖﺴﺗ هﺪﺷ ﺖﮑﻔﺴﻧاﺮﺗ يﺎﻫ trypan blue exclusion

cell viability ﻮﻨﻓ هﺪﻫﺎﺸـﻣ رﺎـﻨﮐ رد

ﺗ ـﯿ ﭗ لﻮﻠـﺳ ﺎـﻫ ز رد ـﯾ ﺮ

ﻣﯿ پﻮﮑﺳوﺮﮑ رﻮﻧ

ي ﺪﺷ مﺎﺠﻧا سﻮﮑﻌﻣ .

اﺮـﺑ ي ا مﺎـﺠﻧا ـﯾ ﺖﺴـﺗ ﻦ

داﺪﻌﺗ 100 ﻃ رد لﻮﻠﺳ ﯽ

ﻟﻮﻠﺳ شرﺎﻤﺷ ﯽ

ﺣ ﮓـﻧر ﻂﺳﻮﺗ ـﯿ

ﺗﺎ ﯽ

trypan blue ﺳرﺮﺑ

ﯽ ﺖﺒﺴﻧ و هﺪﺷ لﻮﻠﺳ

يﺎﻫ نوﺪـﺑ ﻪـﺑ هﺪﻧز

ﺴﻘﺗ ﮓﻧر ﯿ ﻞﮐ داﺪﻌﺗ ﺮﺑ ﻢ لﻮﻠﺳ

ﺎﻫ ) لﻮﻠﺳ يﺎﻫ هدﺮﻣ ﻪﺘﻓﺮﮔ ﮓﻧر +

لﻮﻠﺳ يﺎﻫ هﺪـﻧز ﮓﻧر نوﺪﺑ (

ـﺑ و هﺪـﺷ ﯿ ﻦ هوﺮـﮔ يﺎـﻫ ﻒـﻠﺘﺨﻣ

ﺎﻘﻣ ﯾ ﺪﺷ ﻪﺴ .

جاﺮﺨﺘﺳا RNA

ﻮﻧور ﺶﻨﮐاو و ﯾ

ﺴ ﯽ سﻮﮑﻌﻣ

زا مﺎﺗRNA لﻮﻠﺳ ﺎﻫ اﺮﺗ لﻮـﻠﺤﻣ زا هدﺎﻔﺘـﺳا ﺎﺑ ـﯾ

لوﺰ

) Invotrogen (

ﻖﺒﻃ ﺮﺑ نآ هﺪﻧزﺎﺳ ﻞﻤﻌﻟارﻮﺘﺳد جاﺮﺨﺘـﺳا

دﺮﮔ ﯾﺪ . ﺲﭙﺳ RNA ﺖﺧﺎﺳ ﺖﻬﺟ هﺪﺷ جاﺮﺨﺘﺳا cDNA

ﻪــﺑ طﻮــﺑﺮﻣ miR-150

ﮐ زا هدﺎﻔﺘــﺳا ﺎــﺑ ــﯿ

ﺰﺘﻨــﺳ ﺖ

هﺪــﻨﻨﮐ cDNA )

Thermo Fisher Scientific,

(USA شور ﻂــﺳﻮﺗ stem-loop

زا هدﺎﻔﺘــﺳا ﺎــﺑ اﺮﭘ

ﯾ ﺮــﻤ

ﻮﻧور سﻮﮑﻌﻣ ـﯾ

ﺴ ﯽ ﺻﺎﺼـﺘﺧا ﯽ

microRNA )

لوﺪـﺟ 1 ( ،

ﻮﻧور ﺖﺤﺗ ﯾ

ﺴ ﯽ ﺖـﻬﺟ و ﻪـﺘﻓﺮﮔ راﺮـﻗ سﻮﮑﻌﻣ ﯽـﺳرﺮﺑ

يﺎـﻫ

ﻤﮐ ﯿﺘ ﯽ ﻪﺑ cDNA ﺪﺒﺗ

ﯾ ﺪﺷ ﻞ . اﺮﺑ ي ا مﺎﺠﻧا ﯾ اﺪـﺘﺑا ﻪﻠﺣﺮﻣ ﻦ

5 ﻣ ﯿ ﻟوﺮﮑ ﯿ ﺮﺘ RNA ﻪﺑ هﺪﺷ جاﺮﺨﺘﺳا 5/

1 ﻣ ﯿ ﻟوﺮﮑ ﯿ اﺮﭘ ﺮﺘ ﯾ ﺮﻤ

)RT 50nM ( و 4 ﻣ ﯿ ﻟوﺮﮑ ﯿ نورد رد ﺮــﻄﻘﻣ بآ ﺮــﺘ ــﯾ

ﮏ

ﻣﯿ ﺗوﺮﮑ ﯿ بﻮ 2/

0 رﺎﻋ ي ﺮﺘﺳا زﺎﺌﻠﮐﻮﻧ زا ﯾ

ﺲﭙـﺳ ،ﺪـﺷ ﻪﻓﺎﺿا ﻞ

ﺎـﺳﻮﻣﺮﺗ هﺎﮕﺘﺳد ﻞﺧاد رد ﺶﻨﮐاو طﻮﻠﺨﻣ ﯾ

رد ﺮﻠﮑ ﺎـﻣد ي 70

تﺪﻣ ﻪﺑ ﻪﺟرد 15

ﻗد ﯿ ﻪﻘ ﺪﺷ ﻪﺑﻮﮑﻧا .

ﺗ نآ زا ﺪﻌﺑ ﯿ

ور ﺮﺑ بﻮ ي

ﯾ ﺗﺮﺗ ﻪﺑ نآ ﻪﺑ و ﺪﺷ هداد راﺮﻗ ﺦ ﯿ

ﺐ : 4 ﻣ ﯿ ﻟوﺮﮑ ﯿ ﺮـﺘ ﺮﻓﺎـﺑ 5،X 2

ﻣ ﯿ ﮑ ﻟوﺮ ﯿ طﻮــﻠﺨﻣ ﺮــﺘ )dNTP

10mM (،

1 ﻣ ﯿ ﻟوﺮﮑ ﯿ ﺮــﺘ

ﺰﻧآ ﯾ ر ﻢ ﯾ ﻻﻮﺒ ك ) 20U ( و 1 ﻣ ﯿ ﻟوﺮﮑ ﯿ ـﻧآ ﺮـﺘ ﻢﯾﺰ ) RT 50U (

دﺮﮔ ﻪﻓﺎﺿا نآ ﻪﺑ ﯾﺪ

. ﺗ ﺲﭙﺳ ﯿ تﺪـﻣ ﻪﺑ ﺶﻨﮐاو بﻮ 1

ﺖﻋﺎـﺳ

ﺎﻣد رد ي 42 و ﻪﺟرد 72 ﻪﺟرد ) ﺖﻬﺟ لﺎﻌﻓﺮﯿﻏ ﺰـﻧآ نﺪﺷ ﯾ

ﻢ

ﻠﭘ ﯿ زاﺮﻤ ( تﺪﻣ ﻪﺑ 5 ﻗد ﯿ ﺎﺳﻮﻣﺮﺗ هﺎﮕﺘﺳد رد ﻪﻘ ﯾ

ﺪﺷ ﻪﺑﻮﮑﻧا ﺮﻠﮑ .

ﺎﭘ رد ﯾ نﺎ cDNA ﺳ

ﺎـﻣد رد رﺎـﮐ ﻪـﻣادا ﺖـﻬﺟ هﺪﺷ ﻪﺘﺧﺎ ي

20 - راﺪﻬﮕﻧ ﻪﺟرد ي

ﺪﺷ .

Real-Time PCR ﺖﺧﺎـﺳ ﻪﻠﺣﺮﻣ زا ﺪﻌﺑ cDNA

ﻪـﺑ طﻮـﺑﺮﻣ miR-150

،

ﻨﮑﺗ ﯿ ﮏ RT-PCR اﺮﭘ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ

ﯾ ﺎﻫﺮﻤ ي ﺻﺎﺼﺘﺧا ﯽ ) لوﺪﺟ

1 ( miR-150 ز ﻞﮑﺗوﺮﭘ ﻖﺒﻃ

ﯾ ﺖﻓﺮﮔ مﺎﺠﻧا ﺮ .

ﻟاﻮـﺗ ﯽ اﺮﭘ ﯾ ﺮـﻤ ي

ﻪﺑ طﻮﺑﺮﻣ miR-150 ﺎﭘ ﻪﺑ ﻪﻌﺟاﺮﻣ ﺎﺑ

ﯾ هﺎﮕ ﺗﺎﻋﻼﻃا ﯽ miRBase

) www.mirbase.org (

ﻨﭽﻤﻫ و ﯿ ﻟا راﺰﻓا مﺮﻧ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﻦ ﯿ

ﻮﮕ

ﻟﺎﻧآ ﯿ ﺣاﺮﻃ رﺰ ﯽ دﺮﮔ ﯾ لﺎﺼﺗا ﺖﺤﺻ و ﺪﻧﺪ نآ

ﺎﻫ ﻪﺑ ﯽﻟاﻮﺗ يﺎﻫ فﺪﻫ

ﺮﻃ زا ﯾ ﻖ ﺖﻤﺴﻗ ﻪﺑ ﻪﻌﺟاﺮﻣ BLAST

ﺎﭘ ﯾ هﺎﮕ ﺗﺎﻋﻼﻃا ﯽ NCBI

ﺪﯿﯾﺄﺗ ﺪﺷ . اﺮﺑ ي ا مﺎﺠﻧا ﯾ ور ﺮـﺑ ﻪﻠﺣﺮﻣ ﻦ ي

ـﯾ ﻞـﺧاد رد و ﺦ ـﯾ

ﮏ

ﻣﯿ ﺗ وﺮــﮑ ــﯿ ﺮﺘــﺳا بﻮ ﯾ

راﺪــﻘﻣ ﻞ 2

ﻣ ﯿ ﻟوﺮﮑ ﯿ ﺮــﺘ ﻪــﺑ cDNA 10

ﻣﯿ ﻟوﺮﮑ ﯿ ﺮـﺘ ) Real Time-PCR master mix, sybeer

green ( ﺖﮐﺮــﺷ لﻮﺼــﺤﻣ )

Amplicon corporation (

دﺮﮔ ﻪﻓﺎﺿا ﯾ ﻢﺠﺣ ﻪﺑ بآ ﺎﺑ ﺲﭙﺳ ،ﺪ 19

ﻣ ﯿ ﻟوﺮﮑ ﯿ ﻧﺎﺳر ﺮﺘ ﯿ و ﺪﺷ هﺪ

ﺎﭘ رد ﯾ راﺪﻘﻣ نﺎ 5/

0 ﻣ ﯿ ﺮﻫ زا لﻮﻣ وﺮﮑ اﺮﭘ زا ماﺪﮐ

ﯾ ﺎﻫﺮﻤ ي و ﺖﻓر

ﺗ ﻪﺑ ﺖﺸﮔﺮﺑ ﯿ

ﺶﻨـﮐاو ﺲﭙـﺳ ،هﺪﺷ ﻪﻓﺎﺿا ﺶﻨﮐاو بﻮ ﺖـﺤﺗ

اﺮﺷ ﯾ ﺎﻣد ﻂ ﯽﯾ ز ﯾﺮ : 95 ﻟوا ﻪﺟرد ـﯿ تﺪـﻣ ﻪـﺑ ﻪ 5

ﻗد ﯿ ،ﻪـﻘ 95

ﻪﺑ ﻪﺟرد تﺪﻣ 20 ﻧﺎﺛ ﯿ ﻪ ) زﺎﺳ ﺖﺷﺮﺳاو ﻪﻠﺣﺮﻣ ي

( ، 60 ﻪﺟرد

تﺪﻣ ﻪﺑ 35 ﻧﺎﺛ ﯿ ﻪ ) لﺎﺼﺗا ﻪﻠﺣﺮﻣ (

ﺎﻬﻧ شﺮﺘﺴﮔ ، ﯽﯾ

تﺪـﻣ ﻪـﺑ

10 ﻗد ﯿ داﺪﻌﺗ ،ﻪﻘ 40

ﺳ ﯿ ﺖﻓﺮﮔ مﺎﺠﻧا ﻞﮑ .

ﮔﻮﻠﺟ ﺖﻬﺟ ﯿﺮ

ي زا

ﻐﺗ ﯿﯿ تاﺮ هزاﺪﻧا ﮔ ﯿﺮ ي ﻣ ﯿ ﺑ ناﺰ ـﯿ نﺎ miR-150 زا

يﺎـﻫﺮﻤﯾاﺮﭘ

ﺻﺎﺼﺘﺧا ﯽ نژ U6 snRNA )

لوﺪﺟ 1 ( لﺮـﺘﻨﮐ ناﻮـﻨﻋ ﻪﺑ

ﻠﺧاد ﯽ ﺶﻨﮐاو رد Real-Time PCR

ﺪﺷ هدﺎﻔﺘﺳا .

ﺳرﺮﺑ ﯽ ﺑ ﯿ ﺗﺎﻣرﻮﻔﻧاﻮ ﯿ

ﮏ

ﭘ ﺖﻬﺟ ﯿ ﺑ ﺶ ﯿﻨ ﯽ ﯽﻟاﻮﺗ فﺪﻫ يﺎﻫ miR-150

هدﺎﻔﺘـﺳا ﺎﺑ

راﺰـــــــﻓا مﺮـــــــﻧ زا Target scan 6.1

(4)

(http://www.targetscan.org (

ﺣاﻮــﻧ ﯽ ﻫ ﯿ ﺮﺒ ــﯾ فاﺪــﻫا ﺪ

ﺑﯿ ژﻮﻟﻮ ﯾ ﻪﺑ طﻮﺑﺮﻣ ﮏ miR-150

ﻧآ ﻟﺎﯿ ﺪﺷ ﺰ .

يرﺎﻣآ ﺰﯿﻟﺎﻧآ

راﺰــﻓا مﺮــﻧ زا هدﺎﻔﺘــﺳا ﺎــﺑ يرﺎــﻣآ ﺰﯿﻟﺎــﻧآ Graph Pad

Prism ﺖــﻓﺮﮔ مﺎــﺠﻧا .

هداد توﺎــﻔﺗ ﻦﯿــﺑ ﯽﺑﺎــﯾزرا ياﺮــﺑ زا ﺎــﻫ

شور one-way ANOVA ﺪـﯾدﺮﮔ هدﺎﻔﺘﺳا

. يرﺎـﻣآ توﺎـﻔﺗ

هوﺮﮔ ﻦﯿﺑ شور ﻂـﺳﻮﺗ ﺖﺴـﺗ و لﺮـﺘﻨﮐ يﺎـﻫ Tukey post-

و ﺪــﺷ ﻦﯿـﯿﻌﺗ test 05

/0

≤ رد يرﺎـﻣآ رادﺎــﻨﻌﻣ توﺎـﻔﺗ P ﺮــﻈﻧ

ﺪﺷ ﻪﺘﻓﺮﮔ .

ﻪﺘﻓﺎﯾ ﺎﻫ

ﻤـﺳ ﺮﺛا مﺪﻋ ﯿﺘ

ﯽ و ﮔﺪﻨﺸـﮐ ﯽ ﻟﻮﻠـﺳ ﯽ ﻤـﺳﻼﭘ ﯿ ﺪ

pAAV/Full core ﺑﯿ

نﺎ هﺪﻨﻨﮐ ﺌﺗوﺮﭘ ﯿ ﻦ core و ـﯾ سوﺮ

ﺗﺎﭙﻫ ﯿ ﺳ ﺖ ﯽ

ا رد ــﯾ ﺖﺴــﺗ زا ﻪــﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦ trypan blue exclusion

ﺳرﺮﺑ ﺖﻬﺟ ﯽ

ﺑ رﻮـﺘﮐو ﺮﺛا ـﯿ

ﺌﺗوﺮـﭘ هﺪـﻨﻨﮐ نﺎ ﯿ

ﻦ و core ـﯾ سوﺮ

ﺗﺎﭙﻫ ﯿ ﺳ ﺖ ﯽ ور ﺮﺑ ي هﺪﻧز ﯽﻧﺎﻣ ﻟﻮﻠﺳ ﯽ ﺪـﺷ هدﺎﻔﺘـﺳا .

ـﺘﻧ ﺎﯾ ا ﺞ ـﯾ ﻦ

رد ﺖﺴﺗ هوﺮﮔ يﺎﻫ رادﺎﻨﻌﻣ توﺎﻔﺗ ﻪﮐ داد نﺎﺸﻧ ﻒﻠﺘﺨﻣ ي

ﺮﻈﻧ زا

هﺪﻧز ﯽﻧﺎﻣ ﻟﻮﻠﺳ ﯽ ﺑ رد ﯿ ﻦ لﻮﻠﺳ يﺎﻫ و هﺪـﺷ ﺖﮑﻔﺴـﻧاﺮﺗ Huh7

ﻏﯿ دراﺪﻧ دﻮﺟو ﺖﮑﻔﺴﻧاﺮﺗ ﺮ 01

/0

<

) P ﻞﮑﺷ 1 ( ﺖﺳا هﺪﺷ .

ناﺰـﯿﻣ يور ﺮـﺑ core ﻦﯿﺌﺗوﺮـﭘ هﺪـﻨﻨﮐ نﺎﯿﺑ ﺪﯿﻤﺳﻼﭘ ﺮﺛا 1 . ﻞﮑﺷ هﺪﻧز ﯽﻟﻮﻠﺳ ﯽﻧﺎﻣ .

نﺎﻤﻫ ﺷ رد ﻪﮐ رﻮﻃ ﯽـﻣ هﺪﯾد ﻞﮑ

ﺪﯿﻤـﺳﻼﭘ دﻮـﺷ

ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ هﺪﻨﻨﮐ نﺎﯿﺑ ﭻﯿﻫ core

و ﯽﻟﻮﻠـﺳ ﯽﮔﺪﻨﺸـﮐ تاﺮـﺛا ﻪـﻧﻮﮔ

ﺖﺴــﺗ مﺎــﺠﻧا زا ﺲــﭘ ار يراد ﺎــﻨﻌﻣ ﯽــﮑﯾﺮﺤﺗ trypan blue

exclusion هوﺮﮔ ﻦﯿﺑ رد

ﺖﺳا هداﺪﻧ نﺎﺸﻧ ﻒﻠﺘﺨﻣ يﺎﻫ .

ﺮﺛا ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ يور ﺮـﺑ ﯽـﺳ ﺖـﯿﺗﺎﭙﻫ سوﺮـﯾوcore

نﺎﯿﺑ ناﺰﯿﻣ miR-150

اﺮﺑ ي ﺳرﺮﺑ ﯽ ا ﯾ آ ﻪﮑﻨ ﯾ ﺮﭘ ﺎ ﺌﺗو ﯿ ﻦ و core ﯾ ﺗﺎﭙﻫ سوﺮ ﯿ ﺳ ﺖ ﯽ

ﯽﻣ ﺪﻧاﻮﺗ ﺑ ﯿ نﺎ miR-150 ﺖﺤﺗ ار

ﺮﯿﺛﺄﺗ ﺪـﻫد راﺮﻗ ـﯾ

ﺧ ﺎ ـﯿ ﺎـﻣ ،ﺮ لﻮﻠﺳ

يﺎﻫ ﻤـﺳﻼﭘ ﻂـﺳﻮﺗ ار Huh7

ﯿ ﺪ ﺑ pAAV ـﯿ هﺪـﻨﻨﮐ نﺎ

ﺌﺗوﺮﭘ ﯿ ﻦ و core ﯾ ﺗﺎﭙﻫ سوﺮ ﯿ ﺳ ﺖ ﯽ دﺮـﮐ ﺖﮑﻔﺴـﻧاﺮﺗ ﯾ

ﻟﺎـﻧآ ،ﻢ ﯿ ﺰ

ﺑﯿ ﻨﮑﺗ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ نژ نﺎ ﯿ

ﮏ Real Time PCR ﻪﮐ داد نﺎﺸﻧ

ﺌﺗوﺮﭘ ﯿ ﻦ و core ﯾ ﺎﭙﻫ سوﺮ ﺗﯿ ﺳ ﺖ ﯽ ﯽﻣ ﺪﻧاﻮﺗ ﻪﺑ رﻮـﻃ رادﺎـﻨﻌﻣ ي

ﺑ ﺶﻫﺎﮐ ﺚﻋﺎﺑ ﯿ

نژ نﺎ miR-150 دﻮﺷ

. نﺎﻤﻫ رﻮﻃ رد ﻪﮐ ) ﻞﮑﺷ

1 ( ،ﺖﺳا هﺪﺷ هداد نﺎﺸﻧ لﻮﻠﺳ

يﺎـﻫ هﺪـﺷ ﺖﮑﻔﺴـﻧاﺮﺗ Huh7

ﻤﺳﻼﭘ ﻂﺳﻮﺗ ﯿ

ﺪ ﺑ ﯿpAAV ﺌﺗوﺮـﭘ هﺪﻨﻨﮐ نﺎ ﯿ

ﻦ و core ـﯾ سوﺮ

ﺗﺎﭙﻫ ﯿ ﺳ ﺖ ﯽ ﻗ رد ﯿ ﺎﺑ سﺎ لﻮﻠﺳ يﺎﻫ ﺗ ﯿ رﺎﻤ هﺪﺸﻧ ) ﺒﻃ لﻮﻠﺳ ﯿﻌ ﯽ ( و

لﻮﻠﺳ يﺎﻫ ﻔﺴﻧاﺮﺗ Huh7

ﻤـﺳﻼﭘ ﺎـﺑ هﺪـﺷ ﺖﮑ ﯿ

ﺑ ﺪ ـﯿ هﺪـﻨﻨﮐ نﺎ

ﺌﺗوﺮﭘ ﯿ ﻦ ﻟﺎﺧ GFP ﯽ رادﺎﻨﻌﻣ ﺶﻫﺎﮐ ي

رﺎﻣآ ي ﻣ ﺮـﻈﻧ زا ار ـﯿ

ناﺰ

ﺑﯿ نژ نﺎ miR-150 نﺎﺸﻧ

ﯽﻣ ﺪﻨﻫد 01 /0

<

.اﯾP ﺎﺘﻧ ﻦ ﯾ نﺎﺸﻧ ﺞ

ﯽﻣ ﺪﻫد ﺌﺗوﺮﭘ ﻪﮐ ﯿ ﻦ اراد core ي ﮔﺪـﻨﻨﮐ رﺎـﻬﻣ تاﺮﺛا ﯽ

ور ﺮـﺑ ي

ﺑﯿ نﺎ miR-150 ا و هدﻮﺑ

ﯾ ﺌﺗوﺮﭘ ﻦ ﯿ ﻦ ﻣ ﺖﺳا ﻪﺘﺴﻧاﻮﺗ ﯿ

ﺑ ناﺰ ـﯿ نﺎ

miR-150 ﺖﺤﺗ ار

ﺮﯿﺛﺄﺗ ﺪﻫﺪﺑ راﺮﻗ .

ﻞﮑﺷ 2 . ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ ﺮﺛا ناﺰـﯿﻣ يور ﺮـﺑ ﯽـﺳ ﺖﯿﺗﺎﭙﻫ سوﺮﯾو core

نﺎﯿﺑ miR-150 .

مﺎـﺠﻧا زا ﺲـﭘ نژ نﺎـﯿﺑ ﺰﯿﻟﺎـﻧآ Real Time –

ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ ﻪﮐ داد نﺎﺸﻧPCR ﻪـﺑ ﯽـﺳ ﺖﯿﺗﺎﭙﻫ سوﺮﯾو core

رﻮـﻃ

ﻪﻈﺣﻼﻣ ﻞﺑﺎﻗ

نﺎﯿﺑ ﺶﻫﺎﮐ ﺚﻋﺎﺑ يا miR-150

ﺖﺳا هﺪﺷ . ﺮـﻫ bar

ﺶﯾاﺰﻓا ﺮﮕﻧﺎﯿﺑ ﯾ

ﺎ ﺶﻫﺎﮐ Relative fold change ﺎـﺑ ﻪﺴـﯾﺎﻘﻣ رد

لﻮﻠﺳ نﺎﯿﺑ ﯽﻣ لﺮﺘﻨﮐ يﺎﻫ

ﺪﺷﺎﺑ . 01 /0

<

ﺮـﯿﯿﻐﺗ هﺪـﻨﻫد نﺎﺸﻧ **P

رادﺎﻨﻌﻣ fold change هوﺮﮔ ﺎﺑ ﺖﺴﺗ هوﺮﮔ

ﯽﻣ لﺮﺘﻨﮐ يﺎﻫ ﺪﺷﺎﺑ

.

ﮏﯾژﻮﻟﻮﯿﺑ فاﺪﻫا هﺪﺷ ﯽﻨﯿﺑ ﺶﯿﭘ ﯽﻟاﻮﺗ miR-150

ـﭘ ﺖﻬﺟ ﯿ ﺑ ﺶ ﯿ ـﻨ ﯽ ﯽﻟاﻮـﺗ يﺎـﻫ فﺪـﻫ miR-150 راﺰـﻓا مﺮـﻧ

Targetscan 6.1 ﮑﺑ

ﺪﺷ ﻪﺘﻓﺮﮔ رﺎ .

نﺎﻤﻫ رﻮﻃ ﻞﮑـﺷ رد ﻪـﮐ 3

هﺪﻫﺎﺸﻣ ﯽﻣ ددﺮﮔ ﺎﺘﻧ ، ﯾ ا ﺞ ﯾ ﻟﺎﻧآ ﻦ ﯿ ﻪـﮐ داد نﺎﺸﻧ ﺰ miR-150

رد

(5)

نارﺎﮑﻤﻫ



ﺮﺗﻻﺎﺑ ﯾ ﻫ ﺢﻄﺳ ﻦ ﯿ

ﺮﺒ ـﯾ ﻟاﻮـﺗ ود ﻪـﺑ نﺪـﺷ ﺪ ﯽ

ﺣﺎﻧ ـﯿ ﻪ UTR ٣

نژ ﺖﺷﻮﻧور ﻪﺑ طﻮﺑﺮﻣ C-myb

ﻞﺼﺘﻣ ﯽﻣ ددﺮﮔ .

ﻞﮑﺷ 3 . ﯽﻟاﻮﺗ هﺪﺷ ﯽﻨﯿﺑ ﺶﯿﭘ فﺪﻫ يﺎﻫ miR-150

.

يﺮﯿﮔ ﻪﺠﯿﺘﻧ و ﺚﺤﺑ

ﺖﻧﻮﻔﻋ لﻮﻠﺳ يﺎﻫ ﮐ ﺪﺒ ي ﻂﺳﻮﺗ سوﺮﯾو يﺎﻫ ﺗﺎﭙﻫ ـﯿ

،ﺖ ﻪـﺑ

صﻮﺼﺧ و ﯾ سوﺮ ،ﯾHCV ﭘ هﺪﻤﻋ ﺮﻄﺧ ﮏ ـﯿ

ﺖـﻧﻮﻔﻋ ﺖﻓﺮﺸ ﻪـﺑ

ﯾ نآ ﺐﻗﺎﻌﺘﻣ و ﻦﻣﺰﻣ ﺖﻧﻮﻔﻋ ﮏ ﻓ

ﯿ ـﺳ مﺎﺠﻧاﺮﺳ و ﺪﺒﮐ زوﺮﺒ ﯿ

و زوﺮ

نﺎﻃﺮﺳ لﻮﻠﺳ يﺎﻫ ﺪﺒﮐ ي بﻮﺴﺤﻣ ﯽﻣ دﻮـﺷ . ز تﺎـﻌﻟﺎﻄﻣ ـﯾ

دﺎ ي

نﺎﺸﻧ هداد ﺪﻧا ﻪﮐ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ يﺎﻫ و ﯾ سوﺮ HCV ﻦﻣﺰـﻣ ﺖﻧﻮﻔﻋ رد

ﺷﺎﻧ ﯽ و زا ﯾ ﭘ و سوﺮ ﯿ ﺑ ﺖﻓﺮﺸ ﯿ ﺎﻤ ر ي و ﻪﺘﺷاد ﺶﻘﻧ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ

يﺎـﻫ

اﯾ و ﻦ ﯾ رد ناواﺮﻓ راﺪﻘﻣ ﻪﺑ سوﺮ لﻮﻠﺳ

يﺎﻫ ﺪﺒﮐ ي ﺎﺳﺎﻨﺷ هدﻮﻟآ ﯽﯾ

هﺪﺷ ﺪـﻧا ) 9 .(

ﺮـﺑ هوﻼـﻋ ا ـﯾ ﻦ ﯽـﺳرﺮﺑ ﺎـﻫ ﻪـﮐ ﺖـﺳا هداد نﺎﺸـﻧ

ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ يﺎﻫ و ﯾ سوﺮ HCV ﯽﻣ ﺪﻨﻧاﻮﺗ ﺮﻃ زا ﯾ ﻈﻨﺗ ﻖ ﯿ ﻢ - ﺲﻧاﺮـﺗ

ﻮﻧور ﯾ ﺴ ﯽ ور ﺮﺑ ي ﻣ ﯿ ﺑ ناﺰ ﯿ نﺎ نژ يﺎﻫ ﻟﻮﻠﺳ ﯽ ﺴﻣ و ﯿ ﺎﻫﺮ ي ﻈﻨﺗ ﯿ ﻢ

ﻟﻮﻠﺳ هﺪﻨﻫد ﯽ

ﺮﯿﺛﺄﺗ ا و هدﻮﺑ راﺬﮔ ﯾ

ﻐﺗ ﻦ ﯿﯿ ﺎﭘ رد تاﺮ ﯾ راﺪ ي ﺖـﻧﻮﻔﻋ

وﯾ ﺳوﺮ ﯽ ﭘ و ﯿ ﺎﻫﺪﻣﺎ ي ﻟﺎﺑ ﯿﻨ ﯽ ﺧو ﯿ اﺰﺴﺑ ﺶﻘﻧ نآ ﻢ ﯽﯾ

ﺪـﻧراد ) 5،9 (

microRNAs ﻈﻨﺗ ﻞﻣاﻮﻋ ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ

ﯿ ﺑ هﺪﻨﻨﮐ ﻢ ـﯿ ﺶـﻘﻧ نژ نﺎ

ﻤﻬﻣ ﯽ ﺖﻧﻮﻔﻋ رد ار HCV

ﺰﻧژﻮﺗﺎﭘ و يرﺎـﻤﯿﺑ ﺎـﻫ ي ﺪـﺒﮐ ي ا ﯾ ﺎـﻔ

ﯽﻣ ﺪﻨﻨﮐ )6 .(

ﺖﻧﻮﻔﻋ ﻪﮐ ﺖﺳا هﺪﺷ ﺺﺨﺸﻣ HCV

ﻪـﺑ ﺮـﺠﻨﻣ

ﻐﺗ ـﯿﯿ ﺮ رد تا ﺑ ـﯿ نﺎ microRNAs ﻟﻮﻠـﺳ

ﯽ ﺮﻃ زا ـﯾ ﻖ ﺮﯿﺛﺄـﺗ رد

ﺴــﻣ ﯿ ﺎﻫﺮ ي ــﺳ ﯿ ﻟﺎﻨﮕ ﯿ ﻈﻨﺗ و هﺪــﻨﻫد ﮓﻨ ﯿ

ــﻤ ﯽ ﯽــﻣ ﺪﻧﻮــﺷ ) 5،6 (

.microRNAs ﺎﻫرﻮﺘﮐﺎﻓ نداد راﺮﻗ فﺪﻫ ﺎﺑ

ي ﻟﻮﻠـﺳ ﯽ ﺣ ـﯿ ﺗﺎ ﯽ

ﻣﯿ ﻧﺎﺑﺰ ﯽ ﻧ درﻮﻣ ﯿ ﺜﮑﺗ ﺖﻬﺟ زﺎ ﯿ

ﺮ وﯾ سوﺮ ،HCV ﯽﻣ ﺪﻨﻧاﻮﺗ ﺶـﻘﻧ

اﺰﺴﺑ ﯽﯾ از ﺖﻧﻮﻔﻋ رد ار ﯽﯾ

ـﺷﺎﻧ ﺰﻧژﻮﺗﺎـﭘ و ﯽ

ا زا ـﯾ و ﻦ ـﯾ ا سوﺮ ﯾ ﺎـﻔ

ﺪﻨﻨﮐ . ا رد ﯾ ﺌﺗوﺮﭘ ﺮﺛا ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦ ﯿ

ﻦ و core ﯾ سوﺮ ور ﺮـﺑ HCV

ي

ﺑﯿ نﺎ miR-150 اﺮﺷ رد

ﯾ ﺎﻣزآ ﻂ ـﯾ ﻫﺎﮕﺸ ﯽ ـﺳرﺮﺑ ﯽ ﺪـﺷ . ﺎـﺘﻧ ﯾ ﺞ ﺌﺗوﺮﭘ ﻪﮐ داد نﺎﺸﻧ ﺎﻣ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ

ﯿ ﻦ و core ﯾ سوﺮ ﯽﻣHCV ﺪـﻧاﻮﺗ

ور ﺮﺑ ي ﺎﻓوﺮﭘ ﯾ ﺑ ﻞ ﯿﻧﺎ ﯽ miR-150 ﺮﯿﺛﺄﺗ

رﻮﻄﺑ هدﻮﺑ راﺬﮔ ﯾ

ا ﻪﮑ ـﯾ ﻦ

ﺌﺗوﺮﭘ ﯿ ﻦ ﺳرﺮﺑ رد ﯽ ﺖﺴﻧاﻮﺗ ﺎﻣ ﻪﺑ

رﻮﻃ ﺑﺎﻗ و رادﺎﻨﻌﻣ ﻞ

ﻪـﻈﺣﻼﻣ يا

ﺑ ﺶﻫﺎﮐ ﺚﻋﺎﺑ ﯿ

نﺎ miR-150 دﻮﺷ

. ﺮﺑ هوﻼﻋ اﯾ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ ﺎﻣ ﻦ

ﯽــﺳرﺮﺑ يﺎــﻫ ﺑ ﯿ ﺗﺎﻣرﻮﻔﻧاﻮ ــﯿ ﺑ فاﺪــﻫا ﮏ ﯿ

ژﻮﻟﻮ ــﯾ ﮏ miR-150 ار

ﺳرﺮﺑ ﯽ دﻮﻤﻧ ﯾ ﺎﺘﻧ ،ﻢ ﯾ ا ﺞ ﯾ ﺳرﺮﺑ ﻦ ﯽ ﻪـﮐ داد نﺎﺸﻧ miR-150

رد

ﺮﺗﻻﺎﺑ ﯾ ﻫ ﺢﻄﺳ ﻦ ﯿ

ﺮﺒ ﯾ ﻖﺑﺎﻄﺗ و نﺪﺷ ﺪ ﯽﻣ

ﺪﻧاﻮﺗ ﻪﺑ ﻞﺼﺘﻣ Cmyb

دﻮﺷ و ﺖﺷﻮﻧور يﺎﻫ اﯾ نژ ﻦ ﯾ ﺪـﻫ ﮏ ﺑ ف ﯿ ژﻮـﻟﻮ ﯾﮑ ﯽ اﺮـﺑ ﻢـﻬﻣ ي

miR-150 بﻮﺴﺤﻣ

ﯽﻣ ﺪـﻧدﺮﮔ . C-myb ـﯾ

ﮏ نژﻮـﮑﻧاﻮﺗوﺮﭘ

ﯽﻣ ﺪﺷﺎﺑ ﻪﮐ ﯾ ﻮﻧور رﻮﺘﮐﺎﻓ ﮏ ﯾ

ﺴ ﯽ ﻤﻬﻣ ﯽ ﺪﮐ ار ﯽـﻣ ﺪـﻨﮐ رد ﻪـﮐ

ﺮﺤﺗ ــﯾ ﺜﮑﺗ ﮏ ــﯿ ﺎــﻤﺗ ،ﺮ ﯾ و ﺰ هﺪــﻧز ﯽﻧﺎــﻣ ﻟﻮﻠــﺳ ﯽ دراد ﺶــﻘﻧ )

10 .(

نﺎﺸﻧ تﺎﺷراﺰﮔ ﯽﻣ

ﺪﻫد ﻃ ﻪﮐ ﯽ رد ﻦﻣﺰـﻣ ﺖـﻧﻮﻔﻋ لﻮﻠـﺳ

يﺎـﻫ

ﺪﺒﮐ ي ﺎﺑ هدﻮﻟآ ﺑ ﯿHCV ا نﺎ ﯾ ﺌﺗوﺮﭘ ﻦ ﯿ ﻦ ﺑ ﺑ و ﻪﺘﻓر ﻻﺎ ـﯿ

رد نآ نﺎ

اﯾ ﻦ لﻮﻠﺳ ﺎﻫ ﺑ ﻪﻌﺳﻮﺗ رد ﯿ

رﺎﻤ ي ﭘ و ﺪﺒﮐ ﯿ ﺑ ﺖﻓﺮﺸ ﯿ رﺎﻤ ي ضراﻮﻋ ﻪﺑ

ﻢﯿﺧو ﺮﺗ ﺶﻘﻧ دراد ) 12 - 10 .(

ﺌﺗوﺮـﭘ ﯿ ﻦ د هاﺮـﻤﻫ ﻪـﺑ core ﯾ

ﺮـﮕ

ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ يﺎـﻫ و ـﯾ سوﺮ و HCV miR-150 رد

يرﺎـﻤﯿﺑ ﺎـﻫ ي

ﻔﻠﺘﺨﻣ ﯽ راﺮﻗ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ درﻮﻣ ﻪﺘﻓﺮﮔ

ﺪﻧا ) 15 - 13 ، 9 .(

لﺎﺜﻣ ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ

ﻟ ﯽ نﺎﺸﻧ نارﺎﮑﻤﻫ و ﺌﺗوﺮـﭘ ﻪﮐ ﺪﻧداد

ﯿ ﻦ و core ـﯾ سوﺮ HCV

ﯽﻣ ﺪﻧاﻮﺗ ﻪﺑ رﻮﻃ رادﺎﻨﻌﻣ ي ﺑ ﺶﻫﺎﮐ ﺚﻋﺎﺑ ﯿ

نﺎ miR-122 ﻪﮐ دﻮﺷ

اﯾ ﻦ ﯽﻣ ﺪﻧاﻮﺗ ﻧﺎﮑﻣ رد ﯿ و ﻦﺘﻓر هﺮﻔﻃ ﻢﺴ ﯾ

ﺳ زا سوﺮ ﯿ ا ﻢﺘﺴ ﯾ ﻨﻤ ﯽ و

ﻦﻣﺰﻣ ﺖﻧﻮﻔﻋ ﺮﯿﺛﺄﺗ

راﺬﮔ ﺪﺷﺎﺑ ) 16 .(

ا ﺮﺑ هوﻼﻋ ﯾ ﻦ نارﺎﮑﻤﻫ و ﻦﭼ

ﻃ رد ﯽ ﯾ ور ﺮﺑ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﮏ ي

miR-150 ﺖـﻧﻮﻔﻋ و

لﻮﻠـﺳ يﺎـﻫ

هدﻮﻟآ و ﺎﺑ ﯾ ـﻃ ﻪﮐ ﺪﻧداد نﺎﺸﻧ ﮓﻧاد ﺐﺗ سوﺮ ﯽ

ﺶﻫﺎـﮐ ﺖـﻧﻮﻔﻋ

ﺑ ــﯿ نﺎ miR-150 و هدﺎــﺘﻓا قﺎــﻔﺗا

اﺰــﻓا ﯾ ﺑ ﺶ ــﯿ نﺎ miR-150

ﯽﻣ ﺪﻧاﻮﺗ ﺴﻧژﻮﺗﺎﭘ ﺶﻫﺎﮐ رد ﯿ

ژارﻮﻤﻫ ﺐﺗ ﻪﺘ ﯾ

ـﺷﺎﻧ ﮏ ﯽ و زا ـﯾ سوﺮ

ﻪﺘﺷاد ﺶﻘﻧ ﮓﻧاد ﺪﺷﺎﺑ

) 14 .(

رد ـﯾ د شراﺰـﮔ ﮏ ﯾ

و نارﻮـﻣ ﺮـﮕ

ﻤﻫا نارﺎــﮑﻤﻫ ــﯿ

ﺖ miR-150 ﺑ ﺰﻧژﻮﺗﺎــﭘ رد ار

ﯿ رﺎــﻤ ي ــﺷﺎﻧ ﯽ زا

وﯾ سوﺮ ﻮﺳ اﺰﻧﻻﻮﻔﻧآ ﯾ

ﻪ نﺎﺸـﻧ H1N1 ﺪـﻧداد ) 15 ( ﻪـﻌﻟﺎﻄﻣ رد ،

نآ ﺎﻫ اﺰـﻓا ﻪﮐ ﺪﺷ هﺪﻫﺎﺸﻣ ﯾ

ﺑ ﺶ ـﯿ نﺎ miR-150 ﭘ ﺎـﺑ

ﯿ ﺎﻫﺪـﻣﺎ ي

ﻟﺎﺑ ﯿﻨ ﯽ ﻒﯿﻌﺿ يﺮﺗ هاﺮﻤﻫ ﯽﻣ ﺪﺷﺎﺑ . ا رﺎﻨﮐ رد ﯾ ﺎﺘﻧ ،دراﻮﻣ ﻦ ﯾ

ﺪـﻨﭼ ﺞ

ﻪﮐ ﺖﺳا هداد نﺎﺸﻧ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ رد

يرﺎﻤﯿﺑ ﺎﻫ ي ﺪﺒﮐ ﻦﻣﺰﻣ ي

ﻪﻠﻤﺟ زا

ﻓﯿ ﺑ ﺪﺒﮐ زوﺮﺒ ﯿ

نﺎ miR-150 رادﺎـﻨﻌﻣ ﺶﻫﺎﮐ رﺎﭼد

ي ﯽـﻣ دﻮـﺷ

(6)

) 17 ( ﻨﭽﻤﻫ ، ﯿ ﺑ ﺢﻄﺳ ﻦ ﯿ نﺎ miR-150 ﯽﻣ

ﺪﻧاﻮﺗ ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ ـﯾ ﮏ

ﺑﯿ ﺨﺸﺗ ﺖﻬﺟ ﻢﻬﻣ ﺮﮐرﺎﻣﻮ ﯿ

ﭘ و ﺺ ﯿ بﻮﺴﺤﻣ ﺪﺒﮐ نﺎﻃﺮﺳ ﺖﻓﺮﺸ

ددﺮﮔ ) 18 .(

ﺎﺘﻧ ﯾ ا ﺞ ﯾ نﺎﺸﻧ تاﺪﻫﺎﺸﻣ ﻦ ﯽـﻣ

ﺪـﻫد ﺒـﺷ ﻪـﮐ ﯿ ﻪـﺑ ﻪ

ﺑ ﺢﻄﺳ ﺶﻫﺎﮐ ﺎﻣ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﯿ

نﺎ miR-150 ﻃ

ﯽ و ﺖﻧﻮﻔﻋ ﯾ ـﺳوﺮ ﯽ

ﯽــﻣ ﺪــﻧاﻮﺗ ﭘ رد ــﯿ ﺑ ﺖﻓﺮﺸ ﯿ رﺎــﻤ ي ﻠﮐ ﯿﻨ ﯿ ــﮑ ﯽ ــﺷﺎﻧ ﯽ و زا ــﯾ و سوﺮ

ﻨﭽﻤﻫ ﯿ ﺴﻧژﻮﺗﺎﭘ ﻦ ﯿ ﻦﻣﺰﻣ ﺖﻧﻮﻔﻋ ﻪﺘ صﻮﺼـﺧ ﻪﺑ

ﺑ ﯿ رﺎـﻤ ي ﻦﻣﺰـﻣ

ﺪﺒﮐ ﺮﯿﺛﺄﺗ راﺬﮔ ﯽﻣ ﺪﺷﺎﺑ ا ﺎﺑ ﺎﻣا ، ﯾ لﺎﺣ ﻦ ﯽﺳرﺮﺑ يﺎـﻫ ﻘﻣ ﺎـﺑ ـﯿ سﺎ

ﻊﯿﺳو ﺮﺗ ﺮﺛا و ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ يﺎﻫ ﺑ ﯿ ﺮﺘﺸ ي و زا ﯾ سوﺮ اﺮﺷ رد HCV

ﯾ ﻂ

in vivo اﺮﺑ

ي ﻣ و ﺮﺛا ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﯿ

ﺑ ﺶﻨﮑﻧﺎ ﯿ ﻦ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ يﺎﻫ و ﯾ سوﺮ

ﻈﻨﺗ ﻞــﻣاﻮﻋ و ﯿ

ــﻤ ﯽ ﻟﻮﻠــﺳ ﯽ ﻪــﻠﻤﺟ زا microRNAs

ﺎــﺘﻧ ﯾ و ﺞ

ﺳﺎﻔﺗ ﯿ ﺮ ﻖﯿﻗد ﺮﺗ و ﻞﻣﺎﮐ يﺮﺗ ار ﯽﻣ ﺪﻧاﻮﺗ ﭘ رد ﯽ ﺪﺷﺎﺑ ﻪﺘﺷاد .

ﺎﺘﻧ ﻪﺑ ﻪﺟﻮﺗ ﺎﺑ ﯾ

ا ﺞ ﯾ ﻪﺑﺎﺸﻣ تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ و ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦ ﻦﯾا

رﻮـﻃ ﻪـﺑ

ﺮﻈﻧ ﯽﻣ ﺪﺳر ﻣ ﻪﮐ ﯿ ﺑ ﺶﻨﮑﻧﺎ ﯿ ﻦ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ يﺎـﻫ و ـﯾ سوﺮ و HCV

microRNAs ﻈﻨﺗ ﻢﻬﻣ ﻞﻣاﻮﻋ ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ

ﯿ ﻤ ﯽ ﻟﻮﻠـﺳ ﻞـﺧاد ﯽ

، ﻞﺑﺎﻗ ﺶﻘﻧ

ﻪﻈﺣﻼﻣ يا ﺎﭘ رد ار ـﯾ راﺪ ي ﭘ و ـﯿ ﺖﻓﺮﺸ يرﺎـﻤﯿﺑ ﺎـﻫ ي

ﺪﺒﮐ ﻦﻣﺰﻣ ي

ا ﯾ ﺪﻨﮐ ﺎﻔ . ور ي ﺎﺘﻧ ،ﻪﺘﻓر ﻢﻫ ﯾ

ا ﺞ ـﯾ نﺎﺸـﻧ ﻪـﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦ

ﯽﻣ ﺪﻫد ﺌﺗوﺮﭘ ﻪﮐ ﯿ ﻦ و core ﯾ سوﺮ ﯽﻣHCV ﺪﻧاﻮﺗ ﻣ ﯿ ﺑ ناﺰ ـﯿ نﺎ

miR-150 ﺖﺤﺗ ار

ﺮﯿﺛﺄﺗ ﺪﺑ و هداد راﺮﻗ ﯾ

ا ،ترﻮﺻ ﻦ ﯾ

ﺌﺗوﺮﭘ ﻦ ﯿ ﻦ

رﺎﺘﺧﺎﺳ ي ﭘ ﺖـﻧﻮﻔﻋ رد ﺖـﺳا ﻦـﮑﻤﻣ ﯿ

ﭽ ـﯿ ـﺷﺎﻧ هﺪ ﯽ و زا ـﯾ سوﺮ

ﺮﯿﺛﺄﺗHCV هدﻮﺑ راﺬﮔ ا ﻪﮐ

ﯾ ﻦ ﯽﻣ ﺪـﻧاﻮﺗ ﺑ ـﯿ ﺪﺟ ﺶﻨ ـﯾ ﺪ ي رد ار

ﺑ ﺰﻧژﻮﺗﺎﭘ كرد ﺖﻬﺟ ﯿ

رﺎﻤ ي ﮋﺗاﺮﺘﺳا و ي ﺎﻫ ي ﻧﺎـﻣرد ﯽ نﺎـﻐﻣرا ﻪـﺑ

ﺑﯿ دروﺎ .

ﯽﻧادرﺪﻗ و ﺮﮑﺸﺗ

ﺪﺑ ﯾ ﺳو ﻦ ﯿ ﻮﻧ ﻪﻠ ﯾ ﻧادرﺪﻗ و ﺮﮑﺸﺗ ﺐﺗاﺮﻣ نﺎﮔﺪﻨﺴ ﯽ

زا ار دﻮﺧ

ﻘﺤﺗ ﺖﻧوﺎﻌﻣ ﯿ

روﺎـﻨﻓ و تﺎﻘ ي

ﮑـﺷﺰﭘ مﻮـﻠﻋ هﺎﮕﺸـﻧاد ﯽ

و نﺎﺘـﺳﺮﻟ

ﻨﭽﻤﻫ ﯿ ﻠﮐ ﻦ ﯿ ﻘﺤﺗ ﺰـﮐﺮﻣ رد لﺎﻌﻓ و ﻞﻏﺎﺷ ﻞﻨﺳﺮﭘ و داﺮﻓا ﻪ ﯿ

تﺎـﻘ

ﺗﺎﭙﻫ ﯿ ﮑﺷﺰﭘ مﻮﻠﻋ هﺎﮕﺸﻧاد ﺖ ﯽ

ا رد ار ﺎـﻣ ﻪﮐ نﺎﺘﺳﺮﻟ ـﯾ

ﻪـﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦ

ﯾ رﺎ ي ﻞﻤﻋ ﻪﺑ ﺪﻧدﻮﻤﻧ ﯽﻣ

ﺪﻧروآ .

(7)

نارﺎﮑﻤﻫ



References

1. Hugo R, Chronic Hepatitis C Infection. N Engl J Med 2011; 364:2429-38.

2. Averhoff FM, Glass N, Holtzman D. Global Burden of Hepatitis C: Considerations for Healthcare Providers in the United States.

Clinical Infectious Diseases. 2012; 55(suppl 1): S10-S15.

3. Vio N, Lai MM, J Biosci. The hepatitis C virus persistence: how to evade the immune system? 2003; 28(3):287-304.

4. Wu C, Gilroy R, Taylor R, Olyaee M, Abdulkarim B, Forster J et al. Alteration of Hepatic Nuclear Receptor-mediated Signaling Pathways in HCV Patients with and without a History of Alcohol Drinking.

Hepatology. 2011; 54(6):1966-1974.

5. Gupta P, Cairns MJ, Saksena NK. Regulation of gene expression by microRNA in HCV infection and HCV–mediated hepatocellular carcinoma. Virology Journal. 2014; 11(1):

1-14.

6. Shrivastava S, Mukherjee A, Ray RB.

Hepatitis C virus infection, microRNA and liver disease progression. World Journal of Hepatology. 2013; 5(9): 479-486.

7. Punga AR, Andersson M, Alimohammadi M, Punga T. Disease specific signature of circulating miR-150-5p and miR-21-5p in myasthenia gravis patients. Journal of the Neurological Sciences. 2015; 356(1–2): 90- 96.

8. Chen W, Han C, Zhang J, Song K, Wang Y, Wu T. miR-150 Deficiency Protects against FAS-Induced Acute Liver Injury in Mice through Regulation of AKT. PLoS One.

2015;21:10(7):e0132734.

9. Pawlotsky JM, Pathophysiology of hepatitis C virus infection and related liver disease.

Trends Microbiol 2004; 12(2): 96–102.

10. Kitada T, Seki S, Nakatani K, Kawada N, Kuroki T, Monna T. Hepatic expression of c-Myb in chronic human liver disease.

Hepatology. 1997;26(6):1506-12.

11. Tappero G, Farina M, Negro F, Anfossi G, Mattiello L, Giuli PD et al. Intrahepatic expression of c-fos, c-myb and c-myc oncogenes: correlation with virus-induced chronic liver disease and response to interferon. Ital J Gastroenterol Hepatol.

1997;29(2):148-54

12. Yang H, Huang ZZ, Wang J, Lu S. The role of c-Myb and Sp1 in the up-regulation of methionine adenosyltransferase 2A gene expression in human hepatocellular carcinoma. FASEB J. 2001; 15(9):1507-16.

13. Wu CF, Lin YL, Huang YT. Hepatitis C Virus Core Protein Stimulates Fibrogenesis in Hepatic Stellate Cells Involving the Obese Receptor. Journal of Cellular Biochemistry. 2013;114:541–550..

14. Chena RF, Yanga KD, Lee IK, Liu JW, Huang CH, Lin CY et al. Augmented miR- 150 expression associated with depressed SOCS1 expression involved in dengue haemorrhagic feve. J Infect. 2014; 69(4):

366–374.

15. Moran J, Ramirez-Martinez G, Jimenez- Alvarez L, Cruz A, Perez-Patrigeon S, Hidalgo A et al. Circulating levels of miR- 150 are associated with poorer outcomes of

(8)

A/H1N1 infection. Exp Mol Pathol. 2015;

99(2):253-61.

16. Li S, Xing X, Yang Q, Xu H, He J, Chen Z, et al. The effects of hepatitis C virus core protein on the expression of miR-122 in vitro. Virology Journal. 2013; 10(1): 1-7.

17. Yu F, Lu Z, Chen B, Dong P, Zheng J.

microRNA-150: a promising novel biomarker for hepatitis B virus-related hepatocellular carcinoma. Diagn Pathol.

2015; 28:10:129.

microRNA-150: a promising novel biomarker for hepatitis B virus-related hepatocellular carcinoma. Diagnostic Pathology. 2015; 10(1): 1-9.

microRNA-150: a promising novel biomarker for hepatitis B virus-related hepatocellular carcinoma. Diagnostic Pathology. 2015; 10:129.