The quantification of hepatitis C viral load using an In-House Real-Time PCR assay in HCV infected patients in Khorramabad city

(1)

* ﻪﺒﺗﺎﮑﻣ سردآ

،دﺎﺑآ مﺮﺧ : نﺎﺘﺳﺮﻟ ﯽﮑﺷﺰﭘ مﻮﻠﻋ هﺎﮕﺸﻧاد

، ﺖﯿﺗﺎﭙﻫ تﺎﻘﯿﻘﺤﺗ ﺰﮐﺮﻣ .

ﺖﺴﭘ ﮏﯿﻧوﺮﺘﮑﻟا : [email protected]

ﻦﯿﯿﻌﺗ ﻤﮐ ﯽ رﺎﺑ ﺳوﺮﯾو ﯽ ﺖﯿﺗﺎﭙﻫ ﺎﺑ C

هدﺎﻔﺘﺳا زا

شور Real-Time PCR In-House

رد نارﺎﻤﯿﺑ

هدﻮﻟآ ﻪﺑ ﺖﯿﺗﺎﭙﻫ رد C

نﺎﺘﺳﺮﻬﺷ مﺮﺧ

دﺎﺑآ

ﺎﻧﺎﯿﮐ ﻧﺎﻣز هﺎﺷ

1ﯽ ، نﺎﯾﺮﮕﺸﻟ ﻞﯿﻌﻤﺳا ﺪﻣﺎﺣ

*

ﯽﭘﺎﭘ ﯽﻠﻋ ﺪﯿﻣا ،2

يﺮﯿﺨﻣ ﺪﯿﻤﺣ ،3 4

-1 ،نﺎﺘﺳﺮﻟ هﺎﮕﺸﻧاد ،ﻪﯾﺎﭘ مﻮﻠﻋ هﺪﮑﺸﻧاد ،ﯽﺳﺎﻨﺷ ﺖﺴﯾز هوﺮﮔ ،رﺎﯾدﺎﺘﺳا ناﺮﯾا ،دﺎﺑآ مﺮﺧ

.

-2 ناﺮﯾا ،دﺎﺑآ مﺮﺧ ،نﺎﺘﺳﺮﻟ ﯽﮑﺷﺰﭘ مﻮﻠﻋ هﺎﮕﺸﻧاد ،ﺖﯿﺗﺎﭙﻫ تﺎﻘﯿﻘﺤﺗ ﺰﮐﺮﻣ ،ﮏﯿﺘﻧژ هوﺮﮔ ،رﺎﯾدﺎﺘﺳا .

3 - ناﺮﯾا ،دﺎﺑآ مﺮﺧ ،نﺎﺘﺳﺮﻟ ﯽﮑﺷﺰﭘ مﻮﻠﻋ هﺎﮕﺸﻧاد ،ﯽﺘﺷاﺪﻬﺑ ﺖﻧوﺎﻌﻣ ،يژﻮﻟﻮﯿﻣﺪﯿﭘا ﺪﺷرا سﺎﻨﺷرﺎﮐ .

-4 يرﺎﻤﯿﺑ ﺎﺑ هزرﺎﺒﻣ سﺎﻨﺷرﺎﮐ مﻮﻠﻋ هﺎﮕﺸﻧاد ،ﯽﺘﺷاﺪﻬﺑ ﺖﻧوﺎﻌﻣ ،ﺎﻫ

ناﺮﯾا ،دﺎﺑآ مﺮﺧ ،نﺎﺘﺳﺮﻟ ﯽﮑﺷﺰﭘ .

ﻪﺘﻓﺎﯾ / هرود ﺠﻫ ﻢﻫﺪ / هرﺎﻤﺷ 1

/ رﺎﻬﺑ 95 / ﻞﺴﻠﺴﻣ 67

ﻪﻟﺎﻘﻣ ﺖﻓﺎﯾرد :

13 /11 / 94 ﻪﻟﺎﻘﻣ شﺮﯾﺬﭘ

: 25 / 12 / 94

ﻪﻣﺪﻘﻣ :

شور يﺎﻫ ﺨﺸﺗ ﯿ ﺼ ﯽ ﻟﻮﮑﻟﻮﻣ ﯽ راﺰﺑا هﺪﻤﻋ يا ﺪﻣ رد ﯾﺮ ﯾ ﺑ ﺖ ﯿ و ﻪﺑ ﻼﺘﺒﻣ نارﺎﻤ ﯾ

ﺗﺎﭙﻫ سوﺮ ﯿ ﺖ )C (HCV ﺪﻨﺘﺴﻫ . ـﻌﻟﺎﻄﻣ نﺎﺸـﻧ تﺎ

هداد ﺪﻧا ﻪﮐ ﻂﺒﺗﺮﻣ نﺎﻣرد ﻪﺑ ﺦﺳﺎﭘ ناﺰﯿﻣ و ﺖﻧﻮﻔﻋ ﻪﻠﺣﺮﻣ ﺎﺑ ﯽﺳوﺮﯾو رﺎﺑ ﯽﻣ

و ﺪﺷﺎﺑ دراد ﯽﯾاﺰﺴـﺑ ﺖـﯿﻤﻫا ﯽـﺳوﺮﯾو رﺎـﺑ ﻦﯿﯿﻌﺗ و ﯽﺑﺎﯾزرا اﺬﻟ .

ﺖﻬﺟ ﺖﻤﯿﻗ نازرا لﺎﺣ ﻦﯿﻋ رد و ﻖﯿﻗد شور يﺮﯿﮔرﺎﮑﺑ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﯾا زا فﺪﻫ نارﺎﻤﯿﺑ يﺎﻤﺳﻼﭘ رد ﯽﺳوﺮﯾو رﺎﺑ ﯽﻤﮐ ﺶﺠﻨﺳ

ﯽﻣ ﺪﺷﺎﺑ .

و داﻮﻣ شور ﺎﻫ :

،هﺪﺷ يزاﺪﻧا هار شور رﺎﺒﺘﻋا ﻦﯿﯿﻌﺗ و يزاﺪﻧا هار زا ﺲﭘ يﺎﻤﺳﻼﭘ يور ﺮﺑ ﯽﺳوﺮﯾو رﺎﺑ ﯽﻤﮐ ﺶﺠﻨﺳ

200 هدﻮـﻟآ رﺎـﻤﯿﺑ

ﻦﻣﺰﻣ مﺮﻓ ﻪﺑ ﺪﺷ مﺎﺠﻧاHCV

. دراﺪﻧﺎﺘـﺳا ﻞﻧﺎﭘ زا يﺮﯿﮔ هﺮﻬﺑ ﺎﺑ و ﯽﺟرﺎﺧ دراﺪﻧﺎﺘﺳا ﯽﻨﺤﻨﻣ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ سوﺮﯾو رﺎﺑ ﺖـﻓﺮﮔ ترﻮـﺻRNA

.

ﺎﺑ شور ﻦﯾا زا ﻞﺻﺎﺣ ﺞﯾﺎﺘﻧ ﺪﺷ ﻪﺴﯾﺎﻘﻣ سﻮﺗرآ يرﺎﺠﺗ ﺖﯿﮐ زا هﺪﻣآ ﺖﺳﺪﺑ ﺞﯾﺎﺘﻧ

.

ﻪﺘﻓﺎﯾ ﺎﻫ :

شور ﻦﯾا ﻦﯿﯿﻌﺗ هدوﺪﺤﻣ IU/ml

50 ﯽﻣ ﺪﺷﺎﺑ . هزاﺪﻧا ﯽﺳوﺮﯾو رﺎﺑ ﻦﯿﮕﻧﺎﯿﻣ ﯽﻤﺘﯾرﺎـﮕﻟ سﺎـﯿﻘﻣ رد هﺪﺷ يﺮﯿﮔ

) 22 /0 81 / 5 ( ،

) 05 /0 P<

( ﺪﻣآ ﺖﺳﺪﺑ .

ﻪﻧﻮﻤﻧ يزاﻮﻣ ﺰﯿﻟﺎﻧآ ﯽﮕﺘﺴـﺒﻤﻫ سﻮـﺗرآ يرﺎـﺠﺗ ﺖـﯿﮐ و شور ﻦﯾا زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ ﺎﻫ

داد نﺎﺸـﻧ شور ود ﻦﯿـﺑ ﯽﺑﻮـﺧ

) 05 /0

<

،P 988 /0

= R² .(

ﻪﺠﯿﺘﻧ و ﺚﺤﺑ يﺮﯿﮔ

:

ﯽﺳوﺮﯾو رﺎﺑ ﯽﻤﮐ ﻦﯿﯿﻌﺗ شراﺰـﮔ رﺎـﺑ ﻦﯿـﻟوا ياﺮﺑ دﺎﺑآ مﺮﺧ نﺎﺘﺳﺮﻬﺷ رد سوﺮﯾو ﻦﯾا ﻪﺑ هدﻮﻟآ داﺮﻓا ردHCV

ﺖﺳا هﺪﺷ ﯽﻤﮐ ﺶﺠﻨﺳ ياﺮﺑ ﯽﮔﮋﯾو و بﻮﺧ ﺖﯿﺳﺎﺴﺣ ياراد شور ﻦﯾا ،ﺞﯾﺎﺘﻧ ﻪﺑ ﻪﺟﻮﺗ.

HCV RNA ـﺳا گرﺰـﺑ سﺎﯿﻘﻣ رد

ﺖ . شور ﻦـﯾا

ﯽﻣ ﺪﻧاﻮﺗ ياﺮﺑ ﯽﺒﺳﺎﻨﻣ ﻦﯾﺰﮕﯾﺎﺟ ﺖﯿﮐ

يﺎﻫ يرﺎﺠﺗ ﻪﺑ هﮋﯾو ﺪﺷﺎﺑ نﺎﻣرد ﯽﻨﯿﻟﺎﺑ ﯽﺑﺎﯾزرا ياﺮﺑ .

هژاو يﺪﯿﻠﮐ يﺎﻫ

: ﻤﮐ ﻦﯿﯿﻌﺗ ﯽ ، سوﺮﯾو ،ﯽﺳوﺮﯾو رﺎﺑ ﺖﯿﺗﺎﭙﻫ

،C شور ﺶﻨﮐاو هﺮﯿﺠﻧز يا ﯽﻌﻗاو نﺎﻣز رد زاﺮﻤﯿﻠﭘ .

هﺪﯿﮑﭼ

(2)

ﻪﻣﺪﻘﻣ

ﺖﯿﺗﺎﭙﻫ زا ﯽﮑﯾC

ﻢـﻬﻣ ﻦﯾﺮـﺗ ﺖـﯿﺗﺎﭙﻫ دﺎـﺠﯾا ﻞـﻣاﻮﻋ

رد ﻦﻣﺰﻣ ﺖﺳا ﻪﺘﻓﺎﯾ ﻪﻌﺳﻮﺗ يﺎﻫرﻮﺸﮐ

. نﺎﻣزﺎـﺳ رﺎـﻣآ ﻖـﺒﻃ

ﯽﻧﺎﻬﺟ ﺖﺷاﺪﻬﺑ (WHO)

ﯿﺑ ﻦ -210 130 نﻮـﯿﻠﯿﻣ رد ﺮـﻔﻧ

ﺖﯿﺗﺎﭙﻫ ﻪﺑ ﻼﺘﺒﻣ ﺎﯿﻧد ﺪﻨﺘﺴـﻫC

. ﻪﻧﻻﺎـﺳ 350000 ﻪـﺑ ﺮـﻔﻧ

ﺎﯿﻧد زا يرﺎﻤﯿﺑ ﻦﯾا ﻪﺑ ﻼﺘﺑا ﻞﯿﻟد ﯽﻣ

ﺪـﻧور . رد نﺎـﯾﻼﺘﺒﻣ ﻦـﯾا

هﺪﻫﺎﺸــﻣ ﺎــﯿﻧد ﻒــﻠﺘﺨﻣ طﺎــﻘﻧ زا يرﺎﯿﺴــﺑ و ﺎــﮑﯾﺮﻣآ ،ﺎــﭘورا ﯽﻣ ﺪﻧﻮﺷ ) 1،

2 .(

ﺖﯿﺗﺎﭙﻫ سوﺮﯾو C

(HCV) ﯽـﺳﺎﭙﻫ ﺲﻨﺟ زا يﻮﻀﻋ

ﺖـﺳا هﺪﯾﺮﯾو يوﻼﻓ هداﻮﻧﺎﺧ ﻪﺑ ﻖﻠﻌﺘﻣ و سوﺮﯾو .

ﻦـﯾا مﻮـﻧژ

ﻪﺑ سوﺮﯾو ترﻮﺻ

ﻪﺘـﺷر ﮏـﺗRNA ﺖـﺒﺜﻣ ﻪـﺘﯾرﻼﭘ ﺎـﺑ يا

ﺖﺳا . ﺖﺧﺎﻨـﺷ ﻪﺑ ﺮﺠﻨﻣ سوﺮﯾو مﻮﻧژ رد فﻼﺘﺧا 6

ﭗـﯿﺗﻮﻧژ

زا ﺶﯿــﺑ و ﯽﻠــﺻا 50

ﺖــﺳا هﺪــﺷ ﭗــﯿﺗ ﺖــﺤﺗ .

ﻖﻃﺎــﻨﻣ رد

ﻮﻧژ ﺎﯿﻧد ﯽﯾﺎﯿﻓاﺮﻐﺟ ﻒﻠﺘﺨﻣ ﭗﯿﺗ

هﺪـﺷ هﺪﻫﺎﺸـﻣ ﻒـﻠﺘﺨﻣ يﺎﻫ

ﺖﺳا ) 2 .(

ا رد ناﺮﯾ ﭗﯿﺗﻮﻧژ 1 و 3 ﭗـﯿﺗﻮﻧژ و ﺖﺳا ﻊﯾﺎﺷ ، 2

و

4 ﺰﯿﻧ ﻪﺑ ترﺪﻧ ﯽﻣ هﺪﻫﺎﺸﻣ ﻼﺘﺒﻣ داﺮﻓا رد دﻮﺷ

. رﺎـﻣآ سﺎﺳا ﺮﺑ

هﺪﺷ ﻪﺋارا زا ﺮﺘﻤﮐ ناﺮﯾا رد يرﺎﻤﯿﺑ ﻦﯾا عﻮﯿﺷ

1 % ﯽـﻣ ﺪـﺷﺎﺑ

) 4 .(

هدﺎﻔﺘـﺳا ﺖـﻠﻋ ﻪﺑ ًاﺮﺜﮐا ﺎﻣ رﻮﺸﮐ رد ﺖﻧﻮﻔﻋ لﺎﻘﺘﻧا ﻞﻣﺎﻋ ﺨﻣ داﻮﻣ زا ﮓﻧﺮﺳ و ﯽﻘﯾرﺰﺗ نادﺎﺘﻌﻣ ﻦﯿﺑ رد ﯽﻘﯾرﺰﺗ رﺪ

يﺎـﻫ

هﺪﺷ شراﺰﮔ كﺮﺘﺸﻣ ﺖﺳا

) 5 .(

لواﺪـﺘﻣ ﻦﯾﺮـﺗ ﺖﺴـﺗ ﺎـﻫ ﺮـﺑ

سﺎﺳا ﯽﺘﻧآ ﻦﯿﯿﻌﺗ ﻪـﯿﻠﻋ ﯽﻣﺮـﺳ يدﺎﺑ

ﯽـﺘﻧآ نژ يﺎـﻫ HCV

ﺖﺳا راﻮﺘﺳا ؛

ﻪﺘﮑﻧ ﺎﻣا ﺎﺑ ﻪﻄﺑار رد ﻪﮐ يا شور

يﺎﻫ ﮏﯾژﻮﻟوﺮﺳ

ﺖﺴﺗ ﻦﯾا ﻪﮐ ﺖﺳا نآ ،دراد دﻮﺟو ﺖﯿﺗﺎﭙﻫ ﻪﺑ ﻼﺘﺑا ﻂﻘﻓ ﺎﻫ

C

د نﺎﺸﻧ ار ﺖﻧﻮﻔﻋ ﻦﯿﺑ يﺰﯾﺎﻤﺗ هدا دﻮـﺒﻬﺑ ﺎﯾ و ﻦﻣﺰﻣ ،دﺎﺣ يﺎﻫ

ﻞﺋﺎﻗ ﯽﻤﻧ ﺪﻧﻮﺷ . زﺎـﻓ رد نارﺎـﻤﯿﺑ ﯽﺑﺎـﯾدر ﻪـﺑ ردﺎـﻗ ﻦﯿﻨﭽﻤﻫ

هﺮﺠﻨﭘ ) Window period (

ﯽﻤﻧ ﺪﻨﺷﺎﺑ ) 6،7 (.

رد ﻦﯾاﺮﺑﺎـﻨﺑ

زا ﺖـﺳا مزﻻ ﯽﻄﯾاﺮﺷ ﻦﯿﻨﭼ HCV RNA

ﯽﺑﺎـﯾزرا ياﺮـﺑ

دﻮـﺷ هدﺎﻔﺘـﺳا سوﺮـﯾو ﺮـﯿﺜﮑﺗ و ﺖﯿﻟﺎﻌﻓ ﻖﯿﻗد )

8 .(

Load

viral داﺪﻌﺗ ، ﻪـﮐ ﺖـﺳا نﻮـﺧ رد دﻮـﺟﻮﻣ ﯽﺳوﺮﯾوRNA

سوﺮــﯾو ﻦﺘﺧﺎــﺳ ياﺮــﺑ مزﻻ تﺎــﻋﻼﻃا يوﺎــﺣ ﺮﺘﺸــﯿﺑ يﺎــﻫ

ﯽﻣ ﺪﺷﺎﺑ . ﻞـﺣاﺮﻣ مﺎـﻤﺗ رد سوﺮﯾو لﺎﻌﻓ ﺮﯿﺜﮑﺗ ﻪﮐ ﯽﯾﺎﺠﻧآ زا

ﯽﻣ قﺎﻔﺗا يرﺎﻤﯿﺑ ﯽﻨﯿﻟﺎﺑ ﺶﺠﻨـﺳ و ﯽﯾﺎـﺳﺎﻨﺷ لﺎـﻤﺘﺣا ،ﺪﺘﻓا

دراد دﻮـﺟو ﺖـﻧﻮﻔﻋ ﻞـﺣاﺮﻣ مﺎـﻤﺗ رد سوﺮﯾو ﯽﻤﮐ )

9 .(

رد

ﻓﺮﮕﻧ راﺮـﻗ نﺎـﻣرد ﺖـﺤﺗ ﻪﮐ يداﺮﻓا ﻪـﺘ

سوﺮـﯾو ناﺰـﯿﻣ ،ﺪـﻧا

هدوﺪﺤﻣ رد ًﻻﻮﻤﻌﻣ ﻦﯿـﺑ يا

10⁷ 10² - ﯽـﭙﮐ HCV RNA

ﯽـﻠﯿﻣ ﺮﻫ رد رﺎـﻈﺘﻧا نﺎـﻣرد ترﻮـﺻ رد و ﺖـﺳا نﻮـﺧ ﺮـﺘﯿﻟ

ﯽﻣ دور ﻦﯿﯾﺎﭘ ﻪﮐ دور ﺮـﺗ ) 10 .(

رد ﯽـﭙﮐ داﺪـﻌﺗ ﺮـﺿﺎﺣ لﺎـﺣ

ﺖﯿﺗﺎﭙﻫ سوﺮﯾوRNA ﻪﺑC

ﯽـﺳرﺮﺑ ياﺮـﺑ ﯽﺼﺧﺎﺷ ناﻮﻨﻋ

ﻪﺑ ،هدﻮﻟآ نارﺎﻤﯿﺑ ﯽﻨﯿﻟﺎﺑ ﺖﯿﻌﺿو ﮔآ رد ﯽﺼﺧﺎﺷ ناﻮﻨﻋ

زا ﯽﻫﺎ

ﻪـﻌﻟﺎﻄﻣ و ﯽـﻌﯿﺒﻃ ﺮﯿﺳ ﻢﻬﻓ ياﺮﺑ ،يرﺎﻤﯿﺑ ﺖﻓﺮﺸﯿﭘ ﺖﯿﻌﺿو ﺖﻧﻮﻔﻋ ﺰﻧژﻮﺗﺎﭘ ﺰﯿﻧ وHCV

ﻪﺑ ناﻮﻨﻋ ﯽﺑﺎـﯾزرا ياﺮـﺑ ﯽﺼﺧﺎﺷ

ﺪﺿ يﺎﻫوراد ﺮﺛا ﺖـﺳا ﻪـﺘﻓﺮﮔ راﺮـﻗ لﺎﺒﻘﺘـﺳا درﻮـﻣHCV

) 11،12 (.

نﺎﺸﻧ تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ هداد

ﺪﻧا ﯽﯾﺎﻤـﺳﻼﭘ حﻮﻄـﺳ ﻦﯿـﺑ ﻪـﮐ HCV

ـﺒﺗرا يرﺎﻤﯿﺑ ﯽﮑﯿﻨﯿﻠﮐ ﺖﻓﺮﺸﯿﭘ و يرﺎﻤﯿﺑ ﻞﺣاﺮﻣ ،RNA طﺎ

دراد دﻮﺟو ﯽﻤﯿﻘﺘﺴﻣ .

ﺒﺳﺎﻨﻣ راﺰﺑا ،هوﻼﻌﺑ ﯽ

اﺮﺑ ي ﮓﻨﯾرﻮﺘﯿﻧﺎﻣ

ﻪــﺑ هدﻮــﻟآ نارﺎــﻤﯿﺑ رد ﯽــﺒﯿﮐﺮﺗ نﺎــﻣرد بﻮﺴــﺤﻣHCV

ﯽــﻣ دﻮــﺷ . ﺢﻄــﺳ ﺶﻫﺎــﮐ ،نﺎــﻣرد ندﻮــﺑ ﺮﺛﺆــﻣ ترﻮــﺻ رد

ﯽﯾﺎﻤــﺳﻼﭘ يرﺎــﻤﯿﺑ ﯽﻨﯿﻟﺎــﺑ ﺖﯿﻌــﺿو نﺪــﺷ ﺮــﺘﻬﺑ وRNA

ﺪﺷ ﺪﻫاﻮﺧ هﺪﻫﺎﺸﻣ .

هﺪـﻨﻨﮐ ﺲﮑﻌﻨـﻣ ﻦﯿـﻨﭽﻤﻫ ﺶﻫﺎﮐ ﻦﯾا

ﺎﭙﻫ رد سوﺮﯾو ﺮﯿﺜﮑﺗ ﺶﻫﺎﮐ ﺖﯿﺳﻮﺗ

ﺖﺳا ﺎﻫ . ﺮـﮕﯾد فﺮـﻃ زا

ﯽﻣ ﻢﻫاﺮﻓ ار ﯽﻄﯾاﺮﺷ ﻪـﮐ نﺎـﻣرد ﺖﺴﮑﺷ ﻖﯿﻗد ﺰﯿﻟﺎﻧآ ﺎﺗ ﺪﻨﮐ

مﺎـﺠﻧا ،ﺖﺳا ﯽﺳوﺮﯾو ﺪﺿ يﺎﻫوراد ﻪﺑ ﺖﻣوﺎﻘﻣ رﻮﻬﻇ زا ﯽﺷﺎﻧ دﻮﺷ ) 13 .(

شور يﺎﻫ ﻨﺘﺒﻣ ﯽ ﮏﯿﺌﻠﮐﻮﻧ ﺪﯿﺳا ﺮﯿﺜﮑﺗ ﺮﺑ )

(NAT ﻪـﺑ ردﺎـﻗ

ﺨﺸﺗ ﯿ و ﺺ ﯾ هﺮﺠﻨﭘ هرود لﻼﺧ رد سوﺮ ﯽﻣ

ﺪﻨﺷﺎﺑ . زا يرﺎﯿﺴﺑ

ﯿﻌﺗ ياﺮﺑ ﻦﯿﻘﻘﺤﻣ ﻪـﺑ ﻼﺘـﺒﻣ داﺮـﻓا رد ﯽـﺳوﺮﯾو رﺎﺑ ﯽﻤﮐ ﻦﯿ

شور زاHCV هدﺎﻔﺘـﺳاPCR

هدﻮـﻤﻧ ﺪـﻧا . شور ﺎـﺑ PCR

ﻪﺘﺴﻧاﻮﺗ نﻮﻨﮐﺎﺗ ﯽـﻤﮐ ﺮـﻈﻧ زا ﻢـﻫ و ﯽـﻔﯿﮐ ﺮـﻈﻧ زا ﻢـﻫ ﺪـﻧا

ﺪـﻨﻫد راﺮـﻗ ﺶﺠﻨﺳ و ﯽﺑﺎﯾزرا درﻮﻣ ار سوﺮﯾو )

14،15 (.

رد

شور يﺎﻫ زا ﻢﻋا ﯽﻤﮐPCR

راﺪـﻘﻣ ،ﯽﺘﺑﺎـﻗرﺮﯿﻏ ﺎـﯾ ﯽﺘﺑﺎـﻗر

ﺎﻬﻧ لﻮﺼﺤﻣ ﯽﯾ

وﺮﭘ نﺎﯾﺎﭘ رد هزاﺪـﻧا نﻮﯿﺳﺎﮑﯿﻔﯿﻠﭙﻣآ ﻪﺳ

يﺮـﯿﮔ

ﯽــﻣ دﻮــﺷ . شور ﻪــﺑ نﻮﯿــﺳﺎﮑﯿﻔﯿﻠﭙﻣآ ﻪــﮐ ﯽﯾﺎــﺠﻧآ زا PCR

ﯽﯾﺎــﻤﻧ ﺖــﯿﻫﺎﻣ )

Exponential (

رد ﯽﮑﭼﻮــﮐ ﺮــﯿﯿﻐﺗ ،دراد

(3)

ﻪـﻈﺣﻼﻣ ﻞـﺑﺎﻗ توﺎـﻔﺗ ،نﻮﯿﺳﺎﮑﯿﻔﯿﻠﭙﻣآ ﯽﯾآرﺎﮐ راﺪـﻘﻣ رد يا

ﯽــﻣ دﺎــﺠﯾا ﯽﯾﺎــﻬﻧ لﻮﺼــﺤﻣ ﺪــﻨﮐ

) 16 .(

،هوﻼــﻌﺑ ﻦــﯾا ﻪــﻧﻮﮔ

شور يﺎﻫ ﺎـﺑ هاﺮـﻤﻫ دﺎﻀﺘﻣ ﯽﺠﯾﺎﺘﻧ ﯽﻤﮐ توﺎـﻔﺗ

ﻞـﺑﺎﻗ يﺎـﻫ

ﻪﻈﺣﻼﻣ ﯽﻣ ﺪﯿﻟﻮﺗ يا ﺪﻨﻨﮐ

. ﯽﮑﯿﻣﺎـﻨﯾد هدوﺪـﺤﻣ لﺎـﺜﻣ ياﺮـﺑ

شور Cobas Amplicor دوﺪــﺣ رد

10 زا ﺮــﺘﻤﮐ ﺮــﺑاﺮﺑ

شور RT-PCR دوﺪــﺣ رد ﺎــﻣا ،ﺖــﺳا ﯽﺘﺑﺎــﻗر

100 ﺮــﺑاﺮﺑ

شور زا ﺮﺘﺸﯿﺑ b-DNA

ﯽﻣ ﺪﺷﺎﺑ ) 17 .(

ﻪﺑ رﻮﻈﻨﻣ زا بﺎﻨﺘﺟا

ﻦﯾا ﻪﻧﻮﮔ ،ﻞﺋﺎﺴﻣ شور يﺎﻫ ﯽﺘﺴـﯾﺎﺑ ﯽﻤﮐPCR

ﻪـﺑ ﻪـﻧﻮﮔ يا

زﺎـﻓ لﻼـﺧ رد ار لﻮﺼـﺤﻣ راﺪـﻘﻣ ﺪـﻨﻧاﻮﺘﺑ ﺎـﺗ ﺪﻧﻮﺷ ﯽﺣاﺮﻃ ﻮـﺗﻼﭘ ﻪـﻠﺣﺮﻣ ﻪـﺑ نآ نﺪﯿـﺳر زا ﻞـﺒﻗ و ﺶﻨـﮐاو ﯽﻤﺘﯾرﺎﮕﻟ ﺪﻨﻨﮐ ﻦﯿﯿﻌﺗ .

ًاﺮﯿﺧا شور Real-Time PCR ﻪـﺑ

ﺖـﯿﻘﻓﻮﻣ رﻮـﻃ يﺰـﯿﻣآ

هﺪـﺷ ﻪـﺘﻓﺮﮔ رﺎـﮑﺑ ﯽﻨﯿﻟﺎـﺑ يﺎﻫدﺮﺑرﺎﮐ و ﻪﯾﺎﭘ تﺎﻘﯿﻘﺤﺗ ياﺮﺑ ﺖــﺳا . شور Real-Time PCR هﺪــﺷ ﺮــﮐذ تﻼﮑﺸــﻣ

شور يﺎﻫ ـﻠﺒﻗ ﯽ نﻮﯿـﺳﺎﮑﯿﻔﯿﻠﭙﻣآ ﻪـﺳوﺮﭘ ﮓـﻨﯾرﻮﺘﯿﻧﺎﻣ ﺎـﺑ ار

ﯽﻌﻗاو نﺎﻣز ردPCR ﺖـﺳا هدﻮﻤﻧ فﺮﻃﺮﺑ

. ردﺎـﻗ شور ﻦـﯾا

رد و ﻪـﺧﺮﭼ ﺮﻫ رد ار نﻮﯿﺳﺎﮑﯿﻔﯿﻠﭙﻣآ ﻞﺣاﺮﻣ ﺖﻓﺮﺸﯿﭘ ﺖﺳا ﺪـﻨﻫد نﺎﺸـﻧ ﯽـﻌﻗاو نﺎـﻣز .

شور رد Real-Time PCR

لﻮﺼﺤﻣ ﺮﻫ ردPCR

ﺖـﺳا ﯽﺑﺎﯾدر ﻞﺑﺎﻗ ﻪﺧﺮﭼ .

نﺪـﺷ دازآ

ﺷ ﺪﯾﺮﺒﯿﻫ بوﺮﭘ زا ﺲﻧﺎﺳرﻮﻠﻓ رﻮﻧ لﻼـﺧ رد ﻪﺧﺮﭼ ﺮﻫ رد هﺪ

ﺶﻨﮐاو Real-Time PCR لﻮﺼـﺤﻣ راﺪـﻘﻣ ﺎـﺑ ﺐـﺳﺎﻨﺘﻣ

ﺖﺳاPCR . ﮏـﯿﺌﻠﮐﻮﻧ ﺪﯿﺳا ﻦﯾزﺎﻏآ ﺮﺒﻣﺎﻧ ﯽﭙﮐ داﺪﻌﺗ ﻪﭼﺮﻫ

ﻪـﻈﺣﻼﻣ ﻞﺑﺎﻗ ﺶﯾاﺰﻓا ،ﺪﺷﺎﺑ ﺮﺘﺸﯿﺑ فﺪﻫ ﺲﻧﺎـﺳرﻮﻠﻓ رﻮـﻧ رد

ﯽﻣ هﺪﻫﺎﺸﻣ ﺮﺗدوز دﻮـﺷ

. زا ﻞﮑﯿـﺳ ﺮـﻫ رد ﺶﻨـﮐاو ﯽـﺳرﺮﺑ

ﯽـﻣ ترﻮـﺻ هﺪـﺷ دازآ ﺲﻧﺎـﺳرﻮﻠﻓ ﺶﯾاﺰﻓا ﻖﯾﺮﻃ ،دﺮـﯿﮔ

رد

ﺶﻨـﮐاو ﯽﯾﺎـﻤﻧ زﺎـﻓ ﻞـﯾاوا رد لﻮﺼـﺤﻣ ﯽـﻤﮐ ﻦﯿﯿﻌﺗ ،ﻊﻗاو ﯽﻣ ترﻮﺻ دﺮﯿﮔ

. ا ﻪﺑ ـﯾ ﺗﺮﺗ ﻦ ـﯿ ﻪـﻧﻮﻤﻧ ﺐ يدﺎـﯾز رﺎﯿﺴـﺑ يﺎـﻫ

ﯽﻣ ﻪﺑ ﺪﻨﻧاﻮﺗ ﺪﻧدﺮﮔ ﺰﯿﻟﺎﻧآ نﺎﻣﺰﻤﻫ رﻮﻃ )

18 .(

شور ،هﺪﺷ ﺮﮐذ ﺐﻟﺎﻄﻣ ﻪﺑ ﻪﺟﻮﺗ ﺎﺑ Real-Time PCR

رد

شور ﺮﯾﺎﺳ ﺎﺑ ﻪﺴﯾﺎﻘﻣ ﺦـﺳﺎﭘ ﯽﺳرﺮﺑ ياﺮﺑ ﯽﺒﺳﺎﻨﻣ ﮏﯿﻨﮑﺗ ،ﺎﻫ

ﺮﯾو ﺪﺿ نﺎﻣرد ﻪﺑ ﯽـﻣ بﻮﺴﺤﻣ ﯽﺳو

دﻮـﺷ . ﻊﺑﺎـﻨﻣ ﻪﻧﺎﻔـﺳﺄﺘﻣ

ﺎـﺑ هاﺮـﻤﻫ ﯽـﺳوﺮﯾو ﺪـﺿ نﺎـﻣرد يﺮـﯿﮕﯿﭘ ﻦﯿﻣﺄﺗ ياﺮﺑ ﯽﻟﺎﻣ هزاﺪﻧا

زا و ﺎـﯿﻧد ﻖﻃﺎـﻨﻣ ﺮـﺜﮐا رد ﯽـﺳوﺮﯾو رﺎـﺑ ﻢﻈﻨـﻣ يﺮﯿﮔ ﯽﻣ سﺎﺴﺣا ًﻼﻣﺎﮐ نآ ناﺪﻘﻓ و دراﺪﻧ دﻮﺟو ناﺮﯾا ﻪﻠﻤﺟ دﻮـﺷ

.

ﮏــﯿﻨﮑﺗ زا ،ﻖــﯿﻘﺤﺗ ﻦــﯾا رد Real-Time RT-PCR

ﻪﺑ رﻮﻈﻨﻣ ﺎـﻤﯿﺑ ﯽـﺳوﺮﯾو رﺎـﺑ ﺶﺠﻨـﺳ ﻪـﺑ هدﻮـﻟآ نار

HCV

ﺮﯾﺎﺸـﻋ ياﺪﻬﺷ نﺎﺘﺳرﺎﻤﯿﺑ ﯽﻧﻮﻔﻋ هﺎﮕﻧﺎﻣرد ﻪﺑ هﺪﻨﻨﮐ ﻪﻌﺟاﺮﻣ ﺪﺷ هدﺎﻔﺘﺳا .

شور و داﻮﻣ ﺎﻫ

ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ درﻮﻣ ﻪﻌﻣﺎﺟ ﺮـﺿﺎﺣ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ عﻮـﻧ زا

Case series ﻪـﻌﻣﺎﺟ و هدﻮـﺑ

ﺖـﯿﺗﺎﭙﻫ ﻪـﺑ ﻼﺘﺒﻣ نارﺎﻤﯿﺑ ﻪﯿﻠﮐ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ درﻮﻣ نﺎﺘـﺳﺮﻬﺷC

ﺘـﺳرﺎﻤﯿﺑ ﯽﻧﻮـﻔﻋ هﺎـﮕﻧﺎﻣرد ﻪـﺑ هﺪـﻨﻨﮐ ﻪـﻌﺟاﺮﻣ دﺎﺑآ مﺮﺧ نﺎ

تﺪﻣ ﻪﺑ ﺮﯾﺎﺸﻋ ياﺪﻬﺷ 6

هﺎﻣ ﯽﻣ ﺪﺷﺎﺑ ﻪﮐ 200 ﻞﻣﺎـﺷ ار ﺮﻔﻧ

ﯽﻣ دﻮﺷ . رد قﻼـﺧا ﻪـﺘﯿﻤﮐ ﻂـﺳﻮﺗ ﻖـﯿﻘﺤﺗ مﺎـﺠﻧا ﯽﮕﻧﻮﮕﭼ

درﻮـﻣ نﺎﺘـﺳﺮﻟ ﯽﮑـﺷﺰﭘ مﻮـﻠﻋ هﺎﮕﺸﻧاد ﺶﻫوﮋﭘ ﺪـﯿﯾﺄﺗ

راﺮـﻗ

ﺖﻓﺮﮔ . ﺖـﯿﺗﺎﭙﻫ ﺖـﻧﻮﻔﻋ ﻪـﺑ ﻼﺘـﺒﻣ نارﺎﻤﯿﺑ ﻪﯿﻠﮐ ﺖﮐﺮـﺷC

نﺎﺘــﺳرﺎﻤﯿﺑ ﯽﻧﻮــﻔﻋ هﺎــﮕﻧﺎﻣرد رد ،ﺶﻫوﮋــﭘ ﻦــﯾا رد هﺪــﻨﻨﮐ ﯾﺎﺸـﻋ ياﺪﻬﺷ ﻪـﺘﻓﺎﯾ و ﯽﻨﯿﻟﺎـﺑ ﻢـﺋﻼﻋ هﺪـﺷ شﺮﯾﺬـﭘ ﺮ

يﺎـﻫ

ﯽﻫﺎﮕﺸﯾﺎﻣزآ نآ

ﺎﻫ راﺮﻗ ﯽﺳرﺮﺑ درﻮﻣ ﺺﺼﺨﺘﻣ ﮏﺷﺰﭘ ﻂﺳﻮﺗ

ﺖﻓﺮﮔ . زا ﺲﭘ ﺪﯿﯾﺄﺗ ندﻮـﺑ ﻦﻣﺰـﻣ ﺮﺑ ﯽﻨﺒﻣ ﺺﺼﺨﺘﻣ ﮏﺷﺰﭘ

ﺪـﺷ هداد صﺎﺼـﺘﺧا هﮋـﯾو ﺪـﮐ ﮏـﯾ رﺎـﻤﯿﺑ ﺮـﻫ ﻪـﺑ يرﺎﻤﯿﺑ .

ترﻮـﺻ رد و هدﻮـﻟآ دﺮـﻓ يروﺮـﺿ تﺎﻋﻼﻃا ﯽﻣﺎﻤﺗ ﻦﯿﻨﭽﻤﻫ ﻣﺎﻨﺸﺳﺮﭘ رد ﯽﻠﯿﻤﮑﺗ تﺎﻋﻼﻃا زﺎﯿﻧ ﻪ

رﻮـﻈﻨﻣ ﻦـﯾا ياﺮﺑ ﻪﮐ يا

ﺪـﯾدﺮﮔ ﻂﺒـﺿ و ﺖـﺒﺛ ،دﻮﺑ هﺪﺷ ﻢﯿﻈﻨﺗ .

ﺲـﭘ هزﺎـﺑ نﺎـﯾﺎﭘ زا

ﻪﻧﻮﻤﻧ ،ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ درﻮﻣ ﯽﻧﺎﻣز ﻪـﻘﺒﻃ ﯽﻓدﺎﺼـﺗ شور ﻪﺑ ﺎﻫ

يﺪـﻨﺑ

ﺖـﻬﺟ مزﻻ ﻪـﻧﻮﻤﻧ داﺪـﻌﺗ دﻮـﺟﻮﻣ يﺎﻫﺪـﮐ ﻦﯿﺑ زا و هﺪﯾدﺮﮔ ﺪﻧﺪﯾدﺮﮔ بﺎﺨﺘﻧا ﻖﯿﻘﺤﺗ مﺎﺠﻧا .

نﻮﯿﺳاﺰﯾﺪﯾﺮﺒﯿﻫ يﺎﻫ بوﺮﭘ و ﺮﻤﯾاﺮﭘ ﯽﺣاﺮﻃ :

ﻪﺑ رﻮﻈﻨﻣ ـﻧ ﯽﺳرﺮﺑ مﻮـﻧژ هﺪـﺷ ﺖـﻇﺎﻔﺣ ﯽﺣاﻮ ،HCV

ﭗـﯿﺗﻮﻧژ ﻞﻣﺎﮐ ﯽﻟاﻮﺗ ﻒـﻠﺘﺨﻣ يﺎـﻫ

زا ،ﯽـﻧژ ﮏـﻧﺎﺑ زاHCV

مﺮﻧ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ و ﺪﻣآ ﺖﺳﺪﺑ ،ﺖﻧﺮﺘﻨﯾا ﻖﯾﺮﻃ راﺰـﻓا

Mega

،4 مﻮﻧژ هوﺮﮔ يﺎﻫ ﻒﻠﺘﺨﻣ ﺪـﺷ ﻪﺴـﯾﺎﻘﻣ ﺮﮕﯾﺪـﮑﯾ ﺎـﺑHCV

.

راﺰـﻓا مﺮـﻧ زا هدﺎﻔﺘـﺳا ﺎـﺑ ﯽﺘﺸﮔﺮﺑ و ﯽﺘﻓر ﺮﻤﯾاﺮﭘ ﺖﻔﺟ اﺪﺘﺑا

(4)

Gene Runner ﺪﯾدﺮﮔ ﯽﺣاﺮﻃ

. ﺳ مﺮـﻧ ﮏﻤﮐ ﺎﺑ ﺲﭙ راﺰـﻓا

Blast ﻞـﺻﺎﺣ نﺎـﻨﯿﻤﻃا ﺎﻫﺮﻤﯾاﺮﭘ لﺎﺼﺗا ﻞﺤﻣ ندﻮﺑ ﺎﺘﮑﯾ زا

ﺪﺷ ) لوﺪﺟ 1 .(

لوﺪﺟ 1 . ﻪﯿﺣﺎﻧ ﯽﺻﺎﺼﺘﺧا يﺎﻫﺮﻤﯾاﺮﭘ ﯽﻟاﻮﺗ 5UTR

925706 HCV 5-UTR D10934 Tm P1

CCC TGT AGG AAC TAC TGT

CTT CA

S 43-69 65.4C

P2

GGG CAC TGC ACA GCA CCC

TAT

A 316-

296 64.5C

يور زا ،ﺮـﺒﺘﻌﻣ تﻻﺎـﻘﻣ ﻪـﺑ دﺎﻨﺘـﺳا ﺎﺑ ﺪﻌﺑ ﻪﻠﺣﺮﻣ رد ﯽﻟاﻮﺗ يﺎﻫ بوﺮـﭘ ﺖـﻔﺟ ﮏـﯾ ﯽﻧژ ﮏﻧﺎﺑ رد دﻮﺟﻮﻣHCV

ﺪﯾدﺮﮔ بﺎﺨﺘﻧا .

بوﺮـﭘ مﺮـﻧ رد رﻮـﺑﺰﻣ يﺎـﻫ راﺰـﻓا

Oligo زا

ظﺎﺤﻟ ياﻮـﺘﺤﻣ وTm

ﻦﯿـﺑGC -60 35 % ﯽـﺳرﺮﺑ درﻮـﻣ

ﺖﻓﺮﮔ راﺮﻗ .

ﺶﻨـﮐاو ياﺮﺑ يﺎـﻬﺘﻧا ،FRET

3 ﻻﺎـﺑ بوﺮـﭘ

ﻪﺑ ﺖﺳد هﺪﻨﻫد ناﻮﻨﻋ )

Donor ( يﺎﻬﺘﻧا و ﻦﯿﺌﺳرﻮﻠﻓ ﺎﺑ 5

ﻪــﺑ ﺖــﺳد ﻦﯿﯾﺎــﭘ بوﺮــﭘ هﺪــﻧﺮﯾﺬﭘ ناﻮــﻨﻋ

) Aceptor (

ﺎــﺑ

LightCycler Red 640 نﺎﺸﻧ

راد ﺪﺷ ) لوﺪﺟ 2 .(

لوﺪﺟ 2 . ﻪﯿﺣﺎﻧ ﯽﺻﺎﺼﺘﺧا يﺎﻫ بوﺮﭘ ﯽﻟاﻮﺗ 5UTR

بوﺮﭘ و ﺮﻤﯾاﺮﭘ ﺖﻔﺟ ﺖﺧﺎـﺳ ياﺮـﺑ هﺪﺷ ﯽﺣاﺮﻃ يﺎﻫ

ﺖﮐﺮﺷ ﻪﺑ Tib Mol Biol

ﺪﺷ هداد شرﺎﻔﺳ نﺎﻤﻟآ .

ﺲـﭘ

زا ،ﺰﺘﻨﺳ زا نآ

ﺎﻫ ﺖﻗر 20M و 50M رد هﺪـﺷ ﻪـﯿﻬﺗ

رﺰﯾﺮﻓ 20C - ﺪﺷ يراﺪﻬﮕﻧ .

ﻪﻧﻮﻤﻧ يزﺎﺳ هدﺎﻣآ دوﺪــﺣ رد اﺪــﺘﺑا 10

ﯽــﺳ ﻞــﻣﺎﮐ نﻮــﺧ ﯽــﺳ رد رﺎــﻤﯿﺑ

ﻪﻟﻮﻟ هدﺎﻣ يوﺎﺣ ﻞﯾﺮﺘﺳا يﺎﻫ دﺎﻘﻌﻧا ﺪﺿ

ﻪﺘﺨﯾرEDTA ﺪﺷ .

ﻪﻟﻮﻟ ،ﺎﻤﺳﻼﭘ يزﺎﺳاﺪﺟ ياﺮﺑ ﺲﭙﺳ رود رد ار ﺎﻫ

3000rpm

بﻮﯿﺗوﺮﮑﯿﻣ نورد ﻪﺑ ﻞﺻﺎﺣ يﺎﻤﺳﻼﭘ ،هدﺮﮐ ژﻮﻔﯾﺮﺘﻧﺎﺳ يﺎـﻫ

5/

1 ﯽﻠﯿﻣ ﺪﯾدﺮﮔ ﻞﻘﺘﻨﻣ ﻞﯾﺮﺘﺳا يﺮﺘﯿﻟ .

ﻪﺑ رﻮـﻈﻨﻣ ﯽﯾﺎـﺳﺎﻨﺷ

ﯿﺑ ﯽﺻﺎﺼـﺘﺧا ﺪـﮐ ،رﺎـﻤﯿﺑ ﺮـﻫ ﻪﺑ ﻖﻠﻌﺘﻣ يﺎﻤﺳﻼﭘ ﺪـﮐ ،رﺎـﻤ

ﺪـﺷ ﻪﺘـﺷﻮﻧ لﺎـﯾو ﺮﻫ يور ﺮﺑ ﻪﻃﻮﺑﺮﻣ رﺎﻤﯿﺑ مﺎﻧ و هﺎﮕﺸﯾﺎﻣزآ .

ﻪـﻧﻮﻤﻧ ﻪﯿﻠﮐ ﺲﭙﺳ رﺰـﯾﺮﻓ رد هدﺎﻔﺘـﺳا نﺎـﻣز ﺎـﺗ ﺎـﻫ

70C -

ﺪﻧﺪﺷ هﺮﯿﺧذ .

جاﺮﺨﺘﺳا ﯽﺳوﺮﯾوRNA

ﻪﯿﻬﺗ زا ﺲﭘ 200

ﻼﺘـﺒﻣ نارﺎﻤﯿﺑ نﻮﺧ زا ﺎﻤﺳﻼﭘ ﻪﻧﻮﻤﻧ

ﻪﺑ ياﺰﯾﻻا ﺶﯾﺎﻣزآ ﻪﮐHCV

نآ ﺎﻫ ﺶﯾﺎـﻣزآ و هدﻮـﺑ ﺖـﺒﺜﻣ

يﺪﯿﯾﺄﺗ ﻼﺑ نﺮﺘﺳو ت

نآ ﺎﻫ ،دﻮﺑ ﺖﺒﺜﻣ ﺰﯿﻧ 140

زا ﺮﺘﯿﻟوﺮﮑﯿﻣ

جاﺮﺨﺘـﺳا ياﺮـﺑ ﻞﺻﺎﺣ يﺎﻤﺳﻼﭘ هدﺎﻔﺘـﺳا سوﺮـﯾوRNA

ﺪﺷ . جاﺮﺨﺘﺳا جاﺮﺨﺘـﺳا ﺖـﯿﮐ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ سوﺮﯾوRNA

QIAamp Viral RNA Mini )

ﺖﮐﺮـﺷ Qiagen

(

ﺖﻓﺮﮔ مﺎﺠﻧا .

ﺰﺘﻨﺳ cDNA ﻪــﻠﺣﺮﻣ ﻦــﯾا رد مﺎــﺠﻧا ياﺮــﺑ هﺪــﺷ جاﺮﺨﺘــﺳاRNA

سﻮــﮑﻌﻣ يرادﺮــﺑ ﻪﺨﺴــﻧ ﺶﯾﺎـﻣزآ ﺰﺘﻨــﺳ و

درﻮــﻣcDNA

ﺖﻓﺮﮔ راﺮﻗ هدﺎﻔﺘﺳا .

ﺖـﯿﮐ زا رﻮـﻈﻨﻣ ﻦـﯾا ياﺮـﺑ (Roche)

Expand RT ﺪﺷ هدﺎﻔﺘﺳا

. ،ﺖـﯿﮐ ﻞﻤﻌﻟارﻮﺘـﺳد ﻖـﺒﻃ ﺮﺑ

راﺪﻘﻣ 5/

9 زا ﺮﺘﯿﻟوﺮﮑﯿﻣ ﻪـﻟﻮﻟ ﮏـﯾ ﻪﺑ هﺪﺷ جاﺮﺨﺘﺳاRNA

ﺮﻠﮑﯾﺎﺳﻮﻣﺮﺗ هﺎﮕﺘﺳد ﻪﺑ رﻮﺑﺰﻣ ﻪﻟﻮﻟ ﺲﭙﺳ هﺪﺷ ﻪﻓﺎﺿا )

ABI,

Thermal Cycler Gradient (

تﺪــﻣ ﻪــﺑ و ﻞــﻘﺘﻨﻣ 5

د يﺎـﻣد رد ﻪﻘﯿﻗ C

75˚ ﺪـﺷ هداد راﺮـﻗ .

ﺪـﻌﺑ ﻪـﻠﺣﺮﻣ رد 4

ﻢﯾﺰــﻧآ ﺮﻓﺎــﺑ ﺮــﺘﯿﻟوﺮﮑﯿﻣ ،RT

2 لﻮــﺘﯾﺮﺗﻮﯿﺗ يد ﺮــﺘﯿﻟوﺮﮑﯿﻣ

) ( ،DTT 2 طﻮــﻠﺨﻣ زا ﺮــﺘﯿﻟوﺮﮑﯿﻣ 2/

0 ﯽﺴــﮐوزد رﻻﻮــﻣ

ﺪﯿﺗﻮﺌﻠﮐﻮﻧﻮﺒﯾر )

(dNTP ، 1 ﯽﺻﺎﺼـﺘﺧا ﺮﻤﯾاﺮﭘ زا ﺮﺘﯿﻟوﺮﮑﯿﻣ

ﺲﻨﺳ ﯽﺘﻧآ )

ﺖﻈﻠﻏ ﺎﺑ 50 لﻮﻣﻮﮑﯿﭘ ( ، 20 ﻢﯾﺰـﻧآ ﺪﺣاو وRT

20 ﺰﻧآ ﺪﺣاو ﻢﯾ RNasin يوﺎﺣ ﻪﻟﻮﻟ ﻪﺑ

هدﺮﮐ ﻪﻓﺎﺿاRNA

) ﯽﯾﺎﻬﻧ ﻢﺠﺣ 20

ﺮـﺘﯿﻟوﺮﮑﯿﻣ (

هﺎﮕﺘـﺳد ﻪـﺑ ًادﺪـﺠﻣ ﺲﭙـﺳ و

ﺪﺷ ﻞﻘﺘﻨﻣ ﺮﻠﮑﯾﺎﺳﻮﻣﺮﺗ .

تﺪـﻣ ﻪﺑ قﻮﻓ طﻮﻠﺨﻣ ﻪﻠﺣﺮﻣ ﻦﯾا رد

يﺎـﻣد رد ﺖﻋﺎﺳ ﮏﯾ C

42˚ تﺪـﻣ ﻪـﺑ ﺲﭙـﺳ 5

رد ﻪـﻘﯿﻗد

يﺎﻣد C 95˚ ﺪﺷ هداد راﺮﻗ .

ﻪـﻠﺣﺮﻣ ﺎـﺗ هﺪـﺷ ﺰﺘﻨﺳcDNA

رﺰﯾﺮﻓ رد ﺪﻌﺑ C

20˚ ﺪﺷ يراﺪﻬﮕﻧ - )

19 .(

925706 HCV 5-URT Hyb

probes D10934 Tm

FL GCA CGC TCC

AGG ACC CCC X S 107-

125 67.5C LC

LC640-CCG CGG ACACGCA TAG

TGG TC P

S 128-

150 66.9C

(5)

يزﺎﺳ ﻪﻨﯿﻬﺑ ﺶﯾﺎـﻣزآ

Real-Time PCR In-

house ﻪــﺑ رﻮــﻈﻨﻣ ﺎــﺑ ﺰﯿﻟﺎــﻧآ رد ﺞﯾﺎــﺘﻧ ﻦﯾﺮــﺘﻬﺑ ﻪــﺑ ﯽﺑﺎﯿﺘــﺳد

بوﺮـﭘ ﻪـﻨﯿﻬﺑ ،نﻮﯿــﺳاﺰﯾﺪﯾﺮﺒﯿﻫ يﺎـﻫ ﻂﯾاﺮــﺷ و داﻮـﻣ يزﺎــﺳ

ﯽﻣ ﺮﻈﻧ ﻪﺑ يروﺮﺿ ﺶﯾﺎﻣزآ ﺪﺳر

. زا ،فﺪـﻫ ﻦـﯾا ﻪﺑ ﻞﯿﻧ ياﺮﺑ

ﻪﻧﻮﻤﻧ لﺮﺘﻨﮐ يﺎﻫ )

ﯽﻔﻨﻣ و ﺖﺒﺜﻣ (

رد ﺺﺨﺸﻣ ﯽﺳوﺮﯾو رﺎﺑ ﺎﺑ

ﺘﺳا نار ﺮﻫ ﺪﺷ هدﺎﻔ

. ﺐﺳﺎﻨﻣ هوﻼﻌﺑ ﺖﻈﻠﻏ ﻦﯾﺮﺗ

MgCl₂ رد

ﺪـﯾدﺮﮔ بﺎـﺨﺘﻧا ﺪﯾﺪﺟ يﻮﮕﻟا ﺮﯿﺜﮑﺗ .

،فﺪـﻫ يﻮـﮕﻟا ﺖـﻈﻠﻏ

بوﺮﭘ و ﺎﻫﺮﻤﯾاﺮﭘ ﻪﻨﯿﻬﺑ نﻮﯿﺳاﺰﯾﺪﯾﺮﺒﯿﻫ يﺎﻫ

ﺪﺷ يزﺎﺳ .

دراﺪﻧﺎﺘﺳا ﯽﻨﺤﻨﻣ ﻢﺳر ﮏـﯿﺌﻠﮐﻮﻧ ﺪﯿـﺳا راﺪـﻘﻣ ،ﯽـﻤﮐ شور رد ﻪﮐ ﯽﯾﺎﺠﻧآ زا ﮏـﯾ ﺎـﺑ ﻪﺴـﯾﺎﻘﻣ رد لﻮـﻬﺠﻣ ﻪـﻧﻮﻤﻧ ﮏـﯾ رد دﻮـﺟﻮﻣ فﺪﻫ

ﻧﺎﺘﺳا ﯽﻨﺤﻨﻣ ﯽﻣ ﻦﯿﯿﻌﺗ دراﺪ

دﻮﺷ . ﺪـﯾﺎﺑ دراﺪﻧﺎﺘﺳا ﯽﻨﺤﻨﻣ ﻦﯾا

ﺪﺟاو ﺖﻈﻠﻏ يﺎﻫ فﺪـﻫ ﮏـﯿﺌﻠﮐﻮﻧ ﺪﯿـﺳا نﺎـﻤﻫ زا ﺺﺨﺸﻣ

ﯽﻣ ﺪﺷﺎﺑ . ﻪﻧﻮﻤﻧ رﺎﻬﭼ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﯾا رد ﺎـﺑ دراﺪﻧﺎﺘـﺳا

ﺖـﻗر يﺎـﻫ

رد و هﺪﺷ ﻪﯿﻬﺗ لﺎﯾﺮﺳ بﻮﯿﺗوﺮﮑﯿﻣ

يﺎﻫ ﻪﺘﺨﯾر اﺰﺠﻣ ﺎـﻣا ،ﺪﺷ

ﻪﻧﻮﻤﻧ هاﺮﻤﻫ ﻪﺑ نار ﮏﯾ رد راﺮـﻗ ﺶﯾﺎـﻣزآ درﻮﻣ لﻮﻬﺠﻣ يﺎﻫ

ﺖﻓﺮﮔ )ا ﯽﺟرﺎﺧ دراﺪﻧﺎﺘﺳ .(

ﺐﯿـﺷ ،ﺶﯾﺎـﻣزآ مﺎـﺠﻧا ﻦﯿﺣ رد

ﯽــﻄﺧ نﻮﯿــﺳﺮﮔر ﯽــﻨﺤﻨﻣ )

Crossing point ﺮــﺑاﺮﺑ رد

ﯽﻤﺘﯾرﺎﮕﻟ ﺖﻈﻠﻏ (

ﯽـﻣ ﻪﺒﺳﺎﺤﻣ دﻮـﺷ

. زا هدﺎﻔﺘـﺳا ﺎـﺑ ﺲﭙـﺳ

ﯽﯾارﺎﮐ ﻪﺑ ﺐﯿﺷ شزرا ﺮﯾز لﻮﻣﺮﻓ )

(E ﯽﻣ ﻞﯾﺪﺒﺗ ددﺮﮔ

:

1 ]–

slope /1

10-

= [ E

هدﺎﻣآ ﻊﺟﺮﻣ يﺎﻫدراﺪﻧﺎﺘﺳا يزﺎﺳ HCV

ﻪﺑ رﻮﻈﻨﻣ ﻪﯿﻬﺗ ﻪﻧﻮﻤﻧ ﻫﺎ ي ﯽـﻨﺤﻨﻣ ﻢـﺳر ياﺮﺑ دراﺪﻧﺎﺘﺳا

ﻊــﺟﺮﻣ يﺎــﻫدﺎﻣآ ،ﯽﺟرﺎــﺧ HCV RNA

ﻖــﺒﻃ ﺮــﺑ ﻪــﮐ

دراﺪﻧﺎﺘــﺳا هرﺎﻤــﺷWHO

970 / 96 زا ،دﻮــﺑ هﺪــﺷ هﺮﺒﯿﻟﺎــﮐ

لﺮـــﺘﻨﮐ و ﮏـــﯾژﻮﻟﻮﯿﺑ يﺎﻫدراﺪﻧﺎﺘـــﺳا ﯽـــﻠﻣ يﻮﺘﯿﺘﺴـــﻧا ) NIBSC (

ﺪـﺷ يراﺪﯾﺮﺧ نﺎﺘﺴﻠﮕﻧا رد .

ﺎـﺑ ﻖﺑﺎـﻄﻣ ﺲﭙـﺳ

ﻞﻤﻌﻟارﻮﺘﺳد NIBSC

لﺎﯾو ﺮﻫ ﻪﺑ ، 5/

0 ﯽﻠﯿﻣ رﺎﺑ ود بآ ﺮﺘﯿﻟ

ﻘﺗ ﺪــﺷ ﻪﻓﺎــﺿا ﺮــﯿﻄ .

ﺖــﻗر ﺪــﺟاو ﻞــﺻﺎﺣ لﻮــﻠﺤﻣ IU/ml

25000 ﭗﯿﺗﻮﻧژ زا 1a

ﯽﻣHCV ﺪﺷﺎﺑ . لدﺎـﻌﻣ ﺖـﻈﻠﻏ ﻦﯾا

10⁵ ﯽﭙﮐ ﯽﻠﯿﻣ ﺮﻫ ردRNA

ﯽﻣ ﺮﺘﯿﻟ ﺪﺷﺎﺑ . ﺎﻫدراﺪﻧﺎﺘـﺳا ﻦﯾا ندﻮﻤﻧ هﺮﺒﯿﻟﺎﮐ ياﺮﺑ

شور يﺎـﻫ In–house Real-time

رﺎﮑﺑPCR ﯽﻣ دور .

ﺺﯿﺨﺸـﺗ رد شور ﻦـﯾا ﯽﯾﺎﻧاﻮﺗ تﺎﺒﺛا ياﺮﺑ 6

ﭗـﯿﺗﻮﻧژ

ﯽﻠــﺻا ﭗــﯿﺗﻮﻧژ ﻞــﻧﺎﭘ ﮏــﯾ ،نﺎﺴــﮑﯾ ﺖﯿﺳﺎﺴــﺣ ﺎــﺑHCV

ﺮـﺑ ﻞﻤﺘﺸـﻣ 6

ﯽﻠـﺻا ﭗـﯿﺗﻮﻧژ HCV RNA

زا NIBSC

ﺪــﯾدﺮﮔ يراﺪــﯾﺮﺧ .

يوﺎــﺣ ﻞــﻧﺎﭘ ﻦــﯾا لﺎــﯾو ﺮــﻫ 5/

-0 3/

0

ﯽﻠﯿﻣ ﯽﯾﺎـﻬﻧ ﺖـﻈﻠﻏ ﺎﺑ مﺮﺳ ﺮﺘﯿﻟ IU/ml 1000

ﯽـﻣ ﺪـﺷﺎﺑ .

ﻞﻤﻌﻟارﻮﺘـﺳد ﺎـﺑ ﻖﺑﺎﻄﻣ ﻞﻧﺎﭘ ﻦﯾا زا هدﺎﻔﺘﺳا ياﺮﺑ NIBSC

،

جاﺮﺨﺘﺳا HCV RNA ـﭘ و ﻪـﺘﻓﺮﮔ ترﻮـﺻ مﺮـﺳ زا

زا ﺲ

ﻪﺑ نآ ﻞﯾﺪﺒﺗ هدﺮـﺑ رﺎـﮑﺑ شور ندﻮﻤﻧ ﺮﺒﺘﻌﻣ ياﺮﺑ ،cDNA

ﻪــﺑ ﺪــﺷ رﻮــﻈﻨﻣ ﻪــﯿﻠﮐ هﺪــﺷ يزاﺪــﻧا هار شور ﯽﺠﻨــﺳرﺎﺒﺘﻋا

و رﺎﺒﺘﻋا ﻦﯿﯿﻌﺗ رد ﻞﯿﺧد يﺎﻫﺮﺘﻣارﺎﭘ ﺪﯿﯾﺄﺗ

ﻢـﻋا ﯽـﻤﮐ شور

يﺮﯾﺬـﭘراﺮﮑﺗ و ﺖـﻗد ،ﻦﯿـﯿﻌﺗ هدوﺪﺤﻣ ،ﯽﮔﮋﯾو ،ﺖﯿﺳﺎﺴﺣ زا ﺖﻓﺮﮔ راﺮﻗ ﯽﺳرﺮﺑ درﻮﻣ .

ﺶﯾﺎﻣزآ مﺎﺠﻧا In –house Real-time PCR

ﺮﺑ

نارﺎﻤﯿﺑ ﻪﻧﻮﻤﻧ يور ﯽﻤﮐ ﺶﺠﻨﺳ HCV RNA

يور ﺮﺑ 200 رد هدﻮﻟآ رﺎﻤﯿﺑ

نﺎﻣز ﺮﻔﺻ ) نﺎﻣرد زا ﻞﺒﻗ (

ﺰﯿﻧو 20 ﻢﻟﺎﺳ دﺮﻓ ) ﻪﺑ ناﻮﻨﻋ لﺮﺘﻨﮐ ( ﺎﺑ

شور Real-Time RT-PCR in-house ﺪــﯾدﺮﮔ مﺎــﺠﻧا

.

ﻪﺑ رﻮﻈﻨﻣ ﯽﺟرﺎﺧ دراﺪﻧﺎﺘﺳا ﯽﻨﺤﻨﻣ ﻢﺳر 4

ﻒـﻠﺘﺨﻣ ﺖﻗر )

10³-

10⁶ IU/ml (

زا ﻟﺎﮐ دراﺪﻧﺎﺘﺳاRNA

يﺎﻫدراﺪﻧﺎﺘﺳا ﺎﺑ هﺪﺷ هﺮﺒﯿ

NIBSC ﻪﺑ هﺪﺷ بﺎﺨﺘﻧا

ﺰـﯿﻧ نﺎﻣﺰﻤﻫ رﻮﻃ زا سوﺮـﯾوRNA

ﻪﻧﻮﻤﻧ يور ﺮﺑ ﯽﻤﮐ ﺶﺠﻨﺳ هﺪﺷ جاﺮﺨﺘﺳا نارﺎﻤﯿﺑ يﺎﻤﺳﻼﭘ يﺎﻫ

ﯽﻨﯿﻟﺎﺑ و دراﺪﻧﺎﺘﺳا ﺖﻓﺮﮔ مﺎﺠﻧا

. ﯽﯾﺎـﻬﻧ طﻮﻠﺨﻣ ،رﻮﻈﻨﻣ ﻦﯾا ياﺮﺑ

ﻞﻣﺎﺷ 2 ﺮﺘﯿﻟوﺮﮑﯿﻣ ﺮﻓﺎﺑ

10x ، 4/

0 ﺮﺘﯿﻟوﺮﮑﯿﻣ )dNTP

ﺖﮐﺮـﺷ

Qiagen ( ﺖﻈﻠﻏ ﺎﺑ 10 ،رﻻﻮـﻣ ﯽﻠﯿﻣ 5/

2 ﺮـﺘﯿﻟوﺮﮑﯿﻣ MgCl2

) ﺖﮐﺮﺷ Qiagen ( ﺖﻈﻠﻏ ﺎﺑ 25 ،رﻻﻮﻣ ﯽﻠﯿﻣ 50

/0 زا ﺮﺘﯿﻟوﺮﮑﯿﻣ

ﺖﻈﻠﻏ ﺎﺑ ﯽﺘﺸﮔﺮﺑ و ﯽﺘﻓر يﺎﻫﺮﻤﯾاﺮﭘ زا ﮏﯾ ﺮﻫ 20

،رﻻﻮﻣوﺮﮑﯿﻣ

25 /0 بوﺮﭘ زا ﮏﯾﺮﻫ زا ﺮﺘﯿﻟوﺮﮑﯿﻣ ﺖﻈﻠﻏ ﺎﺑ نﻮﯿﺳاﺰﯾﺪﯾﺮﺒﯿﻫ يﺎﻫ

20 ،رﻻﻮـــﻣوﺮﮑﯿﻣ 3/

0 ﻢﯾﺰـــﻧآ ﺮـــﺘﯿﻟوﺮﮑﯿﻣ Taq DNA

Polymerase )

ﺖﮐﺮﺷ Qiagen ( ﺖﻈﻠﻏ ﺎﺑ 5 و ﺪﺣاو

ًﺎﺘﯾﺎﻬﻧ 3

زا ﺮــﺘﯿﻟوﺮﮑﯿﻣ رد هﺪــﺷ ﺰﺘﻨــﺳcDNA

بﻮــﯿﺗوﺮﮑﯿﻣ يﺎــﻫ

2/

0

(6)

ﺪﺷ ﻪﺘﺨﯾر ﺮﺘﯿﻟوﺮﮑﯿﻣ .

ﻪﺑ ﺮﻄﻘﻣ بآ ﺎﺑ ﯽﯾﺎﻬﻧ ﻢﺠﺣ 20

ﺮﺘﯿﻟوﺮﮑﯿﻣ

ﺪﺷ هﺪﻧﺎﺳر .

بﻮﯿﺗوﺮﮑﯿﻣ هﺎﮕﺘـﺳد رد ﯽﻫﺎﺗﻮﮐ ژﻮﻔﯾﺮﺘﻧﺎﺳ زا ﺲﭘ ﺎﻫ

Rotor Gene ﺪﺷ هداد راﺮﻗ

. هﺎﮕﺘﺳد ﯽﻧﺎﻣز ﻪﻣﺎﻧﺮﺑ ﺖﺳا ترﺎﺒﻋ

زا : رد ﻪﯿﻟوا نﻮﯿﺳارﻮﺗﺎﻧد C

95˚ تﺪﻣ ﻪﺑ 30 نآ ﺐـﻗﺎﻌﺘﻣ ،ﻪـﯿﻧﺎﺛ

45 ﻞﻣﺎﺷ ﻞﮑﯿﺳ 05

/0 ﻪﯿﻧﺎﺛ رد C 95˚ ، 20 رد ﻪـﯿﻧﺎﺛ C 57˚ و

20 رد ﻪﯿﻧﺎﺛ C 72˚ . ﺎﺑ و ﮓﻨﯿﻠﯿﻧآ ﻪﻠﺣﺮﻣ رد ﺲﻧﺎﺳرﻮﻠﻓ رﻮﻧ تﺪﺷ

لﺎﻧﺎﮐ زا هدﺎﻔﺘﺳا F2/F1

ﺪﻣآ ﺖﺳﺪﺑ .

ﺶﯾﺎﻣزآ Real-time PCR يرﺎﺠﺗ ﺖﯿﮐ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ

ﻪﺑ رﻮﻈﻨﻣ ﺗ هار شور ﺎـﺑ ﻪـﺘﻓﺮﮔ مﺎـﺠﻧا ﺶﯾﺎـﻣزآ ﺖﺤﺻ ﺪﯿﺋﺎ

ﯽﺳوﺮﯾو رﺎﺑ ،هﺪﺷ يزاﺪﻧا ﻪﻧﻮﻤﻧ

ﺎﻫ نارﺎﻤﯿﺑ ي ﻪﺑ

رﻮـﻃ ﺎـﺑ نﺎـﻣﺰﻤﻫ

ﺖﻓﺮﮔ راﺮﻗ ﺶﯾﺎﻣزآ درﻮﻣ ﺰﯿﻧ سﻮﺗرآ يرﺎﺠﺗ ﺖﯿﮐ .

اﺮﺑﺎﻨﺑ ﯾ ﻦ اﺪـﺘﺑا

داﻮﻣ ﻪـﺑ ﺎﻫدراﺪﻧﺎﺘـﺳا و ﯽﯾﺎﻬﻧ طﻮﻠﺨﻣ زا ﻢﻋا ﺶﻨﮐاو ﻞـﻣﺎﮐ رﻮـﻃ

طﻮـﻠﺨﻣ ًﻼﻣﺎـﮐ ﻊﯾﺮﺳ و هﺎﺗﻮﮐ ﺲﮑﺗرو ﮏﯾ ﺎﺑ هﺪﺷ بوذ ﺪـﯾدﺮﮔ

.

ﺲﭙﺳ 15 ﯽﯾﺎﻬﻧ طﻮﻠﺨﻣ زا ﺮﺘﯿﻟوﺮﮑﯿﻣ ﻪﺑ

ﯽﻣﺎﻤﺗ ﯾو لﺎ ﺪﺷ ﻪﻓﺎﺿا ﺎﻫ .

ﺖــﯾﺎﻬﻧ رد 5

زا ﺮــﺘﯿﻟوﺮﮑﯿﻣ ﻪــﺑ طﻮــﺑﺮﻣ هﺪــﺷ جاﺮﺨﺘــﺳاRNA

ﻪﻧﻮﻤﻧ ،ﺎﻫ 5 و ﺎﻫدراﺪﻧﺎﺘﺳا زا ﮏﯾ ﺮﻫ زا ﺮﺘﯿﻟوﺮﮑﯿﻣ 5

زا ﺮـﺘﯿﻟوﺮﮑﯿﻣ

ﻪﺑ هﺰﯿﻧﻮﯾد بآ ﺪﺷ ﻪﻓﺎﺿا ﯽﻔﻨﻣ لﺮﺘﻨﮐ ناﻮﻨﻋ

. ﻪﺑ ﻢـﺠﺣ ﻪﮐ يرﻮﻃ

لﺎﯾو ﺮﻫ ﯽﻠﮐ 20

ﻟوﺮﮑﯿﻣ دﻮﺷ ﺮﺘﯿ . ﻪﯿﻠﮐ ﺲﭙﺳ ﻪﻧﻮﻤﻧ

ﺎﻫ تﺪـﻣ ﻪﺑ

10 رود رد ﻪﯿﻧﺎﺛ 2000rpm

ﺪﺷ ژﻮﻔﯾﺮﺘﻧﺎﺳ .

ﯽـﺗراﺮﺣ ﻞـﯾﺎﻓوﺮﭘ

ﺖـﯿﻤﮐ ﻦﯿﯿﻌﺗ و ﺺﯿﺨﺸﺗ ياﺮﺑ HCV RNA

ﺮـﯾز حﺮـﺷ ﻪـﺑ

ﺖﺳا : رد سﻮﮑﻌﻣ يرادﺮﺑ ﻪﺨﺴﻧ C

50˚ تﺪـﻣ ﻪـﺑ 10

،ﻪـﻘﯿﻗد

رد ﻪﯿﻟوا نﺪﺷ هرﻮﺗﺎﻧد C

95˚ تﺪﻣ ﻪﺑ 10 نآ ﺐـﻗﺎﻌﺘﻣ ،ﻪﯿﻧﺎﺛ 50

ﻞﻣﺎﺷ ﻞﮑﯿﺳ C

95˚ ﺪﻣ ﻪﺑ ت 2 ،ﻪﯿﻧﺎﺛ C 55˚ تﺪﻣ ﻪﺑ 12 و ﻪﯿﻧﺎﺛ

C 72˚ تﺪﻣ ﻪﺑ 10 ﻪﯿﻧﺎﺛ .

يرﺎﻣآ ﺰﯿﻟﺎﻧآ هزاﺪﻧا ﯽﺳوﺮﯾو رﺎﺑ ﻦﯿﮕﻧﺎﯿﻣ ،ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﯾا رد رد هﺪـﺷ يﺮـﯿﮔ

ﺐﺴـﺣ ﺮﺑ و ﯽﻤﺘﯾرﺎﮕﻟ سﺎﯿﻘﻣ IU/ml

ﺪـﯾدﺮﮔ ﻪﺒـﺳﺎﺤﻣ .

ياﺮـﺑ

زا هﺪـﺷ ﺮـﮐذ شور ود زا ﻞﺻﺎﺣ ﺞﯾﺎﺘﻧ ﻪﺴﯾﺎﻘﻣ Spearman’s

correlation و

Mann-Whitney test ﺘﺳا

ﺪﺷ هدﺎﻔ .

ﻪﺘﻓﺎﯾ ﺎﻫ

هﺪﺷ يزاﺪﻧا هار شور رﺎﺒﺘﻋا ﻦﯿﯿﻌﺗ زا ﻞﺻﺎﺣ ﺞﯾﺎﺘﻧ :

ﺮـﻫ ﻪﮐ داد نﺎﺸﻧ ﭗﯿﺗﻮﻧژ ﻞﻧﺎﭘ يﺮﯿﮔرﺎﮑﺑ زا ﻞﺻﺎﺣ ﺞﯾﺎﺘﻧ 6

ﭗﯿﺗﻮﻧژ ﻪﺑ رﻮﻃ ﯽﯾﺎـﺳﺎﻨﺷ هﺪﺷ يزاﺪﻧا هار شور ﻂﺳﻮﺗ يﺪﻣآرﺎﮐ

ﯽﻣ ﺪﻧﻮﺷ . زا ﯽﮔﮋﯾو ﻦﯿﯿﻌﺗ ياﺮﺑ 4

ﻪﻧﻮﻤﻧ ﻪـﺑ ﻪـﮐ ﯽـﻔﻨﻣHCV

ﺐﯿﺗﺮﺗ ،HBV ،CMV وEBV

نآHIV ﺎﻫ ﻣ ﻪـﺑ دﻮـﺑ ﺖـﺒﺜ

ﻪﻧﻮﻤﻧ ﮏﯾ هاﺮﻤﻫ ﺖﺒﺜﻣHCV

) ﻪﺑ ﺖﺒﺜﻣ لﺮﺘﻨﮐ ناﻮﻨﻋ (

هدﺎﻔﺘﺳا

ﺪﺷ . ﺮﻤﯾاﺮﭘ ﻪﮐ داد نﺎﺸﻧ ﺞﯾﺎﺘﻧ بوﺮﭘ و

ًﻼﻣﺎـﮐ هﺪـﺷ ﯽﺣاﺮﻃ يﺎﻫ

زا ﺮﯿﻏ ﯽﺳوﺮﯾو ﻞﻣاﻮﻋ ﺎﺑ هدﻮﻤﻧ ﻞﻤﻋ ﯽﺻﺎﺼﺘﺧا ﺶﻨـﮐاوHCV

ﯽﻤﻧ ﺪﻨﻫد . ﻪﺑ رﻮﻈﻨﻣ ﺎـﺑ ﻪـﻧﻮﻤﻧ ﮏﯾ زا شور ﻦﯾا ﺖﯿﺳﺎﺴﺣ ﻦﯿﯿﻌﺗ

ﺖﻈﻠﻏ IU/ml 10⁶ ﺖﻗر يﺎﻫ ﺺﺨﺸﻣ ﻞﻧﺎﭘ هاﺮﻤﻫ ﻪﺑ هﺪﺷ ﻪﯿﻬﺗ

دراﺪﻧﺎﺘﺳا ﻪﺑRNA

ﺖـﻓﺮﮔ راﺮـﻗ ﺶﯾﺎـﻣزآ درﻮﻣ ﯽﯾﺎﺗود ترﻮﺻ .

شور ﻦـﯾا ﻦﯿـﯿﻌﺗ هدوﺪـﺤﻣ ﻪﮐ داد نﺎﺸﻧ ﺞﯾﺎﺘﻧ IU/ml

50 ﺎـﺑ

ﯽﮑﯿﻣﺎـﻨﯾد هدوﺪﺤﻣ )

Dynamic range (

ﻦﯿـﺑ IU/ml 10⁶ -

10³ ﯽــﻣ ﺪــﺷﺎﺑ . نﻮﯿــﺳﺎﮑﯿﻔﯿﻠﭙﻣآ دراﺪﻧﺎﺘــﺳاRNA

ردHCV

ﺖﻈﻠﻏ ار شور ﻦﯾا ندﻮﺑ ﯽﻄﺧ ،ﻒﻠﺘﺨﻣ يﺎﻫ داد نﺎﺸﻧ

. ﺐﯾﺮـﺿ

ﻪﺑ ﺰﯿﻧ دراﺪﻧﺎﺘﺳا ﯽﻨﺤﻨﻣ نﻮﯿﺳﺮﮔر ﻂﺳﻮﺘﻣ رﻮﻃ

99 /0 دﻮﺑ≥ . ياﺮﺑ

،شور ﻦﯾا يﺮﯾﺬﭘراﺮﮑﺗ و ﺖﻗد ﻦﯿﯿﻌﺗ ﺖﻗر

يﺎﻫ 10³ ﺎﺗ 10⁶ ﻞﻧﺎﭘ

دراﺪﻧﺎﺘــﺳا نار ﮏــﯾ ردRNA

) intra-assay (

ر رد و نآ ﺎــﻫ ي

ﻒـﻠﺘﺨﻣ ) inter-assay (

ﺖــﻓﺮﮔ راﺮـﻗ ﺶﯾﺎــﻣزآ درﻮــﻣ .

ﺲﭙــﺳ

رﺎﯿﻌﻣ فاﺮﺤﻧا ﺺﺧﺎﺷ ﺐﯾﺮﺿ و(SD)

تاﺮﯿﯿﻐﺗ سﺎﺳا ﺮﺑ(CV)

Crossing Point ﺪﯾدﺮﮔ ﻪﺒﺳﺎﺤﻣ ﺖﻗر ﺮﻫ زا ﻞﺻﺎﺣ

. ﺐﯾﺮـﺿ

تاﺮــﯿﯿﻐﺗ Intra- و Inter- زا ﺮــﺘﻤﮐ ﺐــﯿﺗﺮﺗ ﻪــﺑ شور ﻦــﯾا رد

77 /1 % و 4/

3 % دﻮﺑ .

سوﺮﯾو رﺎﺑ ﻦﯿﯿﻌﺗ يزاﺪـﻧا هار شور زا هﺪـﻣآ ﺖـﺳﺪﺑ ﺞﯾﺎـﺘﻧ ﻪـﺑ ﻪﺟﻮﺗ ﺎﺑ

رد سوﺮــﯾو رﺎــﺑ ،هﺪــﺷ 9/

37

% زا ﺮــﺘﻤﮐ دراﻮــﻣ زا IU/ml

500،000

، رد 6/

33

% ﻦﯿــﺑ دراﻮــﻣ زا IU/ml

700،000 -

500،000 رد و

7/

28

% زا ﺶﯿــــــﺑ دراﻮــــــﻣ زا IU/ml

700،000 دﻮﺑ

. هزاﺪﻧا ﯽﺳوﺮﯾو رﺎﺑ ﻦﯿﮕﻧﺎﯿﻣ رد هﺪـﺷ يﺮـﯿﮔ

ﯽﻤﺘﯾرﺎـــﮕﻟ سﺎـــﯿﻘﻣ ﺖـــﺳا ترﺎـــﺒﻋ

زا ) : 22 /0 81 /5

،

) 05 /0 P<

.(

ﻪﺑ رﻮﻈﻨﻣ هار شور ﻦﯿﺑ ﯽﮕﺘﺴﺒﻤﻫ ﯽﺳرﺮﺑ هﺪﺷ يزاﺪﻧا

د زا ﻞــﺻﺎﺣ ﺞﯾﺎــﺘﻧ ،يرﺎــﺠﺗ ﺖــﯿﮐ و يور ﺮــﺑ شور و

200

(7)

زا ﻞﺒﻗ رﺎﻤﯿﺑ عوﺮﺷ

ﺪﺷ ﻪﺴﯾﺎﻘﻣ ﺮﮕﯾﺪﮑﯾ ﺎﺑ نﺎﻣرد .

تﺎـﻌﻟﺎﻄﻣ

ﻪـﮐ داد نﺎﺸﻧ يرﺎﻣآ سﺎـﺳا ﺮـﺑ

ﺺﺧﺎـﺷ R² ﯽﮕﺘﺴـﺒﻤﻫ ،

نﺎــﻣرد زا ﻞــﺒﻗ شور ود زا ﻞــﺻﺎﺣ ﺞﯾﺎــﺘﻧ ﻦﯿــﺑ ﯽﺑﻮــﺧ ) 05 /0 P<

، 988 /0

= R² ( دراد دﻮﺟو )

رادﻮﻤﻧ 1 ( . ﯽﯾﺎـﺠﻧآ زا

ﯽﺘﻧآ ﺖﺴﺗ ﻪﮐ ﻢﻟﺎﺳ لﺮﺘﻨﮐ داﺮﻓا ﻪﮐ يدﺎﺑ

نآ ﺎﻫ ـﺑ ﯽـﻔﻨﻣ دﻮ

ﭻﯿﻫ ﻪﻧﻮﮔ ﻦﯾاﺮﺑﺎـﻨﺑ ،ﺪـﻧداﺪﻧ نﺎﺸـﻧ ﺮﯿﺜﮑﺗ زا ﯽﺷﺎﻧ ﯽﻟﺎﻨﮕﯿﺳ

هار شور ﯽﮔﮋﯾو هﺪﺷ يزاﺪﻧا

100 % ﺖـﺒﺜﻣ ﯽﯾﻮﮕﺸﯿﭘ شزرا

ﺰﯿﻧ شور ﻦﯾا ﯽﻔﻨﻣ و 100

% دﻮﺑ .

رادﻮﻤﻧ 1.

شور زا ﻞـﺻﺎﺣ ﺞﯾﺎـﺘﻧ ﻪﺴﯾﺎﻘﻣ In house Real-time

يرﺎﺠﺗ ﺖﯿﮐ وPCR

ﯾ ﻪﺘﻓﺎ يﺎﻫ ﯽﻨﯿﻟﺎﺑ

ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﯾا رد 200

ﻪﺑ ﻼﺘﺒﻣ رﺎﻤﯿﺑ ﺖﯿﺗﺎﭙﻫ

درﻮـﻣC

ﺪﻨﺘﻓﺮﮔ راﺮﻗ ﯽﺳرﺮﺑ .

رد نارﺎـﻤﯿﺑ ﮏـﯿﻓاﺮﮔﻮﻣد تﺎﯿﺻﻮﺼـﺧ

لوﺪـﺟ 3 ﺖـﺳا هﺪــﻣآ .

هﺪــﻣآ ﺖــﺳﺪﺑ ﺞﯾﺎـﺘﻧ ﻪــﺑ ﻪـﺟﻮﺗ ﺎــﺑ

ﺖﯿﺗﺎﭙﻫ يرﺎﻤﯿﺑ ﻪﺑ نﺎﯾﻼﺘﺒﻣ ﻦﯾﺮﺘﺸﯿﺑ )C

5/

95 (%

ﻦـﯾا رد

ﻪﻌﻣﺎﺟ ﯽﻣ ﻞﯿﮑﺸﺗ نادﺮﻣ ار يرﺎﻣآ ي ﺪﻨﻫد

دﺮـﻣ نارﺎﻤﯿﺑ زا

ﺪﻨﺘﺴﻫ . نارﺎﻤﯿﺑ ﯽﻨﺳ ﻒﯿﻃ 18

ﺎﺗ 63 لﺎﺳ ﯽﻣ ﺪﺷﺎﺑ . ﺮـﮔ هو

ﯽﻨﺳ 20 ﺎﺗ 40 ﺎﺑ لﺎﺳ 134 ﺮﻔﻧ ) 67

%(

هوﺮـﮔ و ﻦﯾﺮﺘﺸـﯿﺑ

ﯽﻨﺳ 60 ﺎﺑ ﻻﺎﺑ ﻪﺑ لﺎﺳ 4

ﺮﻔﻧ ) 2

% ( ار ﯽﻨـﺳ هوﺮﮔ ﻦﯾﺮﺘﻤﮐ

ﻞﻣﺎﺷ ﯽـﻣ دﻮـﺷ . ﺖﯿﻌـﺿو ﺮـﻈﻧ زا ﻞـﻫﺄﺗ

داﺪـﻌﺗ ﻦﯾﺮﺘﺸـﯿﺑ

نارﺎﻤﯿﺑ ) 46 (%

دراد صﺎﺼـﺘﺧا دﺮـﺠﻣ داﺮـﻓا ﻪﺑ .

ﺪـﻧدﻮﺑ زا .

،ﯽﻠﻐﺷ ظﺎﺤﻟ ﺪﺻرد ﻦﯾﺮﺘﺸﯿﺑ

ﻼﺘﺑا ) ﯽﻠﻐـﺷ ﯽﺻﺎﺼﺘﺧا (

ﻪـﺑ

رد ﺐﯿﺗﺮﺗ نارﺎﮑﯿﺑ ﺖﯿﻌﻤﺟ

5/

52

% ﻞﻏﺎﺸﻣ رد نآ زا ﺲﭘ و

دازآ ﻢﻗر ﺎﺑ 5/

33 % هﺪﯾد ﯽﻣ دﻮﺷ .

لوﺪﺟ 3 . ﺻﻮﺼﺧ ﯿ ﺖﯿﺗﺎﭙﻫ ﻪﺑ ﻼﺘﺒﻣ نارﺎﻤﯿﺑ ﮏﯿﻓاﺮﮔﻮﻣد تﺎ C

نﺎـﯿﻣ رد ﺮـﻄﺧ يﺎﻫرﻮﺘﮐﺎﻓ ﺮﻈﻧ زا 200

درﻮـﻣ رﺎـﻤﯿﺑ

ﺐـﯿﺗﺮﺗ ﻪـﺑ نﺪـﺷ ﯽﻧاﺪـﻧز و ﯽـﻘﯾرﺰﺗ دﺎﯿﺘﻋا ﻪﻘﺑﺎﺳ ،ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ا دﻮـﺧ ﻪﺑ ار ناﺰﯿﻣ ﻦﯾﺮﺘﺸﯿﺑ ﺖـﺳا هداد صﺎﺼـﺘﺧ

. ﻦـﯾا رد

ﻪـﺑ ﻼﺘـﺑا ﻪﻘﺑﺎﺳ نﺎﯿﻣ ناﺰـﯿﻣ ﻦﯾﺮـﺘﻤﮐ هداﻮﻧﺎـﺧ ردHCV

ﺖﺳا ) لوﺪﺟ 4 .(

لوﺪﺟ 4 . ﺖﯿﺗﺎﭙﻫ ﻪﺑ ﻼﺘﺑا ﺮﻄﺧ يﺎﻫرﻮﺘﮐﺎﻓ C

ﺮﻄﺧ يﺎﻫرﻮﺘﮐﺎﻓ ﯽﻧاواﺮﻓ ﺪﺻرد ﻪﺑ ﻼﺘﺑا ﻪﻘﺑﺎﺳ

هداﻮﻧﺎﺧ ردHCV 18 %9

ﯽﻘﯾرﺰﺗ دﺎﯿﺘﻋا ﻪﻘﺑﺎﺳ 179 %895/

نﺎﺘﺳرﺎﻤﯿﺑ رد نﺪﺷ يﺮﺘﺴﺑ ﻪﻘﺑﺎﺳ 123 %615/

نﻮﺧ ﻖﯾرﺰﺗ ﻪﻘﺑﺎﺳ 48 %24 ﺮﻄﺧﺮﭘ ﯽﺴﻨﺟ سﺎﻤﺗ ﻪﻘﺑﺎﺳ 109 %545/

ﺖﻣﺎﺠﺣ ﻪﻘﺑﺎﺳ 45 %225/

لﺎﺧ ﻪﻘﺑﺎﺳ

ﯽﺑﻮﮐ 111 %555/

ﯽﮑﺷﺰﭙﻧاﺪﻧد ﻪﻘﺑﺎﺳ 130 %65 نﺪﺷ ﯽﻧاﺪﻧز ﻪﻘﺑﺎﺳ 170 %85

رﺎﮕﯿﺳ فﺮﺼﻣ 148 %74

ﻞﮑﻟا فﺮﺼﻣ ﻪﻘﺑﺎﺳ 83 %415/

يﺮﯿﮔ ﻪﺠﯿﺘﻧ و ﺚﺤﺑ

شور هزوﺮﻣا ﯽـﺳوﺮﯾو رﺎـﺑ ﺶﺠﻨـﺳ يﺎـﻫ

ﻪـﺑ ترﻮـﺻ

ﺖﯿﮐ ﻪـﻨﯾﺰﻫ ﺖـﻠﻋ ﻪـﺑ ﺎﻣا ،ﺪﻨﺘﺴﻫ سﺮﺘﺳد رد يرﺎﺠﺗ يﺎﻫ

نآ زا هدﺎﻔﺘﺳا ،ﺪﻧراد ﻪﮐ ﯽﯾﻻﺎﺑ ﻂﯿﺤﻣ رد ﺎﻫ

ﺪـﻣآرد ﻢﮐ يﺎﻫ

ﻪﺑ و ﻒـﻗﻮﺘﻣ تﺎـﻗوا ﺮﺜﮐا رد و دوﺪﺤﻣ ﯽﺘﻟود ﺰﮐاﺮﻣ رد هﮋﯾو

ﺖﺳا هﺪﺷ .

هار ﻪـﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦـﯾا زا فﺪـﻫ شور يزاﺪـﻧا

Real-

Time PCR In- House ﻪﺑ

ﺎـﺟ شور ﮏﯾ ناﻮﻨﻋ ﯾ

ﺰﮕ ﯾ ﻦ

اﺮﺑ ﺖﯿﮐ ي رﺎـﺑ ناﻮـﺘﺑ نآ ﮏـﻤﮐ ﻪـﺑ ﺎـﺗ ﺖـﺳا يرﺎﺠﺗ يﺎﻫ

ﻪﺑ ﻼﺘﺒﻣ نارﺎﻤﯿﺑ رد ار ﯽﺳوﺮﯾو رد و هدﻮـﻤﻧ ﻦﯿﯿﻌﺗHCV

ﯽـﺳوﺮﯾوﺪﺿ نﺎـﻣرد ﻪـﺑ ﺦـﺳﺎﭘ ﯽﺑﺎﯾزرا ياﺮﺑ يﺪﻌﺑ ﻞﺣاﺮﻣ داد راﺮﻗ هدﺎﻔﺘﺳا درﻮﻣ .

ﺪﺻرد ﯽﻧاواﺮﻓ نارﺎﻤﯿﺑتﺎﯿﺻﻮﺼﺧ 5/

99

% 191 دﺮﻣ

5/

4

% 9 نز ﺲﻨﺟ

5/

46

% 93 ﻞﻫﺄﺘﻣ

43

% 86 دﺮﺠﻣ

5/

10

% 21 هﺪﺷ اﺪﺟ ﻞﻫﺄﺗ ﺖﯿﻌﺿو

5/

99

% 191 ﻢﻠﭙﯾد ﺮﯾز

5/

4

% 9 ﻢﻠﭙﯾد زا ﺮﺗﻻﺎﺑ ﯽﻠﯿﺼﺤﺗ ﺖﯿﻌﺿو

5/

57

% 115 رﺎﮑﯿﺑ

5/

42

% 85 ﻞﻏﺎﺷ ﯽﻠﻐﺷ ﺖﯿﻌﺿو

(8)

تﻻﻮﺼﺤﻣ ﯽﻤﮐ ﻦﯿﯿﻌﺗ ياﺮﺑ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﯾا رد زاPCR

بوﺮــﭘ نﻮﯿــﺳاﺰﯾﺪﯾﺮﺒﯿﻫ يﺎــﻫ )

Hybprobe (

ﻢﺘﺴــﯿﺳ رد

Real-Time ﺪﺷ هدﺎﻔﺘﺳا

. بوﺮـﭘ زا ﺮـﯿﺧا تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ يﺎـﻫ

عﻮـﻨﺘﻣ يﺎـﻫدﺮﺑرﺎﮐ رد رﻮـﺑﺰﻣ Real-Time PCR

هﺮـﻬﺑ

هدﺮﺑ ﺪﻧا ) 20 .(

بوﺮﭘ ﯽﺼﯿﺨﺸﺗ ﺖﻣﺮﻓ نﻮﯿـﺳاﺰﯾﺪﯾﺮﺒﯿﻫ يﺎﻫ

ﺖﺳا راﻮﺘﺳا يﺪﯿﺗﻮﺌﻠﮐﻮﻧﻮﮕﯿﻟوا بوﺮﭘ ود زا هدﺎﻔﺘﺳا ﻪﯾﺎﭘ ﺮﺑ .

ﻪﺑ بوﺮﭘ ود ﻦﯾا رد ﻊـﻗاو ﯽﻟاﻮﺗ ﮏﯾ ﻪﺑ ﻢﻫ ﻪﺑ ﮏﯾدﺰﻧ ترﻮﺻ

ﻫﺮﻤﯾاﺮﭘ نﺎﯿﻣ ﯽـﻣ ﻞﺼـﺘﻣ نﻮﯿـﺳﺎﮑﯿﻔﯿﻠﭙﻣآ يﺎ

ﺪﻧﻮـﺷ . ﻦـﯾا

بوﺮﭘ ﻪﺑ ﯽﺘﺴﯾﺎﺑ ﺎﻫ ﻪﻧﻮﮔ

زﺎـﻓ لﻼـﺧ رد ﻪﮐ ﺪﻧﻮﺷ ﯽﺣاﺮﻃ يا

ﻪﻠﺻﺎﻓ ﺎﺑ و مد ﻪﺑ ﺮﺳ ﺖﻟﺎﺣ ﻪﺑ ﮓﻨﯿﻠﯿﻧآ -5

1 ﻪـﺑ ﺪـﯿﺗﻮﺌﻠﮐﻮﻧ

ﮓﻧر ود هﺪﺷ ﻞﺼﺘﻣ ﻪﺘﺷر ﮏﯾ )

رﻮـﻓورﻮﻠﻓ ( ﺮﮕﯾﺪـﮑﯾ ﻪـﺑ ار

ﺪﻨﻨﮐ ﮏﯾدﺰﻧ .

ﯽﻟاﻮـﺗ ﯽﺘﯿﺴـﯿﻧژوﺮﺘﻫ ﻪـﺑ ﻪـﺟﻮﺗ ﺎـﺑ ،HCV

ﺑ بوﺮﭘ و ﺮﻤﯾاﺮﭘ بﺎﺨﺘﻧا ﺖﺳا ﺖﯿﻤﻫا ﺰﺋﺎﺣ رﺎﯿﺴ

. ﻪـﺑ يرﻮـﻃ

هار شور ﻪﮐ ﭗـﯿﺗﻮﻧژ ﯽﻣﺎﻤﺗ ﺪﻧاﻮﺘﺑ هﺪﺷ يزاﺪﻧا

ﺖـﺤﺗ و ﺎـﻫ

ﭗﯿﺗ يﺎﻫ ﻦﯿﯿﻌﺗ و ﯽﯾﺎﺳﺎﻨﺷ نﺎﺴﮑﯾ ﺖﯿﺳﺎﺴﺣ ﺎﺑ ارHCV

هار رد مﺪـﻗ ﻦﯿـﻟوا اﺬﻟ ،ﺪﯾﺎﻤﻧ ﺖﯿﻤﮐ بﺎـﺨﺘﻧا شور يزاﺪـﻧا

ﻪـﯿﺣﺎﻧ زا بوﺮـﭘ و ﺮﻤﯾاﺮﭘ تاﺮـﯿﯿﻐﺗ ﻦﯾﺮـﺘﻤﮐ ﻪـﮐ ﺖـﺳا يا

ﭗﯿﺗﻮﻧژ نﺎﯿﻣ رد ار يﺪﯿﺗﻮﺌﻠﮐﻮﻧ ﻫ

ﻪﺘﺷاد سوﺮﯾو ﻒﻠﺘﺨﻣ يﺎ

ﺪﺷﺎﺑ . هداد نﺎﺸــﻧ ﻒــﻠﺘﺨﻣ تﺎــﻌﻟﺎﻄﻣ و ﺮــﻤﯾاﺮﭘ ﻪــﮐ ﺪــﻧا

بوﺮﭘ ﻪـﯿﺣﺎﻧ هﺪﺷ ﺖﻇﺎﻔﺣ رﺎﯿﺴﺑ ﯽﻟاﻮﺗ ﻪﮐ ﯽﯾﺎﻫ 5′ UTR

مﻮﻧژ ﯽﻣ راﺮﻗ فﺪﻫ درﻮﻣ ارHCV

ﺪﻨﻫد

، ﯽﺻﺎﺼﺘﺧا رﺎﯿﺴﺑ

ﯽﻣﺎـﻤﺗ ﯽﯾﺎـﺳﺎﻨﺷ ﻪـﺑ ردﺎﻗ ﻪﺑﺎﺸﻣ ﺖﯿﺳﺎﺴﺣ ﺎﺑ هدﻮﻤﻧ ﻞﻤﻋ ﭗﯿﺗﻮﻧژ ﭗـﯿﺗ ﺖـﺤﺗ و ﺎﻫ يﺎـﻫ

ﯽـﻣHCV ﺪـﺷﺎﺑ ) 21 .(

رد

ﻪﻨﯿﻬﺑ نﺎﯾﺮﺟ ﺖـﻈﻠﻏ زا ،شور يزﺎﺳ

،ﺮـﻤﯾاﺮﭘ ﻒـﻠﺘﺨﻣ يﺎـﻫ

ﺪﺷ هدﺎﻔﺘﺳا فﺪﻫ يﻮﮕﻟا و بوﺮﭘ .

ﺐـﺳﺎﻨﻣ ﺖﯾﺎﻬﻧ رد ﻦﯾﺮـﺗ

ﺪﺷ بﺎﺨﺘﻧا ﻞﻣاﻮﻋ ﻦﯾا زا ﮏﯾ ﺮﻫ ياﺮﺑ ﺖﻈﻠﻏ .

هار رد ﻪﮐ يﺮﮕﯾد ﺐﻠﻄﻣ ﺖـﯿﻤﻫا زا شور ﮏـﯾ يزاﺪﻧا

قﻮﻓ هدﺎﻌﻟا يزﺎﺳﺮﺒﺘﻌﻣ و ندﻮﻤﻧ دراﺪﻧﺎﺘﺳا ﺖﺳا رادرﻮﺧﺮﺑ يا

هار شور هﺪــﺷ يزاﺪــﻧا ﺖــﺳا

. ﻪــﺑ ﻪــﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦــﯾا رد رﻮــﻈﻨﻣ

دراﺪﻧﺎﺘـﺳا ﻞـﻧﺎﭘ زا هﺪـﺷ ﯽـﺣاﺮﻃ شور ندﻮـﻤﻧ دراﺪﻧﺎﺘﺳا NIBSC ﺪﺷ هدﺎﻔﺘﺳا

. ﻪـﺑ ﺮـﮕﯾد يﻮـﺳ زا ﻦﯿـﯿﻌﺗ رﻮـﻈﻨﻣ

زا ،شور ﯽﮑﯿﺘﯿﻟﺎﻧآ ﺖﯿﺳﺎﺴﺣ ﺖـﻗر دراﺪﻧﺎﺘﺳاRNA

يﺎـﻫ

ﺖـﻓﺮﮔ راﺮـﻗ ﺶﯾﺎﻣزآ درﻮﻣ نار ﮏﯾ رد و هﺪﺷ ﻪﯿﻬﺗ لﺎﯾﺮﺳ .

هار شور ﺖﯿﺳﺎﺴــﺣ ﻪــﮐ داد نﺎﺸــﻧ ﺞﯾﺎــﺘﻧ زاﺪــﻧا

هﺪــﺷ ي

IU/ml 50 ﻦﯿﺑ ﯽﮑﯿﻣﺎﻨﯾد هدوﺪﺤﻣ ﺎﺑ

IU/ml 10³-10⁶

ﯽــﻣ ﺪــﺷﺎﺑ . نﻮﯿــﺳﺎﮑﯿﻔﯿﻠﭙﻣآ دراﺪﻧﺎﺘــﺳاRNA

ردHCV

ﺖﻈﻠﻏ داد نﺎﺸـﻧ ار شور ﻦـﯾا ندﻮـﺑ ﯽـﻄﺧ ،ﻒﻠﺘﺨﻣ يﺎﻫ .

ﻪـﺑ ﺰـﯿﻧ دراﺪﻧﺎﺘـﺳا ﯽﻨﺤﻨﻣ نﻮﯿﺳﺮﮔر ﺐﯾﺮﺿ ﻂـﺳﻮﺘﻣ رﻮـﻃ

99 /0 ﯽﻣ≥ ﺪﺷﺎﺑ .

ﺮﯾﺬﭘراﺮﮑﺗ و ﺞﯾﺎﺘﻧ ندﻮﺑ ﻖﯿﻗد ي

رد ﻢـﻬﻣ يﺎﻫﺮﺘﻣارﺎﭘ زا نآ

هار شور يزﺎﺳﺮﺒﺘﻌﻣ ﯽـﻣ بﻮﺴـﺤﻣ هﺪﺷ يزاﺪﻧا

ﺪﻧﻮـﺷ . ﻦـﯾا رد

تاﺮــﯿﯿﻐﺗ ،ﺎﺘــﺳار Intra-assay

و Inter-assay شور ياﺮــﺑ

هار ﺖﻓﺮﮔ راﺮﻗ ﯽﺳرﺮﺑ درﻮﻣ هﺪﺷ يزاﺪﻧا .

تاﺮﯿﯿﻐﺗ ﺐﯾﺮﺿ Intra

-

و Inter زا ﺮـﺘﻤﮐ ﺐﯿﺗﺮﺗ ﻪﺑ شور ﻦﯾا رد - 77

/1 % و 4/

3 % دﻮـﺑ .

اﺮـﯿﯿﻐﺗ ﺐﯾﺮﺿ ﻪﮐ ﺖﺳا نآ زا ﯽﮐﺎﺣ دﺪﻌﺘﻣ تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ زا ﺮـﺘﻤﮐ ت

5 % ياﺮﺑ Intra-assay زا ﺮـﺘﻤﮐ تاﺮﯿﯿﻐﺗ ﺐﯾﺮﺿ و

10 % ياﺮـﺑ

Inter-assay ﮏﯾ ﺐﺳﺎﻨﻣ ﺖﻗد و ندﻮﺑ ﺮﯾﺬﭘراﺮﮑﺗ هﺪﻨﻫد نﺎﺸﻧ ،

ﺖﺳا شور .

ﯽﻣ ﻪﻈﺣﻼﻣ ﻦﯾاﺮﺑﺎﻨﺑ هار شور ﻪﮐ دﻮﺷ

هﺪـﺷ يزاﺪـﻧا

يﺎﻫدراﺪﻧﺎﺘﺳا درﻮﻣ رد ﻢﻫ ﻪﻧﻮﻤﻧ هرﺎﺑرد ﻢﻫ وRNA

ﯽﻨﯿﻟﺎﺑ يﺎﻫ

ﺮﺑ ﯽﺒﺳﺎﻨﻣ ﺖﻗد و يﺮﯾﺬﭘراﺮﮑﺗ زا ﯽﻣ رادرﻮﺧ

ﺪﺷﺎﺑ .

ﺮﮕﯾد يﻮﺳ زا ﻪﺑ

رﻮﻈﻨﻣ شور ﻦـﯾا هدﺮﺘﺴـﮔ دﺮﺑرﺎﮐ ﻦﯿﯿﻌﺗ

ﯽﯾﺎــﺳﺎﻨﺷ رد نآ ﯽﯾﺎــﻧاﻮﺗ ،ﯽﺗﺎــﻘﯿﻘﺤﺗ و ﯽﻨﯿﻟﺎــﺑ تﺎــﻌﻟﺎﻄﻣ رد 6

دراﺪﻧﺎﺘـﺳا ﻞﻧﺎﭘ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﻖﯾﺮﻃ زا نﺎﻬﺟ رد ﻊﯾﺎﺷ ﯽﻠﺻا ﭗﯿﺗﻮﻧژ ﺖﻓﺮﮔ راﺮﻗ ﯽﺳرﺮﺑ درﻮﻣ ﭗﯿﺗﻮﻧژ .

ﺮﻫ ﻪﮐ داد نﺎﺸﻧ ﺞﯾﺎﺘﻧ 6

ﭗﯿﺗﻮﻧژ

ﯽﻣ ﻪﺑ ﺪﻨﻧاﻮﺗ ﮐ رﻮﻃ ﻪﺑ يﺪﻣآرﺎ ﯽﯾﺎﺳﺎﻨﺷ هﺪﺷ ﯽﺣاﺮﻃ شور ﻪﻠﯿﺳو

ﺪﻧﻮﺷ . هﺪﺷ ﯽﺣاﺮﻃ شور ندﻮﺑ يدﺮﺑرﺎﮐ تﺎﺒﺛا ياﺮﺑ 200

ﻪﻧﻮﻤﻧ

ﺖـﻓﺮﮔ راﺮـﻗ ﺶﯾﺎـﻣزآ درﻮـﻣ نﺎﻣرد زا ﻞﺒﻗ ﯽﻨﯿﻟﺎﺑ .ﻣ

ـﯿ ﮕﻧﺎ ﯿ رﺎـﺑ ﻦ

وﯾ ــﺳوﺮ ﯽ ) 22 /0 81 /5 ، 05 /0 P<

( ﺪــﺷ ﻪﺒــﺳﺎﺤﻣ .

ﺎــﺘﻧ ﯾ ﺞ

زاﺪﻧا هار شور زا ﻞﺻﺎﺣ ي

ور ﺮﺑ هﺪﺷ ي ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺎﻫ ي ﻟﺎﺑ ﯿﻨ ﯽ ﻃ ـﯿ ﻒ

IU/ml 10²-10⁶ ا ﻪﮐ داد نﺎﺸﻧ ار

ﯾ ﺎـﺘﻧ ﻦ ﯾ ﺎﻘﻣ ﻞـﺑﺎﻗ ﺞ ـﯾ

ﺎـﺑ ﻪﺴ

ﺎــﺳ ﯾ ﻣز رد تﺎــﻌﻟﺎﻄﻣ ﺮ ﯿ

ﻪــﻨ Real- time PCR ﯽــﻣ

ﺪــﺷﺎﺑ

) 22،23 ( . ﻓﺮﻃ زا ﯽ هﺪﻣآ ﺖﺳﺪﺑ ﺞﯾﺎﺘﻧ ﺎﺑ شور ﻦﯾا زا ﻞﺻﺎﺣ ﺞﯾﺎﺘﻧ

يرﺎﺠﺗ ﺖﯿﮐ زا Real-Time RT-PCR

ﺪﺷ ﻪﺴﯾﺎﻘﻣ .

ﻪﺴﯾﺎﻘﻣ

(9)

و هﺪـﺷ ﯽـﺣاﺮﻃ شور ﻦﯿﺑ ﯽﺑﻮﺧ ﯽﮕﺘﺴﺒﻤﻫ ﻪﮐ داد نﺎﺸﻧ ﺞﯾﺎﺘﻧ رﺎــﺠﺗ ﺖــﯿﮐ نﺎــﻣرد زا ﻞــﺒﻗ ي

) 05 /0 P<

، 988 /0

= R² ( درﻮــﻣ ،

ﺖﻓﺮﮔ راﺮﻗ ﯽﺳرﺮﺑ .

ﺖﺴـﺗ ﻪـﮐ ﻢﻟﺎـﺳ لﺮـﺘﻨﮐ داﺮﻓا ﻪﮐ ﯽﯾﺎﺠﻧآ زا

ﯽﺘﻧآ يدﺎﺑ نآ ﺎﻫ دﻮﺑ ﯽﻔﻨﻣ ﭻﯿﻫ ﻪﻧﻮﮔ نﺎﺸﻧ ﺮﯿﺜﮑﺗ زا ﯽﺷﺎﻧ ﯽﻟﺎﻨﮕﯿﺳ

هار شور ﯽــﮔﮋﯾو ﻦﯾاﺮﺑﺎــﻨﺑ ،ﺪــﻧداﺪﻧ هﺪــﺷ يزاﺪــﻧا

100 % شزرا

ﺰـﯿﻧ شور ﻦـﯾا ﯽﻔﻨﻣ و ﺖﺒﺜﻣ ﯽﯾﻮﮕﺸﯿﭘ 100

% دﻮـﺑ . ـﯾﺎﻬﻧ رد ﺖ

هار ﯽـﻤﮐ شور ﻪﮐ داد نﺎﺸﻧ ﻖﯿﻘﺤﺗ ﻦﯾا زا ﻞﺻﺎﺣ ﺞﯾﺎﺘﻧ يزاﺪـﻧا

هدﺮﺘﺴـﮔ ﻦﯿﯿﻌﺗ هدوﺪﺤﻣ ﺎﺑ ﺮﯾﺬﭘراﺮﮑﺗ و ﻖﯿﻗد ،ﻊﯾﺮﺳ ﯽﺷور هﺪﺷ ﻪﻧﻮﻤﻧ ﯽﺳوﺮﯾو رﺎﺑ ﻦﯿﯿﻌﺗ ﺖﻬﺟ ﯽﻣ ﯽﻨﯿﻟﺎﺑ يﺎﻫ

ﺪـﺷﺎﺑ . شور ﻦـﯾا

رﺎﯿﺴـﺑ ﯽـﺳوﺮﯾوﺪﺿ نﺎﻣرد ﯽﯾآرﺎﮐ ﮓﻨﯾرﻮﺘﯿﻧﺎﻣ و ﯽﯾﻮﮕﺸﯿﭘ ياﺮﺑ ﺖﺳا ﺪﻨﻣدﻮﺳ .

ﮏﯿﻨﮑﺗ ﻦﯾا يﺪﯿﻔﻣ يﺎﻤﻨﻫار

ﺖﻧﻮﻔﻋ ﺺﯿﺨﺸﺗ رد

ضﺮـﻌﻣ رد داﺮـﻓا رد ﯽﺳوﺮﯾوﺪﺿ نﺎﻣرد ﻪﺑ ﺦﺳﺎﭘ ﯽﺑﺎﯾزرا و ﻪﯿﻟوا نادﺎـﺘﻌﻣ ،ﯽﻠﯿﻓﻮـﻤﻫ نارﺎـﻤﯿﺑ ،نﻮـﺧ نﺎﮔﺪـﻨﻨﮐاﺪﻫا ﺪـﻨﻧﺎﻣ ﺮﻄﺧ رﺎﻤﺷ ﻪﺑ ﯽﻘﯾرﺰﺗ ﯽﻣ

دور . ﺺﯿﺨﺸﺗ ﺎﺑ ﻪﺑ

ﻊـﻗﻮﻣ ﺐـﺳﺎﻨﻣ نﺎـﻣرد و

ﯽﻣ ﻢﺸﭼ ﺶﯾاﺰﻓا زا ناﻮﺗ ﺎـﺗ نآ زا ﯽﺷﺎﻧ تﺎﻌﺒﺗ و يرﺎﻤﯿﺑ ﻦﯾا ﺮﯿﮔ

ــﻤﻧ يﺮﯿﮔﻮــﻠﺟ نﺎــﮑﻣا ﺪــﺣ دﻮ

. مﺎــﺠﻧا يﻻﺎــﺑ ﻪــﻨﯾﺰﻫ ﻞــﯿﻟد ﻪــﺑ

ﺶﯾﺎـــﻣزآ ﯽـــﻔﯿﮐ و ﯽـــﻤﮐ ﺺﯿﺨﺸـــﺗ يﺎـــﻫ مﺪـــﻋ ،HCV

ﺖﻋﺎﻄﺘﺳا ﻢﺸـﭼ ﺶﯾﺎـﻣزآ ﻦﯾا مﺎﺠﻧا زا ًﺎﺒﻟﺎﻏ نارﺎﻤﯿﺑ ،ﯽﻟﺎﻣ ﯽـﺷﻮﭘ

ﯽﻣ ﺪﻨﻨﮐ . ﻪـﺑ ﺖﺒﺴـﻧ نآ لزﺎـﻧ ﺖـﻤﯿﻗ و شور ﻦـﯾا يﺮﯿﮔرﺎﮑﺑ ﺎﺑ

ﺖﯿﮐ ﯽﻣ ،دﻮﺟﻮﻣ يرﺎﺠﺗ يﺎﻫ ﯽﯾاﺪـﺘﺑا ﻞـﺣاﺮﻣ رد ار يرﺎﻤﯿﺑ ناﻮﺗ

ﻪﺑ ﺖﺒﺴﻧ و دﻮﻤﻧ ﯽﯾﺎﺳﺎﻨﺷ دﺮﮐ ماﺪﻗا نآ نﺎﻣرد

. ﺎـﺑ ﺎـﺗ ﺖﺳا ﺪﯿﻣا

ﺖــﻬﺟ رد ﺰﯿﭼﺎــﻧ ﺪــﻨﭼﺮﻫ ﯽﻣﺎــﮔ شور ﻦــﯾا ندﻮــﻤﻧ يدﺮﺑرﺎــﮐ رﻮﺸﮐ ﯽﯾﺎﻓﻮﮑﺷ ﻪﺑ ﻼﺘﺒﻣ نارﺎﻤﯿﺑ ﻪﺑ ﮏﻤﮐ و

ﻪﮐHCV زا ًاﺮـﺜﮐا

ﺸﻗ ﺮ ﯽﺑ و ﺪﻣآرد ﻢﮐ ﻢﯿﺷﺎﺑ ﻪﺘﺷادﺮﺑ ،ﺪﻨﺘﺴﻫ ﻪﻌﻣﺎﺟ ﺖﻋﺎﻀﺑ

.

ﯽﻧادرﺪﻗ و ﺮﮑﺸﺗ

حﺮﻃ ﺮﺿﺎﺣ ﺶﻫوﮋﭘ و هدﻮﺑHSR

نآ ﯽﻟﺎﻣ ﯽﻣﺎﺣ هﺎﮕﺸﻧاد

مﻮﻠﻋ نﺎﺘﺳﺮﻟ ﯽﮑﺷﺰﭘ ﯽﻣ

ﺪﺷﺎﺑ . رﻮـﻣا ﺮﯾﺪـﻣ يرادرﻮـﺧﺮﺑ يﺎـﻗآ زا

هﺎﮕﺸﯾﺎﻣزآ ﺎﻫ ﺖـﺷاﺪﻬﺑ ﺖـﻧوﺎﻌﻣ ﺲﻧاﺮـﻓر ﺰـﮐﺮﻣ ﻞﻨـﺳﺮﭘ ﻪﯿﻠﮐ و

يرﺎﯾ ﻖﯿﻘﺤﺗ ﻦﯾا مﺎﺠﻧا رد ار ﺎﻣ ﻪﮐ نﺎﺘﺳﺮﻟ ﯽﮑﺷﺰﭘ مﻮﻠﻋ هﺎﮕﺸﻧاد ﺮﮑﺸﺗ ﻪﻧﺎﻤﯿﻤﺻ ،ﺪﻧدﻮﻤﻧ ﯽﻣ

ﻢﯿﯾﺎﻤﻧ .

(10)

References

1. Lee MH, Yang HI, Yuan Y, L'Italien G, Chen CJ. Epidemiology and natural history of hepatitis C virus infection. World J Gastroenterol. 2014; 28: 9270-80.

2. Wiessing L, Ferri M, Grady B, Kantzanou M, Sperle I, Cullen KJ, et al. Hepatitis C Virus Infection Epidemiology among People Who Inject Drugs in Europe: A Systematic Review of Data for Scaling Up Treatment and Prevention. PLoS One.

2014; 9:1-19.

3. McGravey MJ, Houghton M. Structure and Molecular virology: Viral hepatitis. 3rd edition, Blackwell. USA; 2005, pp. 381- 406.

4. Khodabandehloo M, Roshani D. Prevalence of hepatitis C virus genotypes in Iranian patients: a systematic review and meta- analysis. Hepat Mon. 2014; 14: 1-12.

5. Samimi-Rad K, Nasiri Toosi M, Masoudi- Nejad A, Najafi A, Rahimnia R, Asgari F, et al. Molecular epidemiology of hepatitis C virus among injection drug users in Iran: a slight change in prevalence of HCV genotypes over time. Archives of virology.

2012; 157:1959-1965.

6. Chevaliez S, Pawlotsky JM. Use of virologic assays in the diagnosis and management of hepatitis C virus infection.

Clin Liver Dis. 2005; 9: 371-382.

7. Raghuraman S, Thermozhi S, Dolly D.

Occurrence of false positive during testing for antibodies of hepatitis C virus among volunteer blood donors in India. J Clin Microbiol. 2003;41:1788-1790.

8. Gullett JC, Nolte FS. Quantitative nucleic acid amplification methods for viral infections. Clin Chem. 2015; 61:72-78.

9. Franciscus A. HCSP Publication. An overview of HCV diagnostic tests.

http://www.hcvadvocate.org. 2015.

10. Wilkins T, Malcolm JK, Raina DD, Schade RR. Hepatitis C: Diagnosis and Treatment.

Am Fam Physician. 2010; 81: 1351-1357.

11. Jabbari H, Zamani F, Hatami K, Sheikholeslami A, Fakharzadeh E, Shahzamani K, et al. Pegaferon in hepatitis C: Results of a Multicenter Study. Middle East J Dig Di. 2011; 3:110-114.

12. Davis GL. Monitoring of viral levels during therapy of Hepatitis. Hepatology. 2002;

36:145-151.

13. Jabbari H, Bayatian A, Sharifi AH, Zaer- Rezaee H, Fakharzadeh E, Asadi R, et al.

Safety and efficacy of locally manufactured pegylated interferon in hepatitis C patients.

Arch Iran Med. 2010; 13: 306-312.

14. Khalvati Fahlyani Bو Behzad-Behbahani A, Taghavi SA, Farhadi A, Salehi S, Adibzadeh S, et al. Development of an In- House TaqMan Real Time RT-PCR Assay to Quantify Hepatitis C Virus RNA in Serum and Peripheral Blood Mononuclear Cells in Patients With Chronic Hepatitis C Virus Infection. Hepat Mon. 2015; 15:

e28895.

15. Shahzamani K, Sabahi F, Merat S, Sadeghizadeh M, Esmaeil Lashkarian H, of hepatitis C virus RNA in HCV-infected patients by real-time RT-PCR using SYBR Green I. Arch Iran Med. 2011; 14: 396-400.