наука и здравоохранение, №2, 2014
Статьи
89 УДК 616-022.7-616-03-057.874
А.Ж. Байбусинова, Е.А. Сундеева, О.А. Заворохина, В.К. Сундеева Государственный медицинский университет города Семей
ИЗУЧЕНИЕ ДЕЙСТВИЯ НЕКОТОРЫХ РАСТЕНИЙ НА СОСТОЯНИЕ
БАКТЕРИОНОСИТЕЛЬСТВА ЗОЛОТИСТОГО СТАФИЛОКОККА СРЕДИ ШКОЛЬНИКОВ
Аннотация
В данной статье представлены результаты обследования группы школьников с целью выявления числа бактери- оносителей золотистого стафилококка, а также результаты изучения бактерицидного действия чистотела и парме- лии (как in vitro, так и in vivo) на выделенные штаммы золотистого стафилококка.
Ключевые слова: бактерионосители золотистого стафилококка, чистотел, пармелия.
Актуальность
Ротоглотка здоровых людей населена различными микро-организмами, в основном условно-патогенными.
При ослабленном иммунитете, связанном с различными причинами, могут возникнуть острые респираторные инфекции, как эндогенного, так и экзогенного происхож- дения.
Очень широко в популяциях людей распространены патогенные и условно-патогенные стафилококки. По многочисленным данным у 30 - 50% здоровых людей выделяются патогенные стафилококки со слизистой оболочки носа. Подобное латентное носительство впо- следствии может обостряться и закончиться острыми респираторными заболеваниями верхних дыхательных путей.
Как известно, наиболее часто в школьном возрасте встречаются инфекционные заболевания, передающи- еся воздушно-капельным путем. Этому способствует как высокая восприимчивость, так и большая скучен- ность в детском коллективе. Условно-патогенные мик- роорганизмы, попадая в организм человека в опреде- ленных условиях (хроническая усталость, снижение иммунитета, психическое перенапряжение, физическая усталость, стрессовое состояние) способствуют разви- тию болезни. С другой стороны, специфическая профи- лактика таких заболеваний практически отсутствует, а лечение антибиотиками может быть недостаточно при- емлемым по многим причинам. Все это заставляет про- водить поиск других средств.
В последние годы значительно возрос интерес к растительным препаратам, которые практически лише- ны недостатков, присущих антибиотикам и другим син- тетическим лекарствам. В ходе длительной эволюции человек пользуется лекарственными растениями, кото- рые не оказывают вреда, обладают более мягким дей- ствием, менее токсичны, не вызывают привыкания и аллергии. Растения не только не угнетают защитные силы организма, а наоборот, активны в отношении штаммов микроорганизмов, уже приобретших устойчи- вость против антибиотиков, и способны усиливать им- мунитет человека, помогая ему тем самым справиться с любой болезнью.
Помимо терапевтических возможностей использо- вания лечебных растений, особое значение имеет при- менение последних для профилактического очищения организма.
Цель нашего исследования: изучение микробной обсемененности ротоглотки здоровых школьников и изучение чувствительности выделенных штаммов к препаратам растительного происхождения.
Было поставлено несколько задач исследования:
-изучить микробную обсемененность ротоглотки, учащихся одной из школ города Семей с целью обна- ружения золотистого стафилококка;
-провести идентификацию выделенных щтаммов;
-выявить антибактериальную активность чистотела и лишайника пармелия в отношении штаммов золоти- стого стафилококка;
-предложить профилактические мероприятия, поз- воляющие снизить заболеваемости среди учащихся.
Материалы и методы:
1.Объекты исследования:
-лицеисты ГУ «Экономический лицей» как предпола- гаемые носители стафилококка,
- изолированные штаммы стафилококка, - местные растения (чистотел и пармелия) 2. Исследуемый материал:
- смывы со слизистой зева учащихся,
-настои чистотела и пармелии для изучения их бак- терицидных свойств.
Исследуемые растения и приготовление насто- ев. Чистотел собирали в течение лета, заготавливали листья цветущего растения, высушивали при комнатной температуре, хранили в сухих бумажных пакетах
Пармелию собирали на песчаных склонах ленточно- го бора в течение апреля, мая, сохраняли в бумажных пакетах.
Настойки из чистотела и пармелии изготавливали следующим образом: 500 мл кипятка заливали 1 столо- вую ложку сырья, 4 часа настаивали, процеживали.
2. Методы исследования:
Бактерионосительство а также изучение бактери- цидных свойств растений проводили общепринятым бактериологическим методом
Схема исследования:
Забор материала проводили стерильными тампо- нами со слизистой зева учащихся. Тампоны помещали в пробирки с питательной средой и затем использовали для посевов с целью выделения стафилококков. Всего было собрано 25 образцов для бактериологического исследования.
Посев исследуемого материала проводили обыч- ным способом на поверхность среды Чистовича (жел- точно – солевой агар) и на молочно-солевой агар. Чаш- ки помещали в термостат. На следующий день изучали выросшие колонии, описывали их культуральные свой- ства. Идентификацию отобранных колоний проводили по культуральным, морфологическим и тинкториальным свойствам. Подтверждением патогенных свойств выде- ленных штаммов служило определение лецитиназной активности на среде Чистовича.
наука и здравоохранение, №2, 2014
Статьи
90
Для изучения противобактериальных свойств чисто- тела и пармелии использовали специально приготов- ленные среды, содержащие настои данных растений.
Каждый выделенный штамм засевали на три чашки Петри: одна с обычным мясопептонным агаром, другие – с агаром, содержащим настои чистотела или парме- лии. Посев производили следующим образом: готовили суспензию из выросшей чистой культуры на физиологи- ческом растворе, готовили разведения: от 1:10 до 1:100 000. Использовали для работы последнее разведение.
В приготовленные чашки Петри со средами наливали на поверхность среды 1 мл приготовленной суспензии, осторожно распределяли ее по поверхности агара (шпателем Дригальского). Культивировали в термоста- те. Спустя сутки изучали рост и подсчитывали число выросших колоний на всех чашках. Вычисляли средний показатель числа колоний на всех чашках. Определяли соотношение числа колоний на контрольной среде и числа колоний на средах с настоями испытуемых рас- тений.
Следующая серия опытов заключалась в том, что группе учащихся, у которых брали мазки из ротоглотки для выделения стафилококка, и у которых был выделен стафилококк, предлагалось полоскать ротовую полость и глотку настоями чистотела и пармелии. Для этого составили две группы по 7 человек, так как группа под- твержденных бактерионосителей – 14 человек. Одной группе давали для полоскания настой чистотела, другой – пармелии. Эту процедуру совершали 2-3 раза в день в течение 2 недель. После этого вновь брали мазки и делали посевы на среды Чистовича для выделения предполагаемого стафилококка. Обнаруженные коло- нии идентифицировали по культуральным, морфологи- ческим и другим свойствам.
Результаты и обсуждение
При культивировании исследуемого материала, взя- того у 25 школьников для выявления бактерионоси-
тельства, такие бактерионосители были действительно обнаружены. Всего было выделено 14 штаммов золоти- стого стафилококка. Таким образом, процент бактерио- носителей составил 56.
Все штаммы были лецитиназоположительны, с ти- пичными морфологическими и культуральными свой- ствами, что позволило идентифицировать их как пато- генный золотистый стафилококк.
Носители Staf.aureus
Рис.1. Относительное число здоровых носителей золотистого стафилококка среди учащихся Изучение бактерицидных свойств чистотела При посеве на чашки Петри с МПА (мясопептонный агар) – контроль - и на чашки, содержащие МПА + настой чистотела было обнаружено следующее: на МПА число выросших колоний в среднем составило 50, на среде с чистотелом – 45.
Изучение бактерицидных свойств пармелии При посеве выделенных штаммов на среды с пар- мелией, соотношение числа колоний по сравнению с контролем составило: 50: 28
Рис.2. Показатель чувствительности штаммов
St.aureus к отварам чистотела (Ч) и пармелии (П) Рис. 3.Сравнительная характеристика бакте- рицидного действия чистотела и пармелии Результаты обследования на бактерионоси-
тельство учащихся после проведения профи- лактических мероприятий.
После проведения профилактических мероприя- тий, а именно после использования настоев чистоте- ла и пармелии для полоскания, вновь культивирова- ли образцы исследуемого материала на средах Чи-
стовича. Обнаружили следующее: 1 группа (полоска- ние ротоглотки настоем чистотела) - из 7 образцов ротоглоточных смывов выделено 5 штаммов стафи- лококка золотистого. 2 группа (полоскание ротоглотки настоем пармелии) – из 7 образцов ротоглоточных смывов выделено 3 штамма стафилококка золотисто- го.
44%
56%
11 человек 14 человек
50
45
28
0 10 20 30 40 50 60
МПА МПА+Ч МПА+П
100 90
56
0 20 40 60 80 100 120
МПА МПА+Ч МПА+П
Абсолютное число колоний % выросших колоний
наука и здравоохранение, №2, 2014
Статьи
91
Рис. 4. Показатель высеваемости штаммов стафилококка до и после санации отварами чистотела и пармелии Заключение.
Таким образом, наши исследования показали, что определенный процент учащихся являются бактери- оносителями золотистого стафилококка, что создает эпидемиологический очаг в школьном коллективе.
Настои цветкового растения чистотел и лишайни- ка пармелия обладают определенным противомик- робным действием, что подтверждено бактериологи- ческим методом и при проведении санации школьни- ков.
Выводы:
1. 56 % обследованных школьников являются здоровыми носителями золотистого стафилококка.
2. Культивирование выделенных штаммов стафи- лококка в среде с добавлением настойки чистотела снижает количество выросших колоний на 10%.
3. Культивирование выделенных штаммов стафи- лококка в среде с добавлением настойки пармелии снижает количество выросших колоний на 56%.
4. Использование природных местных растений (пармелии и чистотела) обладающих антибактери- альным эффектом приводят к снижению обсеменен- ности ротоглотки школьников патогенными бактерия- ми и снижает риск развития инфекции.
Литература:
1. Kluytmans J, van Belkum A, Verbrugh H. Nasal car- riage of Staphylococcus aureus: epidemiology, underlying mechanisms, and associated risks. Clin Microbiol Rev 1997; 10 (3): 505-20.
2. Eriksen NH, Espersen F, Rosdahl VT, Jensen K. Car- riage of Staphylococcus aureus among 104 healthy persons during a 19-month period. Epidemiol Infect 1995; 115 (1):
51 - 60.
3. Антибактериальная терапия: практическое руко- водство / Под ред. Л. С. Страчунского, Ю. Б. Белоусова, С. Н. Козлова. - М.: Фармединфо, 2000. - 191 с.
4. Дерябин Д. Г. Стафилококки: экология и патогенность / Д. Г. Дерябин. - Екатеринбург: УрОРАН, 2000. - 238 с.
5. Зубов Л. А. Современные проблемы антибиоти- корезистентности в педиатрической клинике / Л. А. Зу- бов // Антибиотики и химиотерапия. - 1998. - № 4. - С.
43–49.
6. Панченко А.В., Покателов А.А., Антонов В.А., и соавт. Распространенность S. aureus у практически здо- ровых людей и больных хирургических и терапевтиче- ских стационаров, молекулярно-генетическое типирова- ние этих микроорганизмов // Проблемы и перспективы современной науки: сборник научных трудов. – вып. 2. – Томск, 2008. – С. 32-36.
Тұжырым
ОҚУШЫЛАР АРАСЫНДА АЛТЫНДАЛҒАН СТАФИЛОКОККТЫҢ БАКТЕРИЯ ИЕЛЕНУШІЛЕРІ ЖАҒДАЙЫНА КЕЙБІР ӨСІМДІКТЕРДІҢ ӘСЕРІН ЗЕРДЕЛЕУ
А.Ж. Байбусинова, Е.А. Сундеева, О.А. Заворохина, В.К. Сундеева Семей қаласының Мемлекеттік медицина университеті
Оқушылар тобын тексеру нәтижелері алтындалған стафилококктың бактерияиеленушілердің анық санын көрсетті. Алтындалған стафилококктың белгіленген штаммдарына сүйел шөптің және пармелияның (in vitro-да, in vivo – дағы сияқты) бактерицидті әсерін зерделеу осы белгілерін растады, ал алынған нәтижелерді салыстыру пармелия тұнбасының аса тиімділігін көрсетті.
Негізгі сөздер: алтындалған стафилококктың бактерияиеленушілер, сүйелшөп, пармелия.
Summary
STUDY OF EFFECT OF SOME PLANTS ON CONDITION OF BACTERIA CARRYING OF AUROCOCCUS AMONG PUPILS A.Z. Baibusinova, E.A. Sundeeva, O.A. Zavorohina, V.K. Sundeeva
Semey State Medical University
Inquiry results of group of pupils showed the presence of fixed number of bacteria carriers of aurococcus. Study of bacte- ricidal action of celandine and parmelia (just as in vitro so and in vivo) in separated strain of aurococcus confirmed these properties and comparison of findings showed the biggest efficiency of parmelia infusion.
Key words: bacteria carrying of aurococcus among pupils, celandine, parmelia.
0 1 2 3 4 5 6 7 8
До После
Чистотел Пармелия
Абсолютное число штаммов
![Ключевые слова: периферические, центральные лимфоидные органы, миграционная способность.
Лимфоидная ткань мгновенно реагирует на любые стрессовые воздействия, играет существенную роль в процессе гомеостаза. Так отмечена возможность лимфоидного пика в активации кроветворения, установлены изменения физиологических свойств и клеточной популяции лимфоидной ткани костного мозга, способствующие повышению резистентности организма эмоциональном стрессе [1,2].
Характерной чертой радиационного воздействия является длительное сохранение повреждений в отдельных звеньях системы иммунитета и сопряженных с ним отдаленных последствий и осложнений, проявляющихся в ускорении процессов старения, быстрым прогрессированием хронических заболеваний внутренних органов, латентно протекающих в период формирования, а также развитием злокачественных новообразований [3,4,5].
При действии высоких доз радиации в ближайшем периоде отмечается иммуносупрессия в различных звеньях иммунной системы, приводящая к иммунодефицитному состоянию [7,8,9], тогда как в отдаленном периоде после сублетального гамма излучения изменения в периферических лимфоидных органах иммунной системы представляет большой интерес, так как не изучалось состояние селезенки и лимфатических узлов тонкого кишечника в отдаленном периоде после воздействия сублетального гамма-излучения.
Целью работы явилось изучение функционального состояния селезенки и лимфатических узлов тонкого кишечника в отдаленном периоде после острого воз-действия гамма-излучения.
Материал и методы исследования
Для решения поставленной цели нами были выполнены 4 серии опытов на 115 белых беспородных половозрелых крысах. 1 серия – интактные (n=15), 2-я серия и 3-я серия облученные сублетальной дозой гамма-излучения 6 Гр. через 1 (ближайший период) и 3 месяца (отдаленный период) соответственно, 4 – облученные + эмоциональный стресс.
2, 3 и 4 серий животных подвергли общему облучению на радиотерапевтической установке «Луч-1» мощностью 125 Р в час гамма-лучами 60Со в дозе 6 Гр. Во время облучения животные находились в специально сконструированной камере из органического стекла, с изолированными ячейками для отдельных животных. Время экспозиции для получения дозы 6 Гр составило 9 мин 24 сек.
4 - серию подвергли эмоциональному стрессу [10]. У всех животных до и после ионизирующего облучения в селезенке и лимфатических узлах тонкого кишечника определяли массу, лимфоидный индекс и количество лимфоидных клеток. Клеточные суспензии готовили из селезенки и лимфатических узлов тонкого кишечника, определяли массу подопытных животных. Осуществляли подсчет кариоцитов и определяли их жизнеспособность. Количество лимфоидных клеток в селезенке и лимфатических узлах тонкого кишечника определяли определяли по методике О.И. Белоусовой и М.И. Федотовой (1983) [11]. Определение лимфоидного индекса селезенки выполнялось по методике Е.Д. Гольдберга и соавт. (1972) [12], а в лимфатических узлах тонкого кишечника - по методу Б.А. Жетписбаева (1995) [13].
Полученные цифровые данные обрабатывались общепринятыми методами вариационной статистики по методике Е.В. Монцевичюте-Эрингене (1966) [14].
Результаты и обсуждение
Из таблицы 1 видно, что после сублетального гамма-облучения в дозе 6 Гр В лимфатических узлах тонкого кишечника отмечается достоверное снижение массы, числа лимфоидных клеток и лимфоидного индекса на 28%, 27% и 28% соответственно (P](data:image/gif;base64,R0lGODlhAQABAIAAAP///wAAACH5BAEAAAAALAAAAAABAAEAAAICRAEAOw==)