4) Memeriksa hasil uji (O’Neill 1986)
4.3 Aktivitas Antimalaria
4.3.4 Inhibitory Concentration
Inhibitory concentration (IC50) merupakan konsentrasi obat yang diperlukan untuk menghambat 50% pertumbuhan parasit (Kusch 2011). Kohler (2002) melaporkan bahwa suatu ekstrak yang memiliki efek antimalaria secara in vitro apabila memiliki nilai IC50 sebesar 50 μg/mL, sedangkan pada tingkat fraksi IC50 lebih kecil dari 25 μg/mL, dan senyawa murni IC50lebih kecil dari 1 μM.
Gambar 16. Grafik daya hambat ekstrak teripang keling (H. atra) terhadap pertumbuhan parasit P. falciparum
Keterangan : Metanol A : maserasi bertingkat, Metanol B : maserasi tunggal
% P ar as it em ia Konsentrasi ekstrak (μg/mL)
Nilai IC50 pada penelitian ini diperoleh melalui analisis probit menggunakan program SPSS 13. Analisis probit menggunakan SPSS 13 juga digunakan pada beberapa penelitian pengujian aktivitas antimalaria diantaranya adalah oleh Syarif (2007) dan Rehena (2010). Probit digunakan untuk menganalisis berbagai jenis respon dosis yaitu untuk menguji respon dari suatu organisme dalam berbagai konsentrasi bahan kimia. Hubungan antara dosis dan respon terjadi secara linear membentuk grafik sigmoid sehingga bisa dijalankan fungsi regresi. Hasil analisis diperoleh nilai IC50 setiap ekstrak yang dpat dilihat pada Tabel 9.
Tabel 9. Nilai IC50 ekstrak teripang keling
Ekstrak Nilai IC50 (μg/mL)
n-Heksana 372,04
Etil asetat 70179,71
Metanol bertingkat 1913,08
Metanol tunggal 6208,64
Mekanisme penghambatan pertumbuhan parasit Plasmodium berbeda untuk masing-masing obat antimalaria, bergantung pada jenis senyawa yang terkandung dalam bahan tersebut. Aryanti et al. (2006) melaporkan bahwa sulfadoksin-pirimetamin menghambat pertumbuhan Plasmodium dengan cara pembentukan asam folat. Obat ini akan mengikat enzim dihidropotreroat sintase dan dihidrofolat reduktase. Asam folat diperlukan Plasmodium untuk pembentukan asam nukleat pada inti. Mekanisme penghambatan artemisinin adalah dengan menghambat enzim PfATP6 yaitu enzim yang mirip dengan enzim ATPase di dalam sitoplasma. Artemisinin akan masuk ke dalam sel parasit kemudian diaktifkan oleh ion besi dekat enzim PfATP6 dalam retikulum endoplasma dan terlibat dalam reaksi reduksi hemikatalisis yang menghasilkan senyawa sitotoksik. Senyawa ini mengikat dan menghambat PfATP6 secara irreversible dan spesifik.
5.1 Kesimpulan
Ekstraksi menggunakan metode maserasi bertingkat pada sampel teripang keling (Holothuria atra) dengan pelarut heksana, etil asetat, dan metanol masing-masing menghasilkan rendemen ekstrak kasar sebanyak 0,42%, 0,57% dan 11,00%. Rendemen ekstrak metanol maserasi tunggal sebesar 29,20%. Ekstrak teripang mengandung senyawa golongan alkaloid, steroid, saponin, dan asam amino. Ekstrak kasar yang diujikan terhadap kultur Plasmodium falciparum
menunjukkan aktivitas penghambatan ditandai dengan semakin rendahnya angka parasitemia. Pemberian ekstrak heksana berbeda nyata terhadap ketiga ekstrak yang lain. Angka parasitemia terkecil ditunjukkan ekstrak heksana pada konsentrasi 2560 μg/mL yaitu 0,74. Angka tersebut lebih tinggi daripada angka parasitemia kontrol positif pada arterakin dan kuinin yang masing-masing sebesar 0,64 dan 0,67. Nilai IC50 terendah adalah pada ekstrak heksana yaitu sebesar 372,04 μg/mL.
5.2 Saran
Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui sumber antimalaria dari teripang dan senyawa aktif yang menunjukkan aktivitas antimalaria. Selain itu, perlu dilakukan pengujian aktivitas antimalaria secara in vivo.
Adendorff MR. 2010. Marine anti-malarial isonitriles : a synthetic and computational study [thesis]. Grahamstown : Rhodes University.
Aryanti, Ermayanti TM, Ika PK, Dewi RM. 2006. Uji daya antimalaria Artemisia
spp. terhadap Plasmodium falciparum. Majalah Farmasi Indonesia, 17(2), 81 – 84.
Aziz A. 1987. Beberapa catatan tentang perikanan teripang di indonesia dan kawasan indo pasifik barat. JurnalOseana VIII (2) : 68-78.
Bordar S, Anwar F, Saari N. 2011. High-value components and bioactives from sea cucumbers for functional foods. Jurnal Marine Drugs (9) : 1761-1805 Choo PS. 2008. Population status, fisheries and trade of sea cucumbers in Asia. In
V. Toral-Granda, A. Lovatelli and M. Vasconcellos (eds). Sea cucumbers. A global review of fisheries and trade. FAO Fisheries and Aquaculture Technical Paper. 516 : 81-118
Conand C. 1990. The fishery resources of pacific island countries part 2. Holothurians. FAO Fisheries Technical Paper 272 : 143
Darsono P. 1993. Kandungan substansi bioaktif pada teripang. Journal Oseana XVIII (3) : 87-94
Darsono P. 2003. Sumberdaya teripang dan pengelolaannya. Journal Oseana XXVIII (2) : 1-9
[Depkes]. Departemen Kesehatan, Direktorat Jenderal Pengendalian Penyakit dan Penyehatan Lingkungan. 2008. Pedoman Penatalaksanaan Kasus Malaria di Indonesia.
Dewi KH. 2008. Kajian ekstraksi steroid teripang pasir (Holothuria scabra) sebagai sumber testosteron alami [tesis]. Bogor : Sekolah Pascasarjana Institut Pertanian Bogor.
Dobretsov S, Al-Mammari M, Soussi B. 2009. Bioactive compounds from omani sea cucumbers. Sultan Qaboos University. Journal Agricultural and Marine Sciences
Gandahusada S, Illahude HH, Pribadi W, editor. 1998. Parasitologi Kedokteran
Harborne JB. 1987. Metode Fitokimia. Ed. ke-2. Padmawinata K, Sudiro I, penerjemah. Bandung: ITB. Terjemahan dari: Phytohemical Method.
Hafid AF, Maharani WT, Widyawaruyanti A. 2011. Model terapi kombinasi ekstrak etanol 80% kulit batang cempedak (Artocarpus champeden spreng.) dan artesunat pada mencit terinfeksi parasit malaria. Journal Indonesia Medical Association : 61 : 4
Hiswani. 2004. Gambaran penyakit dan vektor malaria di Indonesia. Fakultas Kesehatan Masyarakat. Universitas Sumatera Utara
Hu XQ, Wang YM, Wang JF, Xue Y, Li ZJ, Nagao K, Yanagita Ti, Xue CH. 2010. Dietary saponins of sea cucumber alleviate orotic acid-induced fatty liver in rats via PPARa and SREBP-1c signaling. Biomedical Central
Hutomo R, Sutarno, Wien W, Kusmardi. 2005. Uji antimalaria ekstrak buah
Morinda citrifolia dan aktivitas makrofag pada mencit (Mus musculus) setelah diinfeksi Plasmodium berghei. Biofarmasi 3 (2): 61-69
Johns T, Arnold W, Thomas J, Saleh MM. 2011. Antimalarial alkaloids isolated from Annona squamosa. Journal of Phytopharmacology 1(3) : 49-53
Kannan A, Navam H, Satya N. 2009. Colon and breast anti-cancer effects of peptide hydrolysates derived from rice bran. The Open Bioactive Compounds (2) : 17-20
Kaur K, Jain M, Kaur T, Jain R. 2009. Antimalarials from nature. Bioorganic and Medical Chemistry
Kohler I, Siems J, Siems K, Hernandes MA. 2002. In vitro antiplasmodial investigation of medical plants from El Savador. Bioscience. (57)
Kordi MG. 2010. A to Z Budidaya Biota Akuatik untuk Pangan, Kosmetik, dan Obat-obatan. Yogyakarta : Lily Publisher
Kusch P, Deininger S, Specht S, Maniako R, Haubrich S, Pommerening T, Lin PK, Hoerauf A, Kaiser A. 2011. In vitro and in vivo antimalarial activity assays of seeds from Balanites aegyptiaca : compounds of the extract show growth inhibition and activity against plasmodial aminopeptidase. Parasitology Research
Kustiariyah. 2006. Isolasi dan uji aktivitas biologis senyawa steroid dari teripang sebagai aprosidiaka alami [tesis]. Bogor : Sekolah Pascasarjana Institut Pertanian Bogor
Martoyo SM, Nugroho, Winarto T. 2000. Budidaya Teripang. Jakarta : Penebar Swadaya.
Mayer A, Rodríguez AD, Berlinck RG, Nobuhiro F. 2011. Marine pharmacology in 2007–8: Marine compounds with antibacterial, anticoagulant, antifungal, anti-inflammatory, antimalarial, antiprotozoal,antituberculosis, and antiviral activities; affecting the immune and nervous system, and other miscellaneous mechanisms of action. Comparative Biochemistry and Physiology, Part C 153: 191–222
Muchtadi, Hartoyo. 2005. Uji aktivitas antimalaria ekstrak daun tumbuhan ayam (Erythrina variegata L.) dan puspa (Schima wallichii Korth). Penelitian Sains & Teknologi. 6 (1) : 14 - 25
Murtihapsari. 2010. Penapisan bahan aktif spons Xestospongia sp. dan Haliclona
sp. asal papua serta aktivitasnya dalam menghambat pertumbuhan
Plasmodium falciparum galur W2 dan D6 secara in vitro [tesis]. Bogor: Sekolah Pascasarjana Institut Pertanian Bogor.
Nurjanah S. 2008. Identifikasi steroid teripang pasir (Holothuria scabra) dan pemanfaatannnya sebagai sumber steroid alami [disertasi]. Bogor: Sekolah Pascasarjana Institut Pertanian Bogor.
O’Neill MJ, Bray DH, Boardman P, Phillipson JD, Warhurst DC, Peters W, Suffness M. 1986. Plants as sources of antimalarial drugs: in vitro antimalarial activities of some quassinoids. American Society for Microbiology. 3 (1) : 101-104
Orhan I, Bilge S, Marcel K, Reto B, Deniz T. 2010. Inhibitory activity of marine sponge-derived natural products against parasitic protozoa. Marine Drugs
(8) : 47-58
Orhan I, Ozcelik B, Konuklugil B, Putz A, Kaban UG, Proksch PR. 2012. Bioactivity Screening of the Selected Turkish Marine Sponges and Three Compounds from Agelas oroides. Journal of Natural Product : 356-367 Patar A, Jaafar H, Jamalullail SM, Abdullah JM. 2012. The bogy wall extract of
Stichopus variegatus promotes repair of acute contused spinal cord injury in rats by improving motor function and reduces intramedullary hemorrhage.
Biomedical and Health Reaserch. 23 (4) : 483-494
Pandey AV, Tekwani BL, Singh RL, Chauh VS. 1999. Artemisin an endoperoxide antimalarial disrupts the hemoglobin catabolism and heme detoxification systems in malarial parasite. Journal of Biological Chemistry. Vol. 274 (27) Pranoto EN, Ma’ruf WF, Pringgenies D. 2012. Kajian aktivitas bioaktif teripang pasir (Holothuria scabra) terhadap jamur Candida albicans. Jurnal Pengolahan dan Bioteknology Hasil Perikanan 1 (1) : 1-8
Praptiwi, Harapini M, Chairul. 2007. Uji aktivitas antimalaria secara in-vivo ekstrak ki pahit (Picrasma javanica) pada mencit yang diinfeksi
Plasmodium berghei. Journal Biodiversitas. 8 (2) : 111-113
Pujiono. NA. 2007. Kajian awal kandungan gizi dan potensi anti-asma dari tepung teripang getah (Holothuria vacabunda). [skripsi]. Bogor : Institut Pertanian Bogor
Purwantiningsih. 2003. Artemisinin dari Artemisia sacrorum, Ledeb dan turunannya sebagai komponen bioaktif antimalaria [disertasi]. Bogor : Sekolah Pasca Sarjana Institut Pertanian Bogor
Radji M. 2005. Peranan bioteknologi dan microba endofit dalam pengembangan obat herbal. Majalah Ilmu Kefarmasian. II (3) : 113- 126
Ravichandran, Kathiresan K, Balaram H. 2007. Anti-malarials from marine sponges. Biotechnology and Molecular Biology Review. 2 : 033-038
Rehena J.F. 2010. Uji aktivitas ekstrak daun pepaya (Carica papaya. Linn) sebagai antimalaria in vitro. Jurnal Ilmu Dasar 11 (1) : 96 –100
Rowe FWE. 1969. A review of the family Holothuriidae (Holothuroidea, Aspidochirotida). Zoology. 18 : 217-250
Scale F, Ernesto F, Marialuisa M, Orazio TC, Michelle T, Marcel K, Deniz T. 2010. Bromopyrrole alkaloids as lead compounds against protozoan parasites. Marine Drugs 2010. 8 : 2162-2174
Sendih SG. 2006. Keajaiban Teripang Penyembuh Mujarab dari Laut. Jakarta : Agro Media Pustaka.
Senecheau CV, Marcel K, Isabelle D, Antoine V, Isabelle M, Anne MR. 2011. Antiprotozoal activities of organic extracts from french marine seaweeds.
Marine Drugs. 9 : 922-933
Simanjuntak P. 1995. Tumbuhan sebagai Sumber Zat Aktif Antimalaria. Puslitbang Bioteknologi-LIPI. Buletin Penelitian Kesehatan. 23 (2)
Singh B, Lee KS, Asmad M, Anand R, Sunita SG, Janet CS, Alan T,David JC. 2004. A large focus of naturally acquired Plasmodium knowlesi infections in human beings. The Lancet. 363
Siregar N. 2012. Uji fitokimia dan potensi teripang (Stichopus horrens) sebagai antioksidan [skripsi]. Bogor : Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Institut Pertanian Bogor
Syamsudin. 2002. Mekanisme kerja obat antimalaria. Bagian Farmakologi Fakultas Farmasi Universitas Pancasila. Jakarta Selatan.
Syari RA, Mae SH, Mustofa, Ngatidjan, Heri K, Said RAH. 2007. Aktivitas antiplasmodium in vitro estrak kembang bulan (Tithonia diversifolia
(Hemsley) A.Gray) terhadap Plasmodium falciparum.Fakultas Kedokteran, Universitas Gajah Mada
Tamaroa T. 1984. The sea cucumber Holothuria atra (Jager, 1833), in south tarawa lagoon (Republic of Kiribati): environmental variability, population biology and fishing pressure [thesis]. Victoria : Master of Science in Marine Biology, University of Wellington
Thoney DA, Schlager N. 2004. Holothuridea. Di dalam Grzimek B, editor. Grzimek’s Animal Life Encyclopedia. New York: Van Nostrand Reinhold Company.
Wiadnyana NN, Puspasari R, Mahulette RT. 2008. Status sumber daya dan perikanan teripang di Indonesia : pemanfaatan dan perdagangan. Kebijakan Perikanan Indonesia (1): 45-60
[WHO] World Health Organization. 2008. In vitro micro-test for the assessment of the response of Plasmodium falciparum to chloroquine, mefloquine, quinine, amodiaquine, sulfadoxine/pyrimethamine and artemisinin
. 2008. World Malaria Report. . 2011. World Malaria Report.
Widyowati, Santa IGP, Rahman Al, Tantular I, Widyawaruyanti A. 2003. Uji in vitro aktivitas antimalaria isolat dari Andrographis paniculata terhadap
Plasmodium falciparum pada stadium gametosit. Majalah Farmasi Airlangga. 3 (3)
Winarno FG. 1992. Kimia Pangan dan Gizi. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama Yuan Y, Yunjun L, Yujian L, Luqi H, Shunqin C, Zhaochun Y, Shuangshuang Q.
2011. High temperature effects on flavones accumulation and antioxidant system in Scutellaria baicalensis Georgi cells. African Journal of Biotechnology 10 (26) : 5182-5192
Zein U, Izwar, Ginting Y, Saragih A, Hadisahputra S, Arrasyid NK, Yulfi H, Sulani F. 2005. Antimalaria effect of chloroquin – sambiloto (Andrographis paniculata Nees) combination compared with chloroquin alone in adult patients of uncomplicated malaria. Medan: Respiratori USU.
Lampiran 1. Perhitungan dosis obat untuk kontrol positif Informasi obat yang digunakan
Nama obat : Arterakine
Bobot tablet : 0,5993 gram = 599,3 mg
Kandungan per tablet (tertulis dalam kemasan) : Dehydroartemisinin (40 mg) dan Piperaquine (160 mg)
Dosis (menurut buku Pedoman penatalaksanaan kasus malaria di indonesia) Dehydroartemisinin = 2-4 mg/KgBB/Hari
Piperaquine -16-32 mg/KgBB/Hari Bobot rata-rata orang dewasa = 70 Kg
JumLah darah = 5 liter = 5000 mL = 5 x 106 μL (micro liter)
Jadi dosis untuk orang dewasa (bobot 70 Kg, volume darah 5 liter) Dehydroartemisinin
Min = (2 x 70) mg/hari = 140 mg Maks = (4x70) mg/hari = 280 mg Piperaquine
Min = (16 x 70) mg/hari = 1120 mg Maks = (32 x 70) mg/hari = 2240 mg
Volume darah kultur dalam plate = 200 μL, MAKA :
5 liter --- 140 mg 5 liter --- 280 mg 200 μL --- ? 200 μL --- ? Dehydroartemisinin 140 mg x 200 μL = 5,6 x 10-3 mg = 5,6 μg 5 x 106 μL 280 mg x 200 μL = 11,2 x 10-3 mg = 11,2 μg 5 x 106 μL Piperaquine 1120 mg x 200 μL = 44,8x10-3 mg = 44,8 μg 5 x 106 μL 2240 mg x 200 μL = 89,6 x 10-3 mg = 89,6 μg 5 x 106 μL
Dalam sediaan tablet yang bobotnya X gram terdapat 40 mg Dehydroartemisinin dan 320 mg Piperaquine
Jika yg dipakai adalah dosis maksimum, Maka untuk mendapatkan 89,6 μg Piperaquine :
599,3 mg x 89,6 μg = 167,804 μg 320 mg
Jadi...
167,804 μg/ 1 mL = 167,804 mg/100 mL
Lampiran 2. Hasil perhitungan eritrosit yang terinfeksi parasit P. falciparum
Pelarut JumLah eritrosit terinfeksi pada tiap-tiap konsentrasi Kontrol
[10] [20] [40] [80] [160] [320] [640] [1280] [2560] Blank Arterakin Quinine
Heksan 157 136 101 98 85 86 65 46 36 152 31 25 134 133 94 86 82 66 62 40 38 133 26 35 Etil Asetat 136 119 105 96 116 128 111 102 83 142 30 36 143 132 144 140 146 123 126 111 112 132 37 34 Metanol Bertingkat 144 127 142 129 136 104 72 82 79 136 41 31 127 132 126 119 106 97 81 77 63 133 32 40 Metanol Tunggal 135 123 125 115 119 119 125 93 68 154 34 36 131 121 131 127 126 115 112 74 72 137 26 32
Lampiran 3. Uji ANOVA 2 arah Between-Subjects Factors Value Label N konsentrasi 1,00 10 ug/mL 4 2,00 20 ug/mL 4 3,00 40 ug/mL 4 4,00 80 ug/mL 4 5,00 160 ug/mL 4 6,00 320 ug/mL 4 7,00 640 ug/mL 4 8,00 1280 ug/mL 4 9,00 2560 ug/mL 4 ekstraksi 1,00 heksana 9 2,00 etil asetat 9 3,00 metanol A 9 4,00 Metanol B 9
Tests of Between-Subjects Effects (Dependent Variable: parasitemia )
Source
Type III Sum
of Squares df Mean Square F Sig.
Corrected Model 9,092(a) 11 ,827 10,599 ,000
Intercept 164,352 1 164,352 2107,407 ,000 konsentrasi 6,676 8 ,835 10,701 ,000 ekstraksi 2,416 3 ,805 10,327 ,000 Error 1,872 24 ,078 Total 175,316 36 Corrected Total 10,964 35
Lampiran 3. Uji Lanjut LSD
Multiple Comparisons
(I) ekstraksi (J) ekstraksi Mean Difference (I-J)
Std.
Error Sig.
95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound
LSD heksana etil asetat -,6978(*) 0,13165 0 -0,9695 -0,4261
metanol A -,4422(*) 0,13165 0,003 -0,7139 -0,1705
Metanol B -,5400(*) 0,13165 0 -0,8117 -0,2683
etil asetat heksana ,6978(*) 0,13165 0 0,4261 0,9695
metanol A 0,2556 0,13165 0,064 -0,0161 0,5273 Metanol B 0,1578 0,13165 0,242 -0,1139 0,4295 metanol A heksana ,4422(*) 0,13165 0,003 0,1705 0,7139 etil asetat -0,2556 0,13165 0,064 -0,5273 0,0161 Metanol B -0,0978 0,13165 0,465 -0,3695 0,1739 Metanol B heksana ,5400(*) 0,13165 0 0,2683 0,8117 etil asetat -0,1578 0,13165 0,242 -0,4295 0,1139 metanol A 0,0978 0,13165 0,465 -0,1739 0,3695
Dependent Variable: parasitemia Based on observed means.
,7175* ,19747 ,001 ,3099 1,1251 -,8825* ,19747 ,000 -1,2901 -,4749 -,6725* ,19747 ,002 -1,0801 -,2649 -,5350* ,19747 ,012 -,9426 -,1274 -,3900 ,19747 ,060 -,7976 ,0176 -,4050 ,19747 ,051 -,8126 ,0026 -,2100 ,19747 ,298 -,6176 ,1976 ,3225 ,19747 ,115 -,0851 ,7301 ,5075* ,19747 ,017 ,0999 ,9151 -1,2050* ,19747 ,000 -1,6126 -,7974 -,9950* ,19747 ,000 -1,4026 -,5874 -,8575* ,19747 ,000 -1,2651 -,4499 -,7125* ,19747 ,001 -1,1201 -,3049 -,7275* ,19747 ,001 -1,1351 -,3199 -,5325* ,19747 ,013 -,9401 -,1249 -,3225 ,19747 ,115 -,7301 ,0851 ,1850 ,19747 ,358 -,2226 ,5926 -1,3900* ,19747 ,000 -1,7976 -,9824 -1,1800* ,19747 ,000 -1,5876 -,7724 -1,0425* ,19747 ,000 -1,4501 -,6349 -,8975* ,19747 ,000 -1,3051 -,4899 -,9125* ,19747 ,000 -1,3201 -,5049 -,7175* ,19747 ,001 -1,1251 -,3099 -,5075* ,19747 ,017 -,9151 -,0999 -,1850 ,19747 ,358 -,5926 ,2226 2560 ug/ ml 10 ug/ml 20 ug/ml 40 ug/ml 80 ug/ml 160 ug/ml 320 ug/ml 1280 ug/ ml 2560 ug/ ml 10 ug/ml 20 ug/ml 40 ug/ml 80 ug/ml 160 ug/ml 320 ug/ml 640 ug/ml 2560 ug/ ml 10 ug/ml 20 ug/ml 40 ug/ml 80 ug/ml 160 ug/ml 320 ug/ml 640 ug/ml 1280 ug/ ml 640 ug/ml 1280 ug/ ml 2560 ug/ ml
Based on observed means.
The mean diff erence is significant at the , 05 level. *.
Multiple Compari sons
Dependent Variable: parasitemia
,2100 ,19747 ,298 -,1976 ,6176 ,3475 ,19747 ,091 -,0601 ,7551 ,4925* ,19747 ,020 ,0849 ,9001 ,4775* ,19747 ,024 ,0699 ,8851 ,6725* ,19747 ,002 ,2649 1,0801 ,8825* ,19747 ,000 ,4749 1,2901 1,2050* ,19747 ,000 ,7974 1,6126 1,3900* ,19747 ,000 ,9824 1,7976 -,2100 ,19747 ,298 -,6176 ,1976 ,1375 ,19747 ,493 -,2701 ,5451 ,2825 ,19747 ,165 -,1251 ,6901 ,2675 ,19747 ,188 -,1401 ,6751 ,4625* ,19747 ,028 ,0549 ,8701 ,6725* ,19747 ,002 ,2649 1,0801 ,9950* ,19747 ,000 ,5874 1,4026 1,1800* ,19747 ,000 ,7724 1,5876 -,3475 ,19747 ,091 -,7551 ,0601 -,1375 ,19747 ,493 -,5451 ,2701 ,1450 ,19747 ,470 -,2626 ,5526 ,1300 ,19747 ,517 -,2776 ,5376 ,3250 ,19747 ,113 -,0826 ,7326 ,5350* ,19747 ,012 ,1274 ,9426 ,8575* ,19747 ,000 ,4499 1,2651 1,0425* ,19747 ,000 ,6349 1,4501 -,4925* ,19747 ,020 -,9001 -,0849 -,2825 ,19747 ,165 -,6901 ,1251 -,1450 ,19747 ,470 -,5526 ,2626 -,0150 ,19747 ,940 -,4226 ,3926 ,1800 ,19747 ,371 -,2276 ,5876 ,3900 ,19747 ,060 -,0176 ,7976 ,7125* ,19747 ,001 ,3049 1,1201 ,8975* ,19747 ,000 ,4899 1,3051 -,4775* ,19747 ,024 -,8851 -,0699 -,2675 ,19747 ,188 -,6751 ,1401 -,1300 ,19747 ,517 -,5376 ,2776 ,0150 ,19747 ,940 -,3926 ,4226 ,1950 ,19747 ,333 -,2126 ,6026 ,4050 ,19747 ,051 -,0026 ,8126 ,7275* ,19747 ,001 ,3199 1,1351 ,9125* ,19747 ,000 ,5049 1,3201 -,6725* ,19747 ,002 -1,0801 -,2649 -,4625* ,19747 ,028 -,8701 -,0549 -,3250 ,19747 ,113 -,7326 ,0826 -,1800 ,19747 ,371 -,5876 ,2276 -,1950 ,19747 ,333 -,6026 ,2126 ,2100 ,19747 ,298 -,1976 ,6176 ,5325* ,19747 ,013 ,1249 ,9401 ,7175* ,19747 ,001 ,3099 1,1251 -,8825* ,19747 ,000 -1,2901 -,4749 (J) konsentrasi 20 ug/ml 40 ug/ml 80 ug/ml 160 ug/ml 320 ug/ml 640 ug/ml 1280 ug/ ml 2560 ug/ ml 10 ug/ml 40 ug/ml 80 ug/ml 160 ug/ml 320 ug/ml 640 ug/ml 1280 ug/ ml 2560 ug/ ml 10 ug/ml 20 ug/ml 80 ug/ml 160 ug/ml 320 ug/ml 640 ug/ml 1280 ug/ ml 2560 ug/ ml 10 ug/ml 20 ug/ml 40 ug/ml 160 ug/ml 320 ug/ml 640 ug/ml 1280 ug/ ml 2560 ug/ ml 10 ug/ml 20 ug/ml 40 ug/ml 80 ug/ml 320 ug/ml 640 ug/ml 1280 ug/ ml 2560 ug/ ml 10 ug/ml 20 ug/ml 40 ug/ml 80 ug/ml 160 ug/ml 640 ug/ml 1280 ug/ ml 2560 ug/ ml 10 ug/ml (I) konsentrasi 10 ug/ml 20 ug/ml 40 ug/ml 80 ug/ml 160 ug/ml 320 ug/ml 640 ug/ml LSD Mean Diff erence
(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound 95% Confidence Int erval
Lampiran 5. Hasil analisis probit untuk IC50 ekstrak n-heksana
Parameter Estimates (PROBIT model: (PROBIT(p)) = Intercept + BX): Regression Coeff. Standard Error Coeff./S.E.
Konsentr ,83136 ,07239 11,48406 Intercept Standard Error Intercept/S.E. -2,13709 ,18063 -11,83157
Pearson Goodness-of-Fit Chi Square = 17,005 DF = 6 P = ,009 Since Goodness-of-Fit Chi square is significant, a heterogeneity factor is used in the calculation of confidence limits.
Number of Observed Expected
Konsentr Subjects Responses Responses Residual Prob 1,30 100,0 3,8 14,561 -10,721 ,14561 1,60 100,0 30,3 21,035 9,255 ,21035 1,90 100,0 34,2 28,947 5,283 ,28947 2,20 100,0 40,3 38,031 2,269 ,38031 2,51 100,0 45,7 47,831 -2,161 ,47831 2,81 100,0 54,6 57,764 -3,164 ,57764 3,11 100,0 69,3 67,225 2,035 ,67225 3,41 100,0 73,6 75,691 -2,141 ,75691 Confidence Limits for Effective Konsentr
95% Confidence Limits Prob Konsentr Lower Upper ,01 ,59205 ,01859 3,13919 ,02 1,25965 ,05980 5,52164 ,03 2,03371 ,12532 7,91175 ... ,45 262,68833 148,15184 469,22865 ,50 372,04198 216,51297 713,75721 ,55 526,91808 306,50515 1120,82928 ... ,98 109883,90946 20770,58216 3482197,48807 ,99 233791,36988 36464,41616 11221757,3835
Lampiran 6. Hasil analisis probit untuk IC50 ekstrak etil asetat
Parameter Estimates (PROBIT model: (PROBIT(p)) = Intercept + BX): Regression Coeff. Standard Error Coeff./S.E.
Konsentr ,43781 ,07237 6,04923 Intercept Standard Error Intercept/S.E. -2,12170 ,18374 -11,54714
Pearson Goodness-of-Fit Chi Square = 19,531 DF = 7 P = ,007 Since Goodness-of-Fit Chi square is significant, a heterogeneity factor is used in the calculation of confidence limits.
Number of Observed Expected
Konsentr Subjects Responses Responses Residual Prob 1,00 100,0 ,3 4,610 -4,342 ,04610 1,30 100,0 10,3 6,032 4,245 ,06032 1,60 100,0 11,0 7,776 3,216 ,07776 1,90 100,0 15,6 9,878 5,761 ,09878 2,20 100,0 6,3 12,369 -6,024 ,12369 2,51 100,0 10,3 15,270 -4,993 ,15270 2,81 100,0 15,3 18,589 -3,308 ,18589 3,11 100,0 23,9 22,323 1,538 ,22323 3,41 100,0 30,3 26,449 3,846 ,26449 Confidence Limits for Effective Konsentr
95% Confidence Limits Prob Konsentr Lower Upper ,01 ,34086 ,00000 5,46869 ,02 1,42961 ,00006 13,52247 ,03 3,55031 ,00084 24,31561 .... ,45 36239,88684 4303,87987 449787252,315 ,50 70179,70682 6563,12451 2954098873,09 ,55 135905,26017 9963,10462 19489889017,9 ... ,98 3445134227,92 5050966,21514 8,68173E+022 ,99 14449505515,6 12080923,9213 5,37830E+024
Lampiran 7. Hasil analisis probit untuk IC50 ekstrak metanol bertingkat Parameter Estimates (PROBIT model: (PROBIT(p)) = Intercept + BX): Regression Coeff. Standard Error Coeff./S.E.
Konsentr ,83706 ,07249 11,54715 Intercept Standard Error Intercept/S.E. -2,74701 ,18858 -14,56672
Pearson Goodness-of-Fit Chi Square = 11,549 DF = 7 P = ,116 Since Goodness-of-Fit Chi square is significant, a heterogeneity factor is used in the calculation of confidence limits.
Number of Observed Expected
Konsentr Subjects Responses Responses Residual Prob 1,00 100,0 3,1 2,807 ,321 ,02807 1,30 100,0 7,4 4,866 2,551 ,04866 1,60 100,0 4,2 7,986 -3,786 ,07986 1,90 100,0 11,3 12,425 -1,075 ,12425 2,20 100,0 13,5 18,352 -4,858 ,18352 2,51 100,0 28,2 25,783 2,367 ,25783 2,81 100,0 45,3 34,529 10,779 ,34529 3,11 100,0 43,2 44,193 -1,029 ,44193 3,41 100,0 49,2 54,217 -4,976 ,54217 Confidence Limits for Effective Konsentr
95% Confidence Limits Prob Konsentr Lower Upper ,01 3,18086 ,57058 8,92912 ,02 6,73297 1,55821 16,37714 ,03 10,83500 2,93979 24,12728 ... ,45 1353,97282 830,02917 2735,20061 ,50 1913,07570 1121,46730 4254,58009 ,55 2703,05176 1505,88607 6659,04548 .... ,98 543572,73601 110530,22525 8071257,93710 ,99 1150588,22539 200943,62874 22237387,5338
Lampiran 8. Hasil analisis probit untuk IC50 ekstrak metanol tunggal Parameter Estimates (PROBIT model: (PROBIT(p)) = Intercept + BX): Regression Coeff. Standard Error Coeff./S.E.
Konsentr ,60280 ,06826 8,83108 Intercept Standard Error Intercept/S.E. -2,28641 ,17403 -13,13824
Pearson Goodness-of-Fit Chi Square = 22,248 DF = 7 P = ,002 Since Goodness-of-Fit Chi square is significant, a heterogeneity factor is used in the calculation of confidence limits.
Number of Observed Expected
Konsentr Subjects Responses Responses Residual Prob 1,00 100,0 4,9 4,613 ,302 ,04613 1,30 100,0 12,8 6,653 6,126 ,06653 1,60 100,0 8,5 9,330 -,840 ,09330 1,90 100,0 13,5 12,730 ,764 ,12730 2,20 100,0 12,4 16,909 -4,487 ,16909 2,51 100,0 16,4 21,878 -5,524 ,21878 2,81 100,0 15,3 27,597 -12,316 ,27597 3,11 100,0 40,3 33,966 6,338 ,33966 3,41 100,0 50,0 40,830 9,126 ,40830 Confidence Limits for Effective Konsentr
95% Confidence Limits Prob Konsentr Lower Upper ,01 ,85852 ,00392 6,23339 ,02 2,43206 ,02804 12,92984 ,03 4,70864 ,09713 20,66663 ... ,45 3841,78848 1285,17991 54389,56845 ,50 6208,64178 1839,32587 131762,20888 ,55 10033,66869 2611,88344 321710,88908 ... ,98 15849611,0775 431355,92995 375513136100 ,99 44899418,9299 877566,99776 2738705353246