BAB 5. PENUTUP
5.2 Saran
Kelenjar saliva nyamuk yang sudah diisolasi sebaiknya sesegera mungkin untuk dilakukan preparasi menjadi vaksin. Karena semakin pendek waktu penyimpanan maka komponen-komponen protein yang terdapat di dalamnya juga akan semakin bagus jika dibandingkan dengan waktu penyimpanan yang lebih lama. Pada waktu melakukan homogenisasi menggunakan mikropistil, sebaiknya penggerusan dilakukan secara on ice agar suhu di dalam eppendorf tetap dingin sehingga protein yang terdapat di dalam kelenjar saliva kondisinya tetap optimal.
Pada saat melakukan anastesi pada hewan coba sebaiknya menggunakan formula Ketamin dan Xylazin seperti yang sudah terdapat pada metode pada BAB 3. Hal ini dikarenakan formulasi ini sudah optimal untuk membuat hewan coba pingsan dengan tenang dan tidak menyebabkan kematian. Karena mecit membutuhkan banyak oksigen untuk kembali sadar seperti keadaan semula. Selain itu kebersihan kandang hewan coba harus tetap terjaga dari awal sampai akhir penelitian.
DAFTAR PUSTAKA
Buku
Abbas AK, Lichtman AH, Pober JS. 2000. Cellular and mollecular immunology. Philadelphia, WB Saunders co.
Anies. 2005. Manajemen Berbasis Lingkungan (Solusi Mencegah dan Menanggulangi Penyakit Menular). Jakarta: PT. Elex Media Komputindo. Baratawidjaja, K.G dan Rengganis, I. 2009. Imunologi Dasar Edisi Ke-8. Jakarta:
Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia Press.
Baratawidjaja K. G., Rengganis I. 2010. Imunologi Dasar. Edisi ke-9. Jakarat: Balai Penerbit Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia.
Bruce-Chwatt, Leonard Jan. 1985. Essential Malariology. London: William Heinemann Medical Books Ltd.
Crowther J. R. 2001. The ELISA Guidebook Vol.149. New Jersey: Humana Press Inc. Damar, T. 2002. Studi Epidemiologi Malaria di Daerah Endemi Malaria Kabupaten
Banjarnegara Jawa Tengah. Salatiga: Litbang Depkes.
Departemen Kesehatan Rl. 1995. Pengendalian Nyamuk Anopheles. Direktorat Jenderal Pemberantasan Penyakit Menular dan Penyehatan Lingkungan Pemukiman, Jakarta: Depkes RI.
Departemen Kesehatan RI. 2003. Pedoman Tatalaksana Kasus Malaria. Jakarta: Direktorat Jendral PPM & PL Direktorat Pemberantasan Penyakit Bersumber Binatang.
Departemen Kesehatan RI. 2009. Keputusan Menkes Nomer: 293/MENKES/SK/IV/2009 tentang Eliminasi Malaria. Jakarta: Depkes.
Gandahusada, S.; Ilahude, H.H.D.; Pribadi, W. 1998. Parasitologi Kedokteran. Jakarta : Balai Penerbit FKUI.
Gandahusada, Srisasi., Ilahude, H. Herry D dan Pribadi, W. 2004. Parasitologi Kedokteran Edisi Ketiga. Jakarta: FK UI.
Gandahusada, Srisasi. 2006. Parasitologi Kedokteran. Jakarta: FK UI.
Harijanto, P. N. 2000. Malaria: Epidemiologi, Patogenesis, Manifestasi Klinis dan Penanganan. Jakarta: EGC.
Hiswani. 2004. Gambaran Penyakit dan Vektor Malaria di Indonesia.Yogyakarta: Gadjah Mada University Press.
Nugroho A. dan Tumewu-Wagey. 2000. Siklus Hidup Plasmodium Malaria: Epidemiologi, Pathogenesis, Manifestasi Klinis dan Penanganan. Editor: P. N Harijanto. Penerbit Buku Kedokteran EGC. Jakarta.
Nugroho, D. T. 2009. Siklus Perkembangan Pradewasa Anopheles aconitus (Diptera: Culicidae) Pada Dua Jenis Formulasi Pakan Yang Berbeda Di Laboratorium. Bogor: IPB.
Nurhayati, Siti. 2008. Pemandulan Anopheles maculatus Sebagai Vektor Penyakit Malaria dengan Radiasi Gamma. Jakarta: Erlangga.
Rajab, Z. 2012. Derajat Parasitemia Mencit Galur BALB/C yang Divaksinasi dengan Kelenjar Saliva Anopheles maculatus dengan Adjuvan Aluminium Hidroksida. Jember: Universitas Jember.
Santoso, B. 2002. Studi karakteristik habitat Larva Nyamuk Anopheles maculatus Theobald dan Anopheles balabacensis Baisas serta beberapa faktor yang mempengaruhi populasi Larva di Desa Hargotirto kecamatan Kokap Kabupaten Kulon Progo, DIY. Yogyakarta: UGM Press.
Zein, U. 2005. Penanganan Terkini Malaria Falciparum. Medan: Universitas Sumatera Utara.
Terbitan Berkala
Afandi, D., Sampurna, B., Sutanto, I., Marwoto, J.W., Chairani, N., Himawan, S. 2008. Autopsy findings in severe malaria – a case report. Med J Indonesia; 17 : 210-5.
Andrade, Teixeira, Barbal dan Barral-Netto. 2005. Haematophagus Arthropod Saliva And Host Defense System: a Tale of Tear and Blood. Anais da academica Brassileira de Ciencias, 77 (4): 665-693.
Ault, S.K. 1994. Malaria. Am. J. Trop. Med. Hyg., 50, 35-49
Barodji, Sularto T, Bambang H, Widiarti, Pradhan GD & Shaw RF. 1985. Life Cycle Study of Malaria Vector Anopheles aconitus Donitz in the Laboratory. Bull. Penelit. Kes. 13: (1) 7 hal.
Brennan, Kent, Dhar, Fujioka, Kumar. 2000. Anopheles gambie Salivary Gland Protein as Putative Targets for Blocking Transmission of Malaria Parasite. New York: PNAS, 97 (25): 13859-13864.
Carter, Mendis, Miller, Molineaux, Saul. 2000. Malaria Transmission Blocking Vaccine: How Can Their Development be Supported. Amerika: Nature America Inc.
CDC. 2004. Malaria, Anopheles Mosquitoes. National Center For Infectious Diseases, Division Of Parasitic Diseases.
Chattopadhyay, Rana dan Kumar, Sanjai. 2009. Review Article-malaria vaccine: latest update and Challenges Ahead. Indian Journal of Experimental Biology, 47 (7) : 527-536.
Cornelie, Remoue, Doucoure, NDiaye, Sauvage, Boulanger dan Simondon. 2007. An Insight into Immunogenic Salivary Proteins of Anopheles gambiae in African Children. Malaria Journal. 6: 75.
Dhar, R., Kumar, N. 2003. Role of Mosquito Salivary Glands. Cur. Sci, 85: 1308-1313.
Doolan, D. L., dan Hoffman, S. L. 2000. The Complexity of Protective Immunity Against Liver-Stage Malaria. J. Immunol. Vol 165:1453–1462.
Donovan, Messmore, Scrafford, Sack, Kamhawi and McDowell. 2007. Uninfected Mosquito Bites Confer Protection against Infection with Malaria Parasites. American Society for Microbiologi. Vol. 75 (5): 2523-2530.
Gillespie R. D, Mbow M. L., Titus R. G. 2000. The Immunomodulatory Factors of Bloodfeeding Arthropod Saliva. Parasite Immunology. Vol 22: 319-331. Ho & White, N.J. 1999. Molecular Mechanisms of Cytoadherence in Malaria. Am J
Hoffman, S.L., GOH, M.L., Luke, T.C. 2002. Protection of humans againts malaria by immunization with radiation-attenuated Plasmodium falciparum, The Journal of Infectious Disease. 185, 1155-1164.
Jariyapan, Choochote, Jitpakdi, Harnnoi, Siriyasatein, Wilkinson, Junkum dan Bates. 2007. Salivary Gland Proteis of The Human Malaria Vector, Anopheles dirus B (Diptera: Culicidae). Rev. Inst. Med. Trop. S. Paulo. Viol. 49 (1): 5-10. Langhorne J., Ndungu F. M., Sponaas A-M., Marsh K. 2008. Immunity to Malaria:
More Question than Answer. Nature Immunology, 9 (7): 725-732.
Lounibes LP. 1994. Geographical and Development Components of Adult Size of Neotropical Anopheles (Nyssorhynchs). Ecological Entomology 19: 138-146. Mahmood, Farida & William KR. 1981. Duration of the Gonotrophic Cycles of
Anopheles culifacies Giles and Anopheless stephensi Liston With Observations on Reproductive and Survivorship During Winter in Punjab Province, Pakistan. J. Am. Mosq. Ctrl. Assoc. 41: 41-50.
Martin. M. E., Dieter, J. A., Luo, Z. 2012. Predicting The Outcome of Infectious Diseases: Variability Among Inbred Mice as a New and Powerfull Tool for Biomarker Discovery. Journal ASM. Vol. 3(5): 00199-12.
Moortthy, Good, Hill. 2004. Malaria Vaccine Development. The Lancet, 363.
Omar, El-Matarawy, El-Naggar, Abdel, dan El Rehemi. 1987. “The Course Of Plasmodium Berghei Infection In Mice Subjected To Variable Dosages Of The Parasite And The Peak Parasitaemia Obtained Accordingly”. Arab Saudi : Journal of the Egyptian Society of Parasitology, 16(2):757-61.
Perlmann, P & Blomberg, M.T. 2002. Malaria and the Immune System in Humans. Chem Immunol. Vol.80, pp 229-242.
Ramirez, Garver, Dimopolus. 2009. Plasmodium Infection andIts Risk Factors in Eastern Uganda. UK: Malaria Journal.
Reid, J. A. 1968. Anophelini mosquitoes of Malaya and Borneo. Inst. Med. Res. Malaysia. 32. 520 hal.
Rosenthal, P. J. 2008. Artesunate for the Treatment of Severe Falciparum Malaria. The New England Journal of Medicine. Vol. 358, Iss. 17, pg. 1829.
Titus, R. G., Bishop, J. V dan Mejia, J. S. 2006. The Immunomodulatory Factors of Arthropod Saliva and Potential for These Factors to Serve as Vaccine Targets to Prevent Pathogen Transmission. Parasite Immunology. Vol. 28: 131-141. Tsakonas K. A and Riley E. M. 2002. Innate Immune Response to Malaria: Rapid
Induction of IFN-γ from Human NK Cell by Live Plasmodium falciparum-infected erythrocytes. The Journal of Immunology, 169: 2956-2963.
Ulanova, M., Tarkowski, A., Hahn-Zoric, M., Hanson, L. A. 2001. The Common Vaccine Adjuvant Aluminum Hydroxide Up-Regulates Accessory Properties of Human Monocytes via an Interleukin-4-Dependent Mechanism. Infection and Immunity, 69: 1151-1159.
Wipasa J., Elliot S., Xu H., Good M. F. 2002. Immunity to Asexual Blood Stage malaria and Vaccine Approaches. Immunology and Cell Biology, 80: 401-414. Wirez ZA, Turrentine Jr JD & Fox RC. 1981. Area Repellents for Mosquitoes (Diptera: Culicidae): Identification of the Active Ingridients in A Petroleum Oil Fraction. J. Am. Mosq. Ctrl. Assoc. 18:126-128.
World Health Organization. 1975. Manual on Practical Entomology in Malaria Part II. Geneva: WHO.
World Health Organization. 2000. Malaria Transmission Blocking Vaccine: an Ideal Public Good. Geneva: WHO Press.
World Health Organization. 2001. Malaria Transmission-Blocking-Vaccines: an Ideal Public Good.
World Health Organization. 2005. WHO guidelines for the treatment of malaria Geneva: WHO Press.
World Health Organization. 2010. World Malaria Report. Geneva: WHO.
Walter Reed Biosistemativs Unit. 2009. Mosquito Identification Resource. Walter Reed Army Institute of Research.
Yoshida S, Shimada Y and Kondoh D. 2008. Hemolytic C-type lectin CEL-III From Sea Cucumber Expressed In Transgenic Mosquitoes Impairs Malaria Parasite Development. PLoS Pathog. 3 (12): 192.
CDC. 2010. Anopheles Mosquitoes. http://www. Centers for Disease Control and Prevention [CDC]/Anopheles, Diakses 19 Januari 2012.
Meigen. 1818. Anopheles. http://en.wikipedia.org/wiki/Anopheles, Diakses 21 Februari 2012.
Prasetyo, A. Malaria. 2006. From URL: http://.www. Pusat Informasi Penyakit Infeksi khususnya HIV-AIDS - Penyakit - Malaria.htm. Diakses 23 Maret 2012.
LAMPIRAN A. KURVA STANDART
a. IFN-γ (Pengambilan Plasma Sebelum Vaksinasi, Pasca Vaksinasi Booster II dan 1 hari Pasca Infeksi P. berghei )
b. IFN-γ (7 Hari Pasca Infeksi P. berghei) y = 0,004x + 0,008 R² = 0,994 0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 3,5 0 200 400 600 800 Abso rb an si Konsentrasi pg/ml
Kurva Standart ELISA IFN-γ
Series1 Linear (Series1) y = 0,003x - 0,101 R² = 0,992 0,00 0,50 1,00 1,50 2,00 2,50 0 200 400 600 800 A bsorbansi Konsentrasi pg/ml
Kurva Standart ELISA IFN-γ
Series1
c. IL-4 (Pengambilan Plasma Sebelum Vaksinasi, Pasca Vaksinasi Booster II dan 1 hari Pasca Infeksi P. berghei )
d. IL-4 (7 Hari Pasca Infeksi P. berghei) y = 0,003x + 0,370 R² = 0,994 0 0,5 1 1,5 2 2,5 0 200 400 600 A bsorbansi Konsentrasi pg/ml
Kurva Standart ELISA IL-4
Series1 Linear (Series1) y = 0,003x + 0,026 R² = 0,998 0 0,5 1 1,5 2 0 200 400 600 A bsorbansi Konsentrasi pg/ml
Kurva Standart ELISA IL-4
Series1
LAMPIRAN B. HASIL UJI ELISA
Hasil Uji ELISA IFN-γ (Validasi)
Hasil Uji ELISA IL-4 (Validasi)
Waktu Pengambilan Kontrol SD % Error Supernatan SD % Error Pelet SD % Error
Sebelum Vaksinasi 65,39 16,69 25,53 44,28 36,72 82,92 135,67 45,96 33,88
Pasca Vaksinasi Booster II 169,83 89,57 52,74 74,83 4,71 6,30 200,67 41,25 20,56
24 Jam Pasca Infeksi P. berghei 201,50 61,28 30,41 194,83 37,71 19,36 195,94 12,62 6,44
7 Hari Pasca Infeksi P. berghei 33,76 2,52 7,47 358,67 9,94 2,77 29,78 0,00 0,00
Waktu Pengambilan Kontrol SD % Error Supernatan SD % Error Pelet SD % Error
Sebelum Vaksinasi 1208,24 99,64 8,25 1119,61 56,95 5,09 1039,30 59,15 5,69
Pasca Vaksinasi Booster II 463,55 56,47 12,18 605,97 29,81 4,92 512,03 69,43 13,56
24 Jam Pasca Infeksi P. berghei 492,33 67,88 13,79 485,52 48,21 9,93 574,15 19,81 3,45
Hasil Uji ELISA IFN-γ (Populasi)
Hasil Uji ELISA IL-4 (Populasi)
Waktu Pengambilan Kontrol SD % Error Supernatan SD % Error Pelet SD % Error
Sebelum Vaksinasi 88,35 88,92 100,64 51,87 9,97 19,23 139 27,65 19,89
Pasca Vaksinasi Booster II 238,17 80,23 33,68 112,61 32,76 29,09 172,89 137,95 79,79
1 Hari Pasca Infeksi P. berghei 175,39 61,79 35,23 183,72 11,71 6,37 165,20 32,32 19,57
7 Hari Pasca Infeksi P. berghei 31,35 3,40 10,86 145,61 184,67 126,82 58,11 44,58 76,72
Waktu Pengambilan Kontrol SD % Error Supernatan SD % Error Pelet SD % Error
Sebelum Vaksinasi 1097,64 99,59 9,07 1006,0 1005,97 98,44 1026,17 33,79 3,29
Pasca Vaksinasi Booster II 478,19 62,66 13,10 621,1 621,12 60,53 633,75 143,74 22,68
1 Hari Pasca Infeksi P. berghei 480,21 60,02 12,50 517,3 517,33 27,93 581,73 125,17 21,52