BAB VI KESIMPULAN DAN SARAN
6.2 Saran
Kepada peneliti selanjutnya diharapkan :
1. Melakukan uji antifungi dari ekstrak rimpang kecombrang dengan metode pengujian lain.
2. Melakukan uji antifungi dari ekstrak rimpang Kecombrang terhadap fungi uji lainnya.
lxi
DAFTAR PUSTAKA
Anurogo, Dito. 2008. Dermatofita Pada Manusia (Pitiriasis Versikolor). http://www.kabarindonesia.com/ Diakses pada tanggal 10 September 2009.
Anonim. 2007. Trichophyton mentagrophytes. Diakses dari mikrobia.files.wordpress.com pada tanggal 9 Maret 2009
Anonim. 2007. Menggempur Jamur Sampai Kabur. Diakses dari http//www.intisari-online.com pada tanggal 9 Maret 2009
Antoro, S.E. 1995. Skrining Fitokimia Rimpang Nicolaia speciosa Horan. Secara Mikrokimiawi Kromatografi Lapis Tipis,dan Spektrofotmetri UV. [Abstrak]. Penelitian Tanaman Obat di Beberapa Perguruan Tinggi di Indonesia 1998.
Appendini P, Hotchkiss Jh. 2000. Antimicrobial activity of a 14 residue synthetic peptide against foodborne microorganism. J Food Protect 63:889-893
Depkes RI. 1979. Farmakofe Indonesia, Edisi III. Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan: Jakarta.
Depkes RI. 1995. Farmakofe Indonesia, Edisi IV. Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan: Jakarta.
Depkes RI. 1995. Materi Medika Indonesia, Jilid VI.Jakarta
Depkes RI. 2000. Parameter Standard Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan: Jakarta.
Dian Sundari, M. Wien Winarno.2001.Informasi Tumbuhan Obat Sebagai Anti Jamur. Depkes RI. Jakarta
Fransworth, M.R. 1969. Biological and Phytochemical Screening of Plants. Journal Pharmaceutical Science; 255-265
lxii
Gandahusada, SS, Pribadi W., Ilahude HD.2004. Parasitologi Kedokteran Edisi III. Balai penerbit FKUI Jakarta.
Ganiswarna SG.2005.Farmakologi Dan Terapi.Bagian farmakologi FKUI. Jakarta
Gharmila.2008.Uji Potensi Antifungi Lendir Bekicot (Achatina Fullica) Terhadap Fungi Trichophyton Rubrum Dan Trichophyton Mentagrophytes. [skripsi] FKIK UIN. Jakarta
Guevara, BQ., Recio, BV. 1985. Phytochemical, Microbiological and Pharmacological Screening of Medicinal Plants. The University of Santo Tomas Manila, Philippines.
Habsah, M., Ali, A.M., Lajis, N.H., Sukari, M.A., Yap, Y.H., Kikuzaki, H. dan Nakatani, N. 2005. Antitumor-Promoting and Cytotoxic Constituents of Etlingera Elatior. Malaysian Journal of Medical Sciences, Vol. 12, No. 1, Januari 2005 (6-12).
Habsah, M., Lajis, N.H., Abas, F., Ali, A.M., Sukari, M.A., Kikuzaki, H. dan Nakatani, N.. 2003. Antioxidative Constituents of Etlingera elatior. [Abstrak]. J. Nat. Prod., 2005, 68 (2), pp 285–288.
Hidayat, SS dan Hutapea JR. 1991. Inventaris Tanaman Obat Indonesia. Edisi 1: 440-441. Badan Penelitian dan Pengembangan Depkes RI
Hoan, Tan, T & Rahardja K. 2006. Obat-Obat Penting, Edisi VI. Elex Media Kompetindo : Jakarta
Howarth, W.H. at all, 1982. Martindale The Extra Pharmacopoeia 28th edition. The Pharmaceutical Press. London. England
Ibrahim, H. dan Setyowati, FM. 2009. Detail data Etlingera elatior (Jack) R.M. Smith. Diakses tanggal 03 maret 2009 dari www.kehati.or.id
Katz, F.W. 1974. Microbiological Diffusion Assay, Operation Studied with Cooper Equation. J. Pharm. Sci. hal 11,36.
lxiii
Musdja, M Yanis.2006.Modul Farmakologi Panyakit Infeksi.UIN-Press. Jakarta.
Myjeck, Mary J.,Harvey, Richard A., Champe, Pamela C.,2005. Farmakologi Ulasan Bergambar Edisi II. Widya Medika. Jakarta
Naufalin, Rifda. 2005. Kajian Sifat Antimikroba Ekstrak Bunga Kecombrang (Nicolaia speciosa Horan) Terhadap berbagai Mikroba Patogen dan Perusak Pangan.[Tesis] Jurusan Teknologi Pangan, Fakultas Petanian, IPB. Bogor.
Pelczar, Michael J., Chan E.C.S. 1986. Dasar – Dasar Mikrobiologi. UI-Press. Jakarta
Staf Pengajar FKUI.1993.Mikrobiologi Kedokteran.Edisi revisi.Binarupa Aksara. Jakarta
Sukandar E. Yulinah, Suganda AG, Pertiwi GU. 2004. Uji Aktivitas Antijamur Salep Dan Krim Ekstrak Daun Ketapang (Terminalia cattapa l.) Pada Kulit Kelinci. Bandung
Sundari, Dian, Wien Winarno, M, 2001. Informasi Tumbuhan Obat sebagai Obat Anti Jamur. Balitbangkes Depkes RI
lxiv
lxv Lampiran 2 Tanaman Kecombrang
Gambar 1 a. Tanaman Kecombrang
Gambar 1 b. Bunga kecombrang
lxvi
Lampiran 3 Ekstraksi Serbuk Rimpang Kecombrang
Serbuk simplisia kering (500 g)
Filtrat Ekstrak kental Uji aktifitas antifungi Rajangan Kecombrang (15 Kg) Dikeringkan (diangin-anginkan)
Rajangan Kecombrang kering (3 Kg) Dihaluskan
Maserasi dengan etanol 70% ( 3 x 24 jam) Residu Dirotary evaporator Penapisan fitokimia Uji karakteristik
lxvii
Lampiran 4 Ekstraksi dan Uji Susut Pengeringan
1. Ekstraksi
Ekstraksi sampel 500 g dalam etanol 70% (1:6 b/v)3 L didapatkan ekstrak cair 40,8 g dan dipekatkan hingga 20 g
Evaporator : Labu destilat + ekstrak = 106 g Labu destilat = 86 g
Ekstrak=20g
Rendemen 20 g x 100 % = 4 % 500 g
2. Uji susut pengeringan
Dipanaskan 30 menit di Oven + 150 oC
Cawan penguap = 14,442 g
Cawan penguap+tutup (m1) = 25,940 g Cawan penguap+tutup+Ekstrak (m2) = 26,944 g (m2-m1) = 26,944 g - 25,940 g = 1,004 g 30 menit selanjutnya : Cawan penguap
+ tutup + Ekstrak
= 26,844 g
30 menit selanjutnya : Cawan penguap + tutup + Ekstrak
= 26,704 g
Didiamkan dalam eksikator 24 jam Cawan penguap + tutup + Ekstrak
= 26,703 g
Jadi susut pengeringan dari ekstrak adalah bobot sampel awal dikurang bobot sampel tetap.
= 26,944 g – 26,703 g
= 0,241 g 0,241 g x 100 % = 0,89% 26,944
Jadi susut pengeringan ekstrak etanol rimpang Kecombrang tersebut adalah 0,89 %
lxviii 3. Perhitungan pembuatan konsentrasi
Ditimbang beker glass = 42, 7072 g (kemudian ditara) Ditimbang ekstrak kecombrang = 20 mg
Ditambahkan dengan aquadest = 20 ml
20 mg/20ml = 1000 ppm
Dengan menggunakan rumus V1.N1 = V2.N2 maka untuk memperoleh konsentrasi berikutnya adalah
100 ppm = X. 1000 ppm = 10 ml.100 ppm X = 1000 ml.ppm = 1 ml 1000 ppm 10 ppm = X. 100 ppm = 10 ml.10 ppm X = 100 ml.ppm = 1 ml 100 ppm 1 ppm = X. 10 ppm = 10 ml.10 ppm X = 100 ml.ppm = 1 ml 100 ppm 0,1 ppm = X. 10 ppm = 10 ml. 0,1 ppm X = 1 ml.ppm = 1 ml 1 ppm
lxix
Lampiran 5 Uji aktivitas antifungi dengan metode difusi agar
Kekeruhan pada A= 0,143-0,187 = 530 nm
Biarkan memadat Suspensi jamur uji 1 ml
Inokulasikan dalam 10 ml medium SDA pada cawan
Penanaman kertas cakram yang mengandung 10µl larutan
Inkubasikan pada suhu 35 ºC selama 4 hari
Amati daerah hambat dan ukur diameternya
lxx
Lampiran 6 Penetapan Potensi Ekstrak Rimpang Kecombrang (Nicolaia spesiosa Horan)
Kekeruhan pada A= 0,143-0,187 = 530 nm
\
Biarkan memadat Pembuatan seri larutan klotrimazol 5; 10; 15; 20; 25 ppm
Suspensi jamur uji 1 ml
Inokulasikan dalam 10 ml medium SDA pada cawan
Penanaman kertas cakram yang mengandung 10µl larutan
Inkubasikan pada suhu 35 ºC selama 4 hari
Amati daerah hambat dan ukur diameternya
Pembuatan kurva standar klotrimazol
lxxi
Lampiran 7 Hasil pengukuran diameter daerah hambat pertumbuhan fungi uji terhadap ekstrak etanol rimpang kecombrang.
Tabel 6. Hasil pengukuran diameter daerah hambat pertumbuhan fungi uji terhadap ekstrak etanol rimpang kecombrang.
Fungi Uji Konsentrasi ekstrak rimpang kecombrang (ppm) Diameter daerah hambat rata-rata (mm) Harga KHM (Konsentrasi Hambat Minimum) 1000 9.5 100 7 10 0 1 0 Trichophyton rubrum 0.1 0 100 ppm 1000 8 100 7 10 0 1 0 Trichophyton mentagrophytes 0.1 0 100 ppm
lxxii
Lampiran 8 Kurva standar antara diameter daerah hambat dengan konsentrasi antifungi pembanding (Klotrimazol)
Tabel 7. Kurva standar antara diameter daerah hambat dengan konsentrasi antifungi pembanding (Klotrimazol)
Fungi Uji Konsentrasi Klotrimazol (ppm) Log konsentrasi klotrimazol Diameter daerah hambat rata-rata (mm) 5 0.6989 0 10 1 8 15 1.1761 9 20 1.3010 10 Trichophyton rubrum 25 1.3979 12 5 0.6989 0 10 1 8 15 1.1761 10.5 20 1.3010 12 Trichophyton mentagrophytes 25 1.3979 15
lxxiii
Gambar 2 a. Grafik hubungan log konsentrasi antifungi pembanding dengan diameter daerah hambat Trichophyton rubrum
Gambar 2 b. Grafik hubungan log konsentrasi antifungi pembanding dengan diameter daerah hambat Trichophyton mentagrophytes.
lxxiv
Lampiran 9 Penetapan potensi ekstrak rimpang kecombrang terhadap antifungi pembanding Klotrimazol
A. Fungi uji Trichophyton rubrum
-KHM ekstrak rimpang kecombrang 100 ppm -Diameter daerah hambat = 7 mm
-Persamaan regresi kurva standar klotrimazol y=16.0579x – 10.1011 -Y= diameter daerah hambat
-X= log konsentrasi klotrimazol Y=d=7 mm Y=16.0579x – 10.1011 7 =16.0579x – 10.1011 X=7+10.1011 16.0579 X=1.0649
Konsentrasi Klotrimazol= antilog X Antilog X= antilog 1.0649= 11.61 ppm Potensi bahan uji = Cu
Cs = 100
11,61 = 8,6132 ppm
B. Fungi uji Trichophyton mentagrophytes -KHM ekstrak rimpang kecombrang 100 ppm -Diameter daerah hambat = 7 mm
lxxv -Y= diameter daerah hambat
-X= log konsentrasi klotrimazol Y=d=7 mm Y=20.3693x – 13.6073 7 =20.3693x – 13.6073 X=7+13.6073 20.3693 X=1.0116
Konsentrasi Klotrimazol= antilog X Antilog X= antilog 1.0116= 10.27 ppm Potensi bahan uji = Cu
Cs = 100
10,27 = 9,737 ppm
lxxvi
Lampiran 10 Hasil pengamatan Jamur Trichophyton rubrum dan Trichophyton mentagrophytes
Gambar 3. Mikroskop T. rubrum (perbesaran 400 x)
Gambar 4. Mikroskop T.mentagrophytes (perbesaran 400 x)
lxxvii Gambar 6. fungi uji Trichophyton rubrum.
Gambar 7. Perbedaan medium membuat fungi uji menghasilkan warna yang berbeda (merah kehitaman : T.rubrum dalam medium PDA)
lxxviii
Lampiran 11 Hasil uji aktifitas ekstrak rimpang Kecombrang terhadap fungi uji.
Gambar 8 a. Hasil penelitian yang menunjukkan aktifitas ekstrak rimpang Kecombrang terhadap Trichophyton mentagrophytes.
Gambar 8 b. Hasil penelitian yang menunjukkan aktifitas ekstrak rimpang Kecombrang terhadap Trichophyton rubrum.
Gambar 9. Hasil penelitian yang menunjukkan aktifitas Klotrimazol terhadap fungi uji Trichophyton rubrum dan Trichophyton mentagrophytes.
lxxix
Lampiran 12 Alat yang digunakan dalam penelitian
Gambar 10 a. Lemari inkubator
Gambar 10 b. Rotary evaporator
lxxx
Gambar 10 d. Laminary air flow
Gambar 10 e. Refrigerator (lemari es).
lxxxi Lampiran 13 Pengujian biokimia
Gambar 11. Hasil pengujian urease yang dilakukan. Tampak warna sebelum dilakukan uji urease dengan hasilnya setelah diamati selama 2-3 hari berikutnya. A) Trichophyton mentagrophytes; B) Trichophyton rubrum
lxxxii
Lampiran 14 Hasil analisa kerusakan sel dengan SEM
Gambar 12 a. Kontrol SEM fungi uji Trichophyton rubrum (perbesaran 1500 x)
lxxxiii
Gambar 13 a. Analisa ekstrak uji SEM fungi Trichophyton rubrum. (perbesaran 2000 x)
Gambar 13 b. Analisa ekstrak uji SEM fungi Trichophyton rubrum. (perbesaran 10000 x)
