BAB 5. KESIMPULAN DAN SARAN
5.2. Saran
Pada penelitian selanjutnya, saran dari penulis diantaranya:
1. Perlu dibuat suspensi bakteri yang lebih pekat sebelum dilakukan enkapsulasi sehingga kepadatan sel bakteri bertambah.
2. Perlu dilakukan optimasi metode pengeringan enkapsulasi sehingga menghasilkan ukuran mikroenkapsulasi.
3. Perlu dilakukan optimasi metode dan penambahan penyalut yang optimum sehingga menghasilkan mikroenkapsulasi dengan efisiensi penjerapan yang lebih baik lagi dan dapat mempertahankan jumlah sel bakteri
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
DAFTAR PUSTAKA
Adlia, Amirah. 2008. Mikroenkapsulasi Pelet Probiotik dengan Metode Suspensi Udara Menggunakan Fluidized Bed Dryer (FBD). Skripsi: Institut Teknologi Bandung.
Adrianto, Ari. 2011. Enkapsulasi Lactobacillus casei dengan Teknik Ekstrusi Sebagai Starter Untuk Pembuatan Dadih Susu Sapi. Skripsi: Institut Pertanian Bogor.
Anal, A.K., Singh, H., 2007. Recent advances in microencapsulation of probiotics for industrial applications and targeted delivery. Trends Food Science and Technology 18 (5): 240–251.
Aneja, K.R. 2003. Experiment in Microbiology, Plant Pathology and Biotechnology. India: New Age International Publisher
Anonim. 2014. Lactobacillus casei. US: American Type Culture Collection
Anwar, Abida, Shah Ali Ul Qader, Aliya Raiz, Samina Iqbal, dan Abid Azhar. 2009. Calcium Alginate: a support material for immobilization of proteases from newly isolated strain of Bacillus subtilis KIBGE-HAS.
World Applied Sciences Journal 7 (10): 1281-1286.
Benita, Simon. 1996. Microencapsulation: Method and Industrial Application 2nd
Betha, Ofa Suzanti. 2014. Uji Aktivitas Enzim Protease dari Bakteri Amobil Bacillus licheniformis F11.4. JML Vol. 11 No.1: 98-101.
edition. New York: Marcel Dekker Inc.
Breed, Robert S., dkk. 1957. Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology 7th
Broadbent, Jeff R, Rebecca L. Larsen, Virginia Deibel, James L. Steele. 2010. Physiological and transcriptional response of
edition. US: The Williams & Wilkins Company.
Lactobacillus casei
Brodelius P, dan EJ Vandamme. 1987. Immobilized cell systems, 407–463, In H.J. Rehm andG. Reed (ed) Biotechnology Chapter 8. VCH Pub. New York.
ATCC 334 to Acid Stress. J. Bacteriology Vol. 192: 2445-2458.
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Burgain, J, C. Gaiani, M. Linder, J. Scher. 2011. Encapsulation of probiotic living cells: from laboratory scale to industrial applications. Journal of Food Engineering Vol. 104: 467-483.
Cahyani, Widya Fatwati. 2011. Perbandingan Pengaruh Sumber Karbon: Glukosa, Fruktosa, Laktosa, Sukrosa, dan Frukto-Oligosakarida Terhadap Pertumbuhan Lactobcaillus casei. Skripsi: Universitas Airlangga.
Castilla OS, Calleros CL, Galindo HSG, Ramirez JA, dan Carter EJV. 2010. Textural properties of alginate-pectin MLN and survivability of entrapped Lb. casei in simulated gastrointestinal condition and in yoghurt. Food Research International 43: 111 – 117.
Cebra, J.J. 1999. Influences of microbiota on intestinal immune system development. Am J. Clin Nutr 69:1046S-1051S.
Chakraverty, Raja. 2011. Preparation and evalution of sustained release microsphere of norfloxacin using sodium alginate. International Journal of Pharmaceutical Sciences and Research Vol. 3(1): 293-299.
Chandramouli V, Kalasapathy K, Peiris P, Jones M. 2004. An improved method of microencapsulation and its evaluation to protect Lactobacillus spp. In simulated gastric conditions. J Microbiol Meth. 56: 27-35.
Charalampopoulos, Dimitris, dan Robert A. Rastall. 2009. Prebiotics and Probiotics Science and Technology. USA: Springer.
Chávarri, M., Izaskun Marañón dan María Carmen Villarán. 2012. Encapsulation technology to protect probiotic bacteria. In Probiotics Chapter 23 InTech DOI: 10.5772/50046.
Chávarri, M., Izaskun Marañón, Raquel Ares, Francisco C. Ibáñez, Florencio Marzo, dan María Carmen Villarán. 2010. Microencapsulation of a probiotic and prebiotic in alginate-chitosan capsules improves survival in simulated gastro-intestinal conditions. International Journal of Food Microbiology Vol. 142: 185-189.
Chávarri, M., Marañón, I., Ares, R., Ibáñez, F.C., Marzo, F., Villarán, M.D.C., 2010. Microencapsulation of a probiotic and prebiotic in alginate–chitosan capsules improves survival in simulated gastro-intestinal conditions.
International Journal of Food Microbiology 142 (1–2): 185–189.
Chen, M.J., Chen, K.N., 2007. Applications of probiotic encapsulation in dairy products. In: Lakkis, Jamileh M. (Ed.), Encapsulation and Controlled
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Release Technologies in Food Systems. Wiley-Blackwell, USA, pp. 83– 107.
Collin dan Lyne’s. 2004. Microbiological Methods 8th
Corcionivoschi, N. and Drinceanu, D. 2009. Probioticele-la timpul prezent. Editura Mirton, Timisoara.
edition. Arnold, a member of the Hodder Headline Group, 338 Euston Road, London NW1 3BH
Corcionivoschi, N, Dan Drinceanu, Lavinia Stef, Ioan Luca, Calin Julean, Dr. Oana Mingyart. 2010. Probiotics-Identification and ways of action.
Innovative Romanian Food Biotechnology Vol. 6: 1-11.
Depson, Ronald. 2012. Identifikasi molecular dan pengaruh pemberian potensial probiotik bakteri asam laktat asal dadih terhadap kolesterol daging itik baying sumber daya genetik Sumatera Barat. Tesis: Universitas Andalas. Desai, Ankur. 2008. Strain identification, viability, and probiotics properties of
Lactobacillus casei. School of Biomedical and Health Science Victoria University, Werribee Campus Victoria Australia.
Dinakar, P., dan Mistry, V. V. 1994. Growth and viability of Bifidobacterium bifidum in Cheddar cheese.Journal of Dairy Science, 77: 2854–2864 Falk, P.G., Hooper, L.V., Midtvedt, T. and Gordon, J.I. 1998. Creating and
maintaining the gastrointestinal ecosystem: what we know and need to know from gnotobiology. Microbiol Mol Biol Rev.62:1157-1170.
FDA (Food and Drug Administration). 2001. Bacteriological analytical manual chapter 3, Aerobic Plate Count. FDA.
Figueroa-Gonzales, Ivonne, Guillermo Quijano, Gerardo Ramirez. 2011. Probiotics and prebiotics-perspective and challenges. J. Science Food Agriculture Vol. 91: 1341-1348.
Food and Agriculture Organisation of the United Nations and World Health Organization. 2001. Health and Nutrition Properties of Probiotics in Food including Powder Milk with Live Lactic Acid Bacteria. Report of a joint FAO/WHO Expert Concultation on Evaluation of Health and Nutrition Properties of Probiotics in Food including Powder Milk with Live Lactic Acid Bacteria. World Health Organization.
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Goktepe, Ipek. 2006. Probiotics in Food Safety and Human Health. USA: CRC Press.
Handayani. 2007. Skrining Kapang Endofit Penghasil Antimikroba dari Ranting Tanaman Garcinia tetranda Pierre terhadap Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Salmonella typhosa, Bacillus subtilis, Pseudomonas aeroginosa, Candida albicans, dan Aspergillus niger. Skripsi Sarjana Ekstensi Farmasi FMIPA UI, Depok: 27-29, 45-46
Harmayani, Erni, Ngatirah, Endang S. Rahayu, dan Tyas Utami. 2001. Ketahanan dan viabilitas probiotik bakteri asam laktat selama proses pembuatan kultur kering dengan metode freeze dan spray drying. Jurnal Teknologi dan Industri Pangan Vol. XII No. 2: 126-132.
Holzapfel, W.H., Haberer, P., Geisen, R., Björkroth, J., Schillinger, U., 2001. Taxonomy and important features of probiotic microorganisms in food and nutrition. American Journal of Clinical Nutrition Vol. 73 (2 Suppl.): 365S– 373S.
Islam, Mohammad Ariful, Cheol-Heui Yun, Yun-Jaie Choi, Chong-Su Cho. 2010. Microencapsulation of live probiotic bacteria. J. Microbiol. Biotechnol.
Vol. 20 (10): 1367-1377.
Istiyani, Khoirul. 2008. Mikroenkapsulasi Insulin Untuk Sediaan Oral Menggunakan Metode Emulsifikasi dengan Penyalut Natrium Alginat dan Kitosan. Skripsi: Universitas Indonesia.
Ivanovska, Tanja Petreska, dkk. 2012. Microencapsulation of Lactobacillus casei
in chitosan-ca-alginate microparticles using spray-drying method.
Macedonian Journal of Chemistry and Chemical and Chemical Engineering Vol. 31 No. 1: 115-123.
Kailasapaty, Kaila. 2002. Microencapsulation of probiotic bacteria: technology and potential applications. Curr. Issues Intest. Microbiol. Vol 3: 39-48. Kourkoutas, Y., Bosnea, L., Taboukos, S., Baras, C., Lambrou, D., & Kanellaki,
M. (2006). Probiotic cheese production using Lactobacillus casei cells immobilized on fruit pieces. Journal of Dairy Science, 89: 1431-1451. Krasaekoopt, W., Bhandari, B., & Deeth, H. 2003. Evaluation of encapsulation
techniques of probiotics for yoghurt. International Dairy Journal, 13: 3– 13.
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Krasaekoopt, W., Bhandari, B., & Deeth, H. 2004. The influence of coating materials on some properties of alginate MLN and survivability of microencapsulated probiotic bacteria. International Dairy Journal, 14: 737–743.
Kusuma, Sri A. Fitri. 2009. Bakteri Asam Laktat. Karya Ilmiah: Universitas Padjajaran
Lee KY, Heo TR. 2000. Survival of Bifidobacterium longum immobilized in calcium alginate MLN in simulated gastric juices and bile salt solution.
Appl Environ Microbiology 66:869–873.
Li, X. Y., Chen, X. G., Cha, D. S., Park, H. J., & Liu, C. S. 2009. Microencapsulation of a probiotic bacteria with alginate-gelatin and its properties. Journal of Microencapsulation, 26: 315-324.
Lotfipour, Farzaneh, Shahla Mirzaeei, dan Maryam Maghsoodi. 2012. Evaluation of the effect of CaCl2
Mandal, S., A.K. Puniya, K. Singh. 2006. Effect of alginate concentration on survival of microencapsulated Lactobacillus casei NCDC-298.
International Dairy Journal volume 16: 1190-1195.
and alginate concentrations and hardening time on the characteristics of Lactobacillus acidophilus loaded alginate beads using response surface analysis. Advanced Pharmaceutical Bulletin, 2 (1): 71-78.
Malago, J.J. 2011. Probiotic Bacteria and Enteric Infections-Cytoprotection by Probiotic Bacteria. New York: Springer.
Michail, Sonia dan Philip M. Sherman. 2009. Probiotics in Pediatric Medicine. USA: Humana Press.
Mokarram, R.R, S. A. Mortazavi, M. B. Habibi Najafi, F. Shahidi. 2009. The influence of multi stage alginate coating on survivability of potential probiotic bacteria in simulated gastric and intestinal juice. Food Research International (42): 1040-1045.
Mortazavian A, Razavi SH, Ehsani MR, Sohrabvandi S. 2007. Principles and methods of microencapsulation of probiotic microorganisms. Iranian Journal of Biotechnology (IJB) 2007;5(1):1-18.
Neish, A.S., Gewirtz, A.T., Zeng, H., Young, A.N., Hobert, M.E., Karmali, V., dkk. 2000. Prokaryotic regulation of epithelial responses by inhibition of IkappaB-alpha ubiquitination. Science 289:1560-1563.
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
O’Riordan, K., Andrews, D., Buckle, K., and Conway, P. 2001. Evaluation of microencapsulation of a Bifidobacterium strain with starch as an approach to prolonging viability during storage. J. Appl. Microbiol. 91: 1059-1066.
Phillips, G.O, D. J. Wedlock, dan P. A. Williams. 1990. Gums and Stabilizers for the Food Industry volume 5. Inggris: Oxford University Press.
Pratiwi, Sylvia T. 2008. Mikrobiologi Farmasi. Jakarta: Erlangga.
Prescott LM, Harley JP, and Kelin DA. 2002. Microbiology, Bacteria: The Low G+ C Gram Positives 5th
Rokka, Susanna dan Pirjo Rantamaki. 2010. Protecting probiotic bacteria by microencapsulation: challenges for industrial applications. Eur Food Res Technol Vol. 231:1-12.
edition. Boston: McGraw Hill: 529-530.
Rosdinawati, Nezla. 2009. Mikroenkapsulasi Ekstrak Sambiloto (Andrographis paniculata (Burm f.) Ness) Untuk Menutupi Rasa Pahit Menggunakan Penyalut Natrium Alginat. Skripsi: Universitas Indonesia.
Rowe, Raymond C., Paul J. Sheskey, Marian E. Quinn. 2009. Handbook of Pharmaceutical Excipient 6th
Saarela, Maria, Gunnar Mogensen, R. Fonden, Jaana Matto, Jaana Matto. 2000. Probiotic bacteria: safety, functional, and Technological Properties.
Journal of Biotechnology Vol. 84: 197-215.
edition. USA: Pharmaceutical Press.
Saarela, M.H., Alakomi, H.L., Puhakka, A. and Matto, J. 2009. Effect of the fermentation pH on the storage stability of Lactobacillus rhamnosus
preparations and suitability of in vitro analyses of cell physiological functions to predict it. J Appl Microbiology 106:1204-1212.
Sahadeva, R.P.K., dkk. 2011. Survival of commercial probiotic strains to pH and bile. International Food Research Journal Vol. 18(4): 1515-1522.
Sandoval-Castilla, O, C. Lobato-Calleros, H.S. García-Galindo, J. Alvarez-Ramírez, E.J. Vernon-Carter. 2009. Textural properties of alginate–pectin MLN and survivability of entrapped Lb. casei in simulated gastrointestinal conditions and in yoghurt. Food Research International Vol. 43: 111-117. Setyaningsih, Putri Pratiwi. 2013. Uji viabilitas Lactobacillus plantarum Mar8
yang dimikroenkapsulasi menggunakan campuran dekstrin dengan jus buah dan biji markisa. Skripsi: Universitas Indonesia.
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Shargel, Leon, Susanna Wu-Pong, dan Andrew B. B Yu. 2005. Biofarmasetika dan Farmakokinetika Terapan edisi ke-5. Alih bahasa: Fasich, Budi Suprapti. Surabaya: Pusat Penerbitan dan Percetakan Universitas Airlangga.
Sheu, T. Y., dan Marshall, R. T. 1993. Microencapsulation of lactobacilli in calcium alginate gels. Journal of Food Science, 58: 557–561.
Sohail, Asma, Mark S. Turner, Allan Coombes, Thor Bostrom, Bhesh Bhandari. 2010. Survivability of probiotics encapsulated in alginate gel microMLN using a novel impinging aerosols method. International Journal of Food Microbiology vol. 145: 162-168
Starling, Shane. 2014. Data eater: EU probiotic yoghurt market to drop 4.5% by 2018; supplements on the up. http://www.nutraingredients.com/Markets- and-Trends/Data-eater-EU-probiotic-yoghurt-market-to-drop-4.5-by-2018-supplements-on-the-up . Diakses pada tanggal 14 Februari 2015.
Solanki, Himanshu K., dkk. 2013. Development of microencapsulation delivery system for long-term preservation of probiotics as biotherapeutics agent.
BioMed Research International Vol. 2013.
Sultana K, Godward G, Reynolds N, Arumugaswamy R, Peiris P, dan Kailasapathy K. 2000. Encapsulation of probiotics bacteria with alginate starch and evaluation of survival in simulated gastrointestinal conditions and in yoghurt. International Journal of Food Microbiology 62: 47–55. Syahrurahman, Agus. 1994. Buku Ajar Mikrobiologi Kedokteran. Jakarta:
Penerbit Binarupa Aksara.
Swapp, Susan. 2013. Scanning Electron Microscopy (SEM). SEM.html. Diakses tanggal 7 Desember 2015.
Tamime, AY dan Robinson NK. 1989. Yoghurt Science and Technology. Oxford: Pergamon Press.
University of California, 2014. Lactobacillus casei. http://wineserver.ucdavis.edu /industry/
USP 25: United States Pharmacopeia Convention. 2002. United States Pharmacopeia and the National Formulary (USP 25 - NF 20). The United States Pharmacopeial Convention, Rockville (MD).
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
USP 32: United States Pharmacopeia Convention. 2009. United States Pharmacopeia and the National Formulary (USP 32 - NF 27). The United States Pharmacopeial Convention, Rockville (MD).
Utami, Fauziah. 2013. Pengaruh Suhu Terhadap Daya Tahan Hidup Bakteri pada Sediaan Probiotik. Skripsi: Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah. Waldman, AS, Schechinger, L, Govindarajoo, G, Nowick, JS, Pignolet, LH. 1998.
The alginate demonstration: polymers, food science, and ion exchange.
Journal of Chemical Education 75 (11): 1430-1431.
Wang, Jicheng, dkk. 2012. Gene expression profile of probiotic Lactobacillus casei Zhang during the late stage of milk fermentation. Food Control (25): 321-327.
World Gastroenterology Organisation. 2008. Probiotics and prebiotics. World Gastroenterology Organisation Practice Guideline.
Xie, Z. P., Y. Huang, Y. L. Chen, and Y. Jia. 2001. A new gel casting of ceramics by reaction of sodium alginate and calcium iodate at increased temperatures. J. Mater. Sci. Lett. 20: 1255-1257.
Yousef, Ahmed E. dan Carolyn Carlstrom. 2003. Food Microbiology: A Laboratory Manual. New Jersey: John Wiley & Sons, Inc.
Yulinery, Titin dan N. Nurhidayat. 2012. Analisis viabilitas probiotik Lactobacillus terenkapsulasi dalam penyalut dekstrin dan jus markisa (Passiflora edulis). Bidang Mikrobiologi: LIPI J. Tek. Ling Vol. 13: 109-121.
Zanjani, Mohammad Ali Khosravi, dkk. 2012. Microencapsulation of
Lactobacillus casei with calcium alginate-resistant starch and evaluation of survival and sensory properties in cream-filled cake. African Journal of Microbiology Research Vol. 6 (26) pp. 5511-5517.
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 1. Alur penelitian
Preparasi Alat
Sterilisasi oven/autoklaf
Probiotik Lactobacillus casei ATCC 393 diremajakan
Pembuatan suspensi bakteri Lactobacillus casei ATCC 393
Mikroenkapsulasi Lactobacillus casei ATCC 393 dengan Na alginat menggunakan metode
ekstrusi Formulasi
konsentrasi MLN: 2%, 3%, dan 4%
Enumerasi
Uji viabilitas mikroenkapsulasi
Lactobacillus casei ATCC 393 Depolimerisas
i
Uji viabilitas mikroenkapsulasi Lactobacillus casei ATCC 393 terhadap cairan simulasi asam
lambung
Kultivasi probiotik Lactobacillus casei
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 2. Preparasi Alat dan Pembuatan Reagen
A. Preparasi alat
Peralatan gelas seperti cawan petri, batang pengaduk, spatula, erlenmeyer, gelas kimia, tabung reaksi dibungkus dengan kertas roti dan disterilkan dengan menggunakan oven pada suhu 180oC selama 120 menit (Collin, dkk, 2004). Untuk alat dan bahan tidak tahan panas sterilisasi serta alat ukur kuantitatif, seperti tube
sentrifuge, mikrotube, pipet volume, labu ukur, natrium alginat, CaCl2, buffer fosfat dilakukan dengan menggunakan autoklaf suhu 121oC selama 15 menit. Untuk bahan yang terbuat dari karet seperti karet pipit tetes, disterilisasi dengan cara direbus.
B. Pembuatan bufer fosfat pH 6,9
Kalium dihidrogen fosfat ditimbang dengan seksama 6,8 gram, kemudian dimasukkan ke dalam labu ukur 250 ml dan dilarutkan ke dalam akuadestilasi hingga garis batas sambil dikocok hingga homogen. Diperoleh larutan kalium dihidrogen fosfat 0,2M. NaOH ditimbang dengan 2,0 gram kemudian dimasukkan ke dalam labu ukur 250 ml dan dilarutkan ke dalam akuadestilasi hingga garis batas sambil dikocok hingga homogen. Diperoleh larutan NaOH 0,2M. Larutan kalium dihidrogen fosfat 0,2M dimasukkan ke dalam gelas kimia yang telah dikalibrasi 1,0 L dan dicek pH dengan alat pH-meter. Kemudian ditambahkan larutan NaOH 0,2M 20 ml. Kemudian ditambahkan dengan akuadestilasi mendekati 1 L. Larutan ditambahkan tetes demi tetes NaOH sampai pH 6,9 (Istiyani, 2008 dan USP).
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 3. Media Perbenihan DeMan Rogosa Sharpe Agar
Formula: Peptone 10 g Lab-Lemco powder 8,0 g Yeast extract 4 g Glucosa 20 g Sorbitan mono-oleat 1 ml
Dipotassium Hidrogen posfat 2,0 g Sodium Acetat 3H2 Triamonium Citrat 2,0 g O 5,0 g Magnesium Sulfat 7H2 Mangan sulfat 4H O 0,2 g 2 Agar 10 g O 0,05 g pH 6,2 ± 0,2 @ 25oC
dilarutkan 62 gram serbuk MRS dalam 1 liter air destilasi pada suhu 60○C hingga larut sempurna kemudian disterilkan menggunakan autoklaf pada suhu 121○C selama 15 menit.
Lampiran 4. Media Perbenihan DeMan Rogosa SharpeBroth
Formula: Peptone 10 g Lab-Lemco powder 8,0 g Yeast extract 4 g Glucosa 20 g Sorbitan mono-oleat 1 ml
Dipotassium Hidrogen posfat 2,0 g Sodium Acetat 3H2 Triamonium Citrat 2,0 g O 5,0 g Magnesium Sulfat 7H2 Mangan sulfat 4H O 0,2 g 2 pH 6,2 ± 0,2 @ 25 O 0,05 g o C
dilarutkan 52 gram serbuk MRS dalam 1 liter air destilasi pada suhu 60○C hingga larut sempurna kemudian disterilkan menggunakan autoklaf pada suhu 121○C selama 15 menit.
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 8. Gambar Koloni yang Tumbuh pada MLN 2%
Keterangan:
(A) : Koloni Pada Pengenceran 10-1 (B) : Koloni Pada Pengenceran 10
MLN 2%
-2
(C) : Koloni Pada Pengenceran 10
MLN 2%
-3
(D) : Koloni Pada Pengenceran 10
MLN 2%
-4
(E) : Koloni Pada Pengenceran 10
MLN 2%
-5
(F) : Koloni Pada Pengenceran 10
MLN 2% -6 MLN 2% (A) (C) (E) (B) (D) (F)
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 9. Gambar Koloni yang Tumbuh pada MLN 3%
Keterangan:
(A) : Koloni Pada Pengenceran 10-1 (B) : Koloni Pada Pengenceran 10
MLN 3%
-2
(C) : Koloni Pada Pengenceran 10
MLN 3%
-3
(D) : Koloni Pada Pengenceran 10
MLN 3%
-4
(E) : Koloni Pada Pengenceran 10
MLN 3%
-5
(F) : Koloni Pada Pengenceran 10
MLN 3% -6 MLN 3% (A) (B) (D) (C) (E) (F)
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 10. Gambar Koloni yang Tumbuh pada MLN 4%
Keterangan:
(A) : Koloni Pada Pengenceran 10-1 (B) : Koloni Pada Pengenceran 10
MLN 4%
-2
(C) : Koloni Pada Pengenceran 10
MLN 4%
-3
(D) : Koloni Pada Pengenceran 10
MLN 4%
-4
(E) : Koloni Pada Pengenceran 10
MLN 4%
-5
(F) : Koloni Pada Pengenceran 10
MLN 4%
-6
(G) : Koloni Pada Pengenceran 10
MLN 4% -7 MLN 4% (A) (B) (C) (D) (E) (F) (G)
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 11. Gambar Koloni yang Tumbuh pada MLN 2% Setelah Simulasi
Asam Lambung
Keterangan:
(A): Koloni Pada Pengenceran 10-1 (B): Koloni Pada Pengenceran 10
MLN 2% Setelah Simulasi Asam Lambung
-2
(C): Koloni Pada Pengenceran 10
MLN 2% Setelah Simulasi Asam Lambung
-3
MLN 2% Setelah Simulasi Asam Lambung (A)
(B)
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 12. Gambar Koloni yang Tumbuh pada MLN 3% Setelah Simulasi
Asam Lambung
Keterangan:
(A): Koloni Pada Pengenceran 10-1 (B): Koloni Pada Pengenceran 10
MLN 3% Setelah Simulasi Asam Lambung
-2
(C): Koloni Pada Pengenceran 10
MLN 3% Setelah Simulasi Asam Lambung
-3
MLN 3% Setelah Simulasi Asam Lambung (A)
(B)
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 13. Gambar Koloni yang Tumbuh pada MLN 4% Setelah Simulasi
Asam Lambung
Keterangan:
(A): Koloni Pada Pengenceran 10-1 (B): Koloni Pada Pengenceran 10
MLN 4% Setelah Simulasi Asam Lambung
-2
(C): Koloni Pada Pengenceran 10
MLN 4% Setelah Simulasi Asam Lambung
-3
MLN 4% Setelah Simulasi Asam Lambung (A)
(B)
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 14. Perhitungan TPC (Total Plate Count) Suspensi Bakteri
10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 10-6 10-7
Over Over Over 530 83 14 0
Over Over Over 411 86 10 0
Over Over Over 477 77 23 0
Koloni/ml =
Koloni/ml = + + = 246 x 106 = 24,6 x 107 koloni/ml
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 15. Gambar Hasil Mikroenkapsulasi Bakteri Lactobacillus casei
ATCC 393 Natrium Alginat
Keterangan: (A): Hasil MLN 2% (B): Hasil MLN 3% (C): Hasil MLN 4%
Lampiran 16. Gambar Hasil MLN Setelah Uji Simulasi Cairan Asam Lambung
Keterangan:
(A): Hasil MLN 2% Setelah Simulasi Cairan Asam Lambung (B): Hasil MLN 3% Setelah Simulasi Cairan Asam Lambung (C): Hasil MLN 4% Setelah Simulasi Cairan Asam Lambung
(A) (B) (C)
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 17. Tabel Hasil Diameter Konsentrasi MLNSebelum dan Sesudah
Ditambahkan Bakteri L. casei dengan paired sample t-test
17.1. Hasil Analisa Diameter Konsentrasi MLN 2% Sebelum dan Sesudah Ditambahkan Bakteri L. casei dengan paired sample t-test
*Keterangan: Signifikansi <0,05, ukuran diameter berbeda secara signifikan Signifikansi >0,05, ukuran diameter tidak berbeda secara signifikan
17.2 Hasil Analisa Diameter Konsentrasi MLN 3% Sebelum dan Sesudah Ditambahkan Bakteri L. casei dengan paired sample t-test
Paired Samples Test Paired Differences t df Sig. (2-tailed) Mean Std. Deviation Std. Error Mean 95% Confidence Interval of the Difference Lower Upper Pair 1 3% sebelum bakteri - 3% setelah bakteri .266500 .073853 .023354 .213669 .319331 11.411 9 .000
*Keterangan: Signifikansi <0,05, ukuran diameter berbeda secara signifikan Signifikansi >0,05, ukuran diameter tidak berbeda secara signifikan
Paired Samples Test Paired Differences t df Sig. (2-tailed) Mean Std. Deviation Std. Error Mean 95% Confidence Interval of the Difference Lower Upper Pair 1 2% sebelum bakteri - 2% setelah bakteri .091100 .024524 .007755 .073556 .108644 11.747 9 .000
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lanjutan.
17.3. Hasil Analisa Diameter Konsentrasi MLN 4% Sebelum dan Sesudah Ditambahkan Bakteri L. casei dengan paired sample t-test
Paired Samples Test Paired Differences t df Sig. (2-tailed) Mean Std. Deviation Std. Error Mean 95% Confidence Interval of the Difference Lower Upper Pair 1 4% sebelum bakteri - 4% setelah bakteri .205900 .041538 .013136 .176185 .235615 15.675 9 .000
*Keterangan: Signifikansi <0,05, ukuran diameter berbeda secara signifikan Signifikansi >0,05, ukuran diameter tidak berbeda secara signifikan
Lampiran 18. Hasil Analisa Data Diameter Ketiga Konsentrasi MLN Setelah
Ditambahkan Bakteri dengan Metode One Way Repeated Measures ANOVA Pairwise Comparisons Measure:MEASURE_1 (I) Konse ntrasi (J) Konse ntrasi Mean
Difference (I-J) Std. Error Sig. a
95% Confidence Interval for Differencea
Lower Bound Upper Bound
2% 3% -.177* .022 .000 -.241 -.113 4% -.623* .014 .000 -.664 -.583 3% 2% .177* .022 .000 .113 .241 4% -.447* .033 .000 -.544 -.350 4% 2% .623* .014 .000 .583 .664 3% .447* .033 .000 .350 .544
*Keterangan: Signifikansi <0,05, ukuran diameter berbeda secara signifikan Signifikansi >0,05, ukuran diameter tidak berbeda secara signifikan
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 19. Alat dan Bahan yang Digunakan Dalam Penelitian
Bakteri Lactobacillus casei ATCC 393
MRS broth dan MRS agar Laminar Air Flow (LAF)
Colony counter Inkubator Mikropipet
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 20. Hasil Pengukuran Efisiensi dan Viabilitas Terenkapsulasi Matrik Natrium Alginat
Lampiran 21. Perhitungan Persentase Penurunan Viabilitas Bakteri Lactobacillus casei ATCC 393 Sebelum dan Setelah Simulasi Cairan
Asam Lambung % Penurunan MLN 4% = X 100% = X 100% = 99,96% Konsentrasi A B C = B x A D E F = x 100% G Vol suspensi yg ditambahkan (ml) Populasi sel (koloni/ml susp. Sel) Jumlah sel total dalam suspensi (koloni) Massa beads yg dihasilkan (gram) Populasi sel dalam beads (koloni/gram) Efisiensi enkapsulasi (%) Rata-rata efisiensi (%) 2% 50 1E+08 5100000000 27.63 5000000 2.708824 1.665926 50 1E+08 5100000000 27.63 1150000 0.623029 3% 50 8E+07 4100000000 33.511 115000 0.093994 0.060565 50 8E+07 4100000000 33.511 33200 0.027136 4% 50 1E+08 5100000000 48.298 690000 0.653444 9.607514 50 1E+08 5100000000 48.298 19600000 18.56158