A. Simpulan
Berdasarkan hasil penelitian dan pembahasan dapat disimpulkan bahwa
P. berghei iradiasi tidak ditemukan pada hati dan limpa mencit (Mus musculus) menggunakan metode nested-PCR. Hal ini berarti bahwa iradiasi gamma efektif untuk menurunkan daya infektifP. berghei.
B. Saran
Penelitian tentang uji daya infektivitas P. berghei iradiasi menggunakan
nested-PCR perlu dilengkapi dengan pemeriksaan P. berghei iradiasi di dalam tubuh nyamuk dan pengukuran jumlah sporozoit iradiasi yang diinfeksikan ke dalam tubuh mencit. Cara lisis sel perlu menggunakan cara yang lebih maksimal seperti penggerusan. Selain itu juga perlu dilengkapi dengan pengamatan mikroskopis organ, apus darah untuk memastikan bahwa di dalam peredaran darah terdapat parasit iradiasi yang diinginkan dan pengamatan serum untuk deteksi kerusakan hati seperti serum alanine aminoransferase.
32
Diseases13(5): 681-686.
Abraham EG & M Jacobs – Lorena. 2004. Mosquito midgut barries to malaria parasite development. Insect Biochem Mol Biol34 (7): 667-671.
Anonim.2011.Definition of Nested PCR. on line at
http://www.pcrstation.com/nested-pcr/[diakses tanggal 20 April 2012].
Arum IL, AP Purwanto, S Arfi, H Tetrawindu, M Octora, Mulyanto, K Surayah & Amanukarti. 2006. Uji diagnostik Plasmodium malariamenggunakan metode imunkromatografi diperbandingkan dengan pemeriksaan mikroskopis.
Indonesian Journal of clinical Pathology and Medical Laboratory 12(3): 118-122.
Brown HW. 1979. Dasar Patologi Klinis. Penterjemah: Bintari Rukmono, Hoedojo, Nani S. Djakaria, Siti Doemilah Soeprihatin, Sri S. Margono, Sri Oemijati, Srisasi Ganda husada & Wita Pribadi. Jakarta: Gramedia.
Capurro M, de LJ Coleman, BT Beerntsen, KM Myles, KE Olson, E Rocha, AU Krettli & AA James. 2000. Virus-expressed, recombinant single-chain antibody blocks sporozoite infection of salivary glands in Plasmodium gallinaceum-infected Aedes aegypti. Am J Trop Med Hyg. 62: 427-433.
Darlina & D Tetriana. 2008. Daya infeksi Plasmodium berghei stadium eritrositik yang diirradiasi sinar gamma .on line at: www.batan.go.id[ diakses tanggal 20 April 2012].
Djanah SN. 2007. Jumlah dan aktivitas proliferasi limfosit lien mencit swiss jantan yang diinfeksi Plasmodium berghei akibat pemberian 5 dan 100 mg/kgbb/hari ekstrak etanol Phyllantus niruri. Kes Mas1(1): 1-50.
Eales L. 1999. Immunology for lifescientist. Newyork: John Wiley & sons.
Ferreira A, Enea V, Morimoto T & Nussenzweig V. 1986. Infectivity of Plasmodium berghei sporozoites measured with a DNA probe. Mol Biochem Parasitol
19(2): 103-109.
Frevert U, E Sabine, Z Sergine, S Jorg, Ng Bruce, M Kai , L Leonard & H Yee. 2005. Intravital observation of Plasmodium berghei infection of the liver.
PLoS Biology3(6): 1034-1046.
Gardner MJ, N Hall, E Fung, O White, M Berriman, RW Hyman, JM Carlton, A Pain , KE Nelson, S Bowman, IT Paulsen, K James, JA Eisen, K Rutherford, SL Salzberg, A Craig, S Kyes, MS Chan, V Nene, SJ Shallom, B Suh, J Peterson, S Angiuoli, M Pertea, J Allen, J Selengut, D Haft, MW Mather, AB Vaidya, DM Martin, AH Fairlamb, MJ Fraunholz, DS Roos, SA Ralph, GI McFadden, LM Cummings, GM Subramanian, C Mungall, JC Venter, DJ Carucci, SL Hoffman, C Newbold, RW Davis, CM Fraser & B Barrell. 2002. Genome sequence of the human malaria parasite Plasmodium falciparum. Natur
e 419(6906):498-511.Garnham PCC. 1965. The structure of early sporogenic stages of Plasmodium berghei. Ann Soc belge Med trop45(3): 259-266.
Ghosh A, P Srinivasan, EG Abraham, H Fujioka & M Jacobs-Lorena. 2003. Molecular strategies to study Plasmodium- mosquito interactions. Trends Parasitol19 (2): 94-101.
Gunes G, N Yilmaz & A Ozturk. 2011. Effects of irradiation dose and O2 and CO2 concentrations in packages on foodborne pathogenic bacteria and quality of ready-to-cook seasoned ground beef product (meatball) during refrigerated storage. The ScientificWorld Journal20(12): 1-7.
Hermanto S, I Sugoro & Akmalia. 2008. Profil protein Escherichia coli hasil inaktivasi iradiasi gamma sebagai bahan vaksin mastitis. Depok: Prosiding Seminar Nasional Biokimia UI.
Hoffman SL, LML Goh, TC Luke, I Schneider, TP Le, DL Doolan, J Sachi, P de la Vega, M Dowler, C Paul, DM Gordon, JA Stoute, LWP Church, M Sedegah, DG Heppener, WR Ballou & TL Richie. 2002. Protection of humans against malaria by immunization with radiation-attenuated Plasmodium falciparum Sporozoites.
J Infect Diseases 185(8): 1155-1164.
Hurd H & V Carter. 2004. The role of programed cell death in Plasmodium-mosquito interactions. Int J Parasitol34 (13-14): 1459-1472.
Iqbal J, S Ali, R H Parsotam & R Al-Owaish. 1999. Comparison of the optimal test with PCR for diagnosis of malaria in immigrants. Journal of Clinical Microbiology37(11): 3644-3646.
Iskandar T, DT Subekti & EF Diani. 2006. Gambaran splenosit, limpa, dan kekebalan pada mencit galur BALB/C yang diberi allantoin dan diinfeksi Toxoplasma gondii. Dalam: Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner, Balai Penelitian Veteriner. Bogor.
Janeway CA, Jr P Travers, M Walport & MJ Shlomchik. 2001. Immunobiology: The Immune System in Health and Disease. 5th edition, New York: Garland Science.
Kanzo K SM & L Zheng. 2003. The mosquito genome-a turning point?. Trends Parasitol19 (8): 329-331.
Kappe SHI, K Kaiser & K Matuschewski. 2003. The Plasmodiumsporozoite journey: a rite of passage. TRENDS in Parassitology19(3): 135-143.
Leids Universitair Medisch Centrum. The genome of P. berghei. On line at:
https://www.lumc.nl/con[ diakses tanggal 25 Januari 2013].
Michael JCR. 2005. Plasmodium sp infection in ex-captive Bornean orangutans (Pongo pygmaeus) housed at the orangutans care center and quarantine, Padang Panjang, Kalimantan Tengah, Indonesia. (Thesis). Departement of Archaeology, Simon Fraser University.
Mikolajczak SA & SH Kappe. 2006. A clash to conquer: The malaria parasite liver infection. Mol Microbiol 62(6): 1499-1506.
Miller LH, DI Baruch, K Marsh & OK Duombo. 2002. The pathogenic basis of malaria. Nature(415): 673-667.
Mohanty S, DK Patel, SS Pati & SK Mishra. 2006. Adjuvant therapy in cerebral malaria. Indian J Med Res124(3): 245.
Muladno. 2002. Seputar Teknologi Rekayasa Genetika. Bogor: Pustaka Wirausaha Muda.
Neumaier M, A Braun & C Wagener. 1998. Fundamentals of quality assessment of molecular amplification methods in clinical diagnostics. Clinical Chemistry
44(1):12-26.
Nikjoo H. 2003. Radiation track and DNA damage. Iran J Radiat Res 1(1): 3 – 16. Nurhayati S, D Tetriana, Darlina, T Rahardjo & M Syaifudin. 2009. Pemeriksaan
Mikroskopis Plasmodium sp Sebagai Penunjang Pengembangan Vaksin Malaria Iradiasi. Jakarta. On line at http://www.batan.go.id/ptkmr [diakses tanggal 20 Januari 2012].
Palm NW & R Medzhitov. 2009. Pattern recognition receptors and control of adaptive immunity. Immunol(227): 221–233
Pooe OJ. 2011. The detection of Plasmodium falciparum in human saliva samples (Disertasi). South Africa: Zululand University.
Saiwichai T, M Maneepak, P Songprakhon, P Harnyuttanakorn & S nithiuthai. 2009. Species – specific nested PCR for detecting Plasmodium gallinaceum infresh chicken blood.Top Mad Parasitol32:75-81.
Sanakkayala N, A Sokolovska, J Gulani, HH Esch, N Sriranganathan, SM Boyle, GG Schurig & R Vemulapalli. 2005. Induction of antigen-specific Th1-Type Immune Responses by gamma-irradiated recombinant Brucella abortus RB51.
Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology. 12( 12): 1429-1436. Sandoz.1973. Atlas of haematology. Switzerland: Sandoz.
Schmidt KE. 2011. Analysis of parasite-specific T cells and cellular interactions in the spleen during Plasmodium berghei induced experimental cerebral malaria. (Disertasi). Germany: University of Bonn.
Shahabuddin M. 1998. Plasmodium ookinete development in the mosquito midgut: A case of reciprocal manipulation . Parasitology 116: 83-93.
Shi Q, MM Lynch, M Romero & JM Burns. 2007. Enhanced protection against malaria by chimeric merozoite surface protein vaccine. Infection and Immunity75(3): 1349-1358.
Sinden RE. 1999. Plasmodium differentiation in the mosquito. Parassitologia 41 (1-3): 139-148.
. 2002. Molecular interactions between plasmodium and its insect vectors.
Singh B, Bobogare A, Cox-Singh J, Snounou J, Abdullah MS & Rahman HA. 1999. A Genus- and species-specific nested Polymerase Chain Reaction malaria detection assay for epidemologic studies. The Amer Soc Tropical Med & Hyg
60(4): 687-692.
Sulandari S & MSA Zein. 2003. Panduan Praktis Laboratorium DNA. Bogor :Bidang Zoologi LIPI.
Sulistyaningsih E. 2007. Polymerase Chain Reaction(PCR): Era baru diagnosis dan managemen penyakit infeksi. Laboratorium Fisiologi Fakultas Kedokteran Jember 1(1): 16-25.
Syaifudin M, S Nurhayati & D Tetriana. 2008. Pengembangan vaksin malaria dengan radiasi pengion. Makalah disampaikan pada Seminar Nasional Sains dan Teknologi- II.Universitas Lampung. Lampung 17-18 November 2008.
Syaifudin M, D Tetriana, Darlina & S Nurhayati. 2009. Respon imun sebagai faktor penting dalam pengembangan vaksin malaria dengan iradiasi. Dalam:
Prosiding Seminar Nasional Keselamatan, Kesehatan dan Lingkungan V.
Pusat Teknologi Keselamatan dan Metrologi radiasi-Badan Tenaga Nuklir Nasional. Depok, 14 Oktober 2009.
Takeuchi O & S Akira. (2010) Pattern recognition receptors and inflammation. Cell
(140): 805–820.
Tetriana D, Darlina, Armanu & M Syaifudin 2008. Pengaruh radiasi gamma terhadap profil protein Plasmodium berghei stadium eritrositik. Dalam: Prosiding Seminar Nasional Keselamatan, Kesehatan dan Lingkungan IV. Pusat Teknologi Keselamatan dan Metrologi radiasi-Badan Tenaga Nuklir Nasional dan Fakultas Kesehatan Masyarakat- Universitas Indonesia. Depok, 27 Agustus 2008. Hlm 282-291.
Vandenberg JP , Chews & MJ Stewat. 1990. Plasmodium sporozoite interactions with macrophages in vitro: a ideomicroscopic analysis. J Protozool37 (6): 528-536. Vaughan JA, LF Scheller, RA Wirtz & AF Azad. 1999. Infectivity of Plasmodium
bergheisporozoites delivered by intravenous inoculation versus mosquito bite: implications for sporozoite vaccine trials. Infect & Immun67(8): 4285-4289. Wijayanti MA, S Noerhajati, Supargiyo & EF Loeki. 1997. Pengaruh imunisasi
mencit dengan stadium eritrositik terhadap infeksi Plasmodium berghei.
Berkala Ilmu Kedokteran29(2): 53-59.
Zakeri S, TN Sohalia, Z Ahmad & DD Navid. 2002. Detection of malaria parasites by
Nested – PCR in South-Eastern Iran: Evidence of Highly Mixed Infection in Chahbahar District. Malaria Journal1:2.
Zetzsche H & B Gemeinholzer. 2009. Workshop Long-term storage of DNA material. Online at http://b.gemeinholzer@bgbm.org.[diakses tanggal 30 Juni 2011].
Lampiran 1. Alat Penelitian
Beberapa alat yang digunakan dalam penelitian disajikan dalam tabel berikut :
No Nama Alat Gambar
1 Neraca Ohaus®
2 Dry bath Aoseng
3 Horizontal elektroforesis Mupid ®-eXu
4 microcentrifuge survall Legend MICRO 17 R
5 GeldocTMXR+ with Image LabTMsoftware
6 GeneAmp® PCR System 9700 Applied Biosystem
Lampiran 2. Dokumentasi penelitian
1 2 3
4 5
6
7 8 9
Keterangan: 1) Sampel hati dan limpa, 2) proses vortex, 3) proses inkubasi menggunakan drybath, 4) sampel hasil isolasi, 5) proses pembuatan gel agaros, 6) proses pemasukan sampel ke dalam sumur, 7) proses elektroforesis, 8) shaking gel agaros menggunakan Ethidium Bromide sebagai pengkelat, 9) Visualisasi menggunakan gel doc dilengkapi seperangkat komputer dan software.