Menentukan Beberapa Metabolit Yang Diduga Merupakan Hapten Imunogenik Pada Penderita Yang Alergi Terhadap Para-Fenilendiamin (PFD) Melalui Pemeriksaan Uji Transformasi Limfosit T Dan Uji Tempel

(1)

(2)

Judul Disertasi

Nama

Nomor Pokok

Program Studi

Menentukan

Beberapa

Metabolit

Yang

Diduga

Merupakan Hapten Imunogenik Pada Penderita Yang

Alergi Terhadap Para-Fenilendiamin (PFD) Melalui

Pemeriksaan UJi Transformasi Limfosit T dan Uji

Tempel

Irma D. Roesyanto-Mahadi

9733102004

S3 Kedokteran

Menyetujui,

Komisi Pembimbing :

Prof. Dr. Marwali Harahap

Ketua

Prof. Dato' Dr. Khairul Anwar

Anggota

Ketua Program Studi,

(Prof, Dr. Harun R Lubis Sp.PD-KGH)

Tanggal Lulus :

Dr. Fong Mun Yik

Anggota

Direktur,

(Prof, Dr. Ir. Sumono, MS)

(3)

(4)

(5)

(6)

(7)

(8)

(9)

vii

MENENTUKAN BEBERAPA METABOLIK YANG DIDUGA MERUPAKAN

HAPTEN IMUNOGENIK PADA PENDERITA YANG ALERGI TERHADAP

PARA-FENILENDIAMIN (PFD) MELALUI PEMERIKSAAN UJi

TRANSFORMASI L1MFOSIT T DAN Uji TEMPEL

Abstrak:

Latar belakang: Uji tempel dengan para-fenilendiamin untuk menentukan

diagnosis dermatitis kontak karena para-fenilendiamin dapat memberikan

nilai positip semu ataupun negatip semu.

Ada dugaan bahwa derivat oksdatif dari Para-fenilendiamin (PFD) yaitu Basis

Bandrowski's (BB)

dan beberapa bahan lainnya (p-arninofenol, p-asarn

aminobenzoik) adalah suatu hapten imunogenik.

Tujuan: Menentukan Basis Bandrowski's (BB), p-aminofenol (PAF), p-asam

aminobenzoik (PAAB) sebagai hapten imunogenik pada penderita yang alergi

terhadap para-fenilendiamin (PFD).

Membuktikan PAF, PAAB adalah suatu bahan yang dapat bereaksi silang,

juga merupakan hapten imunogenik pada penderita yang alergi terhadap

PFD.

Metode: Dari tahun 2001 sampai tahun 2003, 14 pasien yang alergi terhadap

para fenilen-diamnin (PFD) dilakukan pemeriksaan uji tempel dengan PFD,

(para aminofenol (PAF) dan para amino asam benzoic (PAAB) ,uji

transformasi limfosit

(UTL) terhadap BB, PFD, PAF dan PAAB. Pertama

sekali ditentukan konsentrasi optimal dari PFD, BB, PAF dan PAAB pada

orang sehat. Uji transformasi limfosit dilakukan dengan konsentrasi optimal

ini. Uji in vitro dari Iimfosit blastogenesis dengan mitogen ini di!aksanakan

dengan menggunakan piring mikro yang banyak dengan dasar rata. Kultur

dilakukan dengan dua seri (duplo). Hasil dari kultur dua seri ini dihitung nilai

indek stimulasinya (IS) dengan menghitung rasio nilai rata-rata kultur yang

mendapat stimulasi antigen dengan nilai rata-rata kultur yang tidak mendapat

stimulasi antigen.

(10)

viii

Hasil:

Semua penderita yang alergi dengan PFD memberikan hasil uji

tempel yang positif terhadap PFD, semua kelompok pembanding menberikan

hasil uji tempel yang negatif. Secara demografi tak ada perbedaan (p>O.05)

dalarn sebaran umur dan jenis kelamin antara kelompok penderita dan

kelompok pembanding. Dari hasil uji tempel terhadap metabolit PFD didapai

9 dari 14 penderita yang alergi terhadap PFD memberikan hasil uji tempel

positit terhadap PAF. Tidak satupun yang memberikan hasil positif terhadap

PAAB. Sementara uji tempel dengan BB tidak dilakukan karena tidak stabil.

Berdasarkan hasil uji transformasi lirnfosit diketahui bahwa indeks stimulasi

BB pada kelompok penderita sangat bermakna (p<O,01) atau lebih besar

pada kelompok

penderita daripada

kelompok pembanding. Tak

ada

perbedaan antara kelompok penderita dan pernbandinq dengan

metabolit-metabolit PFD. Hasil uji transformasi limfosit antara kelompok penderita dan

kelompok pembanding menunjukkan tidak ada perbedaan (p>O,05) terhadap

PFD dan PAAB. Hasil uji transformasi limfosit terhadap BB dan PAF

menunjukkan perbedaan yang bermakna (p<O,05) antara kelompok penderita

dan kelompok pembanding, dimana hasil uji transformasi Iimfosit positif lebih

banyak

pada

kelompok

penderita.

Dari analisis

hUbungan

hasil

uji

transformasi limfosit PFD dengan metabolit-metabolitnya diketahui hanya BB

yang memberikan hubungan positif dengan PFD dimana seluruh hasil uji

transformasi Iimfosit positif dengan PFD juga positif terhadap BB dan seluruh

hasil uji transformasi limfosit negatif dengan BB negatif juga dengan PFD.

Kesimpulan:

Dari urut penelitian uji tempel dan uji transformasi limfosit yang

dilakukan diduga BB merupakan hapten imunogenik pada penderita yang

alergi dengan PFD . Dapat dipercaya uji transformasi limfosit dengan BB

secara in vitro pada pasien dermatitis kontak karena PFD, sedangkan uji

transformasi lirnfosit dengan PFD tidak dapat dipakai sebagai uji yang

dipercaya pada pasien yang menderita dermatitis kontak karena PFD.

(11)

ix

Abstract

Background: Patch test with para-phenylenediamine (PPD) when used for

diagnosis of contact dermatitis sometime gives, false positive or false

negative results. It has been suspected that Bandrowski's base (BB) is the

immunogenic hapten in PPD hypersensitivity.

Objective: To proof Bandrowski's base (BB), aminophenol (PAP),

p-Aminobenzoic Acid (PABA) are immunogenic hapten and cross reaetives in

patients with allergic contact dermatitis due to para-phenylenediamine (PPD).

Material and Methods: Between the year 2001 to 2003, 14 patients allergic

to PPD were subjected to lymphocyte transformation test (LTT) and patch test

(PT)

with

p-phenylenediamine

(PPD),

p-Aminophenol

(PAP),

p-Aminobenzoic acid (PABA). First to elucidate the optimal concentration of BB,

PPD, PAB and PABA.

In vitro stimulation of lymphocyte blastogenesis was

done with the optimal concentration. All

in vitro blastogenesis of lymphocyte

with all of mitogen were performed in flat bottomed, multiwell microtiter plates.

Cultures were set up in duplicate. Results of duplicate cultures are expressed

as stimulation index (SI) values which are calculated as the ratio of the mean

of stimulated cultures to the mean of unstimulated control cultures.

Results: All of the patients allergic to PPD were positif patch test to PPD and

all of the control patients were negative patch test to PPD. The results of

patch test to the metabolite of PPD, 9 patients out 14 patients (64,3%) were

also positif patch test to PAP. There were no positif patch test to PABA in

(12)

L

x

patients allergic of contact dermatitis due to PPD. There were significant

difference (p<O,01) between the mean of stimulation index from BB in

patients allergic of contact dermatitis due PPO and normal patients (control

patients). There were no difference (p>O,05) in patients allergig of contact

dermatitis due PPD and normal patients to metabolites of PPO. There were

also no difference between the lymphocyte transformations test to PPO and

PAAB in patients of contact dermatitis due PPO and control patients.

However there is significant

difference(p<O,05) in results of lymphocyte

transformation test (LTT ) when stimulated with BB and PAP. The corelation

of lymphocyte transformation test with PPO and the metabolites of PPO (BB,

PAP and PABA) showed positive corelation with BB.

Conclusions: Patch test and lymphocyte transformations tets have been

done in patients allergic due para phenylene diamine, From these results we

can conclude BB can stimulate T lymphocyte in vitro in patients allergic to

PPO and PPO cannot be used as reliable in vitro test for the assessment of

PPO contact sensitivity

(13)

(14)

(15)

(16)

(17)

(18)

(19)

(20)

(21)

(22)

(23)

(24)

(25)

(26)

(27)

(28)

(29)

(30)

(31)

(32)

(33)

(34)

(35)

(36)

(37)

(38)

(39)

(40)

(41)

(42)

(43)

(44)

(45)

(46)

(47)

(48)

(49)

(50)

(51)

(52)

(53)

(54)

(55)

(56)

(57)

(58)

(59)

(60)

(61)

(62)

(63)

(64)

(65)

(66)

(67)

(68)

(69)

(70)

(71)

(72)

(73)

(74)

(75)

(76)

(77)

(78)

(79)

(80)

(81)

(82)

(83)

(84)

(85)

(86)

(87)

(88)

(89)

(90)

(91)

(92)

(93)

(94)

(95)

(96)

(97)

(98)

(99)

(100)

(101)

(102)

(103)

(104)

(105)

(106)

(107)

(108)

(109)

(110)

(111)

(112)

(113)

(114)

(115)

(116)

(117)