commit to user
(He
FA
edyotis co
P
AKULTAS
orymbosa
AYUDA
S MATEM
UNIV
a (L.) Lam
ARA T47D
Ast
M
S
Juru
MATIKA D
VERSITAS
SUR
mk.) TE
D DAN S
Oleh:
tri Ariyani
M0407025
SKRIPSI
usan Biologi
DAN ILM
S SEBELA
RAKARTA
2011
RHADA
SERVIKS
i
MU PENGE
AS MARE
A
AP SEL K
commit to user
vii MOTTO
Don’t give up (Jangan Menyerah) untuk sesuatu yang dipertaruhkan, karena kesimpulannya hanya ada dua, menang atau kalah.
Akhir dari perjalanan adalah bahagia. Jika tidak atau belum, maka itu bukan akhir dari perjalanan.
commit to user
viii
PERSEMBAHAN
Skripsi ini saya persembahkan untuk:
Allah swt. Tuhan saya yang paling hebat. Sahabat sejati kehidupan.
Kedua orang tua saya, Ibu, Bapak yang selalu mendukung baik dalam
keadaaan susah maupun senang.
Mbah uti dan Mbah kung, beliau yang mau menerima saya apa
adanya, tidak ada keluh kesah yang terucap. Beribu kasih dan sayang
untukmu.
Teman-teman Biologi 2007 yang dari awal menemani saya, “second
family” saya di Solo, special untuk temen-temen LEBAY, mami
Hanum (yang bisa mengerti dan selalu member saran terbaik untukku),
Euis (pengalaman luar biasa dari awal kuliah sampe saat ini, big kiss),
Icha (my partner dan semua keajaibannya), Dea (4 Januari), and
also my girl (INTAN).
commit to user
ix
KATA PENGANTAR
Pertama-tama penulis memanjatkan puji syukur ke hadirat Allah swt. yang senantiasa melimpahkan rahmat dan anugerahNya sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penyusunan skripsi dengan judul : “Uji Sitotoksik
Isolat 1 dan 2 Rumput Mutiara (Hedyotis corymbosa (L.) Lamk.) Terhadap
Sel Kanker Payudara T47D Dan Serviks HeLa”. Penyusunan skripsi ini merupakan salah satu syarat untuk memperoleh gelar kesarjanaan strata 1 (S1) di Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sebelas Maret, Surakarta.
Selama melakukan penelitian dan penyusunan skripsi, penulis telah mendapatkan banyak masukan dan dukungan dari berbagai pihak yang sangat membantu dan bermanfaat dalam penyelesaian skripsi ini. Oleh karena itu, pada kesempatan yang berbahagia ini penulis ingin mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada :
Ir. Ari Handono Ramelan M.Sc., Ph.D., selaku Dekan Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sebelas Maret, Surakarta yang telah memberikan dukungan dan dorongan.
Dr. Agung Budiharjo, M.Si., selaku Ketua Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sebelas Maret, Surakarta
yang telah memberikan izin dan dukungannya selama penelitian.
Rita Rakhmawati, M.Si., Apt., selaku Dosen Pembimbing I yang telah memberikan saran dan bimbingannya dari awal penelitian hingga terselesaikannya penyusunan skripsi ini.
Widya Mudyantini, M.Si., selaku Dosen Pembimbing II yang telah
memberikan proyek penelitian, saran dan bimbingan dari awal hingga terselesaikannya penyusunan skripsi ini.
Prof. Dr. Okid Parama Astirin, M.S., selaku Dosen Penelaah I yang telah memberikan bimbingan serta dukungan hingga terselesaikannya penyusunan
commit to user
x
Estu Retnaningtyas N., STP., M.Si, selaku Dosen Penelaah II yang telah
memberikan saran dan dukungan hingga terselesaikannya penyusunan skripsi ini.
Dr. Sunarto, M.S., selaku Pembimbing Akademik beserta dosen-dosen di
Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sebelas Maret, Surakarta yang telah mendidik dan memberikan dorongan
sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini.
Tri Yuliati, SKM selaku Pembimbing penelitian di LPPT, Universitas Gadjah Mada Yogyakarta yang telah memberikan izin penelitian beserta sarana, prasarana dan bantuan selama penelitian.
Nuri Aprillia Ramadhona dan Anisa Amalia yang telah membantu
selama penelitian dan memberikan motivasi. Semua pihak yang telah membantu dalam penyelesaian skripsi ini yang tidak dapat disebutkan satu persatu.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa dalam melakukan penelitian hingga penyusunan skripsi ini masih jauh dari sempurna. Oleh karena itu masukan yang berupa saran dan kritik yang bersifat membangun sangat penulis harapkan.
Semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi kita semua dan pihak-pihak yang berkepentingan.
Surakarta, Juli 2011
commit to user
xi
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL... i
HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING... ii
HALAMAN PENGESAHAN... iii
HALAMAN PERNYATAAN ... iv
ABSTRAK... v
ABSTRACT... vi
HALAMAN MOTTO... vii
HALAMAN PERSEMBAHAN... viii
KATA PENGANTAR... ix
DAFTAR ISI... xi
DAFTAR TABEL... xiii
DAFTAR GAMBAR... xiv
DAFTAR LAMPIRAN... xvi
DAFTAR SINGKATAN... xviii
BAB I. PENDAHULUAN A. Latar Belakang ... 1
B. Perumusan Masalah ... 3
C. Tujuan Penelitian ... 3
D. Manfaat Penelitian ... 4
BAB II. LANDASAN TEORI A. Tinjauan Pustaka …... 5
1. Rumput Mutiara (Hedyotis corymbosa (L.) Lamk.) …...….... 5
2. Kanker ... 10
3. Kanker Payudara ... 16
4. Sel T47D ... 17
5. Gen p53... 18
6. Kanker Serviks ... 19
commit to user
xii
8. Apoptosis ... 22
9. Siklus Sel ... 24
10.Sitotoksik ... 26
B. Kerangka Pemikiran ... 27
BAB III. METODE PENELITIAN A. Waktu dan Tempat Penelitian ... 30
B. Alat dan Bahan ... 30
C. Cara Kerja ... 31
D. Analisis Data ... 33
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN A. Uji Sitotoksik ... 35
B. Sel HeLa ... 38
C. Proses terjadinya kanker serviks oleh sel HeLa... 44
D. Sel T47D ... 44
E. Proses terjadinya kanker payudara oleh T47D... 46
F. Dugaan mekanisme penghambata sel oleh isolat rumput mutiara ... 47
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN A. Kesimpulan ... 51
B. Saran ... 51
DAFTAR PUSTAKA... 52
LAMPIRAN... 59
commit to user
1 BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Kanker merupakan penyebab kematian yang sering terjadi. Di Indonesia,
penyakit ini menduduki peringkat kelima penyebab kematian, bahkan di
negara-negara maju, kanker merupakan salah satu penyakit penyebab kematian yang
menduduki peringkat nomor dua (Anonim, 2008). Penyakit kanker yang sering
ditemui terutama pada wanita adalah kanker payudara dan kanker serviks. Sel
kanker penyebab terjadinya kanker serviks dan payudara yang sering ditemui
adalah sel HeLa dan T47D.
Berbagai pengobatan yang dilakukan untuk mengobati penyakit kanker
yang diakibatkan oleh sel HeLa dan T47D telah banyak dilakukan tetapi
pengobatan kanker yang efektif dan efisien hingga saat ini belum ditemukan
(Sugiyanto et al., 2003). Berbagai upaya penyembuhan telah dilakukan untuk
melawan kanker seperti pembedahan, penyinaran, kemoterapi, dan imunoterapi.
Namun, dari masing-masing cara pengobatan tersebut masih memiliki kelemahan
(Hoffman, 1999). Salah satu contoh pengobatan yang sering dilakukan adalah
penggunaan kemoterapi antikanker. Pengobatan ini belum dapat memberikan
hasil yang optimal karena bekerja tidak spesifik pada sel sehingga dapat merusak
sel-sel normal. Selain itu, pengobatan seperti pembedahan atau pengangkatan
kanker pada umumnya tidak efektif lagi. Pengobatan ini hanya berlaku untuk sel
kanker yang belum mengalami metastasis sedangkan penyinaran, sering kali tidak
commit to user
Berdasarkan pernyataan diatas, perlu dilakukan pencarian alternatif
pengobatan untuk mengobati penyakit kanker. Salah satu upaya adalah pencarian
bahan obat yang berasal dari bahan alam. Indonesia sangat berpotensi dalam
penemuan senyawa baru yang berkhasiat karena keanekaragaman hayatinya yang
melimpah. Salah satu tanaman yang berpotensi sebagai antikanker adalah rumput
mutiara (Hedyotis corymbosa L.). Berdasarkan penelitian Hsu (1998), senyawa
ursolic acid dan oleanic acid pada H. corymbosa memiliki aktivitas
penghambatan terhadap pertumbuhan sel hep-2B dan pembesaran tumor
subcutan, sehingga tumbuhan ini berpotensi sebagai obat kanker. Selain itu,
senyawa ursolic acid mempunyai efek antiproliferatif dan antivirus terhadap sel
kanker serviks (Yim et al., 2006). Dari manfaat tersebut, maka pada penelitian ini
digunakan daun rumput mutiara untuk mengobati penyakit kanker yang
disebabkan oleh sel HeLa dan T47D.
Pada penelitian ini digunakan isolat 1 dan 2 daun rumput mutiara. Isolat
ini didapatkan dari penelitian yang dilakukan oleh Murdiyono (2008) yang berasal
dari fraksi IV hasil fraksinasi bagian fraksi larut etil asetat ekstrak kloroform daun
rumput mutiara. Dari fraksi tersebut dipartisi lebih lanjut oleh Ruwaida (2010)
dan hasilnya didapatkan 6 isolat. Dua isolat teraktif yaitu isolat 4 dan 5 telah
dilakukan uji toksisitas dan sitotoksiknya Ernawati (2010), tetapi keempat isolat
lainnya belum dilakukan pengujian secara lanjut. Pemilihan isolat 1 dan 2 pada
penelitian ini didasari oleh pengujian BST yang dilakukan oleh Ruwaida (2010).
Hasil BST menunjukkan bahwa isolat 1 dan 2 daun rumput mutiara, dapat
commit to user
senyawa uji dikatakan toksik terhadap sel kanker jika nilai LC50 kurang dari 1000
µg/mL sehingga dapat diperkirakan bahwa nilai IC50-24 jam yang akan didapat dari
isolat 1 dan 2 terhadap sel kanker adalah kurang dari 100 µg/mL. Hal ini
menunjukkan bahwa isolat 1 dan 2 rumput mutiara memiliki sifat toksik dan
berpotensi sebagai antikanker.
B. Perumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang di atas, maka dapat dibuat rumusan masalah sebagai
berikut :
1. Apakah isolat 1 dan 2 rumput mutiara (H. corymbosa (L.) Lamk) memiliki efek
sitotoksik terhadap sel kanker payudara T47D dan serviks HeLa ?
2. Berapakah nilai IC50 dari isolat 1 dan 2 rumput mutiara terhadap sel kanker
payudara T47D dan serviks HeLa.
C. Tujuan Penelitian
Berdasarkan permasalahan di atas, penelitian ini bertujuan untuk:
1. Mengetahui efek sitotoksik isolat 1 dan 2 rumput mutiara (H. corymbosa (L.)
Lamk) terhadap sel kanker payudara T47D dan serviks HeLa.
2. Menentukan nilai IC50 dari isolat 1 dan 2 rumput mutiara terhadap sel kanker
commit to user
D. Manfaat PenelitianManfaat yang diharapkan dari penelitian ini adalah :
1. Penelitian diharapkan dapat menjadi bahan informasi ilmiah, tentang efek
sitotoksik isolat rumput mutiara (H. corymbosa (L.) Lamk) sebagai sumber obat
baru antikanker khususnya terhadap sel kanker payudara T47D dan serviks HeLa.
2. Sebagai informasi alternatif pengobatan penyakit kanker payudara dan serviks
commit to user
51 BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
1. Hasil uji sitotoksik menunjukkan bahwa isolat 1 dan 2 rumput mutiara memiliki
efek sitotoksik yang rendah terhadap sel kanker HeLa dan T47D karena memiliki
nilai IC50 lebih besar dari 100 µg/mL.
2. Isolat 1 rumput mutiara memiliki nilai IC50 sebesar 817.711 µg/mL terhadap sel
HeLa dan 604.088µg/mL terhadap sel T47D, sedangkan IC50 yang dihasilkan oleh
isolat 2 rumput mutiara terhadap sel HeLa sebesar 238.23 µg/mL dan 480.049
µg/mL terhadap sel T47D.
B. Saran
1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai kandungan senyawa yang
terdapat di dalam isolat 1 dan 2 rumput mutiara.
2. Perlu dilakukan penelitian mekanisme apoptosis terhadap sel kanker HeLa dan
