PENENTUAN BEBERAPA METABOLIT YANG DIDUGA
MERUPAKAN HAPTEN IMUNOGENIK PADA
PENDERITA YANG ALERGI KONTAK TERHADAP PARA·
FENILENDIAMIN (PFD) MELALUI PEMERIKSAAN UJI
TRANSFORMASI L1MFOSIT T DAN UJI TEMPEL
DISERTASI
Untuk memperoleh gelar Doktor dalam IImu Kedokteran pada
Universitas Sumatera Utara di Medan
di bawah pimpinan Rektor Universitas Sumatera Utara
Profesor dr. Chairuddin P. Lubis DTM&H, SpA(K)
untuk dipertahankan di hadapan Senat Guru Besar
Universitas Sumatera Utara
OLEH
IRMA DAMAYANTI ROESYANTO-MAHADI
NIM: 9733102004
PROGRAM PASCASARJANA
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2003
PENENTUAN BEBERAPA METABOLIT YANG DIDUGA
MERUPAKAN HAPTEN IMUNOGENIK PADA PENDERITA
YANG ALERGI KONTAK TERHADAP
PARA-FENILENDIAMIN (PFD) MELALUI PEMERIKSAAN UJI
TRANSFORMASI L1MFOSIT T DAN UJI TEMPEL
I
DISERTASI ,
OLEH
Irma Damayanti Roesyanto-Mahadi
NIM 9733102004
PROGRAM PASCASARJANA UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2003
PROMOTOR
Profesor Dr. Marwali Harahap, Sp.KK(K)
Guru Besar Luar Biasa Ilmu Penyakit Kulit dan Kelamin
Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara
KO-PROMOTOR
Prof. Dato' Dr. KhairuI Anuar Abdullah
Guru Besar tetap Parasitologi
University Malaya Medical Center
Kuala Lumpur, Malaysia
Dr.Fong Mun Yik
StafPengajar Parasitologi
University Malaya Medical Center
Kuala Lumpur, Malaysia
Telah diuji pada
Tanggal,..•..•...•.•..•••••..•...••....•..••...•....•...••..••.••.••...••..•••...•
PANITIA PENGUJI DISERTASI
Ketua : Prof. Dr. Marwali Harahap, Sp KK(K)
Anggota
FKUSUMEDAN
1.
Prof. Dato' Dr. Kbairul Anuar Abdullah
UMMC Kuala Lumpur,
Malaysia
2. Dr. Fong Mun Yik
UMMC Kuala Lumpur,
Malaysia
3. DR.dr. Saut Sahat Pohan, SpKK(K)
FK.UNAffi SURABAVA
4. Prof. dr. H. Muhd. Dahlan Darip, SPMK
FK. USU MEDAN
5. Prof. dr. Harun R. Lubis SpPD-KGH
FK.USU MEDAN
6. Prof. dr. Harwinta F. Eyanoer, MSc,MPH,DrPH
FK USU MEDAN
Juga .saya ucapkan terima kasih banyak kepada van
deventer-Maasstichting dari negri Belanda, yang pernah memberi bantuan kepada
saya pada masa setelah kepulangan saya dari negri Belanda, sehingga saya
dapat
melakukan
penelitian-penelitian
pendahuluan.
Juga
pada
Lee
foundation yang pernah membantu saya pada masa pendidikan S3 ini.
Akhirnya, saya ingin membagi kebahagian ini dan mengucapkan
terima kasih setulusnya saya sampaikan atas dorongan yang tidak
henti-hentinya, kepada suami saya tercinta Roesyanto, anak-anak kami yang
kusayangi Dianing, Iman, Uke dan Indah yang dengan sabar, penuh
pengertian mendampingi saya selama in; terutama pada masa pendidikan S3
saya.
Tanpa doronganmu dan anak-anak tak akan pernah tercapai jenjang ini
Kepada Allah yang Maha Pengasih dan Maha Penyayang saya
mengucapkan syukur a/hamdulillah atas nikmat yang telah saya terima
selama ini hanya kepada-Nya saya berserah diri dan memohon
keridhaan-Mu.
Sebelum saya menutup ucapan ini, izinkanlah saya membacakan
beberapa pantun Melayu untuk mengungkapkan perasaan saya.
Berdebur ombak berdebur
Deburnya sampai kepanlai Bedagai
Kepada Allah aku bersyukur
Karena 53 lelah selesai
Banteng terkecoh oleh matador
Membuat penonton jadi penasaran
Akan kukenang jasa pak rektor
Atas bantuan yang telah diberikan
Kala orang lemu lawak coat sakil Kuning
Penyembuh darah linggi, buah belimbing
5epuluh jari kuangkal ke alas kening
Ucapan terima kasih pada para pembimbing
Lagu Cindai nyanyian Nurchalizah
Didendangkan sangatlah merdu
UMMC dan U5U, tak dapal dipisah
Bagaikan, saudara kandung seibu
Wabillahitlaufiq
wal
hidayah,
wassalamu'
alaikum
warahmatullahi
wabarakatuh
x
PENENTUAN BEBERAPA METABOLIK YANG DIDUGA MERUPAKAN
HAPTEN IMUNOGENIK PADA PENDERITA YANG ALERGI KONTAK
TERHADAP PARA-FENILENDIAMIN
(PFD)
MELALUI PEMERIKSAAN UJI
TRANSFORMASI L1MFOSIT T DAN
Uji
TEMPEL
Ringkasan
Latar belakang:
Ada dugaan bahwa derivat oksdatif dari Para-fenilendiamin (PFD) yaitu Basis
Bandrowski's (BB)
dan beberapa bahan lainnya (p-aminofenol, p-asam
aminobenzoik) adalah suatu hapten imunogenik.
Uji tempel dengan para-fenilendiamin untuk menentukan diagnosis dermatitis
kontak karena para-fenilendiamin dapat memberikan nilai positip semu
ataupun negatip semu.
Untuk mengetahui adanya reaksi a/ergi yang disebabkan oleh metabolit PFD
dapat dilakukan pemeriksaan uji transformasi
lirnfosit,
Tujuan:
Menentukan
Basis
Bandrowski's
(BB),
p-aminofenol
(PAF),
p-asam
aminobenzoik (PAAB) , yang dapat bereaksi silang dan sebagai hapten
imunogenik pada penderita yang alergi terhadap para-fenilendiamin (PFD).
Metode:
Dari tahun 2001 sampai tahun 2003, 14 pasien yang alergi terhadap para
fenilen-diamnin (PFD) diJakukan pemeriksaan uji tempel dengan PFD, (para
aminofenol (PAF) dan para amino asam benzoik (PAAB) ,uji transformasi
limfosit (UTL) terhadap BB, PFD, PAF dan PAAB. Pertama sekali ditentukan
konsentrasi optimal dari PFD, BB, PAF dan PAAB pada orang
sehat,
Uji
transformasi limfosit dilakukan dengan konsentrasi optimal ini. Uji
in vitro
dari
Iimfosit
blastogenesis
dengan
mitogen
ini
dilaksanakan
dengan
menggunakan piring mikro yang banyak dengan dasar rata. Kultur dilakukan
dengan dua seri (duplo). Hasil dari kultur dua seri ini dihitung nilai indeks
xi
stimulasinya (IS) dengan menghitung rasio nilai rata-rata kultur yang
mendapat stimulasi antigen dengan nilai rata-rata kultur yang tidak mendapat
stimulasi antigen.
Hasil:
Semua penderita yang alergi dengan PFD memberikan hasil uji
tempel yang positif terhadap PFD, semua kelompok kontrol menberikan hasil
uji tempel yang negatif. Dari hasH uji temper terhadap metabolit PFD didapati
9 dari 14 penderita yang alergi terhadap PFD memberikan hasil uji tempel
positif terhadap PAF (64,3%). Tidak satupun yang memberikan hasH positif
terhadap PAAB. Sementara uji temper dengan BB tidak dHakukan karena
tidak stabil. Berdasarkan hasH uji transformasi Iimfosit
diketahui bahwa
indeks stimulasi BB pada kelompok penderita sangat
bermakna
(p<O,01) atau
lebih besar pada kelompok penderita daripada kelompok kontrol. Tak ada
perbedaan antara kelompok penderita dan kelompok kontrol dengan
metabolit-metabolit PFD. HasH uji transformasi limfosit antara kelompok
penderita dan kelompok kontrol menunjukkan tidak ada perbedaan (p>O,05)
terhadap PFD dan PAAB. Hasil uji transformasi limfosit ternadap BB dan PAF
menunjukkan perbedaan yang bermakna
(p<O,05)
antara kelompok penderita
dan kelompok kontrol, dimana hasH uji transformasi limfosit positif lebih
banyak pada
kelompok
penderita.
Dari analisis hubungan hasil
uji
transformasi Iimfosit PFD dengan metabolit-metabolitnya diketahui hanya BB
yang memberikan hubungan positif dengan PFD dimana seluruh hasil uji
transformasi lirnfosit positif dengan PFD juga positif terhadap BB dan seluruh
hasil uji transformasi Iimfosit negatif dengan BB negatif juga dengan PFD.
Kesimpulan:
Dari urut penelitian uji temper dan uji transformasi limfosit yang dilakukan
terbukti BB merupakan hapten imunogenik pada penderita yang alergi
dengan PFD . Dapat dipercaya uji transformasi limfosit dengan BB secara
in
vitro
pada pasien dermatitis kontak karena PFD, sedangkan uji transformasi
XII
Iimfosit dengan PFD tidak dapat dipakai sebagai uji yang dipercaya pada
pasien yang menderita dermatitis kontak karena PFD.
xiii
Summary
DETERMINATION
OF
THE
METABOLITES
WHICH
MAY
ACT
AS
IMMUNOGENIC HAPTEN ON
CONTACT ALLERGIC AGAINST PPD
USING LYMPHOCYTE TRANSFORMATION TEST (LTT) AND PATCH
TEST (PT)
Background:
It has been suspected that Bandrowski's base (BB) and other subtances
(para aminophenol and para aminobenzoic acid) are immunogenic hapten in
PPD hypersensitivity. Patch test with para-phenylenediamine (PPD) when
used for diagnosis of contact dermatitis due to para-phenylenediamine may
give either false positive or false negative results. In order to determine the
metabolite of PPD as a causative factor of contact dermatitis a lymphocyte
transformation test has been used.
Objective: To prove that Bandrowski's base (BB), aminophenol (PAP),
p-aminobenzoic acid (PABA) are immunogenic hapten and cross reactive in
patients with allergic contact dermatitis due to para-phenylenediamine (PPD).
Material and Methods: Between the year 2001 to 2003, 14 patients allergic
to PPD were subjected to lymphocyte transformation test (LTT) and patch test
(PT) with p-phenylenediamine (PPD), p-aminophenol (PAP), p-aminobenzoic
acid (PABA). First of all the optimal concentration of BB, PPD, PAP and
PABA is determined.
In vitro
stimulation of lymphocyte blastogenesis was
done with the optimal concentration. All
in vitro
blastogenesis of lymphocyte
with all of mitogen were performed in flat bottomed, multiwell
microtiter
plates.
Cultures were set up in duplicate. Results of duplicate cultures are expressed
as stimulation index
(51)
values which are calculated as the ratio of the mean
of stimulated cultures to the mean of unstimulated control cultures.
xiv
Results: All patients allergic to PPD
were positifve
for patch
test
with PPD
and all control patients were negative for PPD patch test. From the results of
patch test to the metabolite of PPD, it was found that 9 out 14 patients
(64,3%) were also positifve for patch test with PAP. There were no positive
patch test to PABA in patients allergic to contact dermatitis due to PPD. There
were significant difference (p<O,01) between the mean of stimulation index for
BB in patients allergic to contact dermatitis due to PPD and normal patients
(control patients). There were no difference (p>O,05) in patients allergic to
contact dermatitis due to PPD
and
normal patients to metabolites of PPD.
There were also no difference between the lymphocyte transformations test to
PPD and PAAB in patients of contact dermatitis due to PPD and control
patients. However there is significant
difference (p<O,05) in results of
lymphocyte transformation test (LIT) when stimulated with BB and PAP. The
corelation of lymphocyte transformation test with PPD and the metabolites of
PPD (BB, PAP and PABA) showed positive corelation with BB.
Conclusions: From the order of patch test and lymphocyte transformations
tets performed, BB is proved immunogenic hapten on patients allergic to
para-phenylene diamine. Based on the results it can be concluded that BB
can stimulate T lymphocyte in vitro in patients allergic to PPD and PPD
cannot be used as a reliable
in vitro
test for the assessment of PPD contact
sensitivity
xv
