I.
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang Masalah
Anggrek merupakan salah satu tanaman anggota famili Orchidaceae yang banyak menarik perhatian para pengemar tanaman hias. Salah satunya adalah genus anggrek Phalaenopsisyang mempunyai daya tarik unik. Keunikan bentuk, ukuran dan warna bunganya yang sangat bervariasi, ditunjang oleh daya tahan bunga yang relatif lama menjadi faktor tingginya nilai ekonomiPhalaenopsis sehingga memberikan prospek pasar yang cukup cerah dan meningkatkan minat para pemulia tanaman untuk menciptakan hibrida-hibrida baru (Direktorat Tanaman Hias, 2005).
Pada saat ini minat masyarakat akan anggrek semakin tinggi. Banyak pecinta anggrek mencari anggrek spesies langka dan hibrida-hibrida baru. Para pelaku bisnis anggrek juga mulai memasuki bidang usaha yang spesifik, misalnya spesialis produksi tanaman dalam botol danseedling, community pot,spesialis anggrek spesies, atau spesialis berdasarkan genus tanaman anggrek seperti Phalaenopsis,Vanda,Cattleyadan lain-lain (Widiastuti, 2006).
Menurut Yusnita (2010,in press), dihasilkannya klon dan hibrida anggrek baru merupakan salah satu kunci keberhasilan usaha di bidang peranggrekan. Salah satu cara untuk menghasilkan hibrida baru anggrek adalah dengan melakukan hibridasasi dilanjutkan dengan perbanyakan vegetatif hasil-hasil silangan yang mempunyai sifat-sifat unggul.
AnggrekPhalaenopsisspesies maupun hibrida dapat digunakan sebagai tetua persilangan untuk menghasilkan hibrida baru yang sesuai dengan keinginan pasar. Namun hasil penelitian menunjukkan bahwa tidak semua pasangan anggrek Phalaenopsisdapat disilangkan dan tidak semua tanaman anggrek dapat
diserbukkan sendiri dan menghasilkan biji. Oleh karena itu perlu diidentifikasi di antara koleksi tanaman anggrek, yang dapat digunakan sebagai tetua
persilangan (Darmono, 2004).
3
dengan beberapa ratus sel. Biji anggrek yang berukuran sangat kecil hanya terdiri dari embrio yang terdiri dari ± 30 sel dengan mericarp (George, 1996). Biji anggrek tidak mempunyai cadangan makanan, jika terdapat cadangan makanan jumlahnya sangat sedikit. Tingkat keberhasilan perkecambahan biji anggrek secara alami sangat rendah. Karena ukurannya yang sangat kecil dan tidak memiliki cadangan makanan, maka untuk berkecambah secara alami diperlukan simbiosis dengan cendawan mikoriza (George, 1996, Arditti, 1992 ).
Formulasi media yang dapat digunakan untuk pengecambahan biji anggrek
diantaranya Knudson C, Vacin dan Went, dan Murashige dan Skoog (1962) yang mengandung garam-garam mineral esensial untuk pertumbuhan kecambah biji anggrek (Yusnita, 2006, George,1996; Khishoret al, 2005; Martin and
Madaserry 2006). Keberhasilan pengecambahan biji anggrekPhalaenopsispada berbagai jenis media telah dilaporkan, misalnya Yusnitaet al. (2006) dengan menggunakan media Vacin dan Went serta Utamiet al. (2007) menggunakan media NewPhalaenopsis(NP). Media Murashige dan Skoog (MS)full strength dapat juga digunakan untuk pengecambahan biji anggrekPhalaenopsiskarena mengandung unsur-unsur nutrisi yang lengkap untuk pertumbuhan biji anggrek.
Kebutuhan hara anorganik di dalam media kultur tersedia dalam berbagai formulasi media seperti Vacin-Went (1949), Knudson C (1946) Reinert-Mohr,
Knop’s (1967), dan Murashige dan Skoog (1962). Sumber hara anorganik
pertumbuhan kulturin vitro(Lingga dan Marsono (2004)yang dikutip dalam Warganegara, 2009).
Media perkecambahan biji anggrekin vitroyang terdiri dari pupuk lengkap mungkin dapat digunakan untuk mengecambahkan bijiPhalaenopsisdengan efektifitas yang tidak kalah baik dibandingkan dengan formulasi lain.
Arang aktif merupakan bahan adenda dalam media kultur yang sering digunakan untuk tujuan tertentu, misalnya untuk pengakaran tunas atau untuk tujuan lain. Arang aktif dilaporkan berpengaruh positif untuk pertumbuhanin vitro seedling Dendrobium.Pengaruh penambahan arang aktif ke dalam media pengecambahan biji anggrekPhalaenopsisperlu dipelajari. Arang aktif adalah bahan adenda untuk media kultur jaringan yang mempunyai sifat sebagai penyerap racun dll. dan menghitamkan media. Penambahan arang aktif dapat meningkatkan pertumbuhan seedlinganggrekDendrobium in vitro(Syaputri, 2009) dan meningkatkan
pertumbuhan akar pada tunas anthuriumin vitro(Sismanto, 2009). Penambahan arang aktif ke media dasar MS atau Growmore mungkin dapat meningkatkan perkecambahan biji dan pertumbuhanseedling Phalaenopsis.
5
antaranya faktor dari luar plantlet yaitu pemberian zat pengatur tumbuh (ZPT) (Yusnita, 2004). Untuk meningkatkan pertumbuhan bibit selama diaklimatisasi dapat diberikan zat pengatur tumbuh benziladenin (BA) dan giberellin (GA). Pemberian ZPT BA dan GA diharapkan dapat memicu atau merangsang pertumbuhan tunas bibit anggrek selama periode aklimatisasi.
1.2. Rumusan Masalah
Penelitian ini untuk mendapatkan jawaban dari permasalahan dalam upaya menghasilkan angrek hibrida Phalaenopsis, yaitu
1. Apakah setiap tetua anggrekPhalaenopsis mempunyai kemampuan (kompatibel) untuk disilangkan secara dialel lengkap dan dapat menghasilkan polong buah berbiji.
2. Formulasi media apa yang optimal untuk pengecambahan biji Phalaenopsishibrida in vitro.
3. Apakah penambahan arang aktif ke dalam media berpengaruh terhadap pengecambahan biji dan pertumbuhanseedling phalaenopsis in vitro. 4. Apakah pemberian ZPT BA atau GA dapat meningkatkan pertumbuhan
1.3. Tujuan Penelitian
Penelitian ini bertujuan untuk:
1. Mendapatkan informasi tentang pasangan tetua anggrekPhalaenopsisdari persilangan dialel lengkap yang mempunyai kemampuan untuk disilangkan (kompatibel) dan dapat menghasilkan polong buah berbiji.
2. Memperoleh komposisi media kultur (MS atau Growmore) dengan atau tanpa arang aktif yang optimal untuk pengecambahan bijiPhalaenopsis in vitro.
3. Memperoleh komposisi media kultur (MS atau Growmore) dengan atau tanpa arang aktif yang optimal untuk pertumbuhanseedling Phalaenopsis in vitro.
4. Mempelajari pengaruh ZPT (BA atau GA) terhadap pertumbuhan bibit anggrekPhalaenopsisselama periode aklimatisasi.
1.4. Kerangka Pemikiran
Upaya untuk mendapatkan anggrek hibridaPhalaenopsisharus dilakukan dengan cara mengoleksi, menyeleksi, menyilangkan tetua-tetua anggrekPhalaenopsis, mengecambahkanin vitrobiji hasil persilangan untuk menghasilkanprotokom, dan mengaklimatisasikan bibit botolan secaracommunity potmaupun individu di dalam media tanam.
7
dan bebas dari hama dan penyakit. SeSellaannjjuuttnnyyaadidillaakkuukkaannkekeggiiaattaannpersilanganp tetua, pengecambahan polong, regenerasi plantlet, dan aklimatisasi bibit ke lingkungan luar botol seperti yang tertera pada alur berikut
Skema strategi penelitian ini dapat digambarkan sebagai berikut :
Persilangan dilakukan dengan melakuan penyerbukan buatan dengan cara meletakkan serbuk sari (pollinia) pada putik bunga. Waktu yang baik untuk penyerbukan adalah pada pagi hari. Setelah ditentukan tanaman induk, penyerbukan dapat dilakukan dengan urutan sebagai berikut. Mula-mula ditentukan bunga yang akan digunakan sebagai induk jantan dan induk betina. Setelah penyerbukan, sebaiknya petal termodifikasi/labellum bunga yang telah diserbuki dilepaskan supaya tidak menjadi landasan bagi serangga yang mungkin dapat mengugurkan serbuk sari atau membawa serbuk sari baru. Setiap bunga yang sudah diserbukkan dilabel pada tangkai bunga, bertuliskan tanggal
Mengoleksi (mengumpulkan) tetua anggrekPhalaenopsis
Menyeleksi tetua
Persilangan antar tetua yang terseleksi
Pengecambahan biji hasil persilangan
sampai menjadi protokom dan pembesaranseedling in vitro
penyerbukan dan kode atau nama tetua betina dan jantan. Penyerbukan yang berhasil ditandai oleh membesarnya bakal buah dan layunya perhiasan bunga. Pengamatan dilakukan untuk perkembangan polong buah setelah penyerbukan bunga, keberhasilan penyerbukan (jadi atau tidaknya polong buah), penomoran populasi hasil silangan, panjang dan diameter polong buah, serta bobot segar polong buah pada 3 sampai 4 bulan setelah penyerbukan.
Setelah didapat hasil silangan berupa polong buah yang cukup masak (kurang lebih 4 bulan), biji-bijiPhalaenopsiskemudian ditanam secara aseptik dalam kultur in vitropada media pengecambahan (MS atau Growmore) yang diperkaya dengan atau tanpa arang aktif (semuanya dengan penambahan 150 ml/l air
kelapa). Keberhasilan pengecambahan ditandai dengan terbentuknya protokom yang berasal dari biji viable. Oleh karena itu, perkembangan awal biji anggrek menjadi protokorm juga akan diamati. Pada percobaan berikutnya, protokorm disubkultur ke media Growmore dengan atau tanpa arang aktif kemudian diamati pertumbuhanseedlingnya setelah dua bulan.
9
lebih meningkat, sehingga pertumbuhanseedlingpada saat aklimatisasi lebih cepat.
1.5. Hipotesis
1. Akan diperoleh beberapa tetua anggrekPhalaenopsis dan spesies yang kompatibel bila disilangkan secara selfing maupun crossing atau dialel lengkap.
2. Media MS lebih baik daripada Growmore baik untuk pengecambahan biji maupun untuk pertumbuhanseedlinganggrekphalaenopsis. 3. Media tanpa arang aktif lebih baik daripada media arang aktif untuk
pengecambahan bijiphalaenopsis.
4. Terdapat perbedaaan pertumbuhanseedling in vitroakibat pemberian arang aktif kedalam media MS atau Growmore.
2.1 Anggrek bulan (Phalaenopsis)
Phalaenopsis adalah salah satu genus anggrek yang memiliki kurang lebih 2000 species jumlah varietasnya sekitar 140 jenis, 60 diantaranya terdapat di indonesia. Selama ini pemahaman namaPhalaenopsis sering disalah artikan dengan anggrek bulan. Padahal, anggrek bulan atau Phalaenopsis Amabilis hanya lah salah satu spesies dari genusPhalaenopsis . NamaPhalaenopsis berasal dari Yunani, yaitu Phalaenos yang berarti ngengat atau kupu-kupu dan opsis berarti bentuk atau penampakan. Seorang Ahli botani memberi nama genus anggrek ini dengan dengan Phalaenopsis pada tahun 1825 adalah Blume. Phalaenopsis, diberikan pada waktu Blume dalam hutan dan mengira telah melihat sekawanan kupu-kupu putih yang tengah hinggap pada sebatang ranting kayu (Rentoul, 2003).
11
Menurut Yusnita (2011), langkah-langkah yang perlu dilakukan dalam pemuliaan
anggrek adalah :
1. Menentukan tujuan pemuliaan dan menentukan karakter apa saja yang ingin
didapatkan dalam pemuliaan tersebut .
2. Mempelajari dan mengumpulkan plasma nufah anggrek yang berpotensi sebagai
tetua /indukan yang karakter unggulnya akan digunakan.
3. Melakukan persilangan antar tetua terpilih.
4. Pengecambahan bijiin vitroyang akan memberikan populasiseedlingdalam
kultur in vitro, dilanjutkan dengan aklimatisasi planlet dan pembesaran serta
pemeliharaan tanaman hingga berbunga di rumah kaca.
5. Evaluasi dan seleksi progeni untuk karakter yang diinginkan.
6. Perbanyakan hibrida Phalaenopsis unggul secara in vitro agar diperoleh jumlah
tanaman klonal yang cukup banyak.
7. Pendaftaran dan pelepasan varietas baru yang siap dipasarkan.
Pemuliaan Anggrek merupakan kegiatan untuk mengubah susunan genetik tanaman anggrek secara tetap (baka) sehingga memiliki sifat atau penampilan sesuai dengan tujuan yang diinginkan pemulia tanaman anggrek tersebut. Pemuliaan anggrek umumnya mencakup tindakan penangkaran, persilangan, dan seleksi. Dasar pengetahuan mengenai perilaku biologi tanaman anggrek dan pengalaman dalam budidaya diperlukan dalam Pemulian anggrek sehingga sering kali dikatakan sebagai gabungan dari ilmu dan seni (Yusnita, 2011).
peranggrekan dan memastikan tersedianya benih atau bahan tanam yang baik dan bermutu tinggi.
2.2. Anatomi angrekPhalaenopsis Kingdom : Plantae
Devisi : Magnoliophyta Klas : Liliopsida Ordo : Asparagales Family : Orchidaceae Sub Family : Epidendroideae Genus : Phalaenopsis
Spesies : Phalaenopsis amabilis
2.2.1. Bunga
Secara umum, susunan bunga Phalaenopsis sama dengan jenis anggrek lainnya. Bunga tersebut tersusun menurut pola baku, yaitu merupakan bunga sempurna yang mempunyai organ reproduksi jantan (androecium) dan organ reproduksi betina gymnoecium (Utami dkk,2007).
13
Di bagian tengah bunga terdapat tugu bunga (column atau gymnosium) yang merupakan tempat berkumpulnya organ reproduksi jantan dan betina. Serbuk sari berupa individu pollen (monads) yang berkumpul dalam satu kelompok,atau terdiri dari empat butir yang bergabung dalam massa disebut pollinia umumnya berwarna kuning pucat atau kuning cerah tersimpan dalam kepala sari yang disebutanther capterletak tepat diatas ujung tugu bunga.
Pollinia berjumlah 2-8 buah, terbungkus jaringan tipis berperekat dan terkadang terdapat tangkai sari. Pollinia keras sampai agak lunak denan bagian dasarnya menempel pada tangkai yang disebut caudicle. Putik atau alat reproduksi betina adalah rongga berisi materi lengket yang terletak dibawah anter cap meng hadap ke labellum. Bakal buah atau ovary terletak didasar bunga yaitu dibawah tugu,sepal dan petal. Tugu merupakan tempat alat reproduksi betina yaitu putik dan alat reproduksi jantan (Utami dkk, 2007).
2.2.2. Daun
2.2.3. Batang
Pertumbuhan batang anggrekPhalaenopsisbersifat monofodial yaitu meninggi atau vertical pada satu titik tumbuh dan terdiri dari hanya satu batang utama. Bunga keluar dari sisi batang diantara dua ketiak daunnya. Ukuran batang sangat pendek, bahkan nyaris tidak tampak tidak seperti kebanyakan tanaman anggrek lainnya, anggrek ini tidak menghasilkan umbi semu (pseudo bulb). Disepanjang batang selalu muncul akar-akar udara. Kegunaan akar ini untuk mencari makan sambil merekatkan diri pada benda-benda disekitarnya agar batang tetap tegak (
Utami, dkk ,2007).
2.2.4. Akar
Anggrek Phalaenopsis dihabitat aslinya hidup epifit. Akarnya menempel pada batang atau dahan tanaman lain. Biasanya akar yang menempel tersebut mengikuti bentuk permukaan batang tempat ia menempel. Akarnya nyaris tidak berambut jika ada pun sangat pendek atau menempel kuat pada batang tanaman yang ditumpangi.
15
2.2.5 .Polong buah
Buah anggrek berwarna hijau ukurannya beragam bentuknya seperti kapsul memanjang. Polong buah tersusun dari tiga buah karpel apabila masak akan pecah mengerluarkan biji yang banyak. Biji terdapat didalam buah yang jumlahnya mencapai jutaan, tetapi biji anggrek tidak mempunyai cadangan makan (endosperm) seperti biji tanaman lain. Panjang biji sekitar 0,3–5 mm dan
lebarnya sekitar 0,08-0,75 mm. Embrio pada biji jauh lebih kecil dari biji yaitu sekitar 30-100 um x 100-300 um dan beratnya 0,3-14 um. Di dalam biji embrio yang tersusun dari sekitar 100 sel menempati bagian kecil sel ruang biji yang dibunkus oleh testa mirip jaring jadi sekitar 70-90 % ruangan dalam biji berisi udara. Oleh karena itu untuk perkecambahan dan pertumbuhan awal
membutuhkan unsur-unsur sepeti gula, hara makro, hara mikro dan ZPT dari luar atau lingkungan sekitarnya (Utami dkk, 2007).
2.2.6 Reproduksi tanaman anggrek
Pada tanaman berbunga (termasuk anggrek), akar, batang, dan daun merupakan organ vegetatif dari sporofit (bagian tanaman pembentuk spora), sedangkan bagian tanaman yang memproduksi gamet disebut gametofit (bagian tanaman pembentuk gamet). Setelah tanaman memasuki fase reproduktif, maka
pertumbuhan vegetatif akan diselingi oleh pertumbuhan organ reproduktif (bunga) dan setelah itu bagian vegetatif dapat kembali tumbuh. Selanjutnya secara
berurutan, yaitu: Pembentukan mikro spora dan perkembangannya menjadi pollen, Pembentukan megaspora dan kantung embrio, Penyerbukan,
Perkecambahan pollen, Fertilisasi, Perkembangan zigot menjadi embrio, Pembentukan biji dalam buah (Yusnita, 2011).
Reproduksi seksual suatu tanaman dalam kelas angiospermae memerlukan proses penyerbukan. Proses ini kemudian diikuti oleh berkecambahnya pollen yang ditandai oleh tumbuh memanjangnya tabung pollen dan setelah itu diikuti oleh bertemunya inti sel sperma dengan inti sel telur di dalam ovul. Fertilisasi
berakibat pada terbentuknya zigot, yang kemudian berkembang menjadi embrio di dalam biji, dan jika biji berkecambah akan menjadi individu tanaman baru.
Terjadinya fertilisasi pada anggrek mengakibatnya pembesaran ovari dan terbentuknya buah anggrek, yang di dalamnya terdapat ribuan biji. Fase
embrionik dimulai dari terbentuknya zigot hingga terbentuknya embrio dalam biji. Fase juvenil dimulai dari protokrom yang merupakan struktur hasil
pengecambahan biji hingga masa transisi sebelum tanaman memasuki fase dewasa. Fase dewasa merupakan periode pada siklus tanaman, dimana tanman sudah dapat berpotensi untuk berbunga (Yusnita, 2011).
2.2.7 Tipe penyerbukan pada bunga anggrek
Kebanyakan jenis anggrek bersifat allogamus (menyerbuk silang) dengan vektor berbagai jenis hewan, tetapi ada sebagian kecil (sekitar 3%) yang bersifat
17
terbentuk secara apomiksis (Arditti, 1992). Perbedaan cara reproduksi ini dapat berdampak pada perbedaan konstitusi atau variabilitas genetik, sedangkan penyerbukan sendiri berakibat pada kestabilan genetik dan berkurangnya variabilitas.
2.2.6. Anatomi bungga Anggrek Phalaenopsis
labellum=petal termodifikasi Gambar 1. BungaPhalaenopsis
2.3 Persilangaan dialel lengkap
Persilangan dilakukan dengan membuka alat kelamin bunga (gymnostemium) anggrek. Lidi atau tusuk gigi ditempelkan pada lempeng perekat di putik bunga, kemudian digunakan untuk mengambilpollen.Pollendiletakkan di kepala putik (stigma). Persilangan yang diikuti dengan penyerbukan diakhiri dengan
Petal
Sepal
Anter cap
membuang lidah bunga untuk menghindari serangga menggagalkan penyerbukan, dan memberikan label pada hasil persilangan tersebut (Widiatoety, 2003).
Persilangan buatan yang dilakukan antar genus hanya baik dilakukan untuk bunga dengan tipe pollen yang sama, yaitu antarapolinia-polinia(misal:Cattleya denganDendrobium) ataupolinaria-polinaria(misal:Vandadengan
Phalaenopsis). Selain itu, faktor kesesuaian (compatibility) juga menentukan faktor keberhasilan dalam proses penyerbukan.
Pemilihan tetua disesuaikan dengan hasil yang diinginkan dalam suatu proses persilangan. Secara garis besar tanaman induk harus sehat, yang dicirikan dengan penampilan fisik segar, hijau, tumbuh tegak, kuat dan kokoh.
Untuk dapat menghasilkan persilangan yang diinginkan, maka perlu diketahui sifat-sifat yang dimiliki oleh tetuanya. Sifat-sifat ini ada yang bersifat dominan (sifat yang kuat dan menonjol) dan sifat-sifat yang tidak nampak (resesif, misalnya keawetan bungan dan proses pembungaannya. Sifat-sifat yang
diturunkan oleh tetua dari hasil persilangan F1 (keturunan pertama) dapat bersifat dominan, resesif ataupun dominan tidak sempurna yaitu mempunyai sifat antara kedua tetua (parental)Widiatoety (2003).
Di Indonesia pada umumnya persilangan anggrek lebih mengarah untuk
menghasilkan warna bunga yang menarik, untuk itu sangatlah perlu diperhatikan zat-zat dan organel pembentuk warna pada bunga yaitu:
19
sangat dipengaruhi oleh pH lingkungan cairan sel, bila pH rendah akan muncul warna merah, sedangkan bila pH tinggi akan muncul warna biru. 2. Anthoxanthin, merupakan zat kimia organik yang juga larut dalam
sitoplasma. Zat ini menimbulkan warna kuning muda hingga kuning tua. Jika anthoxantin berada bersama-sama dalam sitoplasma, maka kedua warna tersebut dapat tercampur. Perubahan warna ini dikenal dengan sebutan ko-pigmentasi
3. Plastida pembawa pigmen warna berbentuk butiran, sehingga tidak larut dalam sitoplasma seperti pigmen yang lain. Pigmen dari plastida akan nampak jika anthocyanin dan anthoxanthin tidak larut dalam sitoplasma.
Albinismeyang terjadi pada bunga anggrek seringkali memberikan suatu nilai komersial yang tinggi.Albinismeumumnya terjadi jika warna yang muncul tidak sesuai dengan kaidah keilmuan dalam genetika tanaman. Hal ini dikarenakan adanya faktor gen atau kromogen yang bersifat resesif atauupun resesif keduanya.
Teknik penyilangan anggrek mudah dipelajari, namun tingkat keberhasilan penyilangan tersebut ditentukan oleh banyak aspek, antara lain waktu
penyilangan, umur bunga betina, mutu bunga jantan sebagai penghasil pollen, dan yang tidak kalah pentingnya adalah faktor keuletan dan pengalaman penyilang itu sendiri (Widiatoety , 2003).
Pada persilangan tersebut dilakukan silang dalam (selfing) dan crossing antar tetua persilangan secara bolak balik sehingga dapat diketahui kompatibilitas antara satu tetua dengan tetua yang lain (Fehr, 1993).
Persilangan diallel terdiri dari dua jenis yaitu : persilangan diallel penuh dan parsial. Persilangan parsial masih dapat dibagi lagi menjadi persilangan diallel parsial dengan selfing maupun tanpa selfing. Persilangan penuh digunakan bila diduga ada pengaruh maternal (Fehr, 1993).
Sifat bunga anggrek Phalaenopsis adalah hemaphrodit, di dalam satu kuntum bunga terdapat bunga jantan dan bunga betina sifat kelaminnya disebut monoandrae, yaitu alat kelamin jantan dan betina berada pada satu tempat. Keberhasilan persilangan di tentukan oleh berbagai aspek, antata lain umur bunga, waktu melakukan persilangan, mutu bunga jantan sebagai penghasil polen. Sifat yang diturunkan pada hasil persilangan F1 (turunan pertama) bisa dominan, dominan tidak sempurna yaitu mempunyai sifat antara induk betina dan induk jantan, resesif (Widiastoety, 2003)
2.4 Perkecambahan biji KulturIn vitro
21
yaitu perbanyakan atau multiplikasi propagul; tahap (3) pemanjangan tunas dan pengakaran; dan tahap (4) yaitu aklimatisasi plantlet ke lingkungan luar (Murashige dan Soog (1974); Debergh dan Maene (1981) yang dikutip oleh George, 1996).
Pertumbuhan dan perkembangan kultur secara umum ditentukan oleh genotipe tanaman induk dan lingkungan kultur (media dan lingkungan fisik). Menurut George (1996), respon perbanyakan eksplan di dalam media pada lingkungan kultur berbeda antargenus bahkan antarspecies tanaman. Lingkungan fisik yang dibutuhkan adalah kondisi dengan suhu, kelembaban, dan pencahayaan yang cocok untuk pertumbuhan dan perkembangan kultur. Kebutuhan ketiga faktor lingkungan tersebut berbeda antarsetiap spesies dan tujuan pengulturan. Bahkan, modifikasi komposisi nutrisi dan zat pengatur pertumbuhan didalam media, serta kondisi ruang kultur sangat dibutuhkan untuk memicu pertumbuhan dan perkembangan sesuai dengan tujuan pengulturan.
2.5 Komponen Media Kultur
Kebutuhan hara anorganik di dalam media kultur tersedia dalam berbagai formulasi media seperti Vacin-Went (1949), Knudson C (1946) Reinert-Mohr,
Knop’s (1967), dan Murashige dan Skoog (1962). Sumber hara anorganik
(1987), komposisi media kultur umumnya mengandung unsur anorganik (makro dan mikro), bahan organik (di antaranya vitamin, asam amino, gula/karbohidrat, dan arang aktif), dan zat pengatur tumbuh essensial.
Pupuk majemuk daun yang sering digunakan dalam teknik kultur jaringan antara lain adalah Hyponex, Growmore, Gandasil, Bayfolan, dan Vitabloom. Growmore 32-10-10 merupakan pupuk daun anorganik yang mengandung unsur hara makro, namun selain unsur hara makro Growmore juga dilengkapi dengan unsur hara mikro seperti Mg, Mn, Mo, Fe, Ca, Co, B, S, dan Zn (Lingga dan Marsono, 2004). Persentase hara (N-P2O5-K20) yang dikandung pupuk Growmore biru dapat
dilihat pada Tabel 2. Pupuk ini berbentuk butiran yang digunakan untuk memacu pertumbuhan vegetatif tanaman (Lingga dan Marsono, 2004).
Zat pengatur tumbuh adalah semua senyawa organik bukan nutrisi (sintetik) yang dalam konsentrasi rendah dapat mengatur (merangsang atau menghambat)
23
Tabel 1. Komposisi Growmore 32-10-10.
Sumber: Lingga dan Marsono, 2004
Penambahan bahan pemadat seperti gelrite dan agar ke dalam media dilakukan untuk menghasilkan bentuk fisik media cair, semipadat, dan padat sesuai kebutuhan dan pertumbuhan kultur (Arditti dan Ernst, 1993).
Kandungan Senyawa Persentase (%) Total Total Nitrogen (N)
Fosfat (P2O5)
Kalium (K2O)
Kalsium (Ca) Magnesium (Mg) Sulfur (S)
Boron (B) Tembaga (Cu) Besi (Fe) Mangan (Mn) Molibdenum (Mo) Zing (Zn)
32% 10% 10% 0,05% 0,10% 0,20% 0,02% 0,05% 0,10% 0,05% 0,0005%
Tabel 2. Formulasi media Murashige dan Skoog (MS) (1962).
Komponen Media Konsentrasi dalam Media MS (mg/l)
NH4NO3
KNO3
MgSO4.7H2O
KH2PO4
1650
1900
370
170
CaCl2.2H2O 440
H3BO3
MnSO4.H2O
ZnSO4.7H2O
6,2
16,9
8,6
KI
Na2MoO4.7H2O
CuSO4.5H2O
CoCl2.6H2O
0,83
0,25
0,025
0,025
FeSO4.7H2O
Na2EDTA
27,8 37,3 Tiamin-HCL Piridixin- HCL Asam Nikotinat Glisin 0,1 0,5 0,5 2 Mio-Inositol 100 Sukrosa Agar-agar
Arang Aktif (sesuai perlakuan)
30.000
7.000
2.000
25
2.6 Arang Aktif
Menurut George (1996), arang aktif merupakan arang yang sudah dipanaskan selama beberapa jam dengan menggunakan uap atau udara panas. Arang aktif memiliki sifat adsorpsi yang sangat kuat. Arang aktif dapat ditambahkan pada berbagai tahap perkembangan. Bahan ini dapat ditambahkan pada media inisiasi, media regenerasi, atau media perakaran.
Pengaruh arang aktif secara umum sebagai berikut:
1. Mengadsorpsi persenyawaan-persenyawaan toksik yang terdapat dalam media yang dapat menghambat pertumbuhan kultur terutama pesenyawaan-persenyawaan fenolik dari jaringan-jaringan terluka waktu inisiasi. Arang aktif juga memiliki pengaruh dalam mengadsorpsi persenyawaan 5-hidroksimetilfurfural yang diduga terbentuk dari gula yang berada dalam larutan asam lemah dan mengalami pemanasan tekanan tinggi (Nitsch et al, 1968 yang dikutip oleh George, 1996).
2. Mengadsorpsi zat pengatur tumbuh sehingga mencegah pertumbuhan kalus yang tidak diinginkan, seperti dalam androgenesis dan pucuk yang ingin diakarkan, membantu embryogenesis kultur dalam dalam media regenerasi tanpa auksin yang bertindak sebagaisinkyang menarik auksin dari dalam sel sehingga embryogenesis dapat terjadi (Drew, 1979 dikutip oleh George, 1996).
Konsentrasi arang aktif yang umum digunakan bervariasi dari 0,5—6%, tergantung dari tujuan (George, 1996). Pada eksplan tanaman manggis konsentrasi arang aktif yang ditambahkan untuk inisiasi akar sebanyak 0,15% menghasilkan penampakan visual tunas terbaik dibandingkan tanpa menggunakan arang aktif (Sunarlim, Mariska, dan Ragapatmi, 2002).
Penambahan arang aktif dapat meningkatkan pertumbuhanseedlinganggrek Dendrobium in vitro(Syaputri, 2009) dan meningkatkan pertumbuhan akar pada tunas anthuriumin vitro(Sismanto, 2009).
2.7 Aklimatisasi Planlet
Menurut Wattimena (1988) dalam Kesuma (2006), aklimatisasi merupakan suatu proses penyesuaian peralihan lingkungan hidup heterotrof menjadi autotrof pada planlet yang diperoleh melalui kultur in vitro. Pada tahap aklimatisasi bibit hasil kultur jaringan di pindahkan kelingkungan baru dengan kondisi lingkungan yang sangat berbeda pada saat bibit berada dalam botol. Fase ini merupakan fase yang sangat kritis, karena sering menyebabkan kematian bibit.
27
berpungsinya stomata sebagaimana mestinya, struktur mesofil berubah, dan aktivitas fotosintesis sangat rendah. Dengan karakteristrik seperti itu, planlet mudah menjadi layu atau kering jika di pindahkan kekondisi eksternal secara tiba-tiba. Karena itu, planlet perlu diadaptasi dilingkungan baru yang berbeda, dengan kata lain planlet perlu di aklimatisasi (Yusnita,2003).
2.8 PerananBenziladenin(BA) danGiberellin(GA)
Benziladenin adalah salah satu sitokinin yang banyak di digunakan untuk merangsang pertumbuhan tunas perbanyakan daun dalam kultur jaringan. ZPT sintetik ini memiliki peranan penting di dalam pertumbuhan dan perkembangan tanaman diantaranya (a) menstimulasi pembelahan sel; (b) menstimulasi morfogenesis; (c) menstimulasi pertumbuhan tunas lateral atau adventif; (d) menstimulasi pembesaran daun ; (e) mempengaruhi pembukaan stomata; (f) menstimulasi perkecambahan dalam kondisi gelap; (g) menghambat senensen; dan (h) memicu beberapa tahapan perkembangan akar (Warganegara, H.A., 2009)
Hasil penelitian Wati (2009), pada aklimatisasi anggrek Dendrobium hibrida pemberian 10 mg /l BA dapat meningkatkan pertumbuhan planlet (bibit) secara siknifikan yang ditunjukan oleh peningkatan tinggi tanaman, jumlah daun, jumlah akar, panjang akar dan bobot tanaman. Menurut Zasari (2009), pemberian BA 20 mg /l meningkatkan pertumbuhan angrek Denrobium pada saat aklimatisasi yang di tunjukkan dengan peningkatan bobot tanaman setelah berumur dua bulan.
III. METODE PENELITIAN
Penelitian ini terdiri 4 percobaan yaitu :
I. Persilangan dialel lengkap dua tetua anggrekPhalaenopsis.
II. Pengaruh media dasar dan arang aktif terhadap pengecambahan biji anggrekPhalaenopsis in vitro
III. Pengaruh beberapa jenis adenda terhadap pertumbuhanseedling Phalaenopsis in vitro,dan
IV. Pengaruh BA atau GA terhadap pertumbuhan planlet Phalaenopsispada saat aklimatisasi.
3.1 Percobaan 1. Persilangan dialel lengkap dua anggrekPhalaenopsis
Percobaan ini dilakukan dari bulan September 2009 sampai hingga bualan April 2011. Percobaan ini bertujuan untuk mempelajari kompatibilitas dua tetua anggrekPhalaenopsis yaituPhalaenopsisputih lidah kuning (P1) dan
tetua betina, sedangkan yang disebutkan berikutnya adalah tetua jantan. Untuk setiap pasangan tetua dilakukan persilangan sebanyak tiga kali sehingga
seluruhnya terdapat 12 kali persilangan. Bunga Phalaenopsis putih lidah kuning danPhalaenopsisungu diperoleh dari pasar bungga di Bandar lampung.
Tabel 3. Persilangan dialel lengkap dua tetua anggrekPhalaenopsis.
Tetua Persilangan P1 (Phalaenopsisputih) ♂
P2 (Phalaenopsisungu) ♂
P1 (Phalaenopsisputih) P1 x P1 = P1selfing P1 x P2
[image:30.595.112.510.260.535.2]P2 (Phalaenopsisungu) P2 x P1 P2 x P2 = P2selfing
Gambar 2. Kuntum Bunga TetuaPhalaenopsis.
a. Kuntum bunga tetuaPhalaenopsisputih lidah kuning ( P1 ) b. Kuntum bunga tetuaPhalaenopsis ungu ( P2 ).
31 Cara menyilangkan bungaPhalaenopsisadalah sebagai berikut.
1. Mula-mula ditentukan bunga yang akan digunakan sebagai induk jantan dan induk betina. Misalnya paada persilangan, P1 X P2, bunga tanaman P1 digunakan sebagai tetua betina sedangkan pollen diambil dari bunga tanaman P2.
2. Dengan sepotong lidi runcing atau tusuk gigi yang telah dibasahi atau ditempelkan ke putik supaya lengket, pollinia (serbuk sari) diambil dari kantong sari (anther cap) bunga tetua jantan. Anther cap”dicungkil” dan
diusahakan agar serbuk sari berwarna kuning menempel diujung lidi. 3. Selanjutnya, pollinia ditempelkan ke lubang putik bunga pada tetua
betina.(Gambar 3b).
4. Setelah penyerbukan, sebaiknya bibir bunga yang telah diserbuki dilepaskan supaya tidak menjadi landasan bagi serangga yang mungkin dapat menggugurkan serbuk sari atau membawa serbuk sari baru. Setiap bunga yang sudah diserbukkan diberi label pada tangkai bunga,
bertuliskan tanggal penyerbukan dan kode atau nama tetua betina dan jantan.
Gambar 3. Cara Menyilangkan a. Pollinia diambil dari tetua jantan, dan b. pollinia diletakkan atau dimasukkan dengan tusuk gigi ke putik tetua betina. Pengamatan
Pengamatan dilakukan pada 4 bulan setelah penyerbukan, untuk mengevaluasi pasangan persilanganresiprocaldan/atauselfingmana saja dari kedua tetua yang mengalami pembuahan dan fertilisasi, yang ditandai dengan perkembangan polong buah setelah penyerbukan bunga. Variabel yang diamati adalah
keberhasilan penyerbukan (jadi atau tidaknya polong buah). Setelah berumur 4 bulan sejak persilangan, polong buah dipanen dan siap untuk dikecambahkan dilaboratorium pada media yang telah ditentukan (Percobaan 2).
3.2.Percobaan. 2. Pengaruh media dasar dan arang aktif terhadap pengecambahan biji angrek Phalaenopsis in vitro.
33 3.2.1 Bahan tanaman
Untuk bahan tanaman percobaan 2, dua tetua anggrek yaituPhalaenopsis berbunga merah bertotol disilangkan denganPhalaenopsisberbunga putih ( Gambar 4) dan pada umur 4 bulan 2 minggu setelah penyerbukan di hasilkan polong buah yang bijinya siap ditanaman (Gambar 5).
Gambar 4. Polong buahPhalaenopsis yang dipanen pada umur 4 bulan 2 minggu.
3.2.2 Media Kultur untuk Pengecambahan Biji
[image:33.595.120.556.250.399.2]yaitu 7 g/l bubuk agar-agar. Sterilisasi media dilakukan dengan autoklaf pada suhu 1210C dan tekanan 1,5 kg/cm2selama 15 menit.
3.2.3 Disain Percobaan
Percobaan dilaksanakan dengan rancangan acak lengkap dengan tiga ulangan. Perlakuan yang dicobakan adalah M1= media MS, M2= media MS + 2 g/l arang aktif, M3= media GrowMore, dan M4 = media Growmore + 2 g/l arang aktif. Setiap satuan percobaan terdiri dari satu botol kultur berisi masing-masing media perlakuan, yang di atas permukaannya ditaburkan biji anggrekPhalaenopsis dengan jumlah yang diusahakan sama, yaitu ditakar dengan ujung spatula steril. Pengamatan dilakukan mulai dari umur 1 minggu hinga 8 minggu (2 bulan) setelah tanam. Variabel yang diamati adalah jumlah protokorm perbotol dan biji yang berkecambah menjadi protokormPhalaenopsis.
3.2.4 Sterilisasi Polong, Penanaman Biji dan Kondisi Ruang Kultur
35 dipotong bagian ujung dan pangkalnya dan dibelah dikedua sisinya sehingga biji-biji seperti debu tampak.
Penanaman biji dilakukan dengan menaburkan sejumlah biji yang volumenya diusahakan sama menggunakan ujung spatula keatas permukaan media perlakuan. Setelah biji ditabur, botol ditutup kembali dan diikat dengan karet.
Kemudiankan diletakkan dirak-rak diruang kultur yang suhunya 24-280C dengan pencahayaan lampu fluoresens ±1000 lux.
3.2.5 Pengamatan
Pengamatan dilakukan mulai dari umur 1 minggu hinga 8 minggu setelah tanam. Variabel yang diamati persentase protokorm dan bobot 100 protokorm setelah tanaman berkecambah.
Percobaan 3. Pengaruh beberapa macam adenda terhadap pertumbuhan seedlingPhalaenopsis in vitro.
3.3. Disain Percobaan
Percobaan ini dilaksanakan dengan rancangan kelompok teracak lengkap dengan 3 kelompok dan empat perlakuan. Perlakuan yang dicobakan adalah empat macam adenda yaitu A1= air kelapa, A2= bubur pisang, A3= ekstrak tomat dan A4 = ekstrak kentang. Setiap perlakuan diulang tiga kali. Satiap satuan percobaan terdiri dari satu botol kultur berisi sekitar 20 protokormPhalaenopsisumur 3 bulan (yang pengecambahan bijinya pada perlakuan yang sama).
3.3.1 Kondisi Ruang Kultur
Kultur protokorm pada semua media yang dicobakan diletakkan di rak-rak di ruang kultur yang suhunya 24-280C dengan pencahayaan lampu fluoresens ±1000 lux.
3.3.2 Pengamatan
37 Percobaan 4. Pengaruh BA atau GA terhadap pertumbuhan planlet
Phalaenopsispada saat aklimatisasi.
Percobaan ini bertujuan untuk mempelajari pengaruh penyemprotan larutan BA atau GA terhadap pertumbuhan planlet Phalaenopsispada saat aklimatisasi.
3.4.1 Bahan Tanaman
[image:37.595.114.484.387.526.2]Bahan tanaman yang digunakan dalam percobaan ini adalah planletPhalaenopsis dari tiga spesies yang didapatkan dari laboratorium Kebun Raya Bogor, yaituP. amabilis, P.cornucervidanP. violaceae. Ukuran dan umur planlet dari ke tiga spesiesPhalaenopsistersebut kurang lebih sama (Gambar 4).
Gambar 5. PlanletPhalaenopsisyang akan diaklimatisasi.
3.4.2. Disain Percobaan
terdiri dari satu pot berisi 10 planlet dengan media cacahan pakis dan serat sabut kelapa.
3.4.3. Cara Aklimatisasi planlet
Aklimatisasi planlet dilakukan dengan urutan sebagai berikut:
1. Mula-mula botol berisi planlet diberi air, lalu dikocok untuk memudahkan pengambilan planlet dari media agar-agar.
2. Planlet dicuci bersih, terutama dibagian akar dengan hati-hati agar akar tidak rusak, tetapi bersih dari media agar yang menempel.
3. Planlet direndam dalam larutan fungisida antracol 2g/l selama sekitar 30 menit lalu ditiriskan diatas kertas koran.
4. Media tanam sudah disiapkan, yaitu cacahan batang pakis dan serat sabut kelapa.
5. Penanaman planlet dilakukan dengan cara menggulung longgar akar planlet, lalu menanam dimedia berisi cacahan pakis. Penanaman dilakukan secara kompot, yaitu 5 planlet ditanam bersamaan dalam satu pot.
6. Kompot diletakkan dimeja rumah kaca bernaungan paranet (± 40% dari cahaya penuh).
7. Penyiraman dilakukan secara rutin setiap hari sekali.
39 3.4.4. Pengamatan
Pengamatan dilakukan pada empat bulan setelah bibit dikeluarkan dari botol. Variabel yang diamati adalah:
1. Jumlah daun. 2. Diameter daun. 3. Jumlah akar.
4.1 Hasil
4.1.1. Percobaan I: Persilangan dialel lengkap dua tetua anggrek Phalaenopsis.
Perkembangan Ovari menjadi buah (polong buah).
Teknik penyilangan anggrek mudah dipelajari, namun tingkat keberhasilan penyilangan tersebut ditentukan oleh banyak aspek, antara lain waktu
penyilangan, umur bunga betina, mutu bunga jantan sebagai penghasil pollen, dan yang tidak kalah pentingnya adalah factor keuletan dan pengalaman penyilang itu sendiri. Sekitar lima hingga tujuh hari setelah penyerbukan, mahkota bunga yang digunakan sebagai induk betina layu, disertai dengan pembesaran tangkai bunga tempat ovari berada. Tangkai bunga yang semula berwarna putih atau putih kemerahan juga berangsur-angsur berubah warna menjadi hijau. Pada umur dua minggu setelah penyerbukan, ovari tumbuh membesar sebagaimana disajikan pada Gambar 7. Warna polong buah pada tetua betinaPhalaenopsisungu
berwarna hijau keunguan (Gambar 7a), sedangkan warna polong pada tetua betina Phalaenopsisputih berwarna hijau (Gambar 7b). Hingga berumur 4 bulan
41
[image:41.595.115.504.411.535.2]Gambar 8. Hasil dari persilangandialel lengkapkedua tetuaPhalaenopsisterpilih (P1 dan P2) di sajikan pada Tabel 4
Gambar 6. Warna polong buahPhalaenopsis dari induk betina berbunga ungu pada umur dua minggu setelah penyerbukan,(a). Warna polong hijau keunguan dari persilangan tetua betinaPhalenopsisungu, (b). Warna polong hijau dari persilangan tetua betinaPhalenopsisputih.
Gambar 7. Polong anggrekPhalaenopsisyang disilangkan secara dialel lengkap polang umur 4 bulan 2 minggu. ,(a). Warna polong hijau keunguan dari persilangan tetua betinaPhalenopsisungu, (b). Warna polong hijau dari persilangan tetua betinaPhalenopsisputih.
Kemungkinan warna polong anggrekPhalaenopsisini di pengaruhi oleh zat dan organel pembentuk warna pada bunga yaitu:
1. Anthocyanin, merupakan zat larut dalam cairan sel (sitoplasma). Zat ini menimbulkan warna merah muda, merah tua, dan biru. Warna-warna ini sangat dipengaruhi oleh pH lingkungan cairan sel, bila pH rendah akan muncul warna merah, sedangkan bila pH tinggi akan muncul warna biru. 2. Anthoxanthin, merupakan zat kimia organik yang juga larut dalam
sitoplasma. Zat ini menimbulkan warna kuning muda hingga kuning tua. Jika anthoxantin berada bersama-sama dalam sitoplasma, maka kedua warna tersebut dapat tercampur. Perubahan warna ini dikenal dengan sebutanko-pigmentasi
3. Plastida pembawa pigmen warna berbentuk butiran, sehingga tidak larut dalam sitoplasma seperti pigmen yang lain. Pigmen dari plastida akan nampak jika anthocyanin dan anthoxanthin tidak larut dalam sitoplasma.
43
Tabel 4. Jumlah polong buah yang dihasilkan dari masing-masing tiga kali persilangandialel lengkapdua tetuaPhalaenopsis.
♂
♀
PhalaenopsisPutih Lidah kuning (P1)♀
PhalaenopsisUngu(P2) ♂
PhalaenopsisPutih Lidah kuning (P1)♀
1 (33,3%) Selping
2 (67%) Krosing PhalaenopsisUngu
(P2)♂
3 (100%) Krosing
3 (100%) Selping
Dari Tabel 3 terlihat bahwa semua pasangan tetua persilangan atauselfingdapat menghasilkan polong buah. Hal ini dapat diartikan bahwa kedua tetua tersebut kompatibel untuk disilangkan secara resiprokal, walaupun jumlah polong yang dihasilkan berkisar antara 1-3 dari masing-masing tiga persilangan untuk setiap pasangan tetua.
Polong buah dan bijiPhalaenosis
media perkecambahan, bijiPhalaenopsisterlihat sebagaimana disajikan pada Gambar 9b.
Gambar 8. (a). BijiPhalaenopsisdilihat dengan mikroskop dengan perbesaran 200x, (b). BijiPhalaenosistampak seperti debu ketika disebarkan di media perkecambahan.
4.1.2 Percobaan 2: Pengaruh media dasar dan arang aktif terhadap perkecambahan biji
Pengecambahan bijiPhalaenopsis In vitropada media MS atau Growmore dengan atau tanpa arang aktif
Polong biji yang sudah masak tetapi belum pecah, yaitu yang berumur 4 bulan 2 minggu setelah penyerbukan disterilisasi dan bijinya disemaikan secara aseptik di media MS atau Growmore, dengan atau tanpa arang aktif. Setelah 2 bulan jumlah protokormyang mencerminkan jumlah biji yang berkecambah per botol dihitung, dan disajikan pada Gambar 11.
45
Gambar 9. Jumlah Protokorm perbotol pada perkecambahan bijiPhalaenopsis hibridain vitropada umur dua bulan setelah persemaian biji.
Hasil percobaan menunjukkan bahwa media Growmore tanpa arang aktif
merupakan media yang lebih baik daripada media MS untuk pengecambahan biji Phalaenopsis, dan penambahan arang aktif ke dalam kedua media dasar tersebut justru menekan pengecambahan biji. Pada media yang mengandung arang aktif, jumlah protokorm atau biji yang berkecambah hanya 5,3 pada media Growmore dan 44,6 pada media MS, namun kedua media tersebut tanpa penambahan arang aktif menghasilkan 600 protokorm pada Growmore dan 267 protokorm pada media MS.
Jika perkecambahan biji pada botol yang menghasilkan jumlah protokorm terbanyak dianggap mempunyai persentase perkecambahan 100 % dan perkecambahan pada botol yang lain dibandingkan dengan botol yang
perkecambahan biji yang menghasilkan persentase perkecambahan tertinggi adalah media Growmore tanpa arang aktif (85,5 %), hampir tiga kali lebih tinggi dibandingkan perkecambahan biji pada media MS tanpa arang aktif yaitu 30%. Media MS maupun Growmore dengan arang aktif hanya menghasilkan persen perkecambahan berturut-turut sebesar 6 % (MS + AC) dan 0,07% (Growmore + AC) (Gambar 10).
47
Gambar 11. ProtokormPhalaenopsishibrida pada dua jenis media dasar dengan dan tanpa arang aktif pada umur 2 bulan setelah penyemaian biji.
4.1.3 Percobaan 3. Percobaan Pembesaran protokormPhalaenopsis menjadiseedlingpada media dasar MS atau Growmore dengan atau tanpa arang aktif.
ProtokormPhalaenopsisyang didapatkan dari media perkecambahan biji,
Tabel 5. Rekapitulasi analisis ragam pada Percobaan Pembesaran protokorm Phalaenopsismenjadiseedlingpada media dasar MS atau Growmore dengan atau tanpa arang aktif.
Variabel Arang Media Interaksi
Tinggi tanaman * tn tn
Jumlah daun tn tn tn
Jumlah akar * tn tn
Panjang akar * tn tn
Bobot Tanaman * tn tn
Hasil percobaan III terlihat bahwa media (MS + AC) dan (Gromore + AC) secara umum lebih baik dibandingkan media (MS - AC) dan ( Growmore–AC)
untukseedling Phalaenopsis Pada variable tinggi tanaman,jumlah akar panjang akar dan bobot tanaman berpengaruh nyata sedangkan pada jumlah daun tidak berpengaruh nyata.
Gambar 12. Pengaruh Arang aktif terhadap tinggi tamanam (cm) pada media seedling Phalaenopsis. 1,97 b 3,07 a 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5
Tanpa arang aktif (2g/l) Dengan arang aktif (2g/l)
Ti n g g i Ta n a m a n ( c m )
[image:48.595.180.447.486.632.2]49
[image:49.595.174.423.267.404.2]Tinggi tanaman dari hasil pengamatan masa pertumbuhanseedling Phalaenopsis terlihat Gambar 12 bahwa media MS dan Growmor tanpa arang aktif tingginya hanya 1,97 cm sedangkan pada media MS dan Growmore dengan arang aktif atau (MS + AC) dan Growmore + AC) mengalami peningkatan tingi tanaman yaitu sebesar 3,07 cm.
Gambar 13. Pengaruh Arang aktif terhadap pada jumlah akar (helai) media seedling Phalaenopsis.
Jumlah akar tanaman dari hasil pengamatan masa pertumbuhanseedling Phalaenopsis seperti terlihat pada Gambar 13 bahwa pada media MS dan Growmore tanpa arang aktif yaitu hanya sebesar 1,9 helai sedangkan pada media MS dan Growmore dengan arang aktif atau (MS + AC) dan (Growmore + AC) mengalami peningkatan yang nyata sebesar 5,9 helai.
1,9 b
5,9 a
0 1 2 3 4 5 6 7
Tanpa arang aktif (2g/l) Dengan arang aktif (2g/l)
J
u
m
la
h
a
k
a
r
.
Gambar 14. Pengaruh Arang aktif terhadap Panjang akar (cm) pada media seedling Phalaenopsis.
Dari hasil pengamatan selama masa pertumbuhanseedling Phalaenopsisterlihat pada Gambar 14 panjang akar pada media MS dan Growmore tanpa arang aktif sebesar 2,76 sedang kan pada media MS dengan arang aktif dan Growmore dengan arang aktif atau media (MS + AC) dan (Growmore + AC) mengalami peningkatan sebesar 3,25 cm, hal ini sesuai dengan Tabel 3 pertumbuhansedling Phalaenopsispada arang berbeda nyata dengan media .
2,76 b
3,25 a
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5
Tanpa arang aktif (2g/l) Dengan arang aktif (2g/l)
P
an
jan
g ak
ar
(
cm
)
51
Gambar 15. Pengaruh Arang aktif terhadap bobot segar tanaman (gram) pada mediaseedling Phalaenopsis.
Dari hasil pengamatan bobot akar tanaman pada masa pertumbuhanseedling Phalaenopsisterlihat pada media tanpa arang aktif sebesar 2,11 sedangkan pada media MS dan Gromore dengan arang aktif atau media (MS + AC) dan
(Growmore + AC) mengalami peningkatan pada bobot tanaman segar yaitu sebesar 3,25 gram hal ini dapat dilihat pada Gambar 15.
2,11 b
3,25 a
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5
Tanpa arang aktif (2g/l) Dengan arang aktif (2g/l)
B
ob
ot
T
an
am
an
(
g)
Gambar 16. Menunjukkan hasil pengamatan pembesaranseedling Phalaenopsis pada media MS dan Growmore dengan atau tanpa arang aktif.
4.1.4 Percobaan IV. Respon pertumbuhan dan perkembangan planlet anggrekPhalaenopsisterhadap pemberian BA dan GA pada masa aklimatisasi.
53
Tabel 6. Hasil analisis ragam Respon pertumbuhan dan perkembangan planlet anggrekPhalaenopsisterhadap pemberian BA dan GA pada masa aklimatisasi.
Variabel pengamatan Perlakuan BA atau GA
Jumlah daun ns
Diameter daun **
Jumlah akar **
Bobot segar tanaman *
ns
menunjukkan tidak berbeda nyata pada α0.05
*
menunjukkan berbeda nyata pada tarafα0.05
**
menunjukkan berbeda nyata padaα0.05 danα0.01
Hasil analisis ragam pada Tabel 4 terlihat bahwa pemberian BA dan GA pada planlet Phalaenopsisyang di aklimatisasai tidak berpengaruh pada jumlah daun, tetapi berpengaruh sangat nyata terhadap diameter daun dan jumlah akar serta berpengaruh nyata terhadap bobot segar tanaman.
Gambar 17. Jumlah daun (helai) masa aklimatisasi. 4,66 a
5,93 a 5,06 a
0 2 4 6 8 10
KO BA GA
Ju m lah D au n ( H el ai )
[image:53.595.192.434.521.683.2]Jumlah daun yang di hasil kan olehseedling Phalaenopsis, setelah di beri
[image:54.595.166.451.212.385.2]perlakuan dengan BA dan GA pada 4 bulan masa aklimatisasi tidak berbeda satu sama lain , yaitu pada kontrol 4,7 nilai pada perlakuan GA 5,1 dan nilai pada perlakuan BA 6,0. Tampak pada Gambar 17.
Gambar 18. Diameter daun (cm) pada masa aklimatisasi.
Pada Gambar 18 diameter daun dari hasil pengamatan masa aklimatisasiplanlet Phalaenopsisselama empat bulan pemberian BA 20mg/l dapat meningkatkan diameter daun yang semula hanya 20,8 mm pada kontrol menjadi 26,1 mm sedangkan pemberian GA tidak berpengaruh hanya besar 22,1 mm . Gambar 18.
20,83 b
26,06 a
22,06 b
0 5 10 15 20 25 30
KO BA GA
D
iam
et
er
D
au
n
(
cm
)
55
Gambar 19. Jumlah akar (helai) pada masa aklimatisasi anggrek Phalaenopsis.
Jumlah akar dari hasil pengamatan pada masa aklimatisasi pada gambar 19 terlihat bahwa berbeda nyata yang semula jumlah akar yaitu pada kontrol 4,4 helai BA 7,0 helai dan pada GA 6,0 helai.
Penampilan tanaman phalaenopsis yang tidak diberi ZPT, disemprot dengan BA dengan disemprot dengan GA disajikan pada gambar 20.
Gambar 20. Tanaman phalaenopsis yang tidak diberi perlakuan ZPT (kiri) yang disemprot dengan BA (tengah), dan yang disemprot dengan GA (kanan)
4,36 c
6,93 a
5,7 b
0 1 2 3 4 5 6 7 8
KO BA GA
Ju
m
lah
A
k
ar
[image:55.595.186.444.495.695.2]4.2 Pembahasan
4.2.1Percobaan I: Persilangan dialel lengkap dua tetua angrek Phalaenopsis.
Persilangandialel lengkapyang dilakukan pada kedua tetua angrekPhalaenopsis semua menghasilkan polong buah berbiji. Perbandingan dari 4 persilangan 1:2:3:3 sehingga terdapat empat persilangan yaitu P1 x P1, P1 x P2, P2 x P1 dan P2 x P2. Tetua yang disebutkan pertama adalah tetua betina, sedangkan yang disebutkan berikutnya adalah tetua jantan. Semua tetua yang disilangkan dengan dialel lengakapadalah kompatibel.
Dugaan tentang tetuaPhalaenopsistidak menghasilkan polong buah berbiji atau tidak kompataibel disebabkan karena terbatasnya kuntum bunga sebagai bahan persilangan dan kondisi kuntum bunga masih dalam keadaan siap atau tidak untuk diserbuki sehingga hasil persilangan dialel lengkap ada yang tidak menghasilkan polong berbiji atau tidak kompatibel. Faktor kesesuaian
(compatibility) juga menentukan faktor keberhasilan dalam proses penyerbukan.
Pemilihan tetua tentunya disesuaikan dengan hasil yang diinginkan dalam suatu proses persilangan. Secara garis besar tanaman induk harus sehat, yang dicirikan dengan penampilan fisik segar, hijau, tumbuh tegak, kuat dan kokoh.
57
jumlah kromosom 4 menghasilkan buah yang besar, sedangkan yang
kromosomnya 6n dan 8n justru menghasilkan bunga anggrek yang tidak bagus. Sifat dari tanaman anggrek ditentukan oleh banyak gen sehingga perlu dilakukan persilangan crossing dan resiprokal atau dialel lengkap, agar didapat variasi gen yang besar ditimbulkan pada setiap persilangan.
Untuk dapat menghasilkan persilangan yang diinginkan, maka perlu diketahui sifat-sifat yang dimiliki oleh tetuanya. Sifat-sifat ini ada yang bersifat dominan (sifat yang kuat dan menonjol) dan sifat-sifat yang tidak nampak (resesif, misalnya keawetan bungan dan proses pembungaannya. Sifat-sifat yang
diturunkan oleh tetua dari hasil persilangan F1 (keturunan pertama) dapat bersifat dominan, resesif ataupun dominan tidak sempurna yaitu mempunyai sifat antara kedua tetua (parental).
4.2.2 Percobaan II. Pengaruh media dasar tanpa dan dengan arang aktif terhadap Perkecambahan angrek Phalaenopsis in vitro.
Hasil penelitian ini Pengaruh arang aktif pada perkecambahan anggrek
Phalaenopsisadalah media Growmore tanpa arang aktif merupakan media yang lebih baik daripada media MS untuk pengecambahan bijiPhalaenopsis, dan penambahan arang aktif ke dalam kedua media dasar tersebut justru menekan pengecambahan biji. Pada media yang mengandung arang aktif, jumlah
Menurut George (1996), arang aktif merupakan arang yang sudah dipanaskan selama beberapa jam dengan menggunakan uap atau udara panas. Arang aktif memiliki sifat adsorpsi yang sangat kuat.Mengadsorpsi
persenyawaan-persenyawaan toksik yang terdapat dalam media yang dapat menghambat pertumbuhan kultur terutama pesenyawaan-persenyawaan fenolik dari jaringan-jaringan terluka waktu inisiasi. Arang aktif juga memiliki pengaruh dalam mengadsorpsi persenyawaan 5-hidroksimetilfurfural yang diduga terbentuk dari gula yang berada dalam larutan asam lemah dan mengalami pemanasan tekanan tinggi dan mengadsorpsi zat pengatur tumbuh hingga mencegah pertumbuhan (Nitsch et al, 1968 yang dikutip oleh George, 1996).
4.2.3 Percobaan III. Pengaruh beberapa media MS dan Growmore terhadap pertumbuhanseedling Phalaenopsis in vitro.
Hasil percobaan pengaruh media MS dan Grwmore terhadap perkecambahan anggrekPhalaenopsis in vitro terlihat bahwa media (MS + AC) dan (Gromore + AC) secara umum lebih baik dibandingkan media (MS - AC) dan ( Growmore–
AC) untukseedling Phalaenopsis Pada variable tinggi tanaman,jumlah akar panjang akar dan bobot tanaman berpengaruh nyata sedangkan pada jumlah daun tidak berpengaruh nyata.
59
penambahan 10-20% air kelapa ke dalam media kultur tanpa atau mengandung zat pengatur pertumbuhan cukup efektif untuk meningkatkan pertumbuhan eksplanin vitro. Selain sejumlah jenis nutrisi organik sepertidifenil urea, berbagai asam amino, beberapa vitamin, gula serta gula alkohol, air kelapa juga mengandung zat pengatur pertumbuhan seperti auksin dan sitokinin yang keduanya dapat saling bersinergi dalam aksinya mempengaruhi pertumbuhan kulturin vitro(George, 1996).
Tinggi tanaman, jumlah akar, panjang akar dan bobot segar tanaman di peroleh pada perlakuan media MS dan Growmore atau media (MS + AC) dan (Growmore + AC) masing masing yaitu tinggi tanaman mengalami peningkatan sebesar 3,08 cm, jumlah akar mengalami peningkatan sebesar 5,7 helai, panjang akar 3,25 cm dan bobot segar tanaman mengalami peningkaran sebesar 3,25 gr. Hasil ini mengindikasikan bahwa pada media (MS + AC) dan (Growmore + AC) terbukti sangat baik untuk disajikan sebagai media alternatif untuk perbesaranseedling Phalaenopsis. Menurut George (1996), arang aktif merupakan arang yang sudah dipanaskan selama beberapa jam dengan menggunakan uap atau udara panas. Arang aktif memiliki sifat adsorpsi yang sangat kuat. Arang aktif dapat
ditambahkan pada berbagai tahap perkembangan. Bahan ini dapat ditambahkan pada media inisiasi, media regenerasi, atau media perakaran.
4.2.4 Percobaan IV: Respon pertumbuhan dan perkembangan plantlet anggrekPhalaenopsisterhadap pemberian BA dan GA selama masa aklimatisasi.
Pengaruh penyemprotan larutan mengandung zat pengatur pertumbuhan BA secara umum memengaruhi pertumbuhan dan perkembanganplantletselama masa aklimatisasi. Perlakuan zat pengatur pertumbuhan meningkatkan diameter daun, bobot segar tanaman, dan persen tumbuh tetapi jumlah daun tidak berbeda nyata. Hasil ini sejalan dengan penelitian Daza dan Chamber (1993)yang dikutip dalamGeorge (1996) bahwa untuk meningkatkan pertumbuhan dan
perkembanganplantletselama diaklimatisasi dapat diaplikasikan zat pengatur pertumbuhan tertentu. Menurut Yusnita (2004), secara umum zat pengatur pertumbuhan digunakan untuk merangsang pertumbuhan dan perkembangan sel tanaman.
Responplantletberbeda terhadap pemberian BA atau GA. Spesifikasi respon plantletterhadap jenis zat pengatur pertumbuhan terlihat dari masing-masing peubah yang diamati. Perlakuan BA masing-masing menghasilkan nilai tertinggi tanaman, diameter daun,jumlah akar bobot segar tanaman.
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa BA dan GA berperanan sesuai dengan fungsinya dalam memengaruhi pertumbuhan dan perkembanganplantlet. Selain dapatmenyebabkan jaringan atau organ aktif menjadi sink’penyedia nutrisi untuk pertumbuhan dan perkembangan tanaman, BA berperanan diantaranya
61
perkembangan akar dan daun. Peranan GA untuk menstimulasi perpanjangan organ (daun atau batang) (George, 1996).
Aplikasi BA atau GA dengan merupakan perlakuan yang menghasilkan peningkatan diameter daun,jumlah akar, bobot basah,plantletselama masa aklimatisasi. Sesuai pendapat Dwijoseputro (1990) bahwa manfaat zat pengatur tumbuh tergantung konsentrasi yang diberikan. Jika konsentrasi zat pengatur tumbuh tepat akan meningkatkan pertumbuhan dan perkembangan tanaman dalam waktu relatif singkat. Konsentrasi zat pengatur tumbuh yang terlalu tinggi akan menghambat bahkan meracuni dan mematikan tanaman
5.1 Kesimpulan
Berdasarkan data hasil dan pembahasan dari percobaan 1, 2,3 dan 4 yang telah dikemukakan dapat diambil kesimpulan sebagai berikut
1. Semua tetua anggrekphalaenopsisyang disilangkan secara dialel lengkap kompatibel yang ditunjukkan oleh terbentuknya polong buah pada setiap pasangan yang disilangkan atau silang dalam.
2. Media Growmore merupakan media yang lebih baik daripada media MS untuk perkecambahan bijiPhalaenopsis.
3. Pemberian arang aktif kedalam media menghambat pertumbuhan biji Phalaenopsis.
4. Pada pembesaran seedlingPhalaenopsisin vitro, jenis media dasar (MS atau Growmore) tidak berpengaruh terhadap pertumbuhan tetapi pemberian arang aktif meningkatkan pertumbuhan seedling yang ditunjukkan oleh peningkatan tinggi tanaman, jumlah akar, panjang akar dan bobot basah tanaman.
5. Pemberian BA kepada planletPhalaenopsisyang di aklimatisasi
63 5.2 Saran
Untuk mendapatkan data hasil penelitian perbanyakan klonal anggrek
Phalaenopsis,yang lebih akurat disarankan untuk melakukan penelitian lanjutan yang berkenaan dengan hal-hal sebagai berikut.
1. Perlakuan beberapa jenis formulasi media terhadap perkecambahan anggrek phalaenopsis.
2. Perlakukan beberapa jenis formulasi media terhadap pembesaran atau seedlinganggrekPhalaenopsis.
Dengan ini saya menyatakan dengan sesungguhnya bahwa
1. Tesis dengan judul “Persilangan Dialel Lengkap Dua Tetua Anggrek, Pengecambahan Biji dan Pembesaran SeedlingIn VitroSerta Aklimatisasi PlanletPhalaenopsis” adalah karya saya sendiri dan saya tidak melakukan pengutipan atas karya penulis lain dengan cara tidak sesuai dengan etika ilmiah yang berlaku dalam masyarakat akademik atau disebut dengan plagiarisme.
2. Pembimbing penulisan tesis ini berhak mempublikasikan sebagian atau seluruh tesis ini pada jurnal ilmiah dengan mencantumkan nama saya sebagai salah satu penulisnya.
3. Hak intelektual karya ilmiah ini diserahkan sepenuhnya kepada unila.
Apabila di kemudian hari ternyata ditemukan adanya ketidakbenaran, saya
bersedia menanggung akibat dan sanksi yang diberikan kepada saya, bersedia dan sanggup dituntut sesuai dengan hukum yang berlaku.
Bandar Lampung, 29 Juli 2011 Pembuat pernyataan,
ABSTRACK
Dialel Crossing of Two
Phalaenopssis
Parent Plants,
In Vitro
Seed
Germination, Seedling Growth and Plantlet Acclimatization
By
YIVISTA HANDAYANI
Phalaenopsisis a popular member of Orchidaceae that has a high
economic value due to its uniqueness of the shape, size, and color of its flowers. Currently, the prospect ofPhalaenopsismarket as well as interest of plant breeders to create new hybrids are increasing. Therefore, research in plant breeding and plant propagation is important.
This study consisted of four experiments that aimed to investigate (1) dialel crossing of twoPhalaenopsisparent plants, (2) the effects of two basic media and activated charcoal (AC) onin vitroseed germination, (3) the effects of two basic media onin vitroseedling growth, and (4) the effects of benzyladenine (BA) or l gibberellic acid (GA) application on plantlet growth during
acclimatization.
The experiments were conducted at laboratory of plant tissue culture and green house at Faculty of Agriculture, The University of Lampung since March 2009 until January 2010. In experiment I, diallel crossing of twoPhalaenopsis parent plant were done, resulting in four mating (crossing and selfing of the two parents). Each mating was repeated three times. In experiment II,Phalaenopsis seeds were sown on two basic media (MS or Growmore) with or without 2g/l activated charcoal. In experiment III, the same combinations of basic media and AC were used two grow two month-oldPhalaenopsisprotocorms resulted from experiment II. In experiment IV, planlets were acclimatized in a shaded
greenhouse and treated with 20 mg/ml BA or 20 mg/l GA or without plant growth regulator as a control treatment. Experiment II and III were conducted in
(LSD) at 0,05.
Results of experiment I showed that all of the four mating between P1 and P2 produced seed pods, which implied that the twoPhalaenopsisparents were cross- and self-compatible.
Results of experiment II, showed that Growmore basic medium was better than MS medium, and the basic medium without AC was better than with addition of AC forin vitro germination ofPhalaenopsisseeds.
Results of experiment III, showed that the two basic media tested did not influence seedling growth. However, addition of 2g/l AC in the medium resulted in better seedling growth which were showed by increasing number of leaves and plant fresh weight.
Results of experiment IV, showed that application of 20 mg/l BA
ABSTRAK
PERSILANGAN DIALEL LENGKAP DUA TETUA ANGGREK PHALAENOPSIS,PEKECAMBAHAN BIJI DAN PEMBESARAN
SEEDLINGIN VITROSERTA AKLIMATISASI PLANLET PHALAENOPSIS
Oleh
YIVISTA HANDAYANI
Anggrek merupakan salah satu tanaman anggota famili Orchidaceae yang banyak menarik perhatian para pengemar tanaman hias. Salah satunya adalah genus anggrek Phalaenopsisyang mempunyai daya tarik unik. Keunikan bentuk, ukuran dan warna bunganya yang sangat bervariasi, ditunjang oleh daya tahan bunga yang relatif lama menjadi faktor tingginya nilai ekonomiPhalaenopsis sehingga memberikan prospek pasar yang cukup cerah dan meningkatkan minat para pemulia tanaman untuk menciptakan hibrida-hibrida baru.
Penelitian terdiri dari 4 percobaan yang bertujuan untuk mempelajari (1) persilangan dialel lengkap dua tetuaphalaenopsis. (2) pengaruh media dasar dan arang aktif terhadap pengecambahan biji angrekphalaenopsis in vitro. (3) pengaruh beberapa macam adenda dalam media pupuk growmore. (4) pengaruh BA atau GA terhadap pertumbuhanplantletselama diaklimatisasi.
Percobaan dilaksanakan di laboratorium kultur jaringan dan di rumah kaca Fakultas Pertanian Universitas Lampung mulai bulan Maret 2009 sampai dengan January 2010. Percobaan I melakukan persilangan dialel lengkap yaitu dengan dua belas tetua phalaenopsis untuk dapat meng hasilkan polong yang kompatibel. Percobaan II menggunakan rancangan lengkap dengan tiga ulangan meliputi formulasi media MS dan pupuk Growmore dengan atau tampa
penambahan arang aktif gr/l yang disusun dalam rancangan teracak sempurna faktorial. Desain untuk percobaan III dirancang dengan menggunakan perlakuan tunggal berupa BA 10 dan 20 mg/l, serta GA 10 dan 20 mg/l yang disusun dalam rancangan kelompok teracak sempurna.
Hasil penelitian menunjukkan dengan dua tetua phalaenopsis yang
Semua tetua anggrekphalaenopsisyang disilangkan secara dialel lengkap
kompatibel yang ditunjukkan oleh terbentuknya polong buah pada setiap pasangan yang disilangkan atau silang dalam. Media Growmore merupakan media yang lebih baik daripada media MS untuk perkecambahan bijiPhalaenopsis.Pemberian arang aktif kedalam media menghambat pertumbuhan bijiPhalaenopsis.
ABSTRAK
PERSILANGAN DIALEL LENGKAP DUA TETUA ANGGREK PHALAENOPSIS,PEKECAMBAHAN BIJI DAN PEMBESARAN
SEEDLINGIN VITROSERTA AKLIMATISASI PLANLET PHALAENOPSIS
Oleh
YIVISTA HANDAYANI MULKAN
Anggrek merupakan salah satu tanaman anggota famili Orchidaceae yang banyak menarik perhatian para pengemar tanaman hias. Salah satunya adalah genus anggrek Phalaenopsisyang mempunyai daya tarik unik. Keunikan bentuk, ukuran dan warna bunganya yang sangat bervariasi, ditunjang oleh daya tahan bunga yang relatif lama menjadi faktor tingginya nilai ekonomiPhalaenopsis sehingga memberikan prospek pasar yang cukup cerah dan meningkatkan minat para pemulia tanaman untuk menciptakan hibrida-hibrida baru.
Penelitian terdiri dari 4 percobaan yang bertujuan untuk mempelajari (1) persilangan dialel lengkap dua tetuaphalaenopsis. (2) pengaruh media dasar dan arang aktif terhadap pengecambahan biji angrekphalaenopsis in vitro. (3) pengaruh beberapa macam adenda dalam media pupuk growmore. (4) pengaruh BA atau GA terhadap pertumbuhanplantletselama diaklimatisasi.
Percobaan dilaksanakan di laboratorium kultur jaringan dan di rumah kaca Fakultas Pertanian Universitas Lampung mulai bulan Maret 2009 sampai dengan January 2010. Percobaan I melakukan persilangan dialel lengkap yaitu dengan dua belas tetua phalaenopsis untuk dapat meng hasilkan polong yang kompatibel. Percobaan II menggunakan rancangan lengkap dengan tiga ulangan meliputi formulasi media MS dan pupuk Growmore dengan atau tampa
penambahan arang aktif gr/l yang disusun dalam rancangan teracak sempurna faktorial. Desain untuk percobaan III dirancang dengan menggunakan perlakuan tunggal berupa BA 10 dan 20 mg/l, serta GA 10 dan 20 mg/l yang disusun dalam rancangan kelompok teracak sempurna.
Hasil penelitian menunjukkan dengan dua tetua phalaenopsis yang
Semua tetua anggrekphalaenopsisyang disilangkan secara dialel lengkap
kompatibel yang ditunjukkan oleh terbentuknya polong buah pada setiap pasangan yang disilangkan atau silang dalam. Media Growmore merupakan media yang lebih baik daripada media MS untuk perkecambahan bijiPhalaenopsis.Pemberian arang aktif kedalam media menghambat pertumbuhan bijiPhalaenopsis.
x
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar
1. BungaPhalaenopsis ... 17 2. Kuntum Bunga TetuaPhalaenopsis ... 30 3. Cara Menyilangkan bunga a). Pollinia diambil dari tetua jantan, dan
b). pollinia diletakkan atau dimasukkan dengan tusuk gigi ke putik
tetua betina ... 32 4. Polong buahPhalaenopsis yang dipanen pada umur 4 bulan
2 minggu ... 33 5. PlanletPhalaenopsisyang akan diaklimatisasi ... 37 6. Warna polong buahPhalaenopsis dari induk betina berbunga ungu
pada umur dua minggu setelah penyerbukan,(a). Warna polong hijau keunguan dari persilangan tetua betinaPhalenopsisungu, (b). Warna
polong hijau dari persilangan tetua betinaPhalenopsisputih ... 41 7. Polong anggrekPhalaenopsisyang disilangkan secara dialel lengkap
polang umur 4 bulan 2 minggu. ,(a). Warna polong hijau keunguan dari persilangan tetua betinaPhalenopsisungu, (b). Warna polong hijau dari persilangan tetua betinaPhalenopsisputih ... 41 8. (a). BijiPhalaenopsisdilihat dengan mikroskop dengan perbesaran 200x,
(b). BijiPhalaenosistampak seperti debu ketika disebarkan di media perkecambahan ... 44 9. Jumlah Protokorm perbotol pada perkecambahan bijiPhalaenopsishibrida
in vitropada umur dua bulan setelah persemaian biji ... 45 10. Pengaruh media dasar dan arang aktif terhadap Jumlah perkecambahan
bijiPhalaenopsishibridain vitropada umur 2 bulan setelah
xi tanpa arang aktif pada umur 2 bulan setelah penyemaian biji ... 47 12. Pengaruh Arang aktif terhadap tinggi tamanam (cm) pada media seedling
Phalaenopsis ... 48 13. Pengaruh Arang aktif terhadap pada jumlah akar (helai) media seedling
Phalaenopsis.... 49 14. Pengaruh Arang aktif terhadap Panjang akar (cm) pada media seedling
Phalaenopsis.... 50 15. Pengaruh Arang aktif terhadap bobot segar tanaman (gram) pada media
seedlingPhalaenopsis.... 51 16. Menunjukkan hasil pengamatan pembesaranseedling Phalaenopsispada
