UJI PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL 70%
DAUN JATI (Tectona grandis L. f.) TERHADAP PENURUNAN
KADAR KOLESTEROL TOTAL DARAH PADA TIKUS
PUTIH JANTAN
SKRIPSI
WIWIN WIARSIH
108102000001
FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN
PROGRAM STUDI FARMASI
UIN SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA
UJI PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL 70%
DAUN JATI (Tectona grandis L. f.) TERHADAP PENURUNAN
KADAR KOLESTEROL TOTAL DARAH PADA TIKUS
PUTIH JANTAN
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat memperoleh gelar Sarjana Farmasi
WIWIN WIARSIH
108102000001
FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN
PROGRAM STUDI FARMASI
vi UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Nama : Wiwin Wiarsih Program Studi : Farmasi
Judul : Uji Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol 70% Daun Jati
(Tectona grandis L.f.) Terhadap Penurunan Kadar
Kolesterol Total Darah Pada Tikus Putih Jantan
Daun Jati (Tectona grandis L.f.) secara empiris digunakan di Indonesia sebagai obat alternatif untuk pengobatan antikolesterol. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek dari daun jati (Tectona grandis L.f.) sebagai antikolesterol. Proses ekstraksi menggunakan metode maserasi dengan pelarut etanol 70%. Metode pengukuran kadar kolesterol total menggunakan metode enzimatik dengan alat spektrofotometer UV yang di ukur pada panjang gelombang 504 nm. Ekstrak daun jati diberikan secara oral dengan dosis 250 mg/kg berat badan, 500 mg/kg berat badan dan 1000 mg/kg berat badan terhadap tikus putih jantan galur
Sparague-Dawley, sebagai obat pembanding digunakan simvastatin dengan dosis
1,03 mg/kg berat badan. Penelitian ini menggunakan metode induksi makanan tinggi kolesterol minyak babi dan minyak goreng yang diberikan 2% dari berat badan tikus. Hasil penapisan fitokimia menunjukkan adanya senyawa flavonoid, saponin, steroid, tanin dan kumarin. Hasil penelitian menunjukkan tidak ada penurunan kadar kolesterol total secara bermakna pada semua kelompok perlakuan (p≥0.05).
Name : Wiwin Wiarsih Program Study : Pharmacy
Title : The Test Effect Of 70% Ethanol Extract Of Teak Leaves
(Tectona grandis L.f.) As On Total Blood Cholesterol
Levels Decrease Of White Male Rats.
Teak leaves (Tectona grandis L.f.) is empirically used in Indonesian as an alternative medicine for the treatment of anticholesterol. The aims of this research is to know the effect of teak leaves (Tectona grandis L.f.) as anticholesterol. The extraction process used a maceration method with 70% ethanol solvent. Measurement of the total cholesterol level used the enzymatic method with a UV spectrophotometer 504 nm. Extract was given orally with doses of 250 mg/kg body weight, 500 mg/kg body weight and 1000 mg/kg body weight to white male rats Sparague-Dawley strain, 1,03 mg/kg body weight dose of simvastatin used as comparison drug. This research used the method of induced high cholesterol foods from pig oil and vegetable oil given in 2% of male white rats body weight. The results from phytochemical screening showed there is presence of flavonoid, saponin, steroids, tannin and coumarin compounds. The results is not significantly decrease the total cholesterol levels for all treatment groups (p≥0.05).
viii UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Puji syukur saya panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa, karena atas berkat dan rahmat-Nya, saya dapat menyelesaikan skripsi ini. Penulisan skripsi ini dilakukan dalam rangka memenuhi salah satu syarat untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri (UIN) Syarif Hidayatullah Jakarta.
Saya menyadari bahwa, tanpa bantuan dan bimbingan dari berbagai pihak, dari masa perkuliahan sampai pada penyusunan skripsi ini, sangatlah sulit bagi saya untuk menyelesaikan skripsi ini. Oleh karena itu, saya mengucapkan terima kasih kepada :
(1) Bapak Drs. Ahmad Musir, M.Sc.,Apt selaku pembimbing pertama dan Ibu Nurmeilis, M.Si.,Apt selaku pembimbing kedua, yang memiliki andil besar dalam proses penelitian dan penyelesaian tugas akhir saya ini, semoga segala bantuan dan bimbingan bapak dan ibu mendapat imbalan yang lebih baik dari-Nya.
(2) Prof. Dr. (hc) dr. M. K. Tadjudin, Sp. And selaku dekan Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.
(3) Drs. Umar Mansur, M.Sc.,Apt selaku Ketua Program Studi Farmasi Fakultas
Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah Jakarta. (4) Ibu Eka Putri, M.Si.,Apt selaku pembimbing akademik.
(5) Bapak dan Ibu staf pengajar yang telah memberikan bimbingan dan bantuan selama saya menempuh pendidikan di Program Studi Farmasi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri (UIN) Syarif Hidayatullah Jakarta.
(6) Para staf administrasi, laboran dan karyawan Farmasi yang telah banyak membantu dalam kelancaran studi kuliah.
(7) Bapak Suhendra selaku dosen statistik yang telah membantu memberikan pengarahan dalam pengolahan data.
(10) Nurdin, Amd.,Kep dan keluarga yang selalu mendo’akan dan memberikan motivasi kepada penulis.
(11) Ayahanda Wiryo, S.pd, Ibunda Acih, Adikku Hasan Maulana dan Keluarga besar yang selalu mendo’akan dan memberikan motivasi kepada penulis. Semoga segala amalan dan jerih payah semuanya mendapat balasan yang jauh lebih baik dari-Nya.
Akhir kata, saya berharap Tuhan Yang Maha Esa berkenan membalas segala kebaikan semua pihak yang telah membantu. Semoga skripsi ini membawa manfaat bagi pengembangan ilmu.
Jakarta, 1 April 2013
x UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
TUGAS AKHIR UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS
Sebagai sivitas akademik Universitas Islam Negeri (UIN) Syarif Hidayatullah Jakarta, saya yang bertanda tangan di bawah ini :
Nama : Wiwin Wiarsih
NIM : 108102000001
Program Studi : Farmasi
Fakultas : Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Jenis Karya : Skripsi
demi perkembangan ilmu pengetahuan, saya menyetujui skripsi/karya ilmiah saya,
dengan judul :
UJI PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL 70% DAUN JATI
(Tectona grandis L. f.) TERHADAP PENURUNAN KADAR
KOLESTEROL TOTAL DARAH PADA TIKUS PUTIH JANTAN
Untuk dipublikasikan atau ditampilkan di internet atau media lain yaitu Digital
Library Perpustakaan Universitas Islam Negeri (UIN) Syarif Hidayatullah Jakarta
untuk kepentingan akademik sebatas sesuai dengan Undang-Undang Hak Cipta.
Demikian pernyataan persetujuan publikasi karya ilmiah ini saya buat dengan sebenarnya.
Dibuat di : Jakarta Pada Tanggal : 4 April 2013
Yang menyatakan,
Halaman
HALAMAN SAMPUL ... i
HALAMAN JUDUL ... ii
HALAMAN PERNYATAAN ORISINALITAS ... iii
HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ... iv
HALAMAN PENGESAHAN ... v
ABSTRAK ... vi
ABSTRACT ... vii
KATA PENGANTAR ... viii
HALAMAN PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI ... x
DAFTAR ISI ... xi
2.8.Klasifikasi Hiperlipidemia ... 11
2.9.Pengobatan Hiperlipidemia ... 13
2.10. Simvastatin ... 15
xii UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
3.1. Tempat dan Waktu Penelitian ... 17
3.2. Alat dan Bahan ... 17
3.2.1. Alat ... 17
3.2.2. Bahan ... 17
3.3. Prosedur Kerja ... 18
3.3.1. Penyiapan Simplisia ... 18
3.3.2. Ekstraksi ... 18
3.3.3. Penapisan Fitokimia Simplisia ... 19
3.3.4. Pengujian Parameter Ekstrak ... 20
3.3.5. Penyiapan Hewan Uji ... 21
3.3.6. Rancangan Penelitian ... 21
3.3.7. Penentuan Dosis ... 22
3.3.8. Perhitungan Dosis dan Pembuatan Larutan Uji ... 22
3.3.9. Uji Efek Antihiperkolesterolemia ... 23
3.3.10. Cara Pengambilan Darah dan Pengukuran Kadar Kolesterol Darah ... 24
3.3.11. Uji Statistik Terhadap Kadar Kolesterol Darah ... 25
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ... 26
4.1. Determinasi Daun Jati (Tectona grandis L.f.) ... 26
4.2. Hasil Ekstraksi Daun Jati ... 26
4.3. Hasil Pengujian Parameter Ekstrak ... 26
4.4. Hasil Uji Penapisan Fitokimia ... 27
4.5. Hasil Uji Pengukuran Kadar Kolesterol ... 28
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ... 33
Halaman
Tabel 3.1. Pembagian Kelompok Hewan Uji Berdasarkan Perlakuan ... 22
Tabel 4.1. Hasil Penapisan Fitokimia Serbuk dan Ekstrak Daun Jati ... 27
Table 4.2. Rata-rata kadar kolesterol ... 28
xiv UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Halaman
Gambar 1. Daun Jati (Tectona grandis L.f.) ... 39
Gambar 2. Pereaksi Kolesterol ... 39
Gambar 3. Proses Perlakuan Hewan Uji ... 39
Gambar 4. Standar Kolesterol ... 39
Gambar 5. Ekstrak Daun Jati (Tectona grandis L.f.) ... 39
Gambar 6. Sentrifugasi ... 39
Gambar 7. Rotary evaporator ... 39
Halaman
Lampiran 1. Bahan dan Alat Penelitian ... 39
Lampiran 2. Determinasi Daun Jati (Tectona grandis L.f.) ... 40
Lampiran 3. Sertifikat Bahan Uji Simvastatin ... 41
Lampiran 4. Sertifikat Hewan Uji ... 42
Lampiran 5. Alur Penelitian ... 43
Lampiran 6. Skema Kerja Pembuatan Ekstrak Daun Jati ... 44
Lampiran 7. Hasil Penapisan Fitokimia ... 45
Lampiran 8. Pemeriksaan Parameter Ekstrak ... 46
Lampiran 9. Skema Kerja Uji Antihiperkolesterolemia ... 47
Lampiran 10. Perhitungan Dosis Uji Ekstrak Daun Jati dan volume pemberian oral ... 48
Lampiran 11. Perhitungan Dosis Simvastatin ... 50
Lampiran 12. Hasil Spektrofotometer Serum Uji ... 52
Lampiran 13. Kurva Rata-Rata Kadar Kolesterol ... 54
1 UIN Syarif Hidayatullah Jakarta PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang
Lipid adalah kelompok senyawa heterogen yang dibawa dalam cairan tubuh sebagai kompleks protein terlarut yang dikenal sebagai lipoprotein (Wahid
et al., 2009). Hiperlipidemia adalah gangguan yang ditandai dengan peningkatan
lipoprotein darah atau kadar kolesterol (Noorani et al., 2011). World Health
Organization melaporkan bahwa kolesterol darah yang tinggi menjadi kontribusi
untuk sekitar 56% kasus dari penyakit kardiovaskular di seluruh dunia dan penyebab kematian sekitar 4,4 juta setiap tahun (Ochani et al., 2009). Sekarang ditetapkan bahwa hiperlipidemia merupakan faktor risiko utama untuk perkembangan dini aterosklerosis dan komplikasi kardiovaskular (Noorani et al., 2011., Shinde et al., 2012., Lee at al., 2011).
Produk alami merupakan pengobatan herbal tradisional dan masih digunakan dalam perawatan utama sistem kesehatan (Purushotham et al., 2010).
Pengobatan hiperkolesterolemia dan penyakit terkait kardiovaskuler dengan tanaman obat telah meningkat dalam beberapa tahun terakhir (Ramos et al., 2012). Selain itu, diet rendah kolesterol, olah raga teratur, pengendalian berat
badan serta terapi farmakologik dengan obat hipolipidemia merupakan cara yang dapat dilakukan untuk menurunkan kadar kolesterol darah yang tinggi (Putri et al., 2010).
Bedasarkan penjelasan di atas maka dilakukan penelitian untuk mengetahui efek daun jati (Tectona grandis L.f.) yang diharapkan memiliki efek sebagai antikolesterol pada tikus putih jantan hiperkolesterolemia.
1.2. Perumusan Masalah
Apakah ekstrak etanol daun jati (Tectona grandis L.f.) memiliki aktivitas penurunan kadar kolesterol total pada tikus putih jantan yang diberi makanan tinggi kolesterol?
1.3. Tujuan Penelitian
Mengetahui aktivitas ekstrak etanol daun jati (Tectona grandis L.f.) terhadap penurunan kadar kolesterol total pada tikus putih jantan.
1.4. Manfaat Penelitian
Memberikan informasi mengenai khasiat dari daun jati (Tectona grandis L.f.) sebagai antikolesterol sehingga dapat digunakan sebagai obat herbal dalam
3 UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
TINJAUAN PUSTAKA
2.1.Tanaman Jati (Tectona grandis L.f.)
2.1.1. Klasifikasi Tanaman (Aradhana et al., 2010)
Divisi : Magnoliophyta Sub divisi : Spermatophyta Kelas : Magnoliopsida
2.1.2. Nama Daerah (Warisno, 2011)
Indonesia dan Malaysia : jati.
Inggris, Amerika dan negara-negara yang menggunakan bahasa inggris: teak.
2.1.3. Morfologi
Secara morfologi, tanaman jati memiliki tinggi yang dapat mencapai sekitar 30-45 cm. dengan pemengkasan, batang yang bebas cabang dapat mencapai antara 15-20 m. diameter batang dapat mencapai 220 cm. Kulit kayu berwarna kecoklatan atau abu-abu yang mudah terkelupas. Pangkal batang berakar papan pendek dan bercabang sekitar empat. Daun berbentuk opposite (bentuk jantung membulat dengan ujung meruncing), berukuran panjang 20-50 cm dan lebar 15-40 cm, permukaanya berbulu. Daun muda (petiola) berwarna hijau kecoklatan, sedangkan daun tua berwarna hijau tua keabu-abuan (Sumarna, 2011).
2.1.4. Ekologi dan Penyebaran
Dengan berkembangnya teknis budi daya, saat ini tanaman jati telah menyebar di berbagai negara di Asia, di wilayah pasifik (Australia dan Fiji), di Afrika dan di wilayah Amerika. Di Indonesia sendiri memiliki luas areal pertanian yang relatif tinggi. Selain di Pulau Jawa, jati juga berkembang dibeberapa daerah lain seperti Sulawesi Selatan, Sulawesi Tenggara, NTB, Maluku, Lampung, dan Bali (Sumarna, 2011).
Idealnya, jati akan tumbuh dengan baik pada kawasan hutan dataran rendah dengan kandungan hara optimal sebagai berikut : (Yahya, 2011)
1. Curah hujan antara 750-1500 mm/tahun 2. Suhu udara antara 34-42 oC, dan
3. Kelembapan sekitar 70%.
2.1.5. Kandungan Kimia
Unsur kimia dilaporkan pada daun : (Aradhana et al., 2010)
Kuinon : Tektokuinon, lapakol, deoxylapakol dan isomernya,
tektoleafokuinon, antrakuinon–pigmen naptakuinon.
Steroid : Squalen, poli-isoprena α-tolyl metil eter, asam betulinik, tekto grandon, monoterpen, apokarotenoid: tektoionol-A, tectoionol-B.
Glikosida : Glikosida antrakinon.
Asam fenolik : Asam tanat, asam galia, asam ferulat, asam kaffeik dan asam ellagik.
Flavonoid : Rutin dan kuersitin.
Daun Tectona grandis Linn juga dilaporkan mengandung karbohidrat, alkaloid, tanin, sterol, saponin, protein, kalsium, fosfor, serat mentah dan juga mengandung pewarna (cokelat kekuningan atau kemerahan).
2.1.6. Khasiat Tumbuhan (Aradhana et al., 2010)
Kayu : sedatif, obat cacing, disentri, sakit kepala, antiinflamasi, pencahar, neuralgia, artritis, dispepsia, perut kembung, batuk, penyakit kulit, kusta, hemoroid, gangguan antibilious dan lipid.
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta Daun : antiinflamasi, lepra, penyakit kulit, stomatitis, borok, pendarahan,
hemoptisis.
Biji : diuretik, emolien, penyakit kulit. Minyak yang diperoleh dari biji mendorong pertumbuhan rambut dan berguna pada eksim, kurap dan untuk pemeriksaan kudis.
Kulit pohon : bronkitis, sembelit, obat cacing, disentri, diabetes, lepra, penyakit kulit, leukoderma, sakit kepala, pencahar, ekspektoran, antiinflamasi, gangguan pencernaan.
Bunga : bronkitis, diuretik, antiinflamasi, dipsia, kusta, penyakit kulit, diabetes dan efektif pada kondisi yang disebabkan oleh cacing pitta. Minyak yang diperoleh dari bunga mendorong pertumbuhan rambut dan berguna untuk kudis, eksim.
Buah : diuretik, menawar rasa sakit, pruritus, stomatitis.
Semua bagian dari biji tanaman, bunga, buah-buahan, kayu, kulit kayu, akar, dan daun dapat digunakan baik sendiri atau bersama dengan tanaman lain.
2.2. Simplisia (Depkes RI, 1995)
Simplisia ialah bahan alamiah yang dipergunakan sebagai obat yang belum mengalami pengolahan apapun juga dan kecuali dinyatakan lain, berupa bahan
yang telah dikeringkan.
Simplisia nabati ialah simplisia yang berupa tanaman utuh, bagian tanaman atau eksudat tanaman.
Simplisia hewani ialah simplisia yang berupa hewan utuh bagian hewan atau zat-zat berguna yang dihasilkan oleh hewan dan belum berupa zat kimia murni.
Simplisia pelikan (mineral) ialah simplisia yang berupa bahan-bahan pelikan (mineral) yang belum diolah atau telah diolah dengan cara sederhana dan belum berupa zat kimia murni.
2.3. Ekstrak dan Ekstraksi
kemudian semua atau hampir semua pelarut diuapkan dan massa atau serbuk yang tersisa diperlakukan sedemikian hingga memenuhi baku yang di tetapkan (Depkes RI, 1995).
Ekstraksi adalah kegiatan penarikan kandungan kimia yang dapat larut sehingga terpisah dari bahan yang tidak dapat larut dengan pelarut cair. Simplisia yang akan diekstrak mengandung senyawa aktif yang dapat larut dan senyawa yang tidak dapat larut dan mempunyai struktur kimia yang berbeda-beda yang dapat mempengaruhi kelarutan dan stabilitas senyawa-senyawa tersebut terhadap suhu, udara, cahaya, dan logam berat (Depkes RI, 2000).
2.4. Metode Ekstraksi
2.4.1. Cara Dingin
1. Maserasi
Maserasi adalah proses pengekstrakan simplisia dengan menggunakan pelarut dengan beberapa kali pengocokan atau pengadukan pada temperatur ruangan (kamar). Secara teknologi termasuk ekstraksi dengan prinsip metode pencapaian
konsentrasi pada keseimbangan. Maserasi kinetik berarti dilakukan pengadukan yang kontinu (terus-menerus). Remaserasi berarti dilakukan pengulangan penambahan pelarut setelah dilakukan penyaringan maserat pertama dan
seterusnya (Depkes RI, 2000).
2. Perkolasi
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
2.4.2. Cara Panas 1. Refluks
Refluks adalah ekstraksi dengan pelarut pada temperatur titik didihnya,
selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang relatif konstan dengan adanya pendingin balik. Umumnya dilakukan pengulangan proses pada residu
pertama sampai 3-5 kali sehingga dapat termasuk proses ekstraksi sempurna (Depkes RI, 2000).
2. Soxhlet
Soxhlet adalah ekstraksi menggunakan pelarut yang selalu baru yang umumnya dilakukan dengan alat khusus sehingga terjadi ekstraksi kontinu dengan jumlah pelarut relatif konstan dengan adanya pendingin balik (Depkes RI, 2000).
3. Digesti
Digesti adalah maserasi kinetik (dengan pengadukan kontinu) pada temperatur yang lebih tinggi dari temperatur ruangan (kamar), yaitu secara umum dilakukan pada temperatur 40-50oC (Depkes RI, 2000).
4. Infus
Infus adalah ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur penangas air (bejana infus tercelup dalam penangas air mendidih, temperatur terukur 96-98oC selama waktu tertentu (15-20 menit) (Depkes RI, 2000).
5. Dekok
Dekok adalah infus pada waktu yang lebih lama ≥ 30o
C dan temperatur sampai titik didih air (Depkes RI, 2000).
2.5. Hewan Uji
Terdapat beberapa galur tikus yang memiliki kekhususan tertentu, salah satunya yaitu sparague-dawley berwarna albino putih, berkepala kecil dan ekornya lebih panjang daripada badannya (Malole & Sri, 1989). Klasifikasi tikus sparague-dawley sebagai berikut (Baldatina, 2008):
Kingdom : Animalia
Menurut Akoh et al., 2002 Tidak ada definisi yang tepat dari lipid.
Christie mendefinisikan lipid sebagai ''berbagai produk alami termasuk asam lemak dan turunannya, steroid, terpen, karotenoid dan asam empedu, yang memiliki kesamaan kelarutan dalam pelarut organik seperti dietil eter, heksan, benzena, kloroform atau metanol.''
Kates mengatakan bahwa lipid adalah ''zat yang (a) tidak larut dalam air;
(b) larut dalam pelarut organik seperti kloroform, eter atau benzena, (c) mengandung rantai panjang kelompok hidrokarbon dalam molekulnya, dan (d) ada di atau berasal dari organisme hidup.''
2.7. Lipid Plasma
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
2.7.1. Lipoprotein
Lipoprotein (a) [Lp(a)] terdiri atas partikel LDL dan suatu apoprotein sekunder selain apoB-100. Apo (a) ini melekat pada ApoB-100 melalui ikatan disulfida. Apo (a) pada Lp (a) secara struktural merupakan homolog plasminogen dan tampaknya bersifat aterogenik karena menghambat fibrinolisis thrombus. Kadar Lp (a) meningkat pada nefrosis (Gunawan et al., 2007).
1. Kilomikron
Lipoprotein yang terbesar, dibentuk di dalam usus halus dan mengangkut trigliserida yang berasal dari makanan. Sejumlah kolesterol diesterifikasi oleh sistem asil-koA : kolesterol asiltransferase (ACAT) yang juga tampak dalam inti kilomikron. Fosfolipid dan kolesterol bebas-bersama dengan ApoB-48, A-II, dan protein lain yang baru disintesis membentuk lapisan tunggal pada permukaan. Kilomikron yang baru timbul memasuki ruang limfe usus dan duktus torasikus ke aliran darah (Katzung, 1998)
Lipoprotein dengan berat molekul terbesar ini lebih dari 80% komponennya terdiri dari trigliserida dan kurang dari 5% kolesterol ester.
Kilomikron membawa trigliserida dari makanan ke jaringan lemak dan otot rangka, juga membawa kolesterol makanan ke hati (Gunawan et al.,2007).
2. VLDL
VLDL disekresi oleh hati dan mengangkut trigliserida yang disintesis disana. VLDL mengandung ApoB-100 dan sejumlah ApoC. ApoC lebih banyak didapat dari HDL dalam plasma (Katzung, 1998).
3. LDL
LDL merupakan lipoprotein yang mengangkut kolesterol terbesar untuk disebarkan ke seluruh jaringan tubuh dan pembuluh nadi. LDL sering disebut kolesterol jahat karena efeknya yang aterogenik (mudah melakat pada dinding pembuluh darah), sehingga dapat menyebabkan penumpukan lemak dan penyempitan pembuluh darah (arterosklerosis) (Wiryowidagdo et al,. 2002).
Partikel LDL mengandung trigliserida sebanyak 10% dan kolesterol 50%. Jalur utama katabolisme LDL berlangsung lewat receptor-mediated endocytosis di hati dan sel lain. Ester kolesterol dari inti LDL hidrolisis menghasilkan kolesterol bebas untuk sintesis sel membran dan hormon steroid. Selain lewat proses endositosis sel juga mendapat kolesterol dari sintesis de novo lewat enzim HMG-CoA reduktase. Produksi enzim ini dan reseptor LDL diatur lewat transkripsi genetik berdasarkan tinggi rendahnya kadar kolesterol dalam sel (Gunawan et al., 2007).
4. HDL
HDL merupakan lipoprotein yang mengandung Apo A, yang memiliki efek anti-aterogenik, sehingga disebut kolesterol baik. Fungsi utamanya adalah membawa kolesterol bebas dari dalam endotel dan mengirimkannya ke pembuluh
darah perifer, lalu keluar tubuh lewat empedu. Dengan demikian, penimbunan kolesterol di perifer menjadi berkurang (Wiryowidagdo et al., 2002).
HDL dapat disubklasifikasi ke dalam HDL1, HDL2, HDL3 dan berdasarkan kandungan Apo A-I dan Apo A-II nya. Metabolisme HDL kompleks dan terdapat petunjuk bahwa Apo A-I plasma yang merupakan apoprotein utama HDL merupakan inverse predictor untuk resiko penyakit jantung koroner yang lebih baik dari pada kadar HDL (Gunawan et al., 2007).
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
5. IDL
IDL ini kurang mengandung trigliserida (30%). Lebih banyak kolesterol (20%) dan relatif lebih banyak mengandung apoprotein B dan E. IDL adalah zat perantara yang terjadi sewaktu VLDL dikatabolisme menjadi LDL, tidak terdapat dalam kadar yang lebih besar kecuali bila terjadi hambatan konversi lebih lanjut (Gunawan et al., 2007).
2.7.2. Kolesterol
(Yun : chole = empedu, stereos = padat) adalah zat alamiah dengan sifat fisik serupa lemak tetapi berumus steroida, seperti banyak senyawa alamiah lainnya. Kolesterol merupakan bahan bangunan esensial bagi membran sel dan bahan isolasi sekitar serat saraf, begitu pula hormon kelamin dan anak ginjal, vitamin D serta asam empedu. Kolesterol terdapat pula dalam lemak hewani, kuning telur dan batu empedu (Tjay et al., 2007). Karena itu, terjaminnya suplai kolesterol yang terus- menerus akan sangat penting bagi sel tubuh (Pamela et al., 2010).
Kolesterol berasal dari lemak yang menghasilkan 9 kalori. Sementara itu, karbohidrat dari tepung dan gula hanya menghasilkan 4 kalori. Lemak yang termakan terdiri atas lemak jenuh dan lemak tak jenuh yang masing-masing
dibutuhkan tubuh (Wiryowidagdo et al.,2002).
2.7.3. Trigliserida
Triasilgliserol (trigliserida) adalah ester trihidrat alkohol gliserol dan asam lemak. Mono- dan diasilgliserol, tempat satu atau dua asam lemak teresterifikasi dengan gliserol, juga ditemukan dijaringan (Murray et al., 2009). Meningkatnya trigliserida akan menambah resiko terjadinya penyakit jantung dan stroke (Sutanto, 2010).
2.8. Klasifikasi Hiperlipidemia
Adapun klasifikasi hiperlipidemia menurut Gunawan et al.,2007 yaitu :
1. Tipe I
Tipe ini memperlihatkan hiperkilomikronemia pada waktu puasa bahkan dengan diet lemak normal dan biasanya disebabkan oleh defisiensi lipoproteinemia lipase yang dibutuhkan untuk metabolisme kilomikron. Pemeriksaan biokimia menunjukan adanya lapisan krem dipermukaan plasma pasien puasa.
2. Tipe II
Pada tipe ini terjadi peninggian LDL dan apoprotein B dengan VLDL kadar normal (tipe II a) atau meningkat sedikit (tipe II b). Bentuk paling umum hiperlipidemia tipe II diduga disebabkan oleh penurunan jumlah reseptor LDL berafinitas tinggi. Blockade degradasi LDL menyebabkan penimbunan LDL dalam plasma yang kemudian meningkatkan deposit lemak di dinding arteri.
3. Tipe III
Penimbunan LDL pada tipe ini mungkin disebabkan oleh blockade parsial dalam metabolisme VLDL menjadi LDL, peningkatan produksi apoprotein B atau peningkatan kadar apoprotein E total. Pada kelainan ini kolesterol serum dan
trigliserida meningkat (350-800 mg/dl).
4. Tipe IV
Disini terjadi peningkatan VLDL dengan hiper-trigliseridemia. Mekanisme kelainan yang familial tidak diketahui, tetapi tipe IV yang didapat biasanya bersifat sekunder akibat penyakit lain, alkoholisme berat atau diet kaya karbohidrat, dan biasanya pasien gemuk.
5. Tipe V
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
2.9. Pengobatan Hiperlipidemia
Antihiperlipidemia adalah obat yang dapat menurunkan kadar kolesterol dan/atau trigliserida darah yang tinggi. Menurut Tjay et al., 2007 dan Gunawan et al.,2007 golongan obat antihiperlipidemia dianaranya :
2.9.1. Damar penukar-anion/pengikat asam empedu : kolestiramin dan
kolestipol. Berdaya mengikat asam empedu sehingga sekresi kolesterol ditingkatkan. Khususnya menurunkan LDL-kolesterol (tipe IIA) dan kolsterol total dengan 8-15%, bersama nikotinat sampai 40% dan bekerja sinergistis dengan penghambat HMG-CoA reduktase.
Dosis kolestiramin dan kolestipol yang dianjurkan adalah 12-16 g sehari dibagi 2-4 bagian dan dapat ditingkatkan sampai maksimum 3 kali 8 g dosis.
2.9.2. Asam nikotinat dan acpimox terutama menurunkan Trigliserida dan
VLDL, efeknya terhadap kolesterol total dan LDL lebih ringan.
Asam nikotinat diberikan per oral 2-6 g sehari terbagi dalam 3
dosis bersama makanan, mula-mula dalam dosis rendah (3 kali 100-200 mg sehari) lalu dinaikan setelah 1-3 minggu. Aspimoks merupakan analog sintetik asam nikotinat yang juga menghambat lipolisis pada jaringan
lemak. Obat ini menurunkan lemak darah dan meningkatkan HDL pada pasien hiperlipidemia tipe II,III, dan IV.
2.9.3. Fibrat : kolifibrat, simfibrat, fenofibrat, dan bezafibrat. Berkhasiat
menurunkan trigliserida dan VLDL dengan kuat, kolesterol total hanya sedikit. LDL dapat diturunkan pula, sedangkan HDL dinakkan sedikit, kecuali gemfibrozil yang menaikkan HDL dengan kuat.
2.9.4. Statin : lovastatin, simvastatin, pravastatin, atorvastatin dan rosuvastatin.
Senyawa penghambat reduktase (HMG-CoA-reductase-inhibitors) ini berdaya menurunkan sintesa kolesterol endogen dalam hati dan dengan demikian terjadi penurunan kolesterol total dengan kuat, LDL (dengan 30-40%), trigliserida dan VLDL lebih ringan, sedangkkan HDL dinaikkan.
Pemberian statin sebaiknya dimulai dengan dosis kecil lalu ditingkatkan hingga dosis yang lebih tinggi sampai didapatkan efek yang diinginkan. Lovastatin dimulai dari dosis 20 mg hingga maksimal 80 mg per hari, pravastatin 10-80 mg/hari, simvastatin 5-80 mg/hari, fluvastatin 20-80 mg/hari, atorvastatin 10-80 mg/hari dan rosuvastatin 10-40 mg/hari.
2.9.5. Probukol dianggap sebagai obat pilihan kedua pada pengobatan
hiperkolesterolemia dangan peninggian LDL. Obat ini menurunkan kadar LDL dan HDL tanpa perubahan kadar trigliserida. Dosis dewasa 250-500 mg sebaiknya ditelan bersama makanan, 2 kali sehari. Biasanya dikombinasi dengan obat hipolipidemik yang lain (mis. Resin atau
penghambat HMG CoA reduktase).
2.9.6. Penghambat absorpsi kolesterol intestinal. Ezetimibe menghambat
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
2.10. Simvastatin (Sweetman, 2009., Lacy et al. 2006., Tjay et al., 2007., BNF,
2009)
Sinonim : Simvastatiini; Simvastatina; Simvastatinas; Simvastatine;
Simvastatinum; Sinvinolina; Synvinolin; Szimvasztatin;
Velastatin; Velastatina.
Rumus molekul : C25H38O5
Berat molekul : 418.6
Pemerian : Bubuk Kristal putih atau hampir putih.
Kelarutan : Praktis tidak larut dalam air, mudah larut dalam alkohol, kloroform dan metil alkohol, sedikit larut dalam propilen glikol, sangat sedikit larut dalam minyak, sangat larut dalam diklorometana.
Penggunaan terapi : Hiperkolesterolemia, pencegahan kardiovaskuler dengan aterosklerosis atau diabetes melitus.
Dosis : Dewasa 5-80 mg/hari, permulaan 10 mg malam hari.
Mekanisme kerja :Simvastatin diserap dari saluran pencernaan dan
dihidrolisis kedalam bentuk aktif β-hydroxyacid. Metabolit aktif lain telah terdeteksi dan sejumlah metabolit tidak aktif juga dibentuk. Simvastatin adalah
substrat untuk isoenzyme sitokrom P450 CYP3A4 dan pertama dimetabolisme dalam hati. Kurang dari 5% dari dosis oral telah dilaporkan mencapai sirkulasi sebagai metabolit aktif. Simvastatin terutama diekskresikan dalam feses melalui empedu sebagai metabolit. Sekitar 10 sampai 15% pulih dalam urin, terutama dalam bentuk tidak aktif.
Itu paruh dari metabolit β-hydroxyacid aktif dalam 1,9 jam.
2.11. Cara Pengukuran Kadar Kolesterol Darah
Spekrofotometri adalah suatu metode pengukuran serapan radiasi elaktromagnetik pada panjang gelombang tertentu, spektrofotometer terdiri dari spektrometer dan fotometer. Spektrometer menghasilkan sinar dan spektrum dengan panjang gelombang tertentu dan fotometri adalah alat pengukur intensitas cahaya yang dapat diabsorpsi (Gani et al., 2010).
Pelarut yang banyak digunakan untuk spektroskopi UV ialah etanol 95% karena kebanyakan golongan senyawa larut dalam pelarut tersebut. Pelarut lain yang sering digunakan ialah air, metanol, heksana, eter minyak bumi, dan eter. Senyawa tanpa warna diukur pada jangka 200 sampai 400 nanometer (nm), senyawa berwarna pada jangka 200 sampai 700 nm. Panjang gelombang serapan maksimum dan minimum pada spektrum serapan yang diperoleh direkam dalam nm, demikian juga kekuatan absorbansi pada maksima dan minima yang khas (Harborne, 1987).
Pengukuran kadar kolesterol menggunakan metode enzimatik dengan reagen spesifik untuk kolesterol total. Dimana adsorpsi diukur menggunakan
17 UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
BAB III
METODOLOGI PENELITIAN
3.1. Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilakukan di laboratorium Farmasi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta.Proses pembuatan ekstrak dan uji spektrofotometri dilakukan di laboratorium PDR
(Pharmacy Development Research), uji kolesterol terhadap hewan uji dlakukan di
Laboratorium Animal House, penapisan fitokimia dilakukan PMC (Pharmacy
Medicinal Chemistry). Penelitian berlangsung mulai dari bulan Agustus 2012
sampai Desember 2012.
3.2. Alat dan Bahan
3.2.1. Alat
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini antara lain : timbangan analitik, blender, erlenmeyer, gelas ukur, becker glass, spatula, corong, batang
pengaduk, hot plate, tabung reaksi, kaca arloji, kertas saring, alumunium foil, pipet tetes, termometer, cawan penguap, botol timbang, rotary evaporator, oven, tanur, vortex, mikro pipet, timbangan hewan, sentrifugasi, masker, sarung tangan,
kandang tikus, kapas, sonde lambung, spuit dan spektrofotometer UV.
3.2.2. Bahan
1. Simplisia
Daun jati (Tectona grandis L. f.) yang digunakan untuk penelitian diperoleh dari daerah Telagasari-Karawang-Jawa Barat.
2. Bahan Kimia
1. Good buffer pH 6-7 50 mmol/l 2. Fenol 5 mmol/l
3. 4-aminoantipirin 0,3 mmol/l 4. Kolesterol esterase 200 U/l 5. Kolesterol oksidase 50 U/l 6. Peroksidase 3 U/l
7. Standar 200 mg/dl (5,2 mmol/l)
3. Bahan Penginduksi
Bahan penginduksi makanan tinggi kolesterol yang digunakan dalam penelitian terdiri dari campuran lemak babidan minyak goreng yang diperoleh dari pasar tuparev daerah karawang.
4. Hewan Uji
Hewan uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah tikus putih jantan galur Sparague-Dawley dengan berat badan 180-250 gram dan berumur 3-4 bulan
yang diperoleh dari laboratorium farmakologi fakultas kedokteran universitas indonesia. Tikus yang digunakan berjumlah 30 ekor.
3.3. Prosedur Kerja
3.3.1. Penyiapan Simplisia
Memilih daun yang bagus dan segar, kemudian daun dibersihkan dari bahan pengotor dengan menggunakan air mengalir, lalu dikeringkan dengan cara di angin-anginkan dalam suhu ruangan. Daun yang sudah kering kemudian dihaluskan dengan cara diblender.
3.3.2. Ekstraksi
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta mendapatkan ekstrak kental.Setelah divacum, ekstrak kental tersebut di ujikan pada tikus untuk mengetahui efek penurunan kadar kolesterol total darah pada tikus.
3.3.3. Penapisan Fitokimia Simplisia
1. Identifikasi Alkaloid
O,5 gram ekstrak dilarutkan dalam 10 ml HCl encer, dipanaskan dan disaring. Kedalam filtrat ditambahkan 2 ml larutan ammonia.Kemudian ditambahkan 5 ml kloroform dan dikocok perlahan-lahan untuk mengekstraksi basa alkaloid.Lapisan kloroform diambil lalu diekstraksi dengan 10 ml asam asetat, kemudian dibagi menjadi 2 bagian.Pada bagian pertama ditambahkan pereaksi Mayer dan pada bagian kedua ditambahkan pereaksi Dragendorff.Terbentuknya warna krem dengan pereaksi Mayer dan endapan coklat kemerahan dengan pereaksi Dragendorff menunjukan adanya senyawa alkaloid (Ayoola, G.A. et al., 2008).
2. Identifikasi Flavonoid
0,5 gram ekstrak ditambah 50 ml air panas, dididihkan selama 5 menit dan disaring, filtrat digunakansebagai larutan percobaan.ke dalam 5 ml larutan
percobaan ditambahkan sedikit serbuk magnesium, 1 ml asam klorida pekat dan 2 ml amilalkohol, dikocok dengan kuat dan dibiarkan memisah. Terbentuknya warna jingga atau merah jingga pada lapisan amilalkohol menunjukkan adanya senyawa flavonoid (Wijono, 2003).
3. Identifikasi Saponin
0,5 gram ekstrak dimasukkan dalam tabung reaksi dan di tambahkan aquadest, larutan dikocok selama 3-5 menit. Terbentuknya busa yang stabil selama 30 menit menunjukkan adanya senyawa saponin (Farnsworth, 1966).
4. Identifikasi Steroid dan Triterpenoid
terbentuk warna hijau kehitaman menunjukkan adanya golongan steroid dan jika terbentuk warna merah yang cepat hilang menunjukkan adanya senyawa golongan triterpenoid(Ayoola, G.A. et al., 2008).
5. Identifikasi Tanin
0,5 gram ekstrak dididihkan dlam 10 ml aquadest dalam tabung reaksi, lalu disaring. Kemudian kdalam filtrat ditambahkan beberapa tetes ferri klorida 0.1%.terbentuk warna hijau kecoklatan atau biru kehitaman menunjukkan keberadaan tannin (Ayoola, G.A. et al., 2008).
6. Identifikasi Kumarin
0,5 gram ekstrak dilarutkan dalam air panas, setelah dingin, larutandibagi dalam 2 tabung reaksi, yaitu tabung 1 sebagai blanko,dan tabung 2 ditambah 0,5 ml NH3 10%. Adanya pijaranyang kuat di bawah sinar UV menunjukkan adanya kumarin dan turunannya (Indrayani, dkk. 2006)
3.3.4. Pengujian Parameter Ekstrak
1. Susut Pengeringan
Ekstrak ditimbang sebanyak 1g dan dimasukkan kedalam botol timbang
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
2. Kadar Abu
1 gram ekstrak yang telah digerus dan ditimbang, dimasukkan ke dalam krus silikat yang telah dipijarkan dan ditara, ratakan.Pijarkan perlahan-lahan hingga arang habis, dinginkan, timbang. Jika cara ini arang tidak dapat dihilangkan, tambahkan air panas, saring melalui kertas saring bebas abu. Pijarkan sisa kertas dan kertas saring dalam krus yang sama. Masukkan filtrat kedalam krus, uapkan, pijarkan hingga bobot tetap, timbang. Hitung kadar abu terhadap bahan yang telah dikeringkan di udara (Depkes RI, 2000).
3.3.5. Penyiapan Hewan Uji
Sebelum digunakan untuk penelitian, hewan diaklimatisasi selama 4 minggu agar dapat menyesuaikan diri dengan lingkungan baru.Selama aklimatisasi, tikus diberikan minum dan makanan standar serta mengontrol kesehatan dan berat badan tikus.Setelah diaklimatisasi, tikus diberikan makanan tinggi kolesterol secara oral sebanyak 2%/berat badan setiap hari selama 14 hari.
3.3.6. Rancangan Penelitian
Pada penelitian ini digunakan hewan uji tikus putih jantan dipilih secara acak sebanyak 30 ekor untuk dibagi menjdai 6 kelompok, dihitung berdasarkan
rumus federer : (n-1)(t-1) ≥ 15
Dimana : n = jumlah ulangan minimal dari tiap perlakuan t = jumlah perlakuan
Jumlah hewan uji yang digunakan adalah : (n-1)(t-1) ≥ 15 (n-1)(6-1) ≥ 15 (n-1)(5) ≥ 15 (5n-5) ≥ 15
5n ≥ 20 n ≥ 4 ekor
kelompok, hal ini karena untuk uji antihiperlipidemia digunakan minimal 5 ekor tikus pada masing-masing kelompok (Depkes RI, 1993).
Tabel. 3.1. Pembagian Kelompok Hewan Uji Berdasarkan Perlakuan (Sukandar et
al., 2012 dan Dachriyanuset al., 2007).
3.3.7. Penentuan Dosis
1. Dosis ekstrak daun jati (Tectona grandis L.f.) yang digunakan yaitu berdasarkan uji aktivitas diuretik pada tikus 250, 500 dan 1000 mg/kg (Pradip et al., 2011).
2. Dosis simvastatin yang digunakan sebagai kontrol positif yaitu 10 mg per oral. 3. Komposisi makanan tinggi kolesterol
Lemak Babi 1% Minyak goreng 5%
3.3.8. Perhitungan Dosis dan Pembuatan Larutan Uji
1. Dosis Daun Jati Yang Digunakan
Dosis Rendah = 250 mg/kg Dosis Sedang = 500 mg/kg Dosis Tinggi = 1000 mg/kg
Kelompok
Jumlah
tikus Perlakuan
1. 5 Kontrol normal diberi minum dan makanan standar.
2. 5 Pemberian makanan tinggi kolesterol.
3. 5 Pemberian simvastatin.
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta Volume larutan ekstrak uji yang diberikan dibuat dalam 3 ml. (Lampiran.10)
2. Pembuatan Suspensi NaCMC
Sebanyak 0,5 gram NaCMC, digerus dan ditambahkan sedikit demi sedikit 5 ml aquadest hangat, aduk hingga mengembang. Kemudian ditambahkan aquadest hingga 50 ml.
3. Dosis Simvastatin Sebagai Kontrol Positif
Dosis simvastatin yang digunakan untuk manusia adalah 5-10 mg/hari.Dosis yang digunakan untuk penelitian yaitu 10 mg/hari.Konversi dosis ke tikus berdasarkan rumus HED adalah 1,03 mg/kgBB, perhitungan dapat dilihat pada (Lampiran.10).Pemberian simvastatin melalui oral dalam bentuk suspensi dengan menambahkan NaCMC.
4. Cara Pembuatan Makanan Tinggi Kolesterol
Lemak Babi 1%
Minyak goreng 5%
Penimbangan : 1. Lemak Babi 1% = 1% x 100 ml = 1 g 2. Minyak goreng 5% = 5% x 100 ml = 5 g
Pembuatan : 1. Panaskan lemak babi hingga mencair, kemudian diamkan beberapa saat hingga hangat.
2. Masukkan minyak goreng, aduk ad homogen.
3.3.9. Uji Efek Antihiperkolesterolemia
1. Tikus dibagi menjadi 6 kelompok, tiap kelompok terdiri 5 ekor tikus putih jantan galur Sparague-Dawley. Diukur kadar kolesterol awal sebelum perlakuan.
3. Untuk kelompok uji dilakukan pengukuran kadar kolesterol darah pada hari ke-15 setelah pemberian makanan tinggi kolesterol dan sebelumnya tikus dipuasakan selama 12 jam.
4. Pemberian estrak daun jati untuk kelompok uji 4, 5 dan 6, simvastatin untuk kelompok 3 sebagai pembanding.
5. Setelah pemberian ekstrak, pada hari ke-3, 7 dan 14 dilakukan pengambilan darah tikus pada semua kelompok melalui vena ekor, kemudian dilakukan pengukuran kadar kolesterol total pada darah tikus. Sebelumnya tikus dipuasakan selama 12 jam.
3.3.10. Cara Pengambilan Darah dan Pengukuran Kadar kolesterol Darah
Tikus dipuasakan ± 12 jam sebelum dilakukan pengambilan darah. Pengambilan darah dilakukan sebanyak 5 kali, yaitusebelum percobaan (minggu ke-0), setelah induksi makanan tinggi kolesterol selama 14 haru, setelah 3 hari pemberian ekstrak daun jati, 7 hari setelah pemberian ekstrak daun jati dan 14 hari setelah pemberin ekstrak daun jati. Pengambilandarah dilakukan dengan cara
bagian ujungekor tikus dibersihkan dengan alkohol 70%,kemudian dipotong kira-kira 1-2 mm lalu diurutperlahan-lahan sampai darahnya keluar (Oruganti & Sudesh, 2011). Darahyang diambil dari setiap ekor tikus berkisarantara 0,5-1 ml.
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
3.3.11. Uji Statistik Terhadap Kadar Kolesterol Darah
4.1. Determinasi Daun Jati (Tectona grandis L.f.)
Berdasarkan hasil determinasi yang dilakukan di Herbarium Bogoriense, Puslit Biologi Bidang Botani LIPI Cibinong menunjukkan bahwa jenis simplisia yang digunakan pada penelitian adalah Jati (Tectona grandis L.f.) dengan family (suku) Verbenaceae (Lampiran.2). Determinasi dilakukan dengan tujuan untuk megidentifikasi jenis simplisia.
4.2. Hasil Ekstraksi Daun Jati
Dari 600 gram serbuk daun jati yang diekstraksi diperoleh ekstrak kental 107 gram. Jadi rendemen yang di dapatkan yaitu 17,87% (Lampiran. 8). Metode maserasi dalam proses ekstraksi dipilih karena merupakan metode sederhana dan baik untuk senyawa-senyawa yang tidak tahan dengan pemanasan. Pemilihan pelarut etanol 70% sebagai pelarut ekstraksi dikarenakan etanol merupakan pelarut semipolar yang dapat menarik senyawa polar dan non polar yang terkandung dalam simplisia. Selain itu juga, memiliki toksisitas lebih rendah
dibandingkan pelarut organik lain seperti metanol, kloroform (Saifudin, dkk. 2011). Hasil saringan (filtrat) kemudian di pekatkan dengan menggunakan rotary
evaporator untuk mendapatkan ekstrak kental.
4.3. Hasil Pengujian Parameter ekstrak
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
4.4. Hasil Uji Penapisan Fitokimia
Tabel 4.1. Hasil Penapisan Fitokimia Serbuk dan Ekstrak Daun Jati Golongan Senyawa Serbuk Ekstrak
Alkaloid - -
Penapisan fitokimia dilakukan terhadap serbuk dan ekstrak kental daun jati dengan tujuan ada atau tidak senyawa yang hilang selama proses ekstraksi. Hasil penapisan fitokimia ekstrak daun jati sama dengan hasil penapisan serbuk daun jati yaitu menunjukkan adanya senyawa flavonoid, saponin, steroid, tanin, dan kumarin (Lampiran.7). Hal ini menunjukkan bahwa tidak adanya senyawa yang hilang selama proses ekstraksi. Tujuan dilakukannya penapisan fitokimia yaitu untuk mengetahui kandungan senyawa yang ada dalam ekstrak maupun serbuk.
Senyawa dari daun jati (Tectona grandis L.f.) yang diduga memiliki potensi menurunkan kadar kolesterol diantaranya : Pertama flavonoid. Flavonoid teroksidasi oleh radikal, sehingga lebih stabil dan radikal kurang reaktif. Dengan kata lain, flavonoid menstabilkan reaktif oksigen yang bereaksi dengan senyawa reaktif dari radikal. Karena reaktivitas tinggi dari kelompok hidroksil flavonoid, radikal dibuat tidak aktif. Dengan mengikat radikal, flavonoid dapat menghambat
kolesterol dan mereduksi kadar kolesterol (Nijveldt at al., 2001). Kedua yaitu tannin. Tanin tergolong senyawa polifenol. Polifenol sebagai antioksidan mempunyai efek yang menguntungkan pada fungsi endotel yaitu menurunkan
oksidasi LDL dan meningkatkan produksi nitric oxide (NO). Nitric oxide adalah
vasodilator endogenous yang mempunyai kemampuan anti aterosklerosis
(Umarudinet al., 2012). Beberapa turunan tannin dari herbal tradisional di ketahui
memiliki efek terhadap penghambatan HMG-CoA reductase yang memiliki efek kuat terhadap hiperkolesterolemia (Avci et al., 2006), mekanisme efek dari tannin mungkin dapat dipahami dari kemampuannya untuk membentuk komplek dengan protein. Kemungkinan tannin membentuk sedikit komplek yang dicerna dengan diet protein dan dapat mengikat dan menghalangi protein endogen, seperti enzim pencernaan (Frutos et al., 2004). Ketiga yaitu saponin. Milgate and Roberts (1995) telah merangkum mekanisme dari saponin yang dapat mereduksi kadar kolesterol diantaranya : 1. Penambahan pembentukan kompleks tidak larut dengan
β-hydroxysteroid dapat menurunkan penyerapan kolesterol intertinal sehingga menghasilkan adanya peningkatan sterol dalam ekskresi feses. 2. Adsorpsi dari
asam empedu ke serat ditingkatkan dengan adanya saponin, pembentukan bobot molekul misel yang besar, dikeluarkan asam empedu dari reabsorpsi. Selanjutnya kehilangan asam empedu, diimbangi oleh peningkatan konversi kolesterol
menjadi asam empedu dalam hati, sehingga hypocholesterlemia. (Utama-ang, 2006).
4.5. Hasil Uji Pengukuran Kadar Kolesterol Table 4.2. Rata-rata kadar kolesterol
Kelompok
Rata - Rata Kadar Kolestrol (mg/dl) ± SD
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Tabel 4.3. Persentase Penurunan Kadar Kolesterol (%)
Kelompok
Persentase Penurunan Kadar Koleterol Total Darah Tikus (%)
dipelihara, merupakan hewan yang relatif sehat dan cocok untuk berbagai macam penelitian (Malole & Sri, 1989) dan tidak begitu fotofobik seperti halnya mencit (Harmita & Maksum, 2004). Sebelum digunakan untuk penelitian, tikus diaklimatisasi selama empat minggu agar dapat menyesuaikan diri dengan lingkungan. Selama proses aklimatisasi, tikus diamati aktivitasnya maupun kondisi fisiknya setiap hari, yaitu dengan cara menimbang berat badan tikus dan melihat apakah ada luka atau tidak pada tikus. Setelah aklimatisasi, tikus dikelompokkan menjadi 6 kelompok yaitu kelompok nomal, ngatif, positif, dosis rendah, dosis sedang dan dosis tinggi. Masing-masing kelompok terdiri dari 5 ekor tikus. Pembagian kelompok berdasarkan berat badan tikus dan diantara berat tikus yang satu dengan yang lain tidak boleh berbeda jauh.
Pada penelitian ini digunakan tiga kontrol yaitu normal, negatif dan positif. Kontrol normal diperlukan untuk mengetahui kadar kolesterol total darah tikus selama uji. Kontrol negatif yang diinduksi makanan tinggi kolesterol diperlukan untuk mengetahui peningkatan kadar kolesterol total darah tikus dari normal sampai uji penurunan kadar kolesterol berlangsung. Sedangkan kontrol positif menggunakan simvastatin diperlukan untuk melihat pengaruh obat antikolesterol yang telah terbukti khasiatnya menurunkan kadar kolesterol. Karena simvastatin tidak larut dalam air, maka disuspensikan dengan Na CMC 0,5%.
pembanding pada saat tikus telah diberikan perlakuan induksi makanan tinggi kolesterol. Metode yang digunakan untuk uji efek penurunan kadar kolesterol darah tikus putih jantan yaitu tikus dibuat hiperkolesterol dengan dilakukannya induksi kolesterol yaitu campuran dari minyak babi dan minyak goreng curah dengan perbandingan 1:5 yang diberikan secara oral sebanyak 2% dari berat badan tikus. Minyak babi digunakan sebagai bahan penginduksi di karenakan minyak babi dapat meningkatkan kadar kolesterol darah sebesar 15-25% (Widyaswari, 2011). Tikus di induksi dengan makanan tinggi kolesterol selama 14 hari terhadap semua kelompok perlakuan kecuali kelompok normal. Metode ini digunakan karena merupakan metode yang mudah dan umum digunakan pada uji efek penurunan kadar kolesterol darah tikus.
Pada hari pertama sebelum diinduksi makanan tinggi kolesterol, kadar kolesterol darah tikus seluruh kelompok menunjukkan normal. Pada hari ke 14 setelah diinduksi, hasilnya menunjukkan hewan uji telah mengalami hiperkolesterolemia. Dilihat dari penampakan fisik, tikus hiperkolesterolemia mengalami adanya penurunan aktivitas dimana tikus terlihat kurang aktif
dibandingkan dengan sebelum diberi makanan tinggi kolesterol. Selain itu, keadaan kandang dari tikus hiperkolesterolemia menjadi lebih lembab dibandingkan dengan kandang kelompok normal.
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta Pengukuran kadar kolesterol total darah tikus dilakukan dengan metode enzimatis menggunakan spektrofotometer. Serum yang diperoleh setelah di sentrifus kemudian di tambahkan larutan pereaksi kolesterol sehingga terjadi reaksi dimana enzim kolesterol esterase akan menghidrolisis kolesterol esterase menjadi kolesterol bebas menjadi kolestenon dan hydrogen peroksida. Selanjutnya hidrogen peroksida akan bereaksi dengan 4-aminoantipirin dan fenol pembentuk komplek qunoneimine yang berwarna merah. Warna merah muda yang terbentuk dalam larutan kemudian diukur serapannya dengan spektrofotometer UV-Visibel pada panjang gelombang 500 nm (Dachriyanus et al.,2007). Namun panjang gelombang yang digunakan pada penelitian yaitu 504 nm, hal ini berdasarkan hasil pengukuran standar kolesterol uji yang digunakan selama proses pengukuran kadar kolesterol total darah tikus yang diberi ekstrak etanol 70% daun jati.
Berdasarkan uji normalitas (one-sample Kolmogorov-Smirnov Test)
menunjukkan kadar kolesterol total darah terdistribusi normal (p≥0,05) dan pada uji homogenitas (Levene) menunjukkan kadar kolesterol total darah bervariasi homogen, karena syarat normalitas dan homogenitas sudah terpenuhi maka
dilanjutkan dengan uji One-Way ANOVA dan hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa tidak ada perbedaan yang bermakna (signifikan) pada semua kelompok uji
karena nilai (p≥0,05) (Lmpiran.14). Sehingga dapat dikatakan bahwa ekstrak etanol 70% dari daun jati (Tectona grandis L.f.) tidak dapat menurunkan kadar kolesterol total secara bermakna.
terdiri dari 5 ekor tikus di tempatkan dalam satu kandang yang sama, dikarenakan tersedianya kandang tikus yang terbatas sehingga hal tersebut dapat terbentuknya persaingan antar tikus. Pada metabolisme lipid efek stres dapat meningkatkan pelepasan asam lemak ke dalam darah. Asam lemak nantinya akan di esterifikasi menjadi triasilgliserol. Triasilgliserol akan diangkut oleh kilomikron dan VLDL. VLDL merupakan prekursor IDL dan IDL merupakan prekursor LDL. Kolesterol total meliputi HDL, LDL dan trigliserida. Sehingga jika asam lemak dalam darah meningkat, kadar LDL akan meningkat dan kadar kolesterol total juga meningkat (Widyaswari,2011).
Dalam pengolahan data hasil penelitian, data kontrol positif yang diberikan simvastatin tidak dimasukan dalam data hasil. Hal ini dikarenakan kadar kolesterol masing-masing tikus kontrol positif tidak berbeda jauh dengan kontrol negatif yang hanya diberikan makanan tinggi kolesterol. Kadar kolesterol yang tidak berbeda jauh pada masing-masing tikus kontrol positif maupun negatif dapat disebabkan karena adanya keterbatasan peneliti dalam hal memberikan simvastatin yang seharusnya diberikan sebelum tikus tidur pada malam hari, akan
tetapi selama penelitian berlangsung pemberian simvastatin diberikan pada sore hari setelah maghrib, dimana pada waktu tersebut tikus masih dalam keadaan aktif. Pada kelompok kontrol normal dan uji juga manunjukkan adanya ketidak
33 UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1. Kesimpulan
Dari hasil penelitian uji pengaruh pemberian ekstrak etanol 70% daun jati
(Tectona grandis L.f.) pada tikus putih jantan yang di induksi dengan makanan
tinggi kolesterol selama 14 hari, diperoleh kesimpulan bahwa pemberian ekstrak dengan dosis 250 mg/kg berat badan, 500 mg/kg berat badan dan 1000 mg/kg berat badan tidak memiliki perbedaan secara bermakna (p ≥ 0,05) terhadap kontrol negatif pada aktivitas penurunan kadar kolesterol total darah pada tikus putih jantan.
5.2. Saran
Akoh, C. Casimir dan David B. Min. ( 2002). Food Lipids ; Chemistry, Nutrition,
And Biotechnology. New York : Marcel Dekker.
Aradhana, Rajuri, K.N.V.Rao., David Banji and R.K. Chaithanya. (2010). A Review on Tectona grandis.linn: Chemistry and Medicinal Uses (Family :
Verbenaceae). Herbal Tech Industry.
Avci, Gulcan., Esra Kupeli, Abdullah Eryavuz, Erdem Yesilada and Ismail Kucukkurt. (2006). Antihypercholesterolaemic and Antioxidant Activity
Assessment of Some Plants Used As Remedy in Turkish Folk Medicine. Journal of
Ethnopharmacology 107. 418–423.
Ayoola, Ga., Hab Coker1, Sa Adesegun, Aa Adepoju-Bello1, K Obaweya1, Ec Ezennia1, To Atangbayila1. (2008). Phytochemical Screening And Antioxidant Activities Of Some Selected Medicinal Plants Used For Malaria Therapy In
Southwestern Nigeria. Research Article. Tropical Journal Of Pharmaceutical
Research.
Baldatina, Aqilah Zainaba Istiqlal. (2008). Pngaruh Pemberian Insektisida (Esbiothrin, Imiprothrin dan D-Phenothrin) Pada Tikus Putih (Rattus Rattus):
Kajian Histopatologi Hati dan Ginjal. Skripsi : Institut Pertanian Bogor.
BNF. (2009). British National Formulary-57. German : GGP Media GmbH. hal. 142.
Dachriyanus, Delpa Oria Katrin, Rika Oktarina, Olivia Ernas, Suhatri, dan M. Husni Mukhtar. (2007). Uji Efek A-Mangostin terhadap Kadar Kolesterol Total, Trigliserida, Kolesterol HDL, dan Koletserol LDL Darah Mencit Putih Jantan
serta Penentuan Lethal Dosis 50 (Ld50). J.Sains Tek. Far. 12 (2).
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. (1995). Farmakope Indonesia, ed. IV. Jakarta : Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan makanan. hal. 7.
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. (1995). Materia Medika Jilid VI. Jakarta : Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan makanan. hal. x.
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. (1993). Metode Penapisan Farmakologi, Pengujian Klinik, Pengembangan dan Pemanfaatan Obat Bahan
Alam. Jakarta : Yayasan Pengembangan Obat Bahan Alam Phyto Medica. hal. 37.
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. (2000). Parameter Standar Umum
Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta : Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta Farnsworth, N.R. (1966). Biological and Phytochemical Screening of Plant. J.Pharm.Sci., vol. 55, no.3. hal. 257.
Frutos, P., G. Hervas, F. J. Giraldez and A. R. Mantecon. (2004). Review. Tannins
and Ruminant Nutrition. Spanish Journal of Agricultural Research. 2 (2), 191-202.
Gani, Ratna L., Esti Mumpuni, Sudjaswadi. (2010). Uji Efek Antioksidan dan
Antiinflamasi dari Ekstrak Tumbuhan Kayu Angin (Usnea flexuosa, Tayl)
Terstandarisasi. Penelitian Universitas Pancasila.
Giri, Liga Nenggala. (2008). Potensi Antioksidasi Daun Salam: Kajian In Vivo
Pada Tikus Hiperkolesterolemia dan Hiperglikemia. Skripsi. Program Studi
Biokimia. Fakultas Matematika Dan Ilmu Pengetahuan Alam. Institut Pertanian Bogor.
Gunawan, Sulistia Gan., Rianto setiabudy, Nafrialdi, Elysabeth. (2007).
Farmakologi Dan Terapi. Jakarta : UI Press. hal. 375-382.
Gross, Myron. (2004). Flavonoids and Cardiovascular Disease. Pharmaceutical Biology. Vol. 42, Supplement, pp. 21–35.
Harmita & Maksum Radji. (2004). Buku Ajar Analisis Hayati.Departmen Fakultas FMIPA Universitas Indonesia. hal. 74.
Harborne, J. B. (1987). Metode Fitokimia Penuntun Cara Modern Menganalisis
Tumbuhan. Bandung : Penerbit ITB.hal. 21.
Indrayani, Lany., Hartati Soetjipto, dan Lydia Sihasale. (2006). Skrining Fitokimia dan Uji Toksisitas Ekstrak Daun Pecut Kuda (Stachytarpheta
jamaicensis L. Vahl) Terhadap Larva Udang Aartemia Salina Leach. berk. penel.
hayati: 12 (57–61).
Joo Lee, Seung., Chong-Wook Kim, Hyuk-Jai Jang, Soon-Yeong Cho and Jong-Won Choi. (2011). Anti-hyperlipidemia and Anti-arteriosclerosis Effects of Laminaria japonica in Sprague-Dawley Rats. Original Article. Fish Aquat Sci 14(4), 235-241.
Katzung, Bertram G. (1998). Farmakologi Dasar Dan Klinik, ed.VI. Jakarta : EGC. hal. 544-546.
Krishna, Mahesh S., Jayakumaran Nair A. (2010). Antibacterial, Cytotoxic and Antioxidant Potential of Different Extracts from Leaf, Bark and Wood of Tectona
grandis. International Journal of Pharmaceutical Sciences and Drug Research ;
2(2): 155-158.
Lee , Soo Jung., Gui Fang Zhang And Nak Ju Sung. (2011). Hypolipidemic And Hypoglycemic Effects Of Orostachys Japonicus A. Berger Extracts In
Streptozotocin-Induced Diabetic Rats. Nutrition Research And Practice (Nutr Res
Pract) 2011;5(4):301-307.
Malole & Sri Utami Pramono. (1989). Penggunaan hewan-Hewan Percobaan di
Laboratorium. Departemen Pendidikan dan Kebudayaan Direktorat Jenderal
Pendidikan Tinggi Pusat Antar Universitas Bioteknologi Institut Pertanian Bogor.
Sweetman, Sean C. 2009. Martindale The Complete Drug Reference Thirty-sixth
edition. London:Pharmaceutical Press. hal.1390.
Murray, Robert K., Daryl K. Granner dan Victor W. Rodwell. (2009). Biokimia
Harper Ed.27. Alih Bahasa : Brahm U. Pendit, Editor Edisi Bahasa Indonesia :
Nanda Wulandari, dkk. Jakarta : EGC. hal. 131.
Nayeem, Naira and Karvekar M D. 2012. Effect Of Plant Stages On Analgesic
And Anti Inflammatory Activity Of The Leavesof Tectona Grandis. European
Journal of Experimental Biology.
Nijveldt, Robert J., Els van Nood, Danny EC van Hoorn, Petra G Boelens, Klaske van Norren, and Paul AM van Leeuwen. (2001). Flavonoids: A Review of Probable Mechanisms of Action and Potential Applications. Am J Clin Nutr 2001;74:418–25. Printed in USA.
Noorani, Arshad Ali., Gaurav Dwivedi1 and M. K. Kale. (2011). Antihyperlipidemic Activity of Rimonabant on High Cholesterol Diet Induced
Hyperlipidemia in Rats. Pharmacologyonline1: 1212-1220.
Ochani, Pooja C and Priscilla D’Mello. (2009). Antioxidant and Antihyperlipidemic Activity of Hibiscus sabdariffa Linn. Leaves and Calyces
Extracts in Rats. Indian Journal of Experimental Biology, vol.47
Pamela, C. Champe. (2010). Biokimia; Ulasan Bergambar. Alih bahasa : Richard A. Harvey, dkk. editor edisi bahasa Indonesia : Luqman Yanuar Rahman, dkk. Jakarta : EGC. hal. 266.
Pooja, Vipin Sharma and K.C.Samanta. (2011). Hypoglicemic Activity pf Methanolic Extract of Tectona grandis linn. Root in Alloxan Induced Diabetic
Rats. Journal of Applied Pharmaceutical Science 01 (04) : 106-109.
Pradip, J.Jadhav., Dr.Shete R.V., Shetty S.C. (2011). Diuretic Activity of Tectona
Grandis Leaves Aqueous Extract in Wistar Rats. International Journal of
Pharmaceutical Research and Development ; Vol 3 (7).
Price, Sylvia A dan Lorraine M. Wilson. (1994). Patofisiologi : konsep klinis
proses-proses penyakit. Alih bahasa : Peter Anugerah, editor : Caroline Wijaya,
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta Purushotham, K G., Parun, J Johnsy Jayarani, R Vasnthakumari, L Sankar, and Bijjam Raviprakash Reddy. (2010). Synergistic in vitro antibacterial activity of
Tectona grandis leaves with tetracycline. International Journal of PharmTech
Research Coden (USA): IJPRIF ISSN : 0974-4304 Vol.2, No.1, pp 519-523, Jan-Mar.
Putri, Rista Harwita., Pudjadi, Henny Kartikawati. (2010). Pengaruh Pemberian Ekstrak Bawang Merah (Allium Ascalonicum) Terhadap Kadar Kolesterol HDL
Serum Tikus Wistar Hiperlipidemia.Penelitian Universitas Diponegoro Semarang.
Ramos, María Elena Pahua., Alicia Ortiz-Moreno., Germán Chamorro-Cevallos., María Dolores Hernandez-Navarro., Leticia Garduno-Siciliano., Hugo Necoechea-Mondragon & Marcela Hernandez-Ortega .(2012). Hypolipidemic Effect Of Avocado (Persea Americana Mill) Seed In A Hypercholesterolemic
Mouse Model. Original Paper. Plant Foods Hum Nutr (2012) 67:10–16.
Santoso, Singgih. (2009). Panduan Lengkap Menguasai Statistik dengan SPSS 17. Jakarta : PT Gramedia.
Saifudin, Azis., Viesa Rahayu dan Hilwan Yuda Teruna. (2011). Standardisasi
Bahan Obat Alam. Yogyakarta: Graha Ilmu(buku stndar ekstrak). hal. 72.
Shaw, Shannon Reagan., Minakshi Nihal, and Nihal Ahmad. (2007). Dose
Translation From Animal To Human Studies Revisited. The Faseb Journal article
fj.07-9574LSF.
Shinde, Shubhangi., Niranjan Chivate., Pramodinee Kulkarni and Nilofer Naikwade. (2012). Hypolipidemic Activity Of Psidium Guajava Linn Leaves
Extracts In Hyperlipidemic Rats. International Journal Of Pharmacy And
Pharmaceutical Sciences ISSN- 0975-1491 Vol 5.
Sowmya, A. and T. Ananthi. (2011). Hypolipidemic Activity of Mimosa pudica
Linn on Butter Induced Hyperlipidemia in Rats. Asian J. Res. Pharm. Sci. Vol. 1:
Issue 4, Pg 123-126.
Sukandar, E.Y., Nurdewi and Elfahmi. (2012). Antihypercholesterolemic Effect of Combination of Guazuma ulmifolia Lamk. Leaves and Curcuma xanthorrhiza
Roxb. Rhizomes Extract in Wistar Rats. International Journal of Pharmacology.
Sumarna, Salim Hardja. (2012). Sukses Budidaya 9 Jenis Kayu Penghasil Rupiah. Klaten : Cable Book. hal. 40.
Sumarna, Yana. (2011). Kayu Jati, Panduan Budidaya Dan Prospek Bisnis. Jakarta : Penebar Swadaya. hal. 5, 19.
Sutanto. (2010). Cekal (Cegah Dan Tangkal) Penyakit Modern (Hipertensi,
Stroke, Jantung, Kolesterol, Dan Diabetes). Yogyakarta : Penerbit ANDI
Tjay, Tan Hoan dan Kirana Raharja. (2007). Obat-Obat Penting, Khasiat,
Penggunaan, Dan Efek Sampingnya. Jakarta : PT. Gramedia. hal. 569-581.
Umarudin, R. Susanti dan Ari Yuniastuti. (2012). Efektivitas Ekstrak Tanin Seledri Terhadap Profil Lipid Tikus Putih Hiperkolesterolemi. Unnes J Life Sci 1 (2).
Utama-ang, niramon. (2006). Development of Jiaogulan Tea (Gynostemma
pentaphyllum). Thesis: Graduate school, kasetsart university. hal. 24-25.
Wahid, S.S. ahmad, A., E. Bukhsh., S. Ahmad and S. R. Kakar. (2009).
Antihyperlipidemic Properties of Carthamus oxyacantha. Pakistan Journal Of
Science (Vol. 61, No. 2, June 2009).
Warisno dan Kres dahana. (2011). Investasi Prospektif Dengan Mengebunkan Jati
Unggul. Yogyakarta : Lily Publisher. hal. 11.
Widyaswari, Merisa Inggit. (2011). Pengaruh Pemberian Kelopak Kering Rosella Ungu (Hibiscus sabdariffa)Terhadap Kadar Kolesterol Total Serum Tikus
Hiperkolesterolemia. Artikel Penelitian Universitas Diponegoro Semarang.
Wijono S, Sri Harsodjo. ( 2003). Isolasi Dan Identifikasi Flavonoid Pada Daun
Katu (Sauropus Androgynus (L.) Merr). Makara, Sains, Vol. 7, No. 2, Agustus
2003.
Wiryowidagdo, Sujaswadi, M. Sitanggang. (2002). Tanaman Obat Untuk
Penyakit Jantung, Darah Tinggi dan Kolesterol. Jakarta : AgroMedia Pustaka.
hal. 23.
Yahya, Marzuqi. (2011). Jati Emas Kultur Jaringan, Cara Tepat Dan Cepat
Lampiran 1. Bahan dan Alat Penelitian
Gambar 1. DaunJati
(TectonagrandisL.f.)
Gambar 2.
PereaksiKolesterol
Gambar 3. Proses Perlakuanhewanuji
Gambar 4. StandarKolesterol
Gambar 5. EkstrakDaunJati
(TectonagrandisL.f.)
Gambar 6. Sentrifugasi
Gambar7. Rotary evaporator
Gambar 8.
Lampiran 5. Alur Penelitian
Dicuci dan sortasi basah
Maserasi dengan etanol 70%
Dikentalkan menggunakan rotary evaporator
Dihaluskan menggunakan blender
Ekstrak cair
Pemberian ekstrak pada tikus Ekstrak kental Daun jati segar
Daun dikeringakan
Serbuk simplisia daun jati
Determinasi
Tikus telah dibuat hiperkolesterol
Analisis data hasil dengan menggunakan ANOVA Pemeriksaan kadar kolesterol darah pada tikus menggunakan spektofotometer UV
Pemeriksaan kadar kolesterol awal Tikus diberi makanan tinggi kolesterol
Lampiran 6. Skema Kerja Pembuatan Ekstrak Daun Jati (TectonagrandisL.f.)
Dicuci dan sortasi basah
Dihaluskan menggunakan blender
Maserasi dengan etanol 70%
Dikentalkan menggunakan Rotary Evaporator
Daun jati segar
Daun dikeringakan
Serbuk simplisia daun jati
Ekstrak cair
Ekstrak kental
Pembuatan dosis ekstrak
Uji efek antihiperkolesterolemia
Penapisan Fitokimia
1. Alkaloid 4. Saponin
2. Flavonoid 5. Tanin
3. Steroid dan Triterpenoid 6. Kumarin
Penapisan Fitokimia
1. Alkaloid 4. Saponin
2. Flavonoid 5. Tanin
Lampiran 7. Hasil Penapisan Fitokimia
Senyawa Pengamatan Serbuk Ekstrak
Flavonoid Terbentuknya warna
Kumarin Adanya pijran warna hijau dibawah sinar
