iv
ABSTRAK
EFEK EKSTRAK ETANOL DAUN KEMUNING (Murraya paniculata (L.) Jack) TERHADAP
KADAR KOLESTEROL TOTAL DARAH TIKUS WISTAR JANTAN
Giselle Primagusta C Hartono, 2014. Pembimbing I : Rosnaeni, dra, Apt Pembimbing II: Fenny, dr, Sp.PK,M.Kes
Dislipidemia merupakan faktor risiko terjadinya Penyakit Jantung Koroner (PJK). Pencegahan PJK salah satunya dengan obat antidislipidemia, bila dikonsumsi dalam jangka waktu yang lama memiliki efek samping yang berbahaya sehingga sebagai terapi subtitusi, salah satunya digunakan daun kemuning.
Tujuan Penelitian untuk menilai efek ekstrak etanol daun kemuning (EEDK) dalam menurunkan kadar kolesterol total darah tikus Wistar jantan yang diinduksi secara eksogen dan endogen.
Desain penelitian eksperimental laboratorium sungguhan dengan Rancangan Acak Lengkap (RAL). Efek antidislipidemia diuji dengan metode induksi Pakan Tinggi Lemak (PTL) dan Propiltiourasil (PTU 0,01%), menggunakan 30 tikus putih jantan Wistar yang dibagi menjadi 6 kelompok (n=5) yaitu Kelompok I, II, dan III berturut-turut EEDK dosis 1 : 100 mg/kgBB, dosis 2 : 200 mg/kgBB, dan dosis 3 : 400 mg/kgBB, kelompok IV (kontol negatif) diberi pakan standar dan akuades, kelompok V (kontrol positif) diberi PTL dan PTU 0,01%, kelompok VI (pembanding) dengan simvastatin 0,9 mg/kgBB. Pelakuan diberikan setiap hari selama 14 hari. Data yang diukur kadar kolesterol total sesudah perlakuan. Analisis data dengan ANAVA dilanjutkan LSD, α = 0,05.
Hasil penelitian kadar kolesterol total pada kelompok I (74,00), II (73,40), dan III (61,40) terdapat perbedaan yang sangat bermakna (p<0,01) dibandingkan kelompok V (96,80).
Simpulan ekstrak etanol daun kemuning menurunkan kadar kolesterol total darah.
Kata kunci : Dislipidemia, ekstrak etanol daun kemuning, kadar kolesterol total
v ABSTRACT
THE EFFECT OF ETHANOL EXTRACT OF KEMUNING LEAVE (Murraya paniculata (L.) Jack) TOWARDS THE BLOOD TOTAL CHOLESTEROL LEVEL IN
MALE WISTAR RAT
Giselle Primagusta C Hartono, 2014. First Tutor : Rosnaeni, dra, Apt Second Tutor : Fenny,dr, Sp.PK, M.Kes
Dyslipidemia is the risk accident of Coronary Heart Disease (CHD). Prevention of CHD one of them with antidyslipidemia drugs, when consumed in long term have dangerous side effects so as a substitution therapy, one of them used kemuning.
Objective of the research to find out the effect of ethanol extract of kemuning leave (EEDK) on lowering the blood total cholesterol level in male wistar rat induced by exogenous and endogenous.
The method of the research is true laboratory experiments with a comparative Completely Randomized Design (CRD). The effect of antidyslipidemia tested with High Fat Feeding (HFF) induction and Propiltiourasil (PTU 0.01%). Thirty rats divided into six groups is EEDK dose 1 : 100 mg/kgBB, dose 2 : 200 mg/kgBB, dose 3 : 400 mg/kgBB , group IV (negative control) with aquadest and standard food, group V (positive control) with HFF and PTU 0.,01%, and comparison group with simvastatin 0.9 mg/kgbb. Treatment is given everyday in two weeks. Total cholesterol level (mg/dl) is measured after treatment. Analysis by using ANOVA and continued LSD, α =0.05.
The result of research is total cholesterol level in group I (74.00), II (73.40), and III (61.40) is lower than groups V (96.80) got highly significant (p<0,01)
Conclusion of this research is ethanol extract of kemuning leave can lowering the blood total cholesterol level.
vi
DAFTAR ISI
Halaman
LEMBAR PERSETUJUAN ... ii
SURAT PERNYATAAN ... iii
ABSTRAK ... iv
ABSTRACT ... v
KATA PENGANTAR ... vi
DAFTAR ISI ... ….viii
DAFTAR TABEL ... xii
DAFTAR GAMBAR ... xiii
DAFTAR LAMPIRAN ... xiv
BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang ... 1
1.2 Identifikasi Masalah ... 3
1.3 Maksud dan Tujuan Penelitian ... 3
1.4 Manfaat Penelitian ... 3
1.5 Kerangka Pemikiran dan Hipotesis 1.5.1 Kerangka Pemikiran ... 3
1.5.2 Hipotesis ... 5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Lipid ... 6
2.1.1 Definisi lipid ... 6
vii
2.2 Lipoprotein ... 7
2.2.1 Definisi Lipoprotein ... 7
2.2.2 Pembagian Lipoprotein ... 7
2.2.3 Metabolisme Lipoprotein ... 8
2.2.4 Metabolisme Jalur Endogen ... 8
2.2.5 Metabolisme Jalur Eksogen ... 8
2.2.6 Jalur Reverse Cholesterol ... 9
2.3 Kolesterol ... 10
2.3.1 Definisi Kolesterol ... 10
2.3.2 Fungsi Kolesterol ... 11
2.3.3 Sintesis Kolesterol ... 11
2.3.4 Transpor Kolesterol ... 13
2.3.5 Faktor yang Mempengaruhi Konsentrasi Kolesterol Darah ... 13
2.4 Dislipidemia ... 14
2.4.1 Definisi Dislipidemia ... 14
2.4.2 Klasifikasi Dislipidemia ... 14
2.5 Aterosklerosis ... 15
2.5.1 Definisi Aterosklerosis ... 15
2.5.2 Patogenesis Aterosklerosis ... 15
2.6 Penyakit Jantung Koroner ... 16
2.7 Kriteria Diagnostik dan Pemeriksaan Laboratorium... 16
2.8 Terapi Dislipidemia ... 17
2.8.1 Non-Farmakologi ... 17
2.8.2 Farmakologi ... 18
2.8.3 Simvastatin ... 18
2.9 Kemuning ... 19
2.9.1 Diskripsi Kemuning ... 19
2.9.2 Klasifikasi Kemuning... 20
2.9.3 Kandungan Kimia Daun Kemuning ... 21
2.9.4 Manfaat Kemuning Sebagai Obat Tradisional ... 22
viii
2.9.6 Efek Daun Kemuning Terhadap Kadar Kolesterol Total ... 24
BAB III BAHAN DAN METODE PENELITIAN 3.1 Bahan dan Alat Penelitian ... 26
3.1.1 Bahan Penelitian ... 26
3.1.2 Peralatan Penelitian ... 26
3.1.3 Subjek Penelitian ... 27
3.2 Waktu dan Lokasi Penelitian ... 27
3.3 Metodologi Penelitian ... 28
3.3.1 Desain Penelitian ... 28
3.3.2 Variabel Penelitian ... 28
3.3.2.1 Definisi Konsepsional Variabel ... 28
3.3.2.2 Definisi Operasional Variabel ... 29
3.3.3 Besar Sampel Penelitian ... 29
3.4 Prosedur Penelitian ... 30
3.4.1 Pengumpulan Bahan ... 30
3.4.2 Persiapan Hewan Coba ... 30
3.4.3 Cara Pembuatan Pakan Tinggi Lemak ... 30
3.4.4 Cara Pembuatan Propiltiourasil 0,01% ... 31
3.4.5 Cara Pembuatan Bahan Uji ... 31
3.4.6 Pelaksanaan Penelitian ... 31
3.4.7 Cara Pemeriksaan Kadar Kolesterol Total ... 32
3.4.7.1 Persiapan Pengambilan Sampel Darah ... 32
3.4.7.2 Pemeriksaan Kolesterol Total ... 32
3.5 Metode Analisis ... 33
3.6 Hipotesis Statistika ... 33
3.7 Kriteria Uji ... 33
ix
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil Penelitian dan Pembahasan ... 34
4.2 Pengujian Hipotesis Penelitian ... 42
BAB V SIMPULAN DAN SARAN 5.1 Simpulan ... 43
5.1.1 Simpulan tambahan ... 43
5.2 Saran ... 43
DAFTAR PUSTAKA ... 44
LAMPIRAN ... 48
x
DAFTAR TABEL
Tabel 2.1 Hubungan Kadar Lipid dengan Risiko PJK ………..17 Tabel 4.1 Kadar Kolesterol Total Sebelum Perlakuan pada Setiap Kelompok..34 Tabel 4.2 Uji Homogenitas Kelompok terhadap Kadar Kolesterol Total Sebelum
Perlakuan………35 Tabel 4.3 Kadar Kolesterol Total Setelah Perlakuan pada Setiap Kelompok ...36 Tabel 4.4 Hasil Transformasi Data Kadar Kolesterol Total Setelah Perlakuan..37 Tabel 4.5 Uji Normalitas Kelompok Perlakuan terhadap Kadar Kolesterol Total
Setelah Perlakuan………37 Tabel 4.6 Uji Homogenitas Varian Setiap Kelompok terhadap Kadar Kolesterol
xi
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1 Metabolisme Jelur Eksogen dan Jalur Endogen………9
Gambar 2.2 Jalur Reverse Cholesterol………10
Gambar 2.3 Struktur Kolesterol………...11
Gambar 2.4 Sintesis Kolesterol………12
Gambar 2.5 Aterosklerosis………16
Gambar 2.6 Kemuning………..20
Gambar 2.7 Struktur Kimia Flavonoid………..21
xii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1 Surat Keputusan Komisi Etik Penelitian……….49
Lampiran 2 Konversi Dosis………50
Lampiran 3 Hasil Pengukuran Berat Badan Sebelum Adaptasi……….51
Lampiran 4 Hasil Kadar Kolesterol Total Sebelum Perlakuan………..52
Lampiran 5 Hasil Uji Homogenitas Kadar Kolesterol Total Sebelum Perlakuan………53
Lampiran 6 Hasil Kadar Kolesterol Total Setelah Perlakuan………54
Lampiran 7 Hasil Uji ANAVA……….56
Lampiran 8 Hasil Uji LSD………58
Lampiran 9 Dokumentasi………..60
1
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Penyakit Jantung Koroner (PJK) sampai saat ini masih menjadi suatu masalah, baik di negara maju maupun negara berkembang dan merupakan penyebab kematian nomor satu di dunia. Menurut World Health Organization (WHO) pada tahun 2004, memperkirakan 7,2 juta orang di dunia meninggal akibat jantung tiap tahunnya. Sekitar 80% dari jumlah total kematian di dunia disebabkan penyakit jantung secara umum terjadi di negara-negara berpenghasilan rendah dan sedang (WHO, 2008).
Penyakit Jantung Koroner diperngaruhi oleh berbagai faktor baik yang tidak dapat dimodifikasi maupun yang dapat dimodifikasi, salah satunya yaitu hiperkolesterolemia. Peningkatan kadar kolesterol total, Low Density Lipoprotein (LDL) , trigliserida, dan penurunan High Density Lipoprotein (HDL) dalam serum (dislipidemia) merupakan faktor risiko terjadinya plak aterosklerosis yang mengakibatkan tejadinya PJK (Guyton & Hall, 2006; Libby P, 2008).
2
Kemuning (Murraya paniculata (L.) Jack) adalah salah satu tanaman yang sering digunakan sebagai obat tradisional. Secara empiris digunakan untuk menurunkan kolesterol, mengatasi nyeri, menurunkan demam, obesitas, keseleo, haid tidak teratur, keputihan, penyakit infeksi seperti bisul, eksema, ulkus, infeksi saluran kencing, infeksi saluran pernafasan, diare dan disentri. Bagian tanaman/ simplisia yang utama digunakan untuk obat tradisional adalah daun kemuning/Murrayae folium (Hariana, 2013).
Penggunaan daun kemuning untuk menurunkan secara tradisional dengan merebus 20 gram daun kemuning segar dalam air 3 gelas sampai tersisa 1 gelas (Agustine, 2012). Daun kemuning oleh Industri Obat Tradisional (IOT) dipasarkan dalam bentuk ekstrak kering/ dry extract yang dikemas dalam bentuk sediaan kapsul yang masih tergolong dalam kelompok jamu. Bentuk sediaan kapsul yang paling banyak disukai penduduk (KEPMENKES RI, 2010), alasannya karena penggunaannya lebih praktis, kadarnya dosis terukur dan mengurangi rasa pahit (Wasito,2011).
Penelitian aktivitas daun kemuning terhadap kadar kolesterol yang pernah dilakukan oleh Maria Mikael Miracle Juwita pada tahun 2012, mengenai efek infusa daun kemuning dosis 2,5 g/kgBB/hari, 5 g/kgBB/hari, dan 10 g/kgBB/hari terhadap penurunan kadar kolesterol total serum pada mencit galur Swiss-Webster jantan. Simpulan dari penelitian ini, infusa daun kemuning 10 g/kgBB/hari menurunkan kolesterol sangat bermakna (p<0,01).
3
1.2 Identifikasi Masalah
Berdasarkan latar belakang, maka identifikasi masalah penelitian sebagai berikut :
Apakah ekstrak etanol daun kemuning berefek menurunkan kadar kolesterol total darah tikus Wistar jantan yang diinduksi secara eksogen dan endogen.
1.3 Maksud dan Tujuan Penelitian
Maksud penelitian untuk mengembangkan obat herbal khususnya yang berefek antidislipidemia.
Tujuan penelitian untuk menilai efek ekstrak etanol daun kemuning terhadap penurunan kadar kolesterol total darah pada tikus Wistar jantan yang diinduksi secara eksogen dan endogen.
1.4 Manfaat penelitian
Manfaat akademis
Penelitian ini untuk menambah pengetahuan dan wawasan tentang biokimia, patologi klinik, dan farmakologi tanaman obat, khususnya yang berefek antidislipidemia.
Manfaat praktis
Penelitian ini memberi informasi ilmiah tentang efek daun kemuning terhadap penurunan kadar kolesterol total darah sebagai pengobatan substitusi.
1.5 Kerangka pemikiran
4
Simvastatin merupakan obat golongan statin yang menurunkan kadar kolesterol total darah. Mekanisme kerjanya dengan menghambat HMG-KoA reduktase. Enzim ini yang mengkatalisa HMG-KoA reduktase menjadi asam mevalonat yang merupakan sintesa dari kolesterol (Robbert, 2005; Adam, 2009).
Daun kemuning mengandung metabolit sekunder seperti flavonoid, saponin, dan tanin (DEPKES, 1977).
Flavonoid yang terdapat dalam daun kemuning, yang sudah teridentifikasi jenisnya meliputi senyawa flavon, flavonol dan flavonon (Achmad, 2013). Adanya senyawa flavonoid ini sangat berperan sebagai antioksidan yang dapat menurunkan kadar kolesterol dalam darah. Senyawa ini menangkap radikal bebas dengan menangkap atom hidrogen dari gugus hidroksilnya. Golongan senyawa flavonoid dapat menurunkan kadar kolesterol total, trigliserida, LDL serta meningkatkan HDL dengan menghambat enzim HMG-KoA reduktase sehingga kolesterol darah menurun (Bruneton, 1999; Mills & Bone, 2000; Havsteen, 2002; Park, M. J., et al, 2002).
Saponin dapat menurunkan kadar kolesterol total darah dengan jalan mengikat asam empedu di usus. Asam empedu dibuat dari kolesterol, asam empedu akan diserap kembali dalam usus (siklus enterohepatik) sehingga dengan menghambat penyerapan kembali asam empedu di usus dan di buang maka asam empedu akan dibuat lagi oleh kolesterol secara terus menerus dapat menurunkan kadar kolesterol total (Bruneton, 1999; Cornell University, 2009).
5
1.6 Hipotesis
Berdasarkan data yang ada, maka dapat di buat hipotesis sebagai berikut :
43
BAB V
SIMPULAN DAN SARAN
5.1 Simpulan
Ekstrak etanol daun kemuning berefek menurunkan kadar kolesterol total darah tikus Wistar jantan yang diinduksi secara eksogen dan endogen.
5.1.1 Simpulan tambahan
Ekstrak etanol daun kemuning dosis 100 mg/kgBB, 200 mg/kgBB, dan 300 mg/kgBB berefek menurunkan kadar kolesterol total darah dan antara dosis tersebut mempunyai efek yang sama dalam menurunkan kadar kolesterol total darah tikus Wistar jantan yang diinduksi secara eksogen dan endogen.
5.2 Saran
Penelitian Ekstrak Etanol Daun Kemuning Terhadap Kadar Kolesterol Total Darah yang perlu dilanjutkan dengan penelitian lain.
Penelitian mengenai ekstrak etanol daun kemuning terhadap kadar profil lipid lainnya seperti Trigliserida, High Density Lipoprotein (HDL) dan Low Density Lipoprotein (LDL).
Penelitian tentang ekstrak etanol daun kemuning dalam jangka waktu yang lama untuk mengetahui efek penurunan kadar kolesterol total.
Penelitian mengenai uji toksisitas kronis dan subkronis untuk mengetahui dosis toksik ekstrak etanol daun kemuning terhadap berbagai organ tubuh.
Riwayat Hidup
Nama : Giselle Primagusta Chris Hartono NRP : 1110046
Agama : Kristen
Tempat, Tanggal Lahir : Grobogan, 13 Agustus 1993
Alamat : Jl. Honggokusuman no 46 Kuwu-Purwodadi-Jawa Tengah
Riwayat Pendidikan :
-TK Kuwu (lulus tahun 1999) -SD Negri 2 Kuwu (lulus tahun 2005)
EFEK EKSTRAK ETANOL DAUN KEMUNING (Murraya paniculata (L.) Jack) TERHADAP
KADAR KOLESTEROL TOTAL DARAH TIKUS WISTAR JANTAN
THE EFFECT OF ETHANOL EXTRACT OF KEMUNING LEAVE (Murraya paniculata (L.) Jack) TOWARDS
THE BLOOD TOTAL CHOLESTEROL LEVEL IN MALE WISTAR RAT
Rosnaeni1, Fenny Tanudjaja2, Giselle Primagusta C Hartono3
1Bagian Farmakologi, Fakultas Kedokteran, Universitas Kristen Maranatha,
2Bagian Patologi Klinik, Fakultas Kedokteran, Universitas Kristen Maranatha,
3Fakultas Kedokteran, Universitas Kristen Maranatha
Jalan Prof. Drg. Suria Sumantri MPH No. 65 Bandung 40164 Indonesia
ABSTRAK
Dislipidemia merupakan faktor risiko terjadinya Penyakit Jantung Koroner (PJK). Obat antidislipidemia bila dikonsumsi dalam jangka waktu yang lama memiliki efek samping yang berbahaya sehingga sebagai terapi subtitusi, salah satunya digunakan daun kemuning.
Tujuan Penelitian untuk menilai efek ekstrak etanol daun kemuning (EEDK) dalam menurunkan kadar kolesterol total darah tikus Wistar jantan model dislipidemia.
Desain penelitian eksperimental laboratorium sungguhan dengan Rancangan Acak Lengkap (RAL). Efek antidislipidemia diuji dengan metode induksi Pakan Tinggi Lemak (PTL) dan Propiltiourasil (PTU 0,01%), menggunakan 30 tikus putih jantan Wistar yang dibagi menjadi 6 kelompok (n=5) yaitu Kelompok I, II, dan III berturut-turut EEDK dosis 1 : 100 mg/kgBB, dosis 2 : 200 mg/kgBB, dan dosis 3 : 400 mg/kgBB, kelompok IV (kontol negatif) diberi pakan standar dan akuades, kelompok V (kontrol positif) diberi PTL dan PTU 0,01%, kelompok VI (pembanding) dengan simvastatin 0,9 mg/kgBB. Pelakuan diberikan setiap hari selama 14 hari. Data yang diukur kadar kolesterol total sesudah perlakuan. Analisis data dengan ANAVA dilanjutkan LSD, α = 0,05.
Hasil penelitian kadar kolesterol total pada kelompok I (74,00), II (73,40), dan III (61,40) terdapat perbedaan yang sangat bermakna (p<0,01) dibandingkan kelompok V (96,80).
Simpulan ekstrak etanol daun kemuning menurunkan kadar kolesterol total darah.
Kata kunci : Dislipidemia, ekstrak etanol daun kemuning, kadar kolesterol total darah.
ABSTRACT
Dyslipidemia is the risk accident of Coronary Heart Disease (CHD). If Antidylipidemia drugs consumed in long term have dangerous side effects so as a substitution therapy, one of them used kemuning.
The method of the research is true laboratory experiments with a comparative Completely Randomized Design (CRD). The effect of antidyslipidemia tested with High Fat Feeding (HFF) induction and Propiltiourasil (PTU 0.01%). Thirty rats divided into six groups is EEDK dose 1 : 100 mg/kgBB, dose 2 : 200 mg/kgBB, dose 3 : 400 mg/kgBB , group IV (negative control) with aquadest and standard food, group V (positive control) with HFF and PTU 0.,01%, and comparison group with simvastatin 0.9 mg/kgbb. Treatment is given everyday in two weeks. Total cholesterol level (mg/dl) is measured after treatment. Analysis by using ANOVA and
continued LSD, α =0.05.
The result of research is total cholesterol level in group I (74.00), II (73.40), and III (61.40) is lower than groups V (96,80) got highly significant (p<0,01)
Conclusion of this research is ethanol extract of kemuning leave can lowering the blood total cholesterol level.
Key words : Dyslipidemia, ethanol extract of kemuning leave, the blood total cholesterol level.
PENDAHULUAN
Penyakit Jantung Koroner (PJK) sampai saat ini masih menjadi suatu masalah, baik di negara maju maupun negara berkembang dan merupakan penyebab kematian nomor satu di dunia. PJK dipengaruhi oleh berbagai faktor baik yang dapat dimodifikasi (hiperkolesterolemia, obesitas, merokok, olah raga, hipertensi, diabetes mellitus) maupun yang tidak dapat dimodifikasi (umur,jenis kelamin, genetik)1,2,3.
Pencegahan PJK ini dapat dilakukan dengan menghindari faktor risiko secara nonfarmakologi dengan mengubah pola hidup yaitu terutama diet rendah lemak, olah raga, tidak merokok dan menghindari obesitas. Apabila faktor risiko ini tidak berhasil dihindari maka perlu dilakukan pengobatan untuk menurunkan kadar kolesterol serum, secara farmakologi dapat menggunakan obat-obatan yang ada seperti statin, asam fibrat, niasin, resin asam empedu dan obat penghambat penyerapan kolesterol. Akan tetapi obat-obatan tersebut mempunyai banyak efek samping yang berbahaya sehingga penderita hiperkolesterolemia
banyak memilih obat tradisional sebagai penurun kolesterol. Obat tradisional telah digunakan oleh berbagai aspek ekonomi masyarakat mulai dari tingkat atas sampai tingkat bawah, karena obat tradisional mudah didapat, harganya cukup terjangkau dan berkhasiat untuk perawatan, pengobatan dan pencegahan penyakit4.
Kemuning (Murraya paniculata
(L.) Jack) adalah salah satu tanaman yang sering digunakan sebagai obat tradisional. Secara empiris digunakan untuk menurunkan kolesterol. Bagian tanaman/ simplisia yang utama digunakan untuk obat tradisional adalah daun kemuning/Murrayae folium5.
Daun kemuning oleh Industri Obat Tradisional (IOT) dipasarkan dalam bentuk ekstrak kering/ dry extract yang dikemas dalam bentuk sediaan kapsul yang masih tergolong dalam kelompok jamu. Bentuk sediaan kapsul yang paling banyak disukai penduduk6, alasannya karena
penggunaannya lebih praktis, kadarnya dosis terukur dan mengurangi rasa pahit7.
kimia yang terdapat dalam daun kemuning lebih banyak tersari dibandingkan dengan menggunakan pelarut air5.
BAHAN DAN CARA
Penelitian ini menggunakan subjek penelitian hewan coba tikus Wistar jantan sebanyaj 30 tikus. Bahan yang digunakan adalah ekstrak etanol daun kemuning (EEDK) dengan 3 variasi dosis yang didapatkan dari PT.B. Uji antidislipidemia dengan induksi eksogen (Pakan Tinggi Lemak (PTL)) dan induksi endogen (Propiltiourasil 0,01% (PTU 0,01%)). Waktu perlakuan selama 21 hari.
Sebelum penelitian dimulai 30 ekor tikus masing-masing ditimbang dan dihitung berat badannya (BB1), tikus diadaptasikan terlebih dahulu dengan lingkungan tempat penelitian selama 1 minggu. Selama adaptasi tikus diberi makan pellet standard air minum. Pada hari ke-7, semua tikus ditimbang berat badannya (BB2). Tikus yang digunakan adalah tikus yang sehat, yang berat badannya selama adaptasi tidak berkurang lebih dari 10% dari berat semula dan perilakunya normal. Kemudian dilakukan pemeriksaan kolesterol total (KT1).
Sebanyak 30 tikus dikelompokkan secara acak menjadi 6 kelompok, masing-masing terdiri atas 5 tikus. Kemudian mulai hari ke-8 diberi perlakuan setiap hari selama 14 hari pada masing-masing kelompok sebagai berikut :
1. Kelompok I : diberi PTL + PTU 0,01% + EEDK 100mg/kgBB. 2. Kelompok II : diberi PTL + PTU
0,01% + EEDK 200mg/kgBB 3. Kelompok III : diberi PTL + PTU
0,01% + EEDK 400mg/kgBB 4. Kelompok IV : kontrol negatif,,
hanya diberi makanan standard dan minuman air matang.
5. Kelompok V : kontrol positif, kelompok ini diberi akuades,
pakan diet tinggi lemak, dan PTU 0,01%.
6. Kelompok VI : Kelompok ini diberi Simvastatin 0,9 mg/kgBB, pakan diet tinggi lemak dan PTU 0,01%.
Setelah perlakuan selama 14 hari yaitu pada hari ke 22, tikus dilakukan pemeriksaan kadar kolesterol total (KT2), sebelumnya dipuasakan 8-12 jam kecuali minum dan ditimbang kembali berat badannya (BB3).
ANALISIS DATA
Data yang diukur adalah kadar Kolesterol Total darah (mg/dL) sebelum dan sesudah perlakuan. Analisis data dengan metode ANAVA menggunakan bantuan perangkat lunak komputer yang dilanjutkan dengan uji yang sesuai dengan
α=0,05. Kemudian dilanjutkan dengan post hoct test LSD dengan kemaknaan nilai
p<0,05.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian efek ekstrak etanol daun kemuning (Murraya paniculata
Tabel 4.1 Kadar Kolesterol Total Sebelum Perlakuan pada Setiap Kelompok
Kadar Kolesterol Total (mg/dL) pada Kelompok
Hasil pengukuran kadar kolesterol total dari seluruh hewan coba sebelum perlakuan antara 49,80 – 98,90 mg/dL dengan rerata antara 69,24 - 77,60 mg/dL. Hasil tersebut dilakukan uji homogenitas lavene diperoleh nilai p=0,33. Hal ini menunjukan tidak ada perbedaan yang bermakna (p>0,05) kadar kolesterol total antar kelompok. Dengan demikian dapat disimpulkan kadar kolesterol total masing-masing kelompok homogen dan penelitan dapat dilanjutkan.
Setelah perlakuan selama 14 hari maka setiap hewan coba diukur lagi kadar kolesterol total setelah perlakuan (mg/dL).
Data hasil pengukuran kadar kolesterol total setelah perlakuan dicantumkan pada Tabel 4.2.
Tabel 4.2 Kadar Kolesterol Total Setelah Perlakuan pada Setiap Kelompok
Hasil pengukuran rerata kadar kolesterol total setelah perlakuan berkisar antara 61.40 - 94.80 mg/dL. Syarat yang harus dipenuhi untuk uji ANAVA, data harus berdistribusi normal dan varian homogen. Pada uji normalitas menggunakan uji Shapiro-Wilk
didapatkan p=0,275 dan uji Kolmogorov-Smirnov didapatkan p=0,2. Hal ini menunjukan data berdistribusi normal (p>0,05). Pada hasil uji homogenitas lavene, didapatkan hasil p=0,774. Hal tersebut menunjukan varian homogen (p>0,05). Hasil uji normalitas dan uji homogenitas sebagai syarat dilakukan uji ANAVA, keduanya sudah terpenuhi sehingga dilanjutkan uji ANAVA yang ditunjukan pada Tabel 4.3.
Tabel 4.3 Uji ANAVA Kadar Kolesterol kolesterol total setelah perlakuan diperoleh nilai F hitung = 5,204 yang nilainya lebih besar dari F tabel, dengan
p=0,002. Hal ini menunjukkan terdapat perbedaan yang sangat bermakna (p<0,01) kadar kolesterol total setelah perlakuan minimal pada sepasang kelompok perlakuan. Untuk mengetahui kelompok perlakuan mana yang menunjukan perbedaan kadar kolesterol total dilakukan uji LSD yang hasilnya ditunjukan pada Tabel 4.4
Tabel 4.4 Hasil Uji LSD
Keterangan :
I : EEDK D1 100 mg/kgBB II : EEDK D2 200 mg/kgBB III : EEDK D3 300 mg/kgBB IV : Kontrol Negatif V : Kontrol Positif KP : Kontrol Pembanding TB = Tidak Bermakna
* = perbedaan bermakna dengan 0,05 > p ≥ 0,01 ** = perbedaan sangat bermakna dengan p < 0,01
Hasil uji LSD, didapatkan perbedaan sangat bermakna (p<0,01) pada kelompok I : EEDK D1 (100 mg/kgBB), II menurunkan kadar kolesterol total. Hal ini disebabkan karena daun kemuning mengandung flavonoid, saponin, dan tannin dalam jumlah adekuat, maka berpotensi dapat menurunkan kadar kolesterol total tikus galur Wistar jantan model dislipidemia.
Flavonoid merupakan antioksidan yang dapat menurunkan kadar kolesterol dalam darah. Senyawa ini menangkap radikal bebas dengan menangkap atom hydrogen dari gugus hidroksilnya. Golongan senyawa flavonoid dapat menurunkan kadar kolesterol total, trigliserida, LDL serta meningkatkan HDL dengan menghambat enzim HMG-KoA reduktase sehingga kolesterol darah menurun8,9,10,11.
Saponin dapat menurunkan kadar kolesterol total darah dengan jalan mengikat asam empedu di usus. Asam empedu dibuat dari kolesterol, asam empedu akan diserap kembali dalam usus (siklus enterohepatik) sehingga dengan menghambat penyerapan kembali asam empedu di usus dan di buang maka asam empedu akan dibuat lagi oleh kolesterol secara terus menerus dapat menurunkan kadar kolesterol total12,13.
Tannin dapat menurunkan kadar kolesterol darah dengan cara menghambat pembentukan kolesterol yaitu bereaksi dengan protein mukosa dan sel epitel usus sehingga dapat menghambat penyerapan lemak, dan turunannya dapat menghambat enzim HMG-KoA redukase14,15,16.
Pada kelompok I, II, dan III yang berturut-turut diberi bahan uji EEDK D1 (100 mg/kgBB), EEDK D2 (200 mg/kgBB), dan EEDK D3 (400mg/kgBB) bila dibandingkan dengan kelompok VI yang merupakan kelompok pembanding (Simvastatin 0,9 mg/kgBB), kadar kolesterol total menunjukan tidak terdapat perbedaan (p>0,05). Hal ini menunjukan efek penurunan kolesterol total EEDK dari semua dosis yang diujikan mempunyai potensi yang setara simvastatin. Ini disebabkan karena daun kemuning mengandung flavonoid, saponin, dan tannin dalam jumlah adekuat, maka berpotensi dapat menurunkan kadar kolesterol total serum tikus galur Wistar jantan model dislipidemia.
Pada tahun 2003 yang dilakukan oleh Pri Iswati Utami mengenai pengaruh infusa daun kemuning terhadap kadar lipid plasma tikus putih (Rattus norvegicus) jantan galur Wistar yang di beri diet tinggi lemak. Sebelum perlakuan hewan coba diinduksi diet tinggi lemak selama 14 hari, perlakuan selama 30 hari dengan dosis infusa daun kemuning konsentrasi 5%, 10%, 15%. Hasil penelitian tersebut menunjukan dosis konsentrasi 5% dan 10% dapat menurunkan kadar lipid plasma Rerata Kadar Kolesterol Total Setelah Perlakuan
tetapi dosis konsentrasi 15% memberi efek yang penurunan kadar kolesterol lebih besar dibanding dosis lainnya. Penelitian lainnya, tahun 2012 yang dilakukan oleh Maria Mikael Miracle Juwita mengenai efek daun kemuning terhadap penurunan kadar kolesterol total serum pada mencit galur Swiss-Webster jantan. Penelitian tersebut menggunakan infusa daun kemuning dengan dosis 2,5 g/kgBB/hari, 5 g/kgBB/hari, dan 10 g/kgBB/hari. Hasil penelitian tersebut didapatkan dosis 10g/kgBB/hari yang paling efektif terhadap efek penurunan kolesterol total serum mencit. Pada hasil penelitian infusa daun kemuning dibanding EEDK, dosis terkecil dari infusa daun kemuning yang efektif untuk menurunkan kadar kolesterol total masih lebih tinggi dari dosis terkecil EEDK. Hal ini menunjukan dosis EEDK yang diujikan memiliki dosis yang lebih efektif daripada infusa daun kemuning untuk penurunan kadar kolesterol total.
Pada penelitian ekstrak etanol daun kemuning terhadap penurunan kadar kolesterol total marmot jantan yang dilakukan oleh Marina Pane tahun 2010, dengan dosis 100mg/kgBB, 200mg/kgBB, 400mg/kgBB. Penelitian tersebut didapatkan hasil pemberian ekstrak daun kemuning dosis 100mg/kgBB, 200mg/kgBB, 400mg/kgBB memberi penurunan kadar kolesterol yang tidak berbeda secara nyata dengan pemberian simvastatin 0,8 mg/kgBB. Hasil penelitian terhadap marmot dibandingkan tikus mempunyai dosis efektif yang sama berturut-turut yaitu 100 mg/kgBB, 200 mg/kgBB, 400 mg/kgBB.
SIMPULAN
Ekstrak etanol daun kemuning berefek menurunkan kadar kolesterol total darah tikus Wistar jantan model dislipidemia.
DAFTAR PUSTAKA
1. World Health Organization. 2002.
WHO World Health Organization Report 2000. Genewa : WHO 2. Guyton, Arthur C, & Hall, John G.
2006. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran, edisi 9, EGC, Jakarta, 1077-91.
3. Libby P. 2008. Lipoprotein disorders and cardiovascular disease. In E. Brounwald: Braunwald heart disease. 8th ed. Elsevier. Philadelpia.
p.1071-1091.
4. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 2000. Farmakope Indonesia. Jakarta: Dirjen POM Depkes RI
5. Hariana, Arief. 2013. Tumbuhan Obat dan Khasiatnya. Jakarta: Perum Bukit Permai. Hal 171-175. 6. KEMENKES RI, 2010. Riset
Kesehatan Dasar. Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan Kementrian Kesehatan RI. Hal 417-424.
7. Wasito, Hendri. 2011. Obat Tradisional Kekayaan Indonesia. Yogyakarta : Graha Ilmu. Hal 34-35. 8. Bruneton. 1999. Flavonoids. In:
Pharmacognosy.2nd ed. New York :
Lavoser. p 310-324
9. Mills & Bone. 2000. Flavonoids. In:
Principles and Pranctice of Phytotherapy. New York: Churchill Livingstone. p 32-34
10. Havsteen B.H. 2002. The biochemistry and medical significance of the flavonoids Pharmacology and Therapeutic. p 96 : 67-202.
11. Park, M. J., Kim, S. R., & Lee, MK. K
et al. 2002. Flavonoid & Cardiovascular Diseases. USA :
12. Bruneton. 1999. Saponins. In:
Pharmacognosy.2nd ed. New York :
Lavoser. P 683-684.
13. Department of Animal Science Cornell University. 2009. Saponins. http://www.nfs.uvm.edu/plants/toxi cagents/saponin.html#cholesterol. 12 Februari 2014
14. Bruneton. 1999. Tannins. In:
Pharmacognosy.2nd ed. New York :
Lavoser.p 383-389.
15. Chang, J., Kashiwada, Y., Nonaka, G., Nishioka, I & Lee, K. 2001. Body Lipid Deposition in Nile Tilapia Fed on Rations Containing Tannin. Brazil: Universidadi Estudual Paluista. p 34-38
44
DAFTAR PUSTAKA
Adam, MF. 2009. Dislipidemia. Dalam : Aru W. Sudoyo, dkk. Ed : Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam. Jilid III. Edisi III. Jakarta : Interna Publishing. Hal 1984-90.
Agustine, Ria Dwi. 2012. Ramuan Penurun Kolesterol.
http://penyakitkolesterol.blogspot.com/2012/11/ramuan-penurun-kolesterol.html. 15 Januari 2014.
Anwar J, T Bahri. 2004. Penyakit Jantung Koroner dan Hipertensi. https://docs.google.com/viewers?a=v&q=cache:RW8a_8LqqEEJ:library.usu .ac.id. 25 Maret 2014.
Botham, M & Mayes, A. 2009. Cholesterol Syntesis, Transport & Excretion. In:
Harper’s illustrated Biochemistry.28th Ed. USA: LANGE Mc Graw Hill. chapter 26. p 224-233
Botham, M & Mayes, A. 2009. Lipids of Physiologic Significance. In : Harper’s illustrated Biochemistry. 28th Ed. USA: LANGE Mc Graw Hill. p 121-128. Braunwald, E., Antman, E, M., Selwyn, A, P & Loscalzo, J. 2008. Ischemic
Heart Disease. In : Harrison’s Principles of Internal Medicine. Vol II. 17th ed. New York: Mc Graw Hill. p 1514-15.
Brashers. 2007. Definisi Aterosklerosis. http://www.repository.usu.com. 13 Juli 2014
Bruneton. 1999. Flavonoids. In: Pharmacognosy.2nd ed. New York : Lavoser. p 310-324.
Bruneton. 1999. Tannins. In: Pharmacognosy.2nd ed. New York : Lavoser. p 383-389.
Bruneton. 1999. Saponins. In: Pharmacognosy.2nd ed. New York : Lavoser. p 683-684.
Chang, J., Kashiwada, Y., Nonaka, G., Nishioka, I & Lee, K. 2001. Body Lipid Deposition in Nile Tilapia Fed on Rations Containing Tannin. Brazil: Universidadi Estudual Paluista. p 34-38
45
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 1977. Materia Medika Indonesia. Jilid 1. Jakarta: Dirjen POM Depkes RI.
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 1995. Farmakope Indonesia. Jakarta: Dirjen POM Depkes RI.
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 2000. Farmakope Indonesia. Jakarta: Dirjen POM Depkes RI.
Department of Animal Science Cornell University. 2009. Saponins. http://www.nfs.uvm.edu/plants/toxicagents/saponin.html#cholesterol. 12 Februari 2014
E.N Kosasih dan A.S Kosasih. 2008. Tafsiran Hasil Pemeriksaan Laboratorium Klinik edisi kedua. Jakarta : Karisma Publishing Group. Halaman 143-162 Guyton, Arthur C, & Hall, John G. 2006. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran, edisi
9, Jakarta: EGC, Hal 1077-91.
Hariana, Arief. 2013. Tumbuhan Obat dan Khasiatnya. Jakarta: Perum Bukit Permai. Hal 171-175.
Harmanto, Ning. 2005. Mengusir Kolesterol Bersama Mahkota Dewa. Cetakan Pertama. Jakarta: Agromedia Pustaka. Halaman 5-13, 34-35.
Havsteen B.H. 2002. The biochemistry and medical significance of the flavonoids Pharmacology and Therapeutic. p 96 : 67-202.
Iskandar, D. 2005. Kemuning Jati Belanda: Budidaya dan Pemanfaatan untuk Obat. Cetakan 1. Jakarta : Penerbit Swadaya. Halaman 10-19.
Jansen. 2006. Definisi Aterosklerosis. http://www.repository.usu.com. 15 Juli 2014.
Kemas Ali Hanafiah. 2005. Prinsip Percobaan dan Perancangan Rancangan Percobaan Aplikatif. Aplikasi Kondisional Bidang Pertamanan, Peternakan, Perikanan, Industri dan Hayati, edisi 1. Jakarta : PT Raja Granindo Persada. Hal 10-12.
KEMENKES RI, 2010. Riset Kesehatan Dasar. Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan Kementrian Kesehatan RI. Hal 417-424.
46
Libby P. 2005. The pathogenesis of atherosclerosis, prevention and treatment of atherosclerosis. In : Harrison’s Principles of Internal Medicine. 17th Ed. Vol II. New York: Mcgraw-Hill. p1517-29
Libby P. 2008. Lipoprotein disorders and cardiovascular disease. In E. Brounwald: Braunwald heart disease. 8th ed. Elsevier. Philadelpia. p.1071-1091.
Maria Mikael Miracle Juwita. 2012. Efek Daun Kemuning terhadap Penurunan Kadar Kolesterol Total Serum pada mencit galur Swiss-Webster jantan. http://repository.maranatha.edu/2708/. 25 Agustus 2014.
Morrel. 2005. Patogenesis Aterosklerosis. http://www.repository.usu.com. 15 Juli 2014
Marine Pane. 2010. Uji Efek Ekstrak Daun Kemuning (Murraya paniculata (L.) Jack) Sebagai Penurun Kadar Kolesterol Darah Marmot Jantan (Cavia cobaya).
http://repository.usu.ac.id/bitstream/123456789/25862/4/Chapter%20II.pdf . 7 Januari 2014.
Mills & Bone. 2000. Flavonoids. In: Principles and Pranctice of Phytotherapy. New York: Churchill Livingstone. p 32-34.
Park, M. J., Kim, S. R., & Lee, MK. K. 2002. Flavonoid & Cardiovascular Diseases. USA : Department of Laboratory Medicine and Pathology University of Minnesota. p 21-24.
Pengembangan dan Pemanfaatan Obat Bahan Alam. 1993. Penapisan Farmakologi, Pengujian Fitokimia dan Pengujian Klinik. Jakarta: Yayasan Pengembangan Obat Bahan Alam Phyto Medica. Hal 37-38.
Pri Iswati Utami.2003.Pengaruh Infusa Daun Kemuning (Murraya paniculata (L.) Jack) Terhadap Kadar Lipid Plasma Tikus Putih (Rattus norvegicus) Jantan Galur Wistar Yang Diberi Diet Tinggi Lemak.http://jurnal.ump.ac.id/index.php/pharmacy/article/view/193. 25 Agustus 2014.
Robert L, Talbert. 2005. Hyperlipidemia. In: Pharmacotherapy. Edisi 6. Vol I. New York : McGraw-Hill. p 429-445.
Sjamsul Arifin Achmad. 2013. Ilmu Kimia dan Kegunaan Tumbuh-tumbuhan obat Indonesia. Jilid II. Bandung : Penerbit ITB. Hal 24-26.
47
Suyatna F.D.2007. Hipolipidemik. Farmakologi dan Terapi. Edisi5.Jakarta : Departemen Farmakologi dan Terapeutik Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Hal 383-384.
Wasito, Hendri. 2011. Obat Tradisional Kekayaan Indonesia. Yogyakarta : Graha Ilmu. Hal 34-35.
Widowati, Wahyu. 2007. Peran antioksidan sebagai agen hipokolesterolemia, pencegahan oksidasi lipid dan aterosklerosis. Jakarta: Damianus.
Williams. 2005. Dislipidemia – terapi obat. http://lyrawati.files.wordpress.com/2008/11/dislipidemia_obat_hosppharm.p df. 20 januari 2014.
World Health Organization. 2008. WHO World Health Organization Report 2000. Genewa : WHO.
